JPH03227931A - 非ステロイド抗炎症剤及びテトラサイクリンの配合 - Google Patents

Abstract

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Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、過剰のコラーゲン溶解作用に関連する、リウ
マトイト関節炎やその他の組織破壊性疾病（ｔｉｓｓｕ
ｅ−ｄｅｓｔｒｕｃＬｉｖｃ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ）
の治療に有用な抗−コラーゲン溶解性組成物に関し、更
Ｃ仏このような組成物の使用法に関する。

テトラサイクリン類は、周知の天然及び合成広範囲スペ
クトル抗生物質系を構成する。理化合物（テトラサイク
リン）は、次の一般式：環核の番号の付は方は次の通り
である。

テトラサイクリン並びに５．−０ｆ（（テラマイシン）
及び７−Ｃβ（オーレオマイシン：商標）誘導体は、天
然に存在し、周知の抗生物質である。天然テトラサイク
リンは、それらの抗生物質特性を失うことなく修飾でき
るが、構造のうちの一定の元素は維持しな＆ノればなら
ない。テトラサイクリン基本構造に修飾できる又はてき
ないということについて、ミツチャー（旧ｔｓｃｈｅｒ
　）氏による［テトラサイクリン類の化学（Ｔｈｅ　Ｃ
ｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｏｆＴｅｔｒａｃｙｃｌ　１ｎｅｓ
）　Ｊ第６章に総説されている。ミツチャー氏によれば
、テトラサイクリン環系の５〜９位における置換基は、
抗生物質特性を全く損失することなく修飾できる。しか
し、１〜４位及び１０〜１２位における環の基本系に変
化を与えるか又は置換基の変換は、通常、抗生物質特性
を実質的に減じるが、抗生物質として有効でない合成テ
トラサイクリンをもたらす。例えば、４−デジメチルア
ミノテトラサイクリンは、抗生物質特性を有しないテト
ラサイクリンであると、一般的に考えられている。

テトラサイクリン抗生物質の使用は、有効であるが、望
ましくない副作用をもたらす可能性がある。例えば、テ
トラサイクリン抗生物質の長期間投与は、腸内細菌叢の
ような健常細菌叢を滅らずか又は排除する可能性があり
、抗生物質耐性菌の産生又は酵母及び真菌類の過剰生長
をもたらす可能性がある。

抗生物質特性に加えて、テトラサイクリンは、哺乳類性
コラゲナーセ、マクロファーシエラスターセ及び細菌性
コラゲナーゼ等のコラーゲン破壊性の酵素の活性を阻害
することも知られている〔ゴーラブ（Ｇｏｌｕｂ）等、
ジェー・ペリオトント・レス（Ｊ、Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔ
、　Ｒｅｓ、）、２０．　］２−２３　（１９８５年）
及びゴーラブ等、シエー・ペリオドント・レス（Ｊ、Ｐ
ｅｒｊｏｄｏｎｔ、　Ｒｅｓ、）、　（１９８９年）投
稿、参照〕。

コラーゲンは、骨、滑脱、眼、皮膚、肘及び歯肉等中の
結合組織基質の主要成分である。コラゲナーゼ（数種の
型の細菌のみにより天然に産出され、哺乳類の多くの組
織や細胞中で産出される）は、コラーゲンを分解する。

哺乳類性コラゲナーゼによるコラーゲンの分解は、結合
組織に起こる、正常な成長−分解−再生の自然な過程の
一部である。しかし、コラゲナーゼの産生が過剰に起こ
る可能性がある。このようなコラゲナーゼの過剰産生は
、しばしば、結合組織の異常で且つ衰弱性の破壊をもた
らす。

マクナマラ（ＭｃＮａｍａｒａ　）等に与えられた米国
特許第４，７０４，３８３号明細書は、実質的に有効な
抗生物質活性を有しないテトラサイクリンが、ラツ１〜
のコラーゲン溶解性酸素の活性を明害すると開示する。

マクナマラ等は、非抗生物質性テトラサイクリンが、器
官培養において骨の吸収を減少させることを報告してい
るが、臨床研究は報告されなかった。

ゴーブラ等に与えられた」二記特許より早い米国特許第
４，６６６．８９７号明細書は、通常のテトラサイクリ
ン（市販されている抗生物質製剤を含む）が過剰の骨吸
収を抑制することを開示した。

テトラサイクリン類（非抗体物質テトラサイクリン類を
含む）がラットの関節炎の治療に有効であることの多く
の示唆がある。例えば、１９８９年９月１１日〜１５日
に、フロリダ州デスチンで開催された、マトリックス・
メタロプロテアーゼ・コンフエランス（Ｍａｔｒｉｘ　
Ｉ’１ｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅＣｏｎｆｅｒ
ｅｎｃｅ）において提出された、ゴーラブ等の「テトラ
サイクリン類（ＴＣｓ）はメタロプロテアーゼ（ＭＰｓ
）を阻害する：関節炎及び糖尿病ラットの４ノＷＺ効果
、及び新規な−（７１６’上旦研究（Ｔｅｔｒａｃｙｃ
ｌｉｎｅｓ（ＴＣｓ）　ＩｎｈｉｂｉｔＭｅｔａｉｌｏ
ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ　（ＭＰｓ）　　：　Ｔｎ　Ｖｉ
ｖｏ　　ＥｆｆｅｃｔｓＩｎ　　Ａｒｔｈｒｉｓｔｉｃ
　　Ａｎｄ　　Ｄｉａｂｅｔｉｃ　　Ｒａｔｓ　　　＾
ｎｄ　　ＮｅｗＩｎ　Ｖｉｖｏ　　５ｔｕｄｉｅｓ）　
Ｊ抄録、並びに、１９８７年１０月２３日〜２４日にニ
ュジャージー州、アトランティク市で開催されたアメリ
カリウマチ学会（Ｔｈｅ　Ａｍｅｒ。

