JPH03141230A - ヒト腫瘍治療用注射組成物 - Google Patents
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
本見肚悲１量
がん胎児性抗原（ＣＥＡ）に対する放射性標識抗体は腫
瘍の位置測定に使用できることが知られている。ハンセ
ンらの米国特許３，９２７．１９３号はそのような方法
を開示するが、しかしその動物への使用の実施例を提供
するに過ぎない。この特許に記載されている方法は、腫
瘍部位に関連した放射能の精密な識別を妨害し得る放射
能が血液、そのイきの体液およびある種の組織、特に心
臓および肝臓のような他の体内部位にも存在する状況に
おいて、どのように腫瘍が可視化され得るのか説明して
いない。Ｒｅ１ｆ ｅｔ ａｔ、 Ｓｕｒｇ、０ｎｃｏ
ｌ、 ６，１３３（１９７４〉およびＭａｃｈ ｅｔ
ａｌ、 Ｂｕｒｏｐ、 Ｊ、 Ｃａｎｃｅｒ、 ５ｕｐ
ｐｌ。 １１１３ （Ｉ９７８）に報告されている初期の臨床的
研究は、放射性抗ＣＥＡ抗体をもってヒトのＩＩＩ瘍の
位置測定に失敗した。 Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｔ、 Ｎｅｗ Ｅｎｇ
ｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ、
２９８．１３８４（１９７８）はＣＥＡに対する放射性
標識抗体を投与されている患者のシンチレーション走査
によって腫瘍の発見および位置測定の臨床実験に成功し
たことを報告した。この文献では、血液プールバックグ
ラウンド放射能から特定の放射性抗体活性を区別するこ
とが動物およびヒトの両方の研究において問題であり、
そして他の放射性核種による特別のスキャナー減法技術
がこの方法を用いるあいまいでない腫瘍位置測定に必須
であると考えられることを記している。この文献におい
て使用された抗体製剤はＣＥＡと７０％免疫反応性であ
った。この文献はさらに正常なハムスター組織中のＣＥ
Ａの不存在は、該抗原が通常がん患者には増加したレベ
ルで循環しており、そしである正常な組織中には少量し
た存在しないヒトへ補外を阻害することを記している。 このシンチグラフ方法を使用する位置測定を可能とする
ために使用される減法技術は、各造影スキャンの前にＴ
ｅ−９９ｍ過テクネチウム酸塩およびＴｃ−９９ｍ！！
識ヒト血清アルブミンの注射を含む。得られたデータは
標識抗体単独、Ｔｃ−９９ｍ標識種との合計、およびこ
れら各種の値の和および差のデジタルイメージを発生す
ることができるミニコンピユータに記憶される。 ＣＥＡはＨｉｙｄｅｒｍａｎ＋ ５ｃａｎｄ、 Ｊ、
Ｉｍｍｕｎｏｌ、、８、。 ５ｕｐｐ１．８．１１９（１９７８）およびその他多数
によって報告されているように主として細胞表面抗原で
ある。 ５ｐａｒ、 Ｓｅｍ１ｎａｒｓ Ｉｎ Ｎｕｃｌ、 Ｍ
ｅｄ、、６，３７９（１９７６）およびＥｎｒｉｃｈ、
Ｄｅｕｔｓｈｅ Ｍｅｄ、 Ｗｏｃｈ、 ５ｃｈｒ、
１０４＋１５３（１９７９）により、ヒトの腫瘍位置
測定は腫瘍細胞の表面に存在する抗原に特異性な抗体を
必要とすると考えていた。前出Ｈｅｙｄｅｒｍａｎ、
Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ、 Ｇｕｉｌｌｏｕｚ。 ｅｔ ａｌ、 Ａｌｂｒｅｃｈｔｓｅｎ ｅｔ ａｌお
よびＲｕｏｓｌａｈｔｉ ｅｔ ａｌによるそれぞれ５
ｃａｎｄ、 Ｊ、 Ｉｔａｍｕｎｏｌ、＋８ｔＳｕｐｐ
１８ｒｐｐ、 ４８５ ｆｆ、２８９ｆｆ、１６５ｆｆ
、３ｆｆの報告により、ヒト絨毛膜ゴナンドトロビン（
ＨＣＧ）およびアルファフェトタンパク（ＡＦＰ）の両
方が細胞質性細胞内腫瘍関連物質であることが知られて
いる。 Ｑｕ３ｎｏｎｅｓ ａｔ ａｌ、 Ｊ、Ｎｕｃｌ、Ｍｅ
ｄ、＋１２．６９（１９７１）はハムスターに育成させ
たヒト絨毛膜がんは腫瘍中において動物の肝臓中に比較
して２．８倍の増加した放射性標識抗ＨＣＧ抗体の摂取
を示すことを報告した。しかしながら標識した正常Ｔｇ
Ｇによる対照研究は第２日の後注射により同様の増加し
た腫瘍摂取を示した。さらに著者は特に第３日および第
４日における組織分析により見られる、標識正常１ｇＧ
を上形る放射性抗体の摂取量の差は全身写真スキャニン
グでは観察されなかったと述べている。平井らＡｂｓｔ
ｒａｃｔｓ ６ｔｈ Ｉｎｔ、 Ｒｅｓ、 Ｇｒｏｕｐ
ｆｏｒ Ｃａｒｃｉｎｏｅｍｂｒｏｙｏｎｉｃ Ｐｒｏ
ｔｅｉｎ、 Ｍａｒｂｅｒｇ／Ｌａｈｎ。 西ドイツは移植したヒトへパトーマを持った、およびラ
ットおよびヒト卵黄のう腫瘍を持つネズミー・放射性標
識抗ＡＦＰを投与すると、腫瘍組織への抗体のホームイ
ンは見られないことを報告した。 心臓ミオシンへ特異性の抗体の開裂によって得られる放
射性標識フラグメントは、ハーバ−の米国特許第４．０
３６．９４５号において心筋梗塞の位置および寸法の決
定に使用されている。 抗体を用いる放射療法は多数の人により提案され、１例
の多モード治療的臨床使用におけるその成功の徴候が０
ｒｄｅｒ、 Ｒａｄｉｏｌ、、１１８．２１９（１９７
６）に報告されている。治療へのホウ素標識抗体の使用
は１１ａｗｔｈｏｒｎｅ ｅｔ ａｌ、、Ｊ、 Ｍｅｄ
、 Ｃｈｅｍ、、１５，４４９（１９７２）に報告され
ているが、しかし治療のためホウ素とそして位置測定の
ためラジオアイソトープの組み合わせ使用は示されてい
ない。 前出Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇらによる最近の成功した腫瘍
位置測定および検出方法といえども、その解像力、効率
および実用性を制限するいくつかの欠点を有する。米国
特許第３，９２７，１９３号は、上で論じた後の参考で
は疑問とされなかった制限である、抗ＣＥＡ抗体はその
特異性を妨害する程度まで標識してはならないことを教
える。しかもながらこれはこの方法の解像力を制限し、
そし−で像検出のために多量の抗体を必要とする。 標識した抗体は非常に大きい分子であり、そして交差反
応性の抗原性定量骨を含むことがあり、そのため交差反
応性を１５％以下に減らし、そして７０％より高い特定
抗原に対する特異性を得ることは非常に困難である。Ｇ
ｏｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｔによって使用された減
算法は、標識特異抗体とは異なる移動および分布動力学
を有する担体へ結合した異なる放射性核種の使用を含む
。加えて、バックグラウンド補償材料は各写真走査毎に
事前に注射されなければならず、これは患者を増大した
レベルの放射能および不快さへ暴露する。先行技術方法
のさらに別の制限は抗体分子が血液−脳障壁を通過でき
ないことであり、これは静脈注射した抗体が頭蓋的腫瘍
の位置測定に使用できないことを意味する。 さらに細胞表面抗原に対する抗体の使用に限定されず、
減算性技術のためバックグラウンド補償材料の反復注射
を必要とせず、診断および治療に適応でき、高度の信顛
性と高い解像力を有し、単−回の注射を使用して理想的
には腫瘍または腫瘍細胞の二以上のタイプを検出し、そ
して位置測定することができる腫瘍検出および位置測定
方法に対する需要が存在し続ける。 木光亙■■朔 従って本発明の目的は、バックグラウンド活性のコンピ
ューターを使用した減算法のため他の放射性物質の反復
注射の必要なしに、高い解像度が得られる腫瘍位置測定
および検出方法を提供することである。 本発明の他の目的は、高い特異活性およびＣＥＡに対す
る高い特異性を有し、それによりシンチグラフ法による
腫瘍位置測定および検出方法の解像度を改善する腫瘍検
出および位置測定用抗体を提供することである。 本発明のさらに他の目的は、高い解像度が得られ、そし
て細胞内腫瘍関連マーカー物質を使用するＩＩＩｍ位置
測定および検出方法を提供することである。 本発明のさらに他の目的は、高い特異活性および高い腫
瘍マーカーに対する特異性を有し、それによりシンチグ
ラフ法による腫瘍位置測定および検出方法の解像を改善
する腫瘍検出および位置測定用抗体フラグメントを提供
することである。 本発明のなお他の目的は、腫瘍関連抗原またはマーカー
の２タイプ以上に対する特異性を有するフラグメントを
化学的組合せにおいて含有する多価抗体フラグメントを
提供することである。 本発明の他の目的は、放射線治療的に有効なラジオアイ
ソトープがそれが腫瘍関連マーカーに高度に特異性の抗
体もしくは抗体フラグメントへ結合することによって腫
瘍生育部位へ集中される腫瘍放射線療法を提供すること
である。 本発明のさらに別の目的は、結合したラジオアイソトー
プ標識の検出によって位置測定されたホウ素−１０アイ
ソト一プ含有抗体もしくは抗体フラグメントが熱中性子
によって励起される腫瘍治療方法を提供することである
。 本明細書および請求の範囲をさらに検討するとき、当業
者には本発明のその他の目的および利益が明らかになる
であろう。 本見訓Δ璧！ 前記の諸口的は、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）を産生ずる
かまたはそれに関連する腫瘍の位置を決定する方法であ
って、ＣＥＡに特異であり、そして写真走査装置を使用
して検出し得る薬理学的に不活性なラジオアイソトープ
で標識した抗体を被検者に被経口的に注射することと、
そして前記腫瘍による前記抗体の発生する摂取の位置を
決定するように前記装置によりその後被検者を走査する
ことよりなる前記方法において、前記特異抗体の製造に
使用された種と同一または異なる種からの正常免疫グロ
ブリンを前記被検者に同時に注射することよりなり、前
記免疫グｌ］プリンは前記特異抗体を標識するために使
用した同じ元素の異なるラジオアイソトープで放射標識
されそして前記写真走査装置を使用して独自検知可能な
エネルギーにおいて放射するものであり、標識−した正
常免疫グロブリンは目標を指向しない特異抗体によるバ
ックグラウンド活性の分布を測定するために使用され、
前記分布は特異抗体の全活性より減算されそれにより実
質上目標を指向した腫瘍関連抗体だけの活性が測定され
ることよりなる改良の提供によ−って達成される。 本発明はさらに、前記抗ＣＥＡ抗体とし、て標識前のＣ
ＥＡ−特異免疫反応性を少なくとも７０％、および他の
抗体に対する交差反応性を１５％以下有する実質と単一
特異性抗体であって、そのＣＥＡ特異免疫反応性を５な
いし３３％減少するに充分な程度に放射標識した該抗体
を使用することを含む前記−船方法の改良を提供する。 加えて、本発明は、細胞内マーカー物質を産生ずるかま
たはそれに関連する腫瘍の検出および位置測定方法であ
って、前記マーカー物質に特異性でそして写真走査装置
を使用して検出し得る薬理学的に不活性なラジオアイソ
トープによって標識した抗体を被検者に非経口的に注射
し、そしてその後前記腫瘍による前記標識抗体の摂取部
位を検出し位置測定するため前記装置により前記被検者
を走査することよりなる前記方法を提供する。 細胞質、細胞内または細胞表面マーカー物質を産生じま
たはそれに関連する腫瘍を検出し、そして位置測定する
方法であって、前記マーカー物質に特異性な抗体の開裂
によって得られ、そして写真走査装置を使用して検出し
得る薬理学的に不活性なラジオアイソトープによって標
識した少なくとも１種のマーカー特異フラグメントを被
検者に非経口的に注射し、そしてその後前記腫瘍による
前記標識抗体フラグメントの摂取部位を検出し位置測定
するため前記装置により前記被検者を走査することより
なる前記方法が提供される。 本発明はまた少なくとも１種の細胞質、細胞内または細
胞表面マーカー物質を産生または関連する少なくとも１
タイプの腫瘍の検出および位置測定方法であって、第１
の腫瘍関連マーカーに対し特異性の抗体の開裂によって
得られる少なくとも１種のマーカー特異フラグメントと
、そして同一または異なる腫瘍関連マーカーに対し特異
性の抗体の開裂によって得られる少なくとも第２の異な
るマーカー特異フラグメントとを化学的組合せにおいて
含有する多価ハイブリッドにして、写真走査装置を使用
して検出し得る薬理学的に不活性なラジオアイソトープ
で放射標識した該ハイブリッドを被検者に非経口的に注
射することと、そしてその後前記少なくとも１タイプの
腫瘍による前記標識ハイブリッドの摂取の部位を前記装
置により検出し、位置測定するため被検者を走査するこ
とよりなる前記方法を提供する。 前記方法に使用するために好適な抗体および注射し得る
組成物と、そして放射能標識したマーカー特異性ｌＩｌ
瘍関連抗体または抗体フラグメントが提供される。 「に象１論 本発明に使用される抗体は各種の腫瘍関連抗原またはマ
ーカー物質に特異性であり、他方本発明方法に使用され
るマーカー特異抗体フラグメントはそのような特異抗体
の開裂によって製造される。 該マーカーは、腫瘍によって産生される物質、細胞質内
であれ、核内であれ、各種の機能質的であれ腫瘍細胞内
に蓄積する物質、または腫瘍細胞の上もしくはまわりに
蓄積する物質でよい。それらは細胞内または細胞表面ま
たは細胞質マーカーでよい。このような腫瘍関連マーカ
ーのうちには、）１ｅｂｅｒｍａｍによる。”Ｉｍｍｕ
ｎｏｄｊａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ−Ｆｌｅ
ｉｓｈｅｒ Ｅｄ、およびＴｈｅ Ｃｌ１ｎｉｃａｌ
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ＋
ｐａｇｅ ３４７ （八ｍ、 Ａｓ５ｎ、
Ｃｌ１ｎ、 ＣｈｅＩｌｌ。 １９７９） 、および１ｌｏｌｔｓｅｎ ｅｔ ａｌの
米国特許第４．１５０゜１４９に記載のものがある。 腫瘍関連マーカーは前出Ｈｅｒｂｅｒｍａｎにより、腫
瘍胎児抗原、胎盤抗原、腫瘍形成または腫瘍ビールス関
連抗原、組織関連抗原、臓器関連抗原、適所ホルモンお
よび通常の抗原またはその変種を含む多数のカテゴリー
に分類されている。しばしば腫瘍関連マーカーのサブユ
ニットが高い腫瘍特異性を有する抗体を上昇させるため
に有利に使用される。例えばヒト絨毛ゴナンドトロビン
（）（ＣＧ）のベーターサブユニットは、非腫瘍物質へ
の太きく減少された交差反応性を有する扉体の産生を促
進する。本発明において有用な、椋に対する特異抗体を
上昇させ得るこのような好適なマーカーは、これらに限
定されるものではないが、アルファ胎児タンパク（ＡＦ
Ｐ）、ヒト絨毛ゴナントロピン（ＨＣＧ）およびそのベ
ーターサブユニット、結腸特異抗原−ｐ （Ｃ３Ａｐ）
、がん胎児性抗原（ＣＥＡ） 、前立腺酸性フォスファ
ターゼ、すい臓Ｘｆ！瘍胎児性抗原、胎盤アルカリ性フ
ォスファターゼ、妊婦ベーター１−グロブリン、上皮小
体ホルモン、カルシトニン、組織ポリペプチド抗原、Ｔ
−抗原、ベーター２−ミクログロブリン、乳房腫瘍関連
塘タンパク（ＭＴＧＰ）、ガラクイジルトランスフェラ
ーゼ−Ｕ （ＧＴ−ＩＩ）、ｇｐ−５２ビールス関連抗
原、卵巣のう腫がん関連抗原（ＯＣＡＡ） 、乾燥腫瘍
特異抗原（ＯＣＡ） 、子宮頚管がん抗原（ＣＡ−５８
、ＣＣＡ、ＴＡ−４）。 塩基性胎児性タンパク（ＢＦＰ）、末端デオキシヌクレ
オチジルトランスフェラーゼ（ＴｄＴ）。 細胞質黒色腫関連抗原、ヒト星状細胞腫関連抗原（ＨＡ
ＡＡ）、通常グリオーマ抗原（ＣＣ；Ａ）。 膠芽胎児性抗原（ＧＥＡ）、神経膠原線維酸性タンパク
（ＧＦＡ）、通常髄膜腫抗原（ＣＭＡ）。 および腫瘍脈管形成因子（ＴＡＦ）を含む。 マーカー特異抗体はこの分野でよく知られた慣用方法に
よって製造することができる。通常動物、好ましくはネ
ズミ、ウサギ、さらに好ましくはヤギまたは霊長類に腫
瘍関連マーカー物質を挑戦させ、それに対しその免疫系
をこれらマーカーに特異性の抗体を産生ずることによっ
て反応させる。 動物を出血させ、血液の免疫グロブリン分画を単離し、
そして好ましくは１回または２回以上のアフィニティー
クロマトグラフィーを含む各種の慣用分離技術により特
異性免疫グロブリンを単離する。腫瘍関連マーカー物質
に特異な抗体を上昇させるための好適なこのような一般
法は、特に“Ｉｍｍｕｎｏｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ
Ｃａｎｃｅｒ ＋ Ｈｅｒｂｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌＥ
ｄｓ、 （Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、 Ｉｎｃ、、
ＮｅｗＹｏｒｋ ａｎｄ Ｂａ５ｅｌ。 １９７９）および”Ｔｒ＋ｓｏｒ Ｍａｒｋｅｒｓ’、
５ｅｌｌ、ｔ！ｄ、（ＨｕｍａｎａＰｅｒｓｓ、 Ｃｌ
１ｆｔｏｎ、 Ｎ、Ｊ、、 １９８）に記載されている
。 ＣＥＡ特異抗体は、とりわけＰｒｉ＋＊ｕｓ ｅｔ ａ
ｌ＋ Ｊ。 Ｉｍｍｕｎｏｌ、、１１８．５５（１９７７）； Ｇｏ
ｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ＋５ｕｐｒａ；Ｐｒｉｍ
ｕｓ ｅｔ ａｌ、 Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ、、３７．
１５４４（１９７７）；Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ
ａｌ、” Ｉｍｍｕｎｏｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｃ
ａｎｃｅｒ＋Ｐａｒｔ Ｉ”、 Ｈｅｒｂｅｍａｎ ｅ
ｔ ａｌ＋ Ｅｄｓ、＋ｐａｇｅｓ ２６５−３０６（
Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、 Ｉｎｃ、、Ｎｅｗ Ｙ
ｏｒｋ ＆ Ｂａ５ｅｌ、 １９７９）に報告されてい
る当分野で公知の各種の方法で製造することができる。 前記の慣用技術によって製造した抗体は通常抗体の混合
物であり、その一定割合が特異性であるが、しかし一般
に非！ＩＩ瘍関連または他の抗原に交差反応性の抗体を
可変割合で含有している。抗体混合物のいくつかの成分
がそれに対し交差反応性である結合抗原を使用する繰り
返しアフィニティークロマトグラフィーおよび結合した
精製抗原を含むカラムの通過によって精製した抗体は、
高い特異免疫反応性を有し、しばしば７０％近くまたは
それ以上へ達し、そして非腫瘍関連抗原または他の抗原
に対する交差反応性が１５％以下となる。 これら抗体はそれらが上昇された抗原に対して実買上モ
ノ特異性であると考えられ、そして本発明において好適
に使用される。 ｌ１ｌｌ！瘍位置測定のため、高いマーカー特異免疫反
応性を有する抗体を使用することは特に有利である。高
い特異性は、標識抗体の高割合が腫瘍部位を標的とし、
小割合が非標的態様で分布されることを意味する。それ
故標識抗体の少量を使用することができ、患者の被曝量
を減らし、そして標的へ向わない抗体によるバックグラ
ウンド放射の低い
瘍の位置測定に使用できることが知られている。ハンセ
ンらの米国特許３，９２７．１９３号はそのような方法
を開示するが、しかしその動物への使用の実施例を提供
するに過ぎない。この特許に記載されている方法は、腫
瘍部位に関連した放射能の精密な識別を妨害し得る放射
能が血液、そのイきの体液およびある種の組織、特に心
臓および肝臓のような他の体内部位にも存在する状況に
おいて、どのように腫瘍が可視化され得るのか説明して
いない。Ｒｅ１ｆ ｅｔ ａｔ、 Ｓｕｒｇ、０ｎｃｏ
ｌ、 ６，１３３（１９７４〉およびＭａｃｈ ｅｔ
ａｌ、 Ｂｕｒｏｐ、 Ｊ、 Ｃａｎｃｅｒ、 ５ｕｐ
ｐｌ。 １１１３ （Ｉ９７８）に報告されている初期の臨床的
研究は、放射性抗ＣＥＡ抗体をもってヒトのＩＩＩ瘍の
位置測定に失敗した。 Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｔ、 Ｎｅｗ Ｅｎｇ
ｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ、
２９８．１３８４（１９７８）はＣＥＡに対する放射性
標識抗体を投与されている患者のシンチレーション走査
によって腫瘍の発見および位置測定の臨床実験に成功し
たことを報告した。この文献では、血液プールバックグ
ラウンド放射能から特定の放射性抗体活性を区別するこ
とが動物およびヒトの両方の研究において問題であり、
そして他の放射性核種による特別のスキャナー減法技術
がこの方法を用いるあいまいでない腫瘍位置測定に必須
であると考えられることを記している。この文献におい
て使用された抗体製剤はＣＥＡと７０％免疫反応性であ
った。この文献はさらに正常なハムスター組織中のＣＥ
Ａの不存在は、該抗原が通常がん患者には増加したレベ
ルで循環しており、そしである正常な組織中には少量し
た存在しないヒトへ補外を阻害することを記している。 このシンチグラフ方法を使用する位置測定を可能とする
ために使用される減法技術は、各造影スキャンの前にＴ
ｅ−９９ｍ過テクネチウム酸塩およびＴｃ−９９ｍ！！
識ヒト血清アルブミンの注射を含む。得られたデータは
標識抗体単独、Ｔｃ−９９ｍ標識種との合計、およびこ
れら各種の値の和および差のデジタルイメージを発生す
ることができるミニコンピユータに記憶される。 ＣＥＡはＨｉｙｄｅｒｍａｎ＋ ５ｃａｎｄ、 Ｊ、
Ｉｍｍｕｎｏｌ、、８、。 ５ｕｐｐ１．８．１１９（１９７８）およびその他多数
によって報告されているように主として細胞表面抗原で
ある。 ５ｐａｒ、 Ｓｅｍ１ｎａｒｓ Ｉｎ Ｎｕｃｌ、 Ｍ
ｅｄ、、６，３７９（１９７６）およびＥｎｒｉｃｈ、
Ｄｅｕｔｓｈｅ Ｍｅｄ、 Ｗｏｃｈ、 ５ｃｈｒ、
１０４＋１５３（１９７９）により、ヒトの腫瘍位置
測定は腫瘍細胞の表面に存在する抗原に特異性な抗体を
必要とすると考えていた。前出Ｈｅｙｄｅｒｍａｎ、
Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ、 Ｇｕｉｌｌｏｕｚ。 ｅｔ ａｌ、 Ａｌｂｒｅｃｈｔｓｅｎ ｅｔ ａｌお
よびＲｕｏｓｌａｈｔｉ ｅｔ ａｌによるそれぞれ５
ｃａｎｄ、 Ｊ、 Ｉｔａｍｕｎｏｌ、＋８ｔＳｕｐｐ
１８ｒｐｐ、 ４８５ ｆｆ、２８９ｆｆ、１６５ｆｆ
、３ｆｆの報告により、ヒト絨毛膜ゴナンドトロビン（
ＨＣＧ）およびアルファフェトタンパク（ＡＦＰ）の両
方が細胞質性細胞内腫瘍関連物質であることが知られて
いる。 Ｑｕ３ｎｏｎｅｓ ａｔ ａｌ、 Ｊ、Ｎｕｃｌ、Ｍｅ
ｄ、＋１２．６９（１９７１）はハムスターに育成させ
たヒト絨毛膜がんは腫瘍中において動物の肝臓中に比較
して２．８倍の増加した放射性標識抗ＨＣＧ抗体の摂取
を示すことを報告した。しかしながら標識した正常Ｔｇ
Ｇによる対照研究は第２日の後注射により同様の増加し
た腫瘍摂取を示した。さらに著者は特に第３日および第
４日における組織分析により見られる、標識正常１ｇＧ
を上形る放射性抗体の摂取量の差は全身写真スキャニン
グでは観察されなかったと述べている。平井らＡｂｓｔ
ｒａｃｔｓ ６ｔｈ Ｉｎｔ、 Ｒｅｓ、 Ｇｒｏｕｐ
ｆｏｒ Ｃａｒｃｉｎｏｅｍｂｒｏｙｏｎｉｃ Ｐｒｏ
ｔｅｉｎ、 Ｍａｒｂｅｒｇ／Ｌａｈｎ。 西ドイツは移植したヒトへパトーマを持った、およびラ
ットおよびヒト卵黄のう腫瘍を持つネズミー・放射性標
識抗ＡＦＰを投与すると、腫瘍組織への抗体のホームイ
ンは見られないことを報告した。 心臓ミオシンへ特異性の抗体の開裂によって得られる放
射性標識フラグメントは、ハーバ−の米国特許第４．０
３６．９４５号において心筋梗塞の位置および寸法の決
定に使用されている。 抗体を用いる放射療法は多数の人により提案され、１例
の多モード治療的臨床使用におけるその成功の徴候が０
ｒｄｅｒ、 Ｒａｄｉｏｌ、、１１８．２１９（１９７
６）に報告されている。治療へのホウ素標識抗体の使用
は１１ａｗｔｈｏｒｎｅ ｅｔ ａｌ、、Ｊ、 Ｍｅｄ
、 Ｃｈｅｍ、、１５，４４９（１９７２）に報告され
ているが、しかし治療のためホウ素とそして位置測定の
ためラジオアイソトープの組み合わせ使用は示されてい
ない。 前出Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇらによる最近の成功した腫瘍
位置測定および検出方法といえども、その解像力、効率
および実用性を制限するいくつかの欠点を有する。米国
特許第３，９２７，１９３号は、上で論じた後の参考で
は疑問とされなかった制限である、抗ＣＥＡ抗体はその
特異性を妨害する程度まで標識してはならないことを教
える。しかもながらこれはこの方法の解像力を制限し、
そし−で像検出のために多量の抗体を必要とする。 標識した抗体は非常に大きい分子であり、そして交差反
応性の抗原性定量骨を含むことがあり、そのため交差反
応性を１５％以下に減らし、そして７０％より高い特定
抗原に対する特異性を得ることは非常に困難である。Ｇ
ｏｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｔによって使用された減
算法は、標識特異抗体とは異なる移動および分布動力学
を有する担体へ結合した異なる放射性核種の使用を含む
。加えて、バックグラウンド補償材料は各写真走査毎に
事前に注射されなければならず、これは患者を増大した
レベルの放射能および不快さへ暴露する。先行技術方法
のさらに別の制限は抗体分子が血液−脳障壁を通過でき
ないことであり、これは静脈注射した抗体が頭蓋的腫瘍
の位置測定に使用できないことを意味する。 さらに細胞表面抗原に対する抗体の使用に限定されず、
減算性技術のためバックグラウンド補償材料の反復注射
を必要とせず、診断および治療に適応でき、高度の信顛
性と高い解像力を有し、単−回の注射を使用して理想的
には腫瘍または腫瘍細胞の二以上のタイプを検出し、そ
して位置測定することができる腫瘍検出および位置測定
方法に対する需要が存在し続ける。 木光亙■■朔 従って本発明の目的は、バックグラウンド活性のコンピ
ューターを使用した減算法のため他の放射性物質の反復
注射の必要なしに、高い解像度が得られる腫瘍位置測定
および検出方法を提供することである。 本発明の他の目的は、高い特異活性およびＣＥＡに対す
る高い特異性を有し、それによりシンチグラフ法による
腫瘍位置測定および検出方法の解像度を改善する腫瘍検
