JPH0380072A - ウリ科作物の病害防除微生物および病害防除法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、ウリ科作物の病害、特に土壌伝染病の防除に
有効な新規微生物、該微生物および／またはその代謝産
物を用いた病害防除法に関する。

〔従来の技術〕

ウリ科作物の主要な病害として、キュウリつる割病、キ
ュウリベと病、キュウリモザイク病、メロンつる割病、
メロンペと病、スイカつる割病、スイカ炭そ病、カポチ
ャつる枯病、カポチャうどんこ病等があげられるが、こ
れらの中でつる割病、つる枯病は、土壌伝染病で難防除
病害とされている。

ウリ科作物の病害防除法は、べと病等の空気伝染病に対
しては茎葉部への殺菌剤の散布が行われているが、つる
割病等の土壌伝染病に対しては有効な殺菌剤がなく、く
ん華剤や草気による土壌消毒の他、抵抗性品種あるいは
台本の利用、輪作等が実施されている。しかしながら、
化学合成農薬による防除は、薬剤耐性菌の出現や薬害、
公害発生等の恐れがあり、特にクロルピクリンや臭化メ
チル等のくん蒸剤は、土壌中に生息する微生物を無差別
に殺し、作物生産に対して有益に働く微生物をも殺生し
てしまうという問題があり、さらに、作物および人畜に
対する危険性が極めて大きい。

一方、抵抗性品種あるいは台本を利用した防除は、病原
菌の寄生性が分化し、抵抗性植物を侵し得る病原菌レー
スが出現するという問題があり、その利用については限
界がある。また、最近の野菜栽培では、施設の普及や産
地の指定化にともなって、栽培される作物が単一となる
傾向に有り、輪作の実施も困難な状況で、連作障害の問
題も深刻化している。

〔発明が解決しようとする課題］ 本発明は、従来から行われているウリ科作物の病害防除
における前記不利な点を解決し、合成農薬に代わる新し
い防除資材を提供することを課題とする。すなわち、新
規微生物によりウリ科作物の病害、特に、難防除病害で
ある土壌伝染病を防除する手段を提供することを課題と
する。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者らは、“抵抗性誘導”という微生物植物間相互
の現象に注目し、微生物により作物に病害抵抗性を付与
し、防除困難な土壌伝染病を防除することを目的として
、自然界から多数の微生物を純枠分離し、キュウリを主
たる対象として研究を進めた結果、キュウリのみならず
広くウリ科作物の病害防除に有効で、しかも人畜ならび
に作物に安全な微生物を見い出し、本発明を充放するに
いたった。

すなわち、本発明は、ウリ科作物の病害防除に有効な新
規微生物フザリウム　オキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕ
ｍ　ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）　ＭＴ−３０１３（微工研菌
寄第１０７８７　）　、該微生物および／またはその代
謝産物を植物根または土壌に処理することを特徴とする
ウリ科作物病害の防除方法である。

本発明に係わる微生物は、自然畑土壌で生育させたキュ
ウリの根圏から分離して得られたフザリウム属オキシス
ボルム種（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）の
新規菌株である。

フザリウム属オキシスボルム種（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｏ
ｘｙｓｐｏｒｕｍ）は、国立予防衛生研究所の病原体等
安全管理規程によれば、危険度が最も低い“１；多量に
取り扱っても、実験室感染の可能性が殆どないパと定め
られ、人畜に対する安全性が保証されており、本菌株も
同様である。

本発明に係わる微生物の培養は、ツアペック液体培地、
ポテト・デキストロース液体培地等の糸状菌用液体培地
を用いた振とう培養あるいは静置培養で容易に行なうこ
とができ、さらに寒天入りの平板、斜面培地等の固体培
地による培養も有効である。また、ジャーファメンタを
用いた培養や土壌ふすま培養により大量に培養すること
も可能である。