Ｒｈｅｕｍ、Ａｓ５ｏｃ、）北東領域会合でブリードベ
ルド（Ｂｒｅｅｄｖｅｌｄ）氏の「あるテトラサイクリ
ンによるコラーゲン及びアジューハンド関節炎の抑制（
Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ　　ｏｆ　　ＣｏｌＣｏ１１ａ
　　Ａｎｄ　　Ａｒ１ｊｕｖａｎｔＡｒｔｈｒ１ｔｉｓ
　Ｂｙ　Ａ　Ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ）　Ｊを参照さ
れたい。

骨減損における非抗生物質特性テＩ・ラサイクリンの効
果に関するこれに関連する解説については、１９８９年
９月１１日〜１５日にフロリダ州デスチンで開催された
、シボス（Ｓｉｐｏｓ）氏等の「唾液腺除去ラブ）・の
歯周囲疾患ムこよる歯槽骨損失におけるコラゲナーゼ阻
害剤の効果（Ｔｈｅ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆＣｏｌｌａｇ
ｅｎａｓｅ　　Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　　Ｏｎ　　Ａｌ
ｖｅｏｌａｒ　　ｌ１ｏｎｅ　　、ｏｓｓＤｕｅ　ｔｏ
　Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ　Ｄｉｓｅａｓｅ　Ｉｎ　Ｄ
ｅｓａｌｉｖ＋１ｔｅｄ１ンａｔｓ）　　Ｊを参照され
たい。

しかし、抗生物質としての効果と関係のないテトラサイ
クリンの効果は、リウマトイ）・関節炎を罹患するヒト
の患者について確立されていない。

従って、グリーンウォールド（Ｇｒｅｅｎ凶ａｌｄ）氏
等が、ジェー・リウマト−ル（Ｊ、Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ
）、第１４巻第２８〜３２頁（１９８７年）において、
重篤なリウマトイド関節炎のヒトへのテトラサイクリン
の経口投与が関節組織のコラゲナーゼ活性を減少させる
と報告したけれども、スキナー（Ｓｋｉｎ’ｎｅｒ）氏
等は、アルスライヂス・アント・リウマチイスム（Ａｒ
ｔｈｒｉｔｉｓ　ａｎｄ　Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ）第１
４巻第７２７〜７３２頁（１９７１年）において、リウ
マトイド関節炎のヒトの罹患者に対するテトラサイクリ
ン療法がら有用な利点はなかったと報告した。

テトラサイクリン類と違って、非ステロイド抗炎症剤は
、リウマトイド関節炎やその他の炎症剤の疾患の対症療
法に有用であることが知られている。しかし、このよう
な抗炎症剤は、過剰量のコラゲナーゼの存在によって引
き起こされる、関節の結合組織（股、軟骨及び骨を含む
）の長期間の破壊を有効に防止しない。

過度のコラゲナーゼ活性は、一定の皮膚疾患にも関連し
ている。ホワイト代著のランセット（Ｌａｎｃｅｔ）　
１９８９年４月２９号第９６６頁（１９８９年）によれ
ば、テトラサイクリンミノサイタリンは、栄養障害性表
皮水庖症を治療するのに有効であり、それば過剰のコラ
ゲナーゼに関連すると思われている／、ｌＥ命命切迫皮
膚症状（Ｌｉｆｅ−ｔｈｒｅａｔｅｎｉｎｇｓｋｉｎ　
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）である。

皮膚疾患におけるテトラサイクリンの有効性は、エレブ
スキー（ＥＩｅ＋ｙｓｋｉ）灰等Ｃジャーナル・オブ・
ジ・アメリカン・アカデミ−・オブ・デルマトロジー（
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ａ
ｃａｄｅｍｙ　ｏｆＤｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ）第８巻第
８０７〜８１２頁（１，９８３年）〕によっても検討さ
れている。エレブスキー氏等は、テトラサイクリン抗生
物質か皮膚の抗炎症活性を有する可能性があることを開
示し、細菌に関連する皮膚疾患（例えば、歿庶）におけ
る治療効果の一部を、直接の抗細菌効果よりもむしろ細
菌によってもたらされた炎症の阻止による可能性がある
と推測している。

同様に、プレウィグ（Ｐｌｅｗｉｇ）氏等〔ジャーナル
・オブ・インへスティゲーティブ・デルマトロジ−（Ｊ
ｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ　Ｄ
ｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ）第６５巻第５３２〜５３２頁（
１９７５年）〕は、抗菌剤が炎症性皮膚疾患を治療する
のに有効であるという仮説を試験する目的の実験を開示
する。プレウィグ氏等の実験は、ヨウ化カリウムパンチ
により誘発されたプステルを治療するに際し、テトラサ
イクリンが抗炎症特性を有することを確立している。