出および位置測定用抗体を提供することである。 本発明のさらに他の目的は、高い解像度が得られ、そし
て細胞内腫瘍関連マーカー物質を使用するＩＩＩｍ位置
測定および検出方法を提供することである。 本発明のさらに他の目的は、高い特異活性および高い腫
瘍マーカーに対する特異性を有し、それによりシンチグ
ラフ法による腫瘍位置測定および検出方法の解像を改善
する腫瘍検出および位置測定用抗体フラグメントを提供
することである。 本発明のなお他の目的は、腫瘍関連抗原またはマーカー
の２タイプ以上に対する特異性を有するフラグメントを
化学的組合せにおいて含有する多価抗体フラグメントを
提供することである。 本発明の他の目的は、放射線治療的に有効なラジオアイ
ソトープがそれが腫瘍関連マーカーに高度に特異性の抗
体もしくは抗体フラグメントへ結合することによって腫
瘍生育部位へ集中される腫瘍放射線療法を提供すること
である。 本発明のさらに別の目的は、結合したラジオアイソトー
プ標識の検出によって位置測定されたホウ素−１０アイ
ソト一プ含有抗体もしくは抗体フラグメントが熱中性子
によって励起される腫瘍治療方法を提供することである
。 本明細書および請求の範囲をさらに検討するとき、当業
者には本発明のその他の目的および利益が明らかになる
であろう。 本見訓Δ璧！ 前記の諸口的は、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）を産生ずる
かまたはそれに関連する腫瘍の位置を決定する方法であ
って、ＣＥＡに特異であり、そして写真走査装置を使用
して検出し得る薬理学的に不活性なラジオアイソトープ
で標識した抗体を被検者に被経口的に注射することと、
そして前記腫瘍による前記抗体の発生する摂取の位置を
決定するように前記装置によりその後被検者を走査する
ことよりなる前記方法において、前記特異抗体の製造に
使用された種と同一または異なる種からの正常免疫グロ
ブリンを前記被検者に同時に注射することよりなり、前
記免疫グｌ］プリンは前記特異抗体を標識するために使
用した同じ元素の異なるラジオアイソトープで放射標識
されそして前記写真走査装置を使用して独自検知可能な
エネルギーにおいて放射するものであり、標識−した正
常免疫グロブリンは目標を指向しない特異抗体によるバ
ックグラウンド活性の分布を測定するために使用され、
前記分布は特異抗体の全活性より減算されそれにより実
質上目標を指向した腫瘍関連抗体だけの活性が測定され
ることよりなる改良の提供によ−って達成される。 本発明はさらに、前記抗ＣＥＡ抗体とし、て標識前のＣ
ＥＡ−特異免疫反応性を少なくとも７０％、および他の
抗体に対する交差反応性を１５％以下有する実質と単一
特異性抗体であって、そのＣＥＡ特異免疫反応性を５な
いし３３％減少するに充分な程度に放射標識した該抗体
を使用することを含む前記−船方法の改良を提供する。 加えて、本発明は、細胞内マーカー物質を産生ずるかま
たはそれに関連する腫瘍の検出および位置測定方法であ
って、前記マーカー物質に特異性でそして写真走査装置
を使用して検出し得る薬理学的に不活性なラジオアイソ
トープによって標識した抗体を被検者に非経口的に注射
し、そしてその後前記腫瘍による前記標識抗体の摂取部
位を検出し位置測定するため前記装置により前記被検者
を走査することよりなる前記方法を提供する。 細胞質、細胞内または細胞表面マーカー物質を産生じま
たはそれに関連する腫瘍を検出し、そして位置測定する
方法であって、前記マーカー物質に特異性な抗体の開裂
によって得られ、そして写真走査装置を使用して検出し
得る薬理学的に不活性なラジオアイソトープによって標
識した少なくとも１種のマーカー特異フラグメントを被
検者に非経口的に注射し、そしてその後前記腫瘍による
前記標識抗体フラグメントの摂取部位を検出し位置測定
するため前記装置により前記被検者を走査することより
なる前記方法が提供される。 本発明はまた少なくとも１種の細胞質、細胞内または細
胞表面マーカー物質を産生または関連する少なくとも１
タイプの腫瘍の検出および位置測定方法であって、第１
の腫瘍関連マーカーに対し特異性の抗体の開裂によって
得られる少なくとも１種のマーカー特異フラグメントと
、そして同一または異なる腫瘍関連マーカーに対し特異
性の抗体の開裂によって得られる少なくとも第２の異な
るマーカー特異フラグメントとを化学的組合せにおいて
含有する多価ハイブリッドにして、写真走査装置を使用
して検出し得る薬理学的に不活性なラジオアイソトープ
で放射標識した該ハイブリッドを被検者に非経口的に注
射することと、そしてその後前記少なくとも１タイプの
腫瘍による前記標識ハイブリッドの摂取の部位を前記装
置により検出し、位置測定するため被検者を走査するこ
とよりなる前記方法を提供する。 前記方法に使用するために好適な抗体および注射し得る
組成物と、そして放射能標識したマーカー特異性ｌＩｌ
瘍関連抗体または抗体フラグメントが提供される。 「に象１論 本発明に使用される抗体は各種の腫瘍関連抗原またはマ
ーカー物質に特異性であり、他方本発明方法に使用され
るマーカー特異抗体フラグメントはそのような特異抗体
の開裂によって製造される。 該マーカーは、腫瘍によって産生される物質、細胞質内
であれ、核内であれ、各種の機能質的であれ腫瘍細胞内
に蓄積する物質、または腫瘍細胞の上もしくはまわりに
蓄積する物質でよい。それらは細胞内または細胞表面ま
たは細胞質マーカーでよい。このような腫瘍関連マーカ
ーのうちには、）１ｅｂｅｒｍａｍによる。”Ｉｍｍｕ
ｎｏｄｊａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ−Ｆｌｅ
ｉｓｈｅｒ Ｅｄ、およびＴｈｅ Ｃｌ１ｎｉｃａｌ
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ＋
ｐａｇｅ ３４７ （八ｍ、 Ａｓ５ｎ、
Ｃｌ１ｎ、 ＣｈｅＩｌｌ。 １９７９） 、および１ｌｏｌｔｓｅｎ ｅｔ ａｌの
米国特許第４．１５０゜１４９に記載のものがある。 腫瘍関連マーカーは前出Ｈｅｒｂｅｒｍａｎにより、腫
瘍胎児抗原、胎盤抗原、腫瘍形成または腫瘍ビールス関
連抗原、組織関連抗原、臓器関連抗原、適所ホルモンお
よび通常の抗原またはその変種を含む多数のカテゴリー
に分類されている。しばしば腫瘍関連マーカーのサブユ
ニットが高い腫瘍特異性を有する抗体を上昇させるため
に有利に使用される。例えばヒト絨毛ゴナンドトロビン
（）（ＣＧ）のベーターサブユニットは、非腫瘍物質へ
の太きく減少された交差反応性を有する扉体の産生を促
進する。本発明において有用な、椋に対する特異抗体を
上昇させ得るこのような好適なマーカーは、これらに限
定されるものではないが、アルファ胎児タンパク（ＡＦ
Ｐ）、ヒト絨毛ゴナントロピン（ＨＣＧ）およびそのベ
ーターサブユニット、結腸特異抗原−ｐ （Ｃ３Ａｐ）
、がん胎児性抗原（ＣＥＡ） 、前立腺酸性フォスファ
ターゼ、すい臓Ｘｆ！瘍胎児性抗原、胎盤アルカリ性フ
ォスファターゼ、妊婦ベーター１−グロブリン、上皮小
体ホルモン、カルシトニン、組織ポリペプチド抗原、Ｔ
−抗原、ベーター２−ミクログロブリン、乳房腫瘍関連
塘タンパク（ＭＴＧＰ）、ガラクイジルトランスフェラ
ーゼ−Ｕ （ＧＴ−ＩＩ）、ｇｐ−５２ビールス関連抗
原、卵巣のう腫がん関連抗原（ＯＣＡＡ） 、乾燥腫瘍
特異抗原（ＯＣＡ） 、子宮頚管がん抗原（ＣＡ−５８
、ＣＣＡ、ＴＡ−４）。 塩基性胎児性タンパク（ＢＦＰ）、末端デオキシヌクレ
オチジルトランスフェラーゼ（ＴｄＴ）。 細胞質黒色腫関連抗原、ヒト星状細胞腫関連抗原（ＨＡ
ＡＡ）、通常グリオーマ抗原（ＣＣ；Ａ）。 膠芽胎児性抗原（ＧＥＡ）、神経膠原線維酸性タンパク
（ＧＦＡ）、通常髄膜腫抗原（ＣＭＡ）。 および腫瘍脈管形成因子（ＴＡＦ）を含む。 マーカー特異抗体はこの分野でよく知られた慣用方法に
よって製造することができる。通常動物、好ましくはネ
ズミ、ウサギ、さらに好ましくはヤギまたは霊長類に腫
瘍関連マーカー物質を挑戦させ、それに対しその免疫系
をこれらマーカーに特異性の抗体を産生ずることによっ
て反応させる。 動物を出血させ、血液の免疫グロブリン分画を単離し、
そして好ましくは１回または２回以上のアフィニティー
クロマトグラフィーを含む各種の慣用分離技術により特
異性免疫グロブリンを単離する。腫瘍関連マーカー物質
に特異な抗体を上昇させるための好適なこのような一般
法は、特に“Ｉｍｍｕｎｏｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ
Ｃａｎｃｅｒ ＋ Ｈｅｒｂｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌＥ
ｄｓ、 （Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、 Ｉｎｃ、、
ＮｅｗＹｏｒｋ ａｎｄ Ｂａ５ｅｌ。 １９７９）および”Ｔｒ＋ｓｏｒ Ｍａｒｋｅｒｓ’、
５ｅｌｌ、ｔ！ｄ、（ＨｕｍａｎａＰｅｒｓｓ、 Ｃｌ
１ｆｔｏｎ、 Ｎ、Ｊ、、 １９８）に記載されている
。 ＣＥＡ特異抗体は、とりわけＰｒｉ＋＊ｕｓ ｅｔ ａ
ｌ＋ Ｊ。 Ｉｍｍｕｎｏｌ、、１１８．５５（１９７７）； Ｇｏ
ｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ＋５ｕｐｒａ；Ｐｒｉｍ
ｕｓ ｅｔ ａｌ、 Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ、、３７．
１５４４（１９７７）；Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ
ａｌ、” Ｉｍｍｕｎｏｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ Ｃ
ａｎｃｅｒ＋Ｐａｒｔ Ｉ”、 Ｈｅｒｂｅｍａｎ ｅ
ｔ ａｌ＋ Ｅｄｓ、＋ｐａｇｅｓ ２６５−３０６（
Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、 Ｉｎｃ、、Ｎｅｗ Ｙ
ｏｒｋ ＆ Ｂａ５ｅｌ、 １９７９）に報告されてい
る当分野で公知の各種の方法で製造することができる。 前記の慣用技術によって製造した抗体は通常抗体の混合
物であり、その一定割合が特異性であるが、しかし一般
に非！ＩＩ瘍関連または他の抗原に交差反応性の抗体を
可変割合で含有している。抗体混合物のいくつかの成分
がそれに対し交差反応性である結合抗原を使用する繰り
返しアフィニティークロマトグラフィーおよび結合した
精製抗原を含むカラムの通過によって精製した抗体は、
高い特異免疫反応性を有し、しばしば７０％近くまたは
それ以上へ達し、そして非腫瘍関連抗原または他の抗原
に対する交差反応性が１５％以下となる。 これら抗体はそれらが上昇された抗原に対して実買上モ
ノ特異性であると考えられ、そして本発明において好適
に使用される。 ｌ１ｌｌ！瘍位置測定のため、高いマーカー特異免疫反
応性を有する抗体を使用することは特に有利である。高
い特異性は、標識抗体の高割合が腫瘍部位を標的とし、
小割合が非標的態様で分布されることを意味する。それ
故標識抗体の少量を使用することができ、患者の被曝量
を減らし、そして標的へ向わない抗体によるバックグラ
ウンド放射の低い
【ノベルは解像度を改善するであろう
。このことはさらに他のどの方法でもしばしば困難また
は不可能であるより小さい腫瘍を検出し得ることを意味
する。高度に特異なモノクローン性抗体は雑種形成技術
によって製造することができる。このような抗体は通常
精製を殆んどまたは全く必要とせず、そして通常少なく
とも７５％の特異免疫反応性を持ち、ある場合には９５
％以上の特異性を有する。このようなモノクローン性の
ハイブリドーマ誘導抗体もまた本発明において使用する
のに好適である。好適な具体例において、モノクローン
性抗体は、サルに精製した腫瘍関：Ｊｔ７−カーを挑戦
させ、抗体産生サルリンパもしく４よひ臓細胞をヒトも
しくはマウス骨髄腫細胞と融合して雑種細胞をつくり、
次にこれを分離し、クローン化し、前記マーカー物質に
特異なモノクローン性抗体を生成するそれらの能力につ
いて選定する。 免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）分画からのモノクローン性
抗体はこの方法で得られ、そして本発明による腫瘍検出
、位置測定および治療のため使用されるフラグメントを
製造するために使用される。 Ｋｏｐｒｏｗｓｋｉ の米国特許第４，１７２，１２４
号のＩｇＭ千ツクツクローン性抗体の方法に使用するた
めに適していない。 抗体フラグメントはＦ （ａｂ’ ）ｚと呼ばれる５Ｓ
フラグメントを与えるように抗体をペプシンで酵素分解
することによって製造し得ることが知られている。この
フラグ、メントはさらにチオール還元剤と、場合によっ
てジサルファイド結合の開裂から生ずるスルフヒドリル
基のブロッキング基を使用して開裂し、３．５５ Ｆ
ａｂ’ １価フラグメントを生成させることができる
。その代りに、パパインを使用する酵素分解は直接２個
の１価Ｆａｂフラグメントおよび１個のＦｃフラグメン
トを生成する。これらの方法は特に米国特許第４゜０３
６．９４５号およびその引用文献に、そしてＮ１５ｏｎ
ｏｆｆｅｔ ａｌ、 Ａｒｃｈ、 Ｂｊｏｃｈｅｍ、
Ｂｔｏｐｈｙｓ、、 ８９，３２０（１９６０）；Ｐｏ
ｒｔｅｒ、 Ｂｉｏｃｈｅｍｊ、、 ７３，１１９（１
９５９）； Ｅｄｅｌ＋ａａｎ ｅｔａＬ ”Ｍｅｔｈ
ｏｄｓ ｉｎ Ｉｗ＋＋＋＋ｕｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ
Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ。 Ｖｏｌ、 １，４２２（Ａｃａｄ、 Ｐｒｅｓｓ＋ １
９６７）に記載されて０る。 抗体を開裂する他の方法、例えばＦａｂフラグメントの
それ以上の開裂または他の酵素もしくは化学的手法の使
用も使用することができる。それらの親抗体がそれに対
して上昇された腫瘍関連マーカーに対して特異性を保持
しているフラグメントだけがこの方法に使用される。 混成抗体フラグメントは異なる抗体の還元的開裂から生
ずるＦａｂ“フラグメントの酸化的結合によって製造さ
れた。これらの一部分はもとの抗体がそれに対して上昇
された抗原の両方へ特異性のフラグメントを含有するで
あろう。これは二つの異なる抗体のペプシン分解によっ
て製造された二つの異なるＦ（ａｂ“）ｔフラグメント
を混合し、Ｆａｂ’ フラグメントの混合物を生成する
ように還元的に開裂し、次にもとの抗原のそれぞれへ特
異なＦａｂ’部分を含む混成フラグメントを含むＦ（ａ
ｂ’）、フラグメント混合物を生成するように酸化して
ジサルファイド結合を再生成させることによって有利に
実施することができる。 このように混成抗体フラグメントの製造法は、Ｆｅｔｅ
ａｎｕ、 ”Ｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ
ｆｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄＭｅｄｉｃｔｎｅ ｐ
ａｇｅｓ ３２１−３２３（ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ
Ｔｎｔ、 Ｂｋ。 Ｃｏ、、 Ｎｏｗ Ｙｏｒｋ ｅｔ ａｌ＋ １９７８
）； Ｎ１５ｏｎｏｆｆ ｅｔ ａｌ。 Ａｒｃｈ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｂｔｏｐｈｙｓ、、９
３，４７０（１９６１）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇｅｔ
ａｔ、 Ｊ、 Ｅｘｐ、 Ｍｅｄ、、１２８１４６Ｈ１
９６８）に記載されている。 以下の議論において、「抗体」なる語は断わりのない限
りこれまで記載したような抗体および抗体フラグメント
を包含する。 抗体は当分野で公知のいくつかの手法のいずれによって
も標識することができる。標識技術の広い範囲がＦｅｔ
ｅａｎｕ、Ｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉ
ｎ Ｂｉｏｌｏｇｙａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 、
ｐａｇｅｓ ２１４−３０９（ＭｃＧｒａｓｌ−旧ＩＩ
Ｉｎｔ。 Ｂｏｏｋ Ｃｏ、、 Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ ｅｔ ａｌ、
１９７Ｂ）に記載されている種々の金属ラジオアイソ
トープの導入は、Ｗａｇｎｅｒ ｅｔ ａｌ、、 Ｊ、
Ｎｕｃｌ、 Ｍｅｄ、、 ２０，４２８（１９７９）
。 ５ｕｎｄｂｅｒｙ ｅｔ ａｌ、 Ｊ、 Ｍｅｄ、 Ｃ
ｈｅｍ、、１７．１３０４（１９７４）；５ａｈａ ｅ
ｔ ａｌ、 Ｊ、 Ｎｕｃｌ、 Ｍｅｄ、、６．５４２
（１９７６）の方法によって達成することができる。以
上に当分野で公知のタンパクを放射標識するための多数
の方法の数例に過ぎない。 使用するラジオアイソトープのうち、ガンマ放射体、陽
電子放射体、Ｘ線放射体、および螢光発光体が位置測定
および／または治療用に好適であり、一方ベーター放射
体およびアルファ放射体も治療に使用することができる
。抗体を標識するため好適なラジオアイソトープはヨウ
素−１３１゜ヨー素−１２３．ヨー素１２６．ヨー素１
３３゜臭素−７７，インジウム−１１１，インジウム−
１１５ｍ、ガリウム−６７、ガリウム−６８，ルナ−ニ
ウム−９５，ルテニウム−９７”−、ルテニウム−１０
３，ルテニウム−１０５，水銀−１９７゜−水銀−２０
３，レニウム−９９ｍ、−レニウム−１０５、レニウム
−１０１，テルル−１２１ｍ、テルル−１１２ｍ、テル
ル−１２３ｍ、ツリウム−１６５、ツリウム−１６７、
ツリウム−１６８゜テクネチウム−９９ｍ、およびフッ
素−１８を含む。ハロゲン標識抗体もしくはフラグメン
トおよび／または正常免疫グロブリンもしくは対応する
フラグメントは、実質上同一の運動性および分布と、そ
して類似の代謝を持つであろうから、ハロゲンは標識と
して多かれ少なかれ互換性を持って使用することができ
る。 抗体標識のために好適な技術は、Ｇｒｅｅｎｗｏｏｄ
ｅｔａｌ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｊ、、８９，１１４（
１９６３）によって報告され、ＭｃＣｏｎａｈｅｙ
ｅｔ ａｌ、 Ｉｎｔ、 Ａｒｃｈ、 ＾ｌｌ
ｅｒｇｙ Ａｐｐｌｎ。 Ｉｍｍｕｎｏｌ、、 ２９，１８５（１９６９）によっ
て修正されたように、放射性ヨー化カリウムまたはナト
リウムと抗体との混合物をクロラミン−Ｔで処理する酸
化法を用いて、ヨー素−１３１（１−１３１）またはヨ
ー素−１２３（１−１２３）で標識することを含む。こ
れは試薬の割合および反応条件に依存して、抗体分子上
の、恐らくチロシン残基上の、多分トリプトファンおよ
びフェニルアラニン残基上の水素原子をヨー素原子で直
接置換する結果を生ずる。 一般に、抗体へその免疫特異性を破壊することなくでき
るだけ高い割合の放射性標識を導入するのが望ましい。 非常に多数の研究者は抗体１分子当りヨー素原子１．５
ないし２個以上の直接置換による投入は不利であると考
えていたが、今や抗体１分子当りヨー素を少なくとも２
．５および好ましくは平均５ないし１０原子直接置換し
て導入することは、特に抗体が標識前高度にマーカー特
異性である場合有利であることが判明した。この場合、
高度の標識化の結果として５ないし３３％の抗体特異性
の低下さえも高い活性の方が上廻り、実質上より少量の
標識抗体の使用を許容する。前記したように、高活性の
高い特異性抗体の使用は効率的な位置測定および増大し
た解像性を結果する。 この増加した活性と減少した特異性とのバランスは抗体
１分子当り平均ヨー素ｌＯ原子まで有利で、その後は特
異性の減少が高活性の利益を上廻る。 放射性標識を導入するための他の方法を使用することに
より、減少した免疫特異性に受容できない価格を支払う
ことなしに抗体フラグメントに対する標識の割合をさら
に増加することが可能であろう。それ以上の改良は、抗
体上の抗原結合部位が保護されることを確実にするため
、放射性標識化を特異抗原の存在下において実施するこ
とによって達成することができる。該抗原は標識化後分
離される。 ２価混成抗体フラグメントの実例、例えば２つの異なる
腫瘍特異抗体のそれぞれからＦａｂ’ フラグメントの
化学的結合によって得られるＦ（ａｂｏ）２抗体フラグ
メントを以下に示す。表１は、検出および治療の両方に
対しそれらが有利に使用される好適なそのような２価混
成体および腫瘍タイプの例示リストを与える。１番目の
カラムは混成体の二つのＦａｂ’成分がそれに対して特
異性である二つの抗原を示し、各混成体はそれぞれの抗
原性決定因子に対し特異性の一つのフラグメンＩ−を有
する。いくつかの場合において抗体は特異性を増加させ
るためＭ＠瘍関連抗原のより小さいフラグメントに対し
て上昇されるであろう。例えばＨＣＧのベーターサブユ
ニットに対して上昇された抗体はＨＣＧ自体に対して上
昇させた抗原より好ましい。２番目のカラムは各ハイブ
リッドタイプーｔｌ先的にｆＡ縮する腫瘍タイプを示す
。 ＣＥＡ／Ｃ３Ａｐ ＣＥＡ／ＰＯＡ ＣＥＡ／ＨＣＣ； ＣＥＡ／ＡＦＰ ＣＥＡ／ＴＡＰ ＣＥＡ／フェリチ ン 胃腸例えば結腸、こう門、胃 すい臓、肺 肺、卵巣、胃腸 肝臓、胃腸、卵巣、こう丸 大部分 固形、造血、肝臓 ＣＥＡ／カルシトニン ＣＥＡ／ＰＡＰ ＣＥＡ／上皮小体ホルモ ＨＣＧ／ＰＢＧ ＣＧＡ／ＧＥＡ ＧＦＡ／ＣＭＡ 凡例： ＥＡ がん胎児性抗原 甲状腺 前立腺 ン 上皮小体、肺 顆粒性原形質 脳 脳 ＳＡｐ ＯＡ ＦＰ Ｔ Ｐ Ａ。 ＡＰ ＢＧ ＧＡ ＥＡ ＦＡ ＭＡ 結腸特異抗原−ｐ すい臓腫瘍胎児性抗原 アルファ胎児性タンパク 組織ペプチド抗原 前立腺酸性フォスファターゼ 妊婦ベーター１−グロブリン 通常グリオーマ抗原 膠芽胎児性抗原 神経膠原線維酸性タンパク 通常髄膜腫抗原 表１に示したような混成フラグメントは多数腫瘍タイプ
または細胞の検出および位置測定のため単一ラジオアイ
ソトープで標識するか、または治療のため単数もしくは
複数のラジオアイソトープで標識することができる。さ
らにこのような混成体は検出のためあるラジオアイソト
ープで、そして治療のため１種またはそれ以上のアイソ
トープで、例えばあるラジオアイソトープおよび／また
はホウ素含有フラグメントで標識することができ、その
ため位置測定された腫瘍は以下記載の態様で熱中性子で
照射されることができる。 より小さいマーカー特異性フラグメントを生成するよう
に抗体からＦｃフラグメントを除去することは、フラグ
メントの移動度およびその血液−脳障壁通過能力を容易
にするより小さい分子量を有する分子を生成するという
利益を有する。加えて、Ｆｃフラグメントは抗体の主な
過アレルゲン性および非特異的結合の大部分に責任があ
る。従ってその開裂は抗体の注射、特に多数のＮ＠瘍の
造影または腫瘍放射線療法のための反復注射に対するア
レルギー反応の危険を減らす。抗体フラグメントの運動
性は全天然免疫グロブリンよりももっと速く、そしてＩ
ＩＪＢにもっと特異的に結合するので、減算性技術は省
略するか、または特定の状況で使用するため修正するこ
とができる。加えて、特定の動脈によって供給された腫
瘍への標識した検知剤のもっと直接的な動脈内適用のた
めの標識抗体の使用は、腫瘍検出および腫瘍放射線療法
の両方のため、このプロセスの重要な機会を提供する。 腫瘍位置測定、検出および治療のための単一製剤に標識
抗体フラグメントの混合物を使用することができる。該
混合物は、位置測定および解像度を向上させるため同一
腫瘍タイプに関連する異なる抗原に特異なフラグメント
を使用することができる。この代りに広いＭｌ瘍特異性
を有するフラグメントの混合物を使用して、種々の腫瘍
タイプの広範囲スクリーニングを実施することができる
。 混成フラグメントの使用に同様に、同一もしくは異なる
Ｍｌ瘍または腫瘍細胞タイプに関連する抗原に対し特異
な標識抗体の混合物を使用してもよい。これはある場合
に検出、位置測定および／または治療を向上させること
ができ、そしてまた２種以上の腫瘍またはｌｌ［Ｔ！ｉ
細胞タイプについての広いスクリーンの範囲を増加する
ことができる。 放射性標識特異抗体の投与後２４時間後においてのみ通
常腫瘍位置測定を可能とする以前公知の方法とは対照的
に、この改良された減算技術は、放射性標識特異抗体お
よび放射性標識正常免疫グロブリンの同時投与後２４時
間以内に腫瘍検出および位置測定を可能とする。腫瘍位
置測定は、抗体／免疫グロブリン対の注射後２時間で、
投与後６．１２．１８および２４時間において改良され
た解像度をもって達成することができる。抗体フラグメ
ントは大変速く組織中に拡散しそして一層速く局在化さ
れるので、腫瘍検出および位置測定は標識フラグメント
の注射後短時間で達成することができる。 血液プールまたは間質性体液中に標識フラグメントまた
はそれらの代謝物が蓄積することによる放射能は、腫瘍
関連マーカーへ特建性の標識抗体フラグメントを使用す
る腫瘍位置測定の解像度を−著しく減少させることがあ
り得る。、−そのような場合には、フォト走査前に被検
者へ参照物質を注射するのが有利である。参照物質はマ
ーカー特異抗体フラグメント標識と異なるエネルギーで
放射し、そしてフォト走査装置で独立に検出し得るラジ
オアイソトープで放射標識される。参照物質の活性のレ
ベルは非標的指向特異抗体フラグメントによるバックグ
ラウンド活性の測定に使用され、このバックグラウンド
活性は次に特異抗体の全活性から減算され、実質上標的
指向腫瘍関連抗体のみの活性の測定を許容する。 Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ、 Ｎ、 Ｅｎｇ、
Ｊ、 Ｍｅｄ、＋ ２９８＋ １３８４（１９７Ｂ）
に報告された成功したヒトがんの非侵入的ラジオ免疫検
知法においては、減算技術が成功的位置測定のために必
要であることを示した。しかしながら使用された減算技
