JPH03128391A - 新規オリゴリボヌクレオチド誘導体及び抗ウイルス剤への使用 - Google Patents

新規オリゴリボヌクレオチド誘導体及び抗ウイルス剤への使用

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JPH03128391A
JPH03128391A JP1064058A JP6405889A JPH03128391A JP H03128391 A JPH03128391 A JP H03128391A JP 1064058 A JP1064058 A JP 1064058A JP 6405889 A JP6405889 A JP 6405889A JP H03128391 A JPH03128391 A JP H03128391A
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秀喜 中島
Naoki Yamamoto
直樹 山本
Sachiko Mukai
向井　佐知子
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産粟上■Ｕ分顆 本発明は、ＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）の原因ウ
ィルスであるＡＩＤＳウィルス（ＨＩ　Ｖ−１，ＨＩＶ
−２等）の増殖を阻害することにより無毒化し得る新規
化合物、２′−〇−メチルリボオリゴ叶ヌクレオチドホ
スホロチオエート誘導体、２′−〇−メチルリポオリゴ
ヌクレオチド誘導体、それらの新規製造中間体、オリゴ
リボヌクレオチド誘導体及びそれら誘導体の用途に関し
、医薬品、例えば抗ＡＩＤＳ薬等抗ウィルス剤への使用
に関する。
盗】団バ支直 ＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）は、１９８１年に発
見されたが、その原因がレトロウィルス科に属するＨ　
Ｉ　Ｖ　（ｈｕｍａｎ　ｉｍｎ＋ｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅ
ｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ。
以下ＡＩＤＳウィルスと略す。）によることが明かとな
った。その愚者数は世界各国で年々増加し、Ｗ）１０の
報告では１９８８年８月３１日現在、全世界で１１万人
を越える。一方、日本では９０人の患者が報告されてい
る（１９８８年８月３１日現在）。更に、当該ウィルス
に感染しているが未だＡＩＤＳに至っていない怒染者を
含めるとその数は世界中で１０００万人を越え（ＷＨＯ
推定）、日本では１０４８人である（１９８８年８月３
１日現在、厚生省報告）。この深刻な疾病であるＡＩＤ
Ｓを完全に治癒する薬剤は現在のところ見い出されてい
ない。ＡＩＤＳの病状の進行を遅らせ、患者の臨床徴候
を改善する薬物として３′−デオキシ−３′−アジドチ
ミジンＣ以下ｒＡＺＴ。
と略す。）が臨床的に使用されているが、その有効性と
同時に骨髄障害等の副作用が報告されている（Ｔｈｅ　
Ｎｅｗ　Ｅｎｇｌａｎｄ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅ
ｄｉｃｉｎｅ　３ＪＪ。
１９２−１９７．１９８７年参照）。ＡＺＴの作用機作
は、レトロウィルスが宿主細胞内に侵入後、自己の遺伝
子ＲＮＡをＤＮＡへと転写するのに利用するウィルス自
身の保有する逆転写酵素の活性を阻害する為（Ｍｉｔｓ
ｕｙａ、　Ｈ，，ｅｔ　ａｌ、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ
、　Ａｃａｄ。
Ｓｃｉ、　ＬＩＳＡ、　ｆ４７０９６−７１００．１９
８５年参照。）、副作用発現に関連している可能性があ
る。
一方、最近デオキシオリゴヌクレオチドのホスホロチオ
エート誘導体が抗ＡＩＤＳウィルス活性を有することが
報告されている（Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ。
Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、ＵＳＡ　　８４．７７０６−７７
１０．１９８７年参照。）が実用化されていない。
■　｛”′　しよ゛と　る１１Ｎ ＡＩＤＳウィルスはその表面タンパク質における株間で
の極めて高頻度の変異が生じるため、有効なワクチンの
開発が著しく困難であり、前述のような化学療法剤に期
待されるところが大きい。
しかし、これまでの化学療法剤としてＡＺＴのようなヌ
クレオシド誘導体は抗ＡＩＤＳウィルス活性を有しなが
ら、一方で深刻な副作用も認められている。従って、副
作用が少なくて実用性の高い薬剤の開発が望まれている
。又、その目的を達成する為、デオキシオリゴヌクレオ
チドホスホロチオエート誘導体が基礎的研究の段階で期
待されているが、それよりも一段と作用が強く、しかも
安価で得られる薬剤の開発が望まれている。
１西を”゜　るための 本発明者らは上記の課題を解決すべく鋭意研究を重ねた
結果、新規に製造した２′−〇−メチルリポオリゴヌク
レオチド誘導体及びオリゴリボヌクレオチド誘導体が宿
主細胞へのＡＩＤＳウィルスの感染・増殖を阻害し、Ａ
ＩＤＳ治療薬として使用できることを見い出し、この発
見に暴き本発明を完成するに到った。
即ち、本発明は、下記一般式ので示される新規オリゴリ
ボヌクレオチド誘導体及びこれを有効成分として含有す
る抗ＡＩＤＳウィルス剤、ＡＩＤＳつ４ルｘ　（ＨＩ　
Ｖ−１，ＨＩ　Ｖ−２等）の遺伝子、ＲＮＡ又は染色体
に組み込まれたＤＮＡに相補的な配列を有し、下記一般
式■で示される新規２′−〇−メチルリポオリゴヌクレ
オチドホスホ　一口チオエート誘導体及びこれを有効成
分として含有する抗ＡＩＤＳウィルス剤、下記−般弐〇
で示される新規２″−〇−メチルリボオリゴヌクレオ千
ド誘導体及びこれを有効成分として含有する抗ＡＩＤＳ
ウイ゛ルス剤、下記一般式■で示される新規オリゴリボ
ヌクレオチド誘導体及びこれを有効成分として含有する
抗ＡＩＤＳウィルス剤及びそれら誘導体の製造原料に供
することができる下記一般式■及び■で示される新規２
′−〇−メチルリポヌクレオシド誘導体及び新規ヌクレ
オシド誘導体である。
試下余白 ：Ｚ 一般式の Ｂ。
い・　、７ Ｘ３・　ｚ７ 前記式中、ｍは１−１００の整数（ただしｘ　　及びＸ
がすべて２′位に置換されしかも水素原子を表わす場合
は、ｍは４〜５０の整数）を、Ｂ＝Ｂｚ　、　　Ｂ：ｔ
−・・Ｂ（１１１＋１）で、８１〜Ｂｔｓ＊ｚ）は相互
に同−又は異なり、それぞれピポキサンチン−ターイル
、グアニン−９−イル、アデニン−９−イル、シトシン
−ニーイル、ウラシル−ニーイル、チミン−ｌ−イルの
いずれかを（ただし、Ｘ１及びすべてのＸが３′位に置
換されしかも水素原子を表わす場合は、すべてがアデニ
ン−９−イ′ルを表わすことは無い。）　、Ｑ＝Ｑ２．
Ｑ３＝−Ｑ（−１）でｓ　Ｑ　Ａ′Ｑ（―◆重）は相互
に同−又番よ異なりそれぞれチオアニオン、オキソアニ
オン、アルキル基、アリールオキシ基、アルキルアミノ
基、アリールアミノ基、アルキルチオ基及びアリールチ
オ基のいずれかを（ただし、Ｑ　Ｉ−Ｑ　（ＩＩＩ　Ｉ
　Ｉ　）の少なくとも一つはチオアニオンを表わす。）
。Ｘ＝Ｘ、。
Ｘ、・−・Ｘ（＠＋１）でＸ−Ｘ（ｍ、。）はそれぞれ
相互に同−又は異なり水素原子、メチル基又は炭素数１
〜２０のカルボキシル基を、Ｒは水素原子、炭素数１〜
２０のアシル基、置換基を有していてもよいホスホリル
基、置換基を有していてもよいチオホスホリル基又は置
換基を有していてもよいアルキルアミノホスホリル基の
いずれかを、Ｙ及びＹ２は相互に同−又は異なり、それ
ぞれメトキシ基、炭素数１〜２−０のカルボキシル基、
水素原子、ヒドロキシル基、置換基を有していてもよい
アルキルオキシ基、置換基を有していてもよいホスホリ
ルオキシ基、置換基を有していてもよいチオホスホリル
オキシ基及び置換基を有していてもよいアルキルアミノ
ホスホリルオキシ基をそれぞれ表わす。ここでアルキル
は炭素数１〜３０の直鎖状又は分岐鎖状の炭化水素残基
を、アリールはフェニル基を含む炭素数１〜３０の炭化
水素残基をそれぞれ表わす。
前記式■においてヌクレオシド単量体の糖部２′位及び
３′位の酸素原子のいずれか一方にＸは結合することが
でき、その場合他方がリン原子（Ｐ）と結合しているこ
とを表わす、その単量体の糖部での結合様式は２″−５
″結合でも３’−５’結合のいずれでもよく、またオリ
ゴリボヌクレオチド中にその両方の結合様式を有してい
てもよい。
又、前記式■において、ＲおよびＹ＊　、Ｙｚにおける
置換基としては、相互に同−又は異なり、シアノエチル
基、クロロフェニル基、モノホスホリル基、ピロホスホ
リル基、炭素数１〜２０の炭化水素残基、コレステリル
基及び基Ｊ−（Ｋ−ｏ−Ｌ）　！−力例丁される　ｒ；
ｒ、：ｔ、、ａ、、：九土工τ１２乎に１６ヒドロキシ
ル基又は一般式■で示される誘導体のスホリル基、チオ
ホスホリル基、炭素数１−１０のアルキルアミノホスホ
リル基のいずれかを、Ｌは炭素数１〜２０の炭化水素残
基を、Ｅは１〜１０の整数をそれぞれ表わす。又、塩基
配列はＡＩＤＳウィルスの遺伝子ＲＮＡ又は染色体に組
み込まれたＤＮＡの配列に必らずしも相補的で無くても
よい。− 前記式において、Ｂ　Ｉ−Ｂ　（ｍ＋Ｚ）　ｓ　Ｑ〜導 Ｑ　（ａｌｌ）及びＸ、〜Ｘ（，。。５′側から１．２
゜３．４・・・（ｍ＋　１　）の順で示される。例えば
ｍが２のときＢ　１−８　（１１１１２）は５′側から
順にＢＩ。
Ｂｚ　、Ｂ３．Ｂ４となり、Ｑ　ｌ−Ｑｔ＋ｍ＊＋＞　
は５′側から順にＱ、、Ｑ、、Ｑ、となり、Ｘ、〜Ｘ　
（ｍｓｌ）は５′側から順にＸ、、Ｘ、、Ｘ、となり、
下記構造式を示す。
１２０Ｎて０〕ヌ １、発明の名称＋ 同様に、ｍが１００のときはＢ　Ｉ　−（＋ａ＋Ｚ）は
５′側から順にＢ＋　　Ｂｚ　、　Ｂｘ　”−”Ｂ＋ａ
ｏ　、　ＢＩｏｒ　。
Ｂ１゜２となり、Ｑ　Ｉ−Ｑ　（＠１　Ｇ　１　）は５
′側から順にＱ、、Ｑ、、Ｑ３・・−Ｑ１゜。＋Ｑｔｏ
ｌ　となり、Ｘ。
〜Ｘ（，，，ｌ）は５′側から順にＸｌ、Ｘｚ　、Ｘ３
　””Ｘ　Ｉｏ。、Ｘ。。１となり下記構造式を示す。
〉シ炉 ￥″） シ２１ツ Ｙｚ　　　　Ｙ＋ 一般式■ “′〜″゛゛」、八　　ｊ゛ ただし、前記式中ｍ′は１〜５０の整数を、８１〜８　
（，，，，，）　は相互に同−又は異なり、アデニン−
９−イル−（Ａ）、グアニン−９−イル−（Ｇ）、シト
シン−ｌ−イル−（Ｃ）、ウラシル−ｌ−イル−（Ｕ）
、チミン−１−イル−（Ｔ）及びヒポキサンチン−９−
イル−（Ｈ）のいずれかを、ＱＩ′はチオアニオン（Ｓ
θ）、オキソアニオン（０６’）　、アルキル基、アル
キルオキシ基、アリルオキシ基、アルキルアミノ基、ア
リールアミノ基、アルキルチオ基及びアリールチオ基の
いずれかを、ＱＺ’からＱ　’　（，＊ｌ；は少なくと
も一つがチオアニオン（Ｓｅ）であり、かつ残りがチオ
アニオン（Ｓｅ）又はオキソアニオン（０θ）のいずれ
かをＹｌ’〜Ｙ３’は相互に同−又は異なり、メトキシ
基、置換基を有していてもよいアルキルオキシ基、ヒド
ロキシル基、アルキルシリル基及び水素原子のいずれか
を、Ｒ′は水素原子又は置換基を有していてもよいホス
ホリル基又はチオホスホリル基を、それぞれ表わす、こ
こでアルキルは炭素数１〜３０の直鎖状又は分岐鎖状の
炭化水素残基を、アリール基はフェニル基を含む炭素数
１〜３０の炭化水素残基をそれぞれ表わす。
前記置換基としては、シアノエチル基、クロロフェニル
基及び炭素数１−１０の炭化水素残基が例示される。
前記式において、Ｂ′及びＱ′は５′側から１゜２．３
．４・・・（ｍ’　＋２）の順序で示される。例えば、
ｍ′が２のときＢ　’　１−　（（４１）は５′側から
順に８２’　、　　Ｂ：ｌ’となり、Ｑ′２〜．イ、、
）は５′側から順にＱｚ’　　Ｑ３’となり、下記の構
造を示す。
”ハ　ア 同様に、ｍ′が５０のときはＢ’　！　−（ａｒ４１）
は５′側から順にＢｚ’　、　　Ｂ：ｌ’　、　　Ｂａ
″＋＋＋　Ｂ　、　。’。
ＢＳＩ’となり、Ｑ′２〜（ｍｏｌ）は５′側から順に
Ｑｚ’　、　　Ｑｘ’　＋　　Ｑａ’　−・−Ｑｓ＋ｅ
’　ａ　　Ｑｓ＋’となり、下記の構造を示す。
Ｒ’ＯＡ２０．　 ８　′ １ｚ−Ｙ３” 一般式二〇 呵　７ Ｑ＃ ただし、前記式中ｍ″′は１〜５０の整数を、Ｂ、″〜
Ｂ″（（＋２）は相互に同−又は異なり、それぞれアデ
ニン−９−イル−（Ａ）、グアニン−９−イル−（Ｇ）
、シトシン−ｌ−イル−（０）、ウラシル−ｌ−イル−
（Ｕ）、チミン−■−イル−（Ｔ）及びヒポキサンチン
−９−イル−（Ｈ）のいずれかを、Ｑ＃は少なくとも１
つのチオアニオンを含み、チオアニオン（Ｓｅ）、オキ
ソアニオン（０θ）、アルキル基、アルキルオキシ基、
アリルオキシ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基
、アルキルチオ基及びアリールチオ基のいずれかを、Ｙ
、″〜Ｙ１″は相互に同−又は異なり、メトキシ基、置
換基を有していてもよいアルキルオキシ基、ヒドロキシ
ル基、アルキルシリル基及び水素原子のいずれかを、Ｒ
″は水素原子又は置換基を有していてもよいホスホリル
基を、それぞれ表わす。
ここでアルキルは炭素数１〜３０の直鎖状又は分岐鎖状
