JPH03167473A

JPH03167473A - 抗ｄｎａ抗体結合活性測定法および測定用キット

Info

Publication number: JPH03167473A
Application number: JP29096489A
Authority: JP
Inventors: Masahide Kawamura; 雅英川村; Haruo Nishie; 晴男西江
Original assignee: Nippon DPC Corp
Current assignee: Nippon DPC Corp
Priority date: 1989-11-08
Filing date: 1989-11-08
Publication date: 1991-07-19

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】「産業上の利用分野」本発明は抗ＤＮＡ抗体の結合活性（Ａｙｉａｉｔｙ）を測定するための方法と該測定に用いる測定用キットと
に関する。

「従来の技術」周知のように、全身性紅斑性狼ｆｉ　ＣＳｙｓＬｅｍｉ
ｃＬｒｒｐｕｓ　Ｅｒｙｔｈｅｔａ＊ｔｏｓｕｓ：以下
、ＳＬＥと略す）は自己免疫疾患であり、自己のＤＮＡ
分子に対して特異的に結合する抗ＤＮＡ抗体を産生ずる
。この抗ＤＮＡ抗体の産生量（抗体価として表される）
はＳＬＨの重症度を反映するものなので、血清に含まれ
る抗ＤＮＡ抗体の抗体価を測定することによって、ＳＬ
Ｅを容易に診断することが可能である。このことから、
ＳＬＥ診断のための臨床検査に抗ＤＮＡ抗体の抗体価を
測定する方法が用いられてきた。

しかし、近午になって、抗ＤＮＡ抗体の抗体価のみなら
ず、この抗ＤＮＡ抗体の質、すなわち抗ＤＮＡ抗体の抗
原ＤＮＡに対するａｖｉｄｉｔｙ（以下、結合活性と呼
ぶ）が注目されるようになってきた。

なぜなら、この結合活性はＳＬＨの診断およびＳＬＥ患
者が余病を併発する危険性等の判断に利用することが可
能であるからである。例えば、結合活性の高い抗ＤＮＡ
抗体を持つＳＬＥ患者は、ループス腎症へ移行する可能
性が高く、また結合活性の低い抗ＤＮＡ抗体を持つＳＬ
Ｅ患者は中枢神経障害を起こす可能性が高いということ
が報告されている（　Ｒ．　Ｓｍｅ＊ｎｋ　：　Ｉｒｎ
ｔｓａｎｏｓｓｓｓｙＴｅｃｂ＋＋ｏｌｏ（ｙ．　２　
　目ｉ，　Ｓ．　Ｂ．　Ｐｓｉ．，　Ｅｄ．　ｆｉｌｔ
ｅｒｄＣＧｒｎｙＬｔｒ，　Ｂｅｒｌｉｎ．　１９８６
）。

このような知見に基づいて、抗ＤＮＡ抗体価の測定によ
るＳＬＨの診断のみならず、抗ＤＮＡ抗体そのものの結
合活性からＳＬＥ診断を試みる検査方法が幾通りか試み
られている。例えば硫酸アンモニウム塩析法によって求
められた抗ＤＮＡ抗体の抗原ＤＮＡに対する結合率とポ
リエチレングリコール（以下、ＰＥＧと略す）沈澱法に
よって求められた抗ＤＮＡ抗体の抗原ＤＮＡに対する結
合率との比によって、抗ＤＮＡ抗体の結合活性を推定す
る方法（Ｒ．　Ｓ＋ａｅ＊ａｋ　：　　ｌｍ＋ｕ＋＋ｕ
＋＊ｓｓａｙＴｅｃｈａｏｌｏｌｙ．　２　１４５，　
Ｓ．　Ｂ．　Ｐａｌ．，　Ｅｄ．　Ｌｉｔｅｒ　ｄｅＧ
ｒ＋＋ｙｔｃｒ，　　Ｂｅｒｌｉｎ．　　１９８６）、
ＣｒｉＬｈｉｄｉｍ　Ｌａｃｉｓｅを用いた間接蛍光抗
体法において洗浄液中の塩濃度やｐＨを変化させること
によって、抗原ＤＮＡと抗ＤＮＡ抗体とを解離させ、そ
の解離度から抗ＤＮＡ抗体の結合活性を推定する方法（
Ｒ．Ｓｎｅｅｎｋ：　ＩｍｍｕｎｏｌｏＨｉｃａｌ　Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ．　１０９　２７−３５，１０８）、ある
いは硫安塩析やＰＥＧ法において抗原ＤＮＡと抗ＤＮＡ
抗体とを反応させた後、大量のＤＮＡや塩を加えて抗原
ＤＮＡと抗体ＤＮＡとを解離させ、その解離度から抗Ｄ
ＮＡ抗体の結合活性を推定する方法（ＭｃＧｒａｔｂ　
Ｊｒ．，　ｓｔ　ｓｌ．：Ａｒｔｈｒｉｃｉｓ　Ｒ！ｕ
ｍｉ口ｓｍ　２８　４Ｎ−４３０．　１９８５）等が試
みられてきた。

