JPH03119970A - 稚魚用飼料としての生物の培養法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、エイコサペンタエン酸（以下ＥＰＡと称す）
を餌とする、稚魚用飼料である生物の培養法に関する。

〔従来の技術〕

従来から稚魚の飼料としては、シオミズツボワムシ（以
下単にワムシという）が有用であることが知られている
。このワムシは、海産クロレラを培養し、これをエサと
して得られるものである（特開昭６１−７４５５０公報
）。

近年、このワムシ中に含まれるＥＰＡ　（エイコサペン
タエン酸）が稚魚の成長に必須の因子であることが明ら
かにされたが、ＥＰＡはワムシに本来台まれているもの
ではなく、海産クロレラに含まれるＥＰＡが食物連鎖に
より蓄積されたものである。

上記の理由からＥＰＡを含有するワムシを用いる稚魚用
飼料の製造方法は一層、有用なものとなっているが、こ
のような海産クロレラを用いる方法で稚魚の飼料を作る
ためにはいくつもの広大な培養池を準備する必要があり
、また増殖に極めて長時間を必要とし、手間のかかるも
のであった。

このように、広大な土地を必要とする海産クロレラの培
養はおのずと限界がある。そこでこれを解決するために
、最近ではパン酵母に魚油又は魚油肝油（ＥＰＡ含量７
〜１５％）を混合したものをワムシのエサとして使用さ
れるようになったが、この方法では海産クロレラをエサ
としたワムシの場合に比べると稚魚の生育が劣るという
欠点がある。また、このような混合物は高度不飽和脂肪
酸を多く含むために、非常に酸化され易く、保存に当た
り凍結などの手間が必要である。さらに、パン酵母に付
着した魚油が培養池中で酸化して、水が劣化し異臭を放
つなどの重大な問題があった。

〔発明が解決しようとする問題点〕

本発明の目的は、上述したような従来の稚魚用飼料の製
造法が有していた欠点を払拭し、ＥＰＡを含む稚魚用飼
料を季節によらず安定して供給でき、さらにＥＰＡ高含
有の稚魚用飼料としての生物を効率よく製造できる方法
を提供することにある。

〔問題を解決するための手段〕

本発明者らは、上記の目的を達成すべく種々の研究の結
果、本発明に係わるＥＰＡ産生細菌をワムシ、アルテミ
ア、属に属する細菌等の生物に高効率に取り込ませるこ
とにより、ＥＰＡ高含有稚魚用飼料としての生物を培養
できることを見出した。

さらにこのような場合に、飼料としての生物の培養液に
ビタミン若しくはアンモニア吸着剤、あるいはその両者
を同時に添加することにより、ＥＰＡ高含有稚魚用飼料
としての生物をより効果的かつ安定に供給できることを
見出した。

本発明は、かかる知見に基づいて完成されたもので、Ｅ
ＰＡ産生細菌を取り込ませた稚魚用飼料としてのワムシ
、アルテミア、属に属する細菌等の生物をビタミン若し
くは／及びアンモニア吸着剤を添加した培養液中で培養
する方法である。さらに、本発明は従来の海産クロレラ
やパン酵母を用いる方法を併用することもできる。

〔具体的な説明〕

（１）ＥＰＡ産生細菌 ＥＰＡ産生細菌とは、特に種属などを限定するものでは
なく、ＥＰＡを国体内もしくは菌体外に分泌する細菌で
あればいずれを使用してもよく、通常シェードモナス（
Ｐｓｅｕｄｏ麟ｏｎａｓ）属、アルテロモナス（Ａｌ　
ｔｅｒｏｍｏｎａｓ）属又はシーワネラ（Ｓｈｅｗａｎ
ｅｌｌａ）属などに分類される海洋微生物を用いる。

