JPH04159278A

JPH04159278A - 新規アルカロイドおよび該アルカロイドを有効成分とするアセチルコリンエステラーゼ阻害剤

Info

Publication number: JPH04159278A
Application number: JP2284304A
Authority: JP
Inventors: Tatsunori Ogino; 荻野　達則; Takuji Yamaguchi; 琢児山口; Shunji Sato; 俊次佐藤; Masao Chin; 政雄陳
Original assignee: Tsumura and Co
Current assignee: Tsumura and Co
Priority date: 1990-10-24
Filing date: 1990-10-24
Publication date: 1992-06-02

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［産業上の利用分野］本発明は、アセチルコリンエステラーゼ阻害作用を有し
、脳機能改善剤等の医薬として有用なアルカロイドに関
するものである。

［従来の技術および課題］アセチルコリンは、コリンとアセチル補酵素Ａ（以下、
アセチルＣｏＡと称する。）からプリン・アセチル転移
酵素により合成されるコリン作動性神経繊維の伝達物質
であり、種々の生体反応に関与している極めて重要な生
体内物質である。このアセチルコリンは、諸疾患の発症
に関与している。例えば、自己免疫疾患である重症筋無
力症は、骨格筋のアセチルコリン受容体が減少しており
、シナプス間隙アセチルコリン量を増加することにより
症状が緩解する。

また、アルツハイマー病およびアルツハイマー型痴呆症
の患者においては、大脳皮質中のアセチルコリンの減少
が認められており、脳内のアセチルコリン量を増加させ
ることにより、症状が改善するといわれている。

さらにアセチルコリンは、胃酸の分泌を刺激し、胃腸管
の運動を亢進するため、消化管でのアセチルコリン量を
増加させれば、低下した胃腸機能は緩解する。

従って、生体組織でのアセチルコリン濃度を高める方法
が諸疾患の治療法として有望視されており、その開発が
求められていた。

なお、アセチルコリンは生体内のあらゆる組織中で合成
されるものであり、現在、組織中のアセチルコリン濃度
を高めるために、以下に示す方法が用いられている。

■アセチルコリンの原料となるコリンの前駆物質を与え
、アセチルコリンの生合成を促進する。

■コリン・アセチル転移酵素活性を賦活し、アセチルコ
リンの生合成を促進する。

■アセチルコリンの分解酵素であるアセチルコリンエス
テラーゼの活性を阻害して分解を抑制する。

［課題を解決するための手段］本発明者らは、上記の課題を゛解決すべくアセチルコリ
ンエステラーゼ阻害作用を有する物質に焦点をあて、鋭
意検討を行った結果、下記式で表されるアルカロイドに
その作用があることを見いだし、本発明を完成するに至
った。

すなわち本発明は、下記式１（式Ｉ中Ｒ，およびＲ１は水素原子またはメチル基を、
Ｒ１は水素原子、メチル基またはアセチル基を示す。

ただし、Ｒ１，ＲｔおよびＲ１がすべてメチル基である
場合、Ｒ１およびＲ１がメチル基であり、Ｒ１が水素原
子である場合を除く。）で表されるアルカロイドおよび該アルカロイドを有効成
分とするアセチルコリンエステラーゼ阻害剤である。

以下、式Ｉで表されるアルカロイドを本発明の化合物と
いう。

本発明の化合物を得るには例えば次のような方法が挙げ
られる。

粉防己を水、アルコール類または水とアルコール類の混
合溶媒で抽出し、該抽出液から溶媒を除去した残渣をそ
のまま、または必要に応じて水または水とアルコール類
の混合溶媒に溶解した後、ｎ−ヘキサン、石油エーテル
等の有機溶媒により分配し、該有機溶媒に移行する脂溶
性成分を除去した後、ｐＨ９のアンモニア水に溶解し、
さらにクロロホルムで抽出し、アンモニア水抽出エキス
とクロロホルム抽出エキスを得る。次いで、クロロホル
ム抽出エキスを水、メタノール、クロロホルム、エーテ
ル、ヘキサン、ベンゼン、酢酸エチル、アンモニア水、
ジエチルアミンより選ばれる少なくとも一つを溶出溶媒
として、セファデックスＬＨ２０等のセファデックス、
ダイアイオンＨＰ２０等のポーラスポリマー、アルミナ
またはシリカゲル等を担体に用いたカラムクロマトグラ
フィーに数回付し、薄層クロマトグラフィーで目的成分
を確認しながら分画することにより得ることができる。

