JPH03128393A - ヒトリンパ栄養性ウィルスの処理及び診断 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、疾病の診断及びヒトにおけるリンパ栄養性疾
患の処理のためのＣＤ５との相互作用の調節に関する。

〔発明の背景〕

ヒトリンパ栄養性ウィルスは、過去１０年間に見出され
て来た。これらのウィルスは、悪性疾患及び免疫欠損の
誘発に関係することがわかっており、そして細胞のトラ
ンスフォーメーションに関係する遺伝子を含む複合ゲノ
ムを有する。フレームシフト及び種々のスプライシング
を用いて、正常なエンベロープ、コアー及び逆転写酵素
遺伝子の他に多くの遺伝子がコードされる。これらのウ
ィルスの中で、その病原性の機構がひじょうに複雑であ
ることがわかっているウィルスはＨＩＶである。

ＨＩＶがその免疫抑制活性を付与する正確な機構は、正
確には決定されていない。そのウィルスがＴ　１７２８
球に対する直接的な細胞変性効果を有する正確な証拠が
存在する。それにもかかわらず、感染された個人の末梢
血液におけるウィルスを実際に示す７９２１球の割合は
ひじょうに低い（１０ｓ個の細胞巾約１個）。従って、
ウィルスの直接的な細胞変性効果は、ＨＩＶ感染の間、
Ｔ　ＩＪンパ球の劇的な減少を説明することができない
。さらに、免疫抑制は、量的な細胞欠陥だけでなく、ま
た溶解性抗原へのＣＤ４リンパ球の不十分な応答により
影響される７９２１球の質的な異常性にも関与される。

また、Ｔ−細胞は、ＨＩＶ感染に続いて影響される唯一
のリンパ球集団ではない。ＡＩＤＳにおいては、自己抗
体の分泌によるポリクローナルＢ−細胞活性化が存在す
る。

ＨＩＶエンベロープの研究に主な努力が向けられて来た
。ＨＩＶの第一次細胞受容体としてのＣＤ４、いくつか
のｇｐ４１ペプチドのイン　ビトロ免疫抑制活性、及び
ニューロロイキンとＨＩＶエンベロープタンパク質との
相同性の同定が、ＡＩＤＳの病因にいくらかの洞察力を
提供して来た。対照的に、ｇａｇコードタンパク質は、
はとんど注目されなかった。これらのｇａｇ配列は、Ｈ
ＩＶ−１単離物の間に、及びＨＩＶ−１とＨＩＶ−２と
の間にひじょうに保存されることが見出された。進行し
た臨床段階で数人の患者に検出されるｐ２４／ｐ２５抗
原の高レベルは、その疾患の病因においてコアータンパ
ク質の可能性ある役割をより理解する必要性を強調する
。

現在、種々の療法を提供することができるように、ＨＩ
Ｖが免疫システムを抑制することができる方法をさらに
明らかにする実質的な必要性が存在する。この研究の一
部として、疾病の良好な段階を可能にし、治療に関して
のいくらかの指針を付与し、そして新しい治療機会を提
供することができる診断のための新規の技法を開発する
ことが重要である。

〔関連文献〕

Ｈｕａｎｇ　、など、、　　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃ
ａｄ、Ｓｃｉ、［ＩＳＡ　８４　：２０４〜２０８．１
９８７は、しｙ−１、すなわち７９１１９７８球の膜糖
タンパク質の分子クローニングを記載する。Ｊｏｎｅｓ
、など、、　Ｎａｔｕｒｅ　３２３　：３４６〜３４９
゜１９８６は、ヒトリンパ球糖タンパク質Ｔｌ／Ｌｅｕ
−１のｏｆ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、　　１３６　：２
３９：３〜２３９７．１９８６は、ＨＴＬＶ−１ｐ１９
コアータンパク質の特異的エピトープを記載する。

〔発明の要約〕

大部分、コアー配列ＥＰＴＡＰを有するオリゴペプチド
、そのようなペプチドに対する抗体及びそのような抗体
のイディオタイプに対する抗体が、７９２１球とのヒト
リンパ栄養性ウィルスの相互作用を調節し、前記疾病の
存在を診断し、そしてその疾病の指示及び病因の調節に
おける療法を提供するために付与される。