術は本発明のそれと実質的に相違する。参照方法では、
放射性ヨード化した抗ＣＥＡ抗体が注射され、そしてテ
クネチチウムー９９ｍ標識ヒト血清アルブミンおよび過
テクネチウム酸テクネチウム−９９ｍが各造影走査前に
静注された。像はガンマシンチレーションカメラで得ら
れ、得られたデータはミニコンピユータ−に記憶される
。非標的区域におけるＴｃ−９９活性に対するｌ−１３
１活性の比はバックグラウンド非局在抗体活性のための
比較標準を与えた。これは他の位置における非標的指向
特異抗体活性の測定を許容し、これは全特異抗体活性か
ら減算され、局在化された標的指向抗体の活性値が得ら
れた。 本発明は適当な参照物質のうちで、Ｔｃ−９９ｍ標識正
常免疫グロブリンＧまたはそのフラグメントおよびＴｃ
−９９ｍ標識イオウコロイドの使用を含む。しかしなが
ら好ましくは参照物質は、対応する正常な無関係な免疫
グロブリンＧ（ＩｇＧ）か、または腫瘍位置測定剤とし
て使用した特異抗体フラグメントを製造するために使用
したものと同一もしくは異なる種からの対応するフラグ
メントである。この正常免疫グロブリンＧは、好ましく
は特異抗体を標識するために使用した同じ元素の異なる
アイソトープで放射標識され、そして好ましくは放射標
識されたマーカー特異抗体と同時に注射される。これは
参照物質として標識特異抗体と実質上同じ結合、分布お
よび代謝動力学性を有する分子種を使用するという利益
を有する。 その結果−回だけの参照物質の注射が必要で、そして増
加した解像度が得られる。正常１ｇＧはそれが対応する
特異抗体と同じ方法で製造され、標識される。 一方は特異抗体を標識するために使用することができ、
他方は正常免疫グロブリンを標識するために使用される
ラジオアイソトープの適当な対は、ヨー素−１３１とヨ
ー素１２３、インジウム−１１１とインジウム−１１５
ｍ、ガリウム−６７とガリウム−６８、ルテニウム−９
７とルテニウム−１０３、または水銀−１９７と水！ｌ
−２０３を含む、ヨー素は化学的置換反応により直接導
入し得るため、そして放射性でそしてフォト走査装置を
使用して検出し得る少なくとも５種類のアイソトープを
有するので、ヨー素は、本発明方法に使用するため特異
抗体フラグメントおよび正常免疫グロブリンＧ参照物質
の両方を放射標識するのに好適である。有利には、ヨー
素−１３１が特異抗体を標識するために使用され、ヨー
素−１２３が正常免疫グロブリンを標識するために使用
される。 発生ずる放射はガンマ−シンチレーション検出器の２つ
の異なるチャンネル上に別々に検出される。 得られる走査データはミニコンピューターニ好都合に記
憶され、そし°ζその非標的区域における標識参照免疫
グロブリンに対する比を上田る、放射標識特異抗体の過
剰蓄積区域を決定するため前述の減算法が実施される。 これらの値は関連した出力信号、有利にはカラービデオ
スクリーン上のカラーの変化を発生させるために使用す
ることができる。フォト走査装置はコンピューター断層
放射線写真能力を備えることができる。高い活性と許容
し得る免疫特異性との間に最大のバランスを与えるよう
に標識した高度にモノ特異性で、好ましくはモノクロー
ン性の抗体を使用するこの高度に能率的な減算技術は、
著しく改部された解像度の！ｌＩ瘍位置測定および検出
方法を捷供する。 勿論、高度に標識した、高度に特異性抗体と本発明の改
良された減算技術の組合せはもっと高い解像度を導びく
。好適な具体例において、実質上モノ特異性抗体が抗体
１分子あたリョー素が平均少なくとも２．５原子、好ま
しくは５ないし１ｏ原子導入されるようにｌ−１３１ま
たはｌ−１２３で放射標識され、そして生成した高度に
標識されたモノ特異性抗体は本発明に従って注射される
。 抗体１分子当り少なくとも２．５および好ましくは５な
いし１０原子の平均ヨー素含量へ１−１３１またはｒ−
１２３で放射標識されたモノクローン性特異抗体の使用
も好適である。 さらに改善された解像度は、減算技術において参照物質
として、放射標識された精製正常免疫グロブリンを使用
することによって得られる。正常グロブリンはグロブリ
ンの混合物であり、そのあるものは放射性抗体がそれへ
向けられる特異抗原へ結合されることができる。従って
問題のマーカーに対する反応性を除去するため、減算剤
として使用すべき正常グロブリンを精製することが望ま
しく、そのような−精製法は正常免疫グロブリンを好ま
しくは固体吸着剤上の特異抗原で吸着し、抗原と反応す
るグロブリンをカラムードに残し、そして通過する物質
は非特異性減算剤として標識するためにもっと好適とな
るであろう。モノクローン性非特異免疫グロブリンまた
は骨髄腫タンパン自体は、標識および減算剤として使用
のために所望の純度を持つであろう。 本発明の減算技術を使用するとき、高い放射活性と高い
特異性とのバランスは、抗体の対応して高いマーカー特
異免疫反応性をもって、放射性標識のいくらか低い程度
の側においてもっと破壊される。再びマーカー特異免疫
反応性が高い程、標識化は高くなるが、抗体性質の有益
なバランスはなお維持される。このように少なくとも７
０％、好ましくは少なくとも８０％のマーカー特異免疫
反応性と、１５％以下、好ましくは１０％以下の交差反
応性を有する実質上モノ特異性の抗体は、高度に効果的
な位置測定を許容するように標識後もなお充分な特異性
を保有する一方、抗体１分子当り２．５、好ましくは５
ないし１０ヨ一ド原子程度へ、１−１３１またはｌ−１
２３で標識することができる。 改良された減算技術を使用しない、しかし好ましくは使
用する末法の使用は、腫瘍位置の連続的、反復的、また
は随時的監視を許容する。これは特に手術前に腫瘍の診
断および期決定との組合せに利益を有する。加えて、こ
の方法はどの程度完全な腫瘍除去が達成されたかの徴候
として、手術中または手術後に有用である。転移の場合
、特に小さい拡散転移の増殖が認められた場合、この方
法の高い解像度は術後療法のための標的区域の同定を許
容する。これは本発明の治療方法または他の技術、例え
ば化学療法、照射処置もしくは多モード療法を使用して
実施することができる。 放射性標識したマーカー特異抗体またはフラグメントは
腫瘍治療に有効である。標識された抗体が被検者の１１
１３部位に局在化されることが決定された後、一般に投
与当り２５ないし２５０ｍＣｉ。 好ましくは５０ないし１５０ｍＣｉの標識された抗体の
高投与量が注射される。注射は静脈内、動脈内、リンパ
管内、包膜内、または体腔でよく、そして反復すること
ができる。 種々の放射性核種が治療のために有用であり、そしてそ
れらは前に論じた標識化技術によって特異抗体中に取り
入れることができる。好ましい治療的に有効な核種はｒ
−１３１である。 本発明の治療方法は、有利には高度にマーカー特異抗体
、好ましくは少なくとも７０％、好ましくは少なくとも
８０％のマーカー特異免疫反応性と、１５％以下、好ま
しくは１０％以下の他の抗原に対する交差反応性を有す
る抗体を使用する。 モノクローン性抗体はそれらの高い特異性のために好ま
しい。 放射標識したマーカー特異抗体またはフラグメントを使
用する療法は、他の療法例えば照射および化学療法と組
合せて一次的治療処置として、そして外科手術の補助法
として有利に使用される。 外科的に除去できない、または検出渣のがれることので
きる小さい転移がある場合に４よ、本発明の放射療法は
これらの腫瘍を発見しぞ−して破壊するを力な武器を提
供する。 抗体フラグメントはしばしばいくらか低い免疫反応性を
持ち、そしてその時低い放射性核種含量で、例えばフラ
グメント１分子当り、例えばＴ−１３１をＯ，ｌないし
１．０原子で標識するのが有利である。これは治療のた
め、そしてもし必要ならば検出のため、ｌ−１３１比活
性２．５ないし５２Ｃｉ／μｇを有するフラグメントを
生成させる。 本発明のさらに別の局面は、ラジオアイソトープ標識と
、ホウ素−１０アイソトープの天然存在比を少なくとも
２０％有する著しい多数のホウ素原子を含む付加物の両
方を含有する抗体またはフラグメントの使用に関する。 ホウ素含有付加物は各種の方法により、好ましくは抗体
に、Ｈａｗｔｈｏｒｎｅｅｔ ａｔ、 、Ｊ、 Ｍｅｄ
、 Ｃｈｅｍ、、 １５．４４９（１９７２）の方法に
より、１〜（４−アミノフェニル）−１，２−ジカルバ
クロソドデカボラン（１２）から誘導されたジアゾニウ
ムイオンのようなホウ素リッチなカップリング剤をカッ
プリングすることによって導入することができる。ホウ
素−１０含有抗体は次に、腫瘍位置測定および／または
治療のため１種またはそれ以上の放射性標識と、そして
熱中性子の吸収のためホウ素−ＩＯ原子の高含量の両方
を含有する抗体を製造するため、上述の方法の一つまた
はそれ以上に従って放射標識される。放射標識されそし
てホウ素標識された抗体を注射した後、放射性標識を用
いて腫瘍の位置測定をする。腫瘍は次によくコリメート
された熱中性子のビームで照射され、それらはホウ素含
有付加物中のホウ素ｌＯ核によって優先的に吸収され、
そして活性化された核は急速にリチウム−７およびアル
ファ粒子に崩壊する。これら生成するアルファ粒子は細
胞毒性で、そしてそれらの腫瘍細胞内での生成は細胞を
殺し、そして腫瘍の減少をもたらす。 高度にマーカー特異性の抗体上のホウ素付加物と１種ま
たはそれ以上の放射性標識との結合は、はじめて多モー
ド腫瘍治療剤として作用する単一の試薬を提供する。Ｉ
ＩＩ瘍部位におけるこれら二重に標識された抗体の急速
なそして特異的な局在化は、中性子照射を集中すべき区
域の速いそして精密な区切りを許容する。さらに、腫瘍
細胞は放射性標識からの放射と中性子で活性化されたホ
ウ素１０放射との結合効果によって破壊され、そして殺
されたＩＩ瘍細胞は除去されるので、放射線治療的処理
は局在化された放射標識された抗体の測定または他の腫
瘍検出法によって監視することができる。 本発明の抗体は注射組成物の形で有利に投与される。−
船釣スクリーニングのため、そして位置測定および治療
の多数のタイプのため、注射は静脈内、動脈内または包
膜内注射であろう。注射し得る抗体溶液は静脈、動脈ま
たはを髄液中に２分ないし約１時間のコースにわたり、
好ましくは静脈内または動脈内注入のため１０分ないし
２０分にわたって投与されるであろう。ある場合には、
皮下、粘膜上組織、または体腔内投与が有利である。！
ＩＩ瘍が既知の接近し得る動脈から供給される場合は、
動脈内投与が治療のために好ましい。動脈内ルートは製
剤の長い注入時間、例えば２４時間またはそれ以上を使
用し得る。加えて包膜内投与または頚動脈中へのフラグ
メントの注射は脳内に所在するｌ１ｌｌ瘍に使用するこ
とができる。皮下、粘膜上組織または体腔内投与は皮膚
の特定区域および／または特定の体腔・＼近い区域に限
られた腫瘍に有益である。 本発明による典型的な注射組成物は、ヒト血清アルブミ
ン３４ｔｎｇ（１％米国局方：バークデビス社）と、０
．９％ＮａＣｌ含有０．０４ Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７
，４，バイオウェア社）１ｔｄ当り放射標識された抗体
１ないし５００ ／／ ｇを含有する。本発明の減算性
技術が使用される場合は、特異抗体の重量にほぼ等しい
放射標識した正常イムノグロブリンの量を含有する。他
の慣用の薬剤学的に許容し得る注射用担体も、包膜内、
皮下、粘膜上組織または体腔内注射のため、および静脈
内または動脈内注射のためのように指示された場合に使
用することができる。 当業者はさらに熟考することなく、前記説明を用いて本
発明をその全範囲に利用することができ−るものと信ぜ
られる。従って以下の特定の好ましい具体例は単に例示
であり、開示の残余の部分を限定するものではないと解
すべきである。以下の実施例において、すべての温度は
未補正の摂氏度であり、断わりのない限りすべての部お
よび％は重量による。 これら実施例で使用される抗体は高度に特異性で、そし
°ζ慣用の免疫化の後、補体を不活性し、■■球凝固成
分を除去するため吸着し、そして交差反応性抗原および
特異抗原に対してアフィニティー精製して調製するか、
またはハイブリドーマ誘導モノクローン性抗体のどちら
かである。 実施例１ １３１ ！−ＣＥＡ Ｉ Ｇ ヤギ の（ａ）
ＣＥＡはＮｅｗｍａｎ ｅｔ ａｌ、 Ｃａｎｃｅｒ
Ｒｅｓ、、 ３４．２１２５（１９７４）の方法により
、結腸がんの肝転移から高純度で得られる。 ０））精製ＣＥＡ乾燥重量０．５ ｍｇをメチル化ウシ
血清アルブミン（シグマ社）２ｍｇを含む水２ ｍｇ中
に溶解し、ＣＥＡ溶液を完全なフロインドアジュバント
（デイフコ社）の等容積で乳化する。 ＣＥＡ接種物の等量を健康ヤギの灯の別々の２部位に皮
下注射する。注射は２週間置きに最後の注射後１４日後
に採集した抗血清のラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）が
抗ＣＥＡ力価１：ｌＯｈ以上を示すまで投与される。 次にヤギから血液を無菌的に採取し、パイロ−ジエンを
含有しない遠心試験管へ移し、そして遠心する。抗ＣＥ
Ａは一２０°Ｃで貯蔵する。 ヤギ抗ＣＥ Ａの補体は５６°Ｃで１時間インキュベー
トすることによって不活化し、そしてそれ以上血球凝固
活性が検出できなくなるまで、洗浄レバツクしたＡＢ型
ヒト赤血球（ＲＢＣ）と、血球凝固活性定量から計算し
た血清／ＲＢＣ比で繰り返して混合することにより、抗
血液グループを除去する。吸収した抗ＣＥＡ血清は次に
０．１ Ｍリン酸緩衝液ｐＨ７，０（ＰＯ，）の数容積
に対して透析される。 （Ｃ） 結腸がん抗原ｍ （ＣＣＡ−ＩＩＩ）免疫吸
着体は、正常肺の過塩素酸抽出物の６０，０００分子量
分画を慣用の技術を用いて臭化シアン活性化セファロー
ズ４Ｂ（ファルマシア社）へ結合させることにより調製
される。結合は４℃でゆるやかにかきまぜながら一夜進
行を許容される。ＣＣＡ−ＩＩＩ−免疫吸着体は００５
Ｍホウ酸緩衝液ｐ Ｈ８，４で洗浄され、０．１ＭＭリ
ン酸緩衝液 Ｈ８，０中の１Ｍ２−アミノエタノールの
４容積中に再懸濁される。スラリーは室温で１時間混合
され、口過され、ＰＯ，で洗浄される。 ＣＣＡ−Ｉ［［免疫吸着体力うＪ、が調製され、１０％
（Ｖ／Ｖ）正常ヤギ血液（ギブコ社）２ｍｌ、次いで３
Ｍチオシアン酸アンモニウムの約１カラム容積を前循環
し、そして０．１Ｍリン酸緩衝液ｐＨ７、０で再平衡化
される。 ＣＣＡ−ＩＩＩ−免疫吸着体は自動クロマトグラフィー
システムへ挿入され、そして全体のシステムが非発熱原
性の無菌ＰＯ，で完全に洗浄される。 緩衝液容器は千オシアン酸アンモニウムおよび透折物を
含む容器で取り替えられる。 吸着された抗ＣＥＡ血清はカラムの空隙容積の２／３の
容積へＰＯ，で希釈され、そしてカラムを通る１サイク
ル毎に抗血清の適当量を含有する。 この希釈した抗血清の体積はカラム中へ適用され、そし
て１力ラム空隙体積の全容を与えるのに充分なＰＯ，で
洗浄される。抗血清は室温で２０分間インキュベートす
ることが許され、次に吸着されない分画である特異抗Ｃ
ＥＡ血清がカラムからＰＯ４で溶離される。システムは
抗ＣＥＡ血液の第２の部分標本を適用することにより、
自動的に次のサイクルを開始する。サイクルの回数は抗
血清の全ロットを処理するようにセットされる。 抗ＣＥＡ血清の部分標本が抗血液のもとの容積へ濃縮さ
れ、そして免疫拡散によって再テストされる。抗血清は
参照ＣＥＡ、ＣＣＡ−ＩＩＩ製剤、正常ヒト組織抽出物
および血漿に対してテストされる。もし抗血清がＣＣＡ
−ＩＩＩ製剤、血漿または正常ヒト組織抽出物に陽性反
応を有するならば、それはＣＣＡ−ＩＩＩ免疫吸着体カ
ラムにリサイクルされ−る。 ＠ ＣＥＡ−免疫吸着体力ラムは、ＣＣＡ−ｍ免疫吸着
体と同じ結合操作により、精製ＣＥＡを臭化シアン活性
化セファローズ４Ｂへ結合し、前記（Ｃ）のようにカラ
ムを調製し、前循環し、平衡化することによって調製さ
れる。 ＣＥＡ吸着体カラムは自動化されたクロマトグラフィー
システムへ導入され、そして非発熱原性のＰＯ４で完全
に洗浄される。各サイクル毎に適用すべき抗ＣＥＡ血液
の量はラジオイムノアッセイ定量をもとに計算され、抗
血清のサンプルが希釈され、適用され、そしてＣＣＡ−
Ｉｌｌ免疫吸着体カラムと同様にインキュベートされる
。すべての非反応性免疫グロブリンを含んでいる血清タ
ンパクはカラムからＰＯ４で溶離され、そして吸着され
ない分画として採取される。 特異抗ＣＥＡ ＩｇＧは解離されそしてＰＯ。 中３Ｍチオシアン酸アンモニウムでカラムがら溶離され
、そして吸着された分画として採集される。 チオシアン酸アンモニウムの微量のすべてを除去するた
め、吸着された分画はＰＯ，中１Ｍ尿素および１０％グ
リセロールに対し、中空繊維透析ユニット（アミコン社
またはビオラッド社）の使用によってインライン透析に
かけられる。特異抗体の解離のための別法は、混乱剤と
してグアニジン塩酸塩と、脱塩のためセファデックスＧ
２５ゲルロ過クロマトグラフイーを使用する。 吸着された分画は４°ＣでＰＭ３０膜（アミコン社）に
よる限外口過により、ゲル口過クロマトグラフィーを容
易にする体積まで濃縮される。例えば抗ＣＥＡ血清のｌ
ＯＯｄのロフトは約２０１Ｉｒｌへ濃縮される。濃縮
液は５０ｍＭリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）ｐＨ７，５の
１００容で４回、各４時間透析される。抗ＣＥＡ Ｉ
ｇＧ製剤は無菌のパイロ−ジエン不含血清バイアル中へ
無菌口過される。 部品標本がＲＩＡおよび免疫拡散による品質管理試験の
ために保存される。 （ｅ） セファクリルＳ−２００（ファルマシア社）
カラｌ、がゲルを無菌のパイロ−ジエン不含５０ｍＭ。 ＰＢＳｌｐＨ７，５で５回洗浄することによって調製さ
れる。カラムは１８０℃で３時間乾燥滅菌される。使用
カラム寸法は抗体のロットサイズに応じて２．６ Ｘ
９０ ｃｔａか、または５． ＯＸ ９０ ｃｍである
。 次にカラムはカラムの３倍容のＰＢＳで洗浄される。 ヤギ抗ＣＥＡ ＩｇＧのロフトはカラムに適用され、
そしてＰＢＳで６ｍ／ａａ／時間の流量において溶離さ
れる。ＩｇＧタンパクを含有する分画。 がプールされ、そして約５■ ＩｇＧタンパク／ＢＳに
対して透析され、０．２ミクロンＭｉｌｌｅｘユニット
（ミリポア社）で無菌口過され、そして保存剤としてア
ジ化ナトリウムを添加して約５ ｍｇＩｇＧタンパク／
ｌｌ１１の１ｍｍ部分木の形で冷蔵される。 （ｆ）Ｉ３１■の１ｍＣ１当り７．２ないし１６．８
ＩＩ ｇＩｇＧのヤギ抗ＣＥＡ ＩｇＧをＩＩＩ
ｌ （アマーシャムーサール社）を含む放射性核種バイ
アル中へ注入する。 クロラミンＴおよびメタ重亜硫酸ナトリウム溶液は、そ
れぞれクロラミンＴ１０ｍｇおよび重亜硫酸塩５０ｍｇ
を含む２個のバイアルのそれぞれへ、無菌のパイロ−ジ
エン不合０．０４ Ｍリン酸緩衝液ｐ、 Ｈ７，４の５
−を注入することによって調製された。クロラミンＴは
１０μｇ／ｍＣｉ” Ｉの割合で放射性核種バイアル
中へ注入された。クロラミンＴの５倍量のメタ重亜硫酸
ナトリウム溶液は、クロラミンＴの注入後正確に９０秒
後にバイアル中へ注入される。混合物は無菌注射器で反
応バイアルから除去され、反応バイアルは１％正常ヒト
血清アルブミンでリンスされ、リンス液は反応混合物と
合併された。 １ｆｆ＋ １抗ＣＥＡ ＩビＧのサンプルが事前に
ＰＢＳ中１％正常ヒト血清アルブミンで平衡化されたＰ
Ｄ−１０セファデックスＧ−２５カラムに適用され、Ｐ
ＢＳ中１％正常ヒト血清アルブミン約４゜５ｄで溶離さ
れ、シールドされたガンマ検出器（Ｅｂｃｒｌｉｎｅ社
）でモニターされ、貯蔵および使用のため採集され、あ
らかじめ定めた濃度に希釈される。 生成するｌｆｆ１ ｌ−抗ＣＥＡ １．Ｇは抗体１
分子当り平均ヨー素３ないし７原子を有する。各バッチ
からの無作為部分標本が無菌性、発熱原性、毒性および
その他の品質管理変動について別々にテストされる。 実施例２ モノクローン Ｉ”Ｉ Ｉ−ＣＥＡ Ｉ Ｇの
゛１＃！６月令のＢａ１ｔ＋／Ｃマウスに、がん胎児性
抗原１０ないし１００μｇを腹腔内注射する。その場合
ＣＥＡは等容積（１０−１００μＩ！、）の不完全フロ
イドアジュバント中に混合される。これは１週間後とそ
して２週間後に繰り返されるが、最後はアジュバントな
しで静脈内ルートが用いられる。３日ないし４日後、マ
ウスは頚部膜Ｅ］により殺される。与えられた抗原に対
する抗体を得るための最適時期は、抗原、投与ルート、
免疫化のタイミング、それに最終の増強注射とひ臓細胞
除去の間の間隔によって変化する。 ひ臓を除去し、そして室温で、血清不含培地か、または
２０％ウシ胎児血清を加えたダルベツコの修正イーグル
培地（ＤＭＥＭ）を収容する６０ｍｍペトリ皿中に入れ
、そして細胞を分散するためはさみでミンチする。細胞
はＶｏｒｔｅｘ ミキサー上で１−２分かきまぜること
によりさらに遊離される。 ひ臓細胞は円錐形遠心試験管へ移され、ＩＥＣ−ＭＳ２
遠心機中で１，０００ｒｐｍにおいてベレット化され、
上清が除去され、ペレットをたたいてはぐし７、そして
赤血球を溶解するため１０分間冷たい０．１ Ｎ ８４
Ｃｌ ５ 、ｍｌ中に再懸濁する。２０％ウシ胎児血
清添加の冷却したＤＭＥＭを加え、そして細胞をベレッ
ト化し、そして再び２０％ウシ胎児血清を添加したＤＭ
ＥＭｌ ０ｄ中に懸濁する。 融合のために使用した骨髄腫細胞系統は、高グルコース
（４，５ｇ／ｆｆ）および２０％ウシ胎児血清添加Ｄ
Ｍ Ｆ、 Ｍ中の静止懸濁培養物に、５ないし１０％Ｃ
ＯＺ中、１００．０００ないし１，０００，０００／ｄ
の細胞濃度において保存される。骨髄腫（形質細胞腫）
細胞系統は、５ｖａｓｔｉおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ、
Ｂｉｏｃｈｅｍ。 Ｊｌ、 １２８．４２７−４４４（１９７２）により報
告された、ＭＯＰＣ−２１から誘導されたＢａ１ｂ／Ｃ
形質細胞腫であるＰ３−Ｘ６３−Ａｇ８か、Ｆａｚｅｋ
ａｓ ｄｅ Ｓｔ。 Ｇｒｏｔｈ ＆ Ｓｃｈｅｉｄｅｇｇｅｒ、 Ｂａ５ｌ
ｅ Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ ｏｆＴｍｓｕｎｏｌｇｙによ
るＦＯとして知られるその誘導体か、またはＭａｒｇｕ
ｌｉｅｓ ｅｔ ａｌ、 Ｃｅ１ｌ、 ８ ＋４０５（
１９７６）によって報告された、ＭＰＣ−１１から誘導
されたＢａ１ｂ／Ｃ系統である４ ５．６７ Ｇ １．
７であることができる。これら系統のすべては酵素ヒボ
キサンチンフォスフォリボシルトランスフェラーゼ（Ｈ
ＰＲＴ；Ｅ、ｃ、２．４．２．８）を欠き、そしてその
ためＬｉｔｔｌｅｆｉｅＬｄ、 ５ｃｉｅｎｃｅ＋１４
５，７０９−７１０（１９６４）に記載されているよう
に、ヒボキサンチン、アミノプテリンおよびチミジンを
含有する選択培地中で死滅する。 免疫化した動物から得られるひ臓細胞は、次にＧｅ１ｆ
ｅｒｅｔ ａｌ、 Ｓｏｍａｔ：ｃ Ｃｅ１ｌ Ｇｉｎ
ｅｔｉｃ、、 ３＋２３１−２３６（１９７７）の方法
の採用によるポリエチレングリコールを使用することに
より、形質細胞腫細胞と融合される。例えば３０％ポリ
エチレングリコール溶液は、無菌ポリエチレングリコー
ル４０００ （メルク社、分子量約４，０００）（ポリ
エチレングリコール０．５ｇ＋ジメチルスルホキシド（
ＤＭＳｏ）０．０５ｍ１！＋蒸留水０．５ ｄ ）と、
血清なしのＤＭＥＭとを４１℃へ加熱し、そしてポリエ
チレングリコール３ ｍｌを血清なしのＤＭＥＭ ｐ
Ｈ７゜４−７．６の７ ｍｌと混合することにより調製
され、そして使用まで３７°Ｃで保存される。融合は室
温で行われる。骨髄腫細胞（１０６−１０’）は血清を
含まない培地で２回洗浄され、５０ｍ２円錐底円錐状験
管（ファルコン２０７０）中のひ臓細胞１−３Ｘ１０’
−１−５Ｘ１０’ と混合される。 細胞は２５０Ｘｇで５分間遠心され、そして上清液は注
意深く吸引される。ポリエチレングリコール液の０．２
ｍｌ ｉｆＪが加えられ、そして試験管は細胞を再懸
濁するため手でゆっくりかきまぜられる。 次に細胞は２５０Ｘｇで３分間、そして再度４００Ｘｇ
で３分間遠心され、そしてさらに３分間静止状態に保た
れる。細胞はポリエチレングリコールに約８分曝される
。その後で約５ ａｆｔの血清を含まない培地が試験管
へ加えられ、畦がゆっくり再懸濁され、そして２５０Ｘ
ｇに壮いて５分間遠心することにより再ペレット化され
−る。上清を除去し、そして細胞を血清含有培地２Ｏｄ
中に再懸濁し、そしてＨＡＴ培地がそれへ添加されるマ
イクロプレートに移される前に加湿したインキエベータ
ー中３７℃で４８時間インキユヘートされる。 ソノ化りに、細胞は、ＤＭＥＭ、１０％ＮＣＴＣ１０９
培地（マイクロバイオロジカル、アソシェイッ社）、２
０％ウシ胎児血清（ギブコ社）、２単位ウシインシュリ
ン／ｄ （シグマ社）、０．４５ｍＭピルベート、１ｍ
Ｍオキザロアセテート、および必要に応じ抗生物質より
なる培地３０ｄ中に直接懸濁されるチミジン（１，６Ｘ
１０−’Ｍ）およびヒボキサンチン（ＩＸＩＯ−’Ｍ
）が添加される。 この培地中の細胞は６個のマイクロプレートにウェル当
り１滴（約５０１！ｆ）で分配される。次に日にチ、ミ
ジンとヒボキサンチンを含有し、今回アミノプテリン（
８Ｘ１０−’）を加えた上で規定した培地の１滴を各ウ
ェルへ加える。上の培地を６ないし７日後２滴加え、ク
ローンは顕微鏡的に１０ないし２０日で出現する。ヒボ
キサンチン−アミノプテリン−チミジン（ＨＡＴ）は融
合直後または後で加えることができる。得られる雑種の
数の改善は各マイクロウエルヘフィーダー層を加えると
きに達成される。こ−ではヒト胎児線維芽細胞が４５０
Ｏｒで照射され、そしてこのような細胞１，０００〜２
，０００が各ウェルへ融合の前日または融合した細胞へ
直接加えられ、そしてそれらがマイクロウェル中にその
ように分配される。 顕微鏡的にクローンが出現した後、培地の大部分を除去
し、そして新しい培地を加えることよって交換される。 ２回目の培地交換後、培地はそのままに少なくとも４日
間放置され、次に慣用定量法により抗体活性および特異
性のアッセイのために集められる。 １５０閣プレートまたはローラーボトルから収穫された
消費培養培地から多量の抗体が得られる。 培地は中空繊維濃縮器（アミコン社）によって後で濃縮
される。また２ないし３週間前に約ｌＯ億のクローンし
たハイブリドーマ細胞を注射された無胸腺（無毛）マウ
