JPH0358990A

JPH0358990A - インドロカルバゾールおよびその使用

Info

Publication number: JPH0358990A
Application number: JP2195085A
Authority: JP
Inventors: Juergen Kleinschroth; ユルゲン・クライシュロート; Johannes Hartenstein; ヨハネス・ハルテンシュタイン; Christoph Schaechtele; クリストフ・シエヒテレ; Claus Rudolph; クラウス・ルドルフ
Original assignee: Goedecke GmbH
Current assignee: Goedecke GmbH
Priority date: 1989-07-25
Filing date: 1990-07-25
Publication date: 1991-03-14
Anticipated expiration: 2016-03-05
Also published as: EP0410389A1; DK0410389T3; JP3140453B2; DE3924538A1; ES2068953T3; DE59008696D1; EP0410389B1; JP2001106691A; US5043335A; ATE119906T1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】この発明は、下記−船人（Ｉ）で表わされるインドロカ
ルバゾール９，１０，１１．１２−　テトラヒドロ−９
，１２−４ボキシ−１Ｈ−ジインドｏ　［１，２，３−
（’ｇ：　３’２°、１°−ｋｌ］−ピロロ−［３，４
−１］　　［１，６］−ベンゾジアゾシン−１　、３　
（２Ｈ）−ジオンとこの化合物を含有する医薬Ｓ■成放
物および（Ｉ）の調製中に得られる（１）の誘導体であ
って、イミド窒素原子が５−メトキシテトラヒドロフラ
ン−２−イル基で置換されたもの、すなわち９．１０，
１１．１２−　テトラヒドロ−２−（テトラヒドロ−５
−メトキシ−２−フラニル）−９，１２−エポキシ−Ｉ
ＩＩ−ジインドロ［１，２，３−ｆｇ：　３°。

２°、１“−ｋｌ］−ピロロ−［３，４−１コ　［１，
０］］ベンゾジアゾシンー１．３２Ｈ）−ジオン（ＩＶ
）に関する。

インドロカルバゾールのＮ、Ｎ−グリコシドは、セリン
／トレオニン・プロティンキナーゼの阻害剤として、す
でに刊行物に記載されている。微生物起源のアルカロイ
ドグリコシドであるスタウロスポリン（５ｔａｕｒｏｓ
ｐｏｒｉ口）は、このクラスの参照化合物であると見な
されている（　ＢＩｏｅｈｅｍ、ＢＩｏｐｈｙｓ。

Ｒｅｓ、Ｃｏｍｍｕｎ、　　１３５．２９７　／　１９
８Ｇ参照）。この非常に強い阻害剤の不利な点は、プロ
ティンキナーゼＣおよびｃ　Ａ　Ｍ　Ｐおよびｃ　Ｇ　
Ｍ　Ｐ依存プロティンキナーゼのような種々のセリン／
トレオニン特異プロティンキナーゼを同程度に阻害する
ことである。

驚くべきことに、我々はこの発明による化合物が、スタ
ウロスポリンと対比して、プロティンキナーゼＣに対す
る高い選択性を示すことを見出した。明らかに、イミド
窒素のベンジル基によってこの発明による化合物とは異
なる類似化合物２−ベンジル−９，１２−エポキンー■
−オキソ−１＋１−２．３，９，１０゜１１．１２−ヘ
キサヒドロジインドロー　［１，２，３−ｆｇ　：３’
、２’、ｌ’−に＋　１　　ピロロ−［３，４−ｉコ　
［１，，８ｍ　ベンゾジアゾシン（ＩＩＩ）が、すでに
刊行物に記載されている。（ｌ１ｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅ
ｓ、　２Ｌ　　３０９／　１９８４）。

Ｃ１１２−Ｃ６Ｈ５しかしながら、この刊行物には、プロティンキナーゼに
対する阻害効果に関する記述を見出すことはできない。

しかしながら、比較実験（下記第１表を参照）は、イン
・ビトロ酵素アッセイにおける、１０−５Ｍの濃度での
同一条件下で、化合物（ＩＩＩ）がプロティンキナーゼ
Ｃに対しては重要な阻害を表わさないことを示している
。Ｎ−ベンジル化合物（ＩＩＩ）からイミド窒素が置換
されていない化合物（１）への変換の場合における能力
の増加は驚くべきものである。

