JP3955103B2 - 損傷を与えたｒｎａ断片を含むサンスクリーン組成物 - Google Patents

Description

発明の属する技術分野
本発明は、サンスクリーンの分野に関する。より特定的には、本発明は損傷を与える太陽の放射線からの保護をもたらすＲＮＡを含むサンスクリーンおよび化粧品組成物に関する。
発明の背景
日光に長時間あたると、数多くの好ましくない皮膚症状を引き起こす危険が増加することは、現在ではよく証明されている。太陽の放射線は多くの皮膚がんをおこす原因として関わるだけでなく、しわ、小じわ、斑、および肌色のくすみのようなさまざまな結果をもたらす加齢プロセスを加速することが示されている。皮肉なことに、健康な生活における運動や体育活動の重要性に対する一般の認識が高まったことにより、屋外での活動が増えて、日光にさらされることの危険性に関する知識が普及しているのにも関わらず、多くの人々が、必要以上の日光を浴びる結果となっている。そこで、太陽による損傷に対して十分なレベルの保護ができるようなサンスクリーンを開発することが重要となる。
現在、太陽光線の影響に対して大きな保護効果を有する数多くのサンスクリーンおよび化粧品が利用可能である。最も一般的に用いられるサンスクリーンの多く、たとえば、ｐ−アミノ安息香酸（PABA）およびそのエステル、ベンゾフェノン類、および桂皮酸エステルは、化学的なサンスクリーン、すなわち、自然界には見いだされない合成化学物質である。これらの物質の多くはとても保護能力が高く、ターゲットとなる集団の多くの人々が使用することができるが、化学的サンスクリーンを使用したくない、または、過敏性あるいはアレルギー反応の理由から使用できない人々がかなりの数で存在する。これらの人々は天然の、すなわち、日常的に自然界に見いだされるようなサンスクリーンを要求している。そこで、天然のサンスクリーンを探し出すことが、最近の流れとなっている。
注目を集めた天然に存在する物質として、核酸、特にＤＮＡおよびＲＮＡがある。たとえば、米国特許第5,470,577号および第5,532,001号には、ＤＮＡ断片、特に、一本鎖ＤＮＡ断片、二本鎖ＤＮＡ断片、これらの混合物、デオキシヌクレオチド、ジヌクレオチドおよびジヌクレオチド二量体を、表皮細胞中でのメラニン合成を刺激するために用いることが開示されており、上記特許によれば、紫外線からの保護が得られると記載されている。さらに、WO 9601617には、核酸は紫外線に対する障壁となり得ると述べられており、局所用の組成物に使用できることが示唆されている。GB2233557もまた、ＲＮＡ、リボヌクレオチドまたはリボヌクレオシド、およびその塩あるいは他の誘導体を含む細胞保護薬を開示しており、その細胞保護薬が光の影響から皮膚を保護すると述べている。
照射されたＲＮＡの断片を、紫外線にさらされた細胞の保護のために用いることは以前には報告されていない。本発明において、紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片を皮膚細胞に加えると、予期せざることに、その後に紫外線による障害にさらされた場合に、これらの細胞の修復または紫外線抵抗性を誘導することができることが判明した。損傷を与えたＲＮＡ断片は、サンスクリーン組成物および紫外線からのある程度の保護対策が望まれる他の皮膚用製品の有用な成分である。
発明の概要
本発明は、化粧品または医薬品に使用可能な担体と組み合わせた、保護に有効な量の、紫外線で損傷を与えたＲＮＡ断片を含む化粧品または医薬品組成物に関する。本発明はさらに、保護に有効な量の、紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片を皮膚細胞に適用することからなる、皮膚細胞を紫外線による損傷から保護する方法に関する。さらに、本発明は、有効量の、紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片を皮膚に適用することからなる、皮膚の光加齢を防止する方法に関する。
発明の詳細な説明
本発明は、紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片を生きている皮膚細胞に適用すると、その後細胞が紫外線にさらされた場合に、未処理の細胞と比較して処理済み細胞の生存率が増加するという知見に基づいている。特に、全ＲＮＡを紫外線で処理することにより生成した損傷ＲＮＡで処理された細胞は、ＵＶＢの細胞毒性効果からかなりよく保護されることが注目された。得られる保護の強さのレベルは、照射されていないＲＮＡにより得られるレベルよりも高い。
本発明で用いられるＲＮＡは、どのような供給源から得られたものでもよく、どのようなタイプのものでもよい。たとえば、植物、動物または微生物源から得られたものであってよいし、また、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、トランスファーＲＮＡ（ｔＲＮＡ）、ミトコンドリアＲＮＡ（mtＲＮＡ）、ウイルスＲＮＡ、または合成ＲＮＡであってよい。好ましい実施態様においては、全ＲＮＡをＵＶＣ（波長約254nm）で少なくとも約３分間、好ましくは少なくとも５分間照射する。他の波長の紫外線もまたＲＮＡを照射するために用いることができるが、その場合は線量が高くなるだろう。特に好ましい実施態様においては、用いられるＲＮＡは実質的に純粋なもので、すなわち少なくとも90%はＲＮＡ以外の物質を含まないものである。紫外線処理はＲＮＡの断片化をもたらす。
