JPH04173736A - 乳化剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野コ 本発明は、ポリエン抗真菌抗生物質を含有したリン脂質
からなる乳化剤及びその凍結乾燥製剤に関する。詳しく
は、本発明は、乳剤粒子の平均粒子径が５ｒｏｎ以上１
１００ｎｍ未満の範囲であることを特徴とするポリエン
抗真菌抗生物質を含有したリン脂質からなる改良乳化剤
及びその凍結乾燥製剤に関する。

［従来の技術］ アムホテリシン已に代表されるポリエン抗真菌抗生物質
は、開発されてから約３０年を経過した今日においても
、全身投与でき、確実な効果が期待される重要な抗真菌
剤である。しかし、その臨床使用は、溶血毒性や腎毒性
といった重篤な副作用により著しく制限され、十分な薬
物療法を行うことができない難点を有していた。また、
製剤学的にみても現在市販のアムホテリシンＢ注射剤は
、デオキシコール酸ナトリウムという刺激性・溶血性を
有する界面活性剤を用いたものであり、改善が望まれて
いた。

これらの副作用の軽減を目的として、リン脂質からなる
リポソーム製剤、又は大豆油を少量のリン脂質で乳化し
てなる脂肪乳剤製剤としてアムホテリシンＢを投与する
ことが行われてきた（Ｓｚｏｋａ。

Ｆ、　Ｃ，Ｊｒ、　ｅｔ　ａｌ、、＾ｎｔｉｍｉｃｒｏ
ｂｉａｌＡｇｅｎｔｓ　ａｎｄＣｈｅｍｏｔｈｅｒａｐ
ｙ、　３１．４２１−４２９．１９８７．　Ｃ以下「文
献１」〕、に１ｒｓｈ、　Ｒ，ａｔ　ａｌ、　Ｊｏｕｒ
ｎａｌ　ｏｆ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ口１ｓｅａｓｅｓ
、　１５ｆｌ、　１０６５−１０７Ｇ、　１９８８．　
　Ｃ以下「文献２」〕、〕開開昭６３−６６１２３号公
報以下「文献３」〕、他）。

しかしながら、これら各種リポソーム製剤、脂質複合体
製剤及び脂肪乳剤製剤は、アムホテリシンＢの有する溶
血毒性を軽減し、急性毒件の軽減には成功しているもの
の、臨床で最も大きな問題である腎毒性の軽減について
はほとんど効果がみられないという大きな欠点を有して
いた。また、これら各種リポソーム製剤、脂質複合体製
剤及び脂肪乳剤製剤は、感染部位に集合しているマクロ
ファージ等に対して被賞食性を有することを特徴とする
が、全身レベルで評価した際、投与した薬物の大半が肝
臓や膵臓に代表される細網内皮系細胞に賞食を受は移行
し、感染部位への真の薬物移行性が必ずしも高くないと
いう欠点を有していた。

一方、製剤の製造及び安定性に係る観点からも、リポソ
ーム製剤は工業上その大量生産方法に課題を有し、凝集
等による粒子形の増大等という点で保存安定性にも大き
な欠点を有していた。また、従来より栄養輸液として臨
床で用いられてきた脂肪乳剤が種々の薬物の注射用剤形
として応用され、その有用性が知られているが、ポリエ
ン抗真菌抗生物質への応用は、この薬物が両親媒性であ
り、大豆油への溶解性が低いことなどの理由により、乳
剤の製造及び安定性上に大きな欠点を有し、この課題を
克服することが困難であった。

［発明が解決しようとする課題］ 通常、投与された薬物は、その薬物分子の持つ固有の性
質により生体内を移動分布する。そしてその一部が作用
部位に到達し薬効を発現する。このとき薬効発現に必要
な部位にのみ薬物が集中することが好ましいが、一般に
は身体全体に薬物は広く分布し、不要な部位にも薬物が
移動する。時にこれが副作用の原因となる。従って、薬
物の体内動態を改善することの重要性及び必要性が生じ
る。

そこで、本発明者らは、上記の事情に鑑み、ポリエン抗
真菌抗生物質のもつ分子レベルの薬理作用機構（抗真菌
作用）そのものに影響を与えることなく、その溶血毒性
及び腎毒性を軽減することができ、加えて感染部位への
薬物移行性にも優れた投与剤形を提供することを目的と
した。特に、臨床の場で最も大きな真の問題であるアム
ホテリシンＢの腎毒性を軽減し、重篤な腎障害誘発の懸
念を有することなく安全に有効量を投与できる製剤を提
供することが重要である。