ヒトリンパ栄養性疾患を診断し、そして処理するための
方法及び組成物が提供される。その方法及び組成物は、
配列Ｅ／Ｔ／Ｌ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ　、好ましくはＣ−末
端（左側のアミノ酸がＮ−末端であり、そして右側のア
ミノ酸がＣ−末端である）で１つの追加のＰ及びＮ−末
端で１つの追加のＰを有するオリゴペプチド（ＰＥＰＴ
ＡＰ）の使用に基づいている。

単独で又は他のアミノ酸に結合されるそのオリゴペプチ
ドは、と）　ＩＪンパ栄養性疾患の診断及び／又は予測
、並びにヒト宿主における疾病の進行の調節に適用され
る。

ＥＰＴＡＰ（ＨＩ　Ｖ、　　リンパ栄養性ウィルス及び
ＣＤ５における）に関連する領域は、Ｔ及びＰアミノ酸
に富んでいる。Ｔ及びＰのタブレット又はトリプレット
の配列、すなわちＴＰ配列、たとえばＴＴＴＰＰ。

ＴＴＰＰＰＴＴＴＰＰ又はＴＴＰＰＴＴＴ”ＰＰＰＴＴ
Ｔ　（ここでＴ４はＲにより置換され得る）が興味の対
照である。これらの配列は、式（ＴｎＰｐ）　ｑＴｒ　
（式中、ｎ＝２〜３　、　り＝２〜３．ｑ＝１〜３及び
ｒ＝Ｑ又は１）を有するであろう。一般的に、その配列
は、５〜１６個のアミノ酸、通常約１０〜１４個のアミ
ノ酸を有するであろう。これらの配列は、診断及び治療
においてＥＰＴＡＰ配列と組合して使用され得る。

本発明の主要オリゴペプチド配列はＩＥＰＴＡＰを含ん
で成り、ここでＮ−末端はＰ又はＬのいづれかであろう
１つよりも多くないアミノ酸により拡張され、そしてＣ
−末端は１〜４個、通常１〜２個のアミノ酸、たとえば
Ｐ−Ｒ／ε／Ｆ−Ｌ−Ｑにより、通常１個のみのアミノ
酸により拡張され、ここで第１アミノ酸はＰであり、そ
して第２アミノ酸はＥ。

Ｆ、Ｖ又はＲである。この配列は、通常１０個よりも多
くないアミノ酸、普通９個よりも多くないアミノ酸から
成るであろう。コアー配列及びプロリン以外の保存性置
換が、上記に示された配列に使用され、ここでロイシン
がイソロイシン又はバリンにより置換され、そしてフェ
ニルアラニンがトリプトファン及びチロシンにより置換
され得る。

他のオリゴペプチド、すなわちＴＰ配列は、ＥＰＴＡＰ
配列と同じ態様で処理され得る。

オリゴペプチドは他のアミノ酸に連結され得るが、しか
しこれらのアミノ酸は、ＣＤ５．　ＨＩＶ、　ＬＡＶ及
びＨＴＬＶ−１におけるＥＰＴＡＰ配列又はＴＰ配列に
関連する天然に存在するアミノ酸以外のものであろう。

コアー配列は、便利上、追加のアミノ酸、他の化合物又
は面相に結合され得る。それは、ヒト宿主におけるヒト
リンパ栄養性ウィルス疾病の存在を示す。抗体又はコア
ー抗原の検出のために使用され得る（比較イムノアッセ
イにより）。従来既知である種々のアッセイが使用され
得、ここで上記のオリゴペプチドは、ラベル又は面相に
直接的又は結合基により連結され得る（直接又はキャリ
ヤー化合物により間接的に）。ラベルとして、酵素、螢
光分子、放射性同位体、化学発光分子、粒子、たとえば
コロイド分子及び同様のものを挙げることができる。使
用され得る種々の市販のアッセイ、たとえばＥＬＩＳＡ
、εＭＩＴ、　ＲＩＡ、　ＣＩＥＤＩＡ、　５ＬＦＩＡ
又は同様のアッセイが利用できる。使用される特定のア
ッセイは本発明に臨界でなく、そして所望する感度を提
供するいづれかの手段が使用され得る。使用され得る酵
素として、ホースラディシュベルオキシダーゼ、アルカ
リホスファターゼ、リゾチーム、β−ガラクトシダーゼ
、又は同様のものを挙げることができる。使用できる螢
光化合物として、フィコエリトリン、フルオレセイン、
ローダミン、ラサニド、キレート又は同様のものを挙げ
ることができる。種々の診断アッセイの例示化のために
は、たとえばアメリカ特許第３．７９１．９３２号；第
３．８１７．８３７号：第４．２３３．４０２号及び第
４，１３４．７９２号を参照のこと。