ス（ｎｕ／ｎｕ）の腹水からも得られる。腹水は各マウ
スの腹腔を食塩水であふれさせることによって食塩水で
希釈され、そして各マウスからの希釈液はプールされる
。 モノクローン性抗ＣＥＡ ＩｇＧは、実施例１（ｆ）
（７）ヨウに１−１３１で放射標識される。 実施例３ ” Ｉ−Ｉ Ｃヤギ ノ゛６ 正常ヤギ免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）（マイルス社）を
臭化シアンで結合したＣＥＡに対してアフィニティー精
製し、そしてｌ−１３１の代りに１−１２３を用い、比
放射能の差に対応して試薬の量を比例的に変更すること
を除いて、実施例１（ｆ）の操作を用いて！−１２３で
放射標識する。標識した抗体の比放射能を例えば１００
−５００／／Ｃｉ／μｇに調節するため担体コー素を添
加することができる。添加した担体ヨードの量は、担体
当りのヨー素原子の与えられた数のため、標識した抗体
分子の比放射能を決定するであろう。 実施例４ １ｆｆＩ Ｉ−ＣＥＡ−”Ｂ Ｉ Ｇの（８）
実施例１または２で製造した抗ＣＥＡ ＩＧＧを、Ｈ
ａｗｔｈｏｒｎｅ ｅＬ ａｌ、 Ｊ、 Ｍｅｄ、 Ｃ
ｈｅｍ、＋ １５，４４９（１９７２）の操作を使用し
て、天然存在比のホウ素−１０アイソトープ（２０％）
を有する１−（３アミノフエニル）−１，２−ジカルバ
クロンードデカルボラン（１２）のジアゾニウム塩の２
０倍モル過剰と反応させる。得られる抗体は、平均して
抗体分子当り２ないし１０個のジアゾ結合カルボラン残
基、または４ないし２０のホウ素−１０原子を有する。 （１））前記（ａ）の抗ＣＥＡ−”Ｂ Ｉ ｇＧを実
施例１（ｆ）と同様にｒ−１３１で放射標識し、抗体分
子当りヨー素１ないし１０原子平均を導入する。 実施例５ 庄’ＪＬｊＪ−”ｆＬる訓戒立食木造 以下に示すように無菌のパイロ−ジエン不合溶液が調製
される。 （ａｌ 無菌溶液はｄ当り次の成分を含有する。 （１）ヒト血清アルブミン（Ｈ３Ａ）（１％、米局方パ
ークデービス社）３４■ （２）０．０４ Ｍリン酸緩衝液ｐ Ｈ７，４−（バイ
オウェア社） （３） ０．９％Ｎ ａ Ｃ１ （４）実施例１によって製造した＋３１ Ｔ−抗ＣＥ
ＡＩ［Ｇ（ヨー素平均約５原子／分子、比放射能約８０
μＣｉ／μｇ） 実施例１の標識抗体は２０μｇ ／ ｔｒｔｌの濃度に
おいて溶液（１）、（２）および（３）中に貯蔵され、
そしてこの溶液を調製するためリン酸緩衝液（ＰＢＳ）
中１％Ｈ５Ａの等容で希釈される。 （ｂ） 実施例３で調製し７’、：” Ｉ−１ｇＧ
を１５，１μｇ／−余分に含有することを除いて（Ｊｌ
）部の操作によって無菌溶液が調製される。比放射能５
００ｐｃｉ／μｇの１２３１−ＩｇＧは１０．２ ／／
ｇ ／ ｍｆｌの濃度で１％Ｉ Ｓ Ａを含むリン酸
緩衝液中に貯蔵される。この溶液の等容を（ａ）部の操
作中のＰＢＳ中１％）（ＳＡの代りに使用する。 （Ｃ） 抗体が実施例２によって製造し、２０ｔｔｇ
／ｌｎＱの濃度でＰＢＳ中１％ＩＳＡに貯蔵され、そし
て比較し得る活性を有するｌｆｆ１ ｌ−抗ＣＥＡ
ＩｇＧであること以外（ｂ）部の操作による無菌溶液
。 （ｄ） 抗体が実施例４によって製造され、抗体分子
当り平均ジアゾ結合したカルボラン残基５個とヨー素１
原子を有し、そして約１６μＣｉ／μｇの比放ル１能を
有する１１１ １−抗ＣＥＡ−１ｏＢ Ｉ ｇＧであ
ること以外ら）部の操作による無菌溶液。最終溶液は抗
体５０．４μｇ／ｍｙを含有する。 実施例６ ■舊五里足 放射性ヨード化した抗ＣＥＡ ＩｇＧを１１１１の疑
いある患者に投与する。患者はヤギＩｇＧまたは骨髄腫
１ｇＧに対するアナフィラキシ−過敏症に対して事前テ
ストされる。ｌ−１３１または■−１２３の甲状腺摂取
を阻止するため、ルゴール液（ピュアバック社）を口か
ら、放射能標識した抗体の注射１日前から開始して７日
間、５滴づつ１日２回投与する。 位置測定はＧｏｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ＋ Ｎ、
Ｅｎｇ、 Ｊ、 Ｍｅｄ、＋２９８．１３８４（１９
７８）の方法により、無菌生理食塩水２Ｏｔｕｌｌ中実
施例５ （ｂ）または５（Ｃ）によって製造した＋２３
７−ＩｇＧを含有する＋３１ １−抗ＣＥＡ ＩｇＧ
の溶液３．５ ｔｎｌを１０分ないし４５分を要して注
入することによって実施される。Ｔｃ−９９ｍ化合物は
使用せず、減算技術は１３＋ １と１ｔ３ １との間
を識別するため慣用の態様に適応している。 抗体の注射完了直後および２，８，１２，２４゜４８お
よび７２時間後走査が行われる。 有意な局在化が２時間後に見られ、時間につれて改良さ
れた解像度が得られ、注射後８ないし２４時間の間に高
原に達する傾向がある。追加のバックグラウンド１２：
ｌｌｌｇＧは添加されない。 この方法のＣＥＡ選沢性は以前のＧｏｌｄｅｎｂｅｒｇ
ｅｔａｌ法と比較できるが、しかし解像度、速さおよ
び便利さは著しく増強される。 実施例７ 譚亜殆差 （ａ） 場合によって実施例６の操作によって検出さ
れ、位置測定された卵巣がんを有する患者に、無菌生理
食塩水５０ｍ１中実施例５（ａ）の溶液１５０ｍＣ１を
静脈内注射により注射する。腫瘍サイズの減少を２０日
以内に観察する。前記投与量を個人ベースに調節された
間隔で繰り返す。 （ｂ） 場合によって実施例６の操作によって検出さ
れ、位置測定された子宮頚部がんを有する患者に、患者
の体重７０ｋｇをもとにして２．８ ｍ Ｃｉの１ｆｆ
ｌ ｌ活性を与えるのに充分な実施例５（ｄ）の溶液
の量（無菌生理食塩水中）を注射する。 腫瘍は実施例６の操作を使用して注射後１２時間で正確
に位置測定される。よくコリメートされた熱中性子ビー
ムが位置決めされた腫瘍位置に集中される。３Ｘ１０”
中性子／ ｃｒｌの照射が各腫瘍位置に対して有効であ
り、そして場合により個人ベースで調節された間隔で、
放射標識を持ちまたは持たない腫瘍位置測定抗体の投与
が繰り返される。成功したＭ！ｉ瘍縮小が観察される。 実施例８ ”’ Ｔ−ＨＣＧ Ｉ Ｇ ヤギ の ″（ａ
）ＨＣＧに対する抗体（抗ＨＣＧ）は、Ｇａｇｓｈａ＆
４ｅ。 Ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ Ｉｎｖｅｓｔｉｓｔｉｇａｔｉ
ｖｅ ａｎｄ−ＤｉａｇｎｏｓｔｉｃＥｎｄｏｃｌｉｏ
ｌｏｇｙ、 ｐａｒｔ ＩＩＩ、 Ｐｅｐｔｉｄｅ
−Ｊ（ｏｒｍｏｎｅｓ 。 Ｂｅａｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ、 Ｅｄｓ、、 ｐａ
ｇｅｓ ７５６−７６３（ＮｏｒｔｈＨｏｌｌａｎｄ、
Ａｍｓｔｅｒｄａｍ＋ １９７８）の方法によって製
造される。 ＨＣＧのβ−サブユニットに対する抗体（抗ＨＣＧ−β
ｒｇｃ）は、Ｖａｉｔｕｋａｉｔｉｓ ｅｔ ａｌ。 ／Ｉｓ、 Ｊ、 ０ｂｓｔｅｔ、 Ｇｙｎｅｃｏｌ、、
１１３，７５Ｈ１９７２）の方法によって製造される
。 （ｂ） 前記（ａ）部において調製した抗体は血清溶
液としてさらに精製された。操作は抗−ＨＣＧＩｇＧお
よび抗−ＨＣＧ−β ＩｇＧについて同一である。 抗−ＨＣＧ （または抗−ＨＣＧ−β）血清の補体は５
６°Ｃで１時間のインキュベーションにより不活性され
、もはや血球凝固活性が検出されなくなるまで、血球凝
固アッセイから計算された血清／ＲＢＣ比をもって抗血
液ＡＢヒ）ＲＢＣが除去される。吸着された抗−ＨＣＧ
血清は０．１ Ｍリン酸緩衝液ｐＨ７，０（ＰＯ，）の
数倍容に対して透析される。 （Ｃ） ヒト尿タンパク（ＨＵＰ）免疫吸着体が精製
したＨ Ｕ Ｐを臭化シアン活性化セファローズ４Ｂへ
結合することによって調製され、ＨＵＰ免疫吸着体カラ
ムが調製され、そして抗−ＨＣＧ （または抗−ＨＣＧ
−β）が精製され、そして実施例１（Ｃ）の操作に準じ
てテストされる。 （ｄ）ＨＣＧ−免疫吸着体力ラムが精製したＨＣＧを臭
化シアン活性化したセファローズ４ＢへＨＵＰ免疫吸着
体のそれと同じカップリング操作により結合し、（Ｃ）
部と同様にカラムを調製し、前循環し、そして平衡化す
ることによって調製される。 ＨＣＧ免疫吸着体カラムは自動クロマトグラフィーシス
テムへ導入され、上記（Ｃ）部からの抗ＨＣＧ血清が実
施例１（ｄ）の操作と同様に精製される。 抗ＨｃＧ ＩｇＣ；製剤の無菌のパイロ−ジエン不含
血清バイアル中へ無菌口過される。部分標本がＲＩＡお
よび免疫拡散による品質管理テストのために保存される
。 （ｅ） セファクリルＳ−２００（ファルマシア社）
カラムが準備され、前記（ｄ）部からのヤギ抗１（ＣＧ
ＩｇＧのロフトが実施例１の操作と同様に精製され、そ
してアジ化ナトリウムを保存剤として添加して、約５ｍ
ｇ ＩｇＧ／ｌｄの１一部分標本として冷蔵される。 げ）”’ Ｉ ｍｃｔ当り７．２ないし１６．８
ｐ ｇのヤギ抗ＨＣＧ ＩｇＧが１３籠 ■（アマー
シャムーサール社）を含む核種バイアル中へ注射され、
標識され、そして実施例１ （ｆ）の操作と同様に精製
され、貯蔵される。 得られるＩｌｌ ｌ−抗ＨＣＧ ＩｇＧまたはＩｌ
ｌ １−抗ＨＣＧ−β ＩｇＧは、抗体分子当すョー
素を平均３ないし７原子有する。各バッチからの無作為
部分標本は無菌性、発熱原性、毒性およびその他の品質
管理変動について別々にテストされる。 実施例９ （ａ） ’ゴ宜 １− ＡＦＰ Ｉ Ｇ ヤ
ギ の過免疫ヤギ抗血清は、西、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ
、＋３０＋２５０７（１９７０）の方法により精製した
ヒトＡＦＰの繰り返した皮肉注射によって精製される。 抗血清の特異性は二重ゲル拡散、免疫電気泳動およびラ
ジオイムノアンセイによって確認される。免疫電気泳動
的に純粋なＩｇＧは、抗血清１０Ｉｄ（７）ＤＥＡＥセ
ルロースクロマトグラフィーと、次にアミコンＰＭ−３
０１１９」−の濃縮によって製造される。４．２ｍｇ／
ｍｆｌの濃度において、ヤギ抗ＡＦＰ ＩｇＧは終
了点として２ｎｇの標識抗体の５０％結合を用いて、ラ
ジオイムノアッセイ力価３Ｘ１０’を有する。 抗体は実施例１（ｆ）の操作と同様に放射標識され、該
実施例記載と同じ様に精製され、貯蔵される。 （ｂ） ＋３’ Ｉ−Ｃ３Ａ Ｔ Ｇ ヤ
ギ の ′”抗Ｃ３Ａｐ血清は、氷水下の脱イオン水の
５容ｆｆ１（Ｗ／Ｖ）中のＧＷ−３９ヒト結腸がん外来
移植肺癌を全速度で２分間ポリトロンによりホモジナイ
ズすることにより調製される。次にホモジネートは４８
，０００Ｘｇで１時間遠心される。透明な上清が免疫原
として使用される。免疫原のタンパク含量はロウソー法
により測定するとき７ ｍｇ／ｄである。ヤギがヤギの
首に皮下投与された、５ｍｆｌの完全フロイドアジュバ
ント中に乳化したホモジネート５ｍＲｃタンパク３５■
）で免疫化される。増強免過は３ないし４週間隔−で続
けられる。 ヤギは毎月試験採血され、そして血清が抗体産生につい
てテストされる。特異抗−Ｃ３Ａｐ抗体の製造のため、
アフィニティにより、１０月目およびその後の日日にお
ける出血が処理される。 抗Ｃ３Ａｐ抗体は各種の臓器および組織抽出物に対して
アフィニティー精製される。ヒト結腸がん、ヒトすい臓
および肺、ハｌ、スター肝臓および〒Ｙ臓の抽出物は、
全速度２分間のポリトロンにより氷水下の脱イオン水５
容（Ｗ／Ｖ）中につくられる。ホモジネートは４８，０
００Ｘｇで１時間遠心される。透明な上清が集められ、
凍結乾燥され、そして臭化シアン法によって抗原をセフ
ァローズ４Ｂへ結合するのに適当なタンパク濃度を得る
ように水に再熔解される。同時に、ヒトおよびハムスタ
ー血清がセファローズ４Ｂへの結合前にタンパクについ
て調節される。ＧＷ−３９水ホモジネートおよびその４
Ｂ、０００ｇ上清は、ＧｏｌｄｅｎｂｅｒＢ ｅｔ ａ
ｌ、 Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ、、３６． ３４５５（１
９７６）に報告されているように、Ｃ３Ａ製造のため９
０％フェノール液で処理され、そしてセファローズ４Ｂ
へ結合される。 アヘイニティー吸着は実施例１（Ｃ）ないしくｅ）の操
作と同様に実施される。粗製ヤギ抗Ｃ３Ａｐ （４ｍｌ
）は結腸がん抽出物を結合したセファローズ４Ｂ１００
屑ｉを収容するカラムへ適用され、下方へ流下すること
を許容される。流下液中にタンパクが出現する時流れを
止め、そして抗血清は免疫吸着体と３０分間反応するこ
とが許容され、そして次にゲルが０．１Ｍ ＰＯ４，
ｐＨ７，０緩衝液で洗浄される。溶離された抗体は直ち
にアミコンＰＭ−３０股上で透析され、０．１ Ｍ
Ｐ Ｏ４，ｐ Ｈ７゜０緩衝液で、次に０．０５ Ｍ
Ｐ Ｏ４、ｐ Ｈ７，０中の１．０Ｍ尿素および１０
％グリセロールで、そして最終に０．１ Ｍ Ｐ Ｏ
ａ 、 ｐ Ｈ７，０緩衝液で平衡化される。抗体は
次にヒトひ臓、肺および血清を結合したセファローズ４
Ｂ７５ｍｆの混合物を通過させられる。抗体が免疫吸着
体と反応することが許容された後、カラムは０．１ Ｍ
Ｐ Ｏａ 、 ｐ Ｈ７，０緩衝液で溶離される
。抗体はアミコンＰＭ３０膜上で濃縮され、そしてハム
スター肝臓、腎臓および血清抗原の混合物を含む免疫吸
着体カラム７５ｍを通過させ、そして前述の態様で処理
される。 最後に抗体はＧＷ−３９Ｍ１ｇのフェノール抽出物でつ
くった免疫吸着体３２０ｄへ適用される。 抗体３０分間インキュベートした後、カラムは０゜１Ｍ
ＰＯ４，ｐＴ（７，０緩衝液で溶離される。抗体は
次に濃縮され、そしてアミコンＰＭ−３０膜上で０．０
５ Ｍ Ｐ ０４． Ｐ Ｈ７，５緩衝液で平衡化
される。このようにして得られるアフィニティー精製さ
れた抗体はセファデックスＧ−２００（２゜５ｘ１００
ｃｍ）カラムに適用され、そして０．０５Ｍ ＰＯ，
、ｐＨ１，５緩衝液を用いて分画される。 ＴｇＧ分画はプールされ、アミコンＰＭ−３０膜上で濃
縮される。抗ＣＳ Ａ ｐ Ｉ ｇ Ｇのタンパクは
２．８ｍｇ／ｍｌに調節され、そして−２０°Ｃで貯蔵
される。 １−１３５による放射性ヨー素化は実施例１（ｆ）の操
作と同様に実施され、そしてｌｆｆ１ ｌ−抗Ｃ３Ａ
ｐ ＩｇＧは核実施例１と同様に精製され、貯蔵され
る。 （Ｃ） 実施例１，８およびこの実施例に類似の操作
を使用し”ζ、ＣＥＡ、ＨＣＧ、ＡＦＰまたはＣ５Ａｐ
の代りに、前立腺酸性フォスファターゼ、すい臓胎児性
腫瘍抗原、胎盤アルカリ性フォスファターゼ、妊婦ベー
ター１−グロブリン、小成小体ホルモン、カルシトニン
、組織ポリペプチド抗原、Ｔ−抗原、ベーター２−マイ
クログロブリン、ガラクトシルトランスフェラーゼ−Ｉ
Ｉ （ＧＴ−■）。 ｇｐ−５２ビールス関連抗原、卵巣のう１１！！瘍関連
抗原（ＯＣＡＡ）、卵巣１１１ｆｆｌ特異抗原（ＯＣＡ
）。 頚管がん抗原（ＣＡ−５８，ＯＣＡ、ＴＡ−４）。 塩基性胎児性タンパク（ＢＦＰ）、末端デオキシヌクレ
オチジルトランスフェラーゼ（ＴｄＴ）。 細胞質黒色腫関連抗原、ヒト星状細胞腫関連抗原（ＨＡ
ＡＡ）、通常グリオーマ抗原（ＣＧＡ）。 膠芽胎児性抗原（ＧＥＡ）、神経膠原線維酸性タンーノ
ぐり（ＧＦＡ）、通常髄膜腫抗原（ＣＭＡ）および腫瘍
脈管形成因子（ＴＡＦ）のいずれが１種を用い、そして
適当なアフィニティー精製により、これら抗原に対する
標識した抗体が得られる。 実施例１０ モノクローン １３コ Ｉ−ＡＦＰ Ｉ Ｇのモノ
クローン性１３３１−抗ＡＦＰ ｒｇＧは、ＣＥＡの
代りにＡＦＰ抗原を使用することを除いて、実施例２の
操作と同様に製造される。 モノクローン性抗ＡＦＰ ＩｇＧは実施例１ （ｆ）
の操作と同様に１−１３３で放射標識される。 実施例１１ １！１１ ＴＧ ヤギ の ゛１ 正常ヤギｒｇｃ（マイルス社）は、臭化シアン結合ＨＣ
Ｇ、ＡＦＰおよびＣ３Ａｐに対してアフィニティー亨ｎ
製され、そしてｌ−１２３をＴ−１３１に代え、実施例
３のように比放射能の差を補償するように試薬の比率を
変更することを除き、実施例１（ｆ）の操作と同様に１
−１２３で標識される。 実施例１２ １’＋ １− ＡＦＰ−１０Ｂ Ｉ Ｇの（ａ
） 実施例９（ａ）によって製造した抗ＡＦＰ Ｉ
ｇＧを、実施例４（ａ）の操作と同様に、ホウ素−１Ｏ
天然存在比（２０％）を有する、１−（４−アミノフェ
ニル）−１，２−ジカルバクロソードデカルボラン（１
２）のジアゾニウム塩の２０倍モル過剰と反応させる。 生成する抗体は抗体１分子当り、平均ジアゾ結合カルボ
ラン残基２ないし１０個、もしくは４ないし２０個のホ
ウ素−１Ｏ原子を有する。 ［有］）上記（ａ）部の抗ＡＦＰ−１０Ｂを実施例１（
ｆ）の操作と同様に１−１３１で放射標識し、抗体１分
子当りヨー素平均１ないし１０原を導入する。 実施例１３ 財し′る の！１′告 無菌のパイロ−ジエン不合溶液は以下に示すように製造
される。 （ａ） 無菌溶液はｍｌ当り以下の成分を含有する。 （１）ヒト血清アルブミン（ＩＳＡ）（１％、米局方、
バークデービス社）３．４■ （２）０．０４ Ｍリン酸緩衝液、ｐＨ７，４（バイオ
ウェア社） （３） ０．９％ＮａＣ１ （４）実施例日によって製造した１３１■−抗ＨＣＧＩ
ｇＧ（ヤギ） ｌＯｔｔｇ （平均ヨー素約５原子／分
子、比放射能約８０μＣｉ／μｇ）実施例８の標識抗体
は２０μｇ／ｌｅｌの濃度で（１）、（２）および（３
）の溶液中に貯蔵され、そしてこの溶液を調製するため
にリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中の１％Ｈ３Ａの等容で
希釈される。 （ｂ） 実施例１１で製造したＩｌｌ ｌ Ｉｇ
Ｇの５．１μｇ／ｄをさらに含有することを除いて、上
記（ａ）部の操作による無菌溶液。標識放射能５００μ
Ｃ１／ｌｔｇにおける１２ｆｆｌ１ｇＱは濃度１０．２
ｕｇＺ−において１％Ｈ３Ａを含むリン酸緩衝食塩水
中に貯蔵される。この溶液の等容が（ａ）部の操作にお
けるＰＢＳ中１％Ｈ３Ａの代りに使用される。 （Ｃ） 抗体が実施例９（ａ）により製造され、濃度
２０μｇ／ｄにおいてＰＢＳ中１５Ｈ３Ａ中に貯蔵され
、そして匹敵する比放射能を有するＩＩＩ ｌ−抗Ａ
ＦＰ Ｉ ｇＧ （ヤギ）であることを除き、（ｂ）
部の操作による無菌溶液。 （ｄ） 実施例１０により製造した＋３：ｌ ［−
抗ＡＦＰＩ Ｆ、 Ｇ （モノクローン性） １０
ｔｔ ｇ／ｌｎｌをさらに含有することを除き、（１）
）部の操作による無菌溶液。 ３１１−抗■ＩＣＧ Ｉ ｇＧ、” Ｉ Ｉ ｇ
Ｇおよび１１３ １−抗ΔＦＰ ＩｇＧはそれぞれ最
終溶液の所望の比放射能の３倍の濃度で貯蔵され、そし
て各溶液の等容が無菌溶液の調製に使用される。 （ｅ） 抗体が実施例１２により製造され、抗体１分
子当りジアゾ結合カルボラン基を平均５個およびヨー素
平均】原子と、そして比放射能１６μＣｉ／μｇを有す
る１ｆｆＩ ｌ＝抗ＡＦＰ ＩｇＧであることを除
き、（Ｌ））部の操作による無菌溶液。溶液は抗体５０
．４ ’ｕ ｇ／ｍｌｌ含有する。 実施例１４ 脛鹿痩ｌ護足 放射性ヨード化した抗体は腫瘍の疑いある患者に投与さ
れる。患者はヤギＩｇＧに対するアナフィラキシ−過敏
症に対して事前テズ斗される。■−１３１またはｌ−１
２３の甲状腺摂取を阻止するため、ルゴール液（ピュア
パック社）が放射性標識抗体の注射１日前から始まる７
日管５滴づつ毎日２回口から投与される。 （ａ） 位置測定は、Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ
ａｌ、 Ｎ、 Ｅｎｇ、 Ｊ。 Ｍｅｄ、、 ２９８．１３８４（１９７８）の操作によ
り、無菌生理食塩水２０ｍ１中実施例１３（ｂ）によっ
て製造した＋！ｆｆｌ１ｇＧを含有するｌｊｌ ｌ−
抗ＨＣＧＩｇｃの溶液３．５ ｄを１０ないし２０分を
要して注入することにより実施される。Ｔｃ−９９ｍ化
合物は使用せず、減算技術は慣用の態様で１−１３１と
１−１２３とを識別するのに適応し７ている。 抗体の注射完了直後および２，８，１２，２４゜４８お
よび７２時間走査が行われる。 データ解析はフォト操作データをタンピ１−ターに記憶
させ、標識した正常免疫グロブリンの放射能レベルを少
な（とも１つの標的区域における標識抗体のそれと等化
し、各データポイントについて標識抗体に対するバック
グラウンドレベルを計算し、各データポイント毎に標的
を指向した抗体の活性に対する値を発生するため、写真
毎に全抗体活性からえらえたバックグラウンド値を減算
し、そして得られる標的指向抗体活性の発生した値を関
連する出力（３号を発生させるために使用することを含
む。 有意を局在化が２時間後に見られ、時間とともに解像度
が改善され、注射後８ないし２４時間で高原へ達する傾
向がある。追加のバックグラウンドｌｌｊ１ｇＱは加え
ない。この方法はＨＣＣ選択性は以前のＧｏｌｄｅｎｂ
ｅｒｇ ｅｔ ａｌの方法に匹敵するが、しかし解像度
、速さおよび便利さは著しく増強される。 造影は）−（ＣＧを排泄するこう丸生殖細胞腫瘍を持つ
患者において特に成功する。これら患者の２次的骨盤お
よび腹部ＩＩＩ瘍もまた成功して位置測定され、それら
のうちあるもの、例えば腹部転移はコンピューター化し
た腹部断層撮影法、静脈内賢う造影法および下部ビナキ
アボグラフィーによっては検出困難または不可能である
。 ら）抗体が実施例１３（Ｃ）ｔ？製造したＩ！ｆｆ１１
５Ｇを含有する溶液中のＩＩＩ Ｉ−抗ＡＦＰ Ｉ
ｇＧであることを除いて、（ａ）部の操作を繰り返す。 造影は（ａ）のそれに匹敵し、こう丸および肝臓がんを
有する患者に特に成功である。しばしば高く上昇するＡ
ＦＰレベルにもか＼わらず、２次的腹部および肺転移が
よく位置測定される。 （Ｃ） 抗体溶液が実施例１３（ｄ）により製造した
１３−Ｉ−抗ＨＣＧ ＩｇＧ、” Ｔ−抗ＡＦＰ
ＩｇＣ；および１！３７１ｇＧの３．５ ｘｔｌである
ことを除き、（ａ）部の操作が繰り返される。フォト走
査データが慣用手段でｌ−１３１，ｌ−１３３およびｌ
−１２３放射を分離し、標識標的抗体に対するバックグ
ラウンド値を決定するため等化したｌ−１２３／１−１
３１およびｌ−１２３／ｌ−１３３比を記憶して使用し
、これらを各抗体に対する個別的標的指向活性を計算す
るため減算することによって解析される。 造影は（ａ）部および（ｂ）部の別々の抗体走査により
成功して造影されたすべてのタイプの腫瘍に対して成功
である。走査の組み合せは多数の場合において、特に胎
児性がんにおいて増強された位置測定および解像度を与
える。 実施例１５ 腫爪准療 （ａ） 場合により実施例１４ （ａ）の走査によっ
て検出され、位置測定されたこう丸生殖細胞がんを有す
る患者に、無菌生理食塩水５０城中実施例１３（ａ）の
溶液１５０ｍＣｉを静注する。腫瘍の縮小が２０日以内
に観察される。この投与は個人毎に調節される間隔で繰
り返される。 ０））場合により実施例１４（ｂ）の操作により検出さ
れ、位置測定された肝臓がんを有する患者に、患者の体
重７０ｋｇに対して＋３１ １活性２．８ｍＣ１を与え
るのに充分な量の実施例１３（ｅ）の溶液（無菌生理食
塩水５０ｍ１中）を注射する。腫瘍は実施例１３の操作
を用いて注射１２時間後に精密に位置測定される。よく
コリメートした熱中性子ビームが区切られる腫瘍位置へ
集中される。Ｃ艷当り３×１０１ｇ中性子の照射が各腫
瘍位置について実施され＼そして個人ベースで調節され
た間隔で、放射標識しまたはしない腫瘍位置測定抗体の
投与と共に繰り返される。成功した腫瘍縮小が観察され
る。 実施例１６ （ａ） リン酸緩衝食塩水中ｔ５ｍｇ／ｍの実施例１
で製造したアフィニティー精製したヤギ抗ＣＥＡＴ ｇ
０２ ｍｆｔが、４°Ｃにおいて２４時間、１００ｍ
Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液、Ｐ Ｈ４，０（Ｎ ａ Ａ
ｃ ）に対して透析される。抗体溶液はねし蓋つき試験
管へ移され、３７°Ｃへ予熱され、そしてＮａＡｃ中３
■／ ｍｌのブタペプシン（シグマ社）０．１ｄと３７
°Ｃで１６時間インキュベートされる。沈澱を含むダイ
ジェストは１００ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ７
，５（ＰＯ４）に対して４°Ｃで６時間透析される。得
られる溶液はセファデックスＧ１００上でＰＯ，でクロ
マトグラフされ、Ｆ（ａｂ’）、フラグメントは２番目
のタンパクピークに溶離される。Ｆ（ａｂ’）２分画を
合し、限外口過で濃縮し、５０ｍＭ ＰＯ，、ｐＨ７
，５に対し透析し、そして−２０°Ｃで貯蔵する。 （ｂ） ゲル口過前の（ａ）部で得られた溶液をサン
プルｍｌ光り７μｌの２−メルカプトエタノールで処理
し、４°Ｃで０．５時間一定のかきまぜのもとにインキ
ュベートする。サンプルｌｄｌ当り、１Ｍヨードアセタ
ミド０．１３５ ｔｅｌを加え、混合物をかきまぜなか
ら４°Ｃで１時間インキュベートし、遠心して清澄化す
る。 得られる粗製Ｆａｂ’ フラグメント溶液はセファデッ
クスＧ−１００上でゲルロ遇され、抗ＣＥＡＦａｂ’
フラグメントは２番目のタンパクピークに溶離される。 ビーク２の分画がプールされ、限外口過により濃縮され
、５０ ｍＭ Ｐ Ｏ４ｐ Ｈ７，５に対して透析さ
れ、−２０℃で貯蔵される。 （Ｃ） 前記（ａ）部の操作により、抗ＨＣＧ、抗Ａ
ＦＰ。 抗Ｃ３Ａｐ、抗ＣＧＡ、抗ＧＥＡ、抗ＧＦＡ、抗ＣＭＡ
および抗ＨＡ Ａ ＡのＦ（ａｂ’）、フラグメントが
製造される。 （ｄ） 前記（ａ）部および（ｂ）部の操作により、
抗ＨＣＧ。 抗ＡＦＰ、抗Ｃ３Ａｐ、抗ＣＧＡ、抗ＧＥＡ、抗ＧＦＡ
、抗ＣＭＡおよび抗ＨＡＡＡのＦａｂ’フラグメントが
製造される。 （ｅ）”’ ｌ−１ｍＣ１当り、前記（ａ）部または
（Ｃ）からＦ（ａｂ’）、フラグメント４．４ないし１
０．２μｇ１または前記（ｂ）部または（ｄ）部からの
Ｆａｂ’フラグメント２．４ないし５．６μｇが１２１
１ （アマーシャムーサール社）を含む放射性核種バ
イアル中へ注射され、実施例１ （ｆ）の操作と同様に
放射標識される。 得られる＋３１ １−抗体Ｆ（ａｂ’）、は、フラグメ
ント当すョー素平均３ないし７原子を有する。 各バッチからの無作為部分標本は個々に無菌性、発熱原
性、毒性およびその他の品質管理変動についてテストさ
れ、る。 実施例１７ フラグメントの および （ａ）ＮａＡｃ緩衝液ｐ Ｈ５，０中１５ｍｇ／ｄ溶液
の形の、実施例１６（Ｃ）で製造した抗ＣＥＡおよび抗
Ｃ３ＡｐＦ （ａ ｂ’ ）ｚフラグメントの等量混合
物がサンプル プトエチルアミン塩酸塩溶液で処理され、一定したかき
