JPH0263462A - コラーゲン膜の製造方法 - Google Patents

コラーゲン膜の製造方法

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JPH0263462A
JPH0263462A JP1059474A JP5947489A JPH0263462A JP H0263462 A JPH0263462 A JP H0263462A JP 1059474 A JP1059474 A JP 1059474A JP 5947489 A JP5947489 A JP 5947489A JP H0263462 A JPH0263462 A JP H0263462A
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 [産業上の利用分野] 本発明は、傷の手当や止血に使用するために、または移
植材料として好適な医療用の膜の製造方法に関する。
[従来の技術およびその問題点コ コラーゲンは医療用途、特に外科的用途に従来しばしば
使用されてきた。コラーゲンは粉末の形で(米国特許第
3742955号および第3810473号明細書)あ
るいはスポンジの形で(米国特許第4320201号明
細書およびドイツ特許第2625289号明細書)であ
り、そして順序は最後だが重要なことに、フリースの形
(ドイツ特許第2730622号明細書)であることも
ある。コラーゲンの粉末、スポンジおよびフリースは医
療分野において重要である。なぜなら、コラーゲンは身
体に由来する物質であるので、身体に由来しない異物質
よりも好まれるからである。
コラーゲンスポンジは優れた吸収能力を示し、低い比重
を有し、そして傷の輪郭にぴったり合い易い。しかしこ
れは、傷への付着がしばしば不十分である。スポンジは
緩やかな出血のために使用され得るという事実にもかか
わらず、血が圧力下に流れ出るような出血状況において
の使用には適しない。
欧州特許第0070398号明細書には、外科手術用コ
ラーゲン材料の製造のための方法が開示されている。そ
の方法ではアキレス鍵または皮をアルカリ法で加工し、
酸処理ののち機械的に処理し、収縮させ、架橋し、そし
て乾燥する。このコラーゲン材料から、縦方向に配向さ
れた個々の繊維を露出させ、そして次に普通繊維用に使
用されている方法で繊維機械を用いてさらに加工する。
このようにして、多くの用途の可能性ある外科用材料を
得ることができる。そのような製品の比重はスポンジよ
りもかなり高いので、スポンジによるよりも速い止血が
この材料により達成される。
しかし、危険な出血状況、例えば圧力下の血の流れ(血
管の吻合)におけるその機械的強度は必ずしも十分では
ない。このことは、特に、傷ついた内部器官を止血ネッ
トワーク中に保持しようという試みがなされる場合に特
に問題となる。さらに、この材料の柔軟性は望ましい程
には若干不足であり、傷の輪郭にぴったり合わせること
はそれ故必ずしも十分ではない。
[発明が解決しようとする課題] 本発明は、微細繊維から構成されているが、しかしその
本来の全体的結合力(integralcohes 1
on)の残っている膜を用いて、速やかな止血効果を有
し、柔軟であって傷の輪郭に非常によくぴったり合い、
また柔軟で速やかに膨潤する表面を有し、そして傷の出
血する表面によく付着する医療用の膜を提供することを
課題とする。この課題と関連して、この膜は止血用被覆
として使用することを可能にする高い機械的強度を有し
、それによりその形状、状態および傷ついた器官の保護
を確保するものでなければならない。もし膜が出血して
いる傷を被覆するためおよび血が圧力下に流れ出る出血
状況において出血を止めるために使用されるならば、大
きな機械的強さは特に重要である。
し課題を解決するための手段] この課題は本発明に従う方法で製造されるコラーゲン膜
により解決される。
本発明は、牛、豚またはその他の家畜のコラーゲンから
得られる原料を、機械的な脂肪残渣除去処理し、希釈さ
れたアルカリまたは酸および必要ならば酵素で処理し、
これらの段階の間で十分に洗浄して、コラーゲン原料を
清浄化し、かつ随伴する汚染物を除去し、そしてさらに
加工して約25重量%の乾燥重量を有するコラーゲンマ
トリックスを得る医療用コラーゲン膜の製造方法におい
て、 a) コラーゲン原料を、アミド窒素含量が0.35ミ
リモル/g以下になるまで強アルカリで処理すること、 b)前記原料を次に強酸により1以下のpH値で処理し