［課題を解決するための手段］ 本発明者らは、鋭意検討を重ねた結果、以下に示す医薬
組成物によって、上記目的を達成できることを見出し、
ようやく本発明を完成するに到った。

本発明の要旨は、医薬組成物として、ポリエン抗真菌抗
生物質０．００５〜５％（ｗ／ｖ）、リン脂質０．５〜
２５％（ｗ／ｖ）、及び適当量の水を必須構成成分とし
、乳剤粒子の平均粒子径が５ｎｍ以上１１００ｎｍ未満
の範囲であることを特徴とするポリエン抗真菌抗生物質
を含有した乳化剤である。

本発明に係るポリエン抗真菌抗生物質含有乳化剤（以下
、「本発明乳化剤」という）は、従来から知られている
リポソーム製剤又は脂肪乳剤に対しその含量比率及び乳
剤粒子の粒子径において特徴を有している。

そして、上記特徴により、後述するような従来のリポソ
ーム製剤及び脂肪乳剤では得ることができなかった効果
が得られたということは、本発明者らが本発明によって
初めて明らかにしたものである。

以下、本発明を詳述する。

本発明乳化剤は、安定な乳剤としての形態を有し、１μ
ｍ以上の乳剤粒子を含まない。その平均粒子径は、５ｎ
ｍ以上１１００ｎ未満の範囲内にあることが細網内皮系
による取り込み回避のため好ましい。また、特に７０ｎ
ｍ以下がより好ましい。これは、真菌感染等に起因する
炎症反応により血管透過性の亢進した部位で血管内から
病巣組織内に容易に漏出するからである。このようにし
て感染部位で選択的に、血管より多くの本発明乳剤粒子
が漏出し、病変組織内に移行する。これと同時に、この
乳剤粒子に包含されている薬物も病巣内に移行する。こ
れにより、薬物が容易にそして選択的に病巣部に移行す
るから、病巣部位での薬物濃度が高まりその効果を増大
させることができる。このことは、従来のものより少量
の薬物投与で同等以上の薬理学的効果が得られることに
つながる。

また、ポリエン抗真菌抗生物質として、例えば、アムホ
テリシンＢを含有する本発明乳化剤を有効量投与した場
合、後述する試験例で明らかなように、腎機能に対する
アムホテリシンＢのもつ障害性が全く認められず、最大
の課題であったアムホテリシンＢの腎毒性の軽減問題が
解決することが確認され、この腎毒性軽減は、投与後の
薬物の腎への移行量でも完全に裏付けられた（試験例３
）。

即ち、本発明乳化剤を用いた場合、アムホテリシンＢの
腎への移行量をきわめて僅かにすることができ、その結
果、腎障害を軽減することができた。

このように、ポリエン抗真菌抗生物質の投与剤形として
微粒子化した安定な乳剤粒子を用いることにより、上述
のような非常に有用な効果が得られるばかりでなく、細
網内皮系組織等による非特異的な薬物の取り込みが抑制
されることなどから、薬物の血中濃度が持続する効果を
も得ることができた（試験例５）。

更に、アムホテリシンＢ等のポリエン抗真菌抗生物質は
、比較的不安定な薬物であり、水溶液中で徐々に分解さ
れることが知られている。しかし本発明によれば、アム
ホテリシンＢ等は、リン脂質に乳化された状態にあるた
め、周囲の環境から遮断された状態で存在するので、酵
素的又は非酵素的な分解を抑制することができ、薬物の
安定性についても改善されることが明らかとなった。

前述のように、本発明に係る乳剤粒子は、従来技術であ
るリポソームや大豆油と卵黄レシチンからなる高カロリ
ー輸液を応用した従来型脂肪乳剤に比べ、乳剤粒子の粒
子径がきわめて微細である点において特徴的である。従
来、ポリエン抗真菌抗生物質を含有した安定な微粒子乳
化剤は困難であったが、前記のように薬物含量及び乳化
剤としてリン脂質を用いて高圧微細乳化を行うことによ
り達成され、このことにより、本発明において初めてポ
リエン抗真菌抗生物質を含有した安定な微粒子乳化剤が
得られた。

