JPH0291093A - 生理活性物質ｔａｎ−１０４８，その製造法および用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、生理活性物質Ｔ　Ａ　Ｎ−１０４８、その製
造法および用途に関する。

従来の技術 エストロンジエンはアンドロジエンからアロマターゼ酵
素により生合成されることが明らかにされているので、
アロマターゼ酵素を効果的に阻害することにより、哺乳
動物におけるエストロンジエン依存性疾ｒ■、例えば乳
癌の治療及び予防に何円である〔キャンサー・リサーチ
（ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ）、４２，３２６１　
Ｓ（１９８２）参照〕。

アロマターゼ阻害剤により治療または予防できるエスト
ロンジエン依存性疾患としては、乳癌の他に例えば、子
宮内膜症、子宮体癌、卵巣癌、多のう性卵巣疾患癌候群
、前立腺肥大症等があげられ、また受胎調節にも作用と
考えられている。特に乳癌では、従来行なわれてきた卵
巣則除術、副腎則除術などにとって代わり得る用途をも
っている。

発明の解決しようとする課題 アロマターゼ阻害剤として乳癌の治療などの目的で臨床
試験に供されている治験薬としては、たとえば非ステロ
イド系のアミノグルテチミド（ａｍｉｎｏｇｌｕｔｅｔ
ｈｉｍｉｄｅ）、ステロイド系の４−ヒドロキンアンド
ロステンジオン、テストラクトンなどがあるが、アミノ
グルテチミドはステロイドホルモン生合成に関する他の
酵素、例えばデスモラーゼを阻害するなどの難点があり
、またステロイド系の薬剤には、副作用としてステロイ
ド特有のホルモン作用が伴うことも予想される。

本発明者らは、これらの薬剤とは異なる非ステロイド骨
格を有するアロマターゼ阻害剤を、広く微生物代謝産物
に求めて探索・した結果、ある種の放線菌がアロマター
ゼ阻害活性を仔する化合物を生産し得ろこと、該化合物
が哺乳動物の血中エストロンジエン濃度を低下せしめろ
ことを見出し本発明を完成した。

課題を解決するための手段 本発明は、生理活性物質ＴＡＮ−１０４８またはその塩
、ストレプトミセス属に属し、生理活性物質ＴＡＮ−１
０４８を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、
培養物中に該ＴＡＮ−１０４８を生成蓄積せしめ、これ
を採取することを特徴とする生理活性物質Ｔ　Ａ　Ｎ　
−１０４８の製造法、および生理活性物質ＴＡＮ−１０
４８を自得してなるアロマターゼ阻害剤に関する。

本発明に用いることができる微生物としてはストレプト
ミセス属に属し生理活性物質ＴＡＮ−１０４８を生産す
る菌であればいずれでもよい。たとえば、和歌山県海草
郡下津町の森林土壌より分離されたストレプトミセス・
エスピー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｓｐ、）Ｎｏ、
　　７７１７などは具体的に使用しうる例として挙げら
れる。

Ｎｏ、７７１７株について、インターナショナル・ジャ
ーナル・オブ・ソステマティック・バクテリオロジー（
Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　　Ｊｏｕｒｎａｌ　　ｏ
［Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ　　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ
）、　　Ｉ　６　（３）、３１３−３４０（＋９６６）
記載の方法に準じて検討した性状は下記のとおりである
。なお、培地上の所見は特に記載のないかぎり、２８℃
において１４日間培養し、観察したしのである。

（１）形態的特徴 よく伸長分岐した基中菌糸より、直伸又は湾曲した気菌
糸を生じ、輪生糸は認められない。

胞子は円筒形（φ０．２ｘ０．３〜０．４μｍ）を示し
、８個以上連鎖状に着生し、その表面は平滑である。

（ＩＩ）各種培地上での生育状態 各種培地における生育の程度（Ｇ）、気菌糸（Ａ　Ｍ　
）の生育および色調、裏面の色ｇ（Ｒ）および可溶性色
素（ＳＰ）の有無および色調などについて以下に列記す
る。色の記載について（）で示す標梨色調記号はコンテ
イナー・コーポレーション・オブ・アメリカ（Ｃｏｎｔ
ａｉｎｅｒ　　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　　ｏｆ　　Ａ
ｍｅｒｉｃａ）のザ・カラー・ハーモニー・マニュアル
（ＴｈｅＣｏｌｏｒ　　Ｉｌａｒｍｏｎｙ　　Ｍａｎｕ
ａｌ）第４版、１９５８年によった。

