JPH0385435A - バイオセンサの電極リフレッシュ方法およびその装置 - Google Patents
バイオセンサの電極リフレッシュ方法およびその装置Info
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Abstract
め要約のデータは記録されません。
Description
その装置に関し、さらに詳細にいえば、測定開始前に電
極に対して測定時と異なる極性のバイアスを与えるため
の電極リフレッシュ装置に関する。
選択的に検知することができるという特質に着目して、
種々のバイオセンサの研究が行なわれている。
生理活性物質を固定しておき、所定の順バイアスを与え
た状態で電極から取出される電気信号に基いて測定対象
物質の存在の有無、存在量等を検知するもの、例えば、
ptで作用電極、および対向電極を形成し、酵素膜に固
定された酵素と対象物質との反応により生成されるH2
O。をH20□透過膜を通して電極表面に導き、透過し
たH2O2の量に対応する電気信号を取出して測定対象
物質の存在の有無、存在量等を検知するものが提案され
ている。具体的には、対向電極を基準として作用電極に
0,6Vの順バイアス電圧を印加している。
イアスを与えた状態での対象物質測定動作を継続するこ
とにより、作用電極表面に酸化膜等の通電妨害膜が形成
され、作用電極の活性が低下するので、ある程度の回数
の測定動作を行なった後、測定動作を行なわない期間に
逆バイアスを与えることにより(上記の具体例に対応さ
せれば、対向電極を基準として、作用電極に−0,6V
程度の逆バイアス電圧を印加することにより)通電妨害
膜を除去し、作用電極の活性を復元させ、取出される電
気信号のレベルを再び元のレベルにまで復元させること
が提案されている(特開昭60−155959号公報参
照)。
ることにより、低下した測定感度を回復させ、再び高感
度の測定動作を行なうことができる。
電極と対向電極との間にリフレッシュ用の定電圧を印加
しているのであるから、作用電極の表面の酸化膜が還元
されることに伴なって水素、水素イオン等が発生するこ
ととなり、測定用の定電圧を印加した場合にこれら水素
、水素イオン等に起因する拡散電流が流れる。
て小さくなってしまい、測定用の定電圧印加直後におけ
る測定精度が大幅に低下してしまう。また、拡散電流が
十分に小さくなってから測定を行なうようにすれば十分
な測定精度を得ることができるのであるが、著しく長い
待ち時間(例えば、1〜2分)が必要になってしまう。
たバイオセンサにおいても同様の不都合がある。
電極リフレッシュ動作を行なってから測定動作を開始で
きるまでの所要時間を短縮することができるバイオセン
サの電極リフレッシュ方法およびその装置を提供するこ
とを目的としている。
シュ方法は、作用電極に所定の逆バイアスを所定時間供
給した後、測定時の順バイアスよりも高い順バイアスを
所定時間供給する方法である。
シュ装置は、作用電極にリフレッシュ用の電圧を供給す
るリフレッシュ用電圧供給手段と、測定用の電圧を供給
する測定用電圧供給手段と、測定用の電圧より高い電圧
を供給する高電圧供給手段と、測定動作遂行時に、上記
リフレッシュ用電圧供給手段によるリフレッシュ用の電
圧供給状態と上記高電圧供給手段による電圧供給状態と
上記測定用電圧供給手段による測定用の電圧供給状態と
をこの順に選択する選択手段とを具備している。
給することにより作用電極表面の通電妨害物質を還元し
て活性を高めることができ、次いで測定時の順バイアス
よりも高い順バイアスを供給することにより、通電妨害
物質の還元に伴なって発生した物質を高速に一方の電極
に向かって移動させることができる。したがって、測定
時の順バイアスを供給した状態において上記物質を速や
かに消費させることができ、所定の精度を維持した測定
を開始できるまでの所要時間を著しく短縮できる。
定動作を開始する前に、選択手段により、リフレッシュ