これらの方法は、いずれも抗原ＤＮＡと抗ＤＮＡ抗体と
を結合させたのち、高塩濃度、極端なｐＨ変化あるいは
過剰な抗原処理等によってその結合を解離させ、その解
離度から結合活性を推定しようとするもので、以下のよ
うな原理に基づく。

すなわち、抗ＤＮＡ抗体（Ａｂ）と抗原ＤＮＡ　（ＤＮ
Ａ）は、反応液中においてＡ　ｂ　＋　Ｄ　Ｎ　Ａ−一
→Ａｂ−ＤＮＡ　　　・・・　（１）１１（ｋ．は結合反応速度定数、ｋ，は解離反応速度定数を
示す）のような平衡状態にあり、順方向（→）の反応（
結合反応）に比べて逆方向（←）の反応（解離反応）は
反応速度が極めて遅い。このような場合、平衡状態に達
した（１）式に関する反応系に、高塩濃度処理または極
端なｐｕ変化をおこなうことによって、一部解離した抗
原ＤＮＡおよび抗ＤＮＡ抗体の電荷を変化させて結合反
応の速度を極めて遅くすることができる。すなわち、（
１）式の反応はｋ＋’ Ａｂ＋ＤＮＡにーＡｂ−ＤＮＡ　　・・・（２）κａとなり、ｋ″，＜（ｋ，となる。

「発明が解決しようとする課題」しかし、従来の方法では、高塩濃度や急激なｐＨ変化等
によって抗原ＤＮＡや抗ＤＮＡ抗体の荷電状態を変化さ
せ、抗！ＤＮＡと抗ＤＮＡ抗体との結合反応速度を解離
反応速度に比べて著しく遅くさせ、結合した抗ＤＮＡ抗
体、ＤＮＡ複合体を解離させるものなので、上記（２）
式の反応が平衡に達したかどうかを判断することが困難
であり、（２）式の反応が平衡に達する前に、反応停止
処理を行って抗原ＤＮＡと抗ＤＮＡ抗体との解離度を測
定してしまうことが多い。また、上記した０．６　〜Ｉ
ＯＭのようなＮａＣ　１濃度下（２）式の反応が平衡状
態にまで達すれば、殆ど総ての抗体が解離してしまう。

このため、従来の方法では、抗ＤＮＡ抗体の結合活性を
正確に求めることが困難であるという問題があった。

この発明は前記事情に鑑みてなされたもので、抗原ＤＮ
Ａと抗ＤＮＡ抗体との結合後ではなく、解離反応が平衡
状態に達した段階で抗ＤＮＡ抗体の結合活性を測定する
ことが可能な抗ＤＮＡ抗体結合活性測定法とそのための
測定用キットを提供しようとするものである。

「課題を解決するための手段」上記課題を解決するために、本願発明者が鋭意研究を重
ねたところ、次のような知見を得るに至つｔこ。

すなわち、従来から抗ｉＤＮＡと抗ＤＮＡ抗体とが結合
して形或される複合体を解離させるためには、この複合
体を０．６　〜：ｌＯＭ　ＮａＣ＋を含む強イオン濃度
の緩衝液に溶解させることが必要と考えられていたが、
反応緩衝液中では塩濃度をわずか０．０２５〜０．１Ｍ
程度変化させることによっても、抗ＤＮＡ抗体の抗原Ｄ
ＮＡに対する結合率を大きく変化させることが可能であ
ることを見いだした。すなわち、抗原ＤＮＡと抗ＤＮＡ
抗体との結合は、クーロン力による結合に依存している
ことが多いので（Ｄｃ　Ｇｒｏｏｍ．，　ｅｌ　ｓｌ．
：　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃｉｌ　Ｃｏｍｍａａｉｃｘ
ｔｉｏｎ　９５　Ｉｓ，　１９８Ｇ）、反応液中の塩濃
度の変化に伴って、抗原ＤＮＡと抗ＤＮＡ抗体との反応
の場のイオン強度（　ｉｏｎｉｃａｔｍｏｓｐｂｅｒｔ
）が変化し、これによって上記反応式のｋ．およびｋ，
値がそれぞれ変化すると考えられる。