の炭化水素残基を、アリールはフェニル基を含む炭素数
１〜３０の炭化水素残基をそれぞれ表わす。前記置換基
としては、シアノエチル基、クロロフェニル基及び炭素
数１−１０の炭化水素残基が例示される。又、塩基配列
はＡＩＤＳウィルスの遺伝子ＲＮＡ又は染色体に組み込
まれたＤＮＡの配列に必らずしも相補的で無（でよい。
一般式■ １、〃 ＼−“［Ｂ” い・　２１ ゜Ｘ３・　ｚｌ。
前記式中ｍ′は１〜１００の整数（ただしＸ１及びＸ′
のすべてが２′位に置換されしかも水素原子を表わす場
合は、ｍは４〜５０の整数）を、Ｂ〜はＢ！−，Ｂ、−
・・・Ｂ　”　（ｍ−ｅｌ）で、Ｂｌ′〜Ｂ″″（ｅａ
−ａＺ）　のすべてがアデニン−ターイルである場合を
除く。Ｂ１″〜Ｂ″（ｍ−＋１）は相互に同−又は異な
り、それぞれヒボキサンチン−９−イル、グアニン−タ
ーイル、アデニン−ターイル、シトシン−ニーイル、ウ
ラシル−ｌ−イル、チミン−ニーイルのいずれかを表わ
す。Ｑ″はＱｚ”＋Ｑｓ”−・・Ｑ　５１　（ｍ−，，
）　であり、Ｑｒ−〜Ｑ　”　ｔａｒ　０１　）の少な
くとも一つはチオアニオンを表わす。
Ｑど〜Ｑ″（ｍ−，１）はそれぞれ相互に同−又は異な
り、それぞれチオアニオン、オキソアニオン、アリルオ
キシ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、アルキ
ルチオ基及びアリルチオ基のいずれかを表わす。Ｘ′は
Ｘ、’　、Ｘ、’−Ｘ’　、、。。
であり、ＸＩ’〜Ｘ　’　（５−＋１）はそれぞれ相互
に同−又は異なりそれぞれ水素原子又はメチル基を表わ
す（Ｘ、’〜Ｘ’（＠−＄１）のすべてが２′位に置換
されている場合はＸ、′〜Ｘ　’　（ａｒ＋１）のすべ
てがメチル基を表わすことはない。）。Ｒ”は水素原子
、炭素数１〜２０のアシル基、及び置換基を有していて
もよいホスホリル基のいずれかを、Ｙど及びＹ２″は相
互に同−又は異なり、それぞれメトキシ基、炭素数１〜
２０のカルボキシル基、置換基を有していてもよいアル
キルオキシ基、ヒドロキシル基、アルキルシリル基、水
素原子及び置換基を有していてもよいホスホリル基のい
ずれかを、それぞれ表わす、ここでアルキルは炭素数１
〜３０の直Ｓｃｉは分岐鎖状の炭化水素残基をアリール
はフェニル基を含む炭素数１〜３０の炭化水素残基をそ
れぞれ表わす。前記置換基としてはシアノエチル基、ク
ロロフェニル基及び炭素数１〜２０の炭化水素残基が例
示される。
前記式において、ヌクレオシド単量体の糖部２′位及び
３′位の酸素原子は、いずれか一方がＸ′である場合他
方がリン原子（Ｐ）と結合していることを表わす、その
単量体の糖部での結合様式は２’−５’結合でも３’−
５’結合のいずれでもよく、またオリゴリボヌクレオチ
ド中にその両方の結合様式を有していてもよい。
又、塩基配列はＡＩＤＳウィルスの遺伝子ＲＮＡ又は染
色体に組み込まれた配列に必らずしも相補的でなくても
良い。
一般式■ Ｏ＝Ｐ−００ 一般式■ ただし上記一般式〇及び■中、Ｗはモノメトキシトリチ
ル基又はジメトキシトリチル基を、Ｙ４はメトキシ基、
置換基を有していてもよいアルキル基及び水素原子のい
ずれかをｎ及びｔは相互に異なっていてもよ（，１〜３
０の整数を、０はコンドロールドポアガラス誘導体、ポ
リスチレン誘導体及びシリカゲル誘導体のいずれかを、
２は下記構造式のいずれかで示される置換基を、それぞ
れ表わす。
ｆｉ １１　　　　　　　　ｍｌ ン慌ＣＨ″　　ＨＮ））ΔＮ また、アルキルオキシ基のアルキル部分の炭素数は１−
１０であり、置換基を有するアルキルオＣ１２ Ｎ１１２ オリゴデオキシヌクレオチドの抗ウィルス作用は、例え
ばラウス肉腫ウィルスの増殖抑制のように誘導体化せず
に用いた報告があるが（Ｚａａ＋ｅｃｎｉｋ。
Ｐ−Ｃ−Ｐｒｏｃ−Ｎａｔｌ−Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　
ＵＳＡ　７５．２８０−２８４゜１９７８年参照。）一
方で、オリゴデオキシヌクレオチドが哺乳動物細胞の培
養液中及び細胞抽出物中、或いは血清中で速やかに分解
されることが報告されている（％ｉｉｃｋｓｔｒｏｍ、
　Ｅ、Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ
ａｎｄ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ　Ｍｅｔｈｏｄｓ　１
３．９７−１０２．１９８６年参照、）。従って、オリ
ゴデオキシヌクレオチドのより効果的な抗ウィルス作用
を期待するには、それらを分解されないように誘導体化
しておくことが望ましい。例えばオリゴデオキシヌクレ
オチド中のり−ン酸ジエステルをメチルホスホン酸に換
えた誘導体が、単純ヘルペスウィルスｌ型の増殖を阻害
することが報告されているしくＳｍｉｔｈ、　Ｃ，Ｃ。
ｅｔ　ａｌ、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　
Ｓｃｉ、　ＵＳＡ　８３．２７８７−２７９１、１９８
６年参照。）、オリゴデオキシヌクレオチド中のリＲ酸
ｔｎｅｒルをＬ−ホロチオエートに換えた誘導体が安定
性が高まるということが報告されており（Ｓｔｅｉｎｉ
ｎｇ、Ａ、　Ｎｕｃｌｅｉｃａｌｃｉｄｓ　Ｒｅ５−１
６、３２０９−３２２１．１９８８年参Ｓａｎｃｈｅｚ
−Ｐｅｓｃａｄｏｒルスの増殖を阻害することが報告さ
れている（Ｍａｔｓｕｋｕｒａ、　Ｍ、　ｅｔ　ａ１．
ＰｒｏＷａｉｎ−Ｈｏｂｓｏｎ＋ｌＳＳｃｉ−１１５Ａ
、　８４．７７０６−７７１０．１９８７年参照、）。
又、インターフェロンインデューサーである二本鎖ポリ
ＲＮＡにおいてホスホロチオエート誘導体にすることに
より、安定性が高まり牛の水庖性口内炎ウィルス（ｖｅ
ｓｉｃｕｌａｒ　ｓｔｏｍａｔｉｔｉｓ　ｖｉｒｕｓ）
に対する抗ウィルス作用が増強されることが報告されて
いる（Ｄｅ　ＣｌｅｒｃＱｔ　Ｅ−ｅｔ　ａｌ、　　Ｖ
ｉｒｏｌｏｇｙ　４２ｒ４２１−４２８．１９７０年参
照。）。
一方、２′−〇−メチルリボオリゴヌクレオチドはＲＮ
Ａの糖部分の２′位水酸基がメチル化されたものであり
、それによりＤＮＡ、ＲＮＡを分解する種々の酵素（ヌ
クレアーゼ）に対し抵抗性を示すという性質が知られて
いる（Ｇｒａｙ、　ＬＨ，ｅｔａｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、
　Ｂｉｏｐｈｙｓ、　Ａｃｔａ　　１３ｉＬ２４３＋　
１９６７年：Ｄｕｎｌａｐ、　Ｂ、Ｅ、　ｅｔ　ａｌ、
　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　１（Ｌ　２５８１−２５
８７、１９７１年。）。又、その相補的配列を有するＲ
ＮＡ鎖と安定な二重鎖を作り、しかもその安定性は同じ
塩基配列のＤＮＡ−ＲＮＡ相補的二本鎖の安定性を有意
に上まわるという性質を有している（Ｉｎｏｕｅ、　Ｈ
，ｅｔ　ａ１．．　Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒｅ
ｓ−１５＋６１３１−６１４８．１９８７年参照。）。
またＲＮＡ分解酵素であるＲＮａｓｅ　Ｎからの分解に
抵抗性を示す性質を利用し、ＲＮＡ鎖の位置特異的切断
に用いられており（Ｉｎｏｕｅ＋　Ｒ，，ｅｔ　ａ１．
．　ＦＩＥＢＳ　Ｌｅｔｔｅｒｓ　２１５３２７−３３
０．１９８７年、参照）、更にＤＮＡ分解酵素Ｂａｌ　
３１ヌクレアーゼに対し、ＤＮＡに比べ有意に抵抗性を
示すという性質を利用し、ＤＮＡの一方向のみの欠失体
の作成に用いられている（　Ｍｕｋａ　ｉ　。
Ｓ−，ｅｔ　ａｌ−Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｓｙ
＋＊ｐｏｓｉｕｍ　Ｓｅｒｉｅｓ　Ｎａ１９、１１７−
１２０．１９８８年参照、）、以上の種々の知見は２′
−〇−メチルリボオリゴヌクレオチドが、その相補的塩
基配列のＲＮＡ鎖と安定な二本鎖を形成するということ
、及びＤＮＡ、ＲＮＡを分解する種々の酵素（ヌクレア
ーゼ）に対し抵抗性を示すという特徴に基づいている。
又、過去に於て、作用機作は明確でないがポリ２′−〇
−メチルリボヌクレオチドがマウスでのレトロウィルス
による癌の進行を阻止するということが報告されている
（Ｔｅｎｎａｎｔ、　Ｒ−Ｗ、　ｅｔ　ａｌ、　Ｐｒｏ
ｃ−Ｍａｉｌ、　Ａｃａｄ−Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、　７１
．３１ロアー３１７Ｌ　Ｌ９７４年、参照。）。
又、２′−〇−メチルリボオリゴヌクレオチドはオリゴ
リボヌクレオチドと同様にデオキシオリゴヌクレオチド
に比べより安価な原料を用いて製造することができる。
ＡＩＤＳウィルスの構造及び性質は最近の研究により、
次のような知見が得られている。即ち、ＡＩＤＳウィル
スは約９０００　Ｍ長の一本鎖ＲＮＡを遺伝子の本体と
するレトロウィルスで逆転写酵素を有する。その遺伝子
の塩基配列（一次構造）は既に報告されている（Ｒａｔ
ｎｅｒ、　Ｌ−，ｅｔ　ａｌ−Ｎａｔｕｒｅ　　３１３
　２７？−２８４，１９８５年　Ｍｕｅｓｉｎｇ、　ｌ
’１．Ａ。
ｅｔ　ａ１．　Ｎａｔｕｒｅ　３１３　４５０−４５８
．１９８５年；　Ｓａｎｃｈｅｚ−Ｐｅｓｃａｄｏｒ、
　　Ｒ，，ｅｔ　ａｌ−Ｓｃｉｅｎｃｅ　　２２７　４
８４−４９２＋１９８５年；　Ｗａｉｎ−Ｈｏｂｓｏｎ
、　Ｓ、、　ｅｔ　ａｌ−Ｃｅｌｌ観、９−１７、１９
８５年、参照）。感染標的細胞はヒトリンパ球のうち膜
抗原としてＴ４（モノクローナル抗体で検出される抗原
）陽性である主としてヘルパー／インデユーサー細胞で
あり、感染後これらの細胞変性効果を起こし破壊する。
細胞への吸着・侵入後のウィルスは、自己の有する逆転
写酵素によって、ｔＲＮＡ””をプライマーとして利用
し直鎖状二本鎖ウィルスＤＮＡへと変化し、核内に移行
して現状構造をとり、宿主細胞染色体ＤＮＡへと組み込
まれプロウィルスとなる。プロウィルスからの転写は宿
主細胞のメツセンジャーＲＮＡ　（以下、ｒｍＲＮＡ」
と略す。）と同様に細胞由来のＲＮＡポリメラーゼＨに
よりウィルス蛋白質へと翻訳される。この過程は、ウィ
ルス自身にコードされている少なくとも２つの遺伝子産
物、即ちｔａｔ（ｔｒａｎｓａｃｔｉｖａｔｏｒ）及び
ｒ　ｅ　ｖ　（ｒｅｇｕｌ？Ｆ　ｏｆｅｘｐｒｅｓｓｉ
ｏｎ　ｏｆ　ｖｉｒｉｏｎ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ）により
調節されている。ｔａｔは、ウィルスの転写活性増強因
子として転写開始点直後のＴＡＲエレメント（ｔｒａｎ
ｓａｃｔｉｎｇ　ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ　ｅｌｅｓ＋ｅ
ｎｔ）と呼ばれる領域に働きかける（Ｒｏｓｅｎ、　Ｃ
，Ａ−，ｅｔ　ａ１．．　Ｃｅｌ１４１、８１３−８２
３．１９８５年、参照。）。転写されたウィルスＲＮＡ
は、一部はウィルス粒子中に取り込まれるゲノムＲＮＡ
となり、一部は遺伝子を発現するｍＲＮＡとして利用さ
れる。ｍＲＮＡは数種類存在し、ウィルス抗原と逆転写
酵素を発現する全長のＲＮＡと、１回スプライシングを
受けて短くなった表面糖タンパク質を発現するｍＲＮＡ
と、ｔａｔ、ｒｅｖなどの遺伝子を発現するために少な
くとも２回のスプライシングを受けて更に短（なったｍ
ＲＮＡなどである。
本発明は、上述のごとくこれら２′−〇−メチルリボ不
クレオチド及びオリゴリボヌクレオチドの有する利点を
生かし、リン酸部を更に誘導体化し、ＡＩＤＳウィルス
の怒染・増殖を阻害することに成功した。しかもその阻
害効果はオリゴマー中の単量体の結合様式が２’−５’
結合、３′−５′結合のいずれでもよく、即ち３′−〇
−メチルヌクレオシドをその構成成分としていてもよい
ことが明らかとなった。従ってオリゴマー分子中に２’
−５’結合及び３’−５’結合の両方を有していてもよ
く、糖部２′　（又は３′）水酸基はすべて或いは部分
的にメチル化されていても良いし、アシル化されていて
もよい、又、オリゴヌクレオチドの３’、５’両末端の
糖部は一般式■〜■で示したように置換基を有していて
もよい。
上述したように本発明における化合物は、オリゴマー中
のリン酸部分を誘導体化されている。種々の検討を重ね
た結果チオリン酸結合を有する誘導体が特に有効であり
、又、そのチオリン酸結合は、オリゴマー分子中のすべ
てのリン酸ジエステル結合に必要では無いということが
明らかとなった。又、それらの塩基配列がＡＩＤＳウィ
ルスの遺伝子ＲＮＡ又は染色体に組み込まれたＤＮＡの
塩基配列に相補的である場合、及び必らずしも相補的で
無い場合のいずれの場合でもその阻害効果を有すること
が明らかとなった。
本発明において、相補的な配列のオリゴマーは、ウィル
ス遺伝子上で重要な機能を担っている領域を標的とする
ことが好ましい。
例えば、本発明における特許請求の範囲請求項１５記載
の誘導体（化合物■）、請求項１６記載の誘導体（化合
物■）、請求項１７記載の誘導体（化合物■）、請求項
１８記載の誘導体（化合物■）、請求項２１記載の誘導
体（化合物ＸＩ［）は、いずれもウィルス遺伝子ＲＮＡ
又はｍＲＮＡの５３００番目（ｍＲＮＡの転写開始位置
を１番目とする。）以降に存在する５’　ＵＵＵＡＵＣ
ＣＡＵＵＵＵＣＡＧＡＡＵＵＧＧＧＵＣＵ３’なる塩基
