JPH0363287A

JPH0363287A - ホスファチジルイノシトールの濃縮方法

Info

Publication number: JPH0363287A
Application number: JP19686489A
Authority: JP
Inventors: Hidekazu Takahashi; 秀和高橋; Koji Yamada; 浩司山田; Toshiyuki Kaneko; 俊之金子
Original assignee: Showa Sangyo Co Ltd
Current assignee: Showa Sangyo Co Ltd
Priority date: 1989-07-31
Filing date: 1989-07-31
Publication date: 1991-03-19

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、中性グリセロリン脂質の一つであるホスファ
チジルイノシトールの濃縮方法に関する。

（従来の技術とその問題点）ホスファチジルイノシトールは、ホスファチジルコリン
やホスファチジルエタノールアミン等の他のリン脂質と
ともに動物、植物等生物体内に広く分布しており、とく
に生体膜の重要な構成成分をなしている。人体における
ホスファチジルイノシトールの機能としては、末梢血管
保護作用、コレステロール代謝作用等が解明されており
、最近では抗ガン作用の可能性も示唆され、生体に対す
る極めて重要な物質として注目をあびている。

ホスファチジルイノシトールを工業的に得るためには、
例えば大豆や肝臓を起源とするレシチンを原料とし、こ
れから単離、精製することがなされている。

しかし、一般の植物由来の原料では、総リン脂質中の約
３０％がホスファチジルコリン、約２５％がホスファチ
ジルエタノールアミンで占められており、ホスファチジ
ルイノシトールの台皿はこれらに比して低い。原料から
ホスファチジルイノシトールを分Ｓ、＊製するためには
、シリカゲルやアルミナによる肢体クロマトグラフィー
の手法を用いるのが一般的であるが、大量に共存する上
記の如き他成分を分離するためには、原料を大量の溶媒
で稀釈してカラムに負荷し、つぎに溶媒の組成を順次変
更するなどしながらカラムから溶出させることが必要で
ある。溶媒としてはクロロホルム／メタノールの混合溶
媒系を使用することが多い（例えば、新実験化学講座第
２０巻、生物化学［Ｉ］第４３６〜４６５頁、昭和５３
年６月２０日、丸善株式会社発行）が、該許媒系に対す
るグリセロリン脂質の溶解度が低い乙とも相まって、大
量の溶媒を使用することが必要になり、このためホスフ
ァチジルイノシトールの単離工程は多大の労力と時間を
要するものであった。

とくに、総リン脂質中量も多量に存在するホスファチジ
ルコリンを完全に除去することは困難であった。

また、最近ではイオン交換カラムを使用する方法も提唱
されており　（特開昭６３−３３３８９号）、これを用
いるときは労力や時間が一部節約できるものの、カラム
自体が非常に高価である等の欠点があった。

さらに、選択的にミセル形成が起るような適当な溶媒系
に溶解させて、加圧下に半透膜に接触させ、透過液と不
透過液とに分け、富化両分を回収する方法も提唱されて
いた（特開昭５９−５００４９７号）が、この方法も、
初期投資が過大となるほか、半透膜に耐圧限度があって
粘度の高い高濃度液を処理できないため、原材料を大量
の溶媒で希釈する必要がある、ホスファチジルイノシト
ールの濃縮に際してホスファチジルコリンの除去が不十
分である等種々の欠点がある。

（発明が解決しようとする問題点）本願発明者らは、従来技術の欠点を解決し、ホスファチ
ジルイノシトールを効率的にａｍする方法の研究を鋭意
行った結果、塩化炭化水素に原料を高濃度に溶解し、こ
れをシリカゲルに接触させる方法により、目的物質たる
ホスファチジルイノシトールを高濃度にｉ！Ｋｍできろ
ことを見出し、本発明を完成するに至った。

（問題を解決するための手段）本発明は、ホスファチジルイノシト−ルを含有する材料
を塩化炭化水素の存在下にシリカゲルに接触させること
を特徴とするホスファチジルイルトールの濃縮方法の発
明である。

以下、本発明の詳細な説明する。

本発明に用いる原料としては、大豆あるいは肝臓起源の
市販レシチンが好適に使用されるほか、大豆、とうもろ
こし、菜種、ゴマ等を原材料とする植物油脂の精製過程
、とくに脱ガム工程で得られろ所謂脱ガム油さいを用い
ることができる。

塩化炭化水素としては、クロロホルム、ジクロロメタン
、塩化メチレン等が好適である。

シリカゲルは、通常のカラムクロマトグラフィー用に用
いられる粒度１００〜２００メツシユ程度のものやビー
ズ状シリカゲル等を広く使用することができろ。

本発明では、例えばホスファチジルイノシトールを含有
する原材料にクロロホルム等塩化炭化水素を加え、固形
物濃度が５〜７０　Ｗ／Ｖ％、より好ましくは１５〜５
０Ｗ／Ｖ％の溶液を調整し、これをシリカゲルに接触さ
せる。このシリカゲル処理は、シリカゲルを充填したカ
ラムを使用する方式（以下、「カラム方式」という）で
もよいし、溶液中にシリカゲルを投入して攪拌混合する
バッチ方式（以下、単に「バッチ方式」という）を採用
してもよい。連続操作が可能である点、分離精度がよい
点でカラム方式の方がのぞましい。バッチ方式の場合に
は、ホスファチジルイノシトールを含有する材料と塩化
炭化水素の比率（ｗｔ：ｖｏｌ）は、１）００〜１：　
１が好適である。