（ａ）シュクロース・ 硝酸塩寒天培地 Ｇ　、貧弱 ＡＭ：貧弱、白色 Ｒ・白色 ＳＰ・なし 寒天培地 へＭ：貧弱ないし中程度、灰白色 （ｌ　ｌ／２ｅｃ） Ｒ：褐色（２ｇｃ−３ｐｎ） 寒天培地 ＡＭ＝貧弱ないし中程度、白色 Ｒ、無色あるいは淡肌色（４ｃａ） 塩寒天培地 ＡＭ、中程度、白色 Ｒ淡褐色（２ｇｃ） ＳＰ：なし アスパラギン ΔＭ：中程度、白色 寒天培地 Ｒ：淡褐色（２ｇｃ−３ｐｌ） （ｆ）グルコース・　　Ｇ アスパラギン　　ＡＭ 寒天培地　　　　Ｒ Ｐ （ｇ）ペプトン・イー　Ｇ スト・鉄寒天培　ＡＭ 地　　　　　　　　　　Ｒ Ｐ （ｈ）チロノン寒天培　Ｇ 地　　　　　　　　　ＡＭ Ｐ （ｉ）栄養寒天培地　　Ｇ Ｍ Ｐ 中程度 中程度、白色 白色ないし黄土色（３ｐｅ） なし 中程度 貧弱、白色 無色 なし 中程度 中程度、白色 淡褐色（２ｇｃ−３ｐｌ） なし 貧弱ないし中程度 貧弱、灰白色（＋　１／２ｅｃ） 灰白色−淡褐色（１１／２ｅｃ−３ｎｅ）なし くＩＩＩ）生理的性質 （ａ）生育温度範囲＋Ｉｌ　〜３５°Ｃ（ｂ）ゼラチン
の液化（グルコース・ペプトン・ゼラチン培地）：陽性 （ｃ）ｉｌ）粉の加水分解：陽性（弱い）（ｄ）脱脂乳
の凝固：陰性 脱脂乳のペプトン化；陽性 （ｅ）メラニン様色素の生成 チロシン寒天培地：陰性 ペプトン・イースト鉄寒天培地：陰性 （ＩＶ）炭素源の資化性（ブリード）Ｓム・ゴツトリー
ブ寒天培地） １７−アラビノース　：　　＋ Ｄ−キンロース　　　　廿 Ｄ−グルコース　　：　　＋ Ｄ−フラクトース　、　　廿 シュクロース　　　：　　± イノシトール Ｌ−ラムノース　　、　　廿 ラフィノース　　　・ Ｄ−マンニット　　：　　廿 対照 （注）廿：　比較的良好な生育 ＋：　生育を認める ±二　十又は−の判定が困難 生育せず （）菌体分析 長谷用らの方法（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏ「Ｇｅｎｅｒａｌ
　ＡＭｌｌｉｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　２９．３
　＋９−３２２（１９８３））に桑じて分析したところ
、菌体の塩酸加水分解液中のジアミノピメリン酸はＬＬ
一体であった。

以上の菌学的性状から本菌株がストレプトミセス（Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属に属することは明らかであり
、また文献記載の菌株に一致するものが見出仕ないこと
から、Ｎｏ、７７１７ｔ’Ａをストレプトミセス・エス
ピーＮｏ、７７１７と称することにした。

上記ストレプトミセス・エスピーＮｏ、７７１７株は財
団法人発酵研究所に昭和６３年９月８日から寄託番号Ｉ
ＦＯ１４７８６として寄託されており、また本微生物は
、日本国通商産業省工業技術院微生物工業技術研究所（
ＰＲｌ、日本国茨城県つくば市東１丁目１番３号）にブ
タペスト条約に括づき昭和６３年９月２２日から寄託番
号ＦＥｒｔＭ　　Ｂｌ”−２０６８として寄託されてい
る。