本発明に係わる処理方法は、作物の根部または栽培土壌
に対して行われ、その処理形態は、胞子のみならず菌糸
を含む菌糸体、さらには、本機生物の培養’ａ　＞＆　
、胞子発芽液等の代謝産物も有効である。

植物根部への処理は、胞子あるいは菌糸体懸濁液、培養
濾液、胞子発芽液に根部を浸漬する方法で行ない、土壌
への処理は、潅注あるいは作条施用の方法を用いる。

処理時期は、育苗中及び定植時の両方が望ましく、さら
に、本圃における栽培途中の追加施用は防除効果を持続
させることに有効である。

なお、浸種処理の場合は恕濁液１准当り胞子で１０４制
以」二、望ましくは１０６個以上で、土壌処理の場合は
乾土１ｇ当り１０３個以上、望ましくは１０５個以上で
十分な防除効果が認められる。

また、本発明に係わる防除法と抵抗性品種の利用等の他
の防除法を併用することにより、連作圃場等病原菌密度
が高まった病害激発土壌においても有効となる。

〔作用］ 本発明に係わる微生物および病害防除法は、キュウリの
場合はつる割病、苗立枯病、うどんこ病等の防除に極め
て有効で、メロンの場合はつる割病、つる枯病、うどん
こ病の防除に有効である。

また、スイカ、カポチャ等の他のウリ科作物においても
同様で、類似病害の防除に有効である。

〔実施例〕

以下、例をあげて本発明に係わる新規微生物および該微
生物および／またはその代謝産物を用いた病害防除法に
ついて詳細に説明する。

本発明に係わる微生物は、自然畑土壌で生育させたキュ
ウリの根圏から分離して得られた新規菌株であり、次の
ように特定される。

■フザリウム属菌で、ツアペック寒天培地等の糸状菌用
培地において短担子梗上で小型分生胞子を擬頭状に形成
することからオキシスボルム種と同定される。

■キュウリをはしめとするウリ科作物およびその他の有
用作物に病原性を示さない。

実施例１ 新規微生物の分離方法 圃場の自然土壌で生育しているキュウリの根部を採取し
た。根部は長さが５から１０ｍｍの切片を作製し、７０
％のエタノール水溶液に２から３秒間浸漬した後、２％
次亜塩素酸ナトリウム水溶液に１０分間浸漬することに
より、根切片を表面殺菌した。

滅菌水で洗浄後、寒天を１．５％含む無栄養平板培地上
に置床し、２５°Ｃの恒温器中で７２から１２０時間培
養し、植物組織から出現した微生物を実体顕微鏡下で単
画糸分離を行うことにより純粋分離した。

得られた微生物は、キュウリつる割病に対する防除効果
を検定し、さらに、他の作物に対する病原性を検定し、
キュウリつる割病に対し防除効果を示し、他の作物に対
し病原性を示さない新規微生物ＭＴ−３０１３を分離し
た。

実施例２ 新規微生物の同定 本発明に係わる微生物の同定は、微生物をＰＳ（ポテト
・シュークロース）寒天培地上で培養することにより行
った。その結果、ＭＴ−３０１３は、２５°Ｃ１４日間
で、コロニーの直径が６から７ｃｍに達する。大型分生
胞子、小型分生胞子および厚膜胞子を多数形成する。大
型分生胞子は三日月型で、小型分生胞子は円筒形から長
い楕円形で、厚膜胞子は球形である。いずれの胞子も連
鎖状に形成されることはない。暗所に於ける培養で、紫
色の色素産生が認められる。これらの特徴から、ＭＴ−
３０１３はフザリウム属オキシスポルム種（Ｆｕｓａｒ
ｉｕｍ　。

ｘｙｓｐｏｒｕｍ）と判定された。

実施例３ 新規微生物の生理学的性質 本発明に係わる微生物は、好気性であ一す、生育可能な
ｐＨは３から１０で、温度は５から３５°Ｃであるが、
最適ｐＨは６から８、最適温度は２５から３０°Ｃであ
る。