用電圧供給手段によるリフレッシュ用の電圧供給状態お
よび高電圧供給手段による電圧供給状態とをこの順に選
択するので、先ず、作用電極表面における通電妨害物質
の除去を行なう。
圧よりも高い電圧を供給して、通電妨害物質の除去に伴
なって発生する物質を高速に一方の電極に向かって移動
させる。その後は測定用の電圧を供給した場合に、上記
物質が速かに消費され、短時間で所定の精度での対象物
質の濃度測定を開始できる。
用電極の表面に形成された通電妨害物質を除去する動作
であり、通電妨害物質は酸化により生成されているので
あるから還元動作を行なわせることにより簡単に通電妨
害物質を除去できる。
的に水素、水素イオン等が発生し、測定用の電圧を供給
した場合にこれらの発生物質が拡散するので、拡散電流
が十分に小さくなった後でなけ才ば高精度の対象物質の
濃度測定を行なうことがCきない。具体的には、例えば
測定用の順バイアスを0.75Vに設定し、逆バイアス
を−IV。
が十分には小さくならない。したがって、測定を開始で
きるまでに長い待ち時間が必要であるという不都合があ
る。
前に測定用の電圧よりも高い電圧を供給するようにして
いるので、通電妨害物質の除去に伴なって発生した物質
を高速に一方の電極に向かって移動させることができる
。したがって、測定用の電圧を供給した時点において上
記物質は十分に一方の電極に接近しているのであるから
、測定用の電圧を供給した場合に上記物質が速かに消費
され、高精度の対象物質の濃度測定を開始できるまでの
時間を大幅に短縮できる。
(A3)は従来の場合に、同図(B1)〜(B3)はこ
の発明の場合にそれぞれ対応している。
質が除去された時点においては同じ量の生成物質が作用
電極と参照電極との間に存在している。そして、従来の
場合には、同図(A2)に示すように作用電極に向かう
比較的小さい移動力が生成物質に作用するだけであるか
ら、所定量の生成物質が消費されるまでの所要時間が長
くなる。
時点において生成物質は余り作用電極に接近しておらず
、これらの大半が作用電極に到達して消費されるまでに
長時間がかかることになる。
ように先ず、作用電極に向かう比較的大きい移動力が生
成物質に作用するので、上記時間と等しい時間が経過し
た時点において生成物質が作用電極にかなり接近するこ
とになる(同図(B3)参照)。その後は、従来の場合
と同じ移動力が作用するのであるが、生成物質が既に作
用電極に接近しているのであるから、所定量の生成物質
が消費されるまでの所要時間が短くなる。
を大巾に短縮することができる。尚、第4図は3電極式
のバイオセンサの場合を示しているが、参照電極を有し
ていない2電極式のバイオセンサであっても同様である
。
示す電気回路図であり、ptからなる作用電極(1)と
、Agからなる参照電極(2)および対向電極(3)を
有する、いわゆる3電極式の酵素電極に対するリフレッ
シュを行なわせるようにしである。
れオペアンプ(4)の反転入力端子(4a)および出力
端子(4c)に接続されており、上記オペアンプ(4)
の非反転入力端子(4b)がスイッチ素子(6a〉を介
して抵抗分圧回路(7)の高電圧タップ(7a)、低電
圧タップ(7b)およびアースと選択的に接続されてい
る。また、測定信号取出し用の電流−電圧変換用オペア
ンプ侶)の反転入力端子(6a)を上記作用電極(1)
と接続しており、出力端子(8C)と反転入力端子(6
a)との間に電流−電圧変換用抵抗(9)を接続してい
るとともに、反転入力端子(6a)と非反転入力端子(
6b)との間に、ダイオード(10a) (10b)を
互に逆極性で並列接続している。そして、非反転入力端
子(llb)に測定用の直流型[(12)を接続し、出
力端子(l Ic)と反転入力端子(Ila)とを直接
接続したバッファアンプ(I L)の出力端子(lie
)を上記電流−電圧変換用オペアンプG)の非反転入力
端子と接続している。尚、上記直流電源(12)は0.
