JPH0267223A - 脳機能改善剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 本発明は１式（り （式中、　Ｒ１は水素原子を、　Ｉｈはヒドロキシ基を
意味するか又は該Ｒ２及びＲ１は一緒になってオキソ基
を意味し＋　Ｒ３は水素原子、ハロゲン原子又はアルキ
ル基を、Ｒ４は水素原子、アルキル基、アルケニル基、
アルキニル基又はアシルオキシ基を、Ｒ５はアルキル基
を、ＱＩ及びｑ２はそれぞれ独立に単結合又は二重結合
を、Ｒ＠及びａｔはそれぞれ独立にアルキル基を意味す
る。）で表わされる化合物又はその塩を有効成分とする
脳機能改善剤 （式中、Ｒ１は水素原子を、Ｒ２はヒドロキシ基を意味
するか又は該Ｒ２及びＲ１は一緒になってオキソ基を意
味し、Ｒ３は水素原子、ハロゲン原子又はアルキル基を
、Ｒ４は水素原子、アルキル基、アルケニル基、アルキ
ニル基又はアシルオキシ基を、Ｒ５はアルキル基を、　
ＱＩ及びｑ、はそれぞれ独立に単結合又は二重結合を＋
　Ｉｔｓ及びＲ７はそれぞれ独立にアルキル基を意味す
る。）で表わされる化合物又はその塩を有効成分とする
脳機能改善剤に関する。

〈従来の技術〉 神経成長因子（以下、　ＮＧＦ　”）が知覚神経細胞と
交感神経細胞の分化と成長を促進し、又、成熟交感神経
ｍｇｓの生存、ｌｓ能保持に必須の因子であることは、
以前よりよく知られていた［　Ｐｈｙｓｉｏｌ。

ＲｅｖＪｏ、１２８４（１１８０）　、＾ｎｎ、Ｒｅｖ
、Ｂｉｏｃｈｅｍ、５１，８４５（１９８２）］　、最
近、　ＮＧＦが脳内の海馬や大脳皮質に多く存在し、小
脳、中脳、基底部に少ないこと［ＥＭＢＯＪ、４．１３
８９（１９８５）　］　、海馬や大脳皮質にはＮＧＦの
メツセンジャーリポキシ核酸（以下、　ｍＲＮ＾と略す
）の多いこと［Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ　、＾ｃａｄ、ｓｃ
ｉ、、ＵＳＡ８１．７９５１（１９８４）、ＥＭＢＯＪ
、３．３１８３（１９１３４）　］が報告され、脳内の
ＮＧＦはコリン作動性神経の投射している領域で合成さ
れ、前脳基底部のコリン作動性神経の栄養因子として作
用している可能性が極めて高い。

該ＮＧＦの作用としては、培養神経細胞のコリンアセチ
ルトランスフェラーゼ（以下、　ＣｈＡＴ）活性を上げ
ることが知られている［Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ、１
４５５−８８（１９８５）　］　、又、　　ＮＧＦをラ
ット新生仔脳室内に投与すると中隔、海鳥、皮質のＣｈ
ＡＴ活性が上昇すること［Ｄｅｖ、Ｂｒａｌｎ　Ｒｅｓ
、、ｉ、４５−５２（１９８３）、　Ｍｏｌ。

Ｂｒａｉｎ　Ｒｅｓ、、ｉ、５３−６２（１９８６）］
　、　　２年齢老化ラット中の学習能力低下群の脳室内
に持続注入すると空間認知記憶が改善されることが報告
されている［Ｎａｔｕｒｅ　３２９６５−Ｈ（１９１１
７＞］　、更に、　　ＮＧＦは中隔から海鳥へ投射する
神経繊維の切断後に起こる中隔神経細胞の逆行性変性が
ＮＧＦにより防止されること（ＳＣＩＥＮＣＥ　２３５
２１４−２１６（１９８７）コ及び砂ネズミで脳虚血後
の海馬ニューロンの遅延性神経細胞死も抑制されること
が明らかにされてきている［第２９回日本神経学会総会
抄録、　Ｐ２Ｓ５（１９８８）］　。

従フて、　　ＮＧＦは、痴呆症、精神症、神経症をはじ
めとする中枢性神経変性疾患、退行性疾患の治療に有望
であると共にこれらの疾患に伴う脳機能の低下を改善す
ると期待されている。しかしながら、該物質は分子量１
０．０００以上のタンパク貿であり、末梢投与による脳
内への良好な移行が期待できないことから脳内でのＮＧ
Ｆ産生を高め、末梢投与後容易に脳内に移行し得る低分
子化合物が望まれていた。

