JPH0340041B2

JPH0340041B2 -

Info

Publication number: JPH0340041B2
Application number: JP26572788A
Authority: JP
Priority date: 1988-10-21
Filing date: 1988-10-21
Publication date: 1991-06-17
Also published as: JPH01152105A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、アミノ酸又はアミノ酸重合体の結合
した多糖複合体に関するものである。多糖、アミノ酸及びアミノ酸重合体は、生物の
体を構成する物質であり、生体との親和製が良好
であり、また場合によつては、生体内吸収分解性
を有する。また、多糖とアミノ酸との複合体は、
生体成分（酵素、抗体、ホルモン等）と特異的な
相互作用が期待され、免疫吸着剤、酵素精製用ク
ロマト担体等に応用できる。本発明者らは、アミノ酸又はアミノ酸重合体と
多糖との複合体の調整に鋭意努力した結果、Ｎ−
カルボキシアミノ酸無水物とアミノ基とアミノ基
を有する多糖とを用いることによつて、アミノ酸
又はアミノ酸重合体をペプチド結合を通して多糖
に結合した複合体の合成に到達し、本発明をなす
に至つた。即ち、本発明によれば、アミノ基を有する多糖
において、該アミノ基の少なくとも一部が、アミ
ノ酸又はその重合体のカルボキシル基と反応結合
した構造を有するアミノ酸又はその重合体が結合
した多糖複合体が提供される。この複合体において、アミノ酸又はアミノ酸重
合体の種類とアミノ酸結合量を変化させることに
よつて生体内吸収分解性あるいは、酵素の吸着性
を制御することができ、多糖それ自体では発現で
きないような、特異的吸着現象が可能となる。本発明の多糖複合体に結合するアミノ酸重合体
としては、例えば、Ｌ−グルタミン酸ベンジル、
Ｌ−アスパラギン酸ベンジル、Ｎ−ベンジルオキ
シカルボニル−Ｌ−リジン、Ｌ−メチオニン、Ｌ
−ロイシン、Ｌ−フエニルアラニン、Ｌ−バリ
ン、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−オルニ
チン、Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ−グルタミン酸、
Ｎ−ヒドロキシエチル−Ｌ−グルタミン、Ｎ−ヒ
ドロキシプロピル−Ｌ−グルタミン、DL−アラ
ニン、DL−ロイシン、DL−メチオニン等の単独
重合体、またはそれらの２種以上が混合した共重
合体、挙げられる。もう一方の成分であるアミノ
基を有する多糖は、部分的脱アセチル化キチン、
キトサン、アミノエチルアガロース、グリシルス
ターチ等である。反応溶媒としては、ジメチルス
ルホキシド、ジメチルアセトアミド、ジメチルホ
ルムアミド等のアミノ酸又はその重合体を溶解さ
せ同時に、多糖を膨潤させるものを用いる。アミ
ノ基を有する多糖と、アミノ酸又はその重合体の
構成比は、多糖が10〜90重量％である。本発明の複合体の製造は以下のように行う。例
えば、部分的脱アセチル化キチンをジメチルアセ
トアミド、メチルピロリドン、塩化リチウム
（10：10：１重量比）の混合溶媒に溶解し、Ｎ−
カルボキシアミノ酸無水物を加えて、攪拌溶解さ
せ、キチンのアミノ酸を順次結合させていく。Ｎ−カルボキシアミン酸無水物は、アミノ酸と
ホスゲンを反応させることによつて、合成され
る。この反応を（）式で示す。ここでアミノ酸を
NH₂CHRCOOHで表わし、Ｒはアミノ酸残基の
側鎖である。得られたＮ−カルボキシアミノ酸無水物は、ア
ミノ基と室温で容易に反応し、アミノ酸を結合し
た多糖になる。部分的脱アセチル化キチンは、Ｎ
−アセチルグルコサミンとグルコサミンの共重合