本発明乳化剤における乳剤粒子の微粒子化及びポリエン
抗真菌抗生物質を安定に含有するためには、ポリエン抗
真菌抗生物質０．００５〜５％（Ｗ／Ｖ）、リン脂質０
．５〜２５％（Ｗ／Ｖ）を用いることが必要である。５
％を越える量のポリエン抗真菌抗生物質や０．５％未満
のリン脂質を用いた場合は、粗大粒子の混入が避けられ
ず、薬物を含有した安定な乳剤とすることができない。

安定な微細乳剤化のみならず、ポリエン抗真菌抗生物質
を安定に乳剤粒子中に保持するためにも上記の構成比が
望ましい。

上記の成分構成により、安定な微粒子化乳剤が得られ、
このものがきわめて優れた特徴を有する乳化剤であり、
新規なポリエン抗真菌抗生物質製剤として利用できるこ
とを、本発明者らが、本発明により初めて明らかにした
。

ここに、リン脂質としては、例えば、卵黄、大豆、牛、
豚等由来のリン脂質、又は純若しくは半合成的に得られ
るリン脂質を挙げることができる。

即ち、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノー
ルアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノ
シトール、ホスファチジルグリセロール等を挙げること
ができる。例えば、卵黄ホスファチジルコリン、大豆ホ
スファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコ
リン、シミリストイルホスファチジルコリン、ジステア
ロイルホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチ
ジルコリン、ジステアロイルホスファチジルグリセロー
ル、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、シミ
リストイルホスファチジルグリセロール等を挙げること
ができる。それらの水素添加物も用いることができる。

なかでも好ましい代表例として、精製卵黄レシチンを挙
げることができる。

また、乳剤粒子に表面荷電を賦与するためにステアリル
アミン、ジセチルホスフェート、ホスファチジン酸、ホ
スファチジルグリセロール等の荷電を有する脂質をも用
いることができる。

本発明乳化剤及びこれを使用した製剤の製造にあたって
は、従来から行われてきた種々の乳剤製造法をそのまま
応用することができる。例えば、薬物を含めた全構成成
分をマントンーガウリン型等の加圧噴射式ホモジナイザ
ー、マイクロフルイダイザー、超音波ホモジナイザー等
により充分に微細化して形成せしめる方法が一般的であ
る。この時、一般に知られる乳化補助剤または安定化剤
として生理的に受は入れられるステロール類、脂肪酸あ
るいはそれらの誘導体等を加えることもできる。これら
の代表例としては、コレステロール、オレイン酸等を挙
げることができる。

本発明乳化剤の形状や粒子径は、電子顕微鏡、光散乱方
式の粒子径分析装置、メンブレンフィルターによる濾過
等により容易に確認することができる。

本発明乳化剤の製剤の任意の成分として、一般に注射剤
に用いられる添加剤及び補助物質などを挙げることがで
きる。例えば、酸化防止剤、防腐剤、安定化剤、等張化
剤、緩衝剤等を挙げることができる。これらの添加剤、
補助物質等の要求量及び最適量は、その目的に応じて変
化させることができる。

上記のようにして得られる本発明乳化剤は、必要に応じ
て滅菌（例えば濾過滅菌や高圧蒸気滅菌等）し、窒素ガ
スと共にアンプル中に封入することができる。また、必
要に応じて凍結乾燥することもできる。凍結乾燥させた
本発明乳化剤は、適当な溶液の添加によって復元するこ
とが容易である。

本発明乳化剤よりなる製剤は、真菌感染症やウィルス感
染症等の治療又は予防を目的としてヒト又は種々の動物
の静脈内に投与するのが一般的である。この場合、乳剤
粒子の粒子径等の管理を十分に行う必要がある。なぜな
らば、一般に１μｍ以上の粒子が混在すると、種々の毒
性発現が知られているからである。また本発明乳化剤よ
りなる製剤は、必要に応じて従来品同様、動脈内、筋肉
内、髄腔内及び皮下等に注射剤として投与することもで
きる。更に、本発明乳化剤は、点眼剤、点鼻剤、経口投
与剤、吸入剤、膀胱注入剤、外用剤又は半開等としても
製剤化し使用することができる。この場合においても、
医薬上許容される基剤、賦形剤等の添加剤を任意の成分
として用いることができる。