、さらに水で洗浄し、かくして10〜14重量%の乾燥
重量とし、この段階においてpH値値を2.5〜3.5
に増加させること、 C)前記原料を無機塩溶液の添加により収縮させること
、 d)段階C)において得られた材料を圧搾して40〜5
0重量%の乾燥重量に到達させること、e〉 段階C)
およびd)を数回繰り返えすこと、f)次にかくして得
られたマトリックスから水を、溶媒を加えることにより
除去するこき、g)必要ならば、さらに他の物質(架橋
剤、軟化剤)による処理を行なうこと、 h)最後にかくして得られたマトリックスをストレッチ
状態に乾燥すること、 を特徴とする前記のコラーゲン膜の製造方法に関する。
動物のコラーゲン、例えば羊膜、絨毛膜、網膜、囲心腔
及びこれらに類するものが原料として使用される。これ
らは化学的に処理されるが、その際コラーゲン繊維(マ
トリックス)の元の構造が同じく維持されるように細心
の注意が払われねばならない。これらの原料は牛、豚ま
たはその他の家畜から得られる。
原料をアルカリ、酸、酵素、塩、架橋剤および有機溶媒
で処理することによりコラーゲン月料を製造することは
知られているが、この方法では、多かれ少なかれ変性さ
れたコラーゲン繊維が得られる。例えば、コラーゲン繊
維の製造方法がドイツ特許第2730623号明細書に
記載されている。この方法では洗浄し粉砕した原料をま
ずアルカリで、次に酸で処理してから、機械的に加工す
る。しかしこの方法では低い機械的強度を有するコラー
ゲン材料しか得られず、本来のコラーゲンマトリックス
、従って繊維の本来の全体的結合が破壊されている。し
かし、コラーゲン材料の緒特性は繊維の最初の状態と相
関するのみならず、構造の最初の状態とも相関すること
が見い出された。
例えば、傷の手当の間の上皮形成の刺激および肉芽組織
の刺激の支持は構造の最初の状態に直接関係する。それ
故、本発明によればコラーゲンマトリックスの構造が最
初の状態に極めて一致する高品質なコラーゲン材料を製
造し得るが、このことは重要なことである。
本発明による方法では、それらの技術に関して類似する
一連の段階から成る。その点で、これらの工程段階のあ
るものは、コラーゲン材料を製造するために使用されて
いる方法において基本的に公知のものである。しかし、
これらの工程段階の正確なやり方とその順序は本発明の
コラーゲン材料を製造するために重要である。
請求項(1)において述べられた工程段階のあるものは
一般に公知である。これは材料の清浄化に関する。この
加工段階は、例えば、皮革工業においておよびゼラチン
の製造において知られており、そして同様にソーセージ
スキンの製造、コラーゲン包装材料の製造、またコラー
ゲン繊維の製造において使用されている。この清浄化工
程は以下に示す手段から成る。
牛、豚またはその他の家畜のコラーゲンから得られるコ
ラーゲン材料はまず機械的に脂肪残渣を除去される。か
くして殆んど脂肪残渣を含まないコラーゲン材料は、水
好ましくは流水で、十分に洗浄される。これは次にアル
カリ、例えば希釈された約5%のNaOH溶液により処
理される。その後、好ましくは流水を用いる洗浄を行な
っても良い。次に清浄化段階において、材料は酸、好ま
しくは塩酸で処理され、この段階で酸性化にされた材料
のpH値は1以下に設定される。その後、再び洗浄段階
を行なう。このようにして約25重惜%の乾燥重量を有
するコラーゲンマトリラックスが得られる。
さらに本発明の方法は次の段階から成る。
a)上記の方法で清浄化されたコラーゲンの塊状物は強
アルカリで処理される。水酸化ナトリウムがここで使用
される好ましい物質である。コラーゲン材料の製造の際
のアルカリ処理は一般に公知である。この処理は繊維を
ほぐすために用いられ、これにより繊維は幾分開繊され
、そしてまた幾分は化学的に変性される。このアルカリ
処理は、アミド窒素含量が初めの量の半分に減少するま
で続けられる。これは、アミド窒素含量が0.35ミリ
モル以下/gコラーゲンになるとき達成される。
このアルカリ処理は好ましくは皮なめし用の樽の中で行
なわれ、10〜15日間継続される。
強酸による処理は段階b)で行なわれる。膜は初め酸、
好ましくは塩酸により酸性化される。この酸処理は、材
料が均一に酸性化されるまで、通常約1〜5時間後、好
ましくは約2〜3時間後まで続けられる。比較的強い酸
、好ましくは塩酸が約3%の濃度で使用される。材料は
この処理中にごく僅か膨潤し、そして酸処理の後に1.