コラケナーセか骨吸収に複雑に絡みあっていることも推
測されている。例えば、コーエン（Ｃｏｗｅｎ）氏等〔
バイオケミストリー・インターナショナル（Ｂｉｏｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）第１１
巻第２７３〜２８０頁（１９８５年）〕は、コラゲナー
ゼの遺骨細胞産生が骨吸収におりる開始事項である可能
性があり、破骨細胞により貧食されるミネラル類を残す
という仮説を立てている。

更に、デライセ（Ｄｅｌｌａｉｓｓ６　）氏等〔バイオ
ケミカル・アンド・バイオフィジカル・リサーチ・コミ
ュニケーションズ（Ｂｉｏｃｈｅｍｆｃａｌ　ａｎｄＢ
ｉｏｐｈｙｓｊｃａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｌ＋　Ｃｏｎ＋
＋ｎｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ）第１３３巻第４８３〜４９
０頁（１，９８５年）〕は、コラゲナーゼが骨吸収にお
いて重要な役割を演じると提案している。

デライセ氏等の研究は、哺乳類性のコラゲナーゼの阻害
及び関連する組織のメタロプロテアーゼの阻害が骨コラ
ーゲンの分解を防止し、従って、組織培養において体外
培養されたマウスの骨の吸収を抑制することを示してい
る。

テトラサイクリン類と非ステロイド抗炎症剤との組合せ
の使用は、尋常性１１Ｍによって起こる炎症性皮膚疾患
の治療について検刺されてきた。ウォング（Ｗｏｎｇ）
氏等〔ジャーナル・オブ・シ・アメリカン・アカデミ−
・オブ・デルマトロシー（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｍ
ｅｒｉｃａｎ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｄｅｒｍａｔｏ
ｌｏｇｙ）第１１巻第１０７６〜１０８１頁（１９８４
年）〕は、テトラサイクリンとイブプロフェインとの配
合を検討し、テトラサイクリンが尋常性佳庶に対して有
効であったと同時に、イブプロフェインが、シクロオキ
シゲナーゼを阻害することにより、生じた炎症を減少さ
せるのに有用であったことを見い出した。

アンド（Ｆｏｎｔ）氏〔ジャーナル・オブ・ジ・アメリ
カン・アカデミ−・オブ・デルマトロジ（Ｊｏｕｒｎａ
ｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ａｃａｄｅｍｙ
　ｏｆＤｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ）第１３巻第５２４〜５
２５頁（１９８５年）〕は、テトラサイクリンミノザイ
クリンとイブプロフェインとを配合することによる同様
な結果を開示する。

上述の研究のほとんどにおいて、テトラサイクリンがそ
の抗生物質特性効果について有用であると思われる。従
って、マクナマラ等の特許の開示を除いて、抗生物質テ
トラサイクリン類を、それらの望ましくない副作用にも
かかわらず使用した。

上記の検討にもかかわらず、過剰のコラーゲン溶解作用
に関連するリウマトイド関節炎及びその他の組織破壊性
疾病のための有効な長期治療は、依然としてばつきりし
ないままである。

本発明の目的は、このような治療を提供することにある
。本発明の別の目的は、テトラサイクリン抗生物質療法
の副作用を避けながら前記のような治療を提供すること
である。

過剰のメタロプロテアーゼ作用に関連する、リウマトイ
ド関節炎及びその他の組織破壊性疾病を罹患する哺乳動
物の治療法を提供することにより、これらの、そして、
その他の目的を達成できることが、今や、見いだされた
。この治療法は、メタロプロテアーゼに有効であるが、
抗生物質として有効でないテトラサイクリンの一定量及
び／又は一定種類と、非ステロイド抗炎症剤の一定量と
を哺乳類に投与することを含み、該非ステロイド抗炎症
剤は抗メタロプロテアーゼの有効量及び／又は一定種類
のテトラサイクリンと配合すると、骨減損の顕著な減少
をもたらす。更に、本発明は、過剰のメタロプロテアー
ゼに関連するリウマトイド関節炎及びその他の組織破壊
性疾病を罹患する哺乳動物の治療用医薬組成物を提供す
ることにあり、該医薬組成物は、（ａ）抗コラゲナーゼ
として有効であるが、抗生物質として有効でない量のテ
トラサイクリン；及び（ｂ）抗コラゲナーゼとして有効
な量のテトラサイクリンと配合すると骨減損の顕著な減
少をもたらす量の非ステロイド抗炎症剤からなる。本発
明で使用するテトラサイクリンの量は、患者に抗生物質
として効果がない量である。

従って、抗生物質特性のために通常使用されるテトラサ
イクリンもまた、ここでは、抗生物質として有効でない
少量で使用できる。

本発明は、メタロプロテアーゼのような基質減成性蛋白
分解酵素の過剰作用に関連する組織破壊性症状の治療に
関する。典型的なメタロプロテアーゼには、例えば、コ
ラケナーセ及びゼラチナーゼがある。本発明で治療され
る組織破壊性疾病には、リウマトイド関節炎、変形性関
節症、角膜潰瘍、表皮水泡症、骨粗ｎ症を含む代謝性骨
疾病、糖尿病性腎疾患のような基底膜に対する損傷をも
たらす疾患、転移性癌のような基底膜の細胞通過をとも
なう疾患、及び両回疾患等があるが、これらにド艮定さ
れない。