本発明乳化剤よりなる製剤の投与量は、投与ルート、剤
形、症状、目的によって異なるが、乳剤として一般に、
１〜１００（７／回である。また、アムホテリシンＢと
しての投与量は、成人に対して一般に１〜２００■／回
である。

本発明乳化剤に適応できるポリエン抗真菌抗生物質とし
て、アムホテリシンＢのほかに、アムホテリシンＢメチ
ルエステル、ナイスクチン、トリコマイシン、ピマリシ
ン等を挙げることができる。

［効果コ 本発明によれば、ポリエン抗真菌抗生物質（特に、アム
ホテリシンＢ）の臨床上の利用価値を著しく高めること
ができる。本発明の効果は、従来の問題点を克服し、 ■アムホテリシンＢのもつ溶血毒性のみならず、真の改
善課題であった腎毒性についても著しく軽減したこと、 ■病巣への薬物移行性を改善したこと、■細網内皮系に
よる取り込みを抑制したこと、■包含する薬物の血中濃
度の持続を可能としたこと、 ■保存時の安定性を確保したこと、 ■製造コストを低減させたこと、 等に集約することができる。これらの効果は、本発明に
より初めて成されたものである。

本発明乳化剤の構成成分は、従来から医療現場において
医療用として用いられてきた医療上許容される脂質を主
とするため、極めて安全に使用することができることも
特徴として挙げることもできる。

（以下次頁） ［実施例で 以下に、例として、本発明に係るアムホテリシンＢ含有
乳化剤の製造に関する実施例及び試験例を挙げて本発明
を更に詳しく説明するが、本発明がこれらのみに限定さ
れるものではないことは明白である。

製造例１ アムホテリシン８３■及び精製卵黄レシチン０．５ｇを
クロロホルム／メタノール（１／１．　ｖ／ｖ）　ａ液
１０〇−中で混合溶解した後、ロータリーエバポレータ
ーで減圧下溶媒を完全に除去する。これに、等張リン酸
緩衝液を８ｍＩ！加え、ホモジナイザーで攪拌し粗乳化
液とする。等張リン酸緩衝液を加えて１０ｍ１に定容し
た後、水冷下、超音波ホモジナイザー（ブランソン　モ
デル１８５）で６０分間乳化し極めて微細なアムホテリ
シンＢを含有する乳化剤を得た。このものを常法に従い
凍結乾燥し乾燥製剤を得た。

製造例２ アム不テリシン８３ｇおよび精製卵黄レシチン１５ｇを
約６０℃で加温混合し、これに、等張リン酸緩衝液を５
００ｍ１加え、ホモミキサーで攪拌し粗乳化液とする。

粗乳化液をマントン−ガラリン型ホモジナイザーにより
高圧乳化し、きわめて微細な了ムホテリシンＢを含有す
る乳化剤を得た。このものを常法に従い凍結乾燥し乾燥
製剤を得た。

製造例３ アムホテリシンＢ３０■及び精製卵黄レシチン０．５ｇ
をクロロホルム／メタノール（１／１．　ｖ／ｖ）混液
１００−中で混合溶解した後、ロータリーエバポレータ
ーで減圧下溶媒を完全に除去する。これに、０、２４Ｍ
グリセリン水溶液８艷を加え、ホモジナイザーで攪拌し
粗乳化液とする。そして、０．２４Ｍグリセリン水溶液
を加えて１０ｒｎｌに定容した後、水冷下、超音波ホモ
ジナイザー（プランソン　モデル１８５）で６０分間乳
化して極めて微細なアムホテリシンＢを含有する乳化剤
を得た。このものを常法に従い凍結乾燥し乾燥製剤を得
た。

製造例４ アムホテリシン８２ｇ精製卵黄レシチン３０ｇを約６０
℃で加温混合し、これに、０．２４Ｍグリセリン水溶液
を１００ｍ１加え、ホモミキサーで攪拌し粗乳化液とす
る。粗乳化液をマイクロフルイダイザーにより高圧乳化
し、きわめて微細なアムホテリシンＢを含有する乳化剤
を得た。このものを常法に従い凍結乾燥し乾燥製剤を得
た。