また必要に応じて適宜、カルバメイト化、脱メチル化、
アセチル化等の操作を行ってもよい。

アセチル化は、常用されるアセチル化法、例えば無水ジ
クロロメタン中、無水酢酸を反応させる等によって容易
に達成することができる。

場合によっては、エタノール、水、アセトン等の適当な
溶媒を用いて再結晶することにより精製してもよい。

次に本発明の化合物が、アセチルコリンエステラーゼ阻
害活性を有することについて実験例を示して説明する。

実験例８週齢のウィスター系ラットをエーテル麻酔下に致死さ
せ、直ちに脳を摘出し線条体を取り出した。線条体は２
５℃Ｍナトリウムーリン酸緩衝液（ｐＨ７，０）にて、
テフロンホモジナイザーでホモジナイズした。このホモ
ジネートを１０倍に希釈し、アセチルコリンエステラー
ゼ活性測定の検体とした。

アセチルコリンエステラーゼの活性の測定は、金円、水
産らの方法［Ｊ、Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａ、、３４４．
９３−１００゜（１９８５）］により行った。

すなわち、１０℃Ｍアセチルコリン１００ｄ。

０．３Ｍ塩化ナトリウムを含むナトリウム−リン酸緩衝
液（ｐＨ７，０）２５０通に、上記の検体１００Ａおよ
び後記実施例で得た化合物をジメチルスルフオキシド（
ＤＭＳＯ）に種々の濃度となるように溶解させた薬物溶
解液５０ｄをそれぞれ加えて、３７℃にて１５分間反応
させた。

次に、水中にて６％メタリン酸５０−を加えて反応を停
止させ、ｌＯ分後１０ｘＭエチルホモコリン５０ｄを加
えて、３．００Ｏｒｐｍで１０分間遠心した。この上清
のコリン含量を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ
）にて測定した。

ＨＰＬＣは、以下の条件で行った。移動相としてｅ−デ
カンスルホン酸ソーダ３００１９／（ｌおよびテトラメ
チルアンモニウムクロライド６５ｍｇＩＱを含む０、Ｉ
Ｍ力リすムーリ、ン酸緩衝液（ｐＨ８，０）、流速は１
ＩＩｎ／分、温度は３５℃とした。カラムは逆相系カラ
ムおよび酵素カラムを用いた。検出器は電気化学検出器
を用いた。また、実施例で得た化合物の溶解液を加えな
いかわりに、ＤＭＳＯを加える以外は上記と同様に反応
させて、コントロールとした。その結果を５０％阻害濃
度（ＩＣ５ｏ）として第１表に示した。

第１表第１表から本発明の化合物の優れたアセチルコリンエス
テラーゼ阻害活性が確認された。

従って本発明の化合物は、アセチルコリン濃度を高める
ことによって治療が期待される脳機能改善剤や重症筋無
力症、低下した胃腸機能の緩解等に利用することができ
る。

次に、本発明の化合物の投与量および製剤化について説
明する。

本発明の化合物はそのまま、あるいは慣用の製剤担体と
共に動物および人に投与することができる。投与形態と
しては、特に限定がなく、必要に応じ適宜選択して使用
され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤等の経
口剤、注射剤、半開等の非経口剤が挙げられる。

経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年
令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で本発
明の化合物の重量として３０〜４５０　Ｎを、１日数回
に分けての服用が適当と思われる。

本発明において錠剤、カプセル剤、顆粒剤等の経口剤は
、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキ
シメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等を用
いて常法に従って製造される。

この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、結合剤、崩
壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着
色剤、香料等を使用することができる。それぞれの具体
例は以下に示すごとくである。

［結合剤］デンプン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、
ヒドロキンプロピルスターチ、メチルセルロース、カル
ボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピ
ルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、ポ
リビニルピロリドン、マクロゴール。

［崩壊剤コデンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメ
チルセルロースナトリウム、カルボキンメチルセルロー
スカルシウム、カルボキシメチルセルロース、低置換ヒ
ドロキシプロピルセルロース。

［界面活性剤］ラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ショ糖脂肪酸
エステル、ポリソルベート　８０゜［滑沢剤コタルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステ
ル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウ
ム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリフー
ル。

［流動性促進剤コ軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケ
イ酸アルミニウム、ケイ酸マグネノウム。

また、本発明の化合物は、懸濁液、エマルノヨン剤、シ
ロップ剤、エリキシル剤としても投与することかでき、
これらの各種剤形には、矯味矯臭剤、着色剤を含有して
もよい。

非経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の
年令、体重、疾患の程度により異なるか、通常成人で本
発明の化合物の重量として１日０．１〜５０Ｑまでの静
注、点滴静注、皮下注射、筋肉注射が適当と思われる。

この非経口剤は常法に従って製造され、希釈剤として一
般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射
用植物油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ油、トウモロ
コシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコー
ル等を用いることかできる。さらに必要に応じて、殺菌
剤、防腐剤、安定剤を加えてもよい。また、この非経口
剤は安定性の点から、バイアル等に充填後冷凍し、通常
の凍結乾燥技術により水分を除去し、使用直前に凍結乾
燥物から液剤を再調製することもできる。更に、必要に
応じて適宜、等張化剤、安定剤、防腐剤、無痛化剤等を
加えても良い。