塩化炭化水素中における固形物濃度が上記範囲を下回る
ときは、使用する溶媒量が多量となり、経済性が損なわ
れろ。逆に、上記範囲を上回るときは処理溶液の粘度が
高すぎて操作が困難となる。

つぎに、使用する原料固形物とシリカゲルとの量比（ｗ
ｔ：ｗｔ）は、最大１：　３程度が適当であるが、この
量比は本発明の範囲を限定するものではない。

シリカゲルは予め塩化炭化水素で膨潤（リンス）させて
から使用することができる。

本発明において、ホスファチジルイノシトールがａ縮さ
れた両分は、カラム方式では通過液として、バッチ方式
では液部として得られろ。

バッチ方式の場合には、フィルターを通過した′ａ液を
シリカゲルに再び注入する操作を反復することによって
ｍｍ度を高めろことができる。

（実施例）以下、本願発明の実施例について述べるが、もとより本
願発明がこれら実施例に限定されるものではない。

実施例１市販のペースト状大豆レシチン５０ｇをクロロホルム２
００ｍ＃に溶解し、予めクロロホルムを用いて充填した
シリカゲルカラム（２００ｇ）を通過させた。通過液を
回収し、溶媒を留去して２５ｇの油状物質（Ｆｌ）を得
た。本物質をヘキサン２５ｍｊに溶解し、これにアセト
ン１００■ｌを加え、沈澱物を遠心分離して集めた。沈
澱物を再度アセトン５０窮−に分散し、遠心分離を行い
、乾燥して６．１ｇの粉末状物質（Ｆ２）を得た。

総リン脂質に対するホスファチジルイノシトールの比率
は、原料レシチンにおいては１４．７％であったが、Ｆ
ｌにおいては４１．５％、Ｆ２においては４５．３％に
１ｌｉＩｌｌされた。

２次元展開薄層クロマトグラフィーの結果、Ｆｌわよび
Ｆ２ではホスファチジルコリンは痕跡すら認められなか
った。

実施例２実施例１における市販ペースト状レシチンにかえて、大
豆油脂の脱ガム工程で得られる油さいを用い、実施例１
と同様に処理し、実施例１のＦｌおよびＦ２に相当する
両分としてＦ３およびＦ４を得た。

総リン脂質に対するホスファチジルイノシトールの比率
は、油さいでは１５．８％であったが、Ｆ３では４３．
５％、Ｆ４では４６．７％へと濃縮された。

実施例３粉末レシチン５ｇをジクロロメタン１００ｍｊに分散し
、これを予めジクロロメタン３０鳳４でリンスしたシリ
カゲル２０ｇに加え、ときどき攪拌しつつ３０分間静置
した。ガラスフィルターを用いてシリカゲルを除去して
濾液（Ａ）を得た。ガラスフィルター上に残っｔニジリ
カゲルにとの濾液を注ぎかえす操作を９回くりかえし、
最終源Ｍ　（Ｂ）を得た。

濾液（Ａ）および（Ｂ）を各々脱溶剤したうえ、薄層ク
ロマトグラフィーによりその組成を分析した。

その結果は、総リン脂質中におけろホスファチジルイノ
シトールの濃度は、原料粉末レシチンでは１８．５％で
あったが、濾液（Ａ）では３８゜２％、４ｗ１（Ｂ）で
は４０．６％へと濃縮されｔ二。

他方、ホスファチジルコリンは濾液（Ａ）では９０％除
去され、濾液（Ｂ）では９９％除去されていた。

（発明の効果）本発明の方法により、市販レシチンや植物油精製過程で
生ずる油さいから、極めて効率的にホスファチジルイノ
シトールを高濃度に濃縮することができる。

上記の原料のリン脂質にはホスファチジルコリンが大量
に含まれており、その完全な除去は極めて困難であった
が、本発明の方法によればその除去は容易となり、ホス
ファチジルコリンを実質的に含有しない両分を取得する
ことができる。このため、本発明の濃縮方法によって得
た両分を中間原料として使用すれば、公知の手段、例え
ばアルミナカラム処理、高速液体クロマトグラフィー等
でカラムへの負荷を著しく軽減しつつ、はぼ純粋なホス
ファチジルイノシトールを容易に取得することができる
。

また、本発明の方法によれば、使用する溶媒の量も少な
くてすみ、経済的である。

Claims

【特許請求の範囲】（１）ホスファチジルイノシトールを含有する材料を塩
化炭化水素の存在下にシリカゲルに接触させることを特
徴とするホスファチジルイノシトールの濃縮方法。（２）シリカゲルとの接触をカラムによる連続処理で行
う請求項（１）の濃縮方法。（３）ホスファチジルイノシトールを含有する材料を塩
化炭化水素に５〜７０Ｗ／Ｖ％となるよう分散し、カラ
ム処理を行う請求項（１）または（２）の濃縮方法。（４）シリカゲルとの接触をバッチ処理により行う請求
項（１）の濃縮方法。（５）ホスファチジルイノシトールを含有する材料と塩
化炭化水素の比率（ｗｔ：ｖｏｌ）を１：１００〜１：
１としてバッチ処理を行う請求項（１）または（４）の
濃縮方法。（６）バッチ処理を反復して行う請求項（１
）、（４）または（５）の濃縮方法。（７）シリカゲルを予め塩化炭化水素で膨潤させる請求
項（１）ないし（６）の濃縮方法。