ストレプトミセス属菌は、微生物の一般的性質として自
然的にまたは変異剤によって変異を起し得る。たとえば
Ｘ線、ガンマ−線、紫外線等の放射線の照射、更には単
胞子分離、種々の薬剤による処理または薬剤を含有する
培地上での培養、その他の手段で変異させて得られる多
くの変異株、あるいは自然的に得られる突然変異株等で
あっても、Ｔ’ＡＮ−１０４８を生産する性質を有する
んのはすべて本発明の方法に利用し得る。

本発明方法の培養に用いられろ培地は用いられる菌株が
利用し得る栄養源を含むものなら、液状でも固状でもよ
いが、大量を処理するときには液体培地を用いるのがよ
り適当である。培地には同化し得る炭素源、／ｌ！ｌ化
し得る窒素源、無機物質、微量栄養素を適宜配合される
。

炭素源としては、たとえばブドウ糖、乳糖、シヨ糖、麦
芽糖、デキストリン、でん粉、グリセリン、マンニトー
ル、ソルビトール、油脂類（例、大豆油、オリーブ浦、
ヌカ油、ゴマ油、ラード浦、チキン浦など）、窒素源と
しては、たとえば肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、大
豆粉、コーン・スチープ・リカーペプトン、綿実粉、廃
糖蜜、尿素、アンモニウム塩類（例、硫酸アンモニウム
、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、酢酸アンモニ
ウムなど）その他が用いられる。さらにナトリウム、カ
リウム、カルシウム、マグネシウムなどを含む塩類、鉄
、マンガン、亜鉛、コバルト、ニッケルなどの金属塩類
、リン酸、ホウ酸などの塩類や酢酸、プロピオン酸など
の何機酸の塩類が適宜用いられる。その他、アミノ酸（
例、グルタミン酸、アスパラギン酸、アラニン、リジン
、バリン、メチオニン、プロリン等）、ペプチド（例、
ノペブチド、トリペプチド等）、ビタミン類（例、Ｂ、
、Ｂｔ、ニコヂン酸、Ｂ１ｔ、ｃ等）、核酸類（例、プ
リン、ピリミジンおよびその誘導体）等を含有させても
よい。もちろん培地のＩ）Ｉ−１を調節する目的で無機
または有機の酸、アルカリ類、緩衝剤等を加え、あるい
は消泡の目的で油脂類２表面活性剤等の適量を添加され
る。

培養の手段は静置培養でも、振盪培養あるいは通気攪拌
培養法等の手段を用いてもよい。大量の処理には、いわ
ゆる深部通気攪拌培養によるのが望ましいことはいうま
でもない。

培養の条件は培地の状態５組成、菌株の種類、培養の手
段によって一定しないのは当然であるが、それらは通常
的１５°Ｃ〜３２℃の温度で、初発ｐ　Ｉ−１約５〜９
付近に選択するのがよい。とりわけ、培養中期の温度は
約２０°Ｃ〜３０℃、また初発ｐＨは約６〜８の条件が
望、ましい。培養時期も前記の諸条件により一定しない
が、該生理活性物質６度が最大となるまで培養するのが
よい。これに要する時間は液体培地を用いる振盪培養ま
たは通気攪拌培養の場合は通常的１〜１０日間程度であ
る。

生成した生理活性物質ＴＡＮ−１０４８は、培養ろ液及
び菌体中に存在するので培養物を遠心分離、あるいはろ
過によって上澄液と菌体とに分離し、その上清液および
菌体からそれぞれ精製することもできるが、培養物に直
接、メタノール、アセトン、酢酸エチルなどの有機溶媒
を添加して得られる抽出液から精製する方がより有利で
ある場合もある。