そこで、本発明では、放射性同位元素（　１２８　（１
３Ｈ，　目Ｃまたは３！Ｐ）で標識したＤＮＡを塩濃度
の異なった２種類の緩衝液（低イオン強度緩衝液および
高イオン強度緩衝液）に溶解し、これらの緩衝液に抗Ｄ
ＮＡ抗体を含む試料を加えて撹拌したのち、一定時間イ
ンキユベートすることによって、抗ＩＪＦ［ＤＮＡと抗
ＤＮＡ抗体とを反応させて複合体を形或させ、さらにこ
れの複合体を、５０％飽和硫安を用いた塩析によって析
出させたのち、それらの複合体に含まれる放射能を測定
し、その比を求めることによって、すなわちそれぞれの
緩衝液中における複合体の形戊率と上記した両緩衝液に
おける抗ＤＮＡ抗体の抗原ＤＮＡに対する結合率との比
を求めることによって、上記試料中に含まれる抗ＤＮＡ
抗体の結合活性を測定するようにした。

ここで、５０％飽和硫安を用いる理由は、上記複合体を
析出させるのに好適であり、また１２６　１ＤＮＡを用
いる抗ＤＮＡ抗体のラジオイムノアッセイにおいても、
”’Ｉ−ＤＮＡと抗ＤＮＡ抗体との複合体と遊離”’Ｉ
−ＤＮＡとを分離するのに好適に用いられているからで
ある。

上記緩衝液中の塩は、ＮａＣ　１％ＫＣ　Ｉ，（Ｎ　Ｈ
　４）　ｚｓ　Ｏ　イＮ　ａ　ｉｓ　Ｏ　ａ等の水に溶
けて電離するあらゆる塩類を用いることが可能であり、
また塩濃度は、抗！ＤＮＡを溶解するための２つの緩衝
液の塩濃度の差が、１０〜５００ｍＭ好ましくは２５〜
２００ｍＭになるようにする。

上記の抗原ＤＮＡを、適当な低イオン強度緩衝液および
高イオン強度緩衝液に溶解して冷蔵保存可能にし、かつ
必要に応じて適量取り出させるようにすることによって
、本発明の抗ＤＮＡ抗体結合活性測定法に用いる測定用
キットとすることが可能である。

なお、本発明に用いる２種類の塩濃度の異なる緩衝液（
低イオン強度緩衝液および高イオン強度緩衝液）をＤＮ
ＡまたはＣｒｉｔｈｉｄｉａ　ｌｕｃｉａｅ等の細胞を
固相化させたラジオイムノアッセイ法（ＲＩＡ）、エン
ザイムアッセイ法（Ｅ　Ｉ　Ａ）または蛍光抗体法（Ｆ
　Ｉ　Ａ）に用いることによって、本発明を実施するこ
とも可能である。

次に、本発明を実施例Ｊこもとづいて、具体的に説明す
る。

「実施例」（実施例１）抗原となるＤＮＡは、通常の方法により精製されたプラ
スミドｐＮＤＰｃｌ　（特開平ｌ一９２６６０号）を制
限酵素Ｂａｎｌによって切断することによって得られた
、１．１ｋｂｐおよび１．２ｋｂｐのＤＮＡ断片を用い
た。

