JPH04370755A - グルコ−スバイオセンサ - Google Patents
グルコ−スバイオセンサInfo
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- JPH04370755A JPH04370755A JP3176049A JP17604991A JPH04370755A JP H04370755 A JPH04370755 A JP H04370755A JP 3176049 A JP3176049 A JP 3176049A JP 17604991 A JP17604991 A JP 17604991A JP H04370755 A JPH04370755 A JP H04370755A
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Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、グルコースバイオセン
サに関する。更に詳しくは、電極面上にグルコースデヒ
ドロゲナーゼを固定化せしめて作用極としたグルコース
バイオセンサに関する。
サに関する。更に詳しくは、電極面上にグルコースデヒ
ドロゲナーゼを固定化せしめて作用極としたグルコース
バイオセンサに関する。
【０００２】
【従来の技術】グルコースデヒドロゲナーゼ（ＧＤＨ）
には、補酵素としてニコチンアミドアデニンジヌクレオ
チド（ＮＡＤ）を必要とするものとピロロキノリンキノ
ン（ＰＱＱ）を必要とするものとがある。この内、ＮＡ
Ｄ型ＧＤＨの反応は、ＧＤＨの存在下に次のように行わ
れる。
には、補酵素としてニコチンアミドアデニンジヌクレオ
チド（ＮＡＤ）を必要とするものとピロロキノリンキノ
ン（ＰＱＱ）を必要とするものとがある。この内、ＮＡ
Ｄ型ＧＤＨの反応は、ＧＤＨの存在下に次のように行わ
れる。
【０００３】この場合、ＮＡＤは酵素ＧＤＨと結合して
いないため、グルコース量を測定する際溶液中にＮＡＤ
を添加しなければならないという問題がみられ、このこ
とはＮＡＤを消費し、コストを高めるばかりではなく、
測定操作を煩雑なものとしている。
いないため、グルコース量を測定する際溶液中にＮＡＤ
を添加しなければならないという問題がみられ、このこ
とはＮＡＤを消費し、コストを高めるばかりではなく、
測定操作を煩雑なものとしている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、ニコ
チンアミドアデニンジヌクレオチドを補酵素とするグル
コースデヒドロゲナーゼを作用極側に固定化したグルコ
ースバイオセンサであって、測定溶液中に補酵素の添加
を要しないものを提供することにある。
チンアミドアデニンジヌクレオチドを補酵素とするグル
コースデヒドロゲナーゼを作用極側に固定化したグルコ
ースバイオセンサであって、測定溶液中に補酵素の添加
を要しないものを提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】かかる本発明の目的は、
塩化ビニル樹脂膜で被覆された電極面上に、グルコース
デヒドロゲナーゼおよびニコチンアミドアデニンジヌク
レオチドを吸着固定化し、更に塩化ビニル樹脂膜で被覆
して作用極としたグルコースバイオセンサによって達成
される。
塩化ビニル樹脂膜で被覆された電極面上に、グルコース
デヒドロゲナーゼおよびニコチンアミドアデニンジヌク
レオチドを吸着固定化し、更に塩化ビニル樹脂膜で被覆
して作用極としたグルコースバイオセンサによって達成
される。
【０００６】電極上への塩化ビニル樹脂膜の形成は、次
のようにして行われる。即ち、ポリ塩化ビニルまたは塩
化ビニルに少量のエチレン、酢酸ビニルなどを共重合さ
せた共重合体をそれらの可溶性溶媒、例えばジメチルホ
ルムアミド、シクロヘキサノン、テトラヒドロフラン、
メチルエチルケトンなどに約１〜３０重量％の濃度で溶
解させた溶液を、一般に室温下で直接白金電極、金電極
などの電極表面に滴下した後風乾するか、あるいはワイ
ヤ状、針状などの白金電極、金電極、炭素電極などの電
極面をその溶液中に浸漬し、引き上げた後風乾し、水洗
、乾燥させる。
のようにして行われる。即ち、ポリ塩化ビニルまたは塩
化ビニルに少量のエチレン、酢酸ビニルなどを共重合さ
せた共重合体をそれらの可溶性溶媒、例えばジメチルホ
ルムアミド、シクロヘキサノン、テトラヒドロフラン、
メチルエチルケトンなどに約１〜３０重量％の濃度で溶
解させた溶液を、一般に室温下で直接白金電極、金電極
などの電極表面に滴下した後風乾するか、あるいはワイ
ヤ状、針状などの白金電極、金電極、炭素電極などの電
極面をその溶液中に浸漬し、引き上げた後風乾し、水洗
、乾燥させる。
【０００７】このようにして電極面上を塩化ビニル樹脂
膜で被覆した後、これを濃度約０．１〜１０ｍｇ／ｍｌ
のグルコースデヒドロゲナーゼ水溶液中に４℃で約１〜
４８時間程度浸漬し、引き上げて乾燥させる。次いで、
そこに濃度約１〜２００μＭのニコチンアミドアデニン
ジヌクレオチド、一般にはβ−ニコチンアミドアデニン