化合物Ｔ　Ａ　Ｎ　−１０４８を培養液から採取するに
は、当該物質が両性脂溶性物質であるので、このような
微生物代謝産物を採取する為に通常用いられる分離、精
製の手段が適宜利用される。例えば、夾雑物との溶解度
の差を利用する方法、活性炭、非イオン性ハイポーラス
樹脂、シリカゲル、アルミナ、デキストランゲル等の各
種担体を用いるクロマトグラフィーなどがそれぞれ単独
または組合わせて利用される。

培養物中に生産される生理活性物質ＴＡＩＩ−１０４８
を採取する方法を具体的に説明すると、まず培養液をハ
イフロス−パーセルなどのろ過動剤を用いてろ過して菌
体と上清（ろ液）に分離する。

培養ろ液は、ｐ　Ｉ（を中性又は弱塩基性として、酢酸
エチルのような水と混和しない有機溶媒で抽出する。培
養ろ液より当該物質を抽出するのに用いられる有機溶媒
としては、例えば酢酸エチル、酢酸イソブチルなどの脂
肪酸エステル類、イソブタノール、ｎ−ブタノールなど
のアルコール類、クロロポルム、塩化メチレンなどのハ
ロゲン化炭化水素類、メチルイソブチルケトンなどのケ
トン類などが挙げられる。

当該物質を含む抽出液は、濃縮後シリカゲル等の吸着担
体に吸着させ、適当な溶媒で展開することにより精製さ
れる。吸着剤として例えば、ノリカゲル（Ｍｅｒｃｋ社
、　Ｋｉｅｓｅｌ　Ｇｅｌなど）を用いる場合、好まし
くはアンモニア水などの塩基で予め処理するか、または
展開溶媒中にこれらの塩基を若干添加して用いることが
できる。

展開溶媒としては、一般に極性有機溶媒と非極性溶媒と
の組合わせ、例えばイソプロピルアルコールと酢酸エチ
ル、あるいはメタノールとクロロホルムもしくは塩化メ
ヂレンなどの混合溶媒にアンモニア水を適当量添加した
ものが用いられる。

前記シリカゲルのカラムクロマトグラフィーで分離され
た化合物ＴＡＮ−１０４８は更にセファデックスＬ　■
１−２０　（ファルマノア社）のようなデキストランゲ
ルを用いるカラムクロマトグラフィーにより精製するこ
とができる。

このようにして精製して得られた生理活性物質ＴＡＮ−
１０４８（遊離体）の物理化学的性質は次に示す通りで
ある。

■）色調：粉末では褐色ないし暗褐色 ２）元素分析値（％）： 実測値　ＣＢＢ、４４；　　Ｈ５，３４；　　Ｎ　３．
０９計算値（ＣｚａＨｔｓＮ　Ｏ７・０．４Ｈ，Ｏとし
て）Ｃ６６，３５；　　Ｈ５２５２：　　Ｎ　２．９８
３）分子量：４６３（質量分析による）４）分子式：　
ＣｔｓＨｔ、Ｎ　Ｏ□ ５）紫外線吸収スペクトル： 戸ｅｏＩｌ　（Ｅ　ｉ九）：　２２０（６８５）、２３
６（７８５）、３０３ａＸ （ｓｈ、３１５）、３２６（３８５）、４４１（１８ｇ
）ｎｍ６）赤外線吸収スペクトル（第１図、ＫＢｒ錠法
仁王る主要ピーク、ｃｍ−’）： ３４３０、２９７５゜２９２５．２８６０．１６０５．
１４５５．１４１５゜１３４０、１２９５．１２５５．
１２４０．１１６（１，１０８０，１（１１０゜９４０
、　８４０．　７８５．　７６０．７０５７）’ＨＮＭ
ｒｔスペクトル（３００ＭＩ（ｚ、重クロロホルム中で
のケミカルシフト、δｐｐｍ）１．４５（３１１，ｄ）
、　　２．０２（ｌ）Ｉ、ｄｔ）、　　２．３０（ＩＩ
Ｉ、ｄｄｄ）２．４４（３１１，ｓ）、　　２．４８（
３１１，ｓ）、　　２．７６（Ｉｌｌ、ｄｄｄ）。