体であるので、この反応は（）式のようにな
る。Ｎ−カルボキシアミノ酸無水物が多糖のアミノ
基に対して過剰量存在すれば、最初に結合したア
ミノ酸のアミノ基に更に、Ｎ−カルボキシアミノ
酸無水物が反応する。これを（）式で示す。ここでｘは１から100程度にするのが望ましい。また均一溶液系でなくとも、アミノ基を有する
多糖に、アミノ酸又はその重合体を結合させるこ
とができる。この場合には、キトサンの粉末をジ
メチルスルホキシドにケンダクさせ、これに、Ｎ
−カルボキシアミノ酸無水物を加え、攪拌するこ
とにより、アミノ酸又はその重合体を結合したキ
トサン粉末を得ることができる。この場合も反応
は前記と同じである。多糖の濃度は0.1〜31重量％、Ｎ−カルボキシ
アミノ酸無水物の濃度は0.1〜20重量％が適当で
あり、多糖とＮ−カルボキシアミノ酸無水物との
比は20〜0.05が適当である。次に本発明を実施例に基づき、そらに詳細に説
明する。実施例１カニガラより製造されたキチン粉末3.0ｇを40
％水溶液ナトリウム水溶液に浸漬し、室温で３時
間放置した。これに氷225ｇを加え攪拌し、均一
なアルカリキチン溶液とし、44時間室温で放置し
た。これを５℃に保ちながら濃塩酸60mlを攪拌し
ながら滴下し、更に２規定塩酸40mlを滴下し、PH
７にした。このとき溶液は白濁し、キチンの沈殿
が生じた。これを遠心分離し、沈殿を水で洗浄す
ることと遠心分離を４回おこない、上澄に塩素イ
オンのないことを硝酸銀によつて確めた。更に、
この沈殿に29％アンモニア水を加え、遠心分離
し、次に水による洗浄と遠心分離を４回行い、最
後に沈殿を乾燥させ、部分的脱アセチル化キチン
1.87ｇを得た。別にＬ−グルタミン酸ベンジル
7.65ｇをジオキサン100mlにケンダクさせ、トリ
クロロメチルクロロホーメイト3.0mlを活性炭上
に滴下させて発生させたホスゲンガスを、それに
導入し、50℃で２時間反応させ、その後、窒素ガ
スを１時間通した。ジオキサンを減圧下で蒸留し
て除去し、Ｎ−カルボキシ−Ｌ−グルタミン酸ベ
ンジル無水物7.95ｇを得た。部分的脱アセチル化
キチン0.5ｇをジメチルスルホキシド40mlにケン
ダクさせ、Ｎ−カルボキシ−Ｎ−グルタミン酸ベ
ンジル酸無水物2.82ｇを加え、室温で１週間攪拌
した。沈殿を遠心分離し、ジメチルスルホキシド
で２回洗浄と遠心分離を行つた。次にジオキサン
で同様に３回処理した。得られた沈殿を乾燥し
た。このようにして製造した複合体の収率は1.35ｇ
で重量増加率は171％であつた。部分的脱アセチル化キチンと得られた複合体の
赤外線吸収スペクトルの特性吸収ピークを第１表
に示す。カツコ内のＳ、Ｍ、Ｗは吸収の強さ、つ
まり強い、中位、弱いをそれぞれ表す。アミノ酸重合体が結合していることを示す赤外
線吸収が、3290、1735、750、700cm^-1に現われて
いた。

【表】実施例２アルカリキチンの放置時間を163時間にしたこ
とを除いて実施例１と同様に処理して得た部分的
脱アセチル化キチン0.36ｇをジメチルスルホキシ
ド70mlにケンダクさせ、実施例１と同様にして、
Ｄ−Ｌ−アラニンから合成したＮ−カルボキシ−
DL−アラニン無水物1.61ｇを加え、１週間攪し
た。水による洗浄と遠心分離を数回繰り返し、最
後にアセトンを加え、沈殿を濾過し、複合体
0.669ｇを得た。重量増加率86％であつた。得ら
れた複合体と163時間処理した部分的脱アセチル
化キチンの赤外線吸収スペクトルの特性吸収ピー
クを第２表に示す。カツコ内のＳ、Ｍ、Ｗは実施
例１と同じである。

【表】

Claims

【特許請求の範囲】

１アミノ基を有する多糖において、該アミノ基
の少なくとも一部が、アミノ酸又はその重合体の
カルボキシル基と反応結合した構造を有するアミ
ノ酸又はその重合体が結合した多糖複合体。