実施例４ 新規微生物の大量培養法 本発明に係わる微生物は、ＰＳ（ポテト・シュークロー
ス）やＭＳ（マツシュポテト・シュークロース）培地等
の安価な培養基により容易に培養を行うことが可能で、
ジャーファメンタで７２時間液体培養することにより、
培養液１准当り１億もの胞子が得られた。この様に、本
発明の微生物は、効率的に大量培養が行えることから、
工業的に使用可能である。

試験例１ バーミキュライトで育苗した木葉が２から３枚期のキュ
ウリ苗（品種；霜知不地這）を実験区当り１０個体供試
した。本発明の微生物を、ポテト・デキストロース液体
培地で２７°Ｃ１６日間振とう培養することにより得ら
れた胞子を、滅菌蒸留水で１０’（ＩｌｉＩ／ｍｆｆ１
に希釈調整した懸濁液に、キュウリ苗の根を３０分間浸
漬した後、バーよキュライトに各々仮植した。なお、対
照は、キュウリ苗を滅菌蒸留水に同様の処理をした後バ
ーごキュライトに仮植した。３６時間後、ポテト・デキ
ストロース液体培地で２７°Ｃ１６日間振とう培養する
ことにより得られた胞子を、滅菌蒸留水で希釈調整して
得られたつる割病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｏｘｙｓｐｏ
ｒｕｍ　ｆ、ｓｐ、　ｃｕｃｕｍｅｒｉｎｕｍ）の胞子
懸濁液１０７個／　ｍＨに再び３０分間浸漬し、育苗床
±１０１００Ｏに各々定植して栽培した。

３０日後に発病状態を観察し、発病の度合を、木葉の各
葉位について階級値として表した。

０；無発病 １；葉の一部分発病（黄化、萎凋） ２；葉の１／２程度発病 ３；葉の大部分発病または落葉 さらに、個体ごとの発病指数を次式により計算し、平均
発病指数を求めた。さらに、下記の式により本菌株を種
根処理することによる防除率を対照区の平均発病指数に
対して算出した。

Σ （階級値×該当階級値葉数） １００ 第１表 種根処理によるキュウリつる割病の防除効果 発病指数　防除率Ｃ％） 処理区　　　　　１０　　　　　　９０対照区　　　　
１００ 結果は第１表に示すとおり、本発明の微生物の胞子懸濁
液をキュウリの祖に処理することにより、つる割病の発
病指数が対照区と比べて著しく減少し、極めて高い防除
率が得られた。

試験例２ 試験例１と同様の方法で得られた本発明の微生物の胞子
が１０５個／ｇ生存している育苗床±１００ｍ１にキュ
ウリ種子（品種；霜知地這）を各々播種、育苗し、実験
区当り１０個体を供試した。なお、対照は、無菌の育苗
床上で同様に育苗をしたものを用いた。木葉が第３から
４枚期に育苗床±１０１００Ｏに各々定植した後、試験
例１と同様の方法で得られたつる割病菌（Ｆｕｓａｒｉ
ｕｍ　ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ　ｆ、ｓｐ、　ｃｕｃｕｍｅ
ｒｉｎｕｍ　）の胞子懸濁液１０准を各株基に潅注接種
して栽培した。５０日後に発病状態を観察し、試験例１
と同様に平均発病指数を求め、さらに、処理区の対照区
に対する防除率を算出した。

第２表　育苗床上混和処理によるキュウリつる割病の防
除効果 発病指数　防除率（χ） 処理区　　１０８７ 結果は第２表に示すとおり、本発明の微生物を含む育苗
床上で育苗したキュウリ苗は、つる割病の発病指数がい
ずれも対照区と比べて著しく減少し、高い防除効果が認
、められた。