75Vの順バイアスを与えるものであり、上記高電圧タ
ップ(7a)および低電圧タップ(7b)は、それぞれ
−IV、IVのバイアスを与えるものであり、(18)
はスイッチ素子(6a)の動作を制御する選択手段とし
ての制御部である。
極の一例を示す縦断面図であり、電極本体(13)の所
定位置に作用電極(1)を設けているとともに、作用電
極(1)の全外周を包囲するリング状の参照電極(2)
、および対向電極(3)をこの順に設けている。そして
、上記作用電極(1)、参照電極(2)、および対向電
極(3)を設けている側の面を凸面にしているとともに
、凸面に沿うように、過酸化水素選択透過膜(14)、
グルコースオキシダーゼ(以下、CODと略称する〉を
固定した固定化COD膜(15)、およびポリビニルア
セテート等からなる拡散制限膜(Ic)をこの順に設け
ている。尚、(17)は上記作用電極(1)、参照電極
(2)、および対向電極(3)とそれぞれ接続された信
号取出し端子である。
である。
チ素子(6a〉を動作させることによりオペアンプ(4
)の非反転入力端子(4b)と抵抗分圧回路(7)の高
電圧タップ(7a)とを接続し、作用電極(1)と参照
電極(2との間にリフレッシュ用の定電圧(例えば、−
1v)を印加する(第3図(A)(B)中領域R1参照
)。
た通電妨害物質を還元すべく電流が流れるので、比較的
短い所定時間だけリフレッシュ用の定電圧印加状態を継
続することにより、通電妨害物質を完全に除去し、作用
電極(1)の活性を復元させることができる。そして、
この状態においては作用電極(1)と参照電極(2)と
の間に水素、水素イオン等が存花することになる。
り、オペアンプ(4)の非反転入力端子〈4b)と抵抗
分圧回路(7)の低電圧タップ(7b)とを接続し、作
用電極(1)と参照電極(2)との間に測定用の電圧よ
りも高い電圧(例えば、IV)を印加する(第3図(A
)(B)中領域R2参照)。
を作用電極(1)に向かって移動させるべく大きな移動
力が作用するので、比較的短い時間だけ高い電圧を印加
するだけで水素、水素イオン等の殆どを作用電極(1)
に接近させることができる。
とによりオペアンプ(4)の非反転入力端子(4b)と
アースとを接続し、作用電極(1)に対して、参照電極
(2)を基準として所定の電圧(例えば、0.75V)
を順バイアスとして印加すれば、短時間で水素、水素イ
オン等を消費し、濃度測定可能な状態とすることができ
る。具体的には、従来1〜2分程度の時間がかかってい
たのに対してこの実施例においては30〜45秒程度に
短縮できた。
に滴下すればよく、以下のようにしてグルコース濃度に
対応する信号を出力することができる。
よりグルコースの透過がある程度制限された状態で固定
化COD膜(15〉に導かれ、OD グルコース+02十H20 グルコン酸+H202 で示される酵素反応が行なわれる結果、存在するグルコ
ース濃度に対応する量のH202が生成される。そして
、生成されたH20□が、過酸化水素選択透過膜(14
)を通して十分な活性を有する状態に復元させられた作
用電極(1)の表面に導かれ、しかも上記順バイアス電
圧が印加されているので、作用電極(1)の表面におい
て酸化反応が行なわれると同時に作用電極(1)を通し
てH2O2の量に対応する電流が流入する。この電流は
、電流−電圧変換用オペアンプ(8)の反転入力端子(
6a)に供給されるのであるから、出力端子(8C)か
ら、上記電流に比例した電圧信号に順バイアスによるオ
フセット電圧がffi畳された電圧信号を取出すことが
できる。
みを抽出し、−次微分を施して、−次微分値のピーク値
を検出し、必要な処理を行なうことにより高精度のグル
コース濃度検出信号を得ることができる。
例と異なる点は、オペアンプ(4)の非反転入力端子(
4b)をコンデンサ(5)を介してアースと接続した点