すなわち、プラスミドｐＮＤＰＣ　１を持つ大腸菌（　
Ｅ．　ｃｏｌｉ　　ＫＩ２、ＪＭＩ０９株）をＬＢ培地
（１％トリプトン、０．５％酵母エキス、０．５％Ｎａ
Ｃ　１）で培養し、通常の方法（Ｔ．　Ｍｉｎｉｘｔｉ
ｓｔｔ　ｊｌ．：　Ｍｏｌｅｃｕｌｘｒ　　ＣＩｏｎｉ
Ｂ，　Ｃｏｌｄ　ＳｐｒｉｎｇＢｓｒｂｏｒ　ｌｘｂ．
，　１９８２）で上記プラスミドＤＮＡを精製する。つ
ぎに、この精製されたプラスミドＤＮＡを、反応液（　
７　ｍ　Ｍ　　Ｍ　ｇ　Ｃ　Ｉ　！、７ｍＭ２−メルカ
プトエタノールおよび０．１％牛血清アルブミン（以下
、ＢｓＡと略す）を含む１　０ｍＭＴｒ　ｉ　ｓ−ＨＣ
　１緩衝液：ｐＨ８．５）に溶解し、制限酵素Ｂａｎｌ
Ｊこよって切断する。

この切断によって、１．１ｋｂおよび１　．２　ｋ　ｂ
からなるプラスミドＤ　Ｎ　Ａ・断片を得る。

つぎに、これらのプラスミドＤＮＡ断片を、反応液（　
１　０　ｍＭ　　Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ　イ１　ｍＭジチオス
レイトール、５００μｇ／ｍｌｌ　　ＢＳＡ１　１ｍＭ
ｄＧＴＰ，１ｍＭ　　ｄＡＴＰおよび１ｍＭｄＴＴＰを
含む５　０ｍＭＴｒ　ｒ　ｓ　−ＨＣ　ＪＪｉｌ衝液：
ＰＨ７．２）に溶解し、つづいて＋！８（−ｄＣＴＰお
よびＤＮＡポリメラーゼ！・ラージ７ラグメント（クレ
ノー酵素）をこの反応液に加えてプラスミドＤＮＡ断片
をＩ２８■標識する。

さらに　１２６７ｍ識されたプラスミドＤＮＡ断片を低
イオン強度緩衝液（５０ｍＭホウ酸、１５ｍＭ　　ＥＤ
ＴＡ，０．０　１％ＮａＮ，、Ｉ）Ｈ８．５）および高
イオン強度緩衝液（５０ｍＭホウ酸、１　５ｍＭ　　Ｅ
ＤＴＡ，０．０　１％ＮａＮ３、５０ｍＭまたは１００
ｍＭ　　ＮａＣｌ、ｐ｝１８．５）に加えて溶解させる
。このとき、＋２Ｊｉ［識されたプラスミドＤＮＡ断片
の濃度が各緩衝液とも０．２ＰＣｉ／ｍｅになるように
する。

以上により、抗原ＤＮＡとして使用する口Ｊ標識された
プラスミドＤＮＡ断片が調整される。

つぎに、抗原ＤＮＡと抗ＤＮＡ抗体との結合反応を行わ
せる。

抗ＤＮＡ抗体を含む試料（ＳＬＥ血清）を２本の試験管
に２５μαづつ分注し、さらにこれらの試験管のうちの
１本に上記の方法により調整された抗原ＤＮＡを含む低
イオン強度緩衝液を２００μ直加え、他方の試験管に口
５！標識抗原ＤＮＡ断片を含む高イオン強度緩衝液を２
００ｐＱ加えて、それぞれをよく混和してインキュベー
ト（３７’Ｃ，２時間）する。インキュベーション後、
硫酸アンモニウム溶液（硫酸アンモニウム３６０ｇを蒸
留水ＩＩｌに溶解）をそれぞれの試験管に１ｍＡ加えて
混和し、反応を停止させる。

つづいて、遠心（ｌｓｏｏｘｇ，１５分間）により抗原
ＤＮＡと抗ＤＮＡ抗体との複合体を沈澱させ、上澄みを
吸引除去したのち、γ（ガンマ）カウンターで放射能を
測定する。得られた放射能測定値は抗ＤＮＡ抗体と抗原
ＤＮＡとの結合率を反映させたものである。ここでは、
結合率をγカウンターで測定された上記放射能測定値に
対する上記遠心操作前の全放射Ｉ＠測定値の比としてパ
ーセント表示した。

対照としてＳＬＥ血清のかわりに、ヒト正常血清を用い
て上記と同様の操作を行う。

このようにして求められたそれぞれの試験管に対応する
結合率から、以下に示す式によって、抗ＤＮＡ抗体の結
合活性を結合活性指数（Ａｖｉｄｉｔｙｌａｄｅｘ：　
Ａ　Ｉ　）として表すことができる。