上記の方法で調製された断片を、プレート上にまいた表皮細胞に約１μg/mlの量で適用し、対照として未照射のＲＮＡを用いた。次いで、プレートを、15mJ間隔で0から75mJの強度でＵＶＢにさらした。一晩インキュベートした後、照射ＲＮＡで処理した細胞は、紫外線の損傷作用から皮膚細胞を保護したことが見いだされた。未照射のＲＮＡもまたある程度の明白な保護をもたらすが、照射ＲＮＡにより提供される保護のほうがはるかに大きい。
本発明の断片はさまざまな化粧品または医薬品に配合することができる。たとえば、断片は、紫外線からの保護が望ましいメーキャップ組成物、たとえば口紅、アイシャドー、ファンデーション、または屋外で皮膚に塗ることを意図した他のあらゆるタイプの組成物、たとえばモイスチャライザーまたはリップバルサム（lip balm）にサンスクリーン成分として加えることができる。断片はまた、サンスクリーン組成物の活性成分として有用である。断片は水溶性で、当業者に公知の方法を用いて通常おこなわれる手段で対象となる製品に配合することができる。好ましい実施態様においては、断片は、精製した形で用いる場合、全組成物の重量基準で、約0.001-5%、好ましくは約0.5-3%の量で加える。
本発明の断片は他の太陽光線から保護する物質と組み合わせて用いることもできる。かくして、別の実施態様において、断片は、他のあらゆる種類のサンスクリーンから選ばれた一つ以上のサンスクリーンと組み合わされる。第二のサンスクリーンは、物理的バリヤー型、たとえば、二酸化チタンもしくは酸化亜鉛、または化学的バリヤー型、たとえば、ベンゾフェノン類；ｐ−アミノ安息香酸（PABA）およびその誘導体；サリチル酸フェニルまたはホモメンチル；またはケイ皮酸エステルであってよい。他のサンスクリーンとの組み合わせは、断片を単独で用いることができるようなあらゆる状況、たとえば、メーキャップ製品、サンスクリーン製品、またはセルフタンニング（self-tanning）製品において有用である。追加のサンスクリーンは、その通常の使用法に従って決定された量で製品に配合することができる。
さらに別の実施態様においては、断片は、紫外線により引き起こされる皮膚の損傷からの補足的な保護をもたらす抗酸化剤またはフリーラジカル捕捉剤とも組み合わせられる。このような物質の例には、ビタミンＥおよびその誘導体、ビタミンＣおよびその誘導体、緑茶抽出物、プロアントシアニジン、β−カロチン等が含まれる。
さらに別の実施態様においては、ＲＮＡ断片は光加齢の防止にも有用である。上に記したように、繰り返しおよび/または長時間にわたって太陽の紫外線にさらされると、実質的に皮膚のエラスチンおよびコラーゲンの質および量の早期の減退を招く。これらの変化は、深いしわおよび小じわ、弾力の消失、皮膚の乾燥およびなめらかさの低下、および、斑点あるいは色素沈着によるしみの増加のような加齢の典型的な徴候として外面的に現れる。本発明の断片により提供される紫外線からの保護により、光加齢に対する望ましい保護をもおこなうことができる。このように、上記の製品中におけるサンスクリーンとしての使用に加えて、上に記載したようなさまざまな皮膚用製品中に使用した場合、断片は単独で光加齢を防止するために使用することができる。
この方法において、照射された断片は他の抗加齢剤または皮膚強化剤と組み合わせることもできる。この目的で、断片は一つ以上の以下の製品と組み合わせることができる：αまたはβヒドロキシ酸、たとえば、乳酸、グリコール酸、クェン酸、αヒドロキシオクタン酸、αヒドロキシデカン酸、αヒドロキシラウリン酸、酒石酸、グルクロン酸、ガラクツロン酸、αヒドロキシ酪酸、αヒドロキシイソ酪酸、リンゴ酸、マンデル酸、ピルビン酸、およびタルトロン酸、およびサリチル酸；レチノイド、たとえば、レチノール、酢酸レチニル、パルミチン酸レチニル、酪酸レチニル、オレイン酸レチニル、リノレン酸レチニル、およびレチノイン酸；DHEAおよびその誘導体。
本発明を以下の限定的でない実施例によりさらに詳しく説明する。
実施例
I．照射された細胞の生存度の増加
A．材料および方法
1．ＲＮＡ断片の調製
Sigma社より購入した20マイクログラムのメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を1mlのPBSに可溶化した。可溶化したＲＮＡを二つの0.5mlアリコートに分割し、それぞれを35mmのペトリ皿に入れた。一方のアリコートを254nmのＵＶＣで５分間照射し、他方のサンプルは紫外線にさらさなかった。次いで、それぞれのサンプルを10%DMEMで体積が10mlとなるようにさらに希釈し、最終濃度が1μg/mlとなるようにした。このストック溶液は、次いで、希釈しないで、またはさらに希釈して0.1、0.5または1μg/mlの最終濃度とした。
2．皮膚細胞の処理
Hacat皮膚細胞（形質転換したヒトケラチノサイト）を二つの96ウェルプレートにまき、およそ75%の集密度に達した後、処理をおこなった。調製されたＲＮＡ溶液をそれぞれのウェルに加え、37℃で加湿下に5%の二酸化炭素のもとで一晩インキュベートした。次に、プレートを180μlのPBSで三回すすぎ、100μlのPBSを加えて照射をおこなった。プレートを、15mJの間隔で0から75mJ/cm²のＵＶＢで照射した。照射後、PBSを吸引し、ｍＲＮＡ溶液を上に記したように加えた。37℃で一晩インキュベートした後、ニュートラルレッド色素取り込みアッセイを用いてプレートの細胞生存度をアッセイした。
B．結果
表1aおよび2aは、保護剤として未照射（１）および照射（２）mＲＮＡを用いて得られた結果を示しており、これらの結果は、照射後の生存パーセントで表す。表1bおよび2bは、未照射の対照と比較したそれぞれの処理についての生存率の変化パーセントを示している。