ジヌクレオチド水溶液を滴下し、４℃で乾燥させる。最
後に、これら２種類の固定化物の固定化を確実にするた
めに、電極面上へ行われたのと同様の塩化ビニル樹脂膜
の形成が行われる。
膜で被覆した後、これを濃度約０．１〜１０ｍｇ／ｍｌ
のグルコースデヒドロゲナーゼ水溶液中に４℃で約１〜
４８時間程度浸漬し、引き上げて乾燥させる。次いで、
そこに濃度約１〜２００μＭのニコチンアミドアデニン
ジヌクレオチド、一般にはβ−ニコチンアミドアデニン
ジヌクレオチド水溶液を滴下し、４℃で乾燥させる。最
後に、これら２種類の固定化物の固定化を確実にするた
めに、電極面上へ行われたのと同様の塩化ビニル樹脂膜
の形成が行われる。
【０００８】
【発明の効果】本発明に係るグルコースバイオセンサは
、電極面上に塩化ビニル樹脂膜を被覆し、そこにグルコ
ースデヒドロゲナーゼおよびニコチンアミドアデニンジ
ヌクレオチドを固定化させるだけであるので、それの製
作は簡便性にすぐれている。しかも、塩化ビニル樹脂膜
の電極面への接着性およびグルコースデヒドロゲナーゼ
およびニコチンアミドアデニンジヌクレオチドの固定化
性は、実際に使用してみて良好であり、グルコース濃度
約１〜５００ｍｇ／ｄｌの検量範囲ではすぐれた応答性
を示している。
、電極面上に塩化ビニル樹脂膜を被覆し、そこにグルコ
ースデヒドロゲナーゼおよびニコチンアミドアデニンジ
ヌクレオチドを固定化させるだけであるので、それの製
作は簡便性にすぐれている。しかも、塩化ビニル樹脂膜
の電極面への接着性およびグルコースデヒドロゲナーゼ
およびニコチンアミドアデニンジヌクレオチドの固定化
性は、実際に使用してみて良好であり、グルコース濃度
約１〜５００ｍｇ／ｄｌの検量範囲ではすぐれた応答性
を示している。
【０００９】測定は、電極間に約０．４５〜０．５５Ｖ
の電圧を印加することによって行われるが、その際測定
溶液にニコチンアミドアデニンジヌクレオチドを添加す
る必要がないので、コスト高となる要因や操作上煩雑さ
がなく、またそれをくり返し測定に用いても、安定した
測定結果を示すことが確認され、つまりニコチンアミド
アデニンジヌクレオチドが消費されないことを示してい
る。
の電圧を印加することによって行われるが、その際測定
溶液にニコチンアミドアデニンジヌクレオチドを添加す
る必要がないので、コスト高となる要因や操作上煩雑さ
がなく、またそれをくり返し測定に用いても、安定した
測定結果を示すことが確認され、つまりニコチンアミド
アデニンジヌクレオチドが消費されないことを示してい
る。
【００１０】
【実施例】次に、実施例について本発明を説明する。
【００１１】実施例
ポリ塩化ビニル１５ｇをシクロヘキサノン８５ｍｌ中に
溶解させた溶液０．５μｌを、白金電極（表面積１×１
．５ｍｍ）上に滴下し、１分間室温下で風乾した後、水
中に１分間浸漬、ゲル化させて、電極上に膜厚約１００
μｍのポリ塩化ビニル膜を形成させた。これを、濃度１
ｍｇ／ｍｌのグルコースデヒドロゲナーゼ水溶液中に４
℃で２４時間浸漬し、引き上げた後水洗、乾燥させた。
溶解させた溶液０．５μｌを、白金電極（表面積１×１
．５ｍｍ）上に滴下し、１分間室温下で風乾した後、水
中に１分間浸漬、ゲル化させて、電極上に膜厚約１００
μｍのポリ塩化ビニル膜を形成させた。これを、濃度１
ｍｇ／ｍｌのグルコースデヒドロゲナーゼ水溶液中に４
℃で２４時間浸漬し、引き上げた後水洗、乾燥させた。
【００１２】そこに濃度１００μＭのβ−ニコチンアミ
ドアデニンジヌクレオチド水溶液０．５μｌを滴下し、
４℃で５時間乾燥させた。更にその上に、上記ポリ塩化
ビニルシクロヘキサノン溶液０．５μｌを滴下し、１分
間室温下で風乾した後、水中に１分間浸漬してゲル化さ
せた。
ドアデニンジヌクレオチド水溶液０．５μｌを滴下し、
４℃で５時間乾燥させた。更にその上に、上記ポリ塩化
ビニルシクロヘキサノン溶液０．５μｌを滴下し、１分
間室温下で風乾した後、水中に１分間浸漬してゲル化さ
せた。
【００１３】このようにして製造された作用極を有する
センサを、電流計（ＢＡＳ社製ＬＣ−４Ｂ）に接続し、
この際対極（銀電極）と電流計の参照極（銀電極）とを
ショートさせ、作用極の電位はＮＡＤＨの酸化電位であ
る０．５Ｖとした。
センサを、電流計（ＢＡＳ社製ＬＣ−４Ｂ）に接続し、
この際対極（銀電極）と電流計の参照極（銀電極）とを
ショートさせ、作用極の電位はＮＡＤＨの酸化電位であ
る０．５Ｖとした。
【００１４】測定溶液は、ｐＨ７．４、イオン強度０．
１５、温度３７℃のリン酸緩衝液であり、電流が安定し
た後、最終濃度が１００ｍｇ／ｄｌとなるようにしたグ
ルコース水溶液をそこに添加したところ、応答が得られ
、その定常電流値は２２ｎＡであった。
１５、温度３７℃のリン酸緩衝液であり、電流が安定し
た後、最終濃度が１００ｍｇ／ｄｌとなるようにしたグ
ルコース水溶液をそこに添加したところ、応答が得られ
、その定常電流値は２２ｎＡであった。
【００１５】同じセンサを用い、濃度１００ｍｇ／ｄｌ
のグルコース水溶液の測定を９回くり返して行ったとこ
ろ、その定常電流値はそれぞれ２１，２２，２１，２３