配列を有する領域に相補的な配列であり、ｍＲＮＡの１
回目のスプライシングの切断、結合がおこる領域である
。従って、これを妨害することに載の誘導体（化合物Ｘ
）は、ウィルス遺伝子ＲＮＡの逆転写開始領域に存在す
るプライマーｔＲＮＡ結合領域を含む５’　ＣＡＧＵＧ
ＧＣＧＣＣＣＧＡＡＣＡＧＧＧＡＣ３’なる塩基配烈に
相補的である。従ってウィルス遺伝子複製の最初の段階
である逆転写開始の妨害を期待できる。
又、特許請求の範囲請求項２０記載の誘導体（化合物Ｘ
Ｉ）はウィルス遺伝子ＲＮＡ又はｍＲＮＡの５′末端近
傍に存在する５’　ＣＡＧＡＵＣＵＧＡＧＣＣＵＧＧＧ
ＡＧＣＵＣ３’なるｔａｔ産物が働きかけるＴＡＲエレ
メント内の配列に相補的であり、特許請求の範囲請求項
３記載の誘導体（化合物ＸＸ■）はウィルス遺伝子ＲＮ
Ａ上のプライマー結合部位から、下流に存在する塩基配
列に相補的であり、ウィルスの転写、複製を阻害するこ
とが期待できる。特許請求の範囲請求項４記載の誘導体
（化合物ＸＸ■）は、ｇａｇ遺伝子開始コドンすぐ上流
の塩基配列に相補的であり、特許請求の範囲請求項５記
載の＠導体（化合物ＸＸＩＫ）は、ｇａｇ遺伝子内の塩
基配列に相補的であり、ｇａｇ蛋白質翻訳の阻害が期待
できる。
これらはいずれも強い抗ＡＩＤＳウィルス作用を示すこ
とが判明した。ただし、それらの作用メカニズムの詳細
についての実証はされていない。
一方、オリゴデオキシヌクレオチド誘導体を用いた抗Ａ
ＩＤＳウィルス作用として、文献（Ｍａｔｓｕｋｕｒａ
、　Ｍ、、　ｅＬ　ＦｒｏｅＰｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　
Ａｃａｄ−Ｓｃｉ−ＵＳＡ、　８４．７７０６−７７１
０．１９８７年；　Ａｇｒａｗａｌ、　Ｓ−＋ｅｔ　ａ
ｌ　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ−Ｓｃｉ−［Ｊ
ＳＡ＋　８５．７７０９−７０８３．１９８８年参照）
に記載されているように、ＡＩＤＳウィルス遺伝子ＲＮ
Ａ又は染色体に組み込まれたＤＮＡの塩基配列に相補的
で無いオリゴデオキシヌクレオチド誘導体も相補的な誘
導体と同様に抗ＡＩＤＳウィルス作用を有することが報
原料を用いて製造することができる本発明における一般
式■■及び■で示される化合物はＡＩＤＳウィルスＨｅ
ｉｋｋｉｌａ染色体に組み込まれた塩基配ＡｃｔａＣｈ
ｅｗ補的Ｓｃａｎｄ抗ＡＩＤＳウィルス作用を示す。例
えば一般式■ｕｅされる化合物のうち特許請求の範囲請
求項６記載の誘導体Ｒｅｓｅａｒｃｈ　、請求項７記載
の誘導体（化合物ＸＸＸ　Ｉ　）　、請求項８記載の誘
導体（化合物ＸＸＸＩｎ）　、請求項９記載の誘導体（
化合物ＸＦｒｏｅｈｌｅｒ求項１０記載の誘導体（化合
物ＸＸＸＩＶ）　、請求項１１記載の誘導体（化合物Ｘ
　Ｘ　Ｘ　Ｖ　）及び請求項１２Ｇａｒｅｇｇ（化合物
ＸＸＸＶｒ）は相補的な配列では無いが強い抗ＡＩＤＳ
ウィルス作用を示すことが判明した。又、一般式■で示
される化合物のうち、例えば、特許請求の範囲請求項２
５記載の誘導体（化合物ＸＶ）、請求項２６記載の誘導
体（化合物ＸＶＩ）　、請求項２７記載の誘導体（化合
物Ｘ■）及び請求項２８記載の誘導体（化合物Ｘ■）や
、一般式■で示される化合物のうち、例えば特許請求の
範囲請求項３１記載の誘導体（化合物ＸＸＩ）　、請求
項３２記載の誘導体（化合物ＸＸＩＶ）　、請求項３３
記載の誘導体（化合物ＸＸＶ）及び請求項３４記載の誘
導体（化合物ＸＸＶＩ）も相補的な配列では無いが抗Ａ
ＩＤＳウィルス作用を示すことが判明した。
一方、本発明における化合物は、強いインターフェロン
誘導剤として知られている高分子二本鎖ＲＮＡ（Ｌａｎ
ｐｓｏｎ、　Ｇ−Ｐ、　ｅｔ　ａ１．　Ｐｒｏｃ、　Ｎ
ａｔｌ、　Ａｃａｄ−Ｓｃｉ、　ＵＳＡ＝、　　５８．
７８２．１９６７年；　Ｆｉｅｌｄ、Ａ−に、　ｅｔａ
ｌ　Ｐｒｏｃ−Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ−Ｓｃｉ−ＵＳＡ
、　５Ｌ　ｔｏＯｃ１９６７年参照。）やそれらの誘導
体（口ｅ　Ｃｌｅｒｃｑ。
Ｅ−ｅｔ　ａ１．．　ｖｔｒｏｔｏｇｙ　４２．４２１
−４２８．１９７０年参照。）とは異なりより低分子で
あり、またインターフェロン処理した細胞中に見い出さ
れるタンパク合成阻害物質である、すべてがアデノシン
で構成され、２’−５’結合を有する２’　−５’ｏ１
ｉｇｏ　Ａ　（Ｋｅｒｒ、　１．Ｌ　Ｐｒｏｃ、　Ｎａ
ｔｌ、　Ａｃａｄ−Ｓｃｉ。
ＵＳＡ、　７５．２５６．１９７８年、参照。）やその
誘導体とは明らかに区別される。
本発明のオリゴリボヌクレオチド誘導体は、例えばアミ
ダイト法（Ｍａｔｔｅｕｃｃｉ、　Ｐ１．　Ｄ、　ｅｔ
　ａｌ−Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ、、２２＋
　７１！Ｌ　１９８０年参照。）やＨ−ホスホネート法
（Ｆｒｏｅｈｌｅｒ、　Ｂ、　Ｃ，ｅＬ　ａｌ。
Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｌ　２７＋　４６９＋
　１９８６年；　Ｇａｒｅｇｇ。
Ｐ、Ｊ、、　ｅｔ　ａｌ　Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　ｔ
、ｅｔｔ−１２１４０５５ｍ１９８６年参照。）等の公
知方法により製造することができる。又、２′−〇−メ
チルリボオリゴヌクレオチド誘導体のＨ−ホスホネート
法社よる製造原料に供することができる一般式■で示さ
れる２′−０−メチルリボヌクレオチド誘導体は、公知
方法（Ｒｏｂｉｏｓ、　ＬＪ−，ｅｔ　ａ１．　Ｊ、　
ｅｒｇ、　ＣｈｅＩｌｌ。
３９、１８９１．１９７４年；　Ｈｅｉｋｋｉｌａ、　
Ｊ、、　ｅｔ　ａ１．　ＡｃｔａＣｈｅｗ、　Ｓｃａｎ
ｄ、　８３６　７１５．１９８２年；　Ｉｎｏｕｅ、　
ｎ−ｌｅｔ　ａ１．　Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒ
ｅｓｅａｒｃｈ、　ｌｆ２−．６１３１．１９８７年参
照。）に従い保護された２’　−０−メチルリボヌクレ
オシド誘導体に導いた後、公知方法（Ｆｒｏｅｈｌｅｒ
、　Ｂ、Ｃ。　ｅｔ　ａ１．　Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ
　Ｌｅｔｔｅｒｓ２７、４６９−４７２．１９８６年；
　Ｇａｒｅｇｇ、　Ｐｊ−ｅｔ　ａｌ−Ｔｅｔｒａｈｅ
ｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ　２１４０５１−４０５４．
１９８６年参照。）に従い三塩化リンを用いて製造する
ことができる。この方法により、以下に示す化合物！。
ｎ、ｍ。　■、及びＶを製造した。
ＷＨ−’ｃ４’＞ ど））′” ０ＭＴ０，０．ノ ｏ＝ｐ−ｏθ ■　　　　　　　　　　（化合物層ｌ 〆”Ｆ”ＮＨ ｏ＝ｐ−ｏθ Ｓｏｃ　　　　　　　　（化合物層） ＤＭＴＯ￥０、−ノ ｏ＝Ｏｇｉｌ ｖ ｉｅ　　　　　　　（化合物層） ＬｅｔｔｅｒｓｓＮ１ ０４０　　　　　　　（化合物層） ただし上記式中、ＤＭＴはジメトキシトリチル基を、Ｍ
ＭＴはモノメトキシトリチル基を、それぞれ表わす。
又、一般式〇で示される２′−〇−メチルリボヌクレオ
チド誘導体は、公知方法（ＨａｔＲｏｂｉｎｓｅｔａｌ
、　Ｊ−Ａｍ、　ＣＯｒｇｇ−Ｃｈｅｗ、。　９６．７
３６３．１９７４７４年：Ｓｅｋｉｎｅ、　ＬＪ　ｅｔ
　ａｌ−ａｌｅｔｒａｈｅｄｒｏｎｈｅｗｔｔｅｒｓ、
　ｌｉｓ１０３７−１０４０．１９８８年、参照）によ
り、保護された２′−〇−メチルリボヌクレオシドと亜
リン酸とを、トリイソプロピルベンゼンスルホニルクロ
リドなどの縮合剤や塩化ピバロイルを使用して製造する
こともできる。又、公知方法（Ｒｏｂｉｎｓ、　ＬＪ。
ｅｔ　ａｌ　Ｊ−Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｗ、　３９．１８９
１．１９７４年：Ｈｅｉｋｋｉｌａ、　　Ｊ−ｅｔ　　
ａ１．　　Ａｃｔａ　　Ｃｈｅｗ、　　Ｓｃａｄ−Ｂｉ
！７ＬＬ７１５、１９８２年、参照。）に従い保護され
た３′−０−メチルリボヌクレオシド誘導体を製造し、
これを用いれば上記方法により３′−〇−メチルヌクレ
オシド−Ｈ−ホスホネート誘導体に導（ことができ、一
般式■及び■で示されるオリゴリボヌクレオチド誘導体
の製造原料に供することができる。
一般式■及び■で示されるオリゴリボヌクレオチド誘導
体のうちＸ、〜Ｘ、、ｉ又はＸ、′〜Ｘ　’　（４ｋ　
ｌで示す置換基のすべて或いはいずれかが水素原子であ
る場合、その製造原料としては、例えば公知方法（Ｏｇ
ｉｌｖｉｅ、　Ｋ−に、Ｃａｎ。　Ｊ、　Ｃｈｅｗ、　
５４゜３７９９、１９７３年）に従い容易に製造できる
保護された２′　（又は３　’　）　−０−（ｔｅｒｔ
−ブチルジメチルシリル）リボヌクレオシドが挙げられ
るがこれらは上記同様の方法によりＨ−ホスホネート誘
導体に導くことができる。
一般式■で示される新規ヌ２．しすシト誘Ｈａｒａｄａ
は３Ｓ。デオキシ）ヌクレオシドを用い、例えば公知方
法（Ｍｉｙｏｓｈｉ、　ｆ　ｅｔ　ａｌ、　Ｎｕｃｌｅ
ｉｃＡｃｉｄｓ　Ｒｅｓ、　８．５４９１．１９８０年
参照。）に従って製造することができる。
以上の方法で製造された保護された新規２′−〇−メチ
ルリボヌクレオチド誘導体、保護された３″−〇−メチ
ルリボヌクレオチド誘導体、保護された２′　（又はＧ
ａｒｅｇｇ−ｔｅｒｔ−プチルジメー　チルシリルリボ
ヌクレオチド誘導体及び新規ヌクレオシド誘導体を用い
れば、例えば、公知方法（Ｆｒｏｅｈｌｅｒ、　Ｂ−Ｃ
，ｅｔ　ａｌ−Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒ
ｓ２７、４６９−４７２．１９８６年：　Ｇａｒｅｇｇ
、　Ｐ、Ｊ、　ｅｔ　ａｌ。
Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ　２７．４０
５１−４０５８．１９８６年参照。）に従い２′−〇−
メチルリボオリゴヌクレオチド誘導体及びオリゴリボヌ
クレオチド誘導体を製造することができる。即ち、固相
担体である新規ヌクレオシド誘導体上で、ヌクレオチド
誘導体成分をアシルクロリドを用いて順次縮合し鎖長延
長後、イオウ（Ｓ、）　、よう素（Ｉ２）或はアルキル
アミン／四塩化炭素等の種々の酸化剤を用いて酸化し、
脱保護・精製すれば良い。
又、一般式の一般式〇及び一般式■Ｌｅｔｔ−化合物に
おい７１９．１９８０びＱ”で示される置換基がチオア
ニオン又はチオアニオンとオキソアニオンで選択される
場合、及び一般式〇で示される化合物においては、アミ
ダイト法（Ｍａｔ）ｅｕｃｃｉ。
８．０．　ｅｔ　ａＳｏｃ　Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　
Ｌｅｔｔ−，２２，７１９，１９８０年；Ｓｈｉｂａｈ
ａｒａ、　Ｓ−＋　ｅｔ　ａｌ−，Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａ
ｃｉｄｓ　Ｒｅ５−１５、４４０３．１９８７年；υｓ
ｗａｎ、　Ｎ−ｅｔ　ａｌ−，Ｊ、　Ａｍ。
Ｃｈｅｍ−Ｓｏｃ、　　１０９　７８４５；　１９８７
年、参照。）により製造することもできる。その際、単
量体を縮合後の酸化工程においてイオウ（Ｓ８）或いは
よう素（Ｉ２）で酸化し、鎖長延長後脱保護−精製すれ
ば良い。
又、５′末端に、例えば、アルキル置換チオホスホリル
基やアルキル置換ホスホリル基又はアルキル置換アルキ
ルアミノホスホリル基を有する化合物においては、上述
の方法で固相担体上でオリゴマーの鎖長延長、イオウ（
Ｓ、）或いはよう素（Ｉ２）酸化終了後、アルキル−Ｈ
−ホスホネートを縮合させ、イオウ（ＳＳ）、よう素（
Ｉ２）又はアルキルアミン／四塩化炭素で酸化し脱保護
・精製すればよい、同様に、モノ（モノメトキシトリチ
ル）化されたアルカンジオールのＨ−ホスホネートを縮
合させ酸処理後コレステリル−Ｈ−ホスホネートを縮合
させ酸化、脱保護・精製を行なえば、５′末端にスペー
サーを介してコレステロールが結合した誘導体が得られ
る。
一方、３′末端に、例えばヒドロキシアルキルホスホリ
ルオキシ基やヒドロキシアルキルチオホスホリルオキシ
基を有する化合物であれば、出発物質にアルカンジオー
ルのモノスクシネートを結合した固相担体を用いて上記
同様な方法で縮合、酸化、脱保護・精製を行なうことに
より製造することがてきる。
一方、抗ＡＩＤＳウィルス活性は、文献（Ｈａｒａｄａ
、　Ｓ、、　ｅｔ　ａｌ−，Ｓｃｉｅｎｃｅ　ｕ卸５６
３−５６６＋１９８５年参照。）に記載の方法で、ＡＩ
ＤＳウィルスの分離株であるＨＴＬＶ−ｌｌＬ　　（Ｐ
ｏｐｏｖｉｃ。
Ｌ　ｅｔ　ａｌ−，Ｓｃｉｅｎｃｅ　２２４　４９７−
５００．１９８４年参照、）を用いて行なうことができ
る。この方法は、感染標的細胞としてＨＴＬＶ−Ｉ陽性
Ｔ細胞株であるＭＴ−４細胞を用いるため、ウィルス感
染に対し高い感受性を示し、高率に細胞変性効果が出現
する。この方法を用いて上記化合物■■■Ｄ（，Ｘ、Ｘ
１．ＸＩ［，ＸＶＸＶＩ、Ｘ■、Ｘ■ＸＸＩ及びＸＸＩ
Ｖについて種々の濃度になるように培地で希釈し、細胞
変性抑制効果を調べた。その結果化合物■ではｌＯμＭ