試験例３ １ バーミキュライトで育苗した本葉２から３枚期のキュウ
リ苗（品種：霜知不地這号）を実験区当り１０個体供試
した。キュウリ苗は、ツアペック液体培地で２７℃、６
日間振とう培養した後無菌濾過することにより得られた
本発明の微生物の培養濾液、あるいは本発明の微生物の
胞子を１０７個／　ｍｆｌ含むツアペック液体培地を２
７°Ｃ，１２時間振とう培養して胞子を発芽させた後無
菌濾過することにより得られた胞子発芽液に３０分間浸
漬した後、バーミキュライトに各々仮植した。なお、対
照は、キュウリ苗を滅菌薫留水に同様の処理をした後バ
ーミキュライトに仮植した。３６時間後、試験例Ｉと同
様の方法で得られたつる割病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｏ
ｘｙｓｐｏｒｕｍ　ｆ、ｓｐ、　ｃｕｃｕｍｅｒｉｎｕ
ｍ　）の胞子懸濁液に再び３０分間浸漬し、育苗床土１
０１００Ｏに各々定植して栽培した。２０日後に発病状
態を観察し、試験例１と同様に平均発病指数を求め、さ
らに、処理区の対照区に対する防除率を算出した。

２ 第３表 培養濾液、胞子発芽液のキュウリつる割病に対する防除
効果 培 養 濾 液 胞子発芽液 処理区　　３５　　　６５　　　２０　　　８０結果は
第３表に示すとおり、本発明の微生物の培養濾液、胞子
発芽液をキュウリ根に処理することにより、つる割病の
発病指数が対照区と比べて減少し、高い防除率が得られ
た。

試験例４ バーミキュライトで育苗した木葉が３から４枚期のメロ
ン苗（品種；アールス東海Ｒ−２５０）を実験区当り１
０個体供試した。メロン苗を、試験例１と同様の方法で
得られた本発明の微生物の胞子懸濁液に３０分間浸漬し
た後、バーミキュライトに各々仮植した。なお、対照は
、メロン苗を滅菌華留水に同様の処理をした後、バーミ
キュライトに仮植した。３６時間後、試験例１と同様の
方法で得られたつる割病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｏｘｙ
ｓｐｏｒｕｍ　ｆ、ｓｐ。

ｍｅｌｏｎｉｓ　）の胞子懸濁液に再び３０分間浸漬し
、育苗床上１０１００Ｏに各々定植して栽培した。３０
日後に発病状態を観察し、試験例１と同様に平均発病指
数を求め、さらに、処理区の対照区に対する防除率を算
出した。

第４表　種根処理によるメロンつる割病の防除効果 発病指数　防除率（χ） 処理区　　　　　　１５　　　　８５ 対照区　　　　　１００ 結果は第４表に示すとおり、本発明の微生物の胞子懸濁
液をメロンの根に処理することにより、つる割病の発病
指数が対照区と比べて著しく減少し、極めて高い防除率
が得られた。

試験例５ 試験例２と同様の方法で得られた本発明の微生物を含む
育苗床上１００ｍＲにメロン種子（品種；アールス東海
Ｒ−２５０）を各々播種、育苗し、実験区当り１０個体
を供試した。なお、対照は、無菌の育苗床土で同様に育
苗したものを用いた。木葉が第４から５枚期に育苗床±
１０００ｍｆｆに各々定植した後、試験例１と同様の方
法で得られたつる割病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｏｘｙｓ
ｐｏｒｕｍ　ｆ、ｓｐ、　ｍｅｌｏｎｉｓ　）の胞子懸
濁液１０雌を各株基に潅注接種して栽培した。

５０日後に発病状態を観察し、゛試験例１と同様に平均
発病指数を求め、さらに、処理区の対照区に対する防除
率を算出した。

第５表　育苗床上混和処理によるメロンつる割病の防除
効果 発病指数　防除率（χ） 処理区　　　　　１５　　　　８１ 対照区　　　　　８０ 結果は第５表に示すとおり、本発明の微生物を含む育苗
床土で育苗したメロン苗は、つる割病の発病指数が対照
区と比べて著しく減少し、高い防除効果が認められた。