本発明により治療される疾病は哺乳類に起こる。

例えば、哺乳類にはヒト及び、マウスやラントのような
実験動物がある。

化学的に修飾された非抗生物質テトラサイクリン類似体
がラットのインビボ実験でメタロプロテアーゼを阻害す
ること；化学的に修飾されたテトラサイクリン類が唾液
除去ラブ１〜の歯周囲疾患に関連する歯槽骨減損を減少
させたこと；抗生物質性及び非抗生物質性テトラサイタ
リンが組織培養の骨吸収を阻害すること：テトラサイク
リンミノサイタリンがラットの関節炎の発症率と重篤度
を軽減したこと；そして、抗生物質性テトラサイクリン
かインビボで骨吸収を減少させること（ゴーラブ等の米
国特許第４，６６６．８９７号明細書）等の報告は、テ
トラサイクリン類の非抗生物質用量の投与が関節炎動物
における骨減損を減少させることか予測されるというこ
とを示唆している。しかし、発明者等はこれは違うとい
うことを予期しないで見いだした。関節炎ラブＩ・を化
学的に修飾されたテトラサイクリンである４−デジメチ
ルアミノテトラサイクリンの非抗生物質用量で処理した
とき、骨減損に顕著な減少がなかった。

又、意外にも、本発明者等は、骨減損が、関節炎を罹患
している哺乳類を抗メタロプロテアーゼとして有効であ
るが抗生物質として有効でない一定量のテトラサイクリ
ンと配合した非ステロイド抗炎症剤で処理したとき、顕
著に減少することを見いだした。骨減損は、骨吸収の防
止又は新しい骨の形成の刺激によって減少するのかもし
れない。

テトラサイクリンは、哺乳類において抗生物質として有
効でない用量で哺乳類に投与されるいかなるテトラサイ
クリンであってもよい。好ましくは、テトラサイクリン
は、その抗生物質特性を減少するように修飾される。テ
トラサイクリンの抗生物質特性を減少させる方法は、「
テトラサイクリン類の化学（Ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ　ｏｆ　ｔｈｅ１゛ｅｔｒａｃｙｃｌ　１ｎｅｓ）　
Ｊ第６章第２１１＠ミツチャー（Ｍｉ　ｔｓｃｈｅｒ）
成縮、に開示されている。ミツチャー　（Ｍｉｔｓｃｈ
ｅｒ）氏によって指摘されているように、、２．３．４
．１０及び１２α位における修飾は生物活性の損失をも
たらす。このような修飾テＩ・ラサイクリンの使用は本
発明において好ましい。それらは、幾つかの副作用をも
つ抗生物質テトラサイクリンよりも高濃度で使用できる
からである。

好ましいテトラサイクリン類は、４位のジメチルアミン
基を欠失しているようなものである。例えば、このよう
な化学修飾テトラサイクリン類には、４−デジメチルア
ミノテトラサイクリン、４デジメチルアミノ−５−オキ
シテトラサイクリン、４−デシメチルアミノ−７−クロ
ロテトラサイクリン、４−ヒドロキシ−４−デシメチル
アミノテＩ・ラサイクリン、５ａ、６−アンヒドロ−４
ヒドロキシ−４−デシメチルアミノテトラサイクリン、
６−ジメチル−６−ブオキシー４−デシメチルアミンテ
トラサイクリン、及び６−α−デオキシ−５−ヒドロキ
シ−４−デジメチルアミノテトラサイクリンがある。

又、２位の炭素に二Ｉ・リルを生しさせて変えたテトラ
サイクリン類、例えば、テＩ・ラザイクリノニトリルは
非抗生物質用量メタロプロテアーゼ剤として有用である
。

減少させた抗生物質活性についての修飾テトラサイクリ
ンの別の例には、６−α−ヘンジルチオメチレンテトラ
サイクリン、テトラサイクリンの２−ニトリロ類似体、
テトラサイクリンのモノＮ−アルキル化アミド、６−フ
ルオロ−６−ジメチルテトラサイクリン、又は１１α−
クロロテトラサイクリン等がある。

テトラサイクリンの量は、抗コラケナーゼとして有効で
ありながら抗生物質として有効でない量である。テトラ
サイクリンの量は、抗コラゲナーゼ活性を顕著に減少さ
せる場合、抗コラゲナーセとして有効である。テトラサ
イクリンは、それが病原菌の生長を有意に防止しない場
合、抗生物質として有効でない。ヒトについての最大限
の投与量は、副作用をもたらさない最大投与量である。

本発明の目的のためには、副作用には臨床的に有意な抗
生物質活性並びに毒性がある。例えば、約５０ｍｇ／ｋ
ｇ／日を上まわる用量はヒトを含めて大部分の哺乳類に
副作用を生じさせるであろう。

非ステロイド抗炎症剤は、種々の分類の化合物から選択
できる。例えば、かかる分類には、アセチルナルチル酸
やシフルニザールのようなザルチル酸系；インドメタシ
ン、スリンダク、トルメチン、ジクロフェナック、及び
エトドラクのような酢酸系；フルルビプロフェン、ナプ
ロキセン、及びケトプロフェンのようなプロピオン酸系
；メクロフェナメートのようなフェナム酸系；並びにピ
ロキシカムのようなオキシカム系等がある。

