JPH04222593A - 多糖類の抽出法 - Google Patents
多糖類の抽出法Info
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- JPH04222593A JPH04222593A JP2406050A JP40605090A JPH04222593A JP H04222593 A JPH04222593 A JP H04222593A JP 2406050 A JP2406050 A JP 2406050A JP 40605090 A JP40605090 A JP 40605090A JP H04222593 A JPH04222593 A JP H04222593A
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Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/02—Algae
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- Health & Medical Sciences (AREA)
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- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は多糖類の抽出法に関し、
さらに詳しくは多糖類の分子量を低下させずに微細藻体
から多糖類を抽出することができる多糖類の抽出法に関
する。
さらに詳しくは多糖類の分子量を低下させずに微細藻体
から多糖類を抽出することができる多糖類の抽出法に関
する。
【０００２】
【従来の技術】従来、微細藻体から多糖類を抽出する方
法として、強酸や強アルカリを使用する方法が知られて
いる（特開昭５８−２０１９９３号公報）。しかしなが
ら、この方法で回収される多糖類は、強酸や強アルカリ
で加水分解を受けて分子の一部が低分子化するという問
題があった。
法として、強酸や強アルカリを使用する方法が知られて
いる（特開昭５８−２０１９９３号公報）。しかしなが
ら、この方法で回収される多糖類は、強酸や強アルカリ
で加水分解を受けて分子の一部が低分子化するという問
題があった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、前記
従来技術の問題を解決し、多糖類の分子量を低下させる
ことなく微細藻体から多糖類を抽出することができる多
糖類の抽出法を提供することにある。
従来技術の問題を解決し、多糖類の分子量を低下させる
ことなく微細藻体から多糖類を抽出することができる多
糖類の抽出法を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明は、藻培養液中の
湿藻体から多糖類を抽出するに際し、上記湿藻体の水溶
液をアルカリ性に調整した後、該水溶液を弱アルカリ性
または中性とし、タンパク質分解酵素および／または脂
肪酸エステル分解酵素を加えて酵素反応を行うことを特
徴とする多糖類の抽出法に関する。
湿藻体から多糖類を抽出するに際し、上記湿藻体の水溶
液をアルカリ性に調整した後、該水溶液を弱アルカリ性
または中性とし、タンパク質分解酵素および／または脂
肪酸エステル分解酵素を加えて酵素反応を行うことを特
徴とする多糖類の抽出法に関する。
【０００５】本発明に用いられる微細藻体には特に制限
はないが、紅藻類に属するポルフィリジウム・クルエン
ツム（Ｐｏｒｐｈｙｒｉｄｉｕｍ ｃｒｕｅｎｔｕｍ
海産性） 、ポルフィルジウム・アイロギニュウム（Ｐ
ｏｒｐｈｙｒｉｄｉｕｍ ａｅｒｕｇｉｎｅｕｍ 淡
水性） などが多糖類を多く含むために好ましい。これ
らの微細藻体は、公知の方法で培養して用いられる。
はないが、紅藻類に属するポルフィリジウム・クルエン
ツム（Ｐｏｒｐｈｙｒｉｄｉｕｍ ｃｒｕｅｎｔｕｍ
海産性） 、ポルフィルジウム・アイロギニュウム（Ｐ
ｏｒｐｈｙｒｉｄｉｕｍ ａｅｒｕｇｉｎｅｕｍ 淡
水性） などが多糖類を多く含むために好ましい。これ
らの微細藻体は、公知の方法で培養して用いられる。
【０００６】藻培養液から多糖類を抽出するには、例え
ば次のようにして行う。まず、藻培養液を遠心分離、濾
過等の固液分離操作により上清と湿藻体に分ける。
ば次のようにして行う。まず、藻培養液を遠心分離、濾
過等の固液分離操作により上清と湿藻体に分ける。
【０００７】得られた湿藻体に５〜７倍容の水を加えて
アルカリ性に調整して藻体中のタンパク質をアルカリで
変性して水溶液に溶解する。アルカリ調整は、例えば水