，２０，２１，２２，２４，２０ｎＡであった。
のグルコース水溶液の測定を９回くり返して行ったとこ
ろ、その定常電流値はそれぞれ２１，２２，２１，２３
，２０，２１，２２，２４，２０ｎＡであった。
Claims (1)
- 【請求項１】 塩化ビニル樹脂膜で被覆された電極面
上に、グルコースデヒドロゲナーゼおよびニコチンアミ
ドアデニンジヌクレオチドを吸着固定化し、更に塩化ビ
ニル樹脂膜で被覆して作用極としたグルコースバイオセ
ンサ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3176049A JP2995927B2 (ja) | 1991-06-20 | 1991-06-20 | グルコ−スバイオセンサ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3176049A JP2995927B2 (ja) | 1991-06-20 | 1991-06-20 | グルコ−スバイオセンサ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04370755A true JPH04370755A (ja) | 1992-12-24 |
| JP2995927B2 JP2995927B2 (ja) | 1999-12-27 |
Family
ID=16006827
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3176049A Expired - Lifetime JP2995927B2 (ja) | 1991-06-20 | 1991-06-20 | グルコ−スバイオセンサ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2995927B2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008256725A (ja) * | 2001-05-31 | 2008-10-23 | Instrumentation Lab Co | 分析装置およびバイオセンサ、ならびにこれらの精度および有効期間を増大させるための方法 |
| EP0872729B2 (de) † | 1997-04-17 | 2012-08-29 | F. Hoffmann-La Roche AG | Biosensor mit permeabler Deckmembran aus Polyvinylchlorid-Copolymer |
| WO2023074454A1 (ja) * | 2021-10-28 | 2023-05-04 | パナソニックＩｐマネジメント株式会社 | 酸化還元酵素及び補酵素を含む反応系を用いた処理装置並びにその制御方法 |
| WO2023074455A1 (ja) * | 2021-10-28 | 2023-05-04 | パナソニックＩｐマネジメント株式会社 | 処理装置の制御方法、酵素電極及び処理装置 |
| WO2023074453A1 (ja) | 2021-10-28 | 2023-05-04 | パナソニックＩｐマネジメント株式会社 | 電気化学反応装置及びグルコースの電気化学的分解方法 |
-
1991
- 1991-06-20 JP JP3176049A patent/JP2995927B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0872729B2 (de) † | 1997-04-17 | 2012-08-29 | F. Hoffmann-La Roche AG | Biosensor mit permeabler Deckmembran aus Polyvinylchlorid-Copolymer |
| JP2008256725A (ja) * | 2001-05-31 | 2008-10-23 | Instrumentation Lab Co | 分析装置およびバイオセンサ、ならびにこれらの精度および有効期間を増大させるための方法 |
| WO2023074454A1 (ja) * | 2021-10-28 | 2023-05-04 | パナソニックＩｐマネジメント株式会社 | 酸化還元酵素及び補酵素を含む反応系を用いた処理装置並びにその制御方法 |
| WO2023074455A1 (ja) * | 2021-10-28 | 2023-05-04 | パナソニックＩｐマネジメント株式会社 | 処理装置の制御方法、酵素電極及び処理装置 |
| WO2023074453A1 (ja) | 2021-10-28 | 2023-05-04 | パナソニックＩｐマネジメント株式会社 | 電気化学反応装置及びグルコースの電気化学的分解方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2995927B2 (ja) | 1999-12-27 |
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