本発明のペプチドは、試薬として診断アッセイに使用さ
れ得る抗体の産生のためにもまた、使用され得、ここで
前記抗体はヒ）　Ｔ　ＩＪンバ球以外のものの上での本
発明の配列の存在を検出するであろう。他方、その抗体
は、本発明のペプチドのために血清に存在する抗体と競
争する競争アッセイに使用され得る。後者の情況におい
て、抗体は上記のようにラベルされ得、又は抗−オリゴ
ペプチドに対して特異的な第２抗体が使用され得る。そ
の情況の例として、本発明のペプチドは、支持体に結合
され、そして血清と共に組合され得、ここで特異的ペプ
チドに結合する血清中のいづれかの抗体が免疫複合体を
形成するために結合するであろう。次に、ヒト抗体の不
変部、すなわち特異的である又は特異的でないＬ鎮及び
／又はＨ鎖イソタイプのいづれかに対する抗体を付加す
ることによって（ここで前記抗−抗体はラベルされてい
る）その表面への抗体の結合のレベルを決定することが
できる。たとえばその抗−抗体は、マウス、ラット、羊
、ヤギ、ウシ又は同様のものであり得る。

明らかに、血液、血清又は血漿としてのヒト血液、涙、
Ｃ３Ｆ又は他の流体、免疫組織化学による組織における
ウィルス又はそのウィルスに対する抗体のいづれかの検
出のための手段が考案され得る。本発明のオリゴペプチ
ド又はそれに対する抗体を用いて、ウィルスペプチドが
検出される特別な手段は、利用できる装置、試薬の合成
の容易さ及び同様のものに従って変えられ得る。

本発明のオリゴペプチドに結合する抗体の他に、本発明
のオリゴペプチドのコンホーメーション特性及び結合特
性を模倣するであろう抗−イディオタイプ抗体が調製さ
れ得る。疾病の調節は、本発明のペプチド、本発明のペ
プチドに対する抗体又は抗−イディオタイプ抗体の使用
により達成され得る。これらの種々の化合物は、従来の
手段、たとえば非経口、たとえば腹腔内、筋肉内又は同
様の手段により投与され得る。オリゴペプチド又は抗体
は、リボソームで投与され得る。投与のレベルは広く異
なり、一般的に約１ｍｇ／ｋｇ／日〜１００ｍｇ／ｋｇ
／日の範囲であろう。便利には、本発明の組成物は、適
切なビークツへたとえば脱イオン水、塩溶液、リン酸緩
衝溶液、水性エタノール又は同様のものにより投与され
得る。

本発明のオリゴペプチドは、ヒ）ＣＤ５に存在する配列
、すなわちヘルパーニー細胞により高レベルで発現され
、またいくつかのＢ−細胞上に見出されるｐａｎ−Ｔマ
ーカーと相同性を共有する。ＣＤ５への結合を識別する
ためには、ウィルスの配列とＣＤ５配列とを区別する、
１〜３個のアミノ酸、通常１〜２個のアミノ酸により拡
張されるオリゴペプチドに対する抗体を調製することが
所望される。