酸化ナトリウム、水酸化バリウム、次亜塩素酸などの添
加により行う。水溶液のｐＨは８〜１３が好ましく、よ
り好ましくは８〜９である。
アルカリ性に調整して藻体中のタンパク質をアルカリで
変性して水溶液に溶解する。アルカリ調整は、例えば水
酸化ナトリウム、水酸化バリウム、次亜塩素酸などの添
加により行う。水溶液のｐＨは８〜１３が好ましく、よ
り好ましくは８〜９である。
【０００８】本発明においては、湿藻体水溶液をアルカ
リ性に調整する前に、加熱および／またはホモジナイザ
ー、ボールミル等により細胞破壊を行うことが好ましい
。細胞破壊の方法は藻体の状態によって適宜選択される
が、細胞内のタンパクを変性し、後述する酵素反応を容
易にするためには加熱するのが好ましい。しかし、高温
で長時間細胞破壊を行うと細胞内の多糖類が分解されて
低分子化するおそれがあるため、７０〜１２０℃の温度
で１０分〜６０分間程度で行うことが好ましく、より好
ましくは１２０℃で１０分ないしは７０℃で３０分加熱
を行う。また加熱の前後にホモジナイザー、ボールミル
等で充分破壊するのがさらに好ましい。
リ性に調整する前に、加熱および／またはホモジナイザ
ー、ボールミル等により細胞破壊を行うことが好ましい
。細胞破壊の方法は藻体の状態によって適宜選択される
が、細胞内のタンパクを変性し、後述する酵素反応を容
易にするためには加熱するのが好ましい。しかし、高温
で長時間細胞破壊を行うと細胞内の多糖類が分解されて
低分子化するおそれがあるため、７０〜１２０℃の温度
で１０分〜６０分間程度で行うことが好ましく、より好
ましくは１２０℃で１０分ないしは７０℃で３０分加熱
を行う。また加熱の前後にホモジナイザー、ボールミル
等で充分破壊するのがさらに好ましい。
【０００９】次いでアルカリ性水溶液を弱アルカリまた
は中性に調整する。アルカリで変性したタンパク質は、
酵素により消化され易くなっているが、アルカリ性のま
ま酵素反応を行うと多糖類が部分的に加水分解されて低
分子化するおそれがあるため、酵素反応を行う前に塩酸
等を加えて弱アルカリまたは中性の水溶液とする。
は中性に調整する。アルカリで変性したタンパク質は、
酵素により消化され易くなっているが、アルカリ性のま
ま酵素反応を行うと多糖類が部分的に加水分解されて低
分子化するおそれがあるため、酵素反応を行う前に塩酸
等を加えて弱アルカリまたは中性の水溶液とする。
【００１０】その後、弱アルカリまたは中性に調整され
た水溶液に、タンパク質分解酵素および／または脂肪酸
エステル分解酵素を添加して酵素反応を行う。
た水溶液に、タンパク質分解酵素および／または脂肪酸
エステル分解酵素を添加して酵素反応を行う。
【００１１】本発明に用いられるタンパク質分解酵素と
しては、例えば、中性または弱アルカリ性のエンド型ま
たはエキソ型プロテアーゼの混合酵素剤である、パパイ
ン、プロテアーゼＮ「アマノ」（天野製薬社製商品名）
などが挙げられ、また脂肪酸エステル分解酵素としては
、α位またはβ位の脂肪酸を分解するリパーゼ、パンク
レアチンなどが挙げられる。タンパク質分解酵素と脂肪
酸エステル分解酵素は単独で用いても、併用して用いて
もよい。併用する場合には別々に添加しても同時に添加
してもよい。
しては、例えば、中性または弱アルカリ性のエンド型ま
たはエキソ型プロテアーゼの混合酵素剤である、パパイ
ン、プロテアーゼＮ「アマノ」（天野製薬社製商品名）
などが挙げられ、また脂肪酸エステル分解酵素としては
、α位またはβ位の脂肪酸を分解するリパーゼ、パンク
レアチンなどが挙げられる。タンパク質分解酵素と脂肪
酸エステル分解酵素は単独で用いても、併用して用いて
もよい。併用する場合には別々に添加しても同時に添加
してもよい。
【００１２】湿藻体１００ｍｌに対する添加量は、タン
パク質分解酵素では通常１，０００〜５０，０００Ｕ（
ユニット）／ｇであり、脂肪酸エステル分解酵素では通
常１，０００〜３０，０００Ｕ／ｇである。酵素反応は
、通常３０〜８０℃、より好ましくは４０〜６０℃の温
度で、攪拌または振とうを行いながら３０分〜２４時間
程度行う。
パク質分解酵素では通常１，０００〜５０，０００Ｕ（
ユニット）／ｇであり、脂肪酸エステル分解酵素では通
常１，０００〜３０，０００Ｕ／ｇである。酵素反応は
、通常３０〜８０℃、より好ましくは４０〜６０℃の温
度で、攪拌または振とうを行いながら３０分〜２４時間
程度行う。
【００１３】酵素反応終了後、水混和性有機溶媒を反応
物の２〜３倍容になるまで加え、多糖類を浮遊物として
析出させる。水混和性有機溶媒としては、エタノール、
イソプロパノール等のアルコールなどが用いられる。浮