上記のシュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属に
属する微生物の例としてシュードモナス・ピユートリフ
ァシェンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　　Ｌセ！ハリ至
匣）、５ＣＲＣ−２８７８（徽工研菌寄第ＦＥＲＭＰ−
９１１４）を挙げることができる。アルテロモナス（Ａ
ｌｔｅｒｏｍｏｎａｓ）　ｒ％に属する微生物の例とし
て、アルテロモナス・ビニ−トリファシェンス（Ａｌｔ
ａｒｏｍｏｎａｓ　　朋復１ハ囮！吋）　　Ｓ　ＣＲＣ
−６３７０（微工研菌寄第ＦＥＲＭＰ−１０６８４”）
及びアルテロモナス−ハネダイ（Ａｌｔｅｒｏｓｏｎａ
ｓ　　ｈａｎｅｄａｌ　）ＩＡＭ−１２６４１を挙げる
ことができる。シーワネラ（Ｓｈｅｗａｎｅｌｌａ）１
％に属する微生物の例として、シーワネラ・ビュートリ
ファシェンス（Ｓｈｅｔｍａｎｅｌｌａ匹旦１赳ｕ悶）
　Ｓ　ＣＲＣ−２８７４（ｆＴｈ工研蔀寄第ＦＥＲＭＰ
−９１５９）を挙げることができる。

以と、自然界から分離したこれら菌株について詳細に記
載したが、これら菌に変異を生じさせて一層ＥＰＡ産性
能の高い菌株を得ることも出来る。

この発明の菌株は、常法に従って保存することが出来、
例えば寒天スラント培地上で、又は凍結乾燥法により保
存することが出来る。寒天スラント培地としては、アル
テロモナス属細菌の保存に常用されている培地を使用す
ることができる。また、凍結乾燥保存も常法に従って行
うことができる。

１２１ＥＰＡ産生国の製造方法 前記の微生物を培養して本発明のＥＰＡ産生細菌を製造
しようとする場合、基礎栄養培地として、この発明の微
生物が増殖しうるちのであればいずれを使用してもよい
。

この培地は、窒素源として例えば酵母エキス、ペプトン
、肉エキス、等の１種類又は複数種類を含有する。又は
この培地には必要に応じて炭素源として各種の糖を加え
ることができる。

培養は固体培地又は液体培地のいずれを用いても良いが
、目的とするＥＰＡ産生菌を多量に得る為には、液体培
地を用い、静置もしくは振盪培地、通気・攪拌培養等に
より好気条件下で培養を行うのが好ましい、培養温度は
菌が生育する温度範囲であればいずれの温度でも良く、
好ましくは５〜３０℃であり、より好ましくは１５〜２
５℃であ４、ｐＨは６〜９、好ましくは７〜８の範囲で
ある。培養時間は採取し得る量のＥＰＡ産生菌が生産さ
れる時間を選べば良く、好ましくは８〜４８時間である
。

このようにして得られたＥＰＡ生産菌は、生きたまま湿
菌体として、また凍結乾燥菌体として使用可能であり、
さらに死菌体としても使用可能である。そしてこれらの
菌体を例えば稚魚としての生物の培養槽に添加し、又こ
れらの生物を稚魚の生育槽に加えることにより、稚魚の
生長に利用することができる。稚魚飼料としての生物は
ＥＰＡましくは０゜１〜１％添加したものが望ましい。

表　１　ビタミン混合液の組成 えばシオミズツボワムシ、アルテミア、属に属する細菌
、ミジンコ、オキアミ、チグリオバス、コベボーダなど
を挙げることができる。

（３）　　ビタミンの添加方法 ＥＰＡ生産生産撚加して、稚魚用飼料としての生物を培
養する場合、添加するビタミンが、ビオチン、パントテ
ン酸カルシウム、イノシトール、サイアミン塩酸、ピリ
ドキシン塩酸、ニコチン酸、バラアミノ安息香酸、リボ
フラビン、葉酸、ジアノコバラミンの一つ又はそれらの
混合物であり、該生物の生育が良好な組み合わせ及び濃
度のものであれば、いずれの組み合わせ及び濃度でも良
いが、例えば表１に示す組成のビタミン混合液を該生物
の培養液に対し０．０１〜５％、さらにより好（４） ビオチン パントテン酸カルシウム イノシトール サイアミン塩酸 ピリドキシン塩酸 ニコチン酸 パラアミノ安息香酸 リボフラビン 葉酸 ジアノコバラミン 蒸留水　　　　　　　　１０００閣！ アンモニア吸着剤の添加方法 ＥＰＡ生産菌を添加して稚魚用飼料としての生物を培養
する場合、この培養液中に蓄積するアン剤を添加するこ
とにより生育を向上させることができる。この場合のア
ンモニア吸着剤が、活性炭、セライト、イオン交換樹脂
、シリカゲル等アンモニアを効率良く吸着し、該生物培
養液の系外へ除くことができるものであれば、いずれを
一種又は複数種の組み合わせで使用しても良い、なおア
ンモニア吸着剤としては、上に挙げたもののみに限るも
のではなく、アンモニアを吸着し、かつ該生物の生育を
阻害するものでなければどのような物でも良い、添加す
るアンモニア吸着剤は該生物の培養液に対し０．１〜２
０％、さらに好ましくは１〜１０％添加したものが望ま
しい。