この発明による化合物の調製は、刊行物（ｌＩｅＬｅｒ
ｏｃｙｃｌｅｓ、　２１．３０９／　１９８４）に記載
の方法と同様に行なわれる。この方法は、酸触媒の存在
下で、好ましくはハロゲン化炭化水素、例えばジクロロ
メタンもしくは１，２−ジクロロエタンを溶媒として用
いて、インドロ［２，３−ａ　］　−ピロロ−［３，４
−ｃ　］カルバゾール−５．７ｅｌｌ）−ジオン（ＩＩ
）と２．５−ジメトキシテトラヒドロフランとを反応さ
せることにより行なわれる。

＋１触媒としては、ｐ−トルエンスルホン酸もしくは塩化第
二鉄・６水和物が特に好ましい。

■発物質として用いるインドロカルバゾール（ＩＩ）の
合成は、刊行物（ＴｅＬｒａｌ＋ｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ
、、１４４１／　１９８３　；　Ｊ、Ｏｒｇ、ＣＩ＋ｅ
Ｌ、　５４．８２４／　１９８９）に記載されている。

ホスファチジルセリンおよびジアンルグリセロールで活
性化されたプロティンキナーゼＣの阻害を、欧州特許明
細書ＥＰ−八−０，２５５，１２１３に従って４１り定
した。ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ依存プロテインキナーセ
の阻害の測定は、実験線の試験の詳述に従って行なった
。

第　　１　　表化合物　阻害（ＩＣ５０；８Ｍ）比率１ｃ５゜キナーゼ
Ｃ−キナーゼ　　Ａ−キナーゼ　　Ｇ−キナーゼ　　Ａ
／ＣＩｃｓ。Ｃ−＋ナーゼＧ／ＣＩ　　　　　　　Ｏ，０２８５，５０，５２１９１３１
９スタウロスポリン　　０．０１３　　　　　０．０４
　　　０．Ｃｌ８　　　　　３．Ｉ　　　　　　　　Ｌ
、４ｍ　　　　　　〉　１０プロティンキナーゼＣは、細胞内信号変換に対する重要
な鍵の役割を果たしており、収縮、分〜・および増殖過
程の調節に密接に関与している。これらの特性に基づい
て、この発明による化合物は、免疫系の疾患の他に、血
栓症、動脈硬化、高血圧のような心臓および血管疾患、
および炎症過程、アレルギー　ガンおよび中枢神経系の
変性損傷の治療に使用することが可能である。この化合
物は、Ｙないし　１００＋ｎｇ／ｋｇ体重、好ましくは
　１ないし５０ｍｇ　／　ｋｇ体重の特に適切な処方量
で、腸管内にまたは非経口的に投与することができる。

以下の実施例は、この発明を説明するためのものである
。

実施例９．１０．１１．１２−テトラヒドロ−９，１２−エポ
キシ−１Ｈ−ジインドｏ　［１，２，３−ｒｇ：　３°
、２’、１’−ｋｌ　：ｌ−ビｏ。

［３，４−１１［１，８］−］ベンゾジアゾシンー１．
３２　Ｉ＋　）−ジオン（Ｉ）。

ジクロロメタン２５−にインドロ［２，３−ａ　］−−
ピロロ−［３，４−ｃ　］カルバゾール−５．７−Ｇ１
１）−ジオン（Ｕ　）　　５００ｍｇ　（１，５４ミリ
モル）を懸濁させた懸濁液を、２．５−ジメトキシテト
ラヒドロフラン　３−（２３ミリモル）およびｐ−）ル
エンスルホン酸２０　ｍｇと混合して、２０℃で５日間
撹拌した。次いで、溶媒を留去し、残渣を酢酸エチル４
００−および水１００−に分配した。酢酸エチル層を分
離し、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥して蒸発させた
。残渣を、トルエン／酢酸エチル（３：ｌ　Ｖ／Ｖ　）
でシリカゲルを用いるクロマトグラフィにかけた。Ｒｆ
’が０．４５である分画を単証し、ジイソプロピルエテ
ル／酢酸エチルと一緒に撹拌した。９，１０，１１．１
２−テトラヒドロ−９，１２−エポキシ−１Ｈ−ジイン
ドロ［１，２，３−［’ｇ　：　３′，２′，１°−ｋ
ｌ］−ピロロ−［３゜４−１］［１，６］−］ベンゾジ
アゾシンー１．３２１１）−ジオン（Ｉ）を黄色結晶の
形態で得た。融点、〉３４０℃。