まぜのちとに３７°Ｃで１時間インキュベートされる。 混合物は還元剤を除去するためｐＨ５で４０゛Ｃにおい
てイオン交換カラム（ＩＲ１２０）を通され、得られる
溶液はｐＨ８に調節され、ゆるやかにかきまぜながらそ
して酸素を溶液に通しながら２時間かきまぜる。溶液は
次にＰＯ４に対して４°Ｃで６時間透析され、実施例１
６（ａ）の最終工程のようにセファデックスＧ−１００
上ＰＯ４でクロマトグラフされる。 Ｆ（ａｂ’）、混成フラグメントを含有する分画は２番
目のタンパクピークに溶離される。この分画は臭化シア
ンで結合したＣＥＡおよびＣＳＡｐを含む別々のセファ
ローズ４Ｂカラム上のアフィニティークロマトグラフィ
ーにかけられる。両方のカラムに保持される分画は混乱
的に解離され、セファデックスＧ−１（１０）で再クロ
マトグラムされ、そして硫安で沈澱し、解離しそしてＰ
Ｏ４に対し透析することによってさらに精製され、そし
て抗ＣＥＡ／ＣＳＡｐ Ｆ （ａ ｂ” ）ｚの溶液は
一２０°Ｃで貯蔵される。 −（ｂ）上記（ａ）部の操作により、以下の混成Ｆ（ａ
ｂ’）フラグメントが製造される。成分Ｆａｂ’記号は
それらの抗体源によって示される。 （１）抗Ａ Ｆ Ｐ ／ Ｈ Ｃ Ｇ Ｆ （ ａ
ｂ ’ ） ｚ（２）抗ＣＥＡ／Ｐ ＡＰ Ｆ （ａ
ｂ’ ） ｚ（３）抗ＣＧＡ／ＣＥＡ Ｆ （ａｂ
’ ）。 （Ｃ） 上記（ａ）部および（ｂ）部で製造したフラ
グメントはそれぞれ実施例１ （ｆ）の操作に同様に１
−１３１またはＩ−１３３のどちらかで放射標識される
。 実施例１８ Ｉ Ｇフラグメントの ２および 正常ヤシＩｇＧ（マイルス社）が臭化シアン結合された
ＨＣＧ，ＡＦＰ，ＣＳＡｐ，ＣＥＡ，ＰＡＰ，ＧＥＡお
よびＣＧＡに対してアフィニティー精製され、実施例１
６の操作によりフラグメン）・化され、そしてフラグメ
ントが、Ｉ−１２３を１−１３１の代りに使用し、そし
て実施例３のように比放射能の差を補償するため試薬の
比例的変更を行うこと以外は実施例１ （ｆ）の操作と
同様に１１２３で放射標識される。 実施例１９ ホウ ー１０Ａ フーグメン の および旧識 （ａ） 抗体フラグメント、例えば実施例１６により
製造した抗ＣＥＡ Ｆ（ａｂ’）ｚを、実施例４（ａ
）の操作と同様に、ホウ素−１０を天然存在比に含む（
２０％）、１−（３−アミノフェニル）−１ ２−ジカ
ルバクロソードデカルボラン（１２）のジアゾニウム塩
の２０倍モル過剰と反応させる。 得られるフラグメントは抗体フラグメント当りジアゾ結
合カルポラン残基を平均２ないし１０個もしくはホウ素
−１０を４ないし１０原子有する。 （ｂ） 前記（ａ）部の抗ＣＥＡ−’°Ｂ−Ｆ（ａｂ
’）。 は実施例１（ｆ）の操作と同様に１−１３１で放射標識
され、抗体フラグメント当りヨー素を平均工ないし１０
原子が導入される。 （Ｃ） 実施例１６（Ｃ）のＦ（ａｂ’）ｚフラグメ
ントをそれぞれこの実施例の（ａ）部の操作によりカル
ボラン付加物を付加するように反応させ、得られるホウ
素−１０含有フラグメントは実施例１（ｆ）の操作と同
様に放射標識され、抗体フラグメント当りヨー素平均１
ないしＩＯ原子の標識が達成される。 同 ヨードアセタミドの代りに、１−（４−アミノフェ
ニル）−１．２−ジカルバクロソードテカルボラン（１
２）のＮ−ヨードアセタミドが使用される以外は、実施
例１６（ｂ）の操作が繰り返される。該アミドは、慣用
方法により、塩基の存在下アミンをヨードアセチルクロ
ライドと反応させることによって製造される。得られる
Ｆａｂ’ フラグメントは、還元的開裂で遊離されたス
ルフヒドリル基に、２個のカルポラノフェニル置換アセ
タミド基を有する。ホウ素−ｌＯ含有フラグメントは、
抗体フラグメント当りヨー素平均１ないし１０原子の標
識を得るように、実施例１（ｆ）の操作と同様に放射性
ヨード化される。 （ｅ） 実施例１７（ａ）および１７［有］）によっ
て製造した混成Ｆ（ａｂ”）２フラグメントをこの実施
例の（ａ）部のように反応させ、次に抗体フラグメント
当リョー素１ないし１０原子の標識を得るように、実施
例１（ｆ）の操作と同様に放射性ヨード化される。 実施例２０ 対」・し′＝る ′ のｉ−告 無菌のパイロ−ジエン不合溶液が以下のように製造され
る。 （ａ） ｒｎｌ当り、以下の成分の含有する無菌溶液
（１）ヒト血清アルブミン（ＩＳＡ）（１％、米局方、
パークデービス社）３４ａ＋ｇ （２）０．０４ Ｍリン酸緩衝液、ｐＨ７，４（バイオ
ウェア社） （３） ０．９％ＮａＣＩ （４）実施例１６により製造したｌｆｆ１ ｌ−抗Ｃ
ＥＡＦ （ａｂ’ ）ｚ （ヤギ）６．１μｇ（ヨー
素平均約５原子／分子、比放射能約１２５μＣｉ／μｇ
） 実施例１６の抗体は２４．４μｇ／ａｌの濃度で溶液（
１）、（２）および（３）中に貯蔵され、この溶液を調
製するためにリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中の１％ＩＳ
Ａの３容で希釈される。 （ｂ）一実施例１８で製造した比放射能−５００μＣｉ
／ｌｔｇの”’ Ｉ−Ｆ （ａ ｂ’ ） ！ ６５．
２１！ ｇ／１ｔｄｌをさらに含有することを除き、上
記（ａ）部の操作による無菌溶液。Ｉｚｓ Ｉ−Ｆ （
ａ ｂ’ ） ｔは濃度２０．８μｇ ／ Ｍｌにおい
て１％Ｈ３Ａを含むＰＢＳ中に貯蔵される。この溶液の
等容が（ａ）の操作におけるＰＢＳ中の１％ＩＳＡの１
容の代りに使用される。 （Ｃ） 抗体が実施例１６により製造され、濃度４０
゜４！ｇ／１ｔｄｌにおいてＰＢＳ中１％Ｈ３Ａ中貯蔵
され（フラグメント当すョー素平均２．５原子）、そし
て＋３盲 Ｉ−抗ＣＥＡ Ｆ （ａｂ’ ）ｚフラグ
メントの活性の約半分を有するＩＩＩ Ｉ−抗ＡＦＰ
Ｆａｂ’の１０．１μｇ／ｄであり、そして目３■−Ｆ
（ａｂ’ ）！の代りに”’Ｉ−Ｆａｂ’を■−１３
１対１−１２３の活性化が実施例２ｏ（ハ）と同じにな
るような比放射能において含むこと以外は、（ａ）部の
操作による無菌溶液。 （ｄ） 抗体が実施例１６により製造され、２４．４
μｇ／ｍｌの濃度でＰＢＳ中１％ＩＳＡに貯蔵され、そ
して匹敵する比活性を有するＩＩＩ ｌ−抗Ｃ３Ａｐ
Ｆ（ａｂ’）＝であることを除いて、（ハ）部の操
作による無菌溶液。 （ｅ） 抗体が実施例１７により製造され、２４．４
！ｇ ／ ｔｔｔｆｌの濃度でＰＢＳ中の１％ＩＳＡに
貯蔵され、そして匹敵する比活性を有する１３１ １−
抗ＣＥＡ／ＣＳ Ａ ｐ混成Ｆ （ａｂ’ ）、である
ことを除き、（ｂ）部の操作による無菌溶液。 （「）それぞれ２４．４！ｇ／ｄの濃度でＰＢＳ中の１
％ＩＳＡに貯蔵され、そして匹敵し得る比活性を有する
１コ１ ■−抗ＡＦＰ Ｆ（ａｂ’）ｚおよび１３１
１−抗ＨＣＧＦ （ａ ｂ’ ）ｔをそれぞれ６゜１
μｇ ／ ｍｌさらに含むことを除き、（ｂ）部の操作
による無菌溶液。それぞれの等容が（ａ）部の操作にお
けるＰＢＳ中の１％ＩＳＡの１容の代りに使用される。 （ロ）実施例１７により製造し、２０．４！ｇ／ｌｄｌ
の濃度でＰＢＳ中の１％Ｈ３Ａ中に貯蔵され、そして匹
敵し得る比活性を有する１１３ １−抗ＡＦＰ／ＨＣＧ
Ｆ（ａｂ“）！をさらに含むことを除いて（ｅ）部
の操作による無菌溶液。 色）抗体が実施例１７により製造され、２４．４μｇ／
ｄｌの濃度でＰＢＳ中の１％ＩＳＡに貯蔵され、そして
匹敵する比活性を有する１３１ ｌ−抗ＣＧＡ／ＧＥ
Ａ Ｆ （ａ ｂ’ ）ｚフラグメントであることを
除き、［有］）部の操作による無菌溶液。 （ｉ） 抗体が実施例１９により製造され、抗体分子
当り平均５個のジアゾ結合カルボラン残基とヨード１原
子とを有し、そして約２５μＣ３／μｇの比放射能を有
するＩｌｌ ｌ−抗ＣＥＡ−１’Ｂ Ｆ （ａｂ’
）、フラグメントであることを除き、［有］）の操作に
よる無菌溶液。 （ｊ） 抗体が実施例１９により製造され、抗体分子
当り平均５個のジアゾ結合カルボラン残基およびヨード
１原子とを有し、そして約２５μＣｉ／μｇの比放射能
を有するＩＩＩ ｌ−抗ＣＥＡ／Ｃ５Ａｐ−ＩＯＢ混
成 Ｆ （ａ ｂ ’ ） ｚ Ｔ：アルコトラ除キ、
（ｂ）の操作による無菌溶液。 最終溶液は抗体３０．６！ｇ／ｒｄを含有する。 仮）抗体が実施例１９（ｄ）により製造され、抗体分子
当り平均２個のアミド結合カルボラン残基およびヨー素
ｌ原子とを有し、そして約５２μＣｉ／ｌｔ ｇの比放
射能を有する＋３１ ■−抗ＡＦＰ−貫ｏＢＦａｂ’
フラグメントであることを除き、（ｂ）部の操作によ
る無菌水溶液。最終溶液は抗体１６．８μｇ ／ ｍｌ
ｌを含存する。 （１）抗体が実施例１９（ｅ）により製造され、抗体分
子当り平均５個のアミド結合カルボラン残基およびヨー
素１原子とを有し、そして約２５μＣｉ／ｌｔ ｇの比
活性を有する＋３１ （−抗ＣＧＡ／ＧＥＡｏＢ混成
Ｆ（ａｂ’）ｘフラグメントであることを除き、（ｔ）
）部の操作による無菌溶液。最終溶液は抗体３０．６μ
ｇ ／ ＃Ｎを含存する。 実施例２１ 脛部−位Ｍ’／Ｄ’Ｊ淀− 放射性ヨード化した抗体フラグメントは腫瘍の疑いのあ
る患者に投与される。患者は対応する■ｇｃフラグメン
トに対するアナフィラキシ−過敏症について事前テスト
される。ｌ−１３１または１−１２３の甲状腺摂取を阻
止するため、ルゴール液（ピュアバック社）が放射性標
識抗体フラグメントの注射１日前から始める７田関、５
滴づつ１日２回口から投与される。 （ａ） 位置測定はＧｏｌｄｅｒｂｅｒｇ ｅｔ ａ
ｌ、 Ｎ、 Ｅｎｇ、 Ｊ。 Ｍｅｄ、、 １３８４（１９７８）の方法により、無菌
生理食塩水２０ｍ！中の、実施例２０［有］）により製
造した＋ｚｚ ＩＦ（ａｂ’）２を含むｌｆｆ１
ｌ−抗ＣＥＡＦ（ａｂ’）、の溶液３．５ ｍｌを１０
分ないし２０分を要して注入することにより実施される
。Ｔ ｃ、−９９ｍ化合物は使用されず、減算技術は慣
用態様で１−１３１および！−１２３を識別するのに適
応している。フラグメントの注射の完了直後、および２
，４，８，１２，２４．４８および７８時間後走査が行
われる。 データ解析は、フォト走査データをコンピューターに記
憶させ、標識した正常１ｇＧフラグメントの活性レベル
を少なくとも１つの標的区域における標識した特異フラ
グメントのそれに等化し、そして各データポイントに対
し標識したフラグメントのためのバックグラウンドレベ
ル値を計算し、得られたバックグラウンド値を全フラグ
メント活性から減算し、各データポイントに対し標的へ
向ったフラグメントの活性のための値を発生させ、そし
て得られた標的指向フラグメント活性に対する発生させ
た値を関連する出力信号を発生ずるように使用すること
を含む。 ２時間後に有意な位置測定が見られ、時間とともに改良
された解像度が得られ、注射後４ないし１２時間の間に
高原に達する傾向が見られる。追加のバックグラウンド
１２３ １−ｐ’ （ａ ｂ’ ） ｔは加えられない
。この方法のＣＥＡ特異性は以前のＧｏｌｄｅｒｂｅｒ
ｇｅｔ ａｌ法に匹敵するが、しかし解像度、速さおよ
び便利さは著しく増強された。 （ｂ） 実施例２０（ｂ）の溶液の代りに実施例２０
（Ｃ）の溶液３．５ ＩＩｄｌを使用し、上記（ａ）
部の操作が繰り返される。 造影は（ａ）部に匹敵し、こう丸および肝臓がんを有す
る患者に特に成功する。２次的肺および腹部転移は、し
ばしば高く上昇する血清ＡＦＰにもかかわらず良好に位
置測定される。 （Ｃ） 実施例２０（ｂ）の溶液の代りに実施例２０
（ｄ）の溶液３．５ ｄを使用し、（ａ）部の操作が
繰り返された。 造影は（ａ）部のそれに匹敵し、結腸がんを有する患者
に特に成功する。 （ｄ） 実施例２０（ｂ）の溶液の代りに実施例２０
（ｅ）の溶液３．５ ｄを使用し、（ａ）部の操作が
繰り返される。 胃腸がんの造影は特にシャープで、この実施例の（ａ）
部および（Ｃ）部に匹敵する。 （ｅ） 実施例２０［有］）の溶液の代りに実施例２
０（ｆ）の溶液３．５ ｄを使用し、（ａ）部の操作を
繰り返す。 この実施例の（ａ）、Ｃ３））および（Ｃ）部で位置測
定および検出に成功したタイプのすべての腫瘍の造影に
成功する。組み合わせ走査は多くの場合、特にこう丸生
殖細胞、肝臓および肺がんに対して増強された位置測定
および解像度を与える。 げ）実施例２０（ロ）の溶液の代りに実施例２０（−の
溶液３．５ ｄを使用し、（ａ）部の操作を繰り返す。 造影はこの実施例の（ａ）ないしくｂ）部の操作により
造影されるすべての腫瘍タイプに対し、この実施例の（
ｂ）部のそれに匹敵する。 （８）実施例２０ （ｂ）の溶液の代りに実施例２０（
ハ）の溶液３．５ ｍを使用し、（ａ）部の操作を繰り
返す。脳の膠芽腫の造影に成功し、混成抗体は血液−脳
障壁を通過することができ、そして脳腫瘍中に集中する
ことを示す。 実施例２２ 且鹿治亙 （ａ） 場合により実施例２１の操作により検出され
、位置測定された卵巣がんを有する患者に、無菌生理食
塩水５０ｍ１中実施例２０ （ａ）の溶液１５０ｍＣ１
を静注する。腫瘍サイズの縮小は２０日以内に観察され
る。該投与は個人ペースで調節された間隔で繰返される
。 （ｂ） 場合により実施例２１の操作により検出され
、位置測定された子宮頚部がんを有する患者に、患者の
体重７０ｋｇに対しＩ！Ｉ Ｔ活性２．８ｍＣ１を与
えるのに充分な量の実施例２０（ｉ）の溶液（無菌生理
食塩水５０ｍ１中）を注射する。 １１１ｆｆｉは実施例２１の操作を用いて注射後１２時
間で精密に位置測定される。よくコリメートされた熱中
性子ビームが区切られた腫瘍１立置に集中される。Ｃ−
当り３Ｘ１０”中性子の旧１が各腫瘍位置に対して実施
され、そして場合により個人ペースで調節された間隔で
、放射標識し、またはしない腫瘍位置測定剤の投与とと
もに繰り返される。 成功する腫瘍縮小が観察される。 （Ｃ） 実施例２００）の溶液の代りに実施例２０（
ｊ）の溶液が使用され、患者が結腸がんを有することを
除いて、上記（ハ）部の操作が繰り返される。成功した
腫瘍縮小が観察される。 （ｄ） 実施例２０（ｉ）の溶液の代りに実施例２０
（ｋ）の溶液が使用し、そして患者がこう丸生殖細胞Ｎ
ＩＴ！瘍を有することを除いて、ｂ）部の操作が繰り返
される。腹部転移の減少を含む、成功した腫瘍縮小が観
察される。 （ｅ） 実施例２０（ｉ）の溶液の代りに実施例２０
（＋）の溶液を使用し、そして患者が脳の膠芽腫を有す
ることを除き、（ｂ）部の操作が繰り返される。成功し
た腫瘍縮小が観察される。 前記実施例は本発明の一般的にまたは特定的に記載した
反応剤および／または処理条件で前述の実施例中に使用
されたそれらの置き換えることにより、同様の成功度を
もって繰り返すことができる。 以上の記載から、当業者は本発明の基本的特徴を確かめ
ることができ、そしてその精神および範囲を逸脱するこ
となく、その各種の用途および条件に適応させるため本
発明の各種の改変を行うことができる。
。このことはさらに他のどの方法でもしばしば困難また
は不可能であるより小さい腫瘍を検出し得ることを意味
する。高度に特異なモノクローン性抗体は雑種形成技術
によって製造することができる。このような抗体は通常
精製を殆んどまたは全く必要とせず、そして通常少なく
とも７５％の特異免疫反応性を持ち、ある場合には９５
％以上の特異性を有する。このようなモノクローン性の
ハイブリドーマ誘導抗体もまた本発明において使用する
のに好適である。好適な具体例において、モノクローン
性抗体は、サルに精製した腫瘍関：Ｊｔ７−カーを挑戦
させ、抗体産生サルリンパもしく４よひ臓細胞をヒトも
しくはマウス骨髄腫細胞と融合して雑種細胞をつくり、
次にこれを分離し、クローン化し、前記マーカー物質に
特異なモノクローン性抗体を生成するそれらの能力につ
いて選定する。 免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）分画からのモノクローン性
抗体はこの方法で得られ、そして本発明による腫瘍検出
、位置測定および治療のため使用されるフラグメントを
製造するために使用される。 Ｋｏｐｒｏｗｓｋｉ の米国特許第４，１７２，１２４
号のＩｇＭ千ツクツクローン性抗体の方法に使用するた
めに適していない。 抗体フラグメントはＦ （ａｂ’ ）ｚと呼ばれる５Ｓ
フラグメントを与えるように抗体をペプシンで酵素分解
することによって製造し得ることが知られている。この
フラグ、メントはさらにチオール還元剤と、場合によっ
てジサルファイド結合の開裂から生ずるスルフヒドリル
基のブロッキング基を使用して開裂し、３．５５ Ｆ
ａｂ’ １価フラグメントを生成させることができる
。その代りに、パパインを使用する酵素分解は直接２個
の１価Ｆａｂフラグメントおよび１個のＦｃフラグメン
トを生成する。これらの方法は特に米国特許第４゜０３
６．９４５号およびその引用文献に、そしてＮ１５ｏｎ
ｏｆｆｅｔ ａｌ、 Ａｒｃｈ、 Ｂｊｏｃｈｅｍ、
Ｂｔｏｐｈｙｓ、、 ８９，３２０（１９６０）；Ｐｏ
ｒｔｅｒ、 Ｂｉｏｃｈｅｍｊ、、 ７３，１１９（１
９５９）； Ｅｄｅｌ＋ａａｎ ｅｔａＬ ”Ｍｅｔｈ
ｏｄｓ ｉｎ Ｉｗ＋＋＋＋ｕｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ
Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ。 Ｖｏｌ、 １，４２２（Ａｃａｄ、 Ｐｒｅｓｓ＋ １
９６７）に記載されて０る。 抗体を開裂する他の方法、例えばＦａｂフラグメントの
それ以上の開裂または他の酵素もしくは化学的手法の使
用も使用することができる。それらの親抗体がそれに対
して上昇された腫瘍関連マーカーに対して特異性を保持
しているフラグメントだけがこの方法に使用される。 混成抗体フラグメントは異なる抗体の還元的開裂から生
ずるＦａｂ“フラグメントの酸化的結合によって製造さ
れた。これらの一部分はもとの抗体がそれに対して上昇
された抗原の両方へ特異性のフラグメントを含有するで
あろう。これは二つの異なる抗体のペプシン分解によっ
て製造された二つの異なるＦ（ａｂ“）ｔフラグメント
を混合し、Ｆａｂ’ フラグメントの混合物を生成する
ように還元的に開裂し、次にもとの抗原のそれぞれへ特
異なＦａｂ’部分を含む混成フラグメントを含むＦ（ａ
ｂ’）、フラグメント混合物を生成するように酸化して
ジサルファイド結合を再生成させることによって有利に
実施することができる。 このように混成抗体フラグメントの製造法は、Ｆｅｔｅ
ａｎｕ、 ”Ｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ
ｆｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄＭｅｄｉｃｔｎｅ ｐ
ａｇｅｓ ３２１−３２３（ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ
Ｔｎｔ、 Ｂｋ。 Ｃｏ、、 Ｎｏｗ Ｙｏｒｋ ｅｔ ａｌ＋ １９７８
）； Ｎ１５ｏｎｏｆｆ ｅｔ ａｌ。 Ａｒｃｈ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｂｔｏｐｈｙｓ、、９
３，４７０（１９６１）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇｅｔ
ａｔ、 Ｊ、 Ｅｘｐ、 Ｍｅｄ、、１２８１４６Ｈ１
９６８）に記載されている。 以下の議論において、「抗体」なる語は断わりのない限
りこれまで記載したような抗体および抗体フラグメント
を包含する。 抗体は当分野で公知のいくつかの手法のいずれによって
も標識することができる。標識技術の広い範囲がＦｅｔ
ｅａｎｕ、Ｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉ
ｎ Ｂｉｏｌｏｇｙａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 、
ｐａｇｅｓ ２１４−３０９（ＭｃＧｒａｓｌ−旧ＩＩ
Ｉｎｔ。 Ｂｏｏｋ Ｃｏ、、 Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ ｅｔ ａｌ、
１９７Ｂ）に記載されている種々の金属ラジオアイソ
トープの導入は、Ｗａｇｎｅｒ ｅｔ ａｌ、、 Ｊ、
Ｎｕｃｌ、 Ｍｅｄ、、 ２０，４２８（１９７９）
。 ５ｕｎｄｂｅｒｙ ｅｔ ａｌ、 Ｊ、 Ｍｅｄ、 Ｃ
ｈｅｍ、、１７．１３０４（１９７４）；５ａｈａ ｅ
ｔ ａｌ、 Ｊ、 Ｎｕｃｌ、 Ｍｅｄ、、６．５４２
（１９７６）の方法によって達成することができる。以
上に当分野で公知のタンパクを放射標識するための多数
の方法の数例に過ぎない。 使用するラジオアイソトープのうち、ガンマ放射体、陽
電子放射体、Ｘ線放射体、および螢光発光体が位置測定
および／または治療用に好適であり、一方ベーター放射
体およびアルファ放射体も治療に使用することができる
。抗体を標識するため好適なラジオアイソトープはヨウ
素−１３１゜ヨー素−１２３．ヨー素１２６．ヨー素１
３３゜臭素−７７，インジウム−１１１，インジウム−
１１５ｍ、ガリウム−６７、ガリウム−６８，ルナ−ニ
ウム−９５，ルテニウム−９７”−、ルテニウム−１０
３，ルテニウム−１０５，水銀−１９７゜−水銀−２０
３，レニウム−９９ｍ、−レニウム−１０５、レニウム
−１０１，テルル−１２１ｍ、テルル−１１２ｍ、テル
ル−１２３ｍ、ツリウム−１６５、ツリウム−１６７、
ツリウム−１６８゜テクネチウム−９９ｍ、およびフッ
素−１８を含む。ハロゲン標識抗体もしくはフラグメン
トおよび／または正常免疫グロブリンもしくは対応する
フラグメントは、実質上同一の運動性および分布と、そ
して類似の代謝を持つであろうから、ハロゲンは標識と
して多かれ少なかれ互換性を持って使用することができ
る。 抗体標識のために好適な技術は、Ｇｒｅｅｎｗｏｏｄ
ｅｔａｌ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｊ、、８９，１１４（
１９６３）によって報告され、ＭｃＣｏｎａｈｅｙ
ｅｔ ａｌ、 Ｉｎｔ、 Ａｒｃｈ、 ＾ｌｌ
ｅｒｇｙ Ａｐｐｌｎ。 Ｉｍｍｕｎｏｌ、、 ２９，１８５（１９６９）によっ
て修正されたように、放射性ヨー化カリウムまたはナト
リウムと抗体との混合物をクロラミン−Ｔで処理する酸
化法を用いて、ヨー素−１３１（１−１３１）またはヨ
ー素−１２３（１−１２３）で標識することを含む。こ
れは試薬の割合および反応条件に依存して、抗体分子上
の、恐らくチロシン残基上の、多分トリプトファンおよ
びフェニルアラニン残基上の水素原子をヨー素原子で直
接置換する結果を生ずる。 一般に、抗体へその免疫特異性を破壊することなくでき
るだけ高い割合の放射性標識を導入するのが望ましい。 非常に多数の研究者は抗体１分子当りヨー素原子１．５
ないし２個以上の直接置換による投入は不利であると考
えていたが、今や抗体１分子当りヨー素を少なくとも２
．５および好ましくは平均５ないし１０原子直接置換し
て導入することは、特に抗体が標識前高度にマーカー特
異性である場合有利であることが判明した。この場合、
高度の標識化の結果として５ないし３３％の抗体特異性
の低下さえも高い活性の方が上廻り、実質上より少量の
標識抗体の使用を許容する。前記したように、高活性の
高い特異性抗体の使用は効率的な位置測定および増大し
た解像性を結果する。 この増加した活性と減少した特異性とのバランスは抗体
１分子当り平均ヨー素ｌＯ原子まで有利で、その後は特
異性の減少が高活性の利益を上廻る。 放射性標識を導入するための他の方法を使用することに
より、減少した免疫特異性に受容できない価格を支払う
ことなしに抗体フラグメントに対する標識の割合をさら
に増加することが可能であろう。それ以上の改良は、抗
体上の抗原結合部位が保護されることを確実にするため
、放射性標識化を特異抗原の存在下において実施するこ
とによって達成することができる。該抗原は標識化後分
離される。 ２価混成抗体フラグメントの実例、例えば２つの異なる
腫瘍特異抗体のそれぞれからＦａｂ’ フラグメントの
化学的結合によって得られるＦ（ａｂｏ）２抗体フラグ
メントを以下に示す。表１は、検出および治療の両方に
対しそれらが有利に使用される好適なそのような２価混
成体および腫瘍タイプの例示リストを与える。１番目の
カラムは混成体の二つのＦａｂ’成分がそれに対して特
異性である二つの抗原を示し、各混成体はそれぞれの抗
原性決定因子に対し特異性の一つのフラグメンＩ−を有
する。いくつかの場合において抗体は特異性を増加させ
るためＭ＠瘍関連抗原のより小さいフラグメントに対し
て上昇されるであろう。例えばＨＣＧのベーターサブユ
ニットに対して上昇された抗体はＨＣＧ自体に対して上
昇させた抗原より好ましい。２番目のカラムは各ハイブ
リッドタイプーｔｌ先的にｆＡ縮する腫瘍タイプを示す
。 ＣＥＡ／Ｃ３Ａｐ ＣＥＡ／ＰＯＡ ＣＥＡ／ＨＣＣ； ＣＥＡ／ＡＦＰ ＣＥＡ／ＴＡＰ ＣＥＡ／フェリチ ン 胃腸例えば結腸、こう門、胃 すい臓、肺 肺、卵巣、胃腸 肝臓、胃腸、卵巣、こう丸 大部分 固形、造血、肝臓 ＣＥＡ／カルシトニン ＣＥＡ／ＰＡＰ ＣＥＡ／上皮小体ホルモ ＨＣＧ／ＰＢＧ ＣＧＡ／ＧＥＡ ＧＦＡ／ＣＭＡ 凡例： ＥＡ がん胎児性抗原 甲状腺 前立腺 ン 上皮小体、肺 顆粒性原形質 脳 脳 ＳＡｐ ＯＡ ＦＰ Ｔ Ｐ Ａ。 ＡＰ ＢＧ ＧＡ ＥＡ ＦＡ ＭＡ 結腸特異抗原−ｐ すい臓腫瘍胎児性抗原 アルファ胎児性タンパク 組織ペプチド抗原 前立腺酸性フォスファターゼ 妊婦ベーター１−グロブリン 通常グリオーマ抗原 膠芽胎児性抗原 神経膠原線維酸性タンパク 通常髄膜腫抗原 表１に示したような混成フラグメントは多数腫瘍タイプ
または細胞の検出および位置測定のため単一ラジオアイ
ソトープで標識するか、または治療のため単数もしくは
複数のラジオアイソトープで標識することができる。さ
らにこのような混成体は検出のためあるラジオアイソト
ープで、そして治療のため１種またはそれ以上のアイソ
トープで、例えばあるラジオアイソトープおよび／また
はホウ素含有フラグメントで標識することができ、その
ため位置測定された腫瘍は以下記載の態様で熱中性子で
照射されることができる。 より小さいマーカー特異性フラグメントを生成するよう
に抗体からＦｃフラグメントを除去することは、フラグ
メントの移動度およびその血液−脳障壁通過能力を容易
にするより小さい分子量を有する分子を生成するという