その他の非経口剤としては、外用液剤、軟膏等の塗布剤
、直腸内投与のための半割等が挙げられ、常法に従って
製造される。

以下に、実施例を示して本発明をさらに詳しく説明する
が本発明はこれにより同等制限されるものではない。

実施例１粉防己１５に９を３０１２のメタノールで抽出し、抽出
液よりメタノールを除去してメタノールエキス７９０ｔ
を得た。このメタノールエキスを９０％メタノール−水
混合液３Ｑに溶解し、ｎ−ヘキサン３ｇで３回抽出して
脂溶性成分を除去し、次いで９０％メタノール−水画分
を、減圧上濃縮して得た残渣にｐＨ９，０のアンモニア
水２ｅを加えて溶解し、クロロホルム２１２で３回抽出
し、クロロホルム履を減圧上濃縮してクロロホルム抽出
エキス３３１ｇを得た。次いでクロロホルム抽出エキス
をアルミナ（アルミニウムオキノド９０．メルク社製）
カラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルムおよび
クロロホルム−メタノールで溶出して、フラクションＡ
２５５９およびフラクションＢ５４９の２つのフラクシ
ョンに分け、フラクションＡをシリカゲル（キーセルゲ
ル６０．メルク社製）カラムクロマトグラフィーに付し
、クロロホルム−メタノール（４０：１）で溶出して、
フラクションＡ−■１６１９およびフラクションＡ−■
８１９の２つのフラクションに分けた。

フラクションＡ−■から溶媒を除去し、メタノール、エ
タノール、アセトンなどの溶媒で再結晶することにより
テトランドリン１１８９を得た。

フラクションＡ−■から溶媒を除去し、アセトンで再結
晶することにより無色針状晶のファンチノリン５６ｇを
得た。　　　− フラクションＢ５６９を１０％酢酸水溶液１００ｄに溶
解させ、クロロホルム１００−で３回分配し、ＩＯ％酢
酸層をとり、アンモニア水を加えた後、クロロホルム１
００．ｄで３回抽出して、クロロホルム層を減圧下濃縮
してクロロポルム抽出エキス１９．２９を得た。次いで
クロロホルム抽出エキスをシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーに付し、クロロホルム−メタノールで溶出させ
、フラクションＢ−■〜Ｂ−■の７つのフラクションに
分けた。

フラクションＢ−■２．６ｇをさらにシリカゲルカラム
クロマトグラフィーに付し、酢酸エチル−エタノール−
アンモニア水（５０：１０：ｌ）で溶出させて、フラク
ションＢ−■−１−Ｂ−■−３の３つのフラクションに
分けた。

フラクションＢ−■−２（２０４３１ｇ）から溶媒を除
去し、アセトンで再結晶して無色針状晶のアテロスベル
モリン１１５１ｇを得た。

フラクションＢ−■−３（１，７ｇ）から溶媒を除去し
、エタノールで再結晶することにより無色針状晶４６６
　Ｒ９を得た。この無色針状晶は下記の理化学的性質を
有することから、式１中Ｒ，およびＲ３がメチル基、Ｒ
ｔが水素原子である２°−Ｎ−ノルファンチノリンと決
定した。

融点　１６２〜１６４℃ 比旋光度ゴα］２も＋２５２．５゜（ｃ　＝　０．４５　、ＣｌＣｌ、）マススペクトルＥｌ−ＭＳｍ／ｚ（％）５９４　（Ｍ”
、８８）、３６７　（１００）。

赤外線吸収スペクトル　ν　；−【α−Ｉ：３３２０．
２９３６，１６１６゜１５８６．１５０４プロトン核磁気共鳴スペクトル（δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤＣｌ５）：２．３１（３Ｈ，ｓ）、３．３５（３Ｈ，ｓ）。

３．７７（３Ｈ，ｓ）、３．９２（３Ｈ，ｓ）。

６．０５（Ｉ　Ｈ，ｓ）、６．２９（Ｉ　Ｈ，ｓ）。

６．３９（ＬＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．３．２．２Ｈｚ）。

６．５１（ＩＨ，ｓ）。

６．５４　（ｌ　Ｈ，ｄ　、Ｊ　＝　１．６　Ｈｚ）。

６．８１（Ｉ　Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝８．３，２．６Ｈｚ）。

６．８４（ｌＨ，ｄ、Ｊ＝８．ＩＨ２）。

６．８６（ｌＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．１，１．６Ｈｚ）。

７．１　３（ｌ　　Ｈ９ｄｄ、Ｊ＝８．２．２．６Ｈｚ
）。

７．３　５　（Ｉ　　Ｈ，ｄｄ、Ｊ　＝　８．２．２．
２　Ｈｚ）１３ｃ−核磁気共鳴スペクトル（δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤＣｌ＋）：　　　　　　　　
　　　　　　　＋２２．０（ｔ）、２７．９（ｔ）、３
８．４（ｔ）。