クロマトグラフィの場合には、副生物として、イミド窒
素原子が５−メトキシテトラヒドロフラン−２−イル基
で置換された誘導体、すなわち、９゜１０．１１．１２
−テトラヒドロ−２−（テトラヒドロ−５−メトキシ−
２−フラニル）　−９，１２−エポキシ−１ｌｌ−ジイ
ンドｏ　［１，２，３−ｆｇ：　３’、２’、１−ｋｌ
　］−−ピロロ−３．４−ｉ　］　　［］１．８１ベン
ゾジアゾシンー１．３２Ｈ）−ジオン（ＩＶ）が得られ
た。トルエン／酢酸エチル（３：ｌ　Ｖ／Ｖ　）でＲｆ
は０．５であった。

９．１０．１１．１２−テトラヒドロ−２−（テトラヒ
ドロ−５−メトキシ−２−フラニル’ｔ　−９，１２−
エポキシ−１Ｈ−ジインドロ　［１，２，３−４ｇ　：
　３′，２′，１′ｋｌ　］−ピロロ［３，４−１］　
　［１，［ｉ　］］ベンゾジアゾシンー１．３２＋（）
ジオン（ＩＶ）の分光学的データは以下の通りである。

ＭＳ（７０ｅＶ）　　：　　ｌ！ｌ／ｚ−３９３（Ｍ”
　　ｔｏｏ　）、　３２１（２６）ＩＲ（Ｘ１３ｒ　）　　：　　　−３４３０，１７ＢＯ
Ｓ１６９５、ｌ３５０゜１３１（１，７４０（イ） ’ＩＩ−ＮＭＩ？　　（ＤＭＳＯ−ｄ６／ＴＭＳ）　　
：δ−２，０４（ｐｓ−ｑ。

２１１、　Ｃ１１２）　　　２．７４　（慣、２１１．
ＣＩ＋２　）　、７．３３　（ｌ１１．２１１゜Ｃｌ１
）　　　７．４３　（ｔ、２１．Ｊ−７１１ｚ、８１１
ｚ、Ａｒ１１）　　　７．０３　（ｔ。

２１１、　Ｊ−７１１ｚ、　８１１ｚ、＾ｒｌｌ）　、
７．９４　（ｄ、２１１．Ｊ−８１１２，＾「１１）、
９．０１　（ｄ、２１１．Ｊ−８１１ｚ、Ａｒ１１）Ｇ
キナーゼおよび＾キナーゼに対する試験の詳述ｃＧＭＰ
依存性プロティンキナーゼ：酵素をウシの肺組織から得
て精製し、リン３２−標識リン酸塩をヒストンに組み込
むことによってその活性を決定した。試験バッチ２００
μｇ中に含まれる成分は、１０ｕｇのヒストンＩＩ−Ａ
および多分調べようとする物質の他に、２０　ｍＭのト
リス−１１ＣＩ　（ａｌｌ　７．４）　　　５ｌｌＭの
塩化マグネシウム、ｌ　ｍＭのＤＴＴ、ｌ口μＭのＡＴ
Ｐ、１０μＨのｃＧＭＰ、４０■のＢＳＡ。

