JP2995927B2 - グルコ−スバイオセンサ - Google Patents
グルコ−スバイオセンサInfo
- Publication number
- JP2995927B2 JP2995927B2 JP3176049A JP17604991A JP2995927B2 JP 2995927 B2 JP2995927 B2 JP 2995927B2 JP 3176049 A JP3176049 A JP 3176049A JP 17604991 A JP17604991 A JP 17604991A JP 2995927 B2 JP2995927 B2 JP 2995927B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- electrode
- glucose
- solution
- vinyl chloride
- adenine dinucleotide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、グルコースバイオセン
サに関する。更に詳しくは、電極面上にグルコースデヒ
ドロゲナーゼを固定化せしめて作用極としたグルコース
バイオセンサに関する。
サに関する。更に詳しくは、電極面上にグルコースデヒ
ドロゲナーゼを固定化せしめて作用極としたグルコース
バイオセンサに関する。
【０００２】
【従来の技術】グルコースデヒドロゲナーゼ(GDH)に
は、補酵素としてニコチンアミドアデニンジヌクレオチ
ド(NAD)を必要とするものとピロロキノリンキノン(PQQ)
を必要とするものとがある。この内、NAD型GDHの反応
は、GDHの存在下に次のように行われる。
は、補酵素としてニコチンアミドアデニンジヌクレオチ
ド(NAD)を必要とするものとピロロキノリンキノン(PQQ)
を必要とするものとがある。この内、NAD型GDHの反応
は、GDHの存在下に次のように行われる。
【０００３】この場合、NADは酵素GDHと結合していない
ため、グルコース量を測定する際溶液中にNADを添加し
なければならないという問題がみられ、このことはNAD
を消費し、コストを高めるばかりではなく、測定操作を
煩雑なものとしている。
ため、グルコース量を測定する際溶液中にNADを添加し
なければならないという問題がみられ、このことはNAD
を消費し、コストを高めるばかりではなく、測定操作を
煩雑なものとしている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、ニコ
チンアミドアデニンジヌクレオチドを補酵素とするグル
コースデヒドロゲナーゼを作用極側に固定化したグルコ
ースバイオセンサであって、測定溶液中に補酵素の添加
を要しないものを提供することにある。
チンアミドアデニンジヌクレオチドを補酵素とするグル
コースデヒドロゲナーゼを作用極側に固定化したグルコ
ースバイオセンサであって、測定溶液中に補酵素の添加
を要しないものを提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】かかる本発明の目的は、
塩化ビニル樹脂膜で被覆された電極面上に、グルコース
デヒドロゲナーゼおよびニコチンアミドアデニンジヌク
レオチドを吸着固定化し、更に塩化ビニル樹脂膜で被覆
して作用極としたグルコースバイオセンサによって達成
される。
塩化ビニル樹脂膜で被覆された電極面上に、グルコース
デヒドロゲナーゼおよびニコチンアミドアデニンジヌク
レオチドを吸着固定化し、更に塩化ビニル樹脂膜で被覆
して作用極としたグルコースバイオセンサによって達成
される。
【０００６】電極上への塩化ビニル樹脂膜の形成は、次
のようにして行われる。即ち、ポリ塩化ビニルまたは塩
化ビニルに少量のエチレン、酢酸ビニルなどを共重合さ
せた共重合体をそれらの可溶性溶媒、例えばジメチルホ
ルムアミド、シクロヘキサノン、テトラヒドロフラン、
メチルエチルケトンなどに約1〜30重量%の濃度で溶解さ
せた溶液を、一般に室温下で直接白金電極、金電極など
の電極表面に滴下した後風乾するか、あるいはワイヤ
状、針状などの白金電極、金電極、炭素電極などの電極
面をその溶液中に浸漬し、引き上げた後風乾し、水洗、
乾燥させる。
のようにして行われる。即ち、ポリ塩化ビニルまたは塩
化ビニルに少量のエチレン、酢酸ビニルなどを共重合さ
せた共重合体をそれらの可溶性溶媒、例えばジメチルホ
ルムアミド、シクロヘキサノン、テトラヒドロフラン、
メチルエチルケトンなどに約1〜30重量%の濃度で溶解さ
せた溶液を、一般に室温下で直接白金電極、金電極など
の電極表面に滴下した後風乾するか、あるいはワイヤ
状、針状などの白金電極、金電極、炭素電極などの電極
面をその溶液中に浸漬し、引き上げた後風乾し、水洗、
乾燥させる。
【０００７】このようにして電極面上を塩化ビニル樹脂
膜で被覆した後、これを濃度約0.1〜10mg/mlのグルコー
スデヒドロゲナーゼ水溶液中に4℃で約1〜48時間程度浸
漬し、引き上げて乾燥させる。次いで、そこに濃度約1
〜200μMのニコチンアミドアデニンジヌクレオチド、一
般にはβ-ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド水溶
液を滴下し、4℃で乾燥させる。最後に、これら２種類
の固定化物の固定化を確実にするために、電極面上へ行
われたのと同様の塩化ビニル樹脂膜の形成が行われる。
膜で被覆した後、これを濃度約0.1〜10mg/mlのグルコー
スデヒドロゲナーゼ水溶液中に4℃で約1〜48時間程度浸
漬し、引き上げて乾燥させる。次いで、そこに濃度約1
〜200μMのニコチンアミドアデニンジヌクレオチド、一