利益を有する。加えて、Ｆｃフラグメントは抗体の主な
過アレルゲン性および非特異的結合の大部分に責任があ
る。従ってその開裂は抗体の注射、特に多数のＮ＠瘍の
造影または腫瘍放射線療法のための反復注射に対するア
レルギー反応の危険を減らす。抗体フラグメントの運動
性は全天然免疫グロブリンよりももっと速く、そしてＩ
ＩＪＢにもっと特異的に結合するので、減算性技術は省
略するか、または特定の状況で使用するため修正するこ
とができる。加えて、特定の動脈によって供給された腫
瘍への標識した検知剤のもっと直接的な動脈内適用のた
めの標識抗体の使用は、腫瘍検出および腫瘍放射線療法
の両方のため、このプロセスの重要な機会を提供する。 腫瘍位置測定、検出および治療のための単一製剤に標識
抗体フラグメントの混合物を使用することができる。該
混合物は、位置測定および解像度を向上させるため同一
腫瘍タイプに関連する異なる抗原に特異なフラグメント
を使用することができる。この代りに広いＭｌ瘍特異性
を有するフラグメントの混合物を使用して、種々の腫瘍
タイプの広範囲スクリーニングを実施することができる
。 混成フラグメントの使用に同様に、同一もしくは異なる
Ｍｌ瘍または腫瘍細胞タイプに関連する抗原に対し特異
な標識抗体の混合物を使用してもよい。これはある場合
に検出、位置測定および／または治療を向上させること
ができ、そしてまた２種以上の腫瘍またはｌｌ［Ｔ！ｉ
細胞タイプについての広いスクリーンの範囲を増加する
ことができる。 放射性標識特異抗体の投与後２４時間後においてのみ通
常腫瘍位置測定を可能とする以前公知の方法とは対照的
に、この改良された減算技術は、放射性標識特異抗体お
よび放射性標識正常免疫グロブリンの同時投与後２４時
間以内に腫瘍検出および位置測定を可能とする。腫瘍位
置測定は、抗体／免疫グロブリン対の注射後２時間で、
投与後６．１２．１８および２４時間において改良され
た解像度をもって達成することができる。抗体フラグメ
ントは大変速く組織中に拡散しそして一層速く局在化さ
れるので、腫瘍検出および位置測定は標識フラグメント
の注射後短時間で達成することができる。 血液プールまたは間質性体液中に標識フラグメントまた
はそれらの代謝物が蓄積することによる放射能は、腫瘍
関連マーカーへ特建性の標識抗体フラグメントを使用す
る腫瘍位置測定の解像度を−著しく減少させることがあ
り得る。、−そのような場合には、フォト走査前に被検
者へ参照物質を注射するのが有利である。参照物質はマ
ーカー特異抗体フラグメント標識と異なるエネルギーで
放射し、そしてフォト走査装置で独立に検出し得るラジ
オアイソトープで放射標識される。参照物質の活性のレ
ベルは非標的指向特異抗体フラグメントによるバックグ
ラウンド活性の測定に使用され、このバックグラウンド
活性は次に特異抗体の全活性から減算され、実質上標的
指向腫瘍関連抗体のみの活性の測定を許容する。 Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ、 Ｎ、 Ｅｎｇ、
Ｊ、 Ｍｅｄ、＋ ２９８＋ １３８４（１９７Ｂ）
に報告された成功したヒトがんの非侵入的ラジオ免疫検
知法においては、減算技術が成功的位置測定のために必
要であることを示した。しかしながら使用された減算技
術は本発明のそれと実質的に相違する。参照方法では、
放射性ヨード化した抗ＣＥＡ抗体が注射され、そしてテ
クネチチウムー９９ｍ標識ヒト血清アルブミンおよび過
テクネチウム酸テクネチウム−９９ｍが各造影走査前に
静注された。像はガンマシンチレーションカメラで得ら
れ、得られたデータはミニコンピユータ−に記憶される
。非標的区域におけるＴｃ−９９活性に対するｌ−１３
１活性の比はバックグラウンド非局在抗体活性のための
比較標準を与えた。これは他の位置における非標的指向
特異抗体活性の測定を許容し、これは全特異抗体活性か
ら減算され、局在化された標的指向抗体の活性値が得ら
れた。 本発明は適当な参照物質のうちで、Ｔｃ−９９ｍ標識正
常免疫グロブリンＧまたはそのフラグメントおよびＴｃ
−９９ｍ標識イオウコロイドの使用を含む。しかしなが
ら好ましくは参照物質は、対応する正常な無関係な免疫
グロブリンＧ（ＩｇＧ）か、または腫瘍位置測定剤とし
て使用した特異抗体フラグメントを製造するために使用
したものと同一もしくは異なる種からの対応するフラグ
メントである。この正常免疫グロブリンＧは、好ましく
は特異抗体を標識するために使用した同じ元素の異なる
アイソトープで放射標識され、そして好ましくは放射標
識されたマーカー特異抗体と同時に注射される。これは
参照物質として標識特異抗体と実質上同じ結合、分布お
よび代謝動力学性を有する分子種を使用するという利益
を有する。 その結果−回だけの参照物質の注射が必要で、そして増
加した解像度が得られる。正常１ｇＧはそれが対応する
特異抗体と同じ方法で製造され、標識される。 一方は特異抗体を標識するために使用することができ、
他方は正常免疫グロブリンを標識するために使用される
ラジオアイソトープの適当な対は、ヨー素−１３１とヨ
ー素１２３、インジウム−１１１とインジウム−１１５
ｍ、ガリウム−６７とガリウム−６８、ルテニウム−９
７とルテニウム−１０３、または水銀−１９７と水！ｌ
−２０３を含む、ヨー素は化学的置換反応により直接導
入し得るため、そして放射性でそしてフォト走査装置を
使用して検出し得る少なくとも５種類のアイソトープを
有するので、ヨー素は、本発明方法に使用するため特異
抗体フラグメントおよび正常免疫グロブリンＧ参照物質
の両方を放射標識するのに好適である。有利には、ヨー
素−１３１が特異抗体を標識するために使用され、ヨー
素−１２３が正常免疫グロブリンを標識するために使用
される。 発生ずる放射はガンマ−シンチレーション検出器の２つ
の異なるチャンネル上に別々に検出される。 得られる走査データはミニコンピューターニ好都合に記
憶され、そし°ζその非標的区域における標識参照免疫
グロブリンに対する比を上田る、放射標識特異抗体の過
剰蓄積区域を決定するため前述の減算法が実施される。 これらの値は関連した出力信号、有利にはカラービデオ
スクリーン上のカラーの変化を発生させるために使用す
ることができる。フォト走査装置はコンピューター断層
放射線写真能力を備えることができる。高い活性と許容
し得る免疫特異性との間に最大のバランスを与えるよう
に標識した高度にモノ特異性で、好ましくはモノクロー
ン性の抗体を使用するこの高度に能率的な減算技術は、
著しく改部された解像度の！ｌＩ瘍位置測定および検出
方法を捷供する。 勿論、高度に標識した、高度に特異性抗体と本発明の改
良された減算技術の組合せはもっと高い解像度を導びく
。好適な具体例において、実質上モノ特異性抗体が抗体
１分子あたリョー素が平均少なくとも２．５原子、好ま
しくは５ないし１ｏ原子導入されるようにｌ−１３１ま
たはｌ−１２３で放射標識され、そして生成した高度に
標識されたモノ特異性抗体は本発明に従って注射される
。 抗体１分子当り少なくとも２．５および好ましくは５な
いし１０原子の平均ヨー素含量へ１−１３１またはｒ−
１２３で放射標識されたモノクローン性特異抗体の使用
も好適である。 さらに改善された解像度は、減算技術において参照物質
として、放射標識された精製正常免疫グロブリンを使用
することによって得られる。正常グロブリンはグロブリ
ンの混合物であり、そのあるものは放射性抗体がそれへ
向けられる特異抗原へ結合されることができる。従って
問題のマーカーに対する反応性を除去するため、減算剤
として使用すべき正常グロブリンを精製することが望ま
しく、そのような−精製法は正常免疫グロブリンを好ま
しくは固体吸着剤上の特異抗原で吸着し、抗原と反応す
るグロブリンをカラムードに残し、そして通過する物質
は非特異性減算剤として標識するためにもっと好適とな
るであろう。モノクローン性非特異免疫グロブリンまた
は骨髄腫タンパン自体は、標識および減算剤として使用
のために所望の純度を持つであろう。 本発明の減算技術を使用するとき、高い放射活性と高い
特異性とのバランスは、抗体の対応して高いマーカー特
異免疫反応性をもって、放射性標識のいくらか低い程度
の側においてもっと破壊される。再びマーカー特異免疫
反応性が高い程、標識化は高くなるが、抗体性質の有益
なバランスはなお維持される。このように少なくとも７
０％、好ましくは少なくとも８０％のマーカー特異免疫
反応性と、１５％以下、好ましくは１０％以下の交差反
応性を有する実質上モノ特異性の抗体は、高度に効果的
な位置測定を許容するように標識後もなお充分な特異性
を保有する一方、抗体１分子当り２．５、好ましくは５
ないし１０ヨ一ド原子程度へ、１−１３１またはｌ−１
２３で標識することができる。 改良された減算技術を使用しない、しかし好ましくは使
用する末法の使用は、腫瘍位置の連続的、反復的、また
は随時的監視を許容する。これは特に手術前に腫瘍の診
断および期決定との組合せに利益を有する。加えて、こ
の方法はどの程度完全な腫瘍除去が達成されたかの徴候
として、手術中または手術後に有用である。転移の場合
、特に小さい拡散転移の増殖が認められた場合、この方
法の高い解像度は術後療法のための標的区域の同定を許
容する。これは本発明の治療方法または他の技術、例え
ば化学療法、照射処置もしくは多モード療法を使用して
実施することができる。 放射性標識したマーカー特異抗体またはフラグメントは
腫瘍治療に有効である。標識された抗体が被検者の１１
１３部位に局在化されることが決定された後、一般に投
与当り２５ないし２５０ｍＣｉ。 好ましくは５０ないし１５０ｍＣｉの標識された抗体の
高投与量が注射される。注射は静脈内、動脈内、リンパ
管内、包膜内、または体腔でよく、そして反復すること
ができる。 種々の放射性核種が治療のために有用であり、そしてそ
れらは前に論じた標識化技術によって特異抗体中に取り
入れることができる。好ましい治療的に有効な核種はｒ
−１３１である。 本発明の治療方法は、有利には高度にマーカー特異抗体
、好ましくは少なくとも７０％、好ましくは少なくとも
８０％のマーカー特異免疫反応性と、１５％以下、好ま
しくは１０％以下の他の抗原に対する交差反応性を有す
る抗体を使用する。 モノクローン性抗体はそれらの高い特異性のために好ま
しい。 放射標識したマーカー特異抗体またはフラグメントを使
用する療法は、他の療法例えば照射および化学療法と組
合せて一次的治療処置として、そして外科手術の補助法
として有利に使用される。 外科的に除去できない、または検出渣のがれることので
きる小さい転移がある場合に４よ、本発明の放射療法は
これらの腫瘍を発見しぞ−して破壊するを力な武器を提
供する。 抗体フラグメントはしばしばいくらか低い免疫反応性を
持ち、そしてその時低い放射性核種含量で、例えばフラ
グメント１分子当り、例えばＴ−１３１をＯ，ｌないし
１．０原子で標識するのが有利である。これは治療のた
め、そしてもし必要ならば検出のため、ｌ−１３１比活
性２．５ないし５２Ｃｉ／μｇを有するフラグメントを
生成させる。 本発明のさらに別の局面は、ラジオアイソトープ標識と
、ホウ素−１０アイソトープの天然存在比を少なくとも
２０％有する著しい多数のホウ素原子を含む付加物の両
方を含有する抗体またはフラグメントの使用に関する。 ホウ素含有付加物は各種の方法により、好ましくは抗体
に、Ｈａｗｔｈｏｒｎｅｅｔ ａｔ、 、Ｊ、 Ｍｅｄ
、 Ｃｈｅｍ、、 １５．４４９（１９７２）の方法に
より、１〜（４−アミノフェニル）−１，２−ジカルバ
クロソドデカボラン（１２）から誘導されたジアゾニウ
ムイオンのようなホウ素リッチなカップリング剤をカッ
プリングすることによって導入することができる。ホウ
素−１０含有抗体は次に、腫瘍位置測定および／または
治療のため１種またはそれ以上の放射性標識と、そして
熱中性子の吸収のためホウ素−ＩＯ原子の高含量の両方
を含有する抗体を製造するため、上述の方法の一つまた
はそれ以上に従って放射標識される。放射標識されそし
てホウ素標識された抗体を注射した後、放射性標識を用
いて腫瘍の位置測定をする。腫瘍は次によくコリメート
された熱中性子のビームで照射され、それらはホウ素含
有付加物中のホウ素ｌＯ核によって優先的に吸収され、
そして活性化された核は急速にリチウム−７およびアル
ファ粒子に崩壊する。これら生成するアルファ粒子は細
胞毒性で、そしてそれらの腫瘍細胞内での生成は細胞を
殺し、そして腫瘍の減少をもたらす。 高度にマーカー特異性の抗体上のホウ素付加物と１種ま
たはそれ以上の放射性標識との結合は、はじめて多モー
ド腫瘍治療剤として作用する単一の試薬を提供する。Ｉ
ＩＩ瘍部位におけるこれら二重に標識された抗体の急速
なそして特異的な局在化は、中性子照射を集中すべき区
域の速いそして精密な区切りを許容する。さらに、腫瘍
細胞は放射性標識からの放射と中性子で活性化されたホ
ウ素１０放射との結合効果によって破壊され、そして殺
されたＩＩ瘍細胞は除去されるので、放射線治療的処理
は局在化された放射標識された抗体の測定または他の腫
瘍検出法によって監視することができる。 本発明の抗体は注射組成物の形で有利に投与される。−
船釣スクリーニングのため、そして位置測定および治療
の多数のタイプのため、注射は静脈内、動脈内または包
膜内注射であろう。注射し得る抗体溶液は静脈、動脈ま
たはを髄液中に２分ないし約１時間のコースにわたり、
好ましくは静脈内または動脈内注入のため１０分ないし
２０分にわたって投与されるであろう。ある場合には、
皮下、粘膜上組織、または体腔内投与が有利である。！
ＩＩ瘍が既知の接近し得る動脈から供給される場合は、
動脈内投与が治療のために好ましい。動脈内ルートは製
剤の長い注入時間、例えば２４時間またはそれ以上を使
用し得る。加えて包膜内投与または頚動脈中へのフラグ
メントの注射は脳内に所在するｌ１ｌｌ瘍に使用するこ
とができる。皮下、粘膜上組織または体腔内投与は皮膚
の特定区域および／または特定の体腔・＼近い区域に限
られた腫瘍に有益である。 本発明による典型的な注射組成物は、ヒト血清アルブミ
ン３４ｔｎｇ（１％米国局方：バークデビス社）と、０
．９％ＮａＣｌ含有０．０４ Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７
，４，バイオウェア社）１ｔｄ当り放射標識された抗体
１ないし５００ ／／ ｇを含有する。本発明の減算性
技術が使用される場合は、特異抗体の重量にほぼ等しい
放射標識した正常イムノグロブリンの量を含有する。他
の慣用の薬剤学的に許容し得る注射用担体も、包膜内、
皮下、粘膜上組織または体腔内注射のため、および静脈
内または動脈内注射のためのように指示された場合に使
用することができる。 当業者はさらに熟考することなく、前記説明を用いて本
発明をその全範囲に利用することができ−るものと信ぜ
られる。従って以下の特定の好ましい具体例は単に例示
であり、開示の残余の部分を限定するものではないと解
すべきである。以下の実施例において、すべての温度は
未補正の摂氏度であり、断わりのない限りすべての部お
よび％は重量による。 これら実施例で使用される抗体は高度に特異性で、そし
°ζ慣用の免疫化の後、補体を不活性し、■■球凝固成
分を除去するため吸着し、そして交差反応性抗原および
特異抗原に対してアフィニティー精製して調製するか、
またはハイブリドーマ誘導モノクローン性抗体のどちら
かである。 実施例１ １３１ ！−ＣＥＡ Ｉ Ｇ ヤギ の（ａ）
ＣＥＡはＮｅｗｍａｎ ｅｔ ａｌ、 Ｃａｎｃｅｒ
Ｒｅｓ、、 ３４．２１２５（１９７４）の方法により
、結腸がんの肝転移から高純度で得られる。 ０））精製ＣＥＡ乾燥重量０．５ ｍｇをメチル化ウシ
血清アルブミン（シグマ社）２ｍｇを含む水２ ｍｇ中
に溶解し、ＣＥＡ溶液を完全なフロインドアジュバント
（デイフコ社）の等容積で乳化する。 ＣＥＡ接種物の等量を健康ヤギの灯の別々の２部位に皮
下注射する。注射は２週間置きに最後の注射後１４日後
に採集した抗血清のラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）が
抗ＣＥＡ力価１：ｌＯｈ以上を示すまで投与される。 次にヤギから血液を無菌的に採取し、パイロ−ジエンを
含有しない遠心試験管へ移し、そして遠心する。抗ＣＥ
Ａは一２０°Ｃで貯蔵する。 ヤギ抗ＣＥ Ａの補体は５６°Ｃで１時間インキュベー
トすることによって不活化し、そしてそれ以上血球凝固
活性が検出できなくなるまで、洗浄レバツクしたＡＢ型
ヒト赤血球（ＲＢＣ）と、血球凝固活性定量から計算し
た血清／ＲＢＣ比で繰り返して混合することにより、抗
血液グループを除去する。吸収した抗ＣＥＡ血清は次に
０．１ Ｍリン酸緩衝液ｐＨ７，０（ＰＯ，）の数容積
に対して透析される。 （Ｃ） 結腸がん抗原ｍ （ＣＣＡ−ＩＩＩ）免疫吸
着体は、正常肺の過塩素酸抽出物の６０，０００分子量
分画を慣用の技術を用いて臭化シアン活性化セファロー
ズ４Ｂ（ファルマシア社）へ結合させることにより調製
される。結合は４℃でゆるやかにかきまぜながら一夜進
行を許容される。ＣＣＡ−ＩＩＩ−免疫吸着体は００５
Ｍホウ酸緩衝液ｐ Ｈ８，４で洗浄され、０．１ＭＭリ
ン酸緩衝液 Ｈ８，０中の１Ｍ２−アミノエタノールの
４容積中に再懸濁される。スラリーは室温で１時間混合
され、口過され、ＰＯ，で洗浄される。 ＣＣＡ−Ｉ［［免疫吸着体力うＪ、が調製され、１０％
（Ｖ／Ｖ）正常ヤギ血液（ギブコ社）２ｍｌ、次いで３
Ｍチオシアン酸アンモニウムの約１カラム容積を前循環
し、そして０．１Ｍリン酸緩衝液ｐＨ７、０で再平衡化
される。 ＣＣＡ−ＩＩＩ−免疫吸着体は自動クロマトグラフィー
システムへ挿入され、そして全体のシステムが非発熱原
性の無菌ＰＯ，で完全に洗浄される。 緩衝液容器は千オシアン酸アンモニウムおよび透折物を
含む容器で取り替えられる。 吸着された抗ＣＥＡ血清はカラムの空隙容積の２／３の
容積へＰＯ，で希釈され、そしてカラムを通る１サイク
ル毎に抗血清の適当量を含有する。 この希釈した抗血清の体積はカラム中へ適用され、そし
て１力ラム空隙体積の全容を与えるのに充分なＰＯ，で
洗浄される。抗血清は室温で２０分間インキュベートす
ることが許され、次に吸着されない分画である特異抗Ｃ
ＥＡ血清がカラムからＰＯ４で溶離される。システムは
抗ＣＥＡ血液の第２の部分標本を適用することにより、
自動的に次のサイクルを開始する。サイクルの回数は抗
血清の全ロットを処理するようにセットされる。 抗ＣＥＡ血清の部分標本が抗血液のもとの容積へ濃縮さ
れ、そして免疫拡散によって再テストされる。抗血清は
参照ＣＥＡ、ＣＣＡ−ＩＩＩ製剤、正常ヒト組織抽出物
および血漿に対してテストされる。もし抗血清がＣＣＡ
−ＩＩＩ製剤、血漿または正常ヒト組織抽出物に陽性反
応を有するならば、それはＣＣＡ−ＩＩＩ免疫吸着体カ
ラムにリサイクルされ−る。 ＠ ＣＥＡ−免疫吸着体力ラムは、ＣＣＡ−ｍ免疫吸着
体と同じ結合操作により、精製ＣＥＡを臭化シアン活性
化セファローズ４Ｂへ結合し、前記（Ｃ）のようにカラ
ムを調製し、前循環し、平衡化することによって調製さ
れる。 ＣＥＡ吸着体カラムは自動化されたクロマトグラフィー
システムへ導入され、そして非発熱原性のＰＯ４で完全
に洗浄される。各サイクル毎に適用すべき抗ＣＥＡ血液
の量はラジオイムノアッセイ定量をもとに計算され、抗
血清のサンプルが希釈され、適用され、そしてＣＣＡ−
Ｉｌｌ免疫吸着体カラムと同様にインキュベートされる
。すべての非反応性免疫グロブリンを含んでいる血清タ
ンパクはカラムからＰＯ４で溶離され、そして吸着され
ない分画として採取される。 特異抗ＣＥＡ ＩｇＧは解離されそしてＰＯ。 中３Ｍチオシアン酸アンモニウムでカラムがら溶離され
、そして吸着された分画として採集される。 チオシアン酸アンモニウムの微量のすべてを除去するた
め、吸着された分画はＰＯ，中１Ｍ尿素および１０％グ
リセロールに対し、中空繊維透析ユニット（アミコン社
またはビオラッド社）の使用によってインライン透析に
かけられる。特異抗体の解離のための別法は、混乱剤と
してグアニジン塩酸塩と、脱塩のためセファデックスＧ
２５ゲルロ過クロマトグラフイーを使用する。 吸着された分画は４°ＣでＰＭ３０膜（アミコン社）に
よる限外口過により、ゲル口過クロマトグラフィーを容
易にする体積まで濃縮される。例えば抗ＣＥＡ血清のｌ
ＯＯｄのロフトは約２０１Ｉｒｌへ濃縮される。濃縮
液は５０ｍＭリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）ｐＨ７，５の
１００容で４回、各４時間透析される。抗ＣＥＡ Ｉ
ｇＧ製剤は無菌のパイロ−ジエン不含血清バイアル中へ
無菌口過される。 部品標本がＲＩＡおよび免疫拡散による品質管理試験の
ために保存される。 （ｅ） セファクリルＳ−２００（ファルマシア社）
カラｌ、がゲルを無菌のパイロ−ジエン不含５０ｍＭ。 ＰＢＳｌｐＨ７，５で５回洗浄することによって調製さ
れる。カラムは１８０℃で３時間乾燥滅菌される。使用
カラム寸法は抗体のロットサイズに応じて２．６ Ｘ
９０ ｃｔａか、または５． ＯＸ ９０ ｃｍである
。 次にカラムはカラムの３倍容のＰＢＳで洗浄される。 ヤギ抗ＣＥＡ ＩｇＧのロフトはカラムに適用され、
そしてＰＢＳで６ｍ／ａａ／時間の流量において溶離さ
れる。ＩｇＧタンパクを含有する分画。 がプールされ、そして約５■ ＩｇＧタンパク／ＢＳに
対して透析され、０．２ミクロンＭｉｌｌｅｘユニット
（ミリポア社）で無菌口過され、そして保存剤としてア
ジ化ナトリウムを添加して約５ ｍｇＩｇＧタンパク／
ｌｌ１１の１ｍｍ部分木の形で冷蔵される。 （ｆ）Ｉ３１■の１ｍＣ１当り７．２ないし１６．８
ＩＩ ｇＩｇＧのヤギ抗ＣＥＡ ＩｇＧをＩＩＩ
ｌ （アマーシャムーサール社）を含む放射性核種バイ
アル中へ注入する。 クロラミンＴおよびメタ重亜硫酸ナトリウム溶液は、そ
れぞれクロラミンＴ１０ｍｇおよび重亜硫酸塩５０ｍｇ
を含む２個のバイアルのそれぞれへ、無菌のパイロ−ジ
エン不合０．０４ Ｍリン酸緩衝液ｐ、 Ｈ７，４の５
−を注入することによって調製された。クロラミンＴは
１０μｇ／ｍＣｉ” Ｉの割合で放射性核種バイアル
中へ注入された。クロラミンＴの５倍量のメタ重亜硫酸
ナトリウム溶液は、クロラミンＴの注入後正確に９０秒
後にバイアル中へ注入される。混合物は無菌注射器で反
応バイアルから除去され、反応バイアルは１％正常ヒト
血清アルブミンでリンスされ、リンス液は反応混合物と
合併された。 １ｆｆ＋ １抗ＣＥＡ ＩビＧのサンプルが事前に
ＰＢＳ中１％正常ヒト血清アルブミンで平衡化されたＰ
Ｄ−１０セファデックスＧ−２５カラムに適用され、Ｐ
ＢＳ中１％正常ヒト血清アルブミン約４゜５ｄで溶離さ
れ、シールドされたガンマ検出器（Ｅｂｃｒｌｉｎｅ社
）でモニターされ、貯蔵および使用のため採集され、あ
らかじめ定めた濃度に希釈される。 生成するｌｆｆ１ ｌ−抗ＣＥＡ １．Ｇは抗体１
分子当り平均ヨー素３ないし７原子を有する。各バッチ
からの無作為部分標本が無菌性、発熱原性、毒性および
その他の品質管理変動について別々にテストされる。 実施例２ モノクローン Ｉ”Ｉ Ｉ−ＣＥＡ Ｉ Ｇの
゛１＃！６月令のＢａ１ｔ＋／Ｃマウスに、がん胎児性
抗原１０ないし１００μｇを腹腔内注射する。その場合
ＣＥＡは等容積（１０−１００μＩ！、）の不完全フロ
イドアジュバント中に混合される。これは１週間後とそ
して２週間後に繰り返されるが、最後はアジュバントな
しで静脈内ルートが用いられる。３日ないし４日後、マ
ウスは頚部膜Ｅ］により殺される。与えられた抗原に対
する抗体を得るための最適時期は、抗原、投与ルート、
免疫化のタイミング、それに最終の増強注射とひ臓細胞
除去の間の間隔によって変化する。 ひ臓を除去し、そして室温で、血清不含培地か、または
２０％ウシ胎児血清を加えたダルベツコの修正イーグル
培地（ＤＭＥＭ）を収容する６０ｍｍペトリ皿中に入れ
、そして細胞を分散するためはさみでミンチする。細胞
はＶｏｒｔｅｘ ミキサー上で１−２分かきまぜること
によりさらに遊離される。 ひ臓細胞は円錐形遠心試験管へ移され、ＩＥＣ−ＭＳ２
遠心機中で１，０００ｒｐｍにおいてベレット化され、
上清が除去され、ペレットをたたいてはぐし７、そして
赤血球を溶解するため１０分間冷たい０．１ Ｎ ８４
Ｃｌ ５ 、ｍｌ中に再懸濁する。２０％ウシ胎児血
清添加の冷却したＤＭＥＭを加え、そして細胞をベレッ
ト化し、そして再び２０％ウシ胎児血清を添加したＤＭ
ＥＭｌ ０ｄ中に懸濁する。 融合のために使用した骨髄腫細胞系統は、高グルコース
（４，５ｇ／ｆｆ）および２０％ウシ胎児血清添加Ｄ
Ｍ Ｆ、 Ｍ中の静止懸濁培養物に、５ないし１０％Ｃ
ＯＺ中、１００．０００ないし１，０００，０００／ｄ
の細胞濃度において保存される。骨髄腫（形質細胞腫）
細胞系統は、５ｖａｓｔｉおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ、
Ｂｉｏｃｈｅｍ。 Ｊｌ、 １２８．４２７−４４４（１９７２）により報
告された、ＭＯＰＣ−２１から誘導されたＢａ１ｂ／Ｃ
形質細胞腫であるＰ３−Ｘ６３−Ａｇ８か、Ｆａｚｅｋ
ａｓ ｄｅ Ｓｔ。 Ｇｒｏｔｈ ＆ Ｓｃｈｅｉｄｅｇｇｅｒ、 Ｂａ５ｌ
ｅ Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ ｏｆＴｍｓｕｎｏｌｇｙによ
るＦＯとして知られるその誘導体か、またはＭａｒｇｕ
ｌｉｅｓ ｅｔ ａｌ、 Ｃｅ１ｌ、 ８ ＋４０５（
１９７６）によって報告された、ＭＰＣ−１１から誘導
されたＢａ１ｂ／Ｃ系統である４ ５．６７ Ｇ １．
７であることができる。これら系統のすべては酵素ヒボ
キサンチンフォスフォリボシルトランスフェラーゼ（Ｈ
ＰＲＴ；Ｅ、ｃ、２．４．２．８）を欠き、そしてその
ためＬｉｔｔｌｅｆｉｅＬｄ、 ５ｃｉｅｎｃｅ＋１４
５，７０９−７１０（１９６４）に記載されているよう
に、ヒボキサンチン、アミノプテリンおよびチミジンを
含有する選択培地中で死滅する。 免疫化した動物から得られるひ臓細胞は、次にＧｅ１ｆ
ｅｒｅｔ ａｌ、 Ｓｏｍａｔ：ｃ Ｃｅ１ｌ Ｇｉｎ
ｅｔｉｃ、、 ３＋２３１−２３６（１９７７）の方法
の採用によるポリエチレングリコールを使用することに