２％グリセロールである。このバッチを、酵素なしで、
３０℃で４分間ブレインキュベートし、　２．５ｎＭの
６キナーゼを添加することにより反応を開始した。３０
℃で　５分間インキュベートした後、１０％トリクロロ
酢酸を添加することにより反応を停止させ、次いでニト
ロセルロースフィルターで試料をろ別した。リン酸の取
り込みは、シンチレーションカウンターにおけるチェレ
ンコフ計数（Ｃｅｒｅｎｋｏｖ　ｃｏｕｔｉｎｇ）によ
って決定し、その結果から阻害の割合を計算した。

ｃ　Ａ　Ｍ　Ｐ依存性プロティンキナーゼ：活性の測定
は、市販されている酵素の触媒サブユニット（ｃａｔａ
ｌｙｔｉｃ　５ｕｂｕｎｉｔｓ）を用いて行なった。リ
ン３２−標識リン酸塩のヒストンへの取り込みは、それ
により測定した。反応バッチ２００μｇに含まれる成分
は、５０ｕｇのヒストンｌ＋−２Ｂの他に、５０　ｍＭ
のＰＩＰＥＳ−ＮａＯＩＩ　　（ｐｉｔ　７．５）　、
１０　ＩＩ１Ｈの塩化マグネシウム、ＩＩＩＩＭのＤＴ
Ｔ、４０μＨのＡＴＰである。

試験は、Ｇキナーゼの場合と同様に行なった。

ｃ　Ａ　Ｍ　Ｐ依存性プロティンキナーゼの触媒サブユ
ニット　６ユニツトを添加することにより反応を開始さ
せた。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）９，１０，１１，１２−テトラヒドロ−９，１２
−エポキシ−１Ｈ−ジインドロ［１，２，３−ｆｇ：３
′，２′，１′−ｋｌ］−ピロロ−［３，４−ｉ］［１
，６］−ベンゾジアゾシン−１，３（２Ｈ）−ジオン。
（２）請求項１記載の化合物の調製方法であって、酸触
媒および溶媒としてのハロゲン化炭化水素の存在下で、
インドロ［２，３−ａ］ピロロ−［３，４−ｃ］カルバ
ゾール−５，７（６Ｈ）−ジオンを２，５−ジメトキシ
テトラヒドロフランと反応させ、９，１０，１１，１２
−テトラヒドロ−９，１２−エポキシ−１Ｈ−ジインド
ロ［１，２，３−ｆｇ：３′，２′，１′−ｋｌ］−ピ
ロロ−［３，４−ｉ］［１，６］−ベンゾジアゾシン−
１，３（２Ｈ）−ジオンおよび副生物９，１０，１１，
１２−テトラヒドロ−２−（テトラヒドロ−５−メトキ
シ−２−フラニル）−９，１２−エポキシ−１Ｈ−ジイ
ンドロ［１，２，３−ｆｇ：３′，２′，１′−ｋｌ］
−ピロロ−［３，４−ｉ］［１，６］ベンゾジアゾシン
−１，３（２Ｈ）−ジオンを得る方法。
（３）９，１０，１１，１２−テトラヒドロ−２−（テ
トラヒドロ−５−メトキシ−２−フラニル）−９，１２
−エポキシ−１Ｈ−ジインドロ［１，２，３−ｆｇ：３
′，２′，１′ｋｌ］−ピロロ−［３，４−ｉ］［１，
６］ベンゾジアゾシン−１，３（２Ｈ）−ジオン。
（４）９，１０，１１，１２−テトラヒドロ−９，１２
−エポキシ−１Ｈ−ジインドロ［１，２，３−ｆｇ：３
′，２′，１′−ｋｌ］−ピロロ−［３，４−ｉ］［１
，６］−ベンゾジアゾシン−１，３（２Ｈ）−ジオンと
、通常の補助剤および添加物とを含有する医薬組成物。
（５）血栓症、動脈硬化、高血圧のような心臓および血
管疾患、炎症性疾患、アレルギー、ガン、中枢神経系の
変性損傷および免疫系の疾患の治療のための医薬組成物
の調製への、請求項１に記載の化合物の使用。
（６）血栓症、動脈硬化、高血圧のような心臓および血
管疾患、炎症過程、アレルギー、ガン、中枢神経系の変
性損傷および免疫系の疾患の治療への、請求項１に記載
の化合物の使用。