JPH04273890A - カテキン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】この発明は、肝斑や雀斑等の原因
となるメラニン色素の生成に関与するチロシナーゼの酵
素作用を阻害して優れた美白効果を発揮する新規なカテ
キン誘導体に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来から、肝斑や雀斑等の原因となるメ
ラニン色素の生成に関与するチロシナーゼの酵素作用を
阻害して、優れた美白効果をもたらす皮膚外用剤の有効
成分としては、特定の植物組織からの抽出精製または微
生物を用いる培養法等によって得られるアルブチンや抽
出精製または微生物を用いる培養法等によって得られる
アルブチンやコウジ酸が用いられているが（例えば、特
開昭６０−５６９１２号公報およびフレグランスジャー
ナル、第６３号（１９８３年）、第４０頁〜第４４頁参
照）、特殊な製造装置や多数の不純物を除去するための
複雑な精製工程を必要とするので製造コストが高くなる
等の問題がある。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】この発明は、比較的容
易かつ安価に入手し得る原料を用いて一段階反応で製造
でき、アルブチンやコウジ酸等に比べて遜色のない美白
効果を発揮する、皮膚外用剤の有効成分として有用な新
規化合物を提供するためになされたものである。

【０００４】

【課題を解決するための手段】即ちこの発明は、一般式
（１）：

【化２】 （式中、Ｒ１〜Ｒ５の少なくとも１つはＤ−グルコピラ
ノース残基または重合度２〜８のマルトオリゴ糖残基を
示し、他は各々独立にＨ，Ｃｌ，ＣＨ３，Ｃ２Ｈ５，Ｃ
３Ｈ７，Ｃ１５Ｈ３１ＣＯまたはＣ１７Ｈ３５ＣＯを示
す）で表わされるカテキン誘導体に関する。

【０００５】従来から知られているカテキンの配糖体は
、いずれも、糖とカテキンとの結合様式がβ結合のもの
であって（例えば、ファイトケミストリー、第２８巻（
１９８９年）、第１２３７頁〜第１２４０頁参照）、上
記の一般式（１）で表わされるようなα−結合のカテキ
ン配糖体は全く知られていなかった。

【０００６】一般式（１）において、Ｒ１〜Ｒ５の少な
くとも１つはＤ−グルコピラノース残基または重合度２
〜８のマルトオリゴ糖残基を示し、他は各々独立にＨ，
Ｃｌ，ＣＨ３，Ｃ２Ｈ５，Ｃ３Ｈ７，Ｃ１５Ｈ３１ＣＯ
またはＣ１７Ｈ３５ＣＯを示す。また、置換基ＯＲ１・
Ｃ６Ｈ３・ＯＲ２とＯＲ３はトランス配置またはシス配
置のいずれであってもよい。

【０００７】一般式（１）で表わされるカテキン誘導体
の製造法は特に限定的ではないが、好適な方法としては
、例えば、カテキンおよび澱粉もしくはシクロデキスト
リンを、シクロマルトデキストリン−グルカノトランス
フェラーゼ（以下、ＣＧＴアーゼという）の存在下で反
応させる製法が挙げられる。この反応は、通常、燐酸緩
衝液等の緩衝液を用いて反応系のｐＨを約３〜９に調整
し、約１０〜８０℃で約５〜１００時間おこなう。反応
溶媒としては、水，メタノール／水（５〜５０体積％）
，エタノール／水（５〜５０体積％），酢酸エチル／水
（１０〜８０の体積％）等が例示される。

【０００８】一般式（１）で表わされるカテキン誘導体
は、アルブチンやコウジ酸等に比べて遜色のない美白効
果を発揮するので、皮膚外用剤の配合成分として特に有
用である。この場合、該カテキン誘導体の配合量は特に
限定的ではないが、通常は０．１〜５重量％である。な
お、該カテキン誘導体含有皮膚外用剤の基剤としては、
蜜ロウ，スクワラン，ＫＤ−ワックス１２３，流動パラ
フィン，ソルビタンモノオレート，プロピルパラベン，
ワセリン，セタール，ステアリルアルコール，セトマク
ロゴール−１０００，メチルパラベン等が例示され、ま
た、その他の配合成分としては、酢酸トコフェノール，
亜硫酸水素ナトリウム，グリチルリチン酸モノアンモニ
ウム塩，クエン酸，アスコルビン酸等が例示される。