４１．９（ｔ）、４２．２（Ｑ）、４２．４（Ｑ）、　
　　　　　’４４．３（ｔ）、５６．２（ｑ、２　Ｃ）
、５６．３（ｄ）、　　　・５６．３（Ｑ）、６１．４
（ｄ）、１０５．０（ｄ）。

１１１．６（ｄ）、１１３．７（ｄ）。

１１６．３（ｄ）、１１９．８（ｄ）、　　　　　　　
　　　１１２２．０（ｄ、２Ｃ）、１２２．８（ｄ）、
　　　　　　　＋１２３．５（ｓ）、１２３．６（ｓ）
。

１２８．９（ｓ）、１３０．１（ｓ）。

１３０．３（ｄ）、１３２．４（ｄ）。

１３４．６（ｓ）、１３５．０（ｓ）。

１３５．１　（ｓ）、１４１．８（ｓ）。

１４３．７（ｓ）、１４５．７（ｓ）。

１４７．１（ｓ）、１４８．７（ｓ）、　　　　　　　
　　　【１　４　９．５（ｓ）、１　５３．９（ｓ）実
施例２テトランドリンＩ５９を無水テトラヒドロフラン５００
Ｊに溶解させ、クロロギ酸メチルを加え、室温で５時間
撹拌した後、減圧下溶媒を除去し、ＯＨｌ　Ｏのアンモ
ニア水１５０ｄを加えてクロロホルム１５０１１１で３
回抽出し、クロロホルム層を収り、減圧下溶媒を除去し
てクロロホルム抽出エキスを得た。次いでクロロホルム
抽出エキスをシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付
し、クロロホルム−メタノール（２００：１→８０：ｌ
）で溶造させ、フラクションＴ−１（２，５５９）、Ｔ
−２：６．１４９）およびＴ−３（１，２１ｇ）の３つ
のフラクションに分けた。

フラツジｇ　：／Ｔ−１（２，５５ｙ）に１０％水酸化
りリウムーエチレングリコール４５１１１を加え、１９
０℃、１時間撹拌し、冷後塩酸を加えて酸性ヒした後、
アンモニア水を加えてクロロホルム５０Ｍ１で３回抽出
し、減圧下溶媒を除去してクロボホルム抽出エキス１．
９９９を得た。次いでクロロホルム抽出エキスをシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム−
メタノール（２０１）で溶出させ、Ｔ−１−■およびＴ
−１−■の２つのフラクションに分けた。

Ｔ−１−■８３５１ｇをエタノールで再結晶させ、無色
針状晶２３２　ｍ９を得た。この無色針状晶２３２ＩＩ
＋９を無水ジクロルメタン３０Ｍ１に溶解させ、塩化ア
ルミニウムを加えて２時間撹拌した後、水冷上少量の水
およびメタノールを加え、さらにアンモニア水を加えて
クロロホルムで抽出し、減圧上溶媒を除去し、クロロホ
ルム抽出エキスを得た。

このクロロホルム抽出エキスをシリカゲルカラムクロマ
トグラフィーに付し、クロロホルム−メタノール−アン
モニア水（１０：１　：０　、ｏ　５）で溶出させ、Ｔ
−１−■−１およびＴ−１−■−２の２つのフラクショ
ンに分けた。

７ラクシａ７Ｔ−１−■−２（１０４Ｑ）をエタノール
で再結晶し、無色針状晶６８Ｍ９を得た。この無色針状
晶は、下記に示した理化学的性質を有することから、式
Ｉ中Ｒ，およびＲ１が水素原子、Ｒ３かメチル基である
２、２°−Ｎ、Ｎ−ノノルファノチノリンと決定した。

融点　２２２〜２２４℃ 比旋光度：［αコ’ｏ＋３５６．８゜（ｃ　−０，３６、ＣＩ（Ｃ１３）マススペクトルＥ　Ｉ　−Ｍ　Ｓ　　ｍ／ｚ　（％）。

５８０（Ｍ”、Ｉ　Ｉ）、３５３（＋　００）。

赤外線吸収スペクトル　ν　−；α−１゜３４２４．２
９３２，１６１６゜１５８４．１５０６プロトン核磁気共鳴スペクトル（δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤＣ１３）３．３５（３Ｈ，ｓ）、３．７７（３Ｈ，ｓ）。

３．９４（３Ｈ，ｓ）、６．０３（Ｉ　Ｈ，ｓ）。

６．３０　（Ｉ　Ｈ，ｓ　）。

６．４２（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．２．２．２Ｈｚ）。

６．４３　（Ｉ　Ｈ，ｄ　、Ｊ　＝　１．９　Ｈｚ）。

６．５２（Ｉ　Ｈ，ｓ）。

６．７３（ＬＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．１，１．９Ｈｚ）。

６．８３（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．２，２．５Ｈｚ）。

６．８７（ＩＨ９ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）。

７．１３（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．２，２．５Ｈｚ）。

７．３９（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．２，２．２Ｈｚ）１３
Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤＣ１，）：２７．８（ｔ）、２８．６（ｔ）、３７．１（ｔ）。