このような低分子化合物としては、特開昭６３−８３０
２０号公報に開示された化合物が知られている。

〈発明が解決しようとする問題点〉 本発明者等は、脳内のＮＧＦ産生を高める低分子化合物
を見い出すべく鋭意検討した結果、上記公報の化合物と
は化学構造的に全く異なる式（Ｉ）の化合物が該作用を
有することを見い出し本発明を完成した。

〈発明の構成〉 式（１）においてアルキル基としてはメチル。

エチル、イソプロピル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル。

第三級ブチル、ペンチル、ヘキシル等をあげることがで
きる。アルケニル基としてはビニル、アリル、２−ブテ
ニル、４−ペンテニル、５−へキセニル等をあげること
ができる。アルキニル基としてはエチニル、２−プロピ
ニル、３−ブチニル、４−ペンチニル、５−ヘキシニル
等をあげることができる。アシル基としてはアセチル、
プロパノイル、ブタノイル、ペンタノイル、ヘキサノイ
ル、ベンゾイル等をあげることがでかる。へロゲン原子
としてはフッ素、塩素、臭素、ヨウ素をあげることがで
きる。

本発明にかかわる脳機能の低下を伴う疾患としては前記
の如き痴呆症、精神症、神経症、アルツハイマー病をは
じめとする中枢神経変性及び退行性疾患並びに脳梗蟇、
−過性脳虚血等の脳の虚血による脳障害、打撲等の外傷
による脳障害等をあげることができる。

式（１）の化合物は公知の製剤技術により賦形剤、崩壊
剤、安定化剤、結合剤等の添加剤と共に錠剤、カプセル
剤、顆粒剤、注射剤等の製剤とすることができる。

式ＣＩ）の化合物は経口投与又は静注等の非経口投与す
ることができ、その投与量は経口投与の場合１通常成人
１人当り０．０５〜５０ｍｇ／日の範囲である。

式（１）の化合物をラットに腹腔内投与して急性毒性を
検討したところ２式（１）の化合物は安全性の高いもの
であることが確認された。

〈発明の効果〉 式（１）の化合物はＮＧＦの産生及び分泌を低濃度で促
進し、且つ学習記憶障害を著明に改善した。従って１式
（１）の化合物は脳機能改善剤として優れたものである
と共に、痴呆症の治療剤としても優れたものである。

以下本発明を更に実施例により説明するが１本発明はこ
れに限定されるものではない。

実験には８日齢マウス脳から培養し、数回継代培養した
アストログリア細胞を用いた（Ｓ、　Ｆｕｒｕ−ｋａｗ
ａら；　Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、Ｃｏｍｍｕ
ｎ、　　１３６．５７−６３゜１９８８）　、すなわち
、マウス脳を細断し、カルシウム、マグネシウムを含ま
ないリン酸ｉｉｉ生理食塩液（ＰＢＳ）で洗浄の後、　
　０．２５１リブトシンＰＢＳ中で３７℃、３０分間処
理した。パスツールとベットで緩かに細胞を解離させ、
懸濁液とした。　　２０ＯＸｇで５分間遠心し細胞を集
め、　　１０１牛脂仔血清、ペニシリン（５ｘｌＯ−’
ｕｎｉｔ／ｍｌ）　、ストレプトマイシン（５０μｇ　
／ｍｌ）を含むダルベツコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ
）で、　１ないし２週間、　３日毎に培地交換しながら
培養した。コンフルエントに達するのを待ちトリプシン
処理後、別容器に２回以上継代培養し形態的に均一な細
胞集団とした。この細胞゛は、アストログリア細胞に特
異的な蛋白である抗グリアルフィブラリーアシディック
プロテインの抗血清を用いたペルオキシダーゼ抗ペルオ
キシダーゼ染色法で染色されることを確認したので、ア
ストログリア細胞と見なした。

このアストロダリア細胞を２４孔培養プレートに２Ｘ１
０’個／ｃｔａ２の密度で接種した。　　ＩＩ牛脂仔血
清を含むＤＭＥＭで培養し、コンフルエントに達した後
培地を０．５零牛血清アルブミンを含むＤＭＥＭ　（牛
脂仔血清を含まない）に変換し、　２週間培養を続は細
胞を静止期へと訪導した。プロゲステロンを含む培地に
交換後２４時間培養し、この培地中に含まれるＮＧＦを
酵素免疫測定法により測定して（Ｓ。

Ｆｕｒｕｋａｗａら；　Ｊ、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、　４
０．７３４−７４４．１９８３）。