試験例６ １　コ 試験例２と同様の方法で得られた本発明の微生物を含む
育苗床±５００　ｍｆｌにキュウリ（品種；霜知不地這
）を各々播種、育苗し、実験区当り５個体を供試した。

なお、対照は、無菌の育苗床上で同様に育苗をしたもの
を用いた。木葉が第７から８枚期につる割病激発圃場へ
定植した。この際に、試験例２と同様の方法で得られた
本発明の微生物を含む育苗床土を栽培土壌の１７１０量
植穴に添加した。また、つる割病激発土壌をヘノミル剤
〔ベンレート永和剤（デュポン社製商品名）　）　１０
００倍液を土壌潅注し、殺菌操作を行った土壌も供試し
た。６０日後に発病状態を観察し、試験例１と同様に平
均発病指数を求め、さらに、処理区の対照区に対する防
除率を算出した。

本発明の微生物　　　　ベノミル 処理区 ３ ０ ５ ７ 対照区 ５ ５ Ｇ 結果は第６表に示すように、本発明の微生物を育苗時お
よび定植時に処理することにより、ヘノミル剤と同等以
上の防除効果が得られた。

試験例７ ナス（品種；千両２号）、トマト（品種；ボンデローサ
）、イチゴ（品種；案文早生）、ダイコン（品種；若駒
）の幼苗を実験区当り５個体供試した。試験例１と同様
の方法で得られた本発明の微生物の胞子懸濁液に３０分
間浸漬し、育苗床±１０１００Ｏに各々定植して栽培し
た。なお、対照として、実施例１と同様の方法で得られ
た各作物に病原性を有するナス手帖病菌（Ｆｕｓａｒｉ
ｕｍ　ｏｘｙｓｐｏｒｕｍｆ、ｓｐ、　ｍｅｌｏｎｇｅ
ｎａｅ）、トマト萎凋病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓ
ｐｏｒｕｍ　ｆ、ｓｐ、　１ｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ　ｒ
ａｃｅ　Ｊ−１）　、イチゴ萎黄病菌（Ｆｕｓａｒｉｕ
ｍ　ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ　ｆ、ｓｐ、　ｆｒａｇａｒｉ
ａｅ）　、ダイコン萎黄病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ　ｏｘ
ｙｓｐｏｒｕｍｆ、ｓｐ、　ｒａｐｈａｎｉ）の胞子懸
濁液を同様に処理をして栽培した。３０日後に発病状態
を観察し、生育阻害や葉の黄化、萎凋等の外部病徴で判
断した。

第７表 本発明微生物の主要作物に対する病原性ナス　トマト　
イチゴ　ダイコン ※＋＋＋；枯死または枯死寸前 ＋＋；病徴が激しく認められる ＋；病徴かやや認められる ー；病徴が全く認められない 結果は第７表に示すとおり、本機生物はウリ科作物をは
しめとして、ナス、トマト、イチゴ、ダイコンに対して
も何ら病原性を示さなかった。

〔発明の効果〕

本発明に係わる新規微生物フザリウム・オキシスポルム
（Ｆｕｓａｒｉｕ＋ｎ　ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）　ＭＴ−
３０１３（＠工研菌寄第１０７１１１７号）は、キュウ
リをはじめとするウリ科作物の病害、特に難防除病害で
ある土壌伝染病の防除に有効で、しかも、自然界ムこ生
息する微生物から選抜されたものであることから、化学
合成農薬で懸念される環境汚染の心配が無く、安９ 全に使用できる。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）ウリ科作物の病害防除に有効な新規微生物フザリ
   ウム・オキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏ
   ｒｕｍ）ＭＴ−３０１３（微工研菌寄第１０７８７号）
   。
2. （２）新規微生物フザリウム・オキシスポルム（Ｆｕｓ
   ａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）ＭＴ−３０１３（微工
   研菌寄第１０７８７）および／またはその代謝産物を植
   物根または土壌に処理することを特徴とするウリ科作物
   の病害防除方法。