【０００９】

【実施例】以下、本発明を実施例により説明する。 実施例１ 　　５０ｍｌ容三角フラスコにカテキン２％、澱粉２％
、燐酸緩衝液（ｐＨ６．５）１０ｍＭ、ＣＧＴアーゼ（
バシラス・ステアロサーモフィラス起源）１００単位／
ｍｌから成る反応液２５ｍｌを入れ、４０℃で４８時間
反応させた。 そこへエタノール６０ｍｌを加え反応停止後、生じた不
溶物を遠心分離で取り除いた。更にロータリーエバポレ
ーターで減圧濃縮乾固した後、水３ｍｌに溶解し、高速
液体クロマトで目的成分を分取した。カラムはウォータ
ーズ社製マイクロボンダスフェアＣ１８　　１００オン
グストローム　　内径１９ｍｍ×長さ１５５ｍｍ、溶離
液はメタノール／１０ｍＭ燐酸（１８／８２）、流速５
ｍｌ／ｍｉｎ、カラム温度４０℃、モニターは２７９ｎ
ｍの紫外部吸収で行った。目的物のリテンションタイム
は３４分である。目的画分を１Ｎ水酸化ナトリウムで中
和し、ロータリーエバポレーターで減圧濃縮乾固したの
ち、少量の水に溶解させ、高速液体クロマトで脱塩した
。条件は溶離液がメタノール／水（１８／８２）以外は
上記分取条件と同一である。目的画分をロータリーエバ
ポレーターで減圧濃縮乾固し、更に真空乾燥機で乾燥さ
せ、淡紫色の粉末２４ｍｇを得た。この粉末はＴＬＣ的
に単一であった。薄層はシリカゲル６０Ｆ２５４、展開
溶媒は酢酸エチルエステル／酢酸／水（３／１／１）、
検出は紫外線の照射あるいは硫酸／メタノール（１／２
）噴霧後、加熱（１１０〜１２０℃）発色させることに
よった。なお、目的物のＲｆ値は０．７２であった。

【００１０】実施例２ 　　２００ｍｌ容三角フラスコにカテキン２％、澱粉５
％、燐酸緩衝液（ｐＨ６．５）１０ｍＭ、ＣＧＴアーゼ
（バシラス・マセランス起源）６０単位／ｍｌ、エタノ
ール２０％から成る反応液１００ｍｌを入れ、４０℃で
４０時間反応させた。この反応液をロータリーエバポレ
ーターで減圧濃縮乾固させたのち水２０ｍｌを加え遠心
分離によって水溶性画分を得た。同画分を、あらかじめ
酢酸エチルエステルで平衡化させたシリカゲルカラム（
和光純薬社製ワコーゲルＣ−２００、直径３．６ｃｍ×
高さ１０ｃｍ）に吸着させた。カラム体積（１００ｍｌ
）の２倍容の酢酸エチルエステル、同２倍容のメタノー
ル／酢酸エチルエステル（５／９５）で順次洗いだした
後、５倍容のメタノール／酢酸エチルエステル（１０／
９０）で目的物を溶出させた。同溶出画分をロータリー
エバポレーターにて減圧濃縮乾固したのち、２ｍｌの水
に溶解し高速液体クロマトによって分取を行った。カラ
ムはウォーターズ社製マイクロボンダスフェアＣ１８　
　１００オングストローム　　内径１９ｍｍ×長さ１５
５ｍｍ、溶離液はメタノール／１０ｍＭ燐酸（１８／８
２）、流速５ｍｌ／ｍｉｎ、カラム温度４０℃、モニタ
ーは２７９ｎｍの紫外部吸収で行った。目的物のリテン
ションタイムは３４分である。目的画分を１Ｎ水酸化ナ
トリウムで中和し、ロータリーエバポレーターで減圧濃
縮乾固したのち、少量の水に溶解させ、高速液体クロマ
トで脱塩した。条件は溶離液がメタノール／水（１８／
８２）以外は上記分取条件と同一である。目的画分をロ
ータリーエバポレーターで減圧濃縮乾固し、更に真空乾
燥機で乾燥させ、淡紫色の粉末３８ｍｇを得た。この粉
末はＴＬＣ的に単一であった。

【００１１】上記の実施例で得られた生成物が、次式（
２）：

【化３】 で表わされる（＋）カテキン３’−α−Ｄ−グルコピラ
ノシドであることを、１Ｈ−ＮＭＲ（図１参照）、１３
Ｃ−ＮＭＲ（図２参照）およびＭＳ（図３参照）によっ
て確認した。これらの機器分析の主要なデータは以下の
通りである。

【００１２】１Ｈ−ＮＭＲ（ｐｐｍ、ＣＨ３ＯＨ−ｄ４
）２．４９〜２．８９（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４）、３．３１
（１Ｈ，ｄｄ）、３．４５（１Ｈ，ｔ）、３．５７（１
Ｈ，ｄｄ）、３．７６（２Ｈ，ｄｄ，Ｈ−６”）、３．
８８（１Ｈ，ｔ）、３．９９（１Ｈ，ｄｄ，Ｈ−３）、
４．５７（１Ｈ，ｄ，Ｈ−２）、５．３４（１Ｈ，ｄ，
Ｈ−１”）、５．８４（１Ｈ，ｄ，Ｈ−６）、５．９３
（１Ｈ，ｄ，Ｈ−８）、６．８４（１Ｈ，ｄ，Ｈ−５’
）、６．９７（１Ｈ，ｄ，Ｈ−６’）、７．２９（１Ｈ
，ｄ，Ｈ−２’）