３．２７（ｌＩｌ、Ｌ）、　　３．６０（Ｉｌｌ、ｄｇ
）、　　５．７１（Ｉｌｌ、ｄｄ）。

６．９３（Ｉｌｌ、ｄ）、　　７ＪＯ（ＩＩＩ、ｄｄ）
、　　７．６８（１１１，ｄｄ）。

７．７８（ｉｌｌ、ｄｄ）、　　８．２２（１）１．ｂ
ｒ、５）８）”ＣＮＭＲスペクトル（７５ＭＨ２，重り
ａロホルム中、δｐｐｍ）で次のシ、グナルが認められ
る：１８．６２（Ｑ）、　２２．３０（Ｑ）、　３２．
４４（Ｑ）、　３４．０６（ｔ）。

６２．８１（ｄ）、　７２．２２（ｄ）、　７５．１３
（ｄ）、　７７．７８（ｄ）。

１１４．６６（ｓ）、　１１８．４４．（ｄ）、　Ｌ１
２．５４（ｓ）、　１１８．６３（ｓ）。

１１８．７０（ｄ）、　１２１．３６（ｄ）、　１２５
．０７（ｄ）、　１３１．１９（ｓ）。

１３２．７９（ｓ）、１３５．０７（ｓ）、　１３７．
８３（ｄ）、　１３９．０７（ｓ）。

１４２．１Ｋｓ）、１５３．７２（ｓ）、　１５４．１
５（ｓ）、１６１．９１（ｓ）。

１８９．１３（ｓ）、　Ｌ（ｌａ、３４（ｓ）但し、ｓ
＋ｓｉｎｇｌｅｔ、　　ｄ：ｄｏｕｂｌｅｔ、　　Ｑ：
Ｑｕａｒｌｅｔを示す。

９）溶解性： 可溶：　クロロホルム、メタノール、ジメチルスルホキ
シド 難溶：　ｎ−ヘキサン、水 １０）呈色反応： 陽性：　バートン、　Ｋ　Ｍ　ｎ　Ｏいヨード試薬陰性
：　ドラーゲンドルフ、エールリッヒ試薬１１）酸性、
中性、塩基性の別：両性 ！２）薄層クロマトグラフィー（担体、シリカゲルガラ
スプレート６０　Ｐ　ｚｓ４．０．２５ｍｍ、西独メル
ク社製）： １３）高速液体クロマトグラフィー 担体：　　Ｉｎｅｒｔｓｉｌ　ＯＤＳ　５　μｍ（４、
６ｘ　ｌ　５０ｍｍ）溶媒系＝　７５％メタノール−０
，０１Ｍ・リン酸緩衝ＶｆＬ（ｐＨ３、０） 流速＝　ｌ滅／分 保持時間（ｔＲ）：　　４．９分 推定分子式、紫外線吸収スペクトルＩＨ及び１３ＣＮＭ
ｒｔスペクトルデータなどから、生理活性物質ＴＡＮ−
１０４８はベンズアンスラキノン配糖体系の新規物質で
あると推定される。

ＴＡＮ−１０４８は両性物質であるので、それ自体公知
の方法で、塩酸、硫酸、リン酸、ギ酸、酢酸酒石酸等の
無磯或いは有機の酸と酸付加塩を、またナトリウム塩、
カリウム塩、カルシウム塩、トリエチルアミン塩などの
生理学的に許容される塩を形成させることができる。

作５用 以下に実験例をあげて生理活性物質’ｒＡＮ−１０４８
のｉｎ　　ｖｉｔｒｏヒト胎盤アロマターゼ阻害活性及
びラットにおけるニストロジエン合成抑制作用について
具体的に説明する。