の濃度で、化合物■、Ｘ及びＸ■では１５／／Ｍの濃度
で、化合物■ではｌＩＩＭの濃度で細胞変性抑制効果と
ウィルス抗原陽性細胞の出現抑制効果が認められ、又、
試験最高濃度の１２０．Ｍの濃度においても細胞毒性は
認められなかった。一方、化合物■では２４０μＭの濃
度で細胞変性抑制効果とウィルス抗原陽性細胞の出現抑
制効果が認められ、化合物ＸＩでは３０μＭの濃度で細
胞変性抑制効果が認められ、いずれもこれらの濃度にお
いて細胞に対する毒性は認められなかった。
同様に、化合物ＸＶＩでは１μＭの濃度でそれらの抑制
効果が認められた。一方、化合物ＸＶでは７．５μＭの
濃度で、化合物Ｘ■では１５ａＭの濃度で、化合物Ｘ■
では１２０ｕＭの濃度でそれらの抑制効果が認められ、
いずれの化合物も試験最高濃度（化合物ＸＶ及びＸ■は
６０μＭ、化合物Ｘ■及びＸ■では１２０μＭ）におい
て、細胞に対する毒性は認められなかった。
更に、化合物ＸＸ■は３．８μＭの濃度で細胞変性を、
７．５μＭの濃度でウィルス抗原陽性細胞の出現をそれ
ぞれほぼ完璧に抑制した。一方化合物ＸＸＩＶは７．５
μＭの濃度で細胞変性を、３０７７Ｍの濃度でウィルス
抗原陽性細胞の出現をそれぞれほぼ完璧に抑制した。又
、いずれの化合物とも試験最高濃度（６０１１Ｍ）にお
いて、細胞に対する毒性は認められなかった。
−４，１０７７Ｍの濃度のデオキシオリゴシチジンホス
ホロチオエート（１５ｍｅｒ）や化合物■ＸＩと同じ塩
基配列を有するデオキシオリゴヌクレオチド（リン酸型
）も細胞変性抑制効果基認められなかった。
以上から明らかな如く、本発明による新規２′−〇−メ
チルリポオリゴヌクレオチド誘導体及び新規オリゴリボ
ヌクレオチドｍ４体が抗ＡＩＤＳウィルス作用を有し、
しかも細胞毒性が認められず、抗ＡＩＤＳ薬としての使
用が期待される。
本発明の抗ウィルス剤は、有効成分として０．０１〜２
，０００■好ましくは０．０２〜５００■の範囲で使用
すればよい。
この有効成分は、例えば錠剤、カプセル剤、エリキシル
剤、マイクロカプセル剤あるいは懸濁液剤の形で使用す
ればよい。
本発明の有効成分として使用する化合物は治療や予防を
必要とする患者に対して患者当り０．Ｏｌ〜１　．００
０■の用量範囲で一般に数回に分けて１日当り０．０２
〜２．０００■の全日用量で投与することができる。用
量は病気の重さ、患者の体重および当業者が認める他の
因子によって変化させることができる。
本発明に使用する化合物または生理学的に認められる塩
の化合物または混和物約０．２〜５００■は生理学的に
認められるベヒクル、担体、賦形剤、結合剤、防腐剤、
安定剤、香味剤などとともに一般に認められた製薬実施
に要求される単位用量形態で混和される。これらの組成
物または製剤にお智イ が得られるようにするものである。
錠剤、カプセル剤などに混和することができる具体的な
薬剤は次に示すものである。トラガント、アラビアゴム
、コーンスターチまたはゼラチンのような結合剤：微品
性セルロースのような賦形剤；コーンスターチ、前ゼラ
チン化デンプン、アルギン酸などのような膨化剤；ステ
アリン酸マグネシウムのような潤滑剤；ショ糖、乳糖ま
たはサッカリンのような甘味剤：ペパーミント、アカモ
ノ油またはチェリーのような香味剤、調剤単位形態がカ
プセルである場合には上記のタイプの材料にさらに油脂
のような液状担体を含有することができる。種々の他の
材料は被覆剤としてまた調剤単位の物理的形態を別の方
法で変化させるために存在させることができる。例えば
、錠剤はシェラツク、砂糖またはその両方で被覆するこ
とができる。シロツプまたはエリキシルは活性化合物、
甘味剤としてシ＝Ｉｔ！、防腐剤としてメチルおよびプ
ロピルパラベン、色素およびチェリーまたはオレンジ香
味のような香味剤を含有することができる。
腸溶製剤とするときは、例えばヒドロキシフェニルメチ
ルセルロースの８％水溶液を被覆前処理剤とし、またヒ
ドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの１０％
水溶液およびポリアセチンの３％水溶液を被覆剤とし、
それぞれ使用し常法により腸溶製剤とすればよい。
注射のための無菌組成物は注射用水のようなベヒクル中
の活性物質、ゴマ油、ヤシ油、落花生油、綿実油などの
ような天然産出植物油またはエチルオレエートなどのよ
うな合成脂肪ベヒクルを溶解または懸濁させる通常の製
剤実施に従って処方することができる。緩衝剤、防腐剤
、酸化防止剤などが必要に応じて結合することができる
。
実」１汁 以下、実施例により本発明を具体的に説明する。
実施例１　　Ｎ’−ベンゾイル−５′−〇−ジメトキシ
トリチル−２’　−〇−メチルシチジン−３’　−０−
（Ｈ−ホスホネート）（化合物■）の製造 三塩化リン４３６μｊ！　（５ｍｍｏｆｆｉ）及びＮ−
メチルモルホリン５．５ａｇ　（５０ｍ＋ｗｏｊｌ！）
のジクロルメタン溶液５０ＪＩ１１！に、１．２．４−
　トリアゾール１．１９　フ　ｇ　（１７，３ｍ＋ｎｏ
７！イミダゾール９３０分間攪拌した。この混合液にＮ
４−ベンゾイル−５′−〇−ジメトキシトリチル−２′
−メチルシチジン６６４．７■（１ａ＋ｍｏｊ！）のジ
クロルメタン溶液１７ａｄを１０分間で加えた。室温で
更に２０分間攪拌し、反応の進行をシリカゲル６０を用
いて薄層クロマトグラフィー（移動相ジクロルメタン７
２％トリエチルアミン／８％メタノール）で調べ確認後
、トリエチルアミン−炭酸緩衝液（ＩＭｐＨ７−５）４
０ｍを加えた。水層はジクロルメタン１５１ｄで抽出し
、ジクロルメタン層はあわせて無水硫酸ナトリウムで乾
燥後濃縮乾固した。次に得られた泡状残渣を３７の２％
トリエチルアミンを含むジクロルメタンに溶解させ、２
４ｇのシリカゲル６０を詰めたカラ五にて精製した。即
ち、移動相として、ジクロルメタン７２％トリエチルア
ミン１００ｄ、次いでジクロルメタン７２％トリエチル
アミン７３％メタノール２００ｄ、更にジクロルメタン
７２％トリエチルアミン／６％メタノール２００ａｄ！
で溶出して得られた純粋画分を濃縮乾固した。得られた
残渣を４０ｄのジクロルメタンに溶かし１５ｄ１のＬＭ
）リエチルアミンー炭酸緩衝液（ｐＨ７，５）で洗浄し
た。ジクロルメタン層は無水硫酸ナトリウムで乾燥後濃
縮乾固し、７０３■、０．８４９　ｍｍｏＩｌの化合物
１を８４．９％の収率で得た。
尚、上記同様の操作により、Ｎ＆−ベンゾイル−５’−
０−ジメトキシトリチル−２′−〇−メチルアデノシン
−３’　−０−（Ｈ−ホスホネート）（化合物■）を９
３．９％の収率で、Ｎ２−イソブチリル−５′−〇−モ
ノメトキシトリチル−２′−〇−メチルグアノシン−３
’　−０−（Ｈ−ホスホネート）（化合物■）を４９．
４％の収率で、５′−〇−ジメトキシトリチル−２′−
〇−メチルウリジン−３’　−０−（Ｈ−ホスホネート
）（化合物■）を７７．４％の収率で、５′−〇−ジメ
トキシトリチル−２′−〇−メチルイノシン−３″−〇
−（Ｈ−ホスホネート）（化合物Ｖ）を５６．０％の収
率でそれぞれ得た。次にこれらの”Ｐ−ＮＭＲを測定し
た。但し化合物１．ＩＩ及び■についてはそれらの一部
をジクロルメタンに溶解し、当量の１．８−ジアザビシ
クロ（５，４−０）ウンデス−ツーエン（ＤＢＵと略す
）と混合後ｎ−ヘキサンに滴下しＤＢＵ塩として粉末と
し測定した。一方、化合物■及びＶはそのまま、即ちト
リエチルアミン塩として測定した。測定溶媒にｄＳピリ
ジンを用い、正リン酸のり、Ｏ溶液を外部標準に用い、
そのケミカルシフト（ｐｐｍ）は次のとおりであった。
化合物１　−１．７９ｐｐｍ 化合物１１　−２．２０ｐｐｎ＋ 化合物ｍ　　−２，０４ｐｐｖａ 化合物Ｎ　　−０−７３ｐｐｍ 化合物Ｖ　　−０，４０ｐｐｍ 実施例２５’−０−ジメトキシトリチル−２′−Ｏ−（
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）イノシン−３’　−
０−（Ｈ−ホスホネート）（化合物ＸＸＩ）及び５′−
〇−ジメトキシトリチル−３’　−０−（ｔｅｒｔ−ブ
チルジメチルシリル）イノシン−２’　−０−（Ｈーホ
スホネート）（化合物ＸＸＩＩ）の製造常法により合成
した５′−０−ジメトキシトリチルイノシン２８．５ｇ
　（５０＠ｍｏＩｌ）をピリジン１００ｍに溶解し、こ
れにイミダゾール９．５ｇ（１４０ｍｍ＋ｏｊ！）及び
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン！１９　ｇ　（
６６ａｍｍｏｊ！）を加え室温で攪はんした。５時間後
、反応の進行をシリカゲル６０を用いた薄層クロマトグ
ラフィー（移動相、クロロホルム／メタノール＝１０：
１）で調べた。原料のスポット（訂値０．０８　）が減
少し、新たに５′及び５′−〇−ジメトキシトリチル−
３’　−０−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）イノ
シン（化合物ＸＸ）のスポットがそれぞれＲｆ値０．４
４及び０．３３に出現したのを確認後、氷水冷却下、水
１５０ａｊ！を加えた。ジクロロメタン３５０１１１で
１回、１００ａｄ１で２回抽出し、ジＩＩロメタン層を
　合わせて、水１５０１１１１で２回洗浄後ｔＡ縮した
。得られた油状残渣はトルエンで共沸した後、ジクロロ
メタン５０ａｄ１に溶解し、３′５０ｇのシリカゲル６
０を詰めたカラムにて精製した。即ち、移動相としてア
セトン濃度を２％（Ｖ／Ｖ）から１３％まで段階的に上
昇させたジクロルメタン７１を用い、２％〜５％アセト
ン濃度で溶出した化合物ＸＤ（の純粋画分を集めて濃縮
乾固した（４．０５ｇ。
５−８９＋ａａｏｊ！）、次に、６〜１３％アセトン濃
度で溶出した化合物ＸＩＫ及び化合物ＸＸの混合物を濃
縮乾固し、３５０ｇのシリカゲル６０を詰めたカラムに
て再度精製した。即ち、移動相としてアセトン濃度を１
％（Ｖ／Ｖ）から１２％まで段階的に上昇させたジクロ
ルメタン６ｊ！、次いで酢酸エチル２．ＳＺを使用し、
７％〜１２％アセトン濃度で溶出した化合物ＸＩＸの純
粋画分、酢酸エチルで溶出した化合物ＸＩＸ及び化合物
ＸＸの混合物画分と化合物ＸＸの純粋画分をそれぞれ濃
縮乾固後減圧乾燥した。化合物ＸＩＫの収量は４．３　
ｇ　、　６．２６ＩＩＩｌｏｌで１回目のカラムクロマ
トグラフィーの単離物と合わせて８−３５　ｇ、　１２
．１５　　ｓｉ＋ｏｊ！で２４．３％の収率であった。
化合物ＸＩＸ及び化合物ＸＸの混合物は１．１３　ｇ、
　　１，６５　ｔａｔａｏｌで収率３．３％。
化合物ＸＸは２．６６　ｇ、　３．８８　ｖａｖｌｏｌ
、　？−８％の収率で得られた。
化合物Ｘ　ＩＸ　：　ＦＡＢａ＋ａｓｓスペクトル、　
６８５（Ｍ−Ｈ”）；”ＩＩ−ＮＨＲスペクトル（ＣＤ
Ｃｆｆｉｓ、δｐｐｔａ　）、８−０３（ｓ。
Ｈｓ　　ｏｒ　　Ｉｈ）、　　７．９９（ｓ、１．Ｈｚ
　　ｏｒ　　Ｉｓ）、　　７．４５−６．８０ｍ。
１３、＾ｒ−Ｈ）ｍ　ロー０１（ｄｓｌｓＨｔ’　Ｌ　
４．８９（ＩＩ＊１ｓＬ’　）５４．３３　　（ｓ、１
．Ｈ：ｌ　　’　　）、　　４．２７（＋ａ、１．Ｈａ
’　　）、　　３．７９（ｓ、６゜Ｍｅｏ）＝　　３−
４５（ｍ−２−ｕｓ’　　）−２−７１（ｄ、１−　　
Ｏｉｌｓ’　　）−０，８５（ｓ、９．ｔｅｒｔ−Ｂｕ
−Ｓｉ）、　０．１０（ｓ、３．Ｍｅ−Ｓｉ）。
−０，１２５（ｓ、３Ｊｅ−Ｓｉ）： ＵＶ吸収スペクトル（エタノール）λ■ａｘ＝２４７ｎ
ｓ＋、　　λｍｉｎ＝２２３ｎｍｓ　　　λ２７０ｎｍ
−ｓｈｏｕｌｄｅｒ。
化合物Ｘ　Ｘ　：　ＦＡＢｍａｓｓスペクトル、　６８
５（Ｉ’ｍ−１１つ：’Ｈ−Ｎ１’ｌＲスペクトＪしく
ＣＤＣＩ！ｓ、δＰＰ−）　＋　Ｈ−１１（ｓ。
ＩＩ、　　ｏｒ　　Ｈ，）、　　８．０５（Ｓ、１．Ｈ
！　　ｏｒ　　Ｈ＠）、　　７．４４−６．８０（ｓｉ
。
１３、＾ｒ−Ｈ）、　５Ｊ８（ｄ、１．Ｌ’　）、４−
６２（ＩＩ−１−１ｈ’　）。
４．５０　　（ｍ、１．Ｈｚ’　　）、　　４−１８（
閣−１，１Ｉｎ’　　）−３，７７（５−６゜Ｍｅｏ）
、　　３．３８（−，２，Ｈｓ’　　）、　　３−０７
（ｄ、１．　　ＧＨｚ’　　）−０−８９（ｓ　ｗ　９
　ｓ　ｔｅｒ　ｔ−Ｂｕ　−Ｓ　ｉ　）　ｓ　Ｏ−０９
（ｓ　ｓ　３　ｔ　Ｎｅ−Ｓ　ｔ　）　＋　Ｏ−０２（
ｓ、３．Ｆｌｅ−Ｓｉ）； ＵＶ吸収スペクトル（エタノール）λｍａｘ＝２４７ｏ
ｉｅ、　　　λａｉｎ＝２２３ｎＬ　　　　λ２７０ｎ
ｓ−ｓｈｏｕｌｄｅｒ。
但し、Ｉｎ−ＮＭＲスペクトルにおける糖部プロトンの
同定は、スピンデカップリング法により行った。
測定機器： ＦＡｌｓａｓｓスペクトル：ＪＥＯＬ　Ｊｌ’ｌＳ−Ｄ
Ｘ３００　　（日本電子社製） ”Ｈ−ＮＭＲスペクトル；　Ｖａｒｉａｎ　ＫＬ−３０
，０，３００ＭＨｚＵＶ吸収スペクトル；　ＨｉＬａｃ
ｈｉ　３２０　Ｓｐｅｃｔｒｏ−ｐｂｏｔｏｓｅｔｅｒ 次に、Ｎ−メチルモルホリン１１ｄ（１００ｍａｏｊ！
）及び１．２．４−トリアシーｚし２．３８ｇ（３４５
ｓｔｍｏｊ！）のジクロルメタン溶液に三塩化リン（Ｌ
８７２ｄ（１０閤ｔａｏｌ）を加え室温で３０分間攪は
んした。この混合液に５′−〇−ジメトキシトリチル−
２’　−０−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）イノ
シン（化合物Ｘ■）、１３７゜（２ａ＋ｍｏｊ！）、の
ジクロルメタン−ジメチルホルムアミド（１５：　１．
ｖ／ｖ）溶液３２ｄをＩＯ分間で加えた。室温で更に２
０分間攪はん後、反応の進行をシリカゲル６０を用いた