好適な非ステロイド抗炎症剤には、フルルビプロフェン
、ピロキシカム、トルメチンナトリウム、イブプロフェ
ン、ナプロキセン及びインドメタシン等がある。

非ステロイド抗炎症剤の量は、抗コラゲナーゼ有効量の
テトラサイクリンと配合されるとき、メタロプロテアー
ゼの過剰活性に関連する組織破壊性疾病を罹患している
哺乳類の骨減損を顕著に減少させる量である。その量は
、使用する特定の抗炎症剤、その組成物が投与される哺
乳類、及び組成物中のテトラサイクリンの量に依存する
。通常のヒトの用途についての典型的な用量の幾つかに
は、イ列えば、ピロキシカムについて２０ｍｇ／日、イ
ンドメタシンについて１５０ｍｇ／日、トルメチンにつ
いて１６００〜１８００ｍｇ／日、ナプロキセンについ
て］０００ｍｇ／日、及びイフ゛プロフェンについて３
２００ｍｇＺ日がある。

例えば、適切な量の４−デジメチルアミノテトラサイク
リンは１５■／ｋｇである。３０ｍｇ／ｋｇの４デジメ
チルアミノテトラサイクリンと配合される抗炎症剤の適
切な量は、例えば１〜８ｍｇ／ｋｇのフルルビプロフェ
ン、０．３ｍｇ／ｋｇのピロキシカム及び４０ｍｇ／ｋ
ｇのイブプロフェンであろう。

本発明を実施するのに適当な量の抗炎症剤を与えるガイ
ドラインとして、大ざっばには、治療する関節炎につい
ての通常の抗炎症剤の用量の２０％〜８０％である量を
投与すべきである。従って、投与量は、ピロキシカムに
ついて１０　ｍｇ　／ヒト／日程度の少量から、イブプ
ロフェンについて３２００ｍｇ／ヒト／日程の大量まで
であることができる。いずれにしても、実施者は当分野
の熟達度及び知識によって導かれ、本発明は前述の現象
を達成するのに有効である投与量を限定されることなく
包含する。

本発明で使用するのに好適な医薬組成物は、適切な医薬
用キャリアー中のテトラサイクリンと抗炎症剤との配合
を含む。有効な医薬用キャリアーのデリバリ−の手段は
、哺乳類への経口投与に適した、カプセル、圧縮錠剤、
九剤、液剤又は懸濁剤の形態でありうる。その他のデリ
バリ−手段には、隔膜潰瘍、歯囲疾患等のための局所用
ゲルがある。キャリアーには、経口投与、局所用、関節
への注入により、そしてその他の選択された手段により
適切であるものが包含されることが意図されている。

実施土工 非ステロイド抗炎症薬（フルルビプロフェン）、化学修
飾非抗生物質テトラサイクリン（４−デジメチルアミノ
テトラサイクリン：　ＣＭＴ）及びフルルビプロフェン
／ＣＭＴ配合薬の、 （ｉ）コラゲナーゼ及びセラチナーゼ活性、（１１）臨
床的に評価した炎症の重篤度、及び（ｉｉｉ　）実験的
関節炎をもつラットの組織と関節におけるラジオグラフ
により評価した骨滅撰における効果を決定するために下
記の実験を実施した。

３６匹のルイス（１、ｅｗｉｓ）系成熟ラットを、フロ
インドアジュバントを注射することにより関節炎を起こ
させ、各ラットを次ぎの実験群に分けた。

即ち、 １群−未処置関節炎ラット、 ■群−毎日フルルヒプロフェンを経口ガバーシュにより
投薬した関節炎ラット（１，０■／ラツト）、■群−毎
日ＣＭＴを経口ガバーシュにより投薬した関節炎ラット
（３ｍｇ／ラット）、及び■群−双方の薬剤を投薬した
関節炎ランＩてあった。

２〜３週間の実験期間（酵素活性を評価する６匹うット
／群について２週間；酵素活性を評価する３匹うット／
群について３週間；骨減損をＸ線により評価する３匹う
ット／群について３週間）後に、ラットを殺し、後足を
得、皮を剥がし、そして関節炎にかかっている関節の上
を覆う炎症を起こしている皮下組織を解剖した（総ての
解剖及び摘出手順を４°Ｃで実施した）。組織を細分し
、秤量し抽出し、抽出物を前述した技法〔ラマムルシー
（Ｒａｍａｍｕｒｔｈｙ）及びゴーラブ（Ｇｏｌｕｂ）
著、シエー・ペリオドンタル・レス（Ｊ、Ｐｅｒｉｏｄ
ｏｎｔａｌ　Ｒｅｓ、）第１７巻、第４５５頁（１，９
８３年）］を使用して硫酸アンモニウム沈澱により一部
精製した。次いで、罹病組織の抽出物を５倍に濃縮し、
アリコツトを、３７°Ｃて４時間、［３Ｈ−メチル］ゼ
ラチン（変成タイプＩラット皮膚コラーゲン）と培養し
、セラチン分解活性を測定した。抹消化のセラチンをト
リクロロ酢酸で析出させ、遠心分離後、上澄み液中の分
解生成物のアリコントを液体シンチレーションスペクト
ロメーター中で測定した。