３８．４（ｔ）、３９．７（ｔ）、４２．４（ｔ）。

５３．９（ｄ）、５６．３（ｑ、２　Ｃ）、５６．５（
ｃｌ）。

５６．６（Ｑ）、１０５．２（ｄ）、１１１．７（ｄ）
。

１１３．９（ｄ）、ｉ　１５．９（ｄ）。

１１９．１（ｄ）、１２１．７（ｄ、）。

１２２．３（２Ｃ，ｄ）、１２４．１（ｓ）。

１２４．２（ｓ）、１２８．７（ｓ）。

１３０．３（ｓ）、１３０．５（ｃｌ）。

１３２．５（ｄ）、１３４．１（ｓ）。

１３４．５（ｓ）、１３５．６（ｓ）。

１４０．５　（ｓ　）、　１４３．３　（ｓ　）。

１４５．７（ｓ）、１４７．２（ｓ）。

１４８．５（ｓ）、１５０．２（ｓ）。

１５３．３（ｓ）実施例３実施例■におけるフラクションＴ−２（６，１１）をエ
タノールで再結晶させ、無色針状晶２．ＩＯ２を得た。

この無色針状晶に１０％水酸化カリウム−エチレングリ
コール４０７を加え、１９０℃、１時間撹拌し、冷後塩
酸を加えて酸性とした後、アンモニア水を加えてクロロ
ホルム５０−で３回抽出し、減圧上溶媒を除去してクロ
ロホルム抽出エキス１．７６ｇを得た。次いでクロロホ
ルム抽出エキスをシリカゲルカラムクロマトグラフィー
に付し、クロロホルム−メタノール（３０：１）で溶出
させ、Ｔ−２−■およびＴ−２−■の２つのフラクショ
ンに分けた。

Ｔ−２−■１．３７９をエタノールで再結晶させ、無色
針状晶８３４　Ｎを得た。この無色針状晶を無水ジクロ
ルメタン６０ｄに溶解させ、塩化アルミニウムを加えて
５時間撹拌した後、水冷上少量の水およびメタノールを
加え、さらにアンモニア水を加えてクロロホルムで抽出
し、減圧上溶媒を除去し、クロロホルム抽出エキス７０
６　Ｒ＆を得た。

このクロロホルム抽出エキスをシリカゲルカラムクロマ
トグラフィーに付し、クロロホルム−メタノール−アン
モニア水（５・Ｉ：Ｏ，Ｉ）で溶出させ、Ｔ−２−■＝
１およびＴ−２−■−２の２つのフラクションに分けた
。

フラクションＴ−２−■−２（１５３Ｑ）をエタノール
で再結晶し、無色針状晶７１！９を得た。この無色針状
晶は、下記に示した理化学的性質を有することから、式
■中ＲＩがメチル基、Ｒ７およびＲ３が水素原子である
２゛−Ｎ−ノルアテロスペルモリンと決定した。

融点：２２０〜２２２℃ 比旋光度：［αコ”％＋２７１．４゜（ｃ　＝　０　、２６　、ＣＨＣｌ５）マススペクトル
　Ｅ　Ｉ−ＭＳ　　ｍ／ｚ　（％）二５８０（Ｍ”、５
２）、３６７（１００）。

赤外線吸収スペクトル　ν　；−；α−Ｉ：３３１２．
２９４０．１６１６゜１５９２．１５０４プロトン核磁気共鳴スペクトル（δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤＣｌ５）：２．３１（３Ｈ，ｓ）、３．１８（３Ｈ，ｓ）。

３．７７（３Ｈ１ｓ）、６．０９（Ｉ　Ｈ，ｓ）。

６．１７　（ｌ　Ｈ，ｄｄｊ　＝　８．２．２．１　Ｈ
ｚ）。

６．２９　（Ｉ　Ｈｌｓ　）。

６．４２（Ｉ　Ｈ，ｄ　、Ｊ　＝　１．７　Ｈｚ）。

６．４８（Ｉ　Ｈ，ｓ）。

６．６０　（Ｉ　Ｈ，ｄｄ、Ｊ　＝　８．２．２．５　
Ｈｚ）。

６．７３　（Ｉ　Ｈ，ｄ　、Ｊ　＝　８．０　Ｈｚ）。

６．７５（ＬＨ，ｄｄ、Ｊ　＝８．０，１．７Ｈｚ）。

７．０２（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．２，２．５Ｈｚ）。

７．３１（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．２，２．１Ｈｚ）１３
ｃ−核磁気共鳴スペクトル（δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤＣｌ５）：２１．６（ｔ）、２８．０（ｔ）、３８．４（ｔ）。