薄層クロマトグラフィー（移動相、ジクロルメタン７２
％トリエチルアミン７８％メタノール）で調べた。原料
のスポット（Ｒｆ値０．６４　）が消失し、新たに５′
−〇−ジメトキシトリチル−２’　−０−（Ｌｅｒｔ　
−ブチルジメチルシリル）イノシン−３’　−０−（Ｈ
−ホスホネート）（化合物ＸＸＩ）由来のスポットがＲ
ｆ値０．４４に出現したのを確認後、ＩＭトリエチルア
ミン−炭酸緩衝液（ｐＨ７，５）８０ａｄを加えた。水
層はジクロルメタン４０１１１で抽出し、ジクロルメタ
ン層は合わせて無水硫酸ナトリウムで乾燥後濃縮乾固し
た。ここまでの操作を同じスケールで更に−回繰り返し
、両方で得らＲｅｓ状残渣は合わせて、２％トリエチル
アミンを含むジクロルメタン１０Ｊｄに溶解し、４０ｇ
のシリカゲル６０を詰めたカラムにて精製した。即ち移
動相として、ジクロルメタン７２％トリエチルアミン１
５０ｍｆ、ジクロルメタン７２％トリエチルアミン７２
％メタノール２００１ｄ、ジクロルメタン７２％トリエ
チルアミン７４％メタノール２００ｄ、ジクロルメタン
／２％トリエチルアミン７６％メタノール２００ｄ、ジ
クロルメタン／２％トリエチルアミン７８％メタノール
２００ｄ、ジクロルメタン７２％トリエチルアミン／９
％メタノール１００ｄの順に用い、溶出した化合物ＸＸ
（の純粋画分を濃縮乾固した。得られた残渣は５０ｓｓ
のジクロルメタンに溶かし、１Ｍ）リエチルアミンー炭
酸緩衝液（ｐＨ７−５）４０ｍ１で洗浄した。ジクロル
メタン層は無水硫酸ナトリウムで乾燥後Ｎ縮乾固し、３
−０　ｇ、　−３−５３ｍｍｏｆｆｉの化合物ＸＸＩを
８８％の収率で得た。
尚、上記同様の操作により、５′−〇−ジメトキシトリ
チル−３’　　Ｏ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）
イノシン−２’　−０−（Ｈ−ホスホネート）（化合物
ＸＸＩＩ）を７２．５％の収率で単離した。
化合物Ｘ　ＸロＩホルム７０ＦＡＢｍａｓｓスペクトル
　７４９（Ｍ−Ｈ”）；”Ｐ’ＮＭＲスペクトル、（ｄ
５−ピリジン、δｐｐｆｌｌ。
外部標準５％Ｉｆ２ＰＯ４Ｉｎ　０２０）　−１−４６
９１’ＪＰ−１１＝６０８−７Ｈｚ、　３Ｊ　ｒ−ｎ　
＝１０−２Ｈｚ；’ＩＩ−ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣｊ
！：＋−δｐｐｍ）、８−４０（ｓ、Ｈａｏｒ　Ｈｇ）
、　８．００（ｓ、１．ｌｈ　ｏｒ　ｌｉｔ）、　７−
４４−７．１８（ｍ、１３゜Ａｒ−Ｈ）、　７．０７（
ｄ、ｌ、Ｐ−Ｈ，Ｊ＝６２５Ｈｚ）、　ロー３２（ｄ、
１．Ｈ＋’　）。
４．８２（ｍ、１．Ｈｚ’　）、　４−８５（ｍ、１．
Ｉ１．Ｊ’　）、　４．４６（ｍ、ｌ。
１４’　）、　３−７８（ｓ、６．ｔｌｅＯ）、　３．
４７（＋ａ、２．　ＩＩｓ’　）、　０−７２（ｓ、９
．ｔｅｒｔ−Ｂｕ−Ｓｉ）、　０．０１（ｓ、３．Ｍｅ
−Ｓｉ）、　−０，２１（ｓ、３゜Ｍｅ−Ｓｉ）。
化合物Ｘ　Ｘ　ＩＩ　：　ＦＡＢｍａｓｓスペクトル　
７４９（Ｍ−Ｈ”）　：”Ｐ−ＮＨＲスペクトル　（ａ
Ｓ−ピリジン、δｐｆ’ｏｌ＋外部標準５％Ｈ，ＰＯ４
ｉｎ　ＤｚＯ）　−１−８５８１”ＪＰ−ｌｌ　＝６１
２−８Ｈｚ、　　”ＪＰ−Ｍ　＝１０．７Ｈｚ；’Ｈ−
ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣＩ！ｉ、δｐｐｍ＋）、　７
．９８（ｓ、Ｈａｏｒ　Ｈｚ）、　７−９３（ｓ、１．
Ｈｚ　Ｏｒ　Ｈｓ）、　７−４１−６−７７（ａ＋、１
３゜Ａｒ−Ｈ）＝　６．９５（ｄ、１．Ｐ−Ｈ−Ｊ＝６
３４１１ｚ）−ロー２３（ｄ、１．Ｉｔ’　）。
５−３１（■、１．　　Ｈｚ’　）、４−５０（ｍ、１
．Ｈｉ’　）、４．２３（ｍ、１゜Ｈ４’　）、　３−
７６（ｓ、６．１’ｌｅＯ）、　３−３１（ｍ、２．　
　Ｈｓ’　）、　０−８６（ｓ、９．ｔｅｒｔ−ｎｕ−
Ｓｉ）、　０．１４（ｓ、３．Ｍｅ−Ｓｉ）、　０−０
３（ｓ、３゜Ｍｅ−Ｓｉ）。
実施例３５’−０−モノメトキシトリチル−Ｎｚ−イソ
ブチリル−３′−〇−メチルグアノシン結合コンドロー
ルドボアガラスの製造 常法に従い合成した５′−〇−モノメトキシトリチル−
Ｎ！−イソブチリル−３′−〇−メチルグアノシンを公
知方法（１１ｉｙｏｓｈｉ、に＋１　ｅｔ　ａｌ−Ｎｕ
ｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓ、　ｊ３．５４９１．
１９８０年参照。）に従い、２′−〇−スクシニル−ペ
ンタクロロフェニルエステル体さと導いた。即ち、５’
　−０−モノメトキシトリチル−Ｎ２−イソブチリル−
３′−メチルグアノシン６３９■（１ｍｍｏｆ）と４−
Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰと略す、）
１８３■を無水ピリジン４１１１に溶かし、室温で攪拌
しながら無水こはく酸１５０■（１５ｍｍｏｌ　）を加
え９０分間攪拌後、反応液を減圧留去した。
得られた油状残渣をクロロホルム３５１１１１に溶解し
、Ｏ，１Ｍトリエチルアミン炭酸緩衝液（ｐＨ７，５）
３０ＩＩＪ１で３回洗浄した。クロロホルム層は無水硫
酸ナトリウムで乾燥させた後、減圧濃縮乾固した。
得られた残渣をＤＭＦ５ａｄ！に溶解し、ペンタクロロ
フェノール４００■（１，５ｍｍｏＩ！）及びジシクロ
へキシルカルボジイミド３０９■（１，５ｍｍｏｆ　）
を加え室温で１３．５時間攪拌した。析出した不溶物を
濾過して除き、濾液は減圧留去した。得られた残渣をク
ロロホルム３ａｄ１に溶かし、２０ｇのシリカゲル６０
を詰めたカラムクロマトグラフィーにて精製した。即ち
、移動相としてクロロホルム１００ｄ、次いでクロロホ
ルム７０．３％メタノール１００ｍ、クロロホルム１０
，５％メタノール１００ｆｆｉ１！、更にクロロホルム
１０．６％メタノール１００ｄの順に用いて溶出された
５′−〇−モノメトキシトリチル−Ｎ２−イソブチリル
−３′−〇−メチルグアノシン−２′−〇−スクシニノ
レーペンタクロロフェニルエステルの純粋画分を集めて
減圧濃縮乾固し、５３０■、５３．６％の収率で得た（
シリカゲル６０薄層クロマトグラフィーにてクロロホル
ム：メタノール＝２０：１で展開しＲｆ値０．７３゜）
。次にこれを全量（５３０■）５、４　ｄｉｔＭＦに溶
かしておき、一方で、コンドロールドポアガラス（ＣＩ
Ｉ／ｌＩｌｇ　ｃｈａｉｎ　ａｌｋｙｌａａ＋ｉｎｅ＋
Ｐｏｒｅ　　Ｄｉａ−５００人、　　Ｐａｒｔｉｃｌｅ
　　Ｓｉｚｅ　　１２２−１７７　　ａｓＮＨｚ　−＝
　３０１１ｍ０１　／　ｇ　、　Ｐｉｅｒｃｓ　Ｃｈｅ
ｍｉｃａｌ社製）１ｇをグラスフィルター付き反応容器
にＳれｌａｄ！のＤＭＦで洗浄後、アルゴンガス気流中
で１分間乾燥させた。これに上記ペンタクロロフェニル
エステル化のＤＭＦ溶液５−４　ａｌｌ及びトリエチル
アミン７３μ２をそれぞれ加え密栓後、３０”Ｃで一晩
反応させた。反応液はアルゴン圧により濾去し、コント
ロールトポアグラスは５ｄのＤＭＦで３回、次イテ５Ｉ
ｌｄ！のＴＨＦで３回洗浄後、アルゴン気流中で１分間
乾燥させた。次にＤＭＡＰ４１０■、２．６−ルチジン
１．４ｇ、無水酢酸６６０．ｗｆｆｉ、ＴＨＦ６ｍの混
合液を加え３０℃で１５分間振とうし未反応のフミン基
をアセチル化した。反応液は濾去後５ａｄ！のＴＨＦで
３回、次いで５ＪＩ１１！のジエチルエーテルで３回洗
浄後アルゴン気流中で乾燥し　た。得られた５′−〇−
モノメトキシトリチル−ｐＪ２−イソブチリル−３′−
〇−メチルグアノシン結合コンドロールドポアガラス１
ｇを、少量秤り取り、３％トリクロロ酢酸でモノメトキ
シトリチル基を切断後遊離したトリタノールを過塩素酸
−エタノール混合液で発色定量を行なった結果、結合量
は２６μｍａｌ／ｇであった。
尚、上記と同様の操作で５′−〇−ジメトキシトリチル
−Ｎ６−ベンゾイル−３′−〇−メチルアデノシン結合
コンドロールドボアガラス、５″−〇−ジメトキシトリ
チル−３′−〇−メチルイノシン結合コンドロールドボ
アガラス、５′−〇−ジメトキシトリチル−３′−〇−
メチルウリジン結合コンドロールドポアガラス、５′−
〇−ジメトキシトリチル−Ｎ４−ベンゾイル−３′−〇
−メチルシチジン結合コンドロールドポアガラス、５′
−〇−ジメトキシトリチル−２’　−０−（ｔｅｒｔ−
ブチルジメチルシリル）イノシン結合コンドロールドポ
アガラス及びモノメトキシトリチル−へキサンジオール
結合コンドロールドボアガラスをそれぞれ製造した。
実施例４　５　’　ＡｍｐＣｍｐＡｓｅｐＣａ＋ｐＣｍ
ｐＣｓ＋ｐＡｓｍｐＡｍｐＵｍｐＵｓ＋ｐＣａ＋ｐＵｍ
ｐＣ＋＋＋ｐＡｓｐＡｓｐＡｍｐＡｍｐＵｍｐＧｍｐＧ
ｍ’　　３’（化合物■）の製造 （ｍは２′−〇−メチルヌクレオシドユニット、ｍ′は
３′−〇−メチルヌクレオシドユニットＰＩＩ は−０−Ｐ−０−を表わす。） Ｎ１−イソブチリル−５′−〇−モノメトキシトリチル
−３′−〇−メチルグアノシンを結合した固相担体４０
■（結合量：１．０＃■ｏ！）をカートリフジに詰め、
ＤＮＡシンセサイザー（＋ｍｏｄｅ１３８０Ａ＊　Ａｐ
ｐｌｉｅｄ　Ｂｉｏｓｙｓｔｅｓ＋ｓ社製）にセットし
、表１に示した操作で２′−〇−メチルリボヌクレオシ
ド−３’　−０−（Ｈ−ホスホネート）化（化合物■〜
■）をｍ、　ｔｖ　ｉｔ、　ｎ、　ｎ、　ｉ、　ｍ、　
ｔｖ。
Ｉ、　ＩＶ、　ＩＶ、　ＩＩ、　Ｉ１．　　Ｉ、　　１
．　１．　Ｉ［，Ｉ、　Ｍの順に使用し１９−サイクル
繰り返した後、この固相合成中間体をカートリッジより
取り出し、グラスフィルター付き反応容器に移しｌｊｉ
ｄ！のアセトニトリルで洗浄後、アルゴンガス気流中で
乾燥させた。次に０．２Ｍイオウ（Ｓ、）のトリエチル
アミン二二硫化炭素：ピリジン（１：１２＝１２．体積
比）の混合溶液２ａｄ１を加え振とう後１２時間放置し
た。反応液は濾去し、固相合成中間体は２ａｄの二硫化
炭素で５回洗浄、次いで２ｄのジエチルエーテルで１回
洗浄しアルゴン気流中で乾燥後３−のガラス製バイアル
に移した。これに２８％アンモニア水２１１１を加え密
栓し、５５℃で５時間加熱した。濾過により固相担体を
除いた反応液は、減圧濃縮乾固し、得られた残渣は１０
％アセトニトリルを含む０．１　Ｍ　）リエチルアミン
酢酸緩衝液（ｐＨ７，０，以下ＴＥＡＡと略す。）３０
０ｐｊ！に溶かし、逆相シリカゲル（Ｔｔｌａ　ｔｅｒ
ｓ社、Ｐｒｅｐ　ＰＡＫ−５００／Ｃ−１８）を詰めた
直径１ｃｍ、長ラムで精製した．即ち移動相として１０
％から３５％アセトニトリルの直線濃度勾配をかけた０
−１Ｍ　　ＴＥＡＡ　（ｐＨ７、ｏ）を用い波長２５４
ｎａ＋における吸光度で定量し、５′末端にジメトキシ
トリチル基を有する化合物■の分画を得た．溶媒を減圧
留去した後２ｄの水と３回減圧共沸し、３ｄの８０％酢
酸を加え１０分間攪拌した。反応液は濃縮乾固した後、
更に水と減圧共沸し酢酸を除去した。残渣に１０％アセ
トニトリルを含む０．１Ｍトリエチルアミン炭酸緩衝液
（ｐＨ７．　５　）　１−　５　ｉｔｄｌを加え、ジエ
チルエーテル１．　５　７で２回洗浄した。
水層は濃縮乾固し、得られた残渣にｌＯ％アセトニトリ
ルを含む０．１Ｍ　　ＴＥＡＡ　（ｐＨ７−０）２００
μ２を加え０．４５μｍのフィルター（ミリポア社製）
を通した後、高速液体クロマトグラフィーにより精製し
た．即ちＹＭＣ　ｐａｃｋ　００５　（山村科学社製）
カラムを用い、移動相として１０％ノフ０％アセトニト
リルの直線濃度勾配をかけた０．１ＭＴＥＡＡ　（ｐＨ
７−　０　）を用い１−　２　フ　／分の流速で溶出さ
れた主ピークを分取し、５　２−　９　００ｚＩ−””
　：ｘ　二フ　）、約２ＩＩＩｍｏＩ！の化合物■を収
率２２．６％で得た。
化合１１は１０ｄのトリエチルアミン炭酸緩衝液（ｐＨ
７−　５　）を含むＤｚＯに溶解し、”Ｐ−ＮＩ’ｌＲ
を測定した。（測定装置：　ＪＥＯＬ　ｕｓ−ＤＸ３０
０日本電子社製）外部標準にトリメチルホスフェートを
用いたところ、化合物■は５１〜５５ｐｐｍにマルチプ
レットのホスホロチオエートに特徴的なシグナルを示し
た。
双下余臼 　正　　％冨　の　サイクノレ １　　アセトニトリル洗浄　　　　　３０　　　１２　
　アルゴン乾燥　　　　　　　　　２０１４　　アルゴ
ン乾燥　　　　　　　　　５１７　　放　　置　　　　
　　　　　　　　１８０１８　　アルゴン乾燥　　　　
　　　　　１５　　　１９　　（アセトニトリル洗浄　
　　　３Ｇ　　　３アルゴン乾燥　　　　　　　　２０
　）尚、上記同様の操作で、２μｖａｏｌＬのヌクレオ
シド結合固相担体を出発原料に用い、縮合サイクルに於
−ｃｍ、ＩＶ．　　ＩＩ，　　ＩＩ，　　ＩＩ，　　Ｉ
１．　Ｉ１．　ｍＶ，　　Ｉ，　ＶＩ。
１Ｖ．　　Ｉ１．　　ＩＩ，　　Ｉ，　　１．　　Ｉを
順に用いることにより化合物■を２　６００”””ユニ
ット、約１３２ｎｍｏｆ、約６．３％の収率で、縮合サ
イクルに於てｎ．ｎ。
■，ｎ．ｍ．ｍ，ｔｖ．ｕ．ｎ，ｎ，ｎ，ｍ，　■Ｉ，
　ＩＶ，　■　ｎ，　ｎ，　Ｉ，　Ｉ，　１．　ｎ，　
　Ｉ，　ＩＦを順に用いることにより化合物■を４　１
−　５　００”６”−ユニット、約１３６ｎ■ｏ２、約
６．２％の収率で、縮合サイクルに於てｎ．　　ｍ．　
■，　　Ｉ，　ＩＶ，　ＩＶ，　　ｎ。
Ｉ１．　　Ｉを順に用いることにより化合物■を６２０
１）！＆ｌ＋″”ユニット、約５２８ｎｍｏｊ！，約２
４．２％の収率で、縮合サイクルに於て、ｉｖ，Ｉ，ｎ