より、形質細胞腫細胞と融合される。例えば３０％ポリ
エチレングリコール溶液は、無菌ポリエチレングリコー
ル４０００ （メルク社、分子量約４，０００）（ポリ
エチレングリコール０．５ｇ＋ジメチルスルホキシド（
ＤＭＳｏ）０．０５ｍ１！＋蒸留水０．５ ｄ ）と、
血清なしのＤＭＥＭとを４１℃へ加熱し、そしてポリエ
チレングリコール３ ｍｌを血清なしのＤＭＥＭ ｐ
Ｈ７゜４−７．６の７ ｍｌと混合することにより調製
され、そして使用まで３７°Ｃで保存される。融合は室
温で行われる。骨髄腫細胞（１０６−１０’）は血清を
含まない培地で２回洗浄され、５０ｍ２円錐底円錐状験
管（ファルコン２０７０）中のひ臓細胞１−３Ｘ１０’
−１−５Ｘ１０’ と混合される。 細胞は２５０Ｘｇで５分間遠心され、そして上清液は注
意深く吸引される。ポリエチレングリコール液の０．２
ｍｌ ｉｆＪが加えられ、そして試験管は細胞を再懸
濁するため手でゆっくりかきまぜられる。 次に細胞は２５０Ｘｇで３分間、そして再度４００Ｘｇ
で３分間遠心され、そしてさらに３分間静止状態に保た
れる。細胞はポリエチレングリコールに約８分曝される
。その後で約５ ａｆｔの血清を含まない培地が試験管
へ加えられ、畦がゆっくり再懸濁され、そして２５０Ｘ
ｇに壮いて５分間遠心することにより再ペレット化され
−る。上清を除去し、そして細胞を血清含有培地２Ｏｄ
中に再懸濁し、そしてＨＡＴ培地がそれへ添加されるマ
イクロプレートに移される前に加湿したインキエベータ
ー中３７℃で４８時間インキユヘートされる。 ソノ化りに、細胞は、ＤＭＥＭ、１０％ＮＣＴＣ１０９
培地（マイクロバイオロジカル、アソシェイッ社）、２
０％ウシ胎児血清（ギブコ社）、２単位ウシインシュリ
ン／ｄ （シグマ社）、０．４５ｍＭピルベート、１ｍ
Ｍオキザロアセテート、および必要に応じ抗生物質より
なる培地３０ｄ中に直接懸濁されるチミジン（１，６Ｘ
１０−’Ｍ）およびヒボキサンチン（ＩＸＩＯ−’Ｍ
）が添加される。 この培地中の細胞は６個のマイクロプレートにウェル当
り１滴（約５０１！ｆ）で分配される。次に日にチ、ミ
ジンとヒボキサンチンを含有し、今回アミノプテリン（
８Ｘ１０−’）を加えた上で規定した培地の１滴を各ウ
ェルへ加える。上の培地を６ないし７日後２滴加え、ク
ローンは顕微鏡的に１０ないし２０日で出現する。ヒボ
キサンチン−アミノプテリン−チミジン（ＨＡＴ）は融
合直後または後で加えることができる。得られる雑種の
数の改善は各マイクロウエルヘフィーダー層を加えると
きに達成される。こ−ではヒト胎児線維芽細胞が４５０
Ｏｒで照射され、そしてこのような細胞１，０００〜２
，０００が各ウェルへ融合の前日または融合した細胞へ
直接加えられ、そしてそれらがマイクロウェル中にその
ように分配される。 顕微鏡的にクローンが出現した後、培地の大部分を除去
し、そして新しい培地を加えることよって交換される。 ２回目の培地交換後、培地はそのままに少なくとも４日
間放置され、次に慣用定量法により抗体活性および特異
性のアッセイのために集められる。 １５０閣プレートまたはローラーボトルから収穫された
消費培養培地から多量の抗体が得られる。 培地は中空繊維濃縮器（アミコン社）によって後で濃縮
される。また２ないし３週間前に約ｌＯ億のクローンし
たハイブリドーマ細胞を注射された無胸腺（無毛）マウ
ス（ｎｕ／ｎｕ）の腹水からも得られる。腹水は各マウ
スの腹腔を食塩水であふれさせることによって食塩水で
希釈され、そして各マウスからの希釈液はプールされる
。 モノクローン性抗ＣＥＡ ＩｇＧは、実施例１（ｆ）
（７）ヨウに１−１３１で放射標識される。 実施例３ ” Ｉ−Ｉ Ｃヤギ ノ゛６ 正常ヤギ免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）（マイルス社）を
臭化シアンで結合したＣＥＡに対してアフィニティー精
製し、そしてｌ−１３１の代りに１−１２３を用い、比
放射能の差に対応して試薬の量を比例的に変更すること
を除いて、実施例１（ｆ）の操作を用いて！−１２３で
放射標識する。標識した抗体の比放射能を例えば１００
−５００／／Ｃｉ／μｇに調節するため担体コー素を添
加することができる。添加した担体ヨードの量は、担体
当りのヨー素原子の与えられた数のため、標識した抗体
分子の比放射能を決定するであろう。 実施例４ １ｆｆＩ Ｉ−ＣＥＡ−”Ｂ Ｉ Ｇの（８）
実施例１または２で製造した抗ＣＥＡ ＩＧＧを、Ｈ
ａｗｔｈｏｒｎｅ ｅＬ ａｌ、 Ｊ、 Ｍｅｄ、 Ｃ
ｈｅｍ、＋ １５，４４９（１９７２）の操作を使用し
て、天然存在比のホウ素−１０アイソトープ（２０％）
を有する１−（３アミノフエニル）−１，２−ジカルバ
クロンードデカルボラン（１２）のジアゾニウム塩の２
０倍モル過剰と反応させる。得られる抗体は、平均して
抗体分子当り２ないし１０個のジアゾ結合カルボラン残
基、または４ないし２０のホウ素−１０原子を有する。 （１））前記（ａ）の抗ＣＥＡ−”Ｂ Ｉ ｇＧを実
施例１（ｆ）と同様にｒ−１３１で放射標識し、抗体分
子当りヨー素１ないし１０原子平均を導入する。 実施例５ 庄’ＪＬｊＪ−”ｆＬる訓戒立食木造 以下に示すように無菌のパイロ−ジエン不合溶液が調製
される。 （ａｌ 無菌溶液はｄ当り次の成分を含有する。 （１）ヒト血清アルブミン（Ｈ３Ａ）（１％、米局方パ
ークデービス社）３４■ （２）０．０４ Ｍリン酸緩衝液ｐ Ｈ７，４−（バイ
オウェア社） （３） ０．９％Ｎ ａ Ｃ１ （４）実施例１によって製造した＋３１ Ｔ−抗ＣＥ
ＡＩ［Ｇ（ヨー素平均約５原子／分子、比放射能約８０
μＣｉ／μｇ） 実施例１の標識抗体は２０μｇ ／ ｔｒｔｌの濃度に
おいて溶液（１）、（２）および（３）中に貯蔵され、
そしてこの溶液を調製するためリン酸緩衝液（ＰＢＳ）
中１％Ｈ５Ａの等容で希釈される。 （ｂ） 実施例３で調製し７’、：” Ｉ−１ｇＧ
を１５，１μｇ／−余分に含有することを除いて（Ｊｌ
）部の操作によって無菌溶液が調製される。比放射能５
００ｐｃｉ／μｇの１２３１−ＩｇＧは１０．２ ／／
ｇ ／ ｍｆｌの濃度で１％Ｉ Ｓ Ａを含むリン酸
緩衝液中に貯蔵される。この溶液の等容を（ａ）部の操
作中のＰＢＳ中１％）（ＳＡの代りに使用する。 （Ｃ） 抗体が実施例２によって製造し、２０ｔｔｇ
／ｌｎＱの濃度でＰＢＳ中１％ＩＳＡに貯蔵され、そし
て比較し得る活性を有するｌｆｆ１ ｌ−抗ＣＥＡ
ＩｇＧであること以外（ｂ）部の操作による無菌溶液
。 （ｄ） 抗体が実施例４によって製造され、抗体分子
当り平均ジアゾ結合したカルボラン残基５個とヨー素１
原子を有し、そして約１６μＣｉ／μｇの比放ル１能を
有する１１１ １−抗ＣＥＡ−１ｏＢ Ｉ ｇＧであ
ること以外ら）部の操作による無菌溶液。最終溶液は抗
体５０．４μｇ／ｍｙを含有する。 実施例６ ■舊五里足 放射性ヨード化した抗ＣＥＡ ＩｇＧを１１１１の疑
いある患者に投与する。患者はヤギＩｇＧまたは骨髄腫
１ｇＧに対するアナフィラキシ−過敏症に対して事前テ
ストされる。ｌ−１３１または■−１２３の甲状腺摂取
を阻止するため、ルゴール液（ピュアバック社）を口か
ら、放射能標識した抗体の注射１日前から開始して７日
間、５滴づつ１日２回投与する。 位置測定はＧｏｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ＋ Ｎ、
Ｅｎｇ、 Ｊ、 Ｍｅｄ、＋２９８．１３８４（１９
７８）の方法により、無菌生理食塩水２Ｏｔｕｌｌ中実
施例５ （ｂ）または５（Ｃ）によって製造した＋２３
７−ＩｇＧを含有する＋３１ １−抗ＣＥＡ ＩｇＧ
の溶液３．５ ｔｎｌを１０分ないし４５分を要して注
入することによって実施される。Ｔｃ−９９ｍ化合物は
使用せず、減算技術は１３＋ １と１ｔ３ １との間
を識別するため慣用の態様に適応している。 抗体の注射完了直後および２，８，１２，２４゜４８お
よび７２時間後走査が行われる。 有意な局在化が２時間後に見られ、時間につれて改良さ
れた解像度が得られ、注射後８ないし２４時間の間に高
原に達する傾向がある。追加のバックグラウンド１２：
ｌｌｌｇＧは添加されない。 この方法のＣＥＡ選沢性は以前のＧｏｌｄｅｎｂｅｒｇ
ｅｔａｌ法と比較できるが、しかし解像度、速さおよ
び便利さは著しく増強される。 実施例７ 譚亜殆差 （ａ） 場合によって実施例６の操作によって検出さ
れ、位置測定された卵巣がんを有する患者に、無菌生理
食塩水５０ｍ１中実施例５（ａ）の溶液１５０ｍＣ１を
静脈内注射により注射する。腫瘍サイズの減少を２０日
以内に観察する。前記投与量を個人ベースに調節された
間隔で繰り返す。 （ｂ） 場合によって実施例６の操作によって検出さ
れ、位置測定された子宮頚部がんを有する患者に、患者
の体重７０ｋｇをもとにして２．８ ｍ Ｃｉの１ｆｆ
ｌ ｌ活性を与えるのに充分な実施例５（ｄ）の溶液
の量（無菌生理食塩水中）を注射する。 腫瘍は実施例６の操作を使用して注射後１２時間で正確
に位置測定される。よくコリメートされた熱中性子ビー
ムが位置決めされた腫瘍位置に集中される。３Ｘ１０”
中性子／ ｃｒｌの照射が各腫瘍位置に対して有効であ
り、そして場合により個人ベースで調節された間隔で、
放射標識を持ちまたは持たない腫瘍位置測定抗体の投与
が繰り返される。成功したＭ！ｉ瘍縮小が観察される。 実施例８ ”’ Ｔ−ＨＣＧ Ｉ Ｇ ヤギ の ″（ａ
）ＨＣＧに対する抗体（抗ＨＣＧ）は、Ｇａｇｓｈａ＆
４ｅ。 Ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ Ｉｎｖｅｓｔｉｓｔｉｇａｔｉ
ｖｅ ａｎｄ−ＤｉａｇｎｏｓｔｉｃＥｎｄｏｃｌｉｏ
ｌｏｇｙ、 ｐａｒｔ ＩＩＩ、 Ｐｅｐｔｉｄｅ
−Ｊ（ｏｒｍｏｎｅｓ 。 Ｂｅａｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ、 Ｅｄｓ、、 ｐａ
ｇｅｓ ７５６−７６３（ＮｏｒｔｈＨｏｌｌａｎｄ、
Ａｍｓｔｅｒｄａｍ＋ １９７８）の方法によって製
造される。 ＨＣＧのβ−サブユニットに対する抗体（抗ＨＣＧ−β
ｒｇｃ）は、Ｖａｉｔｕｋａｉｔｉｓ ｅｔ ａｌ。 ／Ｉｓ、 Ｊ、 ０ｂｓｔｅｔ、 Ｇｙｎｅｃｏｌ、、
１１３，７５Ｈ１９７２）の方法によって製造される
。 （ｂ） 前記（ａ）部において調製した抗体は血清溶
液としてさらに精製された。操作は抗−ＨＣＧＩｇＧお
よび抗−ＨＣＧ−β ＩｇＧについて同一である。 抗−ＨＣＧ （または抗−ＨＣＧ−β）血清の補体は５
６°Ｃで１時間のインキュベーションにより不活性され
、もはや血球凝固活性が検出されなくなるまで、血球凝
固アッセイから計算された血清／ＲＢＣ比をもって抗血
液ＡＢヒ）ＲＢＣが除去される。吸着された抗−ＨＣＧ
血清は０．１ Ｍリン酸緩衝液ｐＨ７，０（ＰＯ，）の
数倍容に対して透析される。 （Ｃ） ヒト尿タンパク（ＨＵＰ）免疫吸着体が精製
したＨ Ｕ Ｐを臭化シアン活性化セファローズ４Ｂへ
結合することによって調製され、ＨＵＰ免疫吸着体カラ
ムが調製され、そして抗−ＨＣＧ （または抗−ＨＣＧ
−β）が精製され、そして実施例１（Ｃ）の操作に準じ
てテストされる。 （ｄ）ＨＣＧ−免疫吸着体力ラムが精製したＨＣＧを臭
化シアン活性化したセファローズ４ＢへＨＵＰ免疫吸着
体のそれと同じカップリング操作により結合し、（Ｃ）
部と同様にカラムを調製し、前循環し、そして平衡化す
ることによって調製される。 ＨＣＧ免疫吸着体カラムは自動クロマトグラフィーシス
テムへ導入され、上記（Ｃ）部からの抗ＨＣＧ血清が実
施例１（ｄ）の操作と同様に精製される。 抗ＨｃＧ ＩｇＣ；製剤の無菌のパイロ−ジエン不含
血清バイアル中へ無菌口過される。部分標本がＲＩＡお
よび免疫拡散による品質管理テストのために保存される
。 （ｅ） セファクリルＳ−２００（ファルマシア社）
カラムが準備され、前記（ｄ）部からのヤギ抗１（ＣＧ
ＩｇＧのロフトが実施例１の操作と同様に精製され、そ
してアジ化ナトリウムを保存剤として添加して、約５ｍ
ｇ ＩｇＧ／ｌｄの１一部分標本として冷蔵される。 げ）”’ Ｉ ｍｃｔ当り７．２ないし１６．８
ｐ ｇのヤギ抗ＨＣＧ ＩｇＧが１３籠 ■（アマー
シャムーサール社）を含む核種バイアル中へ注射され、
標識され、そして実施例１ （ｆ）の操作と同様に精製
され、貯蔵される。 得られるＩｌｌ ｌ−抗ＨＣＧ ＩｇＧまたはＩｌ
ｌ １−抗ＨＣＧ−β ＩｇＧは、抗体分子当すョー
素を平均３ないし７原子有する。各バッチからの無作為
部分標本は無菌性、発熱原性、毒性およびその他の品質
管理変動について別々にテストされる。 実施例９ （ａ） ’ゴ宜 １− ＡＦＰ Ｉ Ｇ ヤ
ギ の過免疫ヤギ抗血清は、西、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ
、＋３０＋２５０７（１９７０）の方法により精製した
ヒトＡＦＰの繰り返した皮肉注射によって精製される。 抗血清の特異性は二重ゲル拡散、免疫電気泳動およびラ
ジオイムノアンセイによって確認される。免疫電気泳動
的に純粋なＩｇＧは、抗血清１０Ｉｄ（７）ＤＥＡＥセ
ルロースクロマトグラフィーと、次にアミコンＰＭ−３
０１１９」−の濃縮によって製造される。４．２ｍｇ／
ｍｆｌの濃度において、ヤギ抗ＡＦＰ ＩｇＧは終
了点として２ｎｇの標識抗体の５０％結合を用いて、ラ
ジオイムノアッセイ力価３Ｘ１０’を有する。 抗体は実施例１（ｆ）の操作と同様に放射標識され、該
実施例記載と同じ様に精製され、貯蔵される。 （ｂ） ＋３’ Ｉ−Ｃ３Ａ Ｔ Ｇ ヤ
ギ の ′”抗Ｃ３Ａｐ血清は、氷水下の脱イオン水の
５容ｆｆ１（Ｗ／Ｖ）中のＧＷ−３９ヒト結腸がん外来
移植肺癌を全速度で２分間ポリトロンによりホモジナイ
ズすることにより調製される。次にホモジネートは４８
，０００Ｘｇで１時間遠心される。透明な上清が免疫原
として使用される。免疫原のタンパク含量はロウソー法
により測定するとき７ ｍｇ／ｄである。ヤギがヤギの
首に皮下投与された、５ｍｆｌの完全フロイドアジュバ
ント中に乳化したホモジネート５ｍＲｃタンパク３５■
）で免疫化される。増強免過は３ないし４週間隔−で続
けられる。 ヤギは毎月試験採血され、そして血清が抗体産生につい
てテストされる。特異抗−Ｃ３Ａｐ抗体の製造のため、
アフィニティにより、１０月目およびその後の日日にお
ける出血が処理される。 抗Ｃ３Ａｐ抗体は各種の臓器および組織抽出物に対して
アフィニティー精製される。ヒト結腸がん、ヒトすい臓
および肺、ハｌ、スター肝臓および〒Ｙ臓の抽出物は、
全速度２分間のポリトロンにより氷水下の脱イオン水５
容（Ｗ／Ｖ）中につくられる。ホモジネートは４８，０
００Ｘｇで１時間遠心される。透明な上清が集められ、
凍結乾燥され、そして臭化シアン法によって抗原をセフ
ァローズ４Ｂへ結合するのに適当なタンパク濃度を得る
ように水に再熔解される。同時に、ヒトおよびハムスタ
ー血清がセファローズ４Ｂへの結合前にタンパクについ
て調節される。ＧＷ−３９水ホモジネートおよびその４
Ｂ、０００ｇ上清は、ＧｏｌｄｅｎｂｅｒＢ ｅｔ ａ
ｌ、 Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ、、３６． ３４５５（１
９７６）に報告されているように、Ｃ３Ａ製造のため９
０％フェノール液で処理され、そしてセファローズ４Ｂ
へ結合される。 アヘイニティー吸着は実施例１（Ｃ）ないしくｅ）の操
作と同様に実施される。粗製ヤギ抗Ｃ３Ａｐ （４ｍｌ
）は結腸がん抽出物を結合したセファローズ４Ｂ１００
屑ｉを収容するカラムへ適用され、下方へ流下すること
を許容される。流下液中にタンパクが出現する時流れを
止め、そして抗血清は免疫吸着体と３０分間反応するこ
とが許容され、そして次にゲルが０．１Ｍ ＰＯ４，
ｐＨ７，０緩衝液で洗浄される。溶離された抗体は直ち
にアミコンＰＭ−３０股上で透析され、０．１ Ｍ
Ｐ Ｏ４，ｐ Ｈ７゜０緩衝液で、次に０．０５ Ｍ
Ｐ Ｏ４、ｐ Ｈ７，０中の１．０Ｍ尿素および１０
％グリセロールで、そして最終に０．１ Ｍ Ｐ Ｏ
ａ 、 ｐ Ｈ７，０緩衝液で平衡化される。抗体は
次にヒトひ臓、肺および血清を結合したセファローズ４
Ｂ７５ｍｆの混合物を通過させられる。抗体が免疫吸着
体と反応することが許容された後、カラムは０．１ Ｍ
Ｐ Ｏａ 、 ｐ Ｈ７，０緩衝液で溶離される
。抗体はアミコンＰＭ３０膜上で濃縮され、そしてハム
スター肝臓、腎臓および血清抗原の混合物を含む免疫吸
着体カラム７５ｍを通過させ、そして前述の態様で処理
される。 最後に抗体はＧＷ−３９Ｍ１ｇのフェノール抽出物でつ
くった免疫吸着体３２０ｄへ適用される。 抗体３０分間インキュベートした後、カラムは０゜１Ｍ
ＰＯ４，ｐＴ（７，０緩衝液で溶離される。抗体は
次に濃縮され、そしてアミコンＰＭ−３０膜上で０．０
５ Ｍ Ｐ ０４． Ｐ Ｈ７，５緩衝液で平衡化
される。このようにして得られるアフィニティー精製さ
れた抗体はセファデックスＧ−２００（２゜５ｘ１００
ｃｍ）カラムに適用され、そして０．０５Ｍ ＰＯ，
、ｐＨ１，５緩衝液を用いて分画される。 ＴｇＧ分画はプールされ、アミコンＰＭ−３０膜上で濃
縮される。抗ＣＳ Ａ ｐ Ｉ ｇ Ｇのタンパクは
２．８ｍｇ／ｍｌに調節され、そして−２０°Ｃで貯蔵
される。 １−１３５による放射性ヨー素化は実施例１（ｆ）の操
作と同様に実施され、そしてｌｆｆ１ ｌ−抗Ｃ３Ａ
ｐ ＩｇＧは核実施例１と同様に精製され、貯蔵され
る。 （Ｃ） 実施例１，８およびこの実施例に類似の操作
を使用し”ζ、ＣＥＡ、ＨＣＧ、ＡＦＰまたはＣ５Ａｐ
の代りに、前立腺酸性フォスファターゼ、すい臓胎児性
腫瘍抗原、胎盤アルカリ性フォスファターゼ、妊婦ベー
ター１−グロブリン、小成小体ホルモン、カルシトニン
、組織ポリペプチド抗原、Ｔ−抗原、ベーター２−マイ
クログロブリン、ガラクトシルトランスフェラーゼ−Ｉ
Ｉ （ＧＴ−■）。 ｇｐ−５２ビールス関連抗原、卵巣のう１１！！瘍関連
抗原（ＯＣＡＡ）、卵巣１１１ｆｆｌ特異抗原（ＯＣＡ
）。 頚管がん抗原（ＣＡ−５８，ＯＣＡ、ＴＡ−４）。 塩基性胎児性タンパク（ＢＦＰ）、末端デオキシヌクレ
オチジルトランスフェラーゼ（ＴｄＴ）。 細胞質黒色腫関連抗原、ヒト星状細胞腫関連抗原（ＨＡ
ＡＡ）、通常グリオーマ抗原（ＣＧＡ）。 膠芽胎児性抗原（ＧＥＡ）、神経膠原線維酸性タンーノ
ぐり（ＧＦＡ）、通常髄膜腫抗原（ＣＭＡ）および腫瘍
脈管形成因子（ＴＡＦ）のいずれが１種を用い、そして
適当なアフィニティー精製により、これら抗原に対する
標識した抗体が得られる。 実施例１０ モノクローン １３コ Ｉ−ＡＦＰ Ｉ Ｇのモノ
クローン性１３３１−抗ＡＦＰ ｒｇＧは、ＣＥＡの
代りにＡＦＰ抗原を使用することを除いて、実施例２の
操作と同様に製造される。 モノクローン性抗ＡＦＰ ＩｇＧは実施例１ （ｆ）
の操作と同様に１−１３３で放射標識される。 実施例１１ １！１１ ＴＧ ヤギ の ゛１ 正常ヤギｒｇｃ（マイルス社）は、臭化シアン結合ＨＣ
Ｇ、ＡＦＰおよびＣ３Ａｐに対してアフィニティー亨ｎ
製され、そしてｌ−１２３をＴ−１３１に代え、実施例
３のように比放射能の差を補償するように試薬の比率を
変更することを除き、実施例１（ｆ）の操作と同様に１
−１２３で標識される。 実施例１２ １’＋ １− ＡＦＰ−１０Ｂ Ｉ Ｇの（ａ
） 実施例９（ａ）によって製造した抗ＡＦＰ Ｉ
ｇＧを、実施例４（ａ）の操作と同様に、ホウ素−１Ｏ
天然存在比（２０％）を有する、１−（４−アミノフェ
ニル）−１，２−ジカルバクロソードデカルボラン（１
２）のジアゾニウム塩の２０倍モル過剰と反応させる。 生成する抗体は抗体１分子当り、平均ジアゾ結合カルボ
ラン残基２ないし１０個、もしくは４ないし２０個のホ
ウ素−１Ｏ原子を有する。 ［有］）上記（ａ）部の抗ＡＦＰ−１０Ｂを実施例１（
ｆ）の操作と同様に１−１３１で放射標識し、抗体１分
子当りヨー素平均１ないし１０原を導入する。 実施例１３ 財し′る の！１′告 無菌のパイロ−ジエン不合溶液は以下に示すように製造
される。 （ａ） 無菌溶液はｍｌ当り以下の成分を含有する。 （１）ヒト血清アルブミン（ＩＳＡ）（１％、米局方、
バークデービス社）３．４■ （２）０．０４ Ｍリン酸緩衝液、ｐＨ７，４（バイオ
ウェア社） （３） ０．９％ＮａＣ１ （４）実施例日によって製造した１３１■−抗ＨＣＧＩ
ｇＧ（ヤギ） ｌＯｔｔｇ （平均ヨー素約５原子／分
子、比放射能約８０μＣｉ／μｇ）実施例８の標識抗体
は２０μｇ／ｌｅｌの濃度で（１）、（２）および（３
）の溶液中に貯蔵され、そしてこの溶液を調製するため
にリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中の１％Ｈ３Ａの等容で
希釈される。 （ｂ） 実施例１１で製造したＩｌｌ ｌ Ｉｇ
Ｇの５．１μｇ／ｄをさらに含有することを除いて、上
記（ａ）部の操作による無菌溶液。標識放射能５００μ
Ｃ１／ｌｔｇにおける１２ｆｆｌ１ｇＱは濃度１０．２
ｕｇＺ−において１％Ｈ３Ａを含むリン酸緩衝食塩水
中に貯蔵される。この溶液の等容が（ａ）部の操作にお
けるＰＢＳ中１％Ｈ３Ａの代りに使用される。 （Ｃ） 抗体が実施例９（ａ）により製造され、濃度
２０μｇ／ｄにおいてＰＢＳ中１５Ｈ３Ａ中に貯蔵され
、そして匹敵する比放射能を有するＩＩＩ ｌ−抗Ａ
ＦＰ Ｉ ｇＧ （ヤギ）であることを除き、（ｂ）
部の操作による無菌溶液。 （ｄ） 実施例１０により製造した＋３：ｌ ［−
抗ＡＦＰＩ Ｆ、 Ｇ （モノクローン性） １０
ｔｔ ｇ／ｌｎｌをさらに含有することを除き、（１）
）部の操作による無菌溶液。 ３１１−抗■ＩＣＧ Ｉ ｇＧ、” Ｉ Ｉ ｇ
Ｇおよび１１３ １−抗ΔＦＰ ＩｇＧはそれぞれ最
終溶液の所望の比放射能の３倍の濃度で貯蔵され、そし
て各溶液の等容が無菌溶液の調製に使用される。 （ｅ） 抗体が実施例１２により製造され、抗体１分
子当りジアゾ結合カルボラン基を平均５個およびヨー素
平均】原子と、そして比放射能１６μＣｉ／μｇを有す
る１ｆｆＩ ｌ＝抗ＡＦＰ ＩｇＧであることを除
き、（Ｌ））部の操作による無菌溶液。溶液は抗体５０
．４ ’ｕ ｇ／ｍｌｌ含有する。 実施例１４ 脛鹿痩ｌ護足 放射性ヨード化した抗体は腫瘍の疑いある患者に投与さ
れる。患者はヤギＩｇＧに対するアナフィラキシ−過敏
症に対して事前テズ斗される。■−１３１またはｌ−１
２３の甲状腺摂取を阻止するため、ルゴール液（ピュア
パック社）が放射性標識抗体の注射１日前から始まる７
日管５滴づつ毎日２回口から投与される。 （ａ） 位置測定は、Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇ ｅｔ
ａｌ、 Ｎ、 Ｅｎｇ、 Ｊ。 Ｍｅｄ、、 ２９８．１３８４（１９７８）の操作によ
り、無菌生理食塩水２０ｍ１中実施例１３（ｂ）によっ
て製造した＋！ｆｆｌ１ｇＧを含有するｌｊｌ ｌ−
抗ＨＣＧＩｇｃの溶液３．５ ｄを１０ないし２０分を
要して注入することにより実施される。Ｔｃ−９９ｍ化
合物は使用せず、減算技術は慣用の態様で１−１３１と
１−１２３とを識別するのに適応し７ている。 抗体の注射完了直後および２，８，１２，２４゜４８お
よび７２時間走査が行われる。 データ解析はフォト操作データをタンピ１−ターに記憶
させ、標識した正常免疫グロブリンの放射能レベルを少
な（とも１つの標的区域における標識抗体のそれと等化
し、各データポイントについて標識抗体に対するバック
グラウンドレベルを計算し、各データポイント毎に標的
を指向した抗体の活性に対する値を発生するため、写真
毎に全抗体活性からえらえたバックグラウンド値を減算
し、そして得られる標的指向抗体活性の発生した値を関
連する出力（３号を発生させるために使用することを含
む。 有意を局在化が２時間後に見られ、時間とともに解像度
が改善され、注射後８ないし２４時間で高原へ達する傾
向がある。追加のバックグラウンドｌｌｊ１ｇＱは加え
ない。この方法はＨＣＣ選択性は以前のＧｏｌｄｅｎｂ
ｅｒｇ ｅｔ ａｌの方法に匹敵するが、しかし解像度
、速さおよび便利さは著しく増強される。 造影は）−（ＣＧを排泄するこう丸生殖細胞腫瘍を持つ
患者において特に成功する。これら患者の２次的骨盤お
よび腹部ＩＩＩ瘍もまた成功して位置測定され、それら
のうちあるもの、例えば腹部転移はコンピューター化し
た腹部断層撮影法、静脈内賢う造影法および下部ビナキ
アボグラフィーによっては検出困難または不可能である
。 ら）抗体が実施例１３（Ｃ）ｔ？製造したＩ！ｆｆ１１
５Ｇを含有する溶液中のＩＩＩ Ｉ−抗ＡＦＰ Ｉ
ｇＧであることを除いて、（ａ）部の操作を繰り返す。 造影は（ａ）のそれに匹敵し、こう丸および肝臓がんを
有する患者に特に成功である。しばしば高く上昇するＡ
ＦＰレベルにもか＼わらず、２次的腹部および肺転移が
よく位置測定される。 （Ｃ） 抗体溶液が実施例１３（ｄ）により製造した
１３−Ｉ−抗ＨＣＧ ＩｇＧ、” Ｔ−抗ＡＦＰ
ＩｇＣ；および１！３７１ｇＧの３．５ ｘｔｌである
ことを除き、（ａ）部の操作が繰り返される。フォト走
査データが慣用手段でｌ−１３１，ｌ−１３３およびｌ
−１２３放射を分離し、標識標的抗体に対するバックグ
ラウンド値を決定するため等化したｌ−１２３／１−１
３１およびｌ−１２３／ｌ−１３３比を記憶して使用し
、これらを各抗体に対する個別的標的指向活性を計算す
るため減算することによって解析される。 造影は（ａ）部および（ｂ）部の別々の抗体走査により
成功して造影されたすべてのタイプの腫瘍に対して成功
である。走査の組み合せは多数の場合において、特に胎
児性がんにおいて増強された位置測定および解像度を与
える。 実施例１５ 腫爪准療 （ａ） 場合により実施例１４ （ａ）の走査によっ
て検出され、位置測定されたこう丸生殖細胞がんを有す
る患者に、無菌生理食塩水５０城中実施例１３（ａ）の
溶液１５０ｍＣｉを静注する。腫瘍の縮小が２０日以内
に観察される。この投与は個人毎に調節される間隔で繰
り返される。 ０））場合により実施例１４（ｂ）の操作により検出さ
れ、位置測定された肝臓がんを有する患者に、患者の体
重７０ｋｇに対して＋３１ １活性２．８ｍＣ１を与え
るのに充分な量の実施例１３（ｅ）の溶液（無菌生理食
塩水５０ｍ１中）を注射する。腫瘍は実施例１３の操作
を用いて注射１２時間後に精密に位置測定される。よく
コリメートした熱中性子ビームが区切られる腫瘍位置へ