0より小さいpH値を示す。この材料は続いて再び流水
で洗洗される。かくして材料のp[1値は約3. 0 
(HCl)に増加し、そして材料は膨潤する。これはこ
の時点で10〜14重量%の乾燥重量を有する。
材料の収縮は段階C)で行なわれる。この目的のために
、膜は無機塩溶液、好ましくは食塩溶液で処理される。
この溶液のpII値は2.5〜3.5、好ましくは3.
0であり、そして塩の濃度は10〜20重量%である。
この処理は数分間続けられる。
段階d)において、段階C)で得られた材料は圧搾され
て40〜50重世%の乾燥重量にpiる。本発明の方法
において、この段階は、しばしば膜の固い繊維構造が強
い膨潤と収縮作用により緩められるという事実のために
非常に重要である。しかし収縮したコラーゲン繊維は、
もし塩が繊維から洗い出されるならば、直ちに再び膨潤
する。それ故、段階d)において塩を洗い出すことが好
ましい。
段階C)とd)は数回、すなわち少なくとも2回、好ま
しくは3回繰り返され、この段階において材料は膨潤状
態と収縮状態の間を2〜3回変化する。
段階f)において、得られたマトリックス中の水は溶媒
を加えることにより除去される。収縮した膜の乾燥は空
気中で行なわれてはならないことに注意すべきである。
そうすれば個々の繊維とフィブリルは完全に共に膠着す
るからである。このようにして乾燥された膜は不規則に
透明であり、極めて減少した多孔度を有しそして膜の内
部表面は実質的により小さくなる。これは、親水性液体
の作用による材料の再水和が何時間もかかり、従ってこ
れらの材料は外科用途の使用に適しないことを示す。本
発明の方法において、乾燥段階はアセトンにより行なわ
れることが好ましい。アセトンによる乾燥工程は結果と
して水および酸の完全な除去をもたらす。これより先に
洗い出されなかった塩はアセトンに不溶であるので、膜
の中に留まる。
このようにして乾燥(脱水)されたマトリックスは次に
例えば空気中でストレッチ状態に乾燥される。
必要ならば、その他の物質、例えば架橋剤または軟化剤
による処理が、さらに段階g)で行なわれる。この処理
は本発明によるコラーゲン材料を特定の医療分野の用途
のために改質する場合に興味がある。例えば、もし膜が
移植用に使用される場合には、架橋が興味ある。コラー
ゲン材料のためのそのような架橋は公知のことである。
生理学的に安全な架橋剤は、とりわけヘキサメチレンジ
イソシアナートとポリエチレングリコールジグリシドー
ルエーテルである。架橋度は添加される架橋剤の量と共
に変動し得る。さらにまた、段階g)においてグリセリ
ンのような軟化剤を加えることもできる。このようにし
て非常に柔軟なポリマー材料が得られる。
[実施例] 以下に示す実施例により本発明をさらに説明する。なお
、実施例1は架橋または軟化工程を行なわなかった止血
膜の製造例である。実施例2は傷の手当に特に適当な膜
の製造例である。最後に、実施例3はヘキサメチレンジ
イソシアナートで架橋することにより強化された