，Ｉ。
１、　Ｉ，　　Ｉ，　Ｉ　Ｉ　Ｉ１．　　Ｉ，　ＩＶ，
　ＩＶ，　ＩＩ，　Ｉｔ／。
１、　　Ｉ，　　１．　ＩＶ，　Ｉの順に用いることに
より化合物Ｘを３７０Ｄｔｈ＠ｎｍ″ユニット、約１８
Ｏｎ＋ｍｏｆｆｉ。
約８．７％の収率で得た。又、１μｌＩｏＩｌのヌクレ
オシド結合担体を出発原料に用いて、縮合サイクルにＩ
Ｖ．　　Ｉ，　ＩＶ，　ｕ，　ＩＩＩ，　ｎ．　　Ｉ，
　ＩＶ，　　Ｉ，　Ｉ，　１１。
１Ｉ，　　Ｉ，　　１．　　Ｉ，　ＩＶ．　　Ｉ，　Ｉ
，　ＩＩ，　ＩＮを順に用いることにより化合物ＸＩを
１　６．　０　００”−−ユニット、約７２ｎｓｏｆ、
約７．２％の収率で得た。
又、上記同様の操作で、２．４ｔｘｔｍｏｌの５′−〇
−ジメトキシトリチル−Ｎ＆−ベンゾイル−３′−〇−
メチルアデノシン結合コンドロールドポアガラスを出発
原料に用い、縮合サイクルに於て化合物■を１９サイク
ル用いることにより２５０Ｄ！＆１１ａ−ユニット、約
８１．７　．．ｎｅｏ　ｌの化合物ＸＶ、３．ｂμｗ１
１１ｏ１ａＦＩ　Ｓ’／　Ｏ−”ｔを収率３．４％−９
ントキーシトリチルー３′−〇−メチルイノシン結合固
相担体を出発原料に用い、縮合サイクルに於て化合物Ｖ
を１９サイクル用いることにより、化合物ＸＶＩを７４
００””’ユニット、約３０１ｎｍｏｊ！、約８．３％
の収率で、３−６μａ＋ｏｊ！の５′−〇−ジメトキシ
トリチル−３′−〇−メチルウリジン結合固相担体を出
発原料に用い、縮合サイクルに於て化合物■を１９サイ
クル用いることにより、化合物Ｘ■を５８００””−１
１ットＩＩＩ９２ｎｉｅｏｊ！、約８．１％の収率で、
３．６ｐｉｇｏｆｆｉの５′−〇−ジメトキシトリチル
−Ｎ４−ベンゾイル−３″−〇−メチルシチジン結合固
相担体を出発原料に用い、縮合サイクルに化合物■を１
９サイクル用いることにより化合物Ｘ■を２５０Ｂ！＆
Ｏｎ１１ユニット、約１６８ｎｍｏｊ！、約４．７％の
収率ジエチルエーテル １、上記同様の操作により化合物ＸＸ■ＸＸ■、ＸＸＩ
Ｘを製造した。
実施例５　化合物ＸＨの製造 Ｎ２−イソブチリル−５′−〇−モノメトキシトリチル
−３′−〇−メチルグアノシンを結合した固相担体１２
０＋ａｇ（総結合量＝　３．１２　ｐｍｏｆｆｉ）をグ
ラスフィルター付き反応容器に入れ表１に示した操作で
２′−〇−メチルリボヌクレオシド＝３’　−０−（Ｈ
−ホスホネート）体（化合物■〜■）をｍ、ｔｖ、ｎ、
ｎ、ｎの順に使用し５−サイクル繰り返した。ただし操
作番号１，３，５．６゜９における液量はそれぞれ２ｄ
を使用した。次に０．２Ｍイオウ（Ｓ、）のトリチルア
ミン：二硫化炭素：ピリジン（１：１２：１２．体積比
）の混合溶液２１１１を加え振とう後７０分間放置した
。反応液は濾去し、固相合成中間体は２１１１の二硫化
炭素で５回、次いで２１ｄ１のアセトニトリルで５回洗
浄後アルゴン乾燥した。更に表１に示した操作で、化合
物ＩＩ、　ＩＩＩ、　ＩＶ、　　Ｉ、　ＩＶ、　Ｎ、　
　ｎ、　　ｎ、　　Ｉの順に用い９−サイクル繰り返し
た後、０．１Ｍよう素（ｔｚ　）のピリジン：Ｎ−メチ
ルイミダゾール：Ｈ，０：ＴＨＦ　（５：　１　：　５
　：　９Ｇ、体積比）の混合溶液２Ｍ１を加え室温２０
分間放置した。反応液は濾去し、次いで０．１よう素（
■２）のトリエチルアミン：Ｈ，Ｏ：ＴＨＦ　（５：　
５　：　９０．体積比）の混合溶液２ｄを加え室温２０
分間放置後反応液を濾去した。更に表１に示した操作で
化合物■。
１、　　ＩＩ、　　ｌ、　　ＩＩの順に用い５−サイク
ル繰り返した後、上記と同様のイオウ酸化処理を−晩行
なった。
反応液は濾去し、固相合成中間体は２１１の二硫化炭素
で５回洗浄、次いで２ｄのジエチルエーテルで１回洗浄
しアルゴン気流中で乾燥後３１１１のガラス製バイアル
に移した。これに２８％アンモニア水２ｄを加え密栓し
、５５℃で５時間加熱した。
濾過により固相担体を除いた反応液は、減圧ＩＩｉｉｉ
′　乾固し、得られた残渣はｌＯ％アセトニトリルを含
む０．１　Ｍ　）リエチルアミン酢酸緩衝液（ｐ■７．
０゜以下ＴＥＡＡと略す。）３００ｕｆに溶かし、逆相
シリカゲル（Ｈａ　ｔａｒｓ社、Ｐｒｅｐ　ＰＡＲ−５
００／Ｃ−１８）を詰めた直径ｌａｗ、長 た．即ち移動相としてｌＯ％から３５％アセトニトリル
の直線濃度勾配をかけた（ＬＩＭ　　ＴＥＡＡ（ｐＨ７
、０）を用いて波長２５４ｎｓにおける吸光度で定量し
、５′末端にジメトキシトリチル基を有する化合物Ｘ■
の分画を得た．溶媒を減圧留去した後２ｄの水と３回減
圧共沸し、３ｄの８０％酢酸を加えｌＯ分間攪拌した。
反応液は濃縮乾固した後、更に水と減圧共沸し酢酸を除
去した。残渣にｌθ％アセトニトリルを含む０．　１　
Ｍ　）リエチルアミン炭酸緩衝液（ｐｆｆ７−５　）　
１．　５　ｄを加え、ジエチルエーテル１．　５　ｄで
２回洗浄した．水層は濃縮乾固し、得られた残渣に１０
％アセトニトリルを含む０．１Ｍ　　ＴＥＡＡ　（ｐＨ
７．０）２００ｕｊ！を加え０．　４　５　ｐ　ｍのフ
ィルター（ミリボア社製）を通した後、高速液体クロマ
トグラフィーにより精製した．即ちＹＭＣ　ｐａｃｋ　
００５　（山村科学社製）カラムを用い、移動相として
ｌＯ％ノ５０％アセトニトリルの直線濃度勾配をかけた
（ＬＩＭ　　ＴＥＡＡ（ｐＨ７，０）を用い１−２ｄ／
分の流速で溶出された主ピークを分取し、６５−２００
”””ユニット、約２７８ｎｍｏｆの化合物Ｘ■を収率
８．９％で得た。
化合物Ｘ■は１０ｍＦＩのトリエチルアミン炭酸緩衝液
（ｐＨ？−５）を含むＤｚＯに溶解し、”Ｐ−ＮＭＲを
測定した（測定装置：　ＪＥＯＬ　ＪＭＳ−ＤＸ３００
日本電子社製）、外部標準にトリメチルホスフェートを
用いたところ、化合物Ｘ■は５１〜５５ｐｐｍにマルチ
プレットのホスホロチオエートに特徴的なシグナルと−
４２ｐｐｍにホスフェート由来のシングレットシグナル
を積算比７：１２で与えた。このＮＭＲの結果と鎖長延
長工程での酸化工程の順序により、化合物Ｘ「は５′末
端から５個のリン原子と３′末端から５個のうち平均で
２個のリン原子がチオリン酸で、残りはリン酸ジエステ
ル結合を有することが明らかとなった。
実施例６　化合物ＸＸＩ［の製造 ５′−〇−ジメトキシトリチル−２’　−〇−（ｔｅｒ
ｔ−ブチルジメチルシリル）イノシン結合ＣＰＧ　（コ
ントロールトポアグラス）４０■（結合Ｎ：１．０μｍ
ｏｊ！）ずつを３つのカートリッジに詰め、ＤＮＡシン
セサイザー（ｍｏｄｅｌ　３８０Ａ、Ａｐｐｌｉ−ｅｄ
　Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製）にセットし、表１に示し
た繰作で５′−〇−ジメトキシトリチル−２′−〇−（
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）イノシン−３′−Ｏ
−（Ｈ−ホスホネート）（化合物ＸＸＩ）を塩化ピバロ
イルと共に用い１９サイクル繰り返した後、この固相合
成中間体をカートリッジより取り出し、グラスフィルタ
ー付き反応容器に移し１ｄのアセトニトリルで洗浄後、
アルゴン気流中で乾燥した。次ぎに０．２Ｍのイオウ（
Ｓ８）のトリエチルアミン二二硫化炭素：ピリジン（１
：１２：１２、体積比）の混合溶液２１１１を加え、振
とう後２時間放置した。反応液は濾去し、固相合成中間
体は２１１１の二硫化炭素で５回、次いで２１１１１の
エチルエーテルで１回洗浄しアルゴン気流中で乾燻後３
ＩＩｌのバイアルに移した。これに２８％アンモニア水
１５ｄ及びエタノールＯ−５ａｄ！を加え密栓し、５５
℃で５時間加温した。濾過により固相担体を除き、固相
担体はエタノールｌａｄ！、次いで５０％エタノール水
ｌａ直径１ａ１浄し濾液は合わせて：ＩＩＡｗｉ乾固し
た。得られた残さにテトラ（ｎ−ブチル）アンモニウム
フルオライドのＴＨＦｍ液（１Ｍ）１、５　ｄを加え室
温で１７時間振とうした。次ぎにこの反応液に２０ｍ１
１）リエチルアンモニウム炭酸緩衝液（ｐＨ７，５，以
下ＴＥＡＢ緩衝液と略す。）ｌｄ！を加えて希釈し、セ
ファデックスＧ２５を詰めたカラム（直径１．６ｃｍ、
長 ２５、ファルマシア社製）を用いたゲル濾過クロマトグ
ラフィーにより精製した．即ち、上記反応希釈液を添加
後、移動相として２　０　ｎ＋ＭＴ−Ｅ　Ａ　Ｂ緩衝液
を用いて溶出した素通り画分を集めて濃縮乾固した．残
さは１０％アセトニトリルを含む０．　１Ｍトリエチル
アミン−酢酸緩衝液（ｐＨ７．０，以下ＴＥＡＡと略す
．）３００μｌに溶かし、逆相シリカゲル（　ｗａ　ｔ
ｅｒｓ社製、Ｐｒｅｐ　ＰＡＫ−５００／Ｃ−１８）を
詰めた直径１ａｉ，長 即ち、移動相としてｌＯ％から４０％アセトニトリルの
直線濃度勾配をかけた０．」Ｍ　　ＴＥＡＡ緩衝液を用
い、波長２５４ｎｓ＋に於ける吸光度で定量し、５′末
端にジメトキシトリチル基を有する化合物ＸＸ■の百分
を得た。溶媒を留去、次いで水と３回減圧共沸し、８０
％酢酸水３１１１を加え１０分間攬はんした。反応液は
濃縮乾固した後、更に水と減圧共沸し酢酸を除去した。
残さに２Ｏｎ＋ＭＴＥＡＢ緩衝液１．　５　ｄを加え、
酢酸エチル１．　５　ｍで２回洗浄した．水層は濃縮乾
固し、得られた残さを１０％アセトニトリルを含む０．
１Ｍ　　ＴＥＡＡ緩衝液２００μｌを加え高速液体クロ
マトグラフィーにより精製した．即ち、ＹＭＣ　ｐａｃ
ｋ　ＯＤＳカラム（山村科学社製、直径６閣長さ３０Ｃ
１１）を用い、移動相として１０％−５０％アセトニト
リルの直線濃度勾配をかけた０．１Ｍ　　ＴＥＡＡを用
い、１、２ｄ／分の流速で溶出した主ピークを分取し、
１　２　６００”””ユニット、５１４ｎａ＋ｏｊ！の
化合物ＸＸ■を通算収率１２．９％で得た。
尚、上記同様の操作で、２．４ｐｔａｏ１０５′−〇−
ジメトキシトリチル−２’　−０　−　（ｔｅｒｔ−ブ
チルジメチルシリル）イノシン結合ＣＰＧを用い、縮合
サイクルに５′−〇−ジメトキシトリチルー３　’　−
０−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）イノシン−２
’　−０−（Ｈ−ホスホネート）（化合物ＸＸＩＩ）を
塩化ピバロイルと共に用い１９サイクル繰り返すことに
より、化合物ＸＸ■を６５０口Ｚ４ｈｍ−ユニット、２
６４ｎａ＋ｏｊ！、通算収率１１％で得た。
化合物ＸＸＩＩＩ及びＸＸＩＶは１０ｍＭＴＥＡＢ緩衝
液（ｐＨ７，５）を含む０．０に溶解し、”Ｐ−ＮＭＲ
を測定した（測定装置：　ＪＥＯＬ　ＧＸ−４００ＦＴ
−ＮＭＲ日本電子社製。）。外部標準にトリメチルホス
フェートを用いたところ、化合物ｘｘｍは５３−５４ｐ
ｐｍに、化合物ＸＸＩＶは５２−５５ｐｐｍにマルチプ
レットのホスホロチオエートに特徴的なシグナルのみを
示した。
又、上記同様の操作によりＪ化合物ＸＸＶＸＸＶＩ、Ｘ
ＸＸＩＩ、ＸＸＸＩＶ及びｘｘｘｖを製造した。
一方化合物ＸＸＸは化合物ＸＸＶの製造工程中最後の縮
合サイクル終了後、酸処理を行ない、モノメトキシトリ
チル−ヘキサンジオール−Ｈ−ホスホネートを縮合し、
次いで酸処理を行ない最後にコレステリル−Ｈ−ホスホ
ネートを縮合し、以降は同様の繰作を行なうことにより
製造した。化合物ＸＸＸＩについても、ステアリル−ビ
ーホスホネートを最後に縮合し、以降は同様の操作で製
造した。
化合物ｘｘｘｍについては、化合物ＸＸＶを無水酢酸・
ピリジン処理することにより製造した。
化合物ＸＸＸＶＩについては、モノメトキシトリチル−
ヘキサンジオール結合コントロールトポアグラスを出発
原料に用い、化合物ＸＸｖの製造工程と同様の縮合サイ
クルを終了後、酸処理、次いでモノメトキシトリチル−
ヘキサンジオール−Ｈ−ホスホネートを最後に縮合し、
以降の操作は化合物ＸＸＶと同様に行なうことにより製
造した。
実施例７　抗ＡＩＤＳウィルス活性試験化合物■、化合
物Ｘｌ、化合物■と同じ領域に相補的な塩基配列のデオ
キシオリゴヌクレオチド（リン酸型）である化合物Ｘ■
、化合物Ｘｌと同じ領域に相補的な塩基配列のデオキシ
オリゴヌクレオチド（リン酸型）である化合物ＸＩＶ及
びデオキシオリゴシチジル酸ホスホロチオエートである
ｄｃｓ（１５■ｓｒ　）を一定濃度になるように１０％
牛胎児血清を含むＲＰ）’ＩＩ　１０００培地に溶解し
ておき、ＡＩＤＳ’）イルス（’ＨＴＬＶ　　ＩＩｍ株
、３Ｘ１０’Ｐ　Ｆ　Ｕ／ｄ）をＭＯＩ　０−００２で
感染させたＭＴ−４細胞を開始時に３Ｘ１０’／ｄにな
るように、上記蓮リゴヌクレオチドを含む培地と混合し
た後３７℃で培養した。３日目に細胞の状態を観察後、
再び細胞数が３Ｘ１０’〜５Ｘ１０’／ｄになる　よう
に調製し、オリゴヌクレオチドも試験開始時と同じ濃度
になる様に新しく加えた。ウィルス感染による細胞傷害
の抑制を感染後６日目に評価した。その結果を、ウィル
ス感染・増殖を抑制し細胞が正常に増殖していた場合子
で、ウィルス感染し細胞が破壊していた場合を−で表わ
し、表２に示した。又、いずれの場合も試験濃度での細
胞毒性は見られなかった。
表２ （注１）化合物Ｘ■：化合物■と同じ領域に相補的なデ
オキシオリゴヌクレオチド（リ ン酸型） （注２）化合物Ｘ■：化合物ＸＩと同じ領域に相補的な
デオキシオリゴヌクレオチド （リン酸型） （注３　）　ｄＣＳ（１５ａｅｒ）　＝デオキシオリゴ
シチジル酸ホスホロチオエート（１５ｓｅｒ） 化合物■については、更に詳細な試験を行なった。即ち
、化合物■を試験開始時に１００７７Ｍ。
５０ｕＭ、２５ａＭ、１２．５ｕＭ、６ａＭ、３μＭ濃