４１．８（ｔ）、４１．９（ｑ）、４２．０（ｔ）。

４３．７（ｔ）、５６．０（ｑ）、５６．１（ｄ）。

５６．３（Ｑ）、６１．１　（ｄ）、１０５．１（ｄ）
。

ｒ　　＋　　３．５（ｄ）、１　１　５．４（ｄ）。

１　１　６．３（ｄ）、１　１　９．８（ｄ）。

＋　　２　　＋、９（ｄ）、１　２　２．４（ｄ）。

１　２　３．１（ｓ）、１　２　３．３（ｄ）。

１　２　３．５（ｓ）、１　２　８．７（ｓ）。

１　３　０．０（ｓ）、１　３　０．４（ｄ）。

＋　　３　２．６（ｄ）、１　３　３．２（ｓ）。

１　３４．６（ｓ）、１　３　５．１　　（ｓ）。

１　４　１．７（ｓ）、１　４　３．７（ｓ）。

１　４　３．８　（ｓ　）、　１　４　５．７　（ｓ　
）。

１　４　７．８（ｓ）、１　４　８．８（ｓ）。

１５３．４（ｓ）実施例４実施例１におけるフラクションＴ−３（ｔ　、２　ｔ９
）に１０％水酸化カリウム−エチレングリコール２５Ｍ
１を加え、１９０℃、１時間撹拌し、冷後塩酸を加えて
酸性とした後、アンモニア水を加えてクロロホルム５０
−で３回抽出し、減圧上溶媒を除去してクロロホルム抽
出エキス９２６１１９を得た。

次いでクロロホルム抽出エキスをシリカゲルカラムクロ
マトグラフィーに付し、シクロヘキサンー酢酸エチルー
ジエチルアミン（１０：９：Ｉ）で溶出させ、Ｔ−３−
■およびＴ−３−■の２つのフラグ、メタンに分けた。

Ｔ−３−■６１４１９をエタノールで再結晶させ、無色
針状晶４２１　＊９を得た。この無色針状晶２３５　ｘ
９を無水ジクロルメタン３０Ｍ１に溶解させ、塩化アル
ミニウムを加えて４０分間撹拌した後、水冷上少量の水
およびメタノールを加え、さらにアンモニア水を加えて
クロロホルムで抽出し、減圧上溶媒を除去し、クロロホ
ルム抽出エキス２１８ｍｇを得た。

このクロロホルム抽出エキスをシリカゲルカラムクロマ
トグラフィーに付し、クロロホルム−メタノール（２０
：ｌ）で溶出させ、Ｔ−３−■−１およびＴ−３−■−
２の２つのフラクションに分けた。

フラクションＴ−３−■−２（１７ｆｌｙ）をベンゼン
で再結晶し、無色針状晶９２１９を得た。この無色針状
晶は、下記に示した理化学的性質を有することから、式
■中Ｒ１が水素原子、Ｒ９およびＲ２がメチル基である
２−Ｎ−ノルファンチノリンと決定した。

融点：１６５〜１６８℃ 比旋光度：［αコ２ｚ±３２７．８゜（ｃ　＝　０．３７　、ＣＨＣｌ３）マススペクトルＥ　Ｉ−ＭＳ　　ｍ／ｚ　（％）：５９
４（Ｍ”、５５）、３６７（１００）。

赤外線吸収スペクトル　ν　：２ＫＣ１１−Ｉ：３４３
６．２９３２，１６１６゜１５８６．１５０４プロトン核磁気共鳴スペクトル（δ　　ｐｐｍ　　ｉｎ　　ＣＤＣｌ５）：２．６１（
３Ｈ，ｓ）、３．３５（３Ｈ，ｓ）。

３．７６（３Ｈ，ｓ）、３．９４（３Ｈ，ｓ）。

６．０３（ｌ　Ｈ，ｓ）、６．２９（Ｉ　Ｈ，ｓ）。

６．３７（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．２，２．２Ｈｚ）。

６．４６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ）。

６．５３（ＩＨ，ｓ）。

６．７３（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．０，１．９Ｈｚ）。

６．８　２（Ｉ　　Ｈ，ｄｄ、Ｊ　＝８．２．２．５Ｈ
ｚ）。

６．８　７（ｌ　　Ｈ，ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）。

７．１　３（ｌ　　Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝８．２，２．５Ｈｚ
）。

７．３６（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．２，２．２Ｈ２）１３
Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（δ　ｐｐｔａ　ｉｎ　ＣＤＣ１３）２５．５（ｔ）、２８．６（ｔ）、３７．１（ｔ）。