遊物の回収は濾過等の手段により行う。浮遊物を回収し
た後、必要に応じて水への再溶解工程および水混和性有
機溶媒による浮遊物の回収工程を数回繰り返して多糖類
の精製を行う。さらに必要に応じて透析等による脱塩を
行った後、乾燥する。乾燥は、通常の真空乾燥、スプレ
ー乾燥、凍結乾燥等の方法により行う。
物の２〜３倍容になるまで加え、多糖類を浮遊物として
析出させる。水混和性有機溶媒としては、エタノール、
イソプロパノール等のアルコールなどが用いられる。浮
遊物の回収は濾過等の手段により行う。浮遊物を回収し
た後、必要に応じて水への再溶解工程および水混和性有
機溶媒による浮遊物の回収工程を数回繰り返して多糖類
の精製を行う。さらに必要に応じて透析等による脱塩を
行った後、乾燥する。乾燥は、通常の真空乾燥、スプレ
ー乾燥、凍結乾燥等の方法により行う。
【００１４】本発明の方法により得られる多糖類は、酸
およびアルカリを穏和な条件で用いているため、多糖類
の分子が壊されることがなく、高分子量の多糖を多く含
む。この高分子量の多糖類は、流体摩擦抵抗の低減効果
に優れ、種々の流体摩擦低減剤として有用である。
およびアルカリを穏和な条件で用いているため、多糖類
の分子が壊されることがなく、高分子量の多糖を多く含
む。この高分子量の多糖類は、流体摩擦抵抗の低減効果
に優れ、種々の流体摩擦低減剤として有用である。
【００１５】
【実施例】以下、本発明を実施例により詳しく説明する
。 実施例１ 微細藻体（ポリフィリジウム・クルエンツム）を、培地
として人工海水培地を使用し、光源としてハロゲンラン
プを使用して５〜１０ｋｌｘの光を照射し、２５℃にお
いて、約２週間、ＣＯ２ ５％を含む空気を通気しなが
ら培養を行い、藻培養液を得た。
。 実施例１ 微細藻体（ポリフィリジウム・クルエンツム）を、培地
として人工海水培地を使用し、光源としてハロゲンラン
プを使用して５〜１０ｋｌｘの光を照射し、２５℃にお
いて、約２週間、ＣＯ２ ５％を含む空気を通気しなが
ら培養を行い、藻培養液を得た。
【００１６】得られた藻培養液を遠心分離にかけ、上清
と湿藻体に分離した。湿藻体（固形分１３重量％）１ｋ
ｇに対し、蒸留水２リットルを加えて８０℃で２０分間
加熱した後、室温まで冷却し、１Ｎ−ＮａＯＨを徐々に
加えて水溶液をｐＨ９に調整した。その後、Ｎ２ ガス
を吹き込みながら１時間室温で攪拌し、１Ｎ−ＨＣｌを
加えてｐＨ７に調整した。この水溶液にタンパク質分解
酵素であるパパイン（天野製薬社製）を１３ｇ加え、５
０℃で２４時間酵素反応を行った。反応終了後、エタノ
ールを等量加え、浮遊する多糖類を濾過により回収し、
水およびエタノールを除去し、さらにエタノールで洗浄
した。得られた多糖類を再び蒸留水５リットルに溶解さ
せ、パパインを１３ｇ加え、５０℃で２４時間酵素反応
を行った。その後、エタノールを等量加えて浮遊する多
糖類を回収し、エタノールで充分洗浄して真空乾燥法で
乾燥した。
と湿藻体に分離した。湿藻体（固形分１３重量％）１ｋ
ｇに対し、蒸留水２リットルを加えて８０℃で２０分間
加熱した後、室温まで冷却し、１Ｎ−ＮａＯＨを徐々に
加えて水溶液をｐＨ９に調整した。その後、Ｎ２ ガス
を吹き込みながら１時間室温で攪拌し、１Ｎ−ＨＣｌを
加えてｐＨ７に調整した。この水溶液にタンパク質分解
酵素であるパパイン（天野製薬社製）を１３ｇ加え、５
０℃で２４時間酵素反応を行った。反応終了後、エタノ
ールを等量加え、浮遊する多糖類を濾過により回収し、
水およびエタノールを除去し、さらにエタノールで洗浄
した。得られた多糖類を再び蒸留水５リットルに溶解さ
せ、パパインを１３ｇ加え、５０℃で２４時間酵素反応
を行った。その後、エタノールを等量加えて浮遊する多
糖類を回収し、エタノールで充分洗浄して真空乾燥法で
乾燥した。
【００１７】得られた多糖類の分子量分布を、ＧＰＣ（
ｇｅｌ ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｈｒ
ａｐｈｙ）を用いて測定し、結果を図１に示した。 比較例１ 藻体を含む培養液にＮａＯＨを加えてｐＨ１０〜１２に
調整し、１００℃で１〜２時間加熱した。これを室温ま
で冷却した後、ＨＣｌを加えてｐＨ２〜４に調整し、エ
タノールを２〜３倍容加え、浮遊した多糖を回収した。 回収した多糖を２ＭのＣａＣｌ２ を含む蒸留水に溶解
させた。その後、９０℃で多糖が完全に溶解するまで攪
拌し、溶解後、３５℃まで冷却し、これにさらにエタノ
ールを２〜３倍容加えて多糖類を回収し、４０℃で真空
乾燥させた。
ｇｅｌ ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｈｒ
ａｐｈｙ）を用いて測定し、結果を図１に示した。 比較例１ 藻体を含む培養液にＮａＯＨを加えてｐＨ１０〜１２に
調整し、１００℃で１〜２時間加熱した。これを室温ま
で冷却した後、ＨＣｌを加えてｐＨ２〜４に調整し、エ
タノールを２〜３倍容加え、浮遊した多糖を回収した。 回収した多糖を２ＭのＣａＣｌ２ を含む蒸留水に溶解
させた。その後、９０℃で多糖が完全に溶解するまで攪
拌し、溶解後、３５℃まで冷却し、これにさらにエタノ
ールを２〜３倍容加えて多糖類を回収し、４０℃で真空
乾燥させた。
【００１８】得られた多糖類の分子量分布を実施例１と
同様にして測定し、その結果を図２に示した。
同様にして測定し、その結果を図２に示した。
【００１９】図１と図２の比較から、本発明の方法で得
られた多糖類は、高分子量の多糖を多く含むことがわか
った。 実施例２ 実施例１で用いた藻培養液を遠心分離にかけて上清と湿
藻体に分離した。得られた湿藻体１ｋｇに対して蒸留水
５リットルを加え、１０，０００ｒｐｍで５分間ホモジ
ナイズした。次に８０℃で１０分間加熱した後、室温に
冷却して１Ｎ−ＮａＯＨを加え、ｐＨを１０に調整した
。この水溶液にＮ２ ガスを吹き込みながら４０℃で４
５分間攪拌し、室温に冷却して１Ｎ−ＮＣｌを加えて中
性に調整した。この水溶液にリパーゼ３０ｇを添加し、
３０℃で２０時間酵素反応を行った後、エタノールを等
量加えて浮遊する多糖類を回収した。得られた多糖類を
蒸留水３リットルに溶解させた後、パパイン１０ｇを加
えて５０℃で２４時間酵素反応させ、その後、エタノー
ルを等量加えて多糖類を回収し、エタノールで充分に洗
浄して乾燥した。
られた多糖類は、高分子量の多糖を多く含むことがわか
った。 実施例２ 実施例１で用いた藻培養液を遠心分離にかけて上清と湿
藻体に分離した。得られた湿藻体１ｋｇに対して蒸留水
５リットルを加え、１０，０００ｒｐｍで５分間ホモジ
ナイズした。次に８０℃で１０分間加熱した後、室温に
冷却して１Ｎ−ＮａＯＨを加え、ｐＨを１０に調整した
。この水溶液にＮ２ ガスを吹き込みながら４０℃で４
５分間攪拌し、室温に冷却して１Ｎ−ＮＣｌを加えて中
性に調整した。この水溶液にリパーゼ３０ｇを添加し、
３０℃で２０時間酵素反応を行った後、エタノールを等
量加えて浮遊する多糖類を回収した。得られた多糖類を
蒸留水３リットルに溶解させた後、パパイン１０ｇを加
えて５０℃で２４時間酵素反応させ、その後、エタノー
ルを等量加えて多糖類を回収し、エタノールで充分に洗
浄して乾燥した。
【００２０】得られた多糖類の分子量分布を実施例１と
同様にして測定したが、この多糖類は、比較例１と比較
して高分子量の多糖を多く含むことがわかった。
同様にして測定したが、この多糖類は、比較例１と比較
して高分子量の多糖を多く含むことがわかった。
【００２１】
【発明の効果】本発明の抽出法によれば、酸やアルカリ
を穏和な条件で使用した後、酵素反応でタンパク質を分
解するため、酸、アルカリによる多糖類の低分子化を防
ぐことができ、高分子量の多糖類を得ることができる。 この高分子量の多糖類は流体摩擦低減効果に優れるため
、種々の流体摩擦低減剤として有用である。
を穏和な条件で使用した後、酵素反応でタンパク質を分
解するため、酸、アルカリによる多糖類の低分子化を防
ぐことができ、高分子量の多糖類を得ることができる。 この高分子量の多糖類は流体摩擦低減効果に優れるため
、種々の流体摩擦低減剤として有用である。
【図１】実施例１で得られた多糖類の分子量分布曲線で
ある
ある
【図２】比較例１で得られた多糖類の分子量分布曲線で
ある。
ある。
Claims (1)
- 【請求項１】 藻培養液中の湿藻体から多糖類を抽出
するに際し、上記湿藻体の水溶液をアルカリ性に調整し
た後、該水溶液を弱アルカリ性または中性とし、タンパ
ク質分解酵素および／または脂肪酸エステル分解酵素を
加えて酵素反応を行うことを特徴とする多糖類の抽出法
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2406050A JPH04222593A (ja) | 1990-12-25 | 1990-12-25 | 多糖類の抽出法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2406050A JPH04222593A (ja) | 1990-12-25 | 1990-12-25 | 多糖類の抽出法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04222593A true JPH04222593A (ja) | 1992-08-12 |