度になるように１０％牛胎児血清を含むＲＰＭＩ　１６
４０培地に溶解しておき、ＡＩＤＳウィルス（ＨＴＬＶ
−１，株）をＭＯ１０，００２で感染させたＭＴ−４細
胞を、開始時に３０　Ｘ　１０　’ｃｅｌｌｓ／ｄにな
るように化合物■を含む培地と混合した後、３７℃、Ｃ
Ｏ□インキュベータで培養した。又、対照としてウィル
ス非感染ＭＴ−４細胞を化合物■を含む培地で同時に培
養した。３日目に培養液の一部を取り、トリパンブルー
染色による生細胞数の算定と、間接螢光抗体法によるウ
ィルス抗原陽性細胞の出現率の測定を行なった。一方培
養細胞はオーバーグロースによる細胞増殖への影響を防
ぐため、同濃度の化合物■を含む培養液で再び３０〜５
０　Ｘ　１０’　ｃｅｌｌｓ　／ｄになるように希釈し
、３７℃で更に培養を続けた。試験開始６日目に再度生
細胞数とウィルス抗原陽性細胞の出現率を測定した。こ
れらの結果を表３にまとめて示した。又、第１図及び第
２図に、それぞれ３日目と６日目の生細胞数を、第３図
にウィルス抗原陽性細胞率を示した。
マｔｌｌ：ＩＩ　　　　　　　　　　　　　　　　　　
城―　　番嶽腿鋸皿皿 ０嚢　　−慢　　　　ｔＥ＞ｔｎｍ り佃　　芝　銖　慢　性　機　の　ロ ４■　皿：ｔｍ：　　　ス界 妃　ｍｘ　　　　ｍｘ　　　　▼ ｃ＊”　　　　ｃｏ′−Ｃ％ 又、化合物■、■■　ＩＸ、　Ｘ、　ＸＩ［及びデオキ
シオリゴシチジル酸ホスホロチオエート：　ｄＣＳ（１
５ｍａｒ）についても同様の試験を行ない、感染６日目
における生細胞数及びウィルス抗原陽性細胞の出現率を
測定した。
それらの結果は表４に感染６日目における生細胞数を、
表５に感染６日目におけるウィルス抗原陽性細胞の出現
率を示し、第４図第５図にそれぞ礪　　だ１１１１１１
１１ 更に化合物ＸＶＸＶＩ、Ｘ■、Ｘ■、ＸＸＩ及びＸＸＩ
Ｖについても同様の試験を行なった。化合物ＸＶ、ＸＬ
　Ｘ■及びＸ■の結果については、表６に感染６日目に
おける生細胞数を、表７に感染６日目におけるウィルス
抗原陽性細胞の出現率を示し、第６図、第７図にそれぞ
れをグラフで表わした。一方化合物ＸＸ■及びＸＸＩＶ
の結果については、表８に感染６日目における生細胞数
を、表９に感染６日目におけるウィルス抗原陽性細胞の
出現率を示し、第８図に化合物ＸＸ■、第９図に化合物
ＸＸＩＶの生細胞数をそれぞれグラフで表した。又、第
１０図に化合物ｘｘｍ、ｘｘ■のウィルス抗原陽性細胞
の出現率をグラフで表した。
０　　　　−　　　　　へ　　　　−へｃｏ　　　　　
　　　　　ｃ。
　０　　の　　０　　の　　の　 −１’％Ｘ　　　　Ｌｎｌ　　ｃｙ　　　　Ｃ％）　　
　Ｉｕｖ　　　　ｔｙ＞　　１１〜岑苓 　　″″″　　ＸＸ 光３Ｆと１策 以上説明したように本発明による、ＡＩＤＳウィルス遺
伝子に相補的な塩基配列を有する新規２′−〇−メチル
リポオリゴヌクレオチドホスホロチオエート誘導体及び
新規リボオリゴヌクレオチド誘導体が抗ＡＩＤＳウィル
ス活性作用を有し、ＡＩＤＳの治療薬等医薬品への応用
が期待される。
故に、本発明は医薬品産業上極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
実施例７における化合物■の３日日及び６回目における
生細胞数の測定結果をそれぞれ第１図及び第２図に、ウ
ィルス抗原陽性細胞率の測定結果を第３図に示した。化
合物ＶＩ、ＸＩＩ、■　ＩＸ、　ＸＸ■及びデオキシオ
リゴシチジル酸ホスホロチオエート：　ｄＣＳ（１５ｓ
ｅｒ）の感染６日目における、生細胞数の測定結果を第
４図に、ウィルス抗原陽性細胞率を第５図に、それぞれ
示した。 実施例７における化合物ＸＶＸＶ１．Ｘ■及びＸ■の感
染６日目における、生細胞数の測定結果を第６図に、ウ
ィルス抗原陽性細胞率を第７図にそれぞれ示した。 実施例７における化合物ＸＸ■及びＸＸＩＶの感染６日
目における、生細胞数の測定結果をそれぞれ第８図及び
第９図に、化合物ＸＸ■及びＸＸＩＶの感染６日目にお
けるウィルス抗原陽性細胞率を第１θ図にそれぞれ示し
た。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １）下記一般式で示されるオリゴリボヌクレオチド誘導
    体 ▲数式、化学式、表等があります▼ 前記式中、ｍは１〜１００の整数（ただし、Ｘ、及びＸ
    がすべて２′位に置換されしかも水素原子を表わす場合
    は、ｍは４〜５０の整数）を、Ｂ＝Ｂ＿２、Ｂ＿２・・
    ・Ｂ＿（＿ｍ＿＋＿１）で、Ｂ＿１〜Ｂ＿（＿ｍ＿＋＿
    ２＿）は相互に同一又は異なり、それぞれピポキサンチ
    ン−９−イル、グアニン−９−イル、アデニン−９−イ
    ル、シトシン−１−イル、ウラシル−１−イル、チミン
    −１−イルのいずれかを（ただし、Ｘ＿１及びすべての
    Ｘが３′位に置換されしかも水素原子を表わす場合は、
    すべてがアデニン−９−イルを表わすことは無い。）、
    Ｑ＝Ｑ＿２、Ｑ＿３・・・Ｑ＿（＿ｍ＿＋＿１＿）で、
    Ｑ＿１〜Ｑ＿（＿ｍ＿＋＿１＿）は相互に同一又は異な
    りそれぞれチオアニオン、オキソアニオン、アルキル基
    、アリールオキシ基、アルキルアミノ基、アリールアミ
    ノ基、アルキルチオ基及びアリールチオ基のいずれかを
    （ただし、Ｑ＿１〜Ｑ＿（＿ｍ＿＋＿１＿）の少なくと
    も一つはチオアニオンを表わす。）、Ｘ＝Ｘ＿２、Ｘ＿
    ３・・・Ｘ＿（＿ｍ＿＋＿１＿）でＸ＿１〜Ｘ＿（＿ｍ
    ＿＋＿１＿）はそれぞれ相互に同一又は異なり水素原子
    、メチル基又は炭素数１〜２０のアシル基を、Ｒは水素
    原子、炭素数１〜２０のアシル基、置換基を有していて
    もよいホスホリル基、置換基を有していてもよいチオホ
    スホリル基又は置換基を有していてもよいアルキルアミ
    ノホスホリル基のいずれかを、Ｙ＿１及びＹ＿２は相互
    に同一又は異なり、それぞれメトキシ基、炭素数１〜２
    ０のカルボキシル基、水素原子、ヒドロキシル基、置換
    基を有していてもよいアルキルオキシ基、置換基を有し
    ていてもよいホスホリルオキシ基、置換基を有していて
    もよいチオホスホリルオキシ基及び置換基を有していて
    もよいアルキルアミノホスホリルオキシ基を、それぞれ
    表わす。前記式においてヌクレオシド単量体の糖部２′
    位及び３′位の酸素原子のいずれか一方にＸは結合する
    ことができ、その場合他方がリン原子（Ｐ）と結合して
    いることを表わす。 ２）式中、ＲおよびＹ＿１、Ｙ＿２における置換基が、
    相互に同一又は異なり、シアノエチル基、クロロフェニ
    ル基、モノホスホリル基、ピロホスホリル基、炭素数１
    〜２０の炭化水素残基、コレステリル基及び基Ｊ−（Ｋ
    −Ｏ−Ｌ）＿Ｅ−のいずれかを表わす請求項１記載の誘
    導体。 ただし、Ｊは▲数式、化学式、表等があります▼ ヒドロキシル基又は請求項１記載の誘導体の構造式中Ｒ
    Ｏ、Ｙ＿１及びＹ＿２のいずれか一つを除いたオリゴリ
    ボヌクレオチジル基のいずれかを、Ｋはホスホリル基、
    チオホスホリル基及び炭素数１〜１０のアルキルアミノ
    ホスホリル基のいずれかを、Ｌは炭素数１〜２０の炭化
    水素残基を、Ｅは１〜１０の整数をそれぞれ表わす。 ３）一般式中、ｍが２５を、Ｂ＿１からＢ＿２＿７が順
    にＵ、Ｕ、Ｃ、Ｃ、Ｃ、Ｕ、Ｕ、Ｕ、Ｃ、Ｇ、Ｃ、Ｕ、
    Ｕ、Ｕ、Ｃ、Ａ、Ａ、Ｇ、Ｕ、Ｃ、Ｃ、Ｃ、Ｕ、Ｇ、Ｕ
    、Ｕ、Ｃ、Ｇを、Ｑ＿１からＱ＿２＿６がチオアニオン
    を、Ｙ＿１及びＹ＿２がＯＣＨ＿３をＹ＿３及びＲがＯ
    Ｈをそれぞれ表わす請求項１記載の誘導体。 ４）一般式中、ｍが２８を、Ｂ＿１からＢ＿３＿０が順
    にＵ、Ｃ、Ｃ、Ｕ、Ｕ、Ｃ、Ｕ、Ａ、Ｇ、Ｃ、Ｕ、Ｃ、
    Ｃ、Ｇ、Ｃ、Ｕ、Ａ、Ｇ、Ｕ、Ｃ、Ａ、Ａ、Ａ、Ａ、Ｕ
    、Ｕ、Ｕ、Ｕを、Ｑ＿１からＱ＿２＿９がチオアニオン
    を、Ｙ＿１及びＹ＿２がＯＣＨ＿３をＹ＿３及びＲがＯ
    Ｈをそれぞれ表わす請求項１記載の誘導体。 ５）一般式中、ｍが２６を、Ｂ＿１からＢ＿２＿６が順
    にＵＵ、Ｕ、Ｕ、Ａ、Ａ、Ｕ、Ｕ、Ｕ、Ａ、Ｕ、Ａ、Ｕ
    、Ｕ、Ｕ、Ｕ、Ｕ、Ｕ、Ｃ、Ｕ、Ｕ、Ｕ、Ｃ、Ｃ、Ｃ、
    Ｃ、Ｃ、Ｕを、Ｑ＿１からＱ＿２＿７がチオアニオンを
    、Ｙ＿１及びＹ＿２がＯＣＨ＿３Ｙ＿３及びＲがＯＨを
    それぞれ表わす請求項１記載の誘導体。 ６）一般式が構造式式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１記載の誘導体、ただし前記式において
    、ヌクレオシド単量体の糖部２′位及び３′位の酸素原
    子のいずれか一方に水素原子（Ｈ）は結合することがで
    き、その場合他方がリン原子（Ｐ）と結合していること
    を表わす。 ７）一般式が構造式式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１記載の誘導体。ただし前記式において
    、ヌクレオシド単量体の糖部２′位及び３′位の酸素原
    子のいずれか一方に水素原子は結合することができ、そ
    の場合他方がリン原子（Ｐ）と結合していることを表わ
    す。 ８）一般式が構造式式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１記載の誘導体。ただし前記式において
    、ヌクレオシド単量体の糖部２′位及び３′位の酸素原
    子のいずれか一方にアセチル基は結合することができ、
    その場合他方がリン原子（Ｐ）と結合していることを表
    わす。 ９）一般式が構造式式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１記載の誘導体。ただし前記式において
    、ヌクレオシド単量体の糖部２′位及び３′位の酸素原
    子のいずれか一方に水素原子（Ｈ）は結合することがで
    き、その場合他方がリン原子（Ｐ）と結合していること
    を表わす。 １０）一般式が構造式式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１記載の誘導体。ただし前記式において
    、ヌクレオシド単量体の糖部２′位及び３′位の酸素原
    子のいずれか一方に水素原子（Ｈ）は結合することがで
    き、その場合他方がリン原子（Ｐ）と結合していること
    を表わす。 １１）一般式が構造式式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１記載の誘導体。ただし前記式において
    、ヌクレオシド単量体の糖部２′位及び３′位の酸素原
    子のいずれか一方に水素原子（Ｈ）は結合することがで
    き、その場合他方がリン原子（Ｐ）と結合していること
    を表わす。 １２）一般式が構造式式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項１記載の誘導体。ただし前記式において
    、ヌクレオシド単量体の糖部２′位及び３′位の酸素原
    子のいずれか一方に水素原子（Ｈ）は結合することがで
    き、その場合他方がリン原子（Ｐ）と結合していること
    を表わす。 １３）下記一般式で示されるオリゴリボヌクレオチド誘
    導体の少なくとも一種を有効成分として含有する抗ＡＩ
    ＤＳウィルス剤。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ただし、前記式中ｍは１〜１００の整数（ただしＸ＿１
    及びＸがすべて２′位に置換されしかも水素原子を表わ
    す場合は、ｍは４〜５０の整数）を、Ｂ＝Ｂ＿２、Ｂ＿
    ３・・・Ｂ＿（＿ｍ＿＋＿１＿）で、Ｂ＿１〜Ｂ＿（＿
    ｍ＿＋＿２）は相互に同一又は異なり、それぞれヒポキ
    サンチン−９−イル、グアニン−９−イル、アデニン−
    ９−イル、シトシン−１−イル、ウラシル−１−イル、
    チミン−１−イルのいずれかを（ただし、Ｘ、及びすべ
    てのＸが３′位に置換されしかも水素原子を表わす場合
    は、すべてがアデニン−９−イルを表わすことは無い。 ）、Ｑ＝Ｑ＿２、Ｑ＿３・・・Ｑ＿（＿ｍ＿＋＿１＿）
    で、Ｑ＿１〜Ｑ＿（＿ｍ＿＋＿１＿）は相互に同一又は
    異なり、それぞれチオアニオン、オキソアニオン、アル
    キル基、アリールオキシ基、アルキルアミノ基、アリー
    ルアミノ基、アルキルチオ基及びアリールチオ基のいず
    れかを（ただし、Ｑ＿１〜Ｑ＿（＿ｍ＿＋＿１＿）の少
    なくとも一つはチオアニオンを表わす。）、Ｘ＝Ｘ＿２
    、Ｘ＿３・・・Ｘ＿（＿ｍ＿＋＿１＿）で、Ｘ＿１〜Ｘ
    ＿（＿ｍ＿＋＿１＿）はそれぞれ相互に同一又は異なり
    水素原子、メチル基又は炭素数１〜２０のアシル基を、
    Ｒは水素原子、炭素数１〜２０のアシル基、置換基を有
    していてもよいホスホリル基、置換基を有していてもよ
    いチオホスホリル基又は置換基を有していてもよいアル
    キルアミノホスホリル基のいずれかを、Ｙ＿１及びＹ＿
    ２は相互に同一又は異なり、それぞれメトキシ基、炭素