【００１３】１３Ｃ−ＮＭＲ（ｐｐｍ
、ＣＨ３ＯＨ−ｄ４）２９．８（Ｃ４）、６３．０（Ｃ
６”）、６９．６（Ｃ３）、７２．０（Ｃ４”）、７４
．３（Ｃ２”）、７５．２（Ｃ３”）、７５．７（Ｃ５
”）、８３．６（Ｃ２）、９６．３（Ｃ８）、９７．２
（Ｃ６）、１０１．７（Ｃ１”）、１０２．３（Ｃ４ａ
）、１１８．０（Ｃ２’）、１１９．２（Ｃ５’）、１
２４．８（Ｃ６’）、１３２．５（Ｃ１’）、１４７．
３（Ｃ３’）、１５０．１（Ｃ４）、１５７．７（Ｃ７
）、１５８．４（Ｃ５）、１５８．６（Ｃ８ａ）

【００１４】ＭＳ ｍ／ｅ＝４５３＝（Ｍ＋１）＋ 　　ｍ／ｅ＝４７５＝（Ｍ＋２３）＋ 　　分子量＝４５２

【００１５】実施例３ 　　上記実施例で得られたカテキン誘導体の美白効果を
以下の方法によって評価した。美白効果の指標としては
、一般に用いられているメラニン色素を生成させる酸化
酵素チロシナーゼを阻害する割合で表す方法を用いた。 チロシナーゼ阻害：　チロシナーゼ阻害はＬ−ドーパを
基質として次に述べる手順で行った。 試料溶液：　カテキン−α−Ｄ−グルコピラノシドの１
５０、３００および６００ｍＭ濃度の水溶液を調製した
。 酵素溶液：　チロシナーゼ（２０００単位／ｍｇ、シグ
マ社製）１０ｍｇを水に溶解して１０ｍｌとした。 測　　　　定：　試料０．０５ｍｌに基質溶液０．５ｍ
ｌおよび燐酸緩衝液０．９ｍｌを加え、２５℃で５分間
インキュベートする。これにあらかじめ２５℃でインキ
ュベートした酵素溶液０．０５ｍｌを加えて１．５分間
反応させ、４７５ｎｍの吸光度を測定した。阻害率は次
式によって算出した。 阻害率＝（１−（Ｔ−Ｔ’）／（Ｃ−Ｃ’））×１００
（％）Ｔ　：阻害剤を添加した場合の吸光度 Ｔ’：阻害剤を添加し、基質を添加しない場合の吸光度
Ｃ　：阻害剤を添加しない場合の吸光度Ｃ’：阻害剤も
基質も加えない場合の吸光度得られた結果を次の表１に
示す。

【００１６】

【表１】

【００１７】比較例１ 　　カテキン−α−Ｄ−グルコピラノシドの代わりにア
ルブチンを使用する以外は実施例３と同様の操作をおこ
ない、結果を上記の表１に示す。

【００１８】

【発明の効果】本発明によるカテキン誘導体は、特殊な
製造装置や多数の不純物を除去するための複雑な精製工
程を必要とすることなく、簡便に製造できる化合物であ
って、アルブチンやコウジ酸等に比べて遜色のない美白
効果を発揮するので、皮膚外用剤の配合成分として有用
な新規化合物である。

【図面の簡単な説明】

【図１】　　実施例で調製したカテキン誘導体の１Ｈ−
ＮＭＲスペクトルである。

【図２】　　該カテキン誘導体の１３Ｃ−ＮＭＲスペク
トルである。

【図３】　　該カテキン誘導体のＭＳスペクトルである
。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　一般式（１）： 【化１】 （式中、Ｒ１〜Ｒ５の少なくとも１つはＤ−グルコピラ
   ノース残基または重合度２〜８のマルトオリゴ糖残基を
   示し、他は各々独立にＨ，Ｃｌ，ＣＨ３，Ｃ２Ｈ５，Ｃ
   ３Ｈ７，Ｃ１５Ｈ３１ＣＯまたはＣ１７Ｈ３５ＣＯを示
   す）で表わされるカテキン誘導体。
2. 【請求項２】　　カテキンおよび澱粉もしくはシクロデ
   キストリンを、シクロマルトデキストリン−グルカノト
   ランスフェラーゼの存在下で反応させることを特徴とす
   る、請求項１記載の化合物の製造方法。
3. 【請求項３】　　請求項１記載のカテキン誘導体を含有
   する皮膚外用剤。