たとえば、ＥＰＴ八ＰへこＰ−Ｅ　、Ｐ−Ｆ又はＱ−Ｖ
を付加し、そして次に抗体、特にモノクローナル抗体を
調製するために前記拡張されたオリゴペプチドを用いて
、ウィルス配列とヒ）ＣＤ５配列とを区別する抗体が得
られる。まず、ＩＥＰＴＡＰに強く結合する抗体につい
てハイブリドーマクローンをスクリーンし、続いて、ε
ＰＴＡＰＰＰに結合する抗体についてスクリーンし、そ
してそれらの抗体を捨てる。

残存する抗体を、１又は複数のウィルス配列への結合性
についてスクリーンする。

また、本発明のペプチドは、抗体の調製のために、いづ
れか便利な免疫原又はＴ−細胞免疫優性配列に結合され
得る。種々のＴ−細胞免疫優性配列は、文献に記載され
ており、たとえば１９８８年２月２６日に出願されたε
Ｐ−Ａ　８７．９０５６０２２．７を参照のこと。この
態様においでは、対象のエピトープに特異的に向けられ
る抗体が生成され得る。オリゴペプチドは、種々のキャ
リヤー、たとえば血清アルブミン、キーホールリンペッ
ト（Ｋｅｙｈｏｌｅ　ｌｉｍｐｅｔ）ヘモシアニン、γ
−グロブリン又は同様のものに結合され得る。免疫原に
オリゴペプチドを結合するための方法は良く知られてお
り、そして文献に記載されている。次に、その得られた
免疫原は、既知の手段、特に注射により、通常アジュバ
ント、たとえばフロインアジュバントと共に哺乳類宿主
を免変化するために使用され得る。追加免疫注射が１〜
３週間にわたって行なわれ、そして所望する抗体の力価
がアッセイされる。次に、血液を分離し、そしてγ−グ
ロブリンを硫酸アンモニウムにより沈殿せしめ、ポリク
ローナル抗体を供給する。モノクローナル抗体のために
は、通常、宿主はマスクであり、ここで肺臓細胞を融合
パートナ−に融合し、続いて限界希釈下でクローニング
し、適切な栄養培地中でその細胞を増殖し、そして得ら
れたクローンのスクリーンニングによりモノクローナル
抗体が得られる。本発明のオリゴペプチドは、所望する
特異性及び親和性を有するクローンを同定するために使
用され得る。次に、モノクローナル抗体は、ウィルスの
タンパク質又はウィルスに対する抗体のいづれかが検出
される、宿主におけけるＴ−’Ｊンパ栄養性ウィルスの
存在を同定するために使用され得る。抗体が治療のため
に使用され、そして抗体が異種移植性である場合、Ｆ（
ａｂ’　）２又はＦａｂが使用され得る。他方、ＬｉＪ
及びＨ鎮のためのｍＲＮＡがハイブリドーマから分離さ
れ、可変部をコードする配列が分離され、そしてヒ）Ｌ
及びＨ鎮不変部に結合され得る。前記配列に対する抗体
を有する患者からのＢ−細胞は、ＥＢＶにより形質転換
され、そして／又はヒト又はマウス又はネコ骨髄腫に融
合され、ヒトモノクローナル抗体が製造され得る。

ＣＤ５又はいくらかの抗体に比べてのＣＤ５に比べて、
ウィルスタンパク質に関連するペプチドのための親和性
において少なくとも１０倍、通常１０２倍高い因子によ
り異なるそのような抗体が使用され得る。

本発明の組成物の安定性を高めるために、それらは、末
端カルボキシル基のアミド化、アシル化又は約１〜７個
、より普通には約１〜３個の炭素原子の置換基、非天然
のＤ−立体異性体の追加のアミノ酸、等による末端アミ
ノ基のアルキル化により変性され得る。

本発明の組成物は、従来の技法に従って、合成により容
易に調製され得る。自動合成機が利用でき、その結果、
オリゴペプチドは市販の合成機で容易に調製され得る。

個々のアミノ酸の活性化された誘導体は、Ｍｅｒｒｉｆ
　１ｅｌｄの方法を用いての既知の技法に従って調製さ
れ、そして連続的に付加される。それぞれの側の官能基
は、酸素基及び硫黄側基のためにはアラルキル基及びア
ミン側基のだ約にはアシル基を用いて保護される。オリ
ゴペプチドの合成の記載のためには、ＷＯ３４１０３５
０６及びＷＯ３４１０３５６４を参照のこと。これらは
、引用により本明細書に組込まれている。ペプチドは、
天然のまま使用され又は既知の方法を用いて、まず精製
され得る。