Ａｔ（％）−｛Ｂ（ＩＩｓＴ）−Ｎ（■ＳＴ））／｛Ｂ
（ＬＳＴ）−Ｎ（ＬＳＴ）ＩＸＩＯＯただし、Ｂ（ＨＳＴ）：高イオン強度下におけるＳＬＥ血清の結
合率、Ｎ（ＩＩｓＴ）：高イオン強度下における正常血清の結
合率、Ｂ（ＬＳＴ）：低イオン強度下におけるＳＬＥ血清の結
合率、Ｎ（ＬＳＴ）：低イオン強度下における正常血清の結合
率、とした。

その結果、第１表に示すような結果を得た。

（以下余白）（表１）抗ＤＮＡ抗体価（Ｕ／ｍ１）２６４．５１５２．０１７０．０６５．１５６．６６０．７Ａ　Ｉ　８６（％）７３．Ｏ３５．６３４．ｌ４ｌ．６５０．６６０．１ＡＩ，。。ＯＯｓ２。７１３．４９．１＋５．２２４．０Ｎ．７なお、表１に示した抗ＤＮＡ抗体価は、一般に市販され
ている日本ＤＰＣ社製「リコンジェン抗ＤＮＡキット」
によって求めた。

また、高イオン強度緩衝液中のＮａＣ　１濃度を５０ｍ
ＭとしたときのＡＩ値をＡｌｌ。として表し、１００ｍ
ＭとしたときのＡＩ値をＡｌｌ＠Ｏとして表した。

以上のように、本実施例においては抗ＤＮＡ抗体の結合
活性を正確に、かつ容易に測定することが可能である。

（実施例２）抗原となるＤＮＡは、通常の方法により精製されたプラ
スミドｐＮＤＰＣ１　（特開平１一９２６６０号）を制
限酵素Ｂａｎｌによって切断することによって得られた
、１．１ｋｂｐおよび１．２ｋｂｐのＤＮＡ断片を用い
た。

すなわち、プラスミドｐＮＤＰｃ１を持つ大腸菌（Ｅ．
　ｃｏｌｉ，　Ｋｌ２　ＪＭＩ０９株）をＬＢ培地（１
％トリプトン、０．５％酵母エキス、０．５％ＮａＣ　
Ｉ）で培養し、通常の方法（↑．　ＭａｎｉａＬｉｓｅ
ｔ　　！１．：　　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　　ＣＩｏｎｉ
Ｂ，Ｃ＋Ｉｄ　　ＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ　ｔａｂ．
，　１９ｇ２）で上記プラスミドＤＮＡを精製する。つ
ぎに、この精製されたプラスミドＤＮＡを、反応液（　
７　ｍＭ　　Ｍ　ｇ　Ｃ　１　ｘ、７ｍＭ２−メルカプ
トエタノールおよび０．１％ＢＳＡを含む１　０ｍＭＴ
ｒ　Ｉｓ　−ＨＣ　Ｉ緩？＃液：ｐＨ８．５）に溶解し
、制限酵素Ｂａｎｌによって切断する。この切断によっ
て、１．１ｋｂおよび１．２ｋｂからなるプラスミドＤ
ＮＡ断片を得る。

つぎに、これらのプラスミドＤＮＡ断片を、反応液（　
１　０　ｍＭ　　Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ　イ１　ｍＭジチオス
レイトール、５００μｇ／ｍｊｌ　　ＢＳＡ，１ｍＭｄ
ＧＴＰ，１ｍＭ　　ｄＡＴＰおよび１ｍＭｄＴＴＰを含
む５０ｍＭＴｒｆｓ−ＨＣＩ緩衝液：　ｐＨ７．２）に
溶解し、つづいて目Ｊ−ｄＣＴＰおよびＤＮＡポリメラ
ーゼＩ・ラージ７ラグメント（クレノー酵素）をこの反
応液に加えてプラスミドＤＮＡ断片を目６！標識する。