プロゲステロンを添加した培地中のＮＧＦ濃度と該物質
を添加しなかフた培地（対照）中のＮＧＦ濃度との比を
求めた。結果を表１に示した。

表１ 表１から明らかなように、プロゲステロンは。

ｌμＭ及び１０μＭ′の濃度で静止期アストログリア細
胞が培地中に分泌するＮＧＦを増加させた。

体重１６５〜２０５ｇの雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラットを、
ベンドパルビタール（５０ｍｇ／　ｋｇ、腹腔内投与）
麻酔下Ｐａｘｉｎｏｓ　＆　Ｗａｔｓｏｎの脳図譜に従
って脳定位固定装置に固定し、前脳基底部（以下、　Ｂ
Ｆ）　　（ｂｒｅｇ＋ａａより　１．５＋ｌＩ６尾側、
正中線より　２．６ｍ＋ｓ外側、骨表より１３．０ｍｍ
腹側）を両側性に、リージ目ンジェネレータ−（ＲＦＧ
−４Ａ、　　ＲＡＤＩＯＮＩＣ５社）を使用し、９０秒
間７０℃に加熱し０ｗＩ固破壊した０手術後のラットの
衰弱を回復させるためにブドウ糖を添加したミルク４ｍ
ｌを毎日経口投与した。なお、　２週間経過しても体重
が手術時の７５零未満に減少したままのラットは実験か
ら除外した。プロゲステロンをゴマ油に溶解し９手術前
及び手術後約３０分に１回ずつ腹腔的注射した。その後
は、　１日　１回ずつ計１４日間連続投与した。その後
、以下の行動薬理学試験を行った。

１）　明暗箱を用いた受動回避に対する作用明室に置い
たラットが、暗室に入った直後に２室の連絡口の仕切り
を閉じ、　１０秒間、床のグリッドから１．ｏｌ＆のス
クランブルｆｏｏｔ　５ｈｏｃｋを与えることにより、
暗室に入ると嫌悪刺激を受けることを学習させた。そし
て２４時間後、再度ラットを明室に置き暗室に入るまで
の潜時を測定し学習記憶保持能力の指標とした。なお、
１２０秒で測定を中止し、１２０秒を越えたラットのデ
ータは　１２０秒として扱った。

明室から暗室へ穆ると、床からｆｏｏｔ　５ｈｏｃｋを
受けることを学習させてから２４時間後に回避試験を行
った結果を表２に示した。

表２ 数値は平均上標準誤差 最大測定時間は１２０秒とした。

中Ｐ＜０．０５　ｖｓ、溶媒処置群（−元装置分散分析
及びＦｉｓｈｅｒ’ｓ　ＬＤＳ） 溶媒としてゴマ油を使用した。

上表から、明室に置かれたラットが暗室に入る平均反応
潜時はＢＦを破壊されたラットの溶媒を投与された群で
は、偽手術ラットの潜時と比べ短く、受動回避が障害さ
れていることを示した（Ｐ＜ｏ、ｏＢ　、これに対し、
プロゲステロンを投与された群の平均反応潜時は溶媒投
与群の潜時より有意に長く、受動回避番害が改善される
ことが明らかになった。

２）　シャトルボックスによる能動回避に対する作用 条件刺激としてブザー音を２秒間鳴らし、その間にシャ
トルボックスの反対側へ８動じなければ、無条件刺激と
して床のグリッドからｆｏｏｔｓｈｏｃｋ　　（５０Ｖ
）を５秒間与えた。この訓練を１分毎に１０回繰り返し
ｌセツションとし、　１日おきに　１セツシヨンの学習
実験を６セツシヨン行った。結果を表３に示した。

表３ 数値は平均上標準誤差 ＊　　Ｐ＜０．０５　ｖｓ、ＢＦ破壊ラうト溶媒投与群
（−元装置分散分析及びＦ１ｓｈｅｒ’ｓ　ＬＤＳ）上
表から明らかなように溶媒を投与されたＢＦ破壊ラット
では無傷ラットに比べ著しく回避学習が劣っていた。こ
れに対し、プロゲステロンを投与されたラットでは回避
成功率が有意に高＜、ＢＦ破壊による学習障害が著明に
改善されていた。

実施例３ プロゲステロンをラットに腹腔的投与し、急性毒性を検
討した結果、そのＬＤＩｏｏは３ｏｏｍｇ／ｋｇ以上で
あった。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＿１は水素原子を、Ｒ＿２はヒドロキシ基を
   意味するか又は該Ｒ＿２及びＲ＿１は一緒になつてオキ
   ソ基を意味し、Ｒ＿３は水素原子、ハロゲン原子又はア
   ルキル基を、Ｒ＿４は水素原子、アルキル基、アルケニ
   ル基、アルキニル基又はアシルオキシ基を、Ｒ＿５はア
   ルキル基を、Ｑ＿１及びＱ＿２はそれぞれ独立に単結合
   又は二重結合を、Ｒ＿６及びＲ＿７はそれぞれ独立にア
   ルキル基を意味する。）で表わされる化合物又はその塩
   を有効成分とする脳機能改善剤