実験例１　　ｉｎ　　ｖｉｔｒｏアロマターゼ阻害活性
人胎盤ミクロゾームの調製法： Ｆ、　Ａ、　Ｔｈｏｍｐｓｏｎらの方法〔ジャーナル・
才ブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊ、　Ｂｉｏｌ
、　Ｃｈｅｍ、）２４９．５３６４（＋９７４））を一
部改良して行なった。すなわち、胎盤を予め冷した０、
１５ＭＫＣＣで洗浄し、付着している膜や大きな血管を
除去後ハサミで十分細切した。細切組織に０２５Ｍツユ
−クロースを含有した冷０．０２Ｍリン酸緩衝液、ｐｒ
−ｒ　７　、４を１ｇ組織重量当り２旋を加えポリトロ
ンホモゲナイザーを使用してホモゲナイズ（３０秒、３
回、水中で）し、８００　Ｘｇで１０分間遠心した上澄
液を２０，０００ｘｇで３０分間遠心した後、更に１４
８．０００ｘｇで４５分間遠心して得たペレットをミク
ロゾーム画分として使用した。得られたミクロゾームは
上記リン酸緩衝液に湿胎盤重徂１０ｇ当りｌ藏に＠濁し
て一８０°Ｃにて保存し、使用時に５〜６倍に希釈して
使用した。

アロマターゼ活性の測定方法及び阻害活、性；Ｆ、　Ａ
、　Ｔｈｏｍｐｓｏｎらの方法〔上記文献参照〕を一部
改良して以下のように行なった。

４−アンドロステン−３，＋７−ジオン　４ｇＭ、ｌ　
、２　［３１−（］−アンドロステンジオンｌ　４０，
０００ｄｐｍ、ＮＡＤＰＨ５５０μＭ、上記ミクロゾー
ム２０μＱおよび緩衝液２０ｍＭまたは阻害剤を含む溶
液５μＱを含む反応溶液２２５μＱで９７℃。

１時間反応を行なった。この測定法によれば、アンドロ
ステンジオンの芳香族化によって［３Ｈ］Ｉ（，０が生
成するので、この反応液をクロロホルム０．５成で抽出
することによって分離し、得られた水層を５％活性炭０
．．２５ｄで処理して遊離のステロイドを除き、低速遠
心分離後上清０．２〃Ｊに３滅のシンチレータ−を加え
、液体シンチレーションカウンターにより放射活性を測
定した。

その結果を阻害剤を加えずに反応して得た対照試料にお
ける結果と比較することにより、阻害率（％）を求めた
。基質（アンドロステンジオン）の濃度が４μＭの場合
において、酵素活性を５０％阻害するのに必要な阻害剤
の濃度（ｌｃｓｏ値）は１．２μｇ／−であった。

実験例２　ラットにおけるニストロジエン合成抑制作用 ＴＡＮ−１０４８のｉｎ　　ｖｉｔｒｏでのニストロツ
エン生成阻害作用効果について以下の実験例により検討
した。

幼若ＳＤ系ラット（雌、１９日令）を１群５匹として用
いた。試験群に０．２％アラビアゴム−生理食塩水に懸
澗した各化合物を、５．ｔＯおよび２０　ｍｇ／　ｋｇ
の投与…で皮下に４日間２４時間毎に連続投与するとと
もに非試験群（対照群１．２）には０．２％アラ・ピア
ゴム−生理食塩水０．２ｇを投与し、試験開始後３日日
に化合物を投与した後、試験群と対照群２に妊馬の血清
ゴナドトロピン（ＰＭ　Ｓ　Ｇ　）　Ｉ　ＯＵ　／　ｒ
ａｔ（皮下）を単回投与しｔコ。試験開始５日日にエー
テル麻酔下に工大動脈より血液をヘパリン加採面注射筒
を使用して採血し遠心分離後血漿を得てラジオイムアッ
セイ法により血漿エストラフォール−１フβ濃度の測定
を行なった。

また同ラットより子宮及び卵巣を摘出し、余分な結合組
織等を除去した後それぞれ秤量した。その結果を第１表
に示した。薬効評価の対照化合物として４−ハイドロオ
キンアンドロステンジオン（４−ＯＩＩＡ）を使用した
。