製造例５ アムホテリシンＢ１ｍｇ及び精製卵黄レシチン０．５ｇ
をクロロホルム／メタノール＜１／１．　ｖ／ｖ）混液
１００ｍｆ！中で混合溶解した後、ロータリーエバポレ
ーターで減圧下溶媒を完全に除去する。これに、０、２
４Ｍグリセリン水溶液８−を加え、ホモジナイザーで攪
拌し粗乳化液とする。そして、０．２４Ｍグリセリン水
溶液を加えて１０−に定容した後、超音波ホモジナイザ
ー（プランソン　モデル１８５）で６０分間乳化して極
めて微細なアムホテリシンＢを含有する乳化剤を得た。

このものを常法に従い凍結乾燥し乾燥製剤を得た。

製造例６ アムホテリシン３３■及び精製卵黄レシチン０．４ｇ１
シミリストイルホスフアチジルグリセロール０．１ｇを
クロロホルム／メタノール（１／１．　ｖ／ｖ）混液１
００ｍ１！中で混合溶解した後、ロータリーエバポレー
ターで減圧下溶媒を完全に除去する。これに、０、２４
Ｍグリセリン水溶液８ｍ１ｌ！を加え、ホモジナイザー
で攪拌し粗乳化液とする。そして、０．２４Ｍグリセリ
ン水溶液を加えて１０ｍ１に定容した後、超音波ホモジ
ナイザー（ブランソン　モデル１８５）で６０分間乳化
して極めて微細なアムホテリシンＢを含有する乳化剤を
得た。このものを常法に従い凍結乾燥し乾燥製剤を得た
。製造例７ アムホテリシン８３■及び水素添加卵黄レシチン０．４
．、コレステロール０．１ｇをクロロホルム／メタノー
ル（１／１．　Ｖ／Ｖ）混液１００−中で混合溶解した
後、ロータリーエバポレーターで減圧下溶媒を完全に除
去する。これに、９％ラクトース水溶液８−を加え、ホ
モジナイザーで攪拌し粗乳化液とする。そして、９％ラ
クトース水溶液を加えて１〇−に定容した後、超音波ホ
モジナイザー（プランソン　モデル１８５）で６０分間
乳化し極めて微細なアムホテリシンＢを含有する乳化剤
を得た。このものを常法に従い凍結乾燥し乾燥製剤を得
た。

製造例８ 製造例１．５および６で得られたアムホテリシンＢ含有
乳化剤にアルブミン０．５ｇを加え、その後凍結乾燥処
理を行い、乾燥製剤を得た。

本発明のアムホテリシンＢ含有乳化剤の特性評価試験結
果を以下に記す。

各試験においては、市販のアムホテリシンＢ製剤、従来
技術である各種のアムホテリシンＢ含有リポソーム製剤
および従来技術である脂肪乳剤を比較のために用いた。

各試料の詳細を以下に記す。

検体試料１：製造例１で得られた本発明のアムホテリシ
ンＢ含有乳化剤。

検体試料２：製造例３で得られた本発明のアムホテリシ
ンＢ含有乳化剤。

対照試料１：市販の注射用アムホテリシンＢ製剤（商品
名：ファンギゾン（登録部ｓ）、日本スクイブ） 対照試料２：参考文献１に従い調製した、シミリストイ
ルホスファチジルコリンニジミリストイルホスファチジ
ルグリセロール＝７：３のモル比よりなるマルチラメラ
リポソームあるいは脂質複合体と呼ばれるものに分類さ
れるアムホテリシンＢ含有製剤。

対照試料３：文献１に従い調製した、シミＩＪストイル
ホスファチジルコリン；シミリストイルホスファチジル
グリセロール＝７：３のモル比よりなり、超音波処理後
に得られるスモールユニラメラリポソームと分類される
アムホテリシンＢ含有リポソーム製剤。

対照試料４：文献１に従い調製した、精製卵黄レシチン
よりなり、超音波処理後に得られるスモールユニラメラ
リポソームと分類されるアムホテリシンＢ含有リポソー
ム製剤。

対照試料５：文献２に従い調製した、精製大豆油及び精
製卵黄レシチンよりなるアムホテリシンＢ含有脂肪乳剤
。

試験例１：溶血性試験 精製ラット赤血球に対する溶血作用について検体試料１
及び対照試料１について試験管内で試験した結果、対照
試料１は、極めて低濃度（０，１μｇ／ｍｌ！以上）の
アムホテリシンＢ濃度で顕著な溶血性を示したが、検体
試料は１００倍以上の濃度でもほとんど溶血性を示さな
かった。