般にはβ-ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド水溶
液を滴下し、4℃で乾燥させる。最後に、これら２種類
の固定化物の固定化を確実にするために、電極面上へ行
われたのと同様の塩化ビニル樹脂膜の形成が行われる。
【０００８】
【発明の効果】本発明に係るグルコースバイオセンサ
は、電極面上に塩化ビニル樹脂膜を被覆し、そこにグル
コースデヒドロゲナーゼおよびニコチンアミドアデニン
ジヌクレオチドを固定化させるだけであるので、それの
製作は簡便性にすぐれている。しかも、塩化ビニル樹脂
膜の電極面への接着性およびグルコースデヒドロゲナー
ゼおよびニコチンアミドアデニンジヌクレオチドの固定
化性は、実際に使用してみて良好であり、グルコース濃
度約1〜500mg/dlの検量範囲ではすぐれた応答性を示し
ている。
は、電極面上に塩化ビニル樹脂膜を被覆し、そこにグル
コースデヒドロゲナーゼおよびニコチンアミドアデニン
ジヌクレオチドを固定化させるだけであるので、それの
製作は簡便性にすぐれている。しかも、塩化ビニル樹脂
膜の電極面への接着性およびグルコースデヒドロゲナー
ゼおよびニコチンアミドアデニンジヌクレオチドの固定
化性は、実際に使用してみて良好であり、グルコース濃
度約1〜500mg/dlの検量範囲ではすぐれた応答性を示し
ている。
【０００９】測定は、電極間に約0.45〜0.55Vの電圧を
印加することによって行われるが、その際測定溶液にニ
コチンアミドアデニンジヌクレオチドを添加する必要が
ないので、コスト高となる要因や操作上煩雑さがなく、
またそれをくり返し測定に用いても、安定した測定結果
を示すことが確認され、つまりニコチンアミドアデニン
ジヌクレオチドが消費されないことを示している。
印加することによって行われるが、その際測定溶液にニ
コチンアミドアデニンジヌクレオチドを添加する必要が
ないので、コスト高となる要因や操作上煩雑さがなく、
またそれをくり返し測定に用いても、安定した測定結果
を示すことが確認され、つまりニコチンアミドアデニン
ジヌクレオチドが消費されないことを示している。
【００１０】
【実施例】次に、実施例について本発明を説明する。
【００１１】実施例 ポリ塩化ビニル15gをシクロヘキサノン85ml中に溶解さ
せた溶液0.5μlを、白金電極(表面積1×1.5mm)上に滴下
し、1分間室温下で風乾した後、水中に１分間浸漬、ゲ
ル化させて、電極上に膜厚約100μmのポリ塩化ビニル膜
を形成させた。これを、濃度１mg/mlのグルコースデヒ
ドロゲナーゼ水溶液中に4℃で24時間浸漬し、引き上げ
た後水洗、乾燥させた。
せた溶液0.5μlを、白金電極(表面積1×1.5mm)上に滴下
し、1分間室温下で風乾した後、水中に１分間浸漬、ゲ
ル化させて、電極上に膜厚約100μmのポリ塩化ビニル膜
を形成させた。これを、濃度１mg/mlのグルコースデヒ
ドロゲナーゼ水溶液中に4℃で24時間浸漬し、引き上げ
た後水洗、乾燥させた。
【００１２】そこに濃度100μMのβ-ニコチンアミドア
デニンジヌクレオチド水溶液0.5μlを滴下し、4℃で5時
間乾燥させた。更にその上に、上記ポリ塩化ビニルシク
ロヘキサノン溶液0.5μlを滴下し、１分間室温下で風乾
した後、水中に１分間浸漬してゲル化させた。
デニンジヌクレオチド水溶液0.5μlを滴下し、4℃で5時
間乾燥させた。更にその上に、上記ポリ塩化ビニルシク
ロヘキサノン溶液0.5μlを滴下し、１分間室温下で風乾
した後、水中に１分間浸漬してゲル化させた。
【００１３】このようにして製造された作用極を有する
センサを、電流計(BAS社製LC-4B)に接続し、この際対極
(銀電極)と電流計の参照極(銀電極)とをショートさせ、
作用極の電位はNADHの酸化電位である0.5Vとした。
センサを、電流計(BAS社製LC-4B)に接続し、この際対極
(銀電極)と電流計の参照極(銀電極)とをショートさせ、
作用極の電位はNADHの酸化電位である0.5Vとした。
【００１４】測定溶液は、pH7.4、イオン強度0.15、温
度37℃のリン酸緩衝液であり、電流が安定した後、最終
濃度が100mg/dlとなるようにしたグルコース水溶液をそ
こに添加したところ、応答が得られ、その定常電流値は
22nAであった。
度37℃のリン酸緩衝液であり、電流が安定した後、最終
濃度が100mg/dlとなるようにしたグルコース水溶液をそ
こに添加したところ、応答が得られ、その定常電流値は
22nAであった。
【００１５】同じセンサを用い、濃度100mg/dlのグルコ
ース水溶液の測定を９回くり返して行ったところ、その
定常電流値はそれぞれ21,22,21,23,20,21,22,24,20nAで
あった。
ース水溶液の測定を９回くり返して行ったところ、その
定常電流値はそれぞれ21,22,21,23,20,21,22,24,20nAで
あった。
Claims (1)
- 【請求項１】 塩化ビニル樹脂膜で被覆された電極面上
に、グルコースデヒドロゲナーゼおよびニコチンアミド
アデニンジヌクレオチドを吸着固定化し、更に塩化ビニ
ル樹脂膜で被覆して作用極としたグルコースバイオセン
サ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3176049A JP2995927B2 (ja) | 1991-06-20 | 1991-06-20 | グルコ−スバイオセンサ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3176049A JP2995927B2 (ja) | 1991-06-20 | 1991-06-20 | グルコ−スバイオセンサ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04370755A JPH04370755A (ja) | 1992-12-24 |