本発明のポリペプチドは、特定の配列又は関連する配列
のグループに対してひじょうに特異的であるモノクロー
ナル抗体を生成するために使用され得る。たとえば、異
なった配列と交叉反応し、又は特定の配列に対して特異
的である（ここで前記配列は１又は２個のアミノ酸によ
ってのみ異なる）モノクローナル抗体が調製され得る。

従って、そのモノクローナル抗体は、Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−
Ｐ特色を共有するリンパ栄養性又は他のウィルスのグル
ープのいづれか１種の存在を検出することができる。

そのモノクローナル抗体は、［Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ特色
を共有する１又は複数のレトロウィルスのｇａｇ配列に
結合しながら、ＣＤ５への結合を排除するために調製さ
れ得る。

ヒトＣＤ５とレトロウィルスのｇａｇ配列（ｐ１５）と
の間のεＰＴＡＰについての相同性が、次の表に示され
る。

タンパク質 ＣＤ５ ＨＴＬＶ−ＩＩＩ　（ＢＨＩＯ） ＨＴＬＶ−１ｍ　（ＢＨＩＯ） ＡＶ−１ａ ＲＶ−２ ＨＩＶ−２（ＲＯＤ） ＩＶ ＨＴＬＶ−１ ２３ 配　　　列 ＰＢＰＴＡＰＰＲＬＯ Ｐ［ＥＰＴＡＰＰＦＬ口 ＰＥＰＴＡＰＰＥＥＳ ＰＥＰＴＡＰＰＥＥＳＦ ＰＩＥＰＴＡＰＰＥＥＳＦ しＴＰＴＡＰＰＶＤＰＡ ＬＴＰＴＡＰＰ［ＥＥＰＡ ＥＰＴＡＰＱＶＬ さらに、）ＩＴＬＶ−ＩＩＩは、ｐ１５における配列の
反復体を有し、次のものがそのＣ−末端配列である：Ｑ
ＳＲＰＥＰＴＡＰＰＦＬＱＳＲＰＢＰＴＡＰＰＥＥＳＦ
Ｒ３ＧＶＥＴＴＴＰＰ。

ヒトＣＤ５とレトロウィルスのｇａｇ配列（ｐ１５）と
の間のＴＰ配列についての相同性は、次の通りである： タンパク質　　Ｎ−末端アミノ酸 ＣＤ５　　　　　　　１１５ ＨＩＶ　　　　　　　　４８１ 配　　　列 ＴＴＰＰＴＴＲＰＰＰＴＴＴＰＥＴ ＴＴＰＰ 個々のペプチド又はヘプチドの混合物が、Ｂ−Ｐ−Ｔ−
Ａ−Ｐ特色を含んで成るオリゴペプチドに特異的に結合
する血清中の抗体の存在を同定するために使用され得る
。従って、ｇａｇタンパク質及びＣＤ５と交叉反応する
抗体の存在を、交叉反応する抗体に結合性を付与するこ
とができる配列、たとえばＰ−Ｂ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ−Ｐ
−Ｉ／Ｖ／Ｌ／Ｍ／Ｑ−Ｌ−Ｑ　（コ、：　テ、イツれ
かのアミノ酸が興味の対象である）の組合せを用いて又
はその配列を同定することによって決定することができ
る。ペプチドの代わりに、１又は複数のへブチドを模倣
する抗イデイオタイプ抗体が使用され得る。

本発明によれば、ヒ）　ＩＪンパ栄養性ウィルス疾患の
診断又は治療に使用され得る組成物が供給される。その
組成物は、診断アッセイに、ウィルスの検出のために又
はウィルスに対する抗体の調製のために使用され得る。