、および非反転入力端子(4b)を抵抗(5a)および
スイッチ素子(6a)を介して抵抗分圧回路(7)の高
電圧タップ(7a)、低電圧タップ(7b)と接続した
点のみである。
びコンデンサ(5)に基づいて定まる時定数でバイアス
が増加しく第6図(A)参照)、この結果、第6図(B
)に示すように、通電電流のアンダーシュート、オーバ
ーシュートを大幅に抑制できる。
た、過大な電流が流れることを防止できる関係上、電極
表面の薄膜が受けるダメージを大幅に低減し、従来は1
力月程度であった薄膜の寿命を1年程度にまで延ばすこ
とができた。
、例えばリフレッシュ用の電圧、高い電圧の値を代える
こと、および電圧値に対応して印加時間を変化させるこ
とが可能であるほか、グルコース以外の物質の濃度を測
定する装置に適用することが可能であり、さらに2電極
式のバイオセンサに適用することが可能であるほか、こ
の発明の要旨を変更しない範囲内において種々の設計変
更を施すことが可能である。
一定の逆バイアスを供給することにより作用電極のリフ
レッシュを行なわせ、その後、作用電極に測定用の順バ
イアスを供給する前に測定用の順バイアスよりも高い順
バイアスを供給するのであるから、リフレッシュに伴な
って発生した物質を速かに消費させることができ、所定
の精度での測定を行ない得るまでの所要時間を大幅に短
縮できるという特有の効果を奏する。
所要時間を大幅に短縮できるという特有の効果を奏する
。
示す電気回路図、 第2図は電極の一例を示す概略図、 第3図は電極リフレッシュ時におけるバイアスの変化お
よび電流の変化を示す図 第4図はリフレッシュに伴なって発生する物質の挙動を
説明する図、 第5図は電極リフレッシュ装置の他の実施例を示す電気
回路図、 第6図は電極リフレッシュ時におけるバイアスの変化お
よび電流の変化を示す図。 (1)・・・作用電極、(2)・・・参照電極、(3)
・・・対向電極、(4)・・・オペアンプ、(6a〉・
・・スイッチ素子、(7a〉・・・高電圧タップ、(7
b)・・・低電圧タップ、(12)・・・直流電源、(
18〉・・・制御部
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、生理活性物質が固定された作用電極(1)に所定の
順バイアスを供給した状態で、 作用電極(1)と対向電極(3)との間に生成される電
気的信号に基いて対象物質の濃度測定を行なうバイオセ
ンサにおいて、作用電極(1)に所定の逆バイアスを所
定時間供給した後、測定時の順バイアスよりも高い順バ
イアスを所定時間供給すること を特徴とするバイオセンサの電極リフレッシュ方法。 2、生理活性物質が固定された作用電極(1)に所定の
順バイアスを供給した状態で、 作用電極(2)と対向電極(3)との間に生成される電
気的信号に基いて対象物質の濃度測定を行なうバイオセ
ンサにおいて、作用電極(1)にリフレッシュ用の電圧
を供給するリフレッシュ用電圧供給手段(6a)(7a
)と、測定用の電圧を供給する測定用電圧供給手段(1
2)と、測定用の電圧よりも高い電圧を供給する高電圧
供給手段(6b)(7b)と、測定動作遂行時に、上記
リフレッシュ用電圧供給手段(6a)(7a)によるリ
フレッシュ用の電圧供給状態と上記高電圧供給手段(6
b)(7b)による電圧供給状態と上記測定用電圧供給
手段(12)による測定用の電圧供給状態とをこの順に
選択する選択手段(18)とを具備することを特徴とす
るバイオセンサの電極リフレッシュ装置。
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JP (1) | JPH07119727B2 (ja) |
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