Family
ID=18515676
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2406050A Withdrawn JPH04222593A (ja) | 1990-12-25 | 1990-12-25 | 多糖類の抽出法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH04222593A (ja) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8277849B2 (en) | 2006-01-19 | 2012-10-02 | Solazyme, Inc. | Microalgae-derived compositions for improving the health and appearance of skin |
| US8298548B2 (en) | 2007-07-18 | 2012-10-30 | Solazyme, Inc. | Compositions for improving the health and appearance of skin |
| US8557249B2 (en) | 2008-11-07 | 2013-10-15 | Solazyme, Inc. | Cosmetic compositions comprising microalgal components |
| US8927522B2 (en) | 2008-10-14 | 2015-01-06 | Solazyme, Inc. | Microalgal polysaccharide compositions |
| CN104292356A (zh) * | 2014-11-11 | 2015-01-21 | 济南凯因生物科技有限公司 | 一种生物酶法从牡丹饼粕中提取牡丹多糖的方法 |
| WO2015071477A1 (fr) * | 2013-11-18 | 2015-05-21 | Agrimer | Procédé d'obtention d'extraits d'algues marines |
| US9597280B2 (en) | 2013-05-15 | 2017-03-21 | Terravia Holdings, Inc. | Cosmetic compositions comprising microalgal oil |
| CN106883309A (zh) * | 2017-04-13 | 2017-06-23 | 烟台大学 | 海带多糖的复合酶提取方法及得到的海带多糖 |
| CN110577607A (zh) * | 2018-06-11 | 2019-12-17 | 郑州师范学院 | 一种提取银杏中种皮多糖的方法 |
-
1990
- 1990-12-25 JP JP2406050A patent/JPH04222593A/ja not_active Withdrawn
Cited By (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| US10493007B2 (en) | 2006-01-19 | 2019-12-03 | Algenist Brands, Llc | Microalgae-derived compositions for improving the health and appearance of skin |
| US8932652B2 (en) | 2006-01-19 | 2015-01-13 | Solazyme, Inc. | Microalgae-derived compositions for improving the health and appearance of skin |
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| US9205040B2 (en) | 2008-11-07 | 2015-12-08 | Solazyme, Inc. | Cosmetic compositions comprising microalgal components |
| US9597280B2 (en) | 2013-05-15 | 2017-03-21 | Terravia Holdings, Inc. | Cosmetic compositions comprising microalgal oil |
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