３８．１（ｔ）、３９．８（ｔ）、４２．８（Ｑ）。

４５．５（ｔ）、５３．９（ｄ）、５６．２（ｑ、２　
Ｃ）。

５６．５（ｑ）、６４．１　（ｄ）、１０５．２（ｄ）
。

１１１．７（ｄ）、ｌ　ｌ　３．４（ｄ）。

１１５．９（ｄ）、１１９．９（ｄ）。

１２１．６（ｄ）、１２２．２（ｄ）。

１２２．３（ｄ）、１２４．０５（ｓ）。

１２４．１１（ｓ）、１２８．０（ｓ）。

１２９．１（ｓ）、１３０．３（ｄ）。

１３２．７（ｄ）、１３４．２（ｓ）。

１３４．５（ｓ）、１３５．７（ｓ）。

１４０．５（ｓ）、１４３．２（ｓ）。

１４５．７（ｓ）、１４７．２（ｓ）。

１　４　８．６　（ｓ　）、　１　５　０．２　（ｓ　
）。

１５３．２（ｓ）実施例５アテロスペルモリン２５０　Ｒ９を無水ジクロルメタン
２５−に溶解し、無水酢酸１ｔＮを加えて３時間撹拌し
た後、水冷上少量の水およびアンモニア水を加えてクロ
ロホルム５０１１１で抽出し、減圧下溶媒を除去してク
ロロホルム抽出エキス２６１１９を得た。次いでこのク
ロロホルム抽出エキスをシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーに付し、クロロホルム−メタノール（２０：ｌ）
で溶出させ、ＡＴ−１およびＡＴ−２の２つのフラクシ
ョンに分け、ＡＴ−１から溶媒を除去することにより、
Ｒｆ値０．６６［薄層プレート：キーセルゲル６０ｆ＊
ｓ−１展開溶媒：クロａホルム−メタノール（３：１）
、発色試薬：ドラーゲンドルフ試薬］を有する白色粉末
の化合物を得た。この白色粉末は、下記に示した理化学
的性質により、式Ｉ中Ｒ１およびＲ３がメチル基、Ｒｓ
がアセチル基である１２−０−アセチルアテロスペルモ
リンと決定した。

比旋光度：［α］’３＋１７４．８″ （ｃ　＝　０　、５４　、ＣＨＣｌ＊）マススペクトル
Ｅ　Ｉ　−Ｍ　Ｓ　　ｍ／ｚ　（％）：６３６（Ｍ”、
６１）、３８１（６６）。

赤外線吸収スペクトル　ν　二：、ＣＭ−１３５２４，
２９３６，１７６６゜１６１８．１５９４．１５０４プロトン核磁気共鳴スペクトル（δ　　ｐｐｍ　　ｉｎ　　ＣＤＣｌ５）：２．３１（
３Ｈ，ｓ）、２．３４（３Ｈ，ｓ）。

２．６１（３Ｈ，ｓ）、３．３４（３Ｈ，ｓ）。

ｊ、７６（３Ｈ，ｓ）、６．０２（ｌ　Ｈ，ｓ）。

６．２８（ＩＨ，ｓ）。

６．２９（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．２，２．２Ｈｚ）、６
．５０（ｌ　Ｈ，ｓ）。

６．６４（１，Ｈ，ｄ、Ｊ＝１．６Ｈｚ）。

６．７７（Ｉ　Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝８．２’、２．５Ｈｚ）
。

６．９４（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝８．１，１．６Ｈｚ）。

６．９６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）。

７．１　１　（ｌ　　Ｈ，ｄｄ、Ｊ　＝　８．２．２．
５　Ｈｚ）。

７．３　１（ｌ　Ｈ，ｄｄ、Ｊ＝８．２，２．２Ｈｚ）
”ｃ−核磁気共鳴スペクトル（δ　ｐｐｍ　ｉｎ　ＣＤＣｌ５）２０．８（ｑ）、２１．８（ｔ）、２５．７（ｔ）。

３７．７（ｔ）、４２．２８（ｑ）、４２．３２（ｔ）
。

４２．７（ｑ）、４５．４（ｔ）、５６．１９（ｑ）。

５６．２４（ｑ）、６１．２（ｄ）、６３．９（ｄ）。

１０５．０（ｄ）、１１３．１　（ｄ）。

１１７．７（ｄ）、１２０．８（ｄ）。

１２１．６６（ｄ）、１２１．７４（ｄ）。

１２２．２（ｄ）、１２３．３（ｄ）。

１２３．６（ｓ、２Ｃ）、１２８．４（ｓ）。

１２８．８（ｓ）、１３０．１　（ｄ）。

１３２．８（ｄ）、１３４．７（ｓ）。

１３５．５（ｓ）、１３８．１（ｓ）。

１４１．４（ｓ）、１４２．０（ｓ）。

１４３．７（ｓ）、１４５．９（ｓ）。

１４９．０（ｓ）、１５１．３（ｓ）。

１５４．０（ｓ）、１６９．４（ｓ）実施例６ ■コーンスターチ　　　　　　４４９ ■結晶セルロース　　　　　　４０９ ■カルボキシメチルセルロースカルシウム　　　５ｇ ■軽質無水ケイ酸　　　　　　０．５ｇ■ステアリン酸
マグネンウム　０．５ｇ■実施例１で得た化合物　　　
１０ｇ計　　　　　！　００ｇ上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、打錠機にて
圧縮成型して一部２００　Ｒ９の錠剤を得た。