生理活性物質ＴＡＮ−１０４８はＰＭｓＧ投与刺激によ
って上昇した血中エストロゲン濃度及び卵巣重量を低用
量で存意に抑制した。

（以　下　余　白） 生理活性物質ＴＡＮ−１０４８は、強力なアロマターゼ
阻害活性を有しており、哺乳動物（ウシウマ、ブタ、ネ
ズミ、ヒトなど）の乳癌、子宮内膜癌子宮内膜症、前立
腺肥大症などのニストロジエン依存性疾患の予防・治療
や受胎調節に有利に用いることができる。

本化合物は経口投与の他、非経口的に注射あるいは皮膚
、粘膜、膣、直腸等への局部適用により局所的に用いる
ことができる。

本化合物の投与量は、対象の疾患、投与経路等により大
きく変動しつるが、たとえば乳癌の治療に用いる場合、
成人１日当り０．００１〜２０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは
０．０１〜２　ｍｇ／ｋｇを経口あるいは非経口的に投
与する。

経口投与に当っては、カプセル剤１錠剤、顆粒剤シロッ
プ剤、散剤等の形態に調剤され、剤形により活性物質と
共に製薬組成物に慣用されている適当な添加剤（製剤原
料）、例えば賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤３着色剤
、矯味剤、安定剤などが含まれていてもよい。それらの
中には、デンプン、白糖果糖、乳糖、ブドウ糖、マンニ
トール、′！ルビトール。

沈降炭酸カルシウム、結晶セルロース、カルボキシメチ
ルセルロース、デキストリン、ゼラチン、アラビアゴム
、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ヒドロキンプロ
ピルメチルセルロースなどが挙げられる。

非経口投与に当っては、活性成分を慣用の希釈剤（水性
または非水性担体）中に溶解又は懸濁して用いることが
できる。希釈剤としては、生理食塩水、リンゲル液、ブ
ドウ糖水溶液、アルコール、グリコール類、アミド類、
グリセリン、脂肪酸グリセリド、植物、動物由来の油脂
類、パラフィン類などが含まれる。その他医薬製剤には
、添加剤として、乳化剤、懸澗化剤、溶解補助剤、安定
剤、保存剤、無痛化剤９等張化剤、緩衝液、ｐＨ凋整剤
１着色剤、被覆剤などが含まれていてらよい。また、こ
れらの製剤は通常の方法で製造することができる。

実施例 以下実施例を挙げて本発明をさらに具体的に説明するが
、それらは本発明を限定するものではない。なお、以下
の実施例において、培地の組成のパーセントは重攬／容
量パーセントを示す。

実施例１ イースト・麦芽エキス寒天からなる斜面培地に予め十分
に成育したストレプトミセス・エスピーＮｏ、７７１７
株の一白金耳を、グルニーズ２％可溶性澱粉３％、コー
ンス、チーブリカー１％、生大豆粉１形、ポリペプトン
０．５％、塩化ナトリウム０．３％および炭酸カルシウ
ム０．５％、ｐＨ７，０からなる種培養培地５００滅を
分注滅菌した２０゜容坂ロフラスコに接種して、往復振
盪機りで２８℃で２日間培養した。この培養液５００滅
を、消泡剤アクトコール（武田薬品１！ｉ）０．０５％
を自得する上記種培地３０σを注入し、滅菌した５０Ｑ
、容発酵槽に移植し、２８℃で２０間通気攪拌培伴を行
なった。得られた培養液１０Ｑを、デキストリン５％、
コーンスチープリ力−３％、ポリペプトン０．１％、炭
酸カルシウム０．５％およびアクトコール０．０５％、
ｐＨ７、０からなる主培養培地＋００１２を注入し、滅
菌した２００σ容発酵槽に移植し、温度２８℃、内圧１
　、０　ｋｇ／　ｃｍ２．通気１００ｅ／分、攪拌１５
　Ｏｒｐｍの条件下で６６時間培養を行なった。