（ｂ）コラゲナーゼ活性定量については、抽出物を、２
２°Ｃで１８時間、［３）１−メチル］コラーケンと培
養し、放射線標識したコラ−ケン成分（α鎖）と分解フ
ラクメント（αＡ）を、前述したように〔ゴーラブ等の
ジエー・ペリオドンタル・レス（Ｊ、Ｐｅｒｉｏｄｏｎ
ｔａｌ　Ｒｅｓ、）第２０巻、第１２頁（１９８５年）
ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動とフルオログ
ラフィーの組み合わせにより評価した。

結□那未 １、　未処置関節炎ラット群は、足の炎症腫脹が最も大
きく、関節の骨減損が最も大きい（後者はＸ線により評
価）ことに関連する、組織破壊性メタロプロテアーゼ活
性（セラチン分解及びコラーゲン分解）のレヘルが最も
高いことを示した。

２、　フルルビプロフェン単独で処置した関節炎ラブＩ
・群は、足の腫脹の軽減、メタ１コブロチアーゼ活性の
僅かな軽減（シかし、ゼラチン分解活性の軽減には統計
学的有意性はなかった；注フルオロ〕 グラフィーにより評価したコラーゲン分解活性は統計学
的分析を行わなかった。）、そして、関節における骨減
損の僅かな軽減を示した。

３、　　ＣＭＴ単独で処置した関節炎ラット群は、メタ
ロプロテアーゼ活性の顕著な軽減、関節の骨減損の僅か
な軽減、そして、抗炎症効果を検出てきなかった（足の
腫脹の検出可能な軽減がなかった）という結果を示した
。

４、　　ＣＭＴとフルルビプロフェンとの組合せて処置
した関節炎ラット群は、コラーゲン分解の完全な阻害と
セラチン分解活性の最も大きな軽減、関節の骨減損の最
も大きな軽減、そして、フルルビプロフェン単独で観察
されたと同等又はそれ以上の足の腫脹の軽減を示した。

表−−−■− 炎症を起こしていた関節炎ランＩ・の足組織のフルルビ
プロフェン単独若しくばＣＭＴ単独又は２薬入のゼーチ
ン　　　　の 実ＪｒｔＪ　　　　　　　［’ｎ−メチ＋ｃ　］　　　
統計学的有意性ｖｔ橋１１帽←　−（対−」且 １、（未処置関節炎）　　　７６．２±、４Ｔ、（関節
炎４フルルヒプＵフエン）　６８．３±３．２　　　有
意１生なし；ｐ＞０．０５１、（関節炎＋ＣＭＴ）　　
　　５２．２±４．９　　有意性あり；ｐ＜０．０］Ｉ
Ｖ、（関節炎千両薬剤）、　　４５．６±３．７１　　
有、☆：性あり；ｐ＜０．０１オ各値ば６ラツｌ−／群
についての平均値±Ｓ、Ｅ、Ｍ。

を表ず。

上記の結果より、関節炎ラットのＣＭＴ単独若しくはフ
ルルビプロフェン単独での処置が関節の病理学的変化の
いくらかの改善をもたらすと一つの結論ができる。しか
し、関節炎ラットの両薬剤の配合剤での処置は、組織破
壊性炎症を起こしている関節の変化に最大の軽減をもた
らす。

開缶Ｊ２− 関節炎により誘発された骨及び関節の破壊において、化
学修飾非抗生物質性テ（−ラザイイ・）・ご。

（４−デジメチルアミノテＩ・ラザイクリン）単独、非
ステロイド抗炎症薬（フルルビプロフェン）、及びフル
ルビプロフェンとＣＭ　Ｔとの組合せを使用して達成し
た結果を比較することにより、本発明の有効性を決定す
る更に別の実験を実施した。

実験を実施するために、各々約１２０ｇの開始時の体重
を有するルイス系成熟ランＩ・を使用した。ラットを次
のように５群に分げた。即ら、注躬廿ず関節炎を誘発し
なかった６匹ラント群、フロインドアジュバントの注射
により関節炎を起こさせた４８匹ルイス系成熟ラットで
あった。関節炎ラットを次のような実験群に分けた。即
ち、 １群−賦形剤のみ（即ち、２％カルボギシメチルセルロ
ース）を経口投与した未処置関節炎ランド群、 ■群−日を基準にして、ラット１匹当たり４　ｍｇＺ日
の投与割合で、化学修飾テ１−ラザイクリン（ＣＭＴ）
で経口挿管処置関節炎ラット群、■群−非ステロイド抗
炎症薬フルルビプロフェン（ラント１匹当たり０．５ｎ
＋ｇ／Ｂの投与割合）で経口挿管処置関節炎ラント群、
及び ＴＶ群−ＣＭＴとフルルビプロフェンとの組合セを、単
味活性成分での処置に関して前述した投与量で処置した
関節炎ラット群、であった。

関節炎を誘発した後２３日に、各群のラットの半分を剖
検した。後足を解剖し、骨と関節のラジオグラフを、高
感度Ｘ線フィルムを使用して撮影した。二人の経験のあ
る独立した試験者により盲検的にＸ線を採点し、ラント
の異なる５群にお＆Ｊる、関節炎付破壊の重篤度を評価
した。採点を５次の基準、即ち、１−正常な、２−ゆる
やかな、３−中程度の、そして４−重篤な骨破壊という
基準に従って与えた。最初の試験後、別の経験のある試
験者がその結果を採点した。結果を表Ｈに記載する。