さらに、＋ｘｓＩ標識されたプラスミドＤＮＡ断片を低
イオン強度緩衝液（５０ｍＭホウ酸、ｌ５ｍＭ　　　Ｅ
ＤＴＡ，　　０．０１　％Ｎ　ａ　Ｎ　ｓ、　ｐＨ８．
５）および高イオン強度緩衝液（５０ｍＭホウ酸、１　
５ｍＭ　　ＥＤＴＡ，０．０　１％Ｎ　ａ　Ｎ　ｚ、５
０ｍＭまたは１００ｍＭ　　ＮａＣＩ，ｐＨ８．５）に
加えて溶解させる。このとき、口１標識されたプラスミ
ドＤＮＡ断片の濃度が各緩衝液とも０．２μＣｉ／ｍａ
になるようにする。

以上により、抗原ＤＮＡとして使用するＩＩＩ　１標識
されたプラスミドＤＮＡ断片の調整される。

あるＳＬＥ患者から経日的に採血し、採血毎に血清を分
離して抗ＤＮＡ抗体を含む試料（ＳＬＥ血清）とする。

各試料を２本の試験管に２５μｔづつ分注し、さらにこ
れらの試験管のうちの１本に上記の方法により調整され
た抗原ＤＮＡを含む低イオン強度緩衝液を２００μｌ加
え、他方の試験管に抗原ＤＮＡを含む高イオン強度緩衝
液を２００μα加えて、それぞれをよく混和してインキ
ュベート（３７゜Ｃ，２時間）する。インキュベーショ
ン後、硫酸アンモニウム溶液（硫酸アンモニウム３６０
ｇを蒸留水１ａに溶解）をそれぞれの試験管にｌｍｌｌ
加えて混和し、反応を停止させる。

つづいて、遠心（１５００Ｘｇ，１５分間）により抗ｊ
ＫＤＮＡと抗ＤＮＡ抗体との複合体を沈澱させ、上澄み
を吸引除去したのち、γカウンターで放射能を測定し、
実施例ｌと同様にして結合率およびＡＩ値を求めた。

このようにして、第１回目の採血日をＯ日として、経口
的に採血を繰り返して試料を得、各試料から求めたＡＩ
値および抗ＤＮＡ抗体価を第１図にプロットした。

なお、抗ＤＮＡ抗体価は、一般に市販されている日本Ｄ
ＰＣ社製「リコンジエン抗ＤＮＡキット」によって求め
た。

また、高イオン強度緩衝液中のＮａＣＩ濃度を５０ｍＭ
としたときのＡＩ値をＡＩ．。として表し、１００ｍＭ
とじＩ；ときのＡＩ値をＡＩ，。。とじて表しＩ；。

第１図に見るように、抗ＤＮＡ抗体価の経口的変化に比
例して、Ａ，。値およびＡ１。。値が変化し、それらの
値が抗ＤＮＡ抗体の結合活性に相当する。

「発明の効果」以上説明したように、本発明によれば、血清等の試料に
含まれる抗ＤＮＡ抗体の結合活性を、抗原ＤＮＡと抗Ｄ
ＮＡ抗体とを低イオン強度の緩衝液中で反応させて求め
た抗ＫＤＮＡと抗ＤＮＡ抗体トノ結合率と、抗ｗ．ＤＮ
Ａと抗ＤＮＡ抗体とを高イオン強度の緩衝液中で反応さ
せて求めた結合率との比によって求めることができるの
で、試料中の抗ＤＮＡ抗体の結合活性を容易に、かつ正
確に測定することができる。また、この測定に用いる抗
原ＤＮＡ，低イオン強度緩衝液および高イオン強度緩衝
液を事前に調整してなる測定用キットを用いることによ
って、簡便かつ再現性の高い抗ＤＮＡ抗体結合活性測定
を行うことが可能となる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の実施例を説明するためのもので、ＳＬ
Ｅ血清の抗ＤＮＡ抗体価、Ａ１。。値およびＡ，。値の
経口的変化を示すものである。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）低イオン強度緩衝液および高イオン強度緩衝液中
において、抗ＤＮＡ抗体と抗原ＤＮＡとを反応させて前
記抗ＤＮＡ抗体の前記抗原ＤＮＡに対する結合率を求め
、さらに両緩衝液における該結合率の比を求めることに
よって、前記抗ＤＮＡ抗体の結合活性を測定することを
特徴とする抗ＤＮＡ抗体結合活性測定法。
（２）請求項（１）記載の測定法を実施するための測定
用キットにおいて、抗原ＤＮＡ、低イオン強度緩衝液お
よび高イオン強度緩衝液からなることを特徴とする測定
用キット。