さらに、その組成物は、疾病の処理に、血液に存在する
ＣＤ５又は他の成分との相互作用の調節に及びレトロウ
ィルスのコアータンパク質の調節に使用され得る。

本明細書に引用されるすべての出版物及び特許出願は、
それぞれ個々の出版物又は特許出願が５用により導入さ
れることが特別に及びそれぞれに示されているかのよう
に、引用により本明細書に組込まれる。

前述の発明は、明確に理解するために例示的且つ測的に
いくらか詳細に記載されているけれども、特許請求の範
囲内で修飾及び変更を行なうことができる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ＣＤ５、又はＨＩＶ−１又は−２のｐ１５又はＨＴ
   ＬＶ−１の天然に存在する配列の合計１０個よりも多く
   ないアミノ酸を含み、そして配列Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐを
   含んで成るアミノ酸ポリペプチド。 ２、前記配列がｐ１５のＣ−末端で天然に存在するアミ
   ノ酸の４個までを含んで成る請求項１記載のポリペプチ
   ド。 ３、前記配列がＥ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ−Ｐ−Ｆを含んで成
   る請求項２記載のポリペプチド。４、前記配列がＰ−Ｅ
   −Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ−Ｐ−Ｆ−Ｌ−Ｑ、Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−
   Ｐ−Ｐ−Ｅ−Ｅ−Ｓ、Ｐ−Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ−Ｐ−Ｅ
   −Ｅ−Ｓ又はＰ−Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｏ
   を含んで成る請求項２記載のポリペプチド。 ５、請求項１記載のポリペプチド、及びＴ及びＰの交互
   のタブレット又はトリプレットを含んで成る５〜１６個
   のアミノ酸の第２ポリペプチドを含んで成るポリペプチ
   ド組成物。６、前記第２ポリペプチドが式Ｔ−Ｔ−Ｔ−
   Ｐ−Ｐを有する請求項５記載のポリペプチド組成物。 ７、ＨＩＶ−１又は−２のｐ１５の天然に存在する配列
   の合計１０個よりも多くないアミノ酸を含み、そして配
   列Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐを含んで成るアミノ酸ポリペプチ
   ドに対して特異的に結合するモノクローナル抗体。 ８、前記抗体が、配列Ｐ−Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ−Ｐ−Ｆ
   −Ｌ−Ｑ、Ｐ−Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ−Ｐ−Ｅ−Ｅ−Ｓ、
   Ｐ−Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｑ又はＥ−Ｐ−
   Ｔ−Ａ−Ｐ−Ｐ−Ｆ−Ｌ−Ｑのペプチドに特異的に結合
   する請求項７記載の抗体組成物。 ９、Ｔ及びＰの交互のタブレット又はトリプレットを含
   んで成る５〜１６個のアミノ酸の第２ポリペプチドに対
   するモノクローナル抗体をさらに含んで成る請求項７記
   載の抗体組成物。 １０、ＣＤ５、又はＨＩＶ−１又は−２のｐ１５、又は
   ＨＴＬＶ−１の天然に存在する配列の合計１０個よりも
   多くないアミノ酸を含み、そしてＣＤ５以外の化合物又
   はリボソーム又はリンパ栄養性レトロウィルスのカプシ
   ドタンパク質に共有結合される配列Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ
   を含んで成るアミノ酸ポリペプチドを含んで成る免疫原
   。 １１、体液中のヒトリンパ栄養性レトロウィルスの存在
   を検出するための方法であって、ＨＩＶ−１又は−２、
   又はＨＴＬＶ−１のｐ１５カプシドタンパク質の天然に
   存在する配列の合計１０個よりも多くないアミノ酸を含
   み、そしてＨＩＶ−１又は−２のｐ１５、又はＨＴＬＶ
   −１の天然に存在する配列の合計９個よりも多くないア
   ミノ酸を含み、そして配列Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐを含んで
   成るアミノ酸ポリペプチドに対して特異的に結合する配
   列Ｅ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ又はモノクローナル抗体（該抗体
   はＥ−Ｐ−Ｔ−Ａ−Ｐ−Ｐ−Ｒ−Ｌ−Ｑを含んで成る配
   列のための親和性よりも少なくとも１０大きな前記ポリ
   ペプチドのための親和性を有する）を含んで成る少なく
   とも１つのポリペプチドを使用することを含んで成る方
   法。