ｌ−、Ｈ 非関節炎対照　　　　、０　　０±０ 関節炎十賦形剤　　　２．８　　０±０関節炎十〇ＭＴ
　　　　２．４　　１２．８±０．５（ＳＥＭ）関節炎
子方しルビプＵフェン　　　　２．０　　　　　　０±
０関節炎十両薬剤配合　、１　　１２．４±、３（ＳＥ
Ｍ）＊血清濃度データば１４１」目に撲殺したラットか
ら得た。

上記のデータは、１群当たり６匹の骨について３人の試
験者の平均採点を示す。但し、ＣＭＴとＮＡＳ　Ｉ　Ｄ
との配合剤で処置した群については５匹の骨を使用した
。

詰−果 １、　単独で使用した活性成分、ＣＭ　Ｔ及びフルルビ
プロフェンの各々は、２３日のプロトコールの間、関節
炎誘発骨と関節の破壊において僅かしか抑制効果かなか
った。この結果は、成分の各ｋが別々に有効であるので
はないかという予測に研究者を導く文献に記載されてい
るような当初の確信からのると、全く驚くべきことであ
る。

２、　　ＣＭＴとフルルビプロフェンの組合せは、実験
中に関節炎誘発されていたランドにおける骨破壊及び関
節破壊を防止するのに非常に有効な能力を発揮した。

３、　この実験の結果から更に得られる情報は、ＣＭＴ
と絹み合わせたフルルビプロフェンの経口投与がＣＭＴ
の血清濃度を減少させなかったことを示していることで
ある。

炎症の程度を決定するために、このプロトコールの前後
で、後足の直径を物理的測定をすることにより、更にデ
ータが得られた。第１図に示されているデータは、ＣＭ
Ｔとフルルビプロフェンの組合せ使用の結果として、炎
症の劇的な減少を明らかに描写している。

事実、関節炎ラットに投与されたＣＭＴとフルルビプロ
フェンとの組合せは、正常な非関節炎ラットから得られ
る後足直径採点と木質的に同等の採点をもたらした。Ｃ
１ｙｌ　Ｔｉｌ独で処置されたうン１へから得られた後
足は高度の炎症を示した。一方、フルルビプロフェンの
みで処置されたラットから得られた後量では、予測通り
に、明瞭な抗炎症効果をもたらした。関節炎ラットの未
処置後量では、期待通りの標準的な炎症足の直径測定値
を示した。

これは、組合せたことによる活性の効果の劇的な成績で
ある。

基本的には、第二番目の実験の効果は、第一番目の実験
の結果を確認するものであり、組織破壊性疾病の治療に
おける本発明の大きな有効性をはっきりとさせるもので
ある。

従って、本発明の好適な実施態様と現在思われるものを
記載したが、その他の変更及び更に修正することは当業
界の熟達者にとって明らかであろう。本発明の精神内に
あるようなかかる変更や修正の総てが本発明に含まれる
ことを意図している。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の使用により達成される予朋できない卓
越した炎症治療特徴を示す図表である。 囮 ５ ！