即ち、本発明のアムホテリシンＢ含有乳化剤は従来知ら
れるリポソーム製剤及び脂肪乳剤製剤と同様にアムホテ
リシンＢ自身の持つ溶血毒性を大幅に軽減することが明
らかとなった。

試験例２　：　ｉｎ　ｖｉｖｏ急性毒性試験実験動物と
してｄｄＹ系雄性マウス（体重約２０ｇ）を用い、各々
の検体試料及び対照試料を尾静脈より静脈内投与し、そ
の急性毒性を評価した。

投与１時間後の判定によると検体試料はいずれもきわめ
て低毒性であった。対照試料のうち、２及び３は溶血性
に起因する毒性の低下が認められた。しかし、対照試料
１．４及び５については急性毒性の軽減は認められなか
った。

投与後７２時間後の判定によると検体試料はいずれもき
わめて低毒性であった。しかし、対照試料はいずれも毒
性が発現し、検体試料に比べ腎毒性が著しいことが示さ
れた。

即ち、本発明のアムホテリシンＢ含有乳化剤は、従来知
られているリポソーム製剤及び脂肪乳剤製剤に比較して
、投与直後にみられる溶血毒性のみならず、特に腎毒性
に起因すると考えられる投与後７２時間で評価した場合
の毒性軽減効果が顕著であることが示された。

試験例３：腎臓中薬物量（腎への移行性）実験動物とし
てＳＤ系雌雄性ラット体重約２５０ｇ）を用い各々の検
体試料及び対照試料を尾静脈より静脈内投与した。投与
量はアムホテリシンＢとして１■／ｋｇとした。投与１
８時間後、腎臓を摘出し、ホモジナイズした後、腎臓中
のアムホテリシンＢｆｉ度を高速液体クロマトグラフィ
ーにて測定した。その結果を、表１に示した。

検体試料を投与した場合の腎臓中アムホテリシンＢＡ度
は、いずれも狗定限界以下であったが、対照試料を投与
した場合は、いずれも高濃度のアムホテリシンＢが検出
された。

即ち、本発明のアムホテリシンＢ含有乳化剤は、従来知
られているリポソーム製剤及び脂肪乳剤製剤に比べ、顕
著な腎臓への薬物移行性の改善（移行性の低下）を達成
することが示された。

表１：アムホテリシンＢの腎移行量 試験例４：腎機能評価 実験動物としてＳＤ系雄件ラット　（体重的２５０ｇ）
を用い各々の検体試料及び対照試料を尾静脈より静脈内
投与した。投与量はアムホテリシンＢとして１■／ｋｇ
とし、２４時間毎に計３回投与した。

最終投与２４時間後に頚静脈より採血し血清を得た。

腎機能の指標として用いられる血清中尿素窒素量（ＢＵ
Ｎ）を市販の測定キットを用いて測定した結果を表２に
示した。なあ、コントロールとして生理食塩水を同様に
投与して得た血清を用いた。

（以下次頁） 表２＝腎機能の血清生化学的評価 検体試料を投与した場合のＢＵＮａ度は、いずれもコン
トロールと差が認められず、腎機能に全く障害は認めら
れなかった。しかし、対照試料を投与した場合は、いず
れも顕著に高いＢＵＮ濃度を示し、腎機能の障害が認め
られた。

即ち、本発明のアムホテリシンＢ含有乳化剤は、従来知
られているリポソーム製剤及び脂肪乳剤製剤に比べ、腎
臓機能の障害性の顕著な改善を達成することが示された
。

試験例５：血中濃度推移 実験動物としてＳＤ系雌雄性ラット体重的２５０ｇ）を
用い各々の検体試料及び対照試料を尾静脈より静脈内投
与した。投与量はアムホテリシンＢとして１■／ｋｇと
した。投与後、各時間において頚静脈より少量採血し血
漿を得た。血漿中のアムホテリシンＢ濃度は高速液体ク
ロマトグラフィー（文献：　Ｈ，Ｈｏ５ｏｔｓｕｂｏ、
　ｅｔ　ａ１１Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ＾ｇｅｎｔ
ｓ　ａｎｄ　ＣｈｅｍｏｔｈｅｒａｐＬ　３２　、１１
０３〜１１０５（１９８Ｂ）記載の条件に準じた）にて
測定した。その結果を図１に示した。