    数１〜２０のカルボキシル基、水素原子、ヒドロキシル
    基、置換基を有していてもよいアルキルオキシ基、置換
    基を有していてもよいホスホリルオキシ基、置換基を有
    していてもよいチオホスホリルオキシ基及び置換基を有
    していてもよいアルキルアミノホスホリルオキシ基をそ
    れぞれ表わす。前記式において、ヌクレオシド単量体の
    糖部２′位及び３′位の酸素原子のいずれか一方にＸは
    結合することができ、その場合他方がリン原子（Ｐ）と
    結合していることを表わす。 又、前記式中ＲおよびＹ＿１、Ｙ＿２における置換基は
    、相互に同一又は異なり、シアノエチル基、クロロフェ
    ニル基、モノホスホリル基、ピロホスホリル基、炭素数
    １〜２０の炭化水素残基、コレステリル基及び基Ｊ−（
    Ｋ−Ｏ−Ｌ）＿Ｅ−のいずれかを表わし、ただしＪは▲
    数式、化学式、表等があります▼ ヒドロキシル基又は特許請求の範囲請求項１で示される
    誘導体の構造式中ＲＯ、Ｙ＿１、Ｙ＿２のいずれか一つ
    を除いたオリゴリボヌクレオチジル基のいずれかを、Ｋ
    はホスホリル基、チオホスホリル基、炭素数１〜１０の
    アルキルアミノホスホリル基のいずれかを、Ｌは炭素数
    １〜２０の炭化水素残基を、Ｅは１〜１０の整数をそれ
    ぞれ表わす。 １４）ＡＩＤＳウィルスの遺伝子ＲＮＡ又は染色体に組
    み込まれたＤＮＡに相補的な配列を有し、下記一般式で
    示される２′−Ｏ−メチルリボオリゴヌクレオチドホス
    ホロチオエート誘導体。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ただし、前記式中ｍ′は１〜５０の整数を、Ｂ＿１′〜
    Ｂ′＿（＿ｍ＿＋＿２＿）は相互に同一又は異なりアデ
    ニン−９−イル−、グアニン−９−イル、シトシン−１
    −イル−、ウラシル−１−イル−、チミン−１−イル−
    及びヒポキサンチン−９−イル−のいずれかを、Ｑ＿１
    ′はチオアニオン、オキソアニオン、アルキル基、アル
    キルオキシ基、アリルオキシ基、アルキルアミノ基、ア
    リールアミノ基、アルキルチオ基及びアリールチオ基の
    いずれかをＱ＿２′からＱ′＿（＿ｍ＿＋＿１＿）は少
    なくとも一つがチオアニオンで、残りがチオアニオン又
    はオキソアニオンのいずれかを、Ｙ＿１′〜Ｙ＿３′は
    相互に同一又は異なり、それぞれメトキシ基、置換基を
    有していてもよいアルキルオキシ基、ヒドロキシル基、
    アルキルシリル基及び水素原子のいずれかを、Ｒ′は水
    素原子又は置換基を有していてもよいホスホリル基又は
    チオホスホリル基を、それぞれ表わす。 １５）一般式中、ｍ′が１８を、Ｂ＿１′からＢ＿２＿
    ０′が順にＡ、Ｃ、Ａ、Ｃ、Ｃ、Ｃ、Ａ、Ａ、Ｕ、Ｕ、
    Ｃ、Ｕ、Ｇ、Ａ、Ａ、Ａ、Ａ、Ｕ、Ｇ、Ｇを、Ｑ＿１′
    からＱ＿１＿９′がチオアニオンをＹ＿１′及びＹ＿２
    ′がメトキシ基を、Ｙ＿３′及びＲ′が水酸基を、それ
    ぞれ表わす請求項１４記載の誘導体。 １６）一般式中、ｍ′が１５を、Ｂ＿１′からＢ＿１＿
    ７′が順にＣ、Ｃ、Ｃ、Ａ、Ａ、Ｕ、Ｕ、Ｃ、Ｕ、Ｇ、
    Ａ、Ａ、Ａ、Ａ、Ｕ、Ｇ、Ｇを、Ｑ＿１′からＱ＿１＿
    ６がＳ＾■を、Ｙ＿１′及びＹ＿２′がＯＣＨ、を、Ｙ
    ＿３′及びＲ′がＯＨをそれぞれ表わす請求項１４記載
    の誘導体、 １７）一般式中、ｍ′が２３を、Ｂ＿１′からＢ＿２＿
    ５″が順にＡ、Ｃ、Ａ、Ｃ、Ｃ、Ｃ、Ａ、Ａ、Ｕ、Ｕ、
    Ｃ、Ｕ、Ｇ、Ａ、Ａ、Ａ、Ａ、Ｕ、Ｇ、Ｇ、Ａ、Ｕ、Ａ
    、Ａ、Ａを、Ｑ＿１′からＱ＿２＿４′がＳ＾■を、Ｙ
    ＿１′及びＹ＿２′がＯＣＨ＿３を、Ｙ＿３′及びＲ′
    がＯＨを、それぞれ表わす請求項１４記載の誘導体。 １８）一般式中、ｍ′が８を、Ｂ＿１′からＢ＿１＿０
    ′が順にＣ、Ａ、Ａ、Ｕ、Ｕ、Ｃ、Ｕ、Ｇ、Ａ、ＡをＱ
    ＿１′からＱ＿９′がＳ＾■を、Ｙ＿１′及びＹ＿″が
    ＯＣＨ＿３を、Ｙ＿３′及びＲ′がＯＨを、それぞれ表
    わす請求項１４記載の誘導体。 １９）一般式中、ｍ′が１９を、Ｂ＿１′からＢ＿２＿
    １′が順にＧ、Ｕ、Ｃ、Ｃ、Ｃ、Ｕ、Ｇ、Ｕ、Ｕ、Ｃ、
    Ｇ、Ｇ、Ｇ、Ｃ、Ｇ、Ｃ、Ｃ、Ａ、Ｃ、Ｕ、Ｇを、Ｑ＿
    ′からＱ＿２＿０′がＳ＾■を、Ｙ＿１′及びＹ＿２′
    がＯＣＨ＿３を、Ｙ＿３′及びＲ′が水酸基を、それぞ
    れ表わす請求項１４記載の誘導体。 ２０）一般式中、ｍ′が１９を、Ｂ＿１′からＢ＿２＿
    １Ｅ′が順にＧ、Ａ、Ｇ、Ｃ、Ｕ、Ｃ、Ｃ、Ｃ、Ａ、Ｇ
    、Ｇ、Ｃ、Ｕ、Ｃ、Ａ、Ｇ、Ａ、Ｕ、Ｃ、Ｕ、Ｇを、Ｑ
    ＿１′からＱ＿２＿０′がチオアニオンを、Ｙ＿１′及
    びＹ＿２′がメトキシ基を、Ｙ＿３′及びＲ′が水酸基
    を、それぞれ表わす請求項３４記載の誘導体。 ２１）一般式中、ｍ′が１８を、Ｂ＿１′からＢ＿２＿
    ０′が順にＡ、Ｃ、Ａ、Ｃ、Ｃ、Ｃ、Ａ、Ａ、Ｕ、Ｕ、
    Ｃ、Ｕ、Ｇ、Ａ、Ａ、Ａ、Ａ、Ｕ、Ｇ、Ｇ、Ｑ＿１′か
    らＱ＿５′がチオアニオンを、Ｑ＿６′からＱ＿１＿４
    ′がオキソアニオンを、Ｑ＿１＿５′からＱ＿１＿９′
    のうちいずれか２つがチオアニオンで他の３つがオキソ
    アニオンを、Ｙ＿１′及びＹ＿２′がメトキシ基を、Ｙ
    ＿３′及びＲ′が水酸基を、それぞれ表わす請求項５４
    記載の誘導体。 ２２）一般式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される２′−Ｏ−メチルリボヌクレオチド誘導体。 ただし、式中Ｗはモノメトキシトリチル基又はジメトキ
    シトリチル基を、Ｚは下記構造式のいずれかで示される
    置換基を、それぞれ表わす。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、
    表等があります▼、 ▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、
    表等があります▼、 ２３）一般式 で示されるヌクレオシド誘導体。 ただし式中Ｗはモノメトキシトリチル基又はジメトキシ
    トリチル基を、Ｙ＿４はメトキシ基、置換基を有してい
    てもよいアルキルオキシ基又は水素原子を、ｎ及びｔは
    相互に異なっていてもよく、それぞれ異なっていてもよ
    く、１〜３０の整数を、（Ｐ）はコントロールドポアガ
    ラス誘導体、ポリスチレン誘導体及びシリカゲル誘導体
    のいずれかを、Ｚは下記構造式のいずれかで示される置
    換基を、それぞれ表わす。 ▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、
    表等があります▼、 ▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、
    表等があります▼、 ▲数式、化学式、表等があります▼、▲数式、化学式、
    表等があります▼ ２４）下記一般式で示される２′−Ｏ−メチルリボオリ
    ゴヌクレオチドホスホロチオエート誘導体。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ただし、前記式中ｍ″は１〜５０の整数を、Ｂ＿１″〜
    Ｂ″＿（＿ｍ″＿＋＿２＿）は相互に同一又は異なりア
    デニン−９−イル−、グアニン−９−イル、シトシン−
    １−イル−、ウラシル−１−イル−、チミン−１−イル
    −及びヒポキサンチン−９−イル−のいずれかを、Ｑ″
    は少なくとも１つのチオアニオンを含み、チオアニオン
    、オキソアニオン、アリルオキシ基、アルキルアミノ基
    、アリールアミノ基、アルキルチオ基及びアリールチオ
    基のいずれかを、Ｙ＿１″〜Ｙ＿３″は相互に同一又は
    異なり、それぞれメトキシ基、置換基を有していてもよ
    いアルキルオキシ基、ヒドロキシル基、アルキルシリル
    基及び水素原子のいずれかを、Ｒ″は水素原子又は置換
    基を有していてもよいホスホリル基を、それぞれ表わす
    。 ２５）一般式中、ｍ″が１８をＢ＿１″〜Ｂ＿２＿０″
    がアデニン−９−イルを、Ｑ″がＳ＾■を、Ｙ＿１″及
    びＹ＿２″がＯＣＨ＿３を、Ｙ＿３″及びＲ″がＯＨを
    、それぞれ表わす請求項２４記載の誘導体。 ２６）一般式中、ｍ″が１８をＢ＿１″〜Ｂ＿２＿０″
    がヒポキサンチン−９−イルを、Ｑ″がＳ＾■を、Ｙ＿
    １″及びＹ＿２″がＯＣＨ＿３を、Ｙ＿３″及びＲ″が
    ＯＨを、それぞれ表わす請求項２４記載の誘導体。 ２７）一般式中、ｍ″が１８をＢ＿１″〜Ｂ＿２＿０″
    がウラシル−１−イルを、Ｑ″がＳ＾■を、Ｙ＿１″及
    びＹ＿２″がＯＣＨ＿３を、Ｙ＿３″及びＲ″がＯＨを
    、それぞれ表わす請求項２４記載の誘導体。 ２８）一般式中、ｍ″が１８をＢ＿１″〜Ｂ＿２＿０″
    がシトシン−１−イルをＱ″がＳ＾■を、Ｙ＿１″及び
    Ｙ＿２″がＯＣＨ＿３を、Ｙ＿３″及びＲ″がＯＨを、
    それぞれ表わす請求項２４記載の誘導体。 ２９）下記一般式で示されるオリゴリボヌクレオチド誘
    導体。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 前記式中ｍ′″は１〜１００の整数（ただしＸ＿１′及
    びＸ′のすべてが２′位に置換されしかも水素原子を表
    わす場合は、ｍは４〜５０の整数）を、Ｂ′″＝Ｂ＿２
    ′″、Ｂ＿３′″・・・Ｂ′″＿（＿ｍ＾−＿＋＿１＿
    ）で、Ｂ＿１′″〜Ｂ′″＿（＿ｍ＾−＿＋＿２＿）は
    相互に同一又は異なり、それぞれピポキサンチン−９−
    イル、グアニン−９−イル、アデニン−９−イル、シト
    シン−１−イル、ウラシル−１−イル、チミン−１−イ
    ルのいずれかを（ただし、すべてがアデニン−９−イル
    を表わすことはない。）、Ｑ′″＝Ｑ＿２′″、Ｑ＿３
    ′″・・・Ｑ′″＿（＿ｍ＾−＿＋＿１＿）で、Ｑ＿１
    ′″〜Ｑ′″＿（＿ｍ＾−＿＋＿１＿）は相互に同一又
    は異なり、それぞれチオアニオン、オキソアニオン、ア
    リルオキシ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、
    アルキルチオ基及びアリルチオ基のいずれかを（ただし
    、Ｑ＿１′″〜Ｑ′″＿（＿ｍ＾−＿＋＿１＿）の少な
    くとも一つはチオアニオンを表わす。）、Ｘ′＝Ｘ＿２
    ′、Ｘ＿３′・・・Ｘ′＿（＿ｍ＾−＿＋＿１＿）で、
    Ｘ＿１′〜Ｘ′＿（＿ｍ＾−＿＋＿１＿）はそれぞれ相
    互に同一又は異なりそれぞれ水素原子又はメチル基を（
    Ｘ＿１′〜Ｘ′＿（＿ｍ＾−＿＋＿１＿）のすべてが２
    ′位に置換されている場合Ｘ＿１′〜Ｘ′＿（＿ｍ＾−
    ＿＋＿１＿）のすべてがメチル基を表わすことはない。 ）、Ｒ′″は水素原子、炭素数１〜２０のアシル基及び
    置換基を有していてもよいホスホリル基のいずれかを、
    Ｙ＿１′″及びＹ＿２′″は相互に同一又は異なり、そ
    れぞれメトキシ基、炭素数１〜２０のカルボキシル基、
    置換基を有していてもよいアルキルオキシ基、ヒドロキ
    シル基、アルキルシリル基、水素原子及び置換基を有し
    ていてもよいホスホリル基のいずれかを、それぞれ表わ
    す。前記式において、ヌクレオシド単量体の糖部２′位
    及び３′位の酸素原子のいずれか一方にＸ′は結合する
    ことができ、その場合他方がリン原子（Ｐ）と結合して
    いることを表わす。 ３０）式中置換基がシアノエチル基、クロロフェニル基
    及び炭素数１〜２０の炭化水素残基のいずれかを表わす
    請求項２９記載の誘導体。 ３１）一般式が構造式式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項２９記載の誘導体。 ３２）一般式が構造式式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項２９記載の誘導体。 ３３）一般式が構造式式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項２９記載の誘導体。ただし前記式におい
    て、ヌクレオシド単量体の糖部２′位及び３′位の酸素
    原子のいずれか一方に水素原子（Ｈ）は結合することが
    でき、その場合他方がリン原子（Ｐ）と結合しているこ
    とを表わす。 ３４）一般式が構造式式： ▲数式、化学式、表等があります▼ を有する請求項２９記載の誘導体。ただし前記式におい
    て、ヌクレオシド単量体の糖部２′位及び３′位の酸素
    原子のいずれか一方にメチル基（ＣＨ＿３）は結合する
    ことができ、その場合他方がリン原子（Ｐ）と結合して
    いることを表わす。
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