実施例２ 実施例１で得られた培養液（９０Ｃ）を、ハイフロス−
パーセル（Ｊｏｈｎｓ−Ｍａｎｖｉｌｌｅ社、米国）を
ろ過助剤として用いてろ過し、そのろ液（７５ρ）をｐ
Ｈ９，４に補正して酢酸エチル２５（２で２回抽出し、
酢酸エチル層を合わせて水洗後、濃縮した。濃縮液（４
００滅）をシリカゲル（２５０ｇ）のカラムクロマトグ
ラフィーに付し、酢酸エチル−イソプロピルアルコール
−２Ｎ・アンモニア水（２０・２；１．１．ｏＱ）で展
開後、酢酸エチル−イソプロピルアルコール−２Ｎ・ア
ンモニア水（１０：２：１゜３　、　Ｏｆｆ）で溶出し
た。溶出液を５００滅ずり分画し、フラクションＮｏ、
２〜５を集めて濃縮乾固すると、粗粉末７７７ｍｇが得
られた。

この粗粉末（７００ｍｇ）を酢酸エチル（３００ｖｒｌ
）に溶解し、ｐＨ６，３の０．１Ｍ−リン酸緩衝液（３
００滅）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮
して得られる残渣をメタノール（２０ｄ）に溶解し、セ
ファデックスＬＨ−２０（ｌｄ）のカラムクロマトグラ
フィーに付し、メタノールで展開した。溶出液を５０滅
ずっ分取しフラクションＮｏ、２２〜２４を集めて濃縮
すると、生理活性物質ＴＡＮ　−１０４８（２８３ｍｇ
）が褐色粉末として得られた。

実施例３ 錠剤（１０００錠分） ＴＡＮ−１０４８２０ｇ 乳糖　　　　　　　　　　　　　　　　８０ｇトウモロ
コシデンプン　　　　　　　４６ｇステアリン酸マグネ
シウム　　　　　　　１ｇタルク　　　　　　　　　　
　　　　　　３ｇ５０ｇ ＴＡＮ−１０４８２０ｇ、乳糖８０ｇ、トウモロコシデ
ンプン３０ｇからなる均質な混合物より、常法により調
製した顆粒に、残りのデンプン及びステアリン酸マグネ
ンウムからなる粉末混合物を合わせ、更にタルク粉末を
加えて混合均質化した後、常法により錠剤１．０００錠
を打錠した。

本院を成人乳癌小者の症状に合わせ、１日当り１〜６錠
を経口投与する。

発明の効果 本発明の生理活性物質ＴＡＮ−１０４８は、強いアロマ
クーゼ阻害作用を有し、乳癌などニストロツエン依存性
疾患等の予防・治療に何州である。

【図面の簡単な説明】

第１図は生理活性物質ＴＡＮ−１０４８のＩＲスペクト
ル（ＫＢｒ錠法仁王示す。 代理人　　弁理士　岩　１）　　弘

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）遊離体として次の物理化学的性質を有する生理活
   性物質ＴＡＮ−１０４８またはその塩：１）色調：粉末
   では褐色ないし暗褐色 ２）推定分子式：Ｃ＿２＿６Ｈ＿２＿５ＮＯ＿７３）紫
   外線吸収スペクトル： ▲数式、化学式、表等があります▼：２２０、２３６、
   ３０３（肩）、３２６、４４１４）＾１＾３Ｃ核磁気共
   鳴スペクトル（７５ＭＨｚ、重クロロホルム中、δｐｐ
   ｍ）で次のシグナルが認められる： １８．６、２２．３、３２．４、３４．１、６２．８、
   ７２．２、７５．１、７７．８、１１４．７、１１８．
   ４、１１８．５、１１８．６、１１８．７、１２１．４
   、１２５．１、１３１．２、１３２．８、１３５．１、
   １３７．８、１３９．１、１４２．２、１５３．７、１
   ５４．２、１６１．９、１８９．１、１９３．３ （２）ストレプトミセス属に属し、生理活性物質ＴＡＮ
   −１０４８を生産する能力を有する微生物を培地に培養
   し、培養物中に該ＴＡＮ−１０４８を生成蓄積せしめ、
   これを採取することを特徴とする請求項（１）記載の生
   理活性物質の製造法。 （３）請求項（１）記載の生理活性物質を含有してなる
   アロマターゼ阻害剤。