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、（ａ）抗コラゲナーゼとして有効であるが抗生物質
   として有効でない量のテトラサイクリン；及び （ｂ）抗コラゲナーゼとして有効な量のテトラサイクリ
   ンと配合すると、骨減損の顕著な減少をもたらす量の非
   ステロイド抗炎症剤 を含む、メタロプロテアーゼの過剰活性に関連するリウ
   マトイド関節炎及びその他の組織破壊性疾病を罹患する
   哺乳類の治療用組成物。 ２、テトラサイクリンがデジメチルアミノテトラサイク
   リンである、請求項１記載の組成物。 ３、デジメチルアミノテトラサイクリンが、４−デ（ジ
   メチルアミノ）−テトラサイクリン、４−デ（ジメチル
   アミノ）−５−オキシテトラサイクリン、４−デ（ジメ
   チルアミノ）−７−クロロテトラサイクリン、４−ヒド
   ロキシ−４−デ（ジメチルアミノ）−テトラサイクリン
   、５ａ，６−アンヒドロ−４−ヒドロキシ−４−デ（ジ
   メチルアミノ）テトラサイクリン、６−デオキシ−６−
   デメチル−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、及
   び６−α−デオキシ−５−ヒドロキシ−４−デジメチル
   アミノテトラサイクリンからなる群から選択される、請
   求項２記載の組成物。 ４、テトラサイクリンが６α−ベンジルチオメチレンテ
   トラサイクリン、テトラサイクリンの２−ニトリロ類似
   体、テトラサイクリンのモノ−Ｎ−アルキル化アミド、
   ６−フルオロ−６−デメチルテトラサイクリン、又は１
   １α−クロロテトラサイクリンである、請求項１記載の
   組成物。 ５、非ステロイド抗炎症剤がサリチレート、酢酸類、プ
   ロピオン酸類、フェナメート類、ピラゾール類、及びオ
   キシカム頚からなる群から選択される、請求項１記載の
   組成物。 ６、前記サリチレートがアセチルサリチル酸及びジフル
   ニサールからなる群から選択され、前記酢酸類がインド
   メタシン、スリンダク、トルメチン、ジクロフェナック
   及びエトドラクからなる群から選択され、前記プロピオ
   ン酸類がフルルビプロフェン、ナプロキセン、ケトプロ
   フェン及びイブプロフェンからなる群から選択され、前
   記オキシカム類がピロキシカム及びイソキシカム類から
   なる群から選択され、そして、フェナメート類がメクロ
   フェナメート及びフルフェナム酸からなる群から選択さ
   れる、請求項５記載の組成物。 ７、非抗生物質性テトラサイクリンが約０．１ｍｇ／ｋ
   ｇ／日〜約２４ｍｇ／ｋｇ／日の量で存在し、そして、
   非ステロイド抗炎症剤が約０．３ｍｇ／ヒト／日〜約３
   ５００ｍｇ／ヒト／日の量で存在する、請求項１記載の
   組成物。 ８、非ステロイド抗炎症剤が、関節炎を治療するのに使
   用される通常の抗炎症剤の用量の約２０％〜約８０％の
   量で存在する、請求項７記載の組成物。 ９、前記非抗生物質性テトラサイクリンが約２ｍｇ／ｋ
   ｇ／日〜約１８ｍｇ／ｋｇ／日の量で存在する、請求項
   ８記載の組成物。 １０、前記過剰のメタロプロテアーゼに関連する組織破
   壊性疾病が、変形性関節症、角膜潰瘍、表皮水泡症、骨
   粗鬆症を含む代謝性骨疾病、基底膜に対する損傷をもた
   らす疾患、基底膜の細胞通過を伴う疾患、及び歯囲疾患
   からなる群から選択される、請求項１記載の組成物。 １１、（ａ）抗生物質として有効でない量の抗コラゲナ
   ーゼテトラサイクリン；及び （ｂ）成分（ａ）のテトラサイクリンと配合すると、骨
   減損の顕著な減少をもたらす量の非ステロイド抗炎症剤 からなる、過剰のメタロプロテアーゼに関連するリウマ
   トイド関節炎及びその他の組織破壊性疾病を罹患する哺
   乳類の治療のための組合せ。 １２、テトラサイクリンがデジメチルアミノテトラサイ
   クリンである、請求項１１記載の組合せ。 １３、デジメチルアミノテトラサイクリンが、４−デ（
   ジメチルアミノ）−テトラサイクリン、４−デ（ジメチ
   ルアミノ）−５−オキシテトラサイクリン、４−デ（ジ
   メチルアミノ）−７−クロロテトラサイクリン、４−ヒ
   ドロキシ−４−デ（ジメチルアミノ）−テトラサイクリ
   ン、５ａ，６−アンヒドロ−４−ヒドロキシ−４−デ（
   ジメチルアミノ）テトラサイクリン、６−デオキシ−６
   −デメチル−４−デジメチルアミノテトラサイクリン、
   及び６−α−デオキシ−５−ヒドロキシ−４−デジメチ
   ルアミノテトラサイクリンからなる群から選択される、
   請求項１２記載の組合せ。 １４、テトラサイクリンが６α−ベンジルチオメチレン
   テトラサイクリン、テトラサイクリンの２−ニトリロ類
   似体、テトラサイクリンのモノ−Ｎ−アルキル化アミド
   、６−フルオロ−６−デメチルテトラサイクリン、又は
   １１α−クロロテトラサイクリンである、請求項１１記
   載の組合せ。 １５、非ステロイド抗炎症剤がサリチレート、酢酸類、
   プロピオン酸類、フェナメート類、ピラゾール類、及び
   オキシカム類からなる群から選択される、請求項１１記
   載の組合せ。 １６、前記サリチレートがアセチルサリチル酸及びジフ
   ルニサールからなる群から選択され、前記酢酸類がイン
   ドメタシン、スリンダク、トルメチン、ジクロフェナッ
   ク及びエトドラクからなる群から選択され、前記プロピ
   オン酸類がフルルビプロフェン、ナプロキセン、ケトプ
   ロフェン及びイブプロフェンからなる群から選択され、
   前記オキシカム類がピロキシカム及びイソキシカム類か
   らなる群から選択され、そして、フェナメート類がメク
   ロフェナメート及びフルフェナム酸からなる群から選択
   される、請求項１５記載の組合せ。 １７、非抗生物質性テトラサイクリンが約０．１ｍｇ／
   ｋｇ／日〜約２４ｍｇ／ｋｇ／日の量で存在し、そして
   非ステロイド抗炎症剤が約０．３ｍｇ／ヒト／日〜約３
   ５００ｍｇ／ヒト／日の量で存在する、請求項１１記載
   の組合せ。 １８、非ステロイド抗炎症剤が、関節炎を治療するのに
   使用される通常の抗炎症剤の用量の約２０％〜約８０％
   の量で存在する、請求項１７記載の組合せ。 １９、前記非抗生物質性テトラサイクリンが約２ｍｇ／
   ｋｇ／日〜約１８ｍｇ／ｋｇ／日の量で存在する、請求
   項１８記載の組合せ。 ２０、前記過剰のメタロプロテアーゼに関連する組織破
   壊性疾病が、変形性関節症、角膜潰瘍、表皮水泡症、骨
   粗鬆症を含む代謝性骨疾病、基底膜に対する損傷をもた
   らす疾患、基底膜の細胞通過を伴う疾患、及び歯囲疾患
   からなる群から選択される、請求項１１記載の組合せ。