集中される。Ｃ艷当り３×１０１ｇ中性子の照射が各腫
瘍位置について実施され＼そして個人ベースで調節され
た間隔で、放射標識しまたはしない腫瘍位置測定抗体の
投与と共に繰り返される。成功した腫瘍縮小が観察され
る。 実施例１６ （ａ） リン酸緩衝食塩水中ｔ５ｍｇ／ｍの実施例１
で製造したアフィニティー精製したヤギ抗ＣＥＡＴ ｇ
０２ ｍｆｔが、４°Ｃにおいて２４時間、１００ｍ
Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液、Ｐ Ｈ４，０（Ｎ ａ Ａ
ｃ ）に対して透析される。抗体溶液はねし蓋つき試験
管へ移され、３７°Ｃへ予熱され、そしてＮａＡｃ中３
■／ ｍｌのブタペプシン（シグマ社）０．１ｄと３７
°Ｃで１６時間インキュベートされる。沈澱を含むダイ
ジェストは１００ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ７
，５（ＰＯ４）に対して４°Ｃで６時間透析される。得
られる溶液はセファデックスＧ１００上でＰＯ，でクロ
マトグラフされ、Ｆ（ａｂ’）、フラグメントは２番目
のタンパクピークに溶離される。Ｆ（ａｂ’）２分画を
合し、限外口過で濃縮し、５０ｍＭ ＰＯ，、ｐＨ７
，５に対し透析し、そして−２０°Ｃで貯蔵する。 （ｂ） ゲル口過前の（ａ）部で得られた溶液をサン
プルｍｌ光り７μｌの２−メルカプトエタノールで処理
し、４°Ｃで０．５時間一定のかきまぜのもとにインキ
ュベートする。サンプルｌｄｌ当り、１Ｍヨードアセタ
ミド０．１３５ ｔｅｌを加え、混合物をかきまぜなか
ら４°Ｃで１時間インキュベートし、遠心して清澄化す
る。 得られる粗製Ｆａｂ’ フラグメント溶液はセファデッ
クスＧ−１００上でゲルロ遇され、抗ＣＥＡＦａｂ’
フラグメントは２番目のタンパクピークに溶離される。 ビーク２の分画がプールされ、限外口過により濃縮され
、５０ ｍＭ Ｐ Ｏ４ｐ Ｈ７，５に対して透析さ
れ、−２０℃で貯蔵される。 （Ｃ） 前記（ａ）部の操作により、抗ＨＣＧ、抗Ａ
ＦＰ。 抗Ｃ３Ａｐ、抗ＣＧＡ、抗ＧＥＡ、抗ＧＦＡ、抗ＣＭＡ
および抗ＨＡ Ａ ＡのＦ（ａｂ’）、フラグメントが
製造される。 （ｄ） 前記（ａ）部および（ｂ）部の操作により、
抗ＨＣＧ。 抗ＡＦＰ、抗Ｃ３Ａｐ、抗ＣＧＡ、抗ＧＥＡ、抗ＧＦＡ
、抗ＣＭＡおよび抗ＨＡＡＡのＦａｂ’フラグメントが
製造される。 （ｅ）”’ ｌ−１ｍＣ１当り、前記（ａ）部または
（Ｃ）からＦ（ａｂ’）、フラグメント４．４ないし１
０．２μｇ１または前記（ｂ）部または（ｄ）部からの
Ｆａｂ’フラグメント２．４ないし５．６μｇが１２１
１ （アマーシャムーサール社）を含む放射性核種バ
イアル中へ注射され、実施例１ （ｆ）の操作と同様に
放射標識される。 得られる＋３１ １−抗体Ｆ（ａｂ’）、は、フラグメ
ント当すョー素平均３ないし７原子を有する。 各バッチからの無作為部分標本は個々に無菌性、発熱原
性、毒性およびその他の品質管理変動についてテストさ
れ、る。 実施例１７ フラグメントの および （ａ）ＮａＡｃ緩衝液ｐ Ｈ５，０中１５ｍｇ／ｄ溶液
の形の、実施例１６（Ｃ）で製造した抗ＣＥＡおよび抗
Ｃ３ＡｐＦ （ａ ｂ’ ）ｚフラグメントの等量混合
物がサンプル プトエチルアミン塩酸塩溶液で処理され、一定したかき
まぜのちとに３７°Ｃで１時間インキュベートされる。 混合物は還元剤を除去するためｐＨ５で４０゛Ｃにおい
てイオン交換カラム（ＩＲ１２０）を通され、得られる
溶液はｐＨ８に調節され、ゆるやかにかきまぜながらそ
して酸素を溶液に通しながら２時間かきまぜる。溶液は
次にＰＯ４に対して４°Ｃで６時間透析され、実施例１
６（ａ）の最終工程のようにセファデックスＧ−１００
上ＰＯ４でクロマトグラフされる。 Ｆ（ａｂ’）、混成フラグメントを含有する分画は２番
目のタンパクピークに溶離される。この分画は臭化シア
ンで結合したＣＥＡおよびＣＳＡｐを含む別々のセファ
ローズ４Ｂカラム上のアフィニティークロマトグラフィ
ーにかけられる。両方のカラムに保持される分画は混乱
的に解離され、セファデックスＧ−１（１０）で再クロ
マトグラムされ、そして硫安で沈澱し、解離しそしてＰ
Ｏ４に対し透析することによってさらに精製され、そし
て抗ＣＥＡ／ＣＳＡｐ Ｆ （ａ ｂ” ）ｚの溶液は
一２０°Ｃで貯蔵される。 −（ｂ）上記（ａ）部の操作により、以下の混成Ｆ（ａ
ｂ’）フラグメントが製造される。成分Ｆａｂ’記号は
それらの抗体源によって示される。 （１）抗Ａ Ｆ Ｐ ／ Ｈ Ｃ Ｇ Ｆ （ ａ
ｂ ’ ） ｚ（２）抗ＣＥＡ／Ｐ ＡＰ Ｆ （ａ
ｂ’ ） ｚ（３）抗ＣＧＡ／ＣＥＡ Ｆ （ａｂ
’ ）。 （Ｃ） 上記（ａ）部および（ｂ）部で製造したフラ
グメントはそれぞれ実施例１ （ｆ）の操作に同様に１
−１３１またはＩ−１３３のどちらかで放射標識される
。 実施例１８ Ｉ Ｇフラグメントの ２および 正常ヤシＩｇＧ（マイルス社）が臭化シアン結合された
ＨＣＧ，ＡＦＰ，ＣＳＡｐ，ＣＥＡ，ＰＡＰ，ＧＥＡお
よびＣＧＡに対してアフィニティー精製され、実施例１
６の操作によりフラグメン）・化され、そしてフラグメ
ントが、Ｉ−１２３を１−１３１の代りに使用し、そし
て実施例３のように比放射能の差を補償するため試薬の
比例的変更を行うこと以外は実施例１ （ｆ）の操作と
同様に１１２３で放射標識される。 実施例１９ ホウ ー１０Ａ フーグメン の および旧識 （ａ） 抗体フラグメント、例えば実施例１６により
製造した抗ＣＥＡ Ｆ（ａｂ’）ｚを、実施例４（ａ
）の操作と同様に、ホウ素−１０を天然存在比に含む（
２０％）、１−（３−アミノフェニル）−１ ２−ジカ
ルバクロソードデカルボラン（１２）のジアゾニウム塩
の２０倍モル過剰と反応させる。 得られるフラグメントは抗体フラグメント当りジアゾ結
合カルポラン残基を平均２ないし１０個もしくはホウ素
−１０を４ないし１０原子有する。 （ｂ） 前記（ａ）部の抗ＣＥＡ−’°Ｂ−Ｆ（ａｂ
’）。 は実施例１（ｆ）の操作と同様に１−１３１で放射標識
され、抗体フラグメント当りヨー素を平均工ないし１０
原子が導入される。 （Ｃ） 実施例１６（Ｃ）のＦ（ａｂ’）ｚフラグメ
ントをそれぞれこの実施例の（ａ）部の操作によりカル
ボラン付加物を付加するように反応させ、得られるホウ
素−１０含有フラグメントは実施例１（ｆ）の操作と同
様に放射標識され、抗体フラグメント当りヨー素平均１
ないしＩＯ原子の標識が達成される。 同 ヨードアセタミドの代りに、１−（４−アミノフェ
ニル）−１．２−ジカルバクロソードテカルボラン（１
２）のＮ−ヨードアセタミドが使用される以外は、実施
例１６（ｂ）の操作が繰り返される。該アミドは、慣用
方法により、塩基の存在下アミンをヨードアセチルクロ
ライドと反応させることによって製造される。得られる
Ｆａｂ’ フラグメントは、還元的開裂で遊離されたス
ルフヒドリル基に、２個のカルポラノフェニル置換アセ
タミド基を有する。ホウ素−ｌＯ含有フラグメントは、
抗体フラグメント当りヨー素平均１ないし１０原子の標
識を得るように、実施例１（ｆ）の操作と同様に放射性
ヨード化される。 （ｅ） 実施例１７（ａ）および１７［有］）によっ
て製造した混成Ｆ（ａｂ”）２フラグメントをこの実施
例の（ａ）部のように反応させ、次に抗体フラグメント
当リョー素１ないし１０原子の標識を得るように、実施
例１（ｆ）の操作と同様に放射性ヨード化される。 実施例２０ 対」・し′＝る ′ のｉ−告 無菌のパイロ−ジエン不合溶液が以下のように製造され
る。 （ａ） ｒｎｌ当り、以下の成分の含有する無菌溶液
（１）ヒト血清アルブミン（ＩＳＡ）（１％、米局方、
パークデービス社）３４ａ＋ｇ （２）０．０４ Ｍリン酸緩衝液、ｐＨ７，４（バイオ
ウェア社） （３） ０．９％ＮａＣＩ （４）実施例１６により製造したｌｆｆ１ ｌ−抗Ｃ
ＥＡＦ （ａｂ’ ）ｚ （ヤギ）６．１μｇ（ヨー
素平均約５原子／分子、比放射能約１２５μＣｉ／μｇ
） 実施例１６の抗体は２４．４μｇ／ａｌの濃度で溶液（
１）、（２）および（３）中に貯蔵され、この溶液を調
製するためにリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中の１％ＩＳ
Ａの３容で希釈される。 （ｂ）一実施例１８で製造した比放射能−５００μＣｉ
／ｌｔｇの”’ Ｉ−Ｆ （ａ ｂ’ ） ！ ６５．
２１！ ｇ／１ｔｄｌをさらに含有することを除き、上
記（ａ）部の操作による無菌溶液。Ｉｚｓ Ｉ−Ｆ （
ａ ｂ’ ） ｔは濃度２０．８μｇ ／ Ｍｌにおい
て１％Ｈ３Ａを含むＰＢＳ中に貯蔵される。この溶液の
等容が（ａ）の操作におけるＰＢＳ中の１％ＩＳＡの１
容の代りに使用される。 （Ｃ） 抗体が実施例１６により製造され、濃度４０
゜４！ｇ／１ｔｄｌにおいてＰＢＳ中１％Ｈ３Ａ中貯蔵
され（フラグメント当すョー素平均２．５原子）、そし
て＋３盲 Ｉ−抗ＣＥＡ Ｆ （ａｂ’ ）ｚフラグ
メントの活性の約半分を有するＩＩＩ Ｉ−抗ＡＦＰ
Ｆａｂ’の１０．１μｇ／ｄであり、そして目３■−Ｆ
（ａｂ’ ）！の代りに”’Ｉ−Ｆａｂ’を■−１３
１対１−１２３の活性化が実施例２ｏ（ハ）と同じにな
るような比放射能において含むこと以外は、（ａ）部の
操作による無菌溶液。 （ｄ） 抗体が実施例１６により製造され、２４．４
μｇ／ｍｌの濃度でＰＢＳ中１％ＩＳＡに貯蔵され、そ
して匹敵する比活性を有するＩＩＩ ｌ−抗Ｃ３Ａｐ
Ｆ（ａｂ’）＝であることを除いて、（ハ）部の操
作による無菌溶液。 （ｅ） 抗体が実施例１７により製造され、２４．４
！ｇ ／ ｔｔｔｆｌの濃度でＰＢＳ中の１％ＩＳＡに
貯蔵され、そして匹敵する比活性を有する１３１ １−
抗ＣＥＡ／ＣＳ Ａ ｐ混成Ｆ （ａｂ’ ）、である
ことを除き、（ｂ）部の操作による無菌溶液。 （「）それぞれ２４．４！ｇ／ｄの濃度でＰＢＳ中の１
％ＩＳＡに貯蔵され、そして匹敵し得る比活性を有する
１コ１ ■−抗ＡＦＰ Ｆ（ａｂ’）ｚおよび１３１
１−抗ＨＣＧＦ （ａ ｂ’ ）ｔをそれぞれ６゜１
μｇ ／ ｍｌさらに含むことを除き、（ｂ）部の操作
による無菌溶液。それぞれの等容が（ａ）部の操作にお
けるＰＢＳ中の１％ＩＳＡの１容の代りに使用される。 （ロ）実施例１７により製造し、２０．４！ｇ／ｌｄｌ
の濃度でＰＢＳ中の１％Ｈ３Ａ中に貯蔵され、そして匹
敵し得る比活性を有する１１３ １−抗ＡＦＰ／ＨＣＧ
Ｆ（ａｂ“）！をさらに含むことを除いて（ｅ）部
の操作による無菌溶液。 色）抗体が実施例１７により製造され、２４．４μｇ／
ｄｌの濃度でＰＢＳ中の１％ＩＳＡに貯蔵され、そして
匹敵する比活性を有する１３１ ｌ−抗ＣＧＡ／ＧＥ
Ａ Ｆ （ａ ｂ’ ）ｚフラグメントであることを
除き、［有］）部の操作による無菌溶液。 （ｉ） 抗体が実施例１９により製造され、抗体分子
当り平均５個のジアゾ結合カルボラン残基とヨード１原
子とを有し、そして約２５μＣ３／μｇの比放射能を有
するＩｌｌ ｌ−抗ＣＥＡ−１’Ｂ Ｆ （ａｂ’
）、フラグメントであることを除き、［有］）の操作に
よる無菌溶液。 （ｊ） 抗体が実施例１９により製造され、抗体分子
当り平均５個のジアゾ結合カルボラン残基およびヨード
１原子とを有し、そして約２５μＣｉ／μｇの比放射能
を有するＩＩＩ ｌ−抗ＣＥＡ／Ｃ５Ａｐ−ＩＯＢ混
成 Ｆ （ａ ｂ ’ ） ｚ Ｔ：アルコトラ除キ、
（ｂ）の操作による無菌溶液。 最終溶液は抗体３０．６！ｇ／ｒｄを含有する。 仮）抗体が実施例１９（ｄ）により製造され、抗体分子
当り平均２個のアミド結合カルボラン残基およびヨー素
ｌ原子とを有し、そして約５２μＣｉ／ｌｔ ｇの比放
射能を有する＋３１ ■−抗ＡＦＰ−貫ｏＢＦａｂ’
フラグメントであることを除き、（ｂ）部の操作によ
る無菌水溶液。最終溶液は抗体１６．８μｇ ／ ｍｌ
ｌを含存する。 （１）抗体が実施例１９（ｅ）により製造され、抗体分
子当り平均５個のアミド結合カルボラン残基およびヨー
素１原子とを有し、そして約２５μＣｉ／ｌｔ ｇの比
活性を有する＋３１ （−抗ＣＧＡ／ＧＥＡｏＢ混成
Ｆ（ａｂ’）ｘフラグメントであることを除き、（ｔ）
）部の操作による無菌溶液。最終溶液は抗体３０．６μ
ｇ ／ ＃Ｎを含存する。 実施例２１ 脛部−位Ｍ’／Ｄ’Ｊ淀− 放射性ヨード化した抗体フラグメントは腫瘍の疑いのあ
る患者に投与される。患者は対応する■ｇｃフラグメン
トに対するアナフィラキシ−過敏症について事前テスト
される。ｌ−１３１または１−１２３の甲状腺摂取を阻
止するため、ルゴール液（ピュアバック社）が放射性標
識抗体フラグメントの注射１日前から始める７田関、５
滴づつ１日２回口から投与される。 （ａ） 位置測定はＧｏｌｄｅｒｂｅｒｇ ｅｔ ａ
ｌ、 Ｎ、 Ｅｎｇ、 Ｊ。 Ｍｅｄ、、 １３８４（１９７８）の方法により、無菌
生理食塩水２０ｍ！中の、実施例２０［有］）により製
造した＋ｚｚ ＩＦ（ａｂ’）２を含むｌｆｆ１
ｌ−抗ＣＥＡＦ（ａｂ’）、の溶液３．５ ｍｌを１０
分ないし２０分を要して注入することにより実施される
。Ｔ ｃ、−９９ｍ化合物は使用されず、減算技術は慣
用態様で１−１３１および！−１２３を識別するのに適
応している。フラグメントの注射の完了直後、および２
，４，８，１２，２４．４８および７８時間後走査が行
われる。 データ解析は、フォト走査データをコンピューターに記
憶させ、標識した正常１ｇＧフラグメントの活性レベル
を少なくとも１つの標的区域における標識した特異フラ
グメントのそれに等化し、そして各データポイントに対
し標識したフラグメントのためのバックグラウンドレベ
ル値を計算し、得られたバックグラウンド値を全フラグ
メント活性から減算し、各データポイントに対し標的へ
向ったフラグメントの活性のための値を発生させ、そし
て得られた標的指向フラグメント活性に対する発生させ
た値を関連する出力信号を発生ずるように使用すること
を含む。 ２時間後に有意な位置測定が見られ、時間とともに改良
された解像度が得られ、注射後４ないし１２時間の間に
高原に達する傾向が見られる。追加のバックグラウンド
１２３ １−ｐ’ （ａ ｂ’ ） ｔは加えられない
。この方法のＣＥＡ特異性は以前のＧｏｌｄｅｒｂｅｒ
ｇｅｔ ａｌ法に匹敵するが、しかし解像度、速さおよ
び便利さは著しく増強された。 （ｂ） 実施例２０（ｂ）の溶液の代りに実施例２０
（Ｃ）の溶液３．５ ＩＩｄｌを使用し、上記（ａ）
部の操作が繰り返される。 造影は（ａ）部に匹敵し、こう丸および肝臓がんを有す
る患者に特に成功する。２次的肺および腹部転移は、し
ばしば高く上昇する血清ＡＦＰにもかかわらず良好に位
置測定される。 （Ｃ） 実施例２０（ｂ）の溶液の代りに実施例２０
（ｄ）の溶液３．５ ｄを使用し、（ａ）部の操作が
繰り返された。 造影は（ａ）部のそれに匹敵し、結腸がんを有する患者
に特に成功する。 （ｄ） 実施例２０（ｂ）の溶液の代りに実施例２０
（ｅ）の溶液３．５ ｄを使用し、（ａ）部の操作が
繰り返される。 胃腸がんの造影は特にシャープで、この実施例の（ａ）
部および（Ｃ）部に匹敵する。 （ｅ） 実施例２０［有］）の溶液の代りに実施例２
０（ｆ）の溶液３．５ ｄを使用し、（ａ）部の操作を
繰り返す。 この実施例の（ａ）、Ｃ３））および（Ｃ）部で位置測
定および検出に成功したタイプのすべての腫瘍の造影に
成功する。組み合わせ走査は多くの場合、特にこう丸生
殖細胞、肝臓および肺がんに対して増強された位置測定
および解像度を与える。 げ）実施例２０（ロ）の溶液の代りに実施例２０（−の
溶液３．５ ｄを使用し、（ａ）部の操作を繰り返す。 造影はこの実施例の（ａ）ないしくｂ）部の操作により
造影されるすべての腫瘍タイプに対し、この実施例の（
ｂ）部のそれに匹敵する。 （８）実施例２０ （ｂ）の溶液の代りに実施例２０（
ハ）の溶液３．５ ｍを使用し、（ａ）部の操作を繰り
返す。脳の膠芽腫の造影に成功し、混成抗体は血液−脳
障壁を通過することができ、そして脳腫瘍中に集中する
ことを示す。 実施例２２ 且鹿治亙 （ａ） 場合により実施例２１の操作により検出され
、位置測定された卵巣がんを有する患者に、無菌生理食
塩水５０ｍ１中実施例２０ （ａ）の溶液１５０ｍＣ１
を静注する。腫瘍サイズの縮小は２０日以内に観察され
る。該投与は個人ペースで調節された間隔で繰返される
。 （ｂ） 場合により実施例２１の操作により検出され
、位置測定された子宮頚部がんを有する患者に、患者の
体重７０ｋｇに対しＩ！Ｉ Ｔ活性２．８ｍＣ１を与
えるのに充分な量の実施例２０（ｉ）の溶液（無菌生理
食塩水５０ｍ１中）を注射する。 １１１ｆｆｉは実施例２１の操作を用いて注射後１２時
間で精密に位置測定される。よくコリメートされた熱中
性子ビームが区切られた腫瘍１立置に集中される。Ｃ−
当り３Ｘ１０”中性子の旧１が各腫瘍位置に対して実施
され、そして場合により個人ペースで調節された間隔で
、放射標識し、またはしない腫瘍位置測定剤の投与とと
もに繰り返される。 成功する腫瘍縮小が観察される。 （Ｃ） 実施例２００）の溶液の代りに実施例２０（
ｊ）の溶液が使用され、患者が結腸がんを有することを
除いて、上記（ハ）部の操作が繰り返される。成功した
腫瘍縮小が観察される。 （ｄ） 実施例２０（ｉ）の溶液の代りに実施例２０
（ｋ）の溶液が使用し、そして患者がこう丸生殖細胞Ｎ
ＩＴ！瘍を有することを除いて、ｂ）部の操作が繰り返
される。腹部転移の減少を含む、成功した腫瘍縮小が観
察される。 （ｅ） 実施例２０（ｉ）の溶液の代りに実施例２０
（＋）の溶液を使用し、そして患者が脳の膠芽腫を有す
ることを除き、（ｂ）部の操作が繰り返される。成功し
た腫瘍縮小が観察される。 前記実施例は本発明の一般的にまたは特定的に記載した
反応剤および／または処理条件で前述の実施例中に使用
されたそれらの置き換えることにより、同様の成功度を
もって繰り返すことができる。 以上の記載から、当業者は本発明の基本的特徴を確かめ
ることができ、そしてその精神および範囲を逸脱するこ
となく、その各種の用途および条件に適応させるため本
発明の各種の改変を行うことができる。
Claims (10)
- （１）（ａ）腫瘍マーカーに対し特異性であり、薬理学
的に不活性なかつ放射療法的に有効なラジオアイソトー
プの腫瘍減少有効量で放射標識された少なくとも１種の
マーカー特異性抗体もしくは抗体フラグメントと、 （ｂ）薬剤学的に許容し得る注射剤担体とを含むこを特
徴とするヒト腫瘍治療用注射組成物。 - （２）前記腫瘍マーカーは、細胞表面マーカーである第
１項の組成物。 - （３）前記腫瘍マーカーは、ガン胎児性抗原である第２
項の組成物。 - （４）前記腫瘍マーカーは、細胞内マーカーである第１
項の組成物。 - （５）前記腫瘍マーカーはアルファ胎児タンパク、ヒト
絨毛ゴナントロピンもしくはそのベーターサブユニット
、または結腸特異抗原−ｐである第４項の組成物。 - （６）前記腫瘍マーカーは、前立腺酸性フォスファター
ゼ、すい臓腫瘍胎児性抗原、胎盤アルカリ性フォスファ
ターゼ、妊婦ベータ−１−グロブリン、上皮小体ホルモ
ン、カルシトニン、組織ポリペプチド抗体、Ｔ−抗原、
ベータ−２−ミクログロブリン、ガラクトシルトランス
フェラーゼII、ｇｐ−５２ビールス関連抗原、卵巣のう
腫瘍関連抗原、卵巣腫瘍特異抗原、子宮頚管がん抗原Ｃ
Ａ−５８、子宮頚管がん抗原ＣＡＡ、子宮頚管がん抗原
ＴＡ−４、塩基性胎児性タンパク、末端デオキシヌクレ
オチドトランスフェラーゼ、細胞質黒色腫関連抗原、ヒ
ト星状細胞腫関連抗原、神経膠原線維酸性タンパク、通
常髄膜腫抗原、および腫瘍脈管形成因子の１種である第
１項の組成物。 - （７）前記抗体フラグメントは、化学的結合の形で、第
１の腫瘍マーカーに対して特異性の少なくとも１種のマ
ーカー特異性フラグメントと、そして同じもしくは異な
る腫瘍マーカーに対して特異性の少なくとも１種の第２
の異なるマーカー特異性フラグメントを含んでいる多価
混成体である第１項の組成物。 - （８）前記抗体フラグメントはモノクロナール抗体フラ
グメントである第１項ないし第７項のいずれかの組成物
。 - （９）前記ラジオアイソトープはヨウ素もしくはレニウ
ムのアイソトープである第１項ないし第７項のいずれか
の組成物。 - （１０）前記抗体フラグメントはモノクロナール抗体フ
ラグメントである第９項の組成物。
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|---|---|---|---|---|
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| AT392004B (de) * | 1981-10-27 | 1991-01-10 | Hybritech Inc | Verfahren zur herstellung eines monoklonalen antikoerpers gegen tumor-assoziiertes antigen und dessen verwendung |
| EP0088994B1 (en) * | 1982-03-15 | 1991-06-19 | Schering Corporation | Hybrid dna, binding composition prepared thereby and processes therefor |
| CA1194415A (en) * | 1982-05-05 | 1985-10-01 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Immunoglobulin half-molecules and process for producing hybrid antibodies |
| WO1984002983A1 (en) * | 1983-01-21 | 1984-08-02 | Frederick James Primus | Specific cea-family antigens, antibodies specific thereto and their methods of use |
| AU577781B2 (en) * | 1983-04-28 | 1988-10-06 | Mark Philip Best | Lung imaging with radiolabelled agents |
| CA1242643A (en) * | 1983-08-12 | 1988-10-04 | Eric T. Fossel | Nmr imaging utilizing chemical shift reagents |
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| US4824659A (en) * | 1985-06-07 | 1989-04-25 | Immunomedics, Inc. | Antibody conjugates |
| US4735210A (en) * | 1985-07-05 | 1988-04-05 | Immunomedics, Inc. | Lymphographic and organ imaging method and kit |
| US5776093A (en) | 1985-07-05 | 1998-07-07 | Immunomedics, Inc. | Method for imaging and treating organs and tissues |
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| GB9115192D0 (en) * | 1991-07-12 | 1991-08-28 | Antisoma Ltd | Cancer treatment |
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|---|---|---|---|---|
| US4211766A (en) * | 1972-07-10 | 1980-07-08 | Ab Bonnierforetagen | Cancer associated polypeptide antigen compositions |
| US3960827A (en) * | 1972-07-10 | 1976-06-01 | Bjoerklund K B | Cancer associated polypeptide antigen, process for its preparation, process for preparing antibodies, process of cancer diagnosis and composition useful as an immunizing agent |
| US3927193A (en) * | 1973-05-18 | 1975-12-16 | Hoffmann La Roche | Localization of tumors by radiolabelled antibodies |
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| US4146603A (en) * | 1977-02-18 | 1979-03-27 | Research Corporation | Tumor specific glycoproteins and method for detecting tumorigenic cancers |
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| ONCOLOGY=1974 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR19980038203A (ko) * | 1996-11-25 | 1998-08-05 | 규오 리 헤 | 항-간암 마우스 모노클로날 항체에 의해 전달되는 방사성소핵체를 함유하는 의약 |
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| Humphrey | Advances in the applications of monoclonal antibodies in clinical oncology |