| JP2995927B2 true JP2995927B2 (ja) | 1999-12-27 |
Family
ID=16006827
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3176049A Expired - Lifetime JP2995927B2 (ja) | 1991-06-20 | 1991-06-20 | グルコ−スバイオセンサ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2995927B2 (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AT404992B (de) † | 1997-04-17 | 1999-04-26 | Avl List Gmbh | Sensor zur bestimmung eines enzymsubstrates |
| US6872297B2 (en) * | 2001-05-31 | 2005-03-29 | Instrumentation Laboratory Company | Analytical instruments, biosensors and methods thereof |
| CN118140137A (zh) | 2021-10-28 | 2024-06-04 | 松下知识产权经营株式会社 | 电化学反应装置及葡萄糖的电化学分解方法 |
| CN118215839A (zh) * | 2021-10-28 | 2024-06-18 | 松下知识产权经营株式会社 | 使用了包含氧化还原酶及辅酶的反应体系的处理装置以及其控制方法 |
| WO2023074455A1 (ja) * | 2021-10-28 | 2023-05-04 | パナソニックＩｐマネジメント株式会社 | 処理装置の制御方法、酵素電極及び処理装置 |
-
1991
- 1991-06-20 JP JP3176049A patent/JP2995927B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH04370755A (ja) | 1992-12-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6740215B1 (en) | Biosensor | |
| US4321123A (en) | Coenzyme immobilized electrode | |
| JP3056221B2 (ja) | 酵素電極およびその製造方法 | |
| US5922188A (en) | Biosensor and method for quantitating biochemical substrate using the same | |
| CN1122178C (zh) | 基质的定量方法 | |
| EP1873516B1 (en) | Biosensor | |
| EP1308720B1 (en) | Biosensor | |
| JPH1144667A (ja) | バイオセンサ | |
| JP4796731B2 (ja) | クレアチニン・バイオセンサー | |
| CN103842518A (zh) | 用于电化学生物传感器的氧化还原试剂组合物及包含所述组合物的生物传感器 | |
| KR102360124B1 (ko) | 탄소나노튜브를 포함하는 생체신호 측정용 전기화학적 바이오 센서 및 이의 제조방법 | |
| Bilitewski et al. | Glucose biosensors based on thick film technology | |
| Wang et al. | Chitosan/Prussian blue-based biosensors | |
| IE881274L (en) | Amperometric method for determining an adenine compound | |
| US9617576B2 (en) | Enzyme electrode | |
| JP2995927B2 (ja) | グルコ−スバイオセンサ | |
| JPH09127053A (ja) | 過酸化水素の測定方法、その方法を用いた過酸化水素測定センサーおよびその製造方法 | |
| Crumbliss et al. | Amperometric glucose sensor fabricated from glucose oxidase and a mediator coimmobilized on a colloidal gold hydrogel electrode | |
| JP2000262281A (ja) | 架橋グルコースデヒドロゲナーゼ | |
| JP2000180399A (ja) | 基質の定量方法 | |
| JP3770757B2 (ja) | バイオセンサ | |
| JP2000338076A (ja) | バイオセンサ | |
| JP3158762B2 (ja) | フルクトースセンサ | |
| CA2512282C (en) | Process for preparation of enzyme electrode | |
| JPH0783872A (ja) | バイオセンサおよびその製造方法 |