この錠剤−錠には、実施例１で得た化合物２０！９が含
有されており、成人１日５〜！５錠を数回に分けて服用
する。

実施例７ ■結晶セルロース　　　　　８４．５９■ステアリン酸
マグネンウム　０゜５ｇ■カルボキシメチルセルロースカルシウム　　　　５９ ■実施例２で得た化合物　　　１０９計　　　　　１００ｇ上記の処方に従って■、■および■の一部を均一に混合
し、圧縮成型した後、粉砕し、■および■の残量を加え
て混合し、打錠機にて圧縮成型して一部２００贋９の錠
剤を得た。

この錠剤−錠には、実施例２で得た化合物２０友９が含
有されており、成人１日５〜１５錠を数回に分けて服用
する。

実施例８ ■結晶セルロース　　　　　４９．５９■１０％ヒドロ
キシプロピルセルロースエタノール溶液　３５９ ■カルボキシメチルセルロースカルシウム　　　５９ ■ステアリン酸マグネシウム　０５ｇ ■実施例３で得たし合物　　　ｔｏ９計　　　　　１００ｇ上記の処方に従って■、■および■を均一に混合し、常
法によりねっ和し、押し出し造粒機により造粒し、乾燥
・解砕した後、■および■を混合し、打錠機にて圧縮成
型して一部２００１９の錠剤を得た。

この錠剤−錠には、実施例３で得た化合物２０１１９が
含有されており、成人１日５〜１５錠を数回に分けて服
用する。

実施例９ ■コーンスターチ　　　　　３４５９ ■ステアリン酸マグネシウム　５０９ ■カルホキンメチルセルロースカルシウム　　　５９ ■軽質無水ケイ酸　　　　　　０．５９■実施例４で得
た化合物　　　１０ｇ計　　　　　１００ｇ上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、圧縮成型機
にて圧縮成型後、破砕機により粉砕し、篩別して顆粒剤
を得た。

この顆粒剤１ｇには、実施例４で得た化合物ｔｏｏｉ＋
ｔが含有されており、成人１日１〜３ｇを数回に分けて
服用する。

実施例！０ ■結晶セルロース　　　　　　５５９ ■ｌＯ％ヒドロキンプロピルセルロースエタノール溶液３５ｇ ■実施例５で得た化合物　　　＋０１？計　　　　　１
００９上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、ねつ和した
。押し出し造粒機に上り造粒後、乾燥し、篩別して顆粒
剤を得た。

この顆粒剤１９には、実施例５で得た化合物１００　Ｒ
９が含有されており、成人１日１〜３９を数回に分けて
服用する。

実施例１１ ■コーンスターチ　　　　　８９．５９■軽質無水ケイ
酸　　　　　　０．５ｇ■実施例１で得た化合物　　　
１０ｇ計“　　１００９上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、２００　ｙ
ｚ９を２号カプセルに充填した。

このカプセル剤ｌカプセルには、実施例１で得た化合物
２０Ｒ９が含有されており、成人１日５〜１５カプセル
を数回に分けて服用する。

実施例１２ ■注射用蒸留水　　　　　　　適量 ■ブドウ糖　　　　　　　　　２００■■実施例２で得
た化合物　　２００　Ｒ９全量　　　　　　　１００７注射用蒸留水に■および■を溶解させた後、５−のアン
プルに注入し、１２１’ｃで１５分間加圧滅菌を行って
注射剤を得た。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）下記式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ （式 I 中Ｒ＿１およびＲ＿２は水素原子またはメチル
基を、Ｒ＿３は水素原子、メチル基またはアセチル基を
示す。ただし、Ｒ＿１、Ｒ＿２およびＲ＿３がすべてメチル基
である場合、Ｒ＿１およびＲ＿２がメチル基であり、Ｒ
＿３が水素原子である場合を除く。）で表されるアルカロイド。
（２）下記式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ （式 I 中Ｒ＿１およびＲ＿２は水素原子またはメチル
基を、Ｒ＿３は水素原子、メチル基またはアセチル基を
示す。ただし、Ｒ＿１、Ｒ＿２およびＲ＿３がすべてメチル基
である場合、Ｒ＿１およびＲ＿２がメチル基であり、Ｒ
＿３が水素原子である場合を除く。）で表されるアルカロイドを有効成分とするアセチルコリ
ンエステラーゼ阻害剤。