いずれの検体試料を投与した場合も、その血漿中アムホ
テリシンＢ濃度推移は、いずれの対照試料よりも高いこ
とが示された。一方、いずれの対照試料を投与した場合
も、速やかに血漿中濃度が低下した。

即ち、本発明のアムホテリシンＢ含有乳化剤は、従来知
られているリポソーム製剤及び脂肪乳剤製剤に比べ、Ｔ
ムホテリシンＢの顕著な血中濃度の持続が達成されるこ
とが示された。

試験例６：炎症部位への薬物移行性 真菌等に感染した部位は炎症反応を起こすことが知られ
ているので、そのモデル系として、実験的炎症部位への
薬物移行性について評価した。

実験動物としてＳＤ系雌雄性ラット体重約２５０ｇ）を
用い、胸腔内に２％λ−カラゲニン０．１−を投与し、
実験的胸膜炎を作製した。２．５時間後、各々の検体試
料及び対照試料を尾静脈より静脈内投与した。投与量は
アムホテリシンＢとして１■／ｋｇとした。投与後、各
時間において腹部大動脈より放血致死せしめ、胸腔内に
漏出している浸出液を得た。浸出液中のアムホテリシン
Ｂ１度は高速液体クロマトグラフィーにて測定した。

いずれの検体試料を投与した場合も、その浸出液中アム
ホテリシンＢｌ１度推移は、いずれの対照試料よりも高
いことが示された。

即ち、本発明のアムホテリシンＢ含有乳化剤は、従来知
られているリポソーム製剤及び脂肪乳剤製剤に比べ、顕
著な炎症部位（感染部位）への集積性を有し、より有効
で安全な薬物療法が達成されることが示された。

試験例７：粒子径の測定 検体試料１及び検体試料２の乳剤粒子の粒子径について
、レーザー光による動的光散乱粒子径測定装置を用いそ
の粒子径について評価した。

その結果、粒子径は、５ｎｍ以上１１００ｎ未満であり
、１μｍ以上の粒子を含まなかった。

即ち、本発明のアムホテリシンＢ含有乳化剤は、きわめ
て微細で、均一な乳剤粒子よりなり、静脈内に投与する
際、毒性上問題となる１μｍ以上の粒子をも含まないの
で、有効で安全な薬物療法が達成されることが示された
。

試験例８　：　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ抗真菌試験サブロー培
地にてカンジダ菌（Ｃ，Ａｌｂｊｃａｎｓ）を培養し、
各々の検体試料及び対照試料を培地に添加し、カンジダ
菌の生育を阻止する最低アムホテリシンＢｆｉ度を求め
、各試料の抗真菌活性を評価した。その結果を表３に示
した。各種試料ともきわめて微量のアムホテリシンＢａ
度で、抗真菌活性を示し、カンジダ菌の生育を抑制した
。

即ち、本発明のアムホテリシンＢ含有乳化剤は、アムホ
テリシンＢ自身の持つ抗真菌活性に悪影響を全く与えず
、有効で安全な薬物療法が達成されることが示された。

表３：抗真菌活性（ｉｎ　ｖｉｔｒｏ）

【図面の簡単な説明】

図１は、各検体試料または各対照試料をラットに投与し
た後の血漿中アムホテリシンＢの濃度推移を示している
。横軸は各試料投与後の時間（時間）経過を、縦軸は血
漿中アムホテリシンＢの濃度（μｇ　／ｍｉりをそれぞ
れ表している。○印線は検体試料１の場合を、・印線は
検体試料２の場合を、■印線は対照試料１の場合を、ム
印線は対照試料２の場合を、Δ印線は対照試料５の場合
を、それぞれ示している。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）医薬組成物として、ポリエン抗真菌抗生物質０．
   ００５〜５％（ｗ／ｖ）、リン脂質０．５〜２５％（ｗ
   ／ｖ）及び適当量の水を必須構成成分とし、乳剤粒子の
   平均粒子径が５ｎｍ以上１００ｎｍ未満の範囲であるこ
   とを特徴とするポリエン抗真菌抗生物質を含有した乳化
   剤、及びその凍結乾燥製剤。