〔発明の効果〕

本発明によれば、ワムシを用いる従来の稚魚用飼料の製
造法に見られた欠点が解決され、ＥＰＡを含む稚魚用飼
料のワムシ等の生物を、ＥＰＡ産生細菌並びにビタミン
若しくは／及びアンモニア吸着剤添加培地により培養し
て得ることが可能である。

実施例１ ＥＰＡ産生菌であるアルテロモナス・ビニ−トリファシ
ェンス（Ａｌｔｅｒｏｓｏｎａｓ　　ｄ）ＳＣＲＣ−６
３７０（微工研菌寄第ＦＥＲＭＰ１０６８４　）をペプ
トン１％、酵母エキス０．５％を含有した海水培地（ｐ
Ｈ７，０）１０ｊ！で２４時間好気的に培養して得られ
た菌体を集菌後凍結乾燥に付した。

このようにして調整された乾燥菌体２■を、パン酵母Ｉ
　Ｘ　１０　’ｃｅｌｌｓ／ｍｌを含むワムシ培養液５
ｍｌ　（ワムシ２０個体）に添加して、ワムシの培養を
行った。培養３日目及び６日目に表１のビタミン混合液
５０μｌを添加し、毎日１回ワムシの個体数を測定した
。ビタミン混合液を添加しないものをコントロールとし
て比較したところ、ワムシの培′＃７日目ではワムシの
個体数は、ビタミン混合液を添加した場合８００個体と
増加した。

一方、コントロールは２０〜１００個体であり、ビタミ
ン混合液を添加することにより８倍〜４０倍もワムシの
生育を向上させることができた。

実施例２ ＥＰＡａｆ生菌であるアルテロモナス・ピユートリファ
シェンス（Ａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓ　　＄）ＳＣＲＣ−
６３７０（微工研菌寄第ＦＥＲＭＰ１０６８４　）をペ
プトン１％、酵母エキス０．５％を含有した海水培地（
ｐＨ７，０）ｌＯｊで、２４時間好気的に培養して得ら
れた菌体を集菌した。

このようにして得られた湿菌体１００ｗをパン酵母２　
Ｘ　１０　’ｃｅｌｌｓ／ｌｌｌを含むワムシ培養液１
００ｍ１（ワムシ１００個体／　ｍ　＋　）に添加して
ワムシの培養を行った９培養液に活性炭５ｇを添加した
ものを試験区、添加しないものをコントロールとした。

ワムシの培養１日目、２日目及び３日目にワムシの個体
数をそれぞれ測定したところ、コントローＪしでは１日
目に７１％、２日目に５７％、３日目に３６％に減少し
た。一方、活性炭添加図では、逆に一日目で１０％、２
日目と３日目では７３９４の増加が見られ、活性炭添加
により著しいワムシの生育の向上が見られた。

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. （１）稚魚用飼料としての生物を培養するに当たり、そ
   の生物のエサとしてエイコサペンタエン酸産生細菌の生
   菌又は死菌を与え、かつビタミン若しくは／及びアンモ
   ニア吸着剤を培養液に添加することを特徴とする当該生
   物の培養方法。
2. （２）エイコサペンタエン酸産生細菌がシュードモナス
   （￥Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ￥）属、アルテロモナス（
   ￥Ａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓ￥）属、又はシーワネラ（￥
   Ｓｈｅｗａｎｅｌｌａ￥）属に属する細菌である請求項
   （１）記載の培養方法。
3. （３）生物がシオミズツボワムシ、アルテミア又は原虫
   動物である請求項（１）記載の培養方法。
4. （４）ビタミンが、ビオチン、パントテン酸カルシウム
   、イノシトール、サイアミン塩酸、ピリドキシン塩酸、
   ニコチン酸、パラアミノ安息香酸、リボフラビン、葉酸
   、シアノコバラミンの一つ又はそれらの混合物からなる
   請求項（１）記載の培養方法。
5. （５）アンモニア吸着剤が、活性炭、セライト、イオン
   交換樹脂、シリカゲルの一つ又はそれらの混合物からな
   る請求項（１）記載の培養方法。