これらの結果は、照射されたＲＮＡ断片で処理した細胞と未照射のＲＮＡのみで処理した細胞では生存率に顕著な差があることを示しており、それゆえ、照射されたＲＮＡ断片の保護効果を証明している。
II．ＲＮＡ断片含有組成物の調製
以下に、本発明のＲＮＡ断片を含む組成物の例を記載する。

Claims (15)

1. 化粧品または医薬品に使用可能な担体と組み合わせた、紫外線からの保護に有効な量の、紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片を含む化粧品または医薬品組成物。
2. 紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片が、ＵＶＣにより損傷を与えたものである、請求項１記載の組成物。
3. 紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片が、紫外線により損傷を与えたメッセンジャーＲＮＡ断片である、請求項１または２記載の組成物。
4. 紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片が、全組成物の重量の0.001％−5%の量で存在する、請求項１から３のいずれかに記載の組成物。
5. 紫外線により損傷を与えたＲＮＡ断片が、全組成物の重量の0.5％−3%の量で存在する、請求項１から４のいずれかに記載の組成物。
6. 組成物がサンスクリーンである、請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
7. 少なくとも一つの追加のサンスクリーンをさらに含む、請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
8. 組成物が口紅、ファンデーション、パウダー、およびアイシャドーからなる群から選択されるメーキャップ製品である、請求項１〜７のいずれかに記載の組成物。
9. 組成物がモイスチャライザーまたはリップバルサムである、請求項１〜７のいずれかに記載の組成物。
10. さらに抗酸化剤またはフリーラジカル捕捉剤を含む、請求項１〜９のいずれかに記載の組成物。
11. さらに他の抗加齢剤または皮膚強化剤を含む、請求項１〜１０のいずれかに記載の組成物。
12. 抗酸化剤またはフリーラジカル捕捉剤が、ビタミンEおよびその誘導体、ビタミンCおよびその誘導体、緑茶抽出物、プロアントシアニジン、およびβ−カロチンから成る群から選択される、請求項１０に記載の組成物。
13. 他の抗加齢剤または皮膚強化剤が、αヒドロキシ酸、βヒドロキシ酸、レチノイド、およびDHEAおよび誘導体からなる群から選択される、請求項１１に記載の組成物。
14. 皮膚細胞を紫外線による損傷から保護するための、請求項１〜１３に記載の組成物。
15. 光加齢を防止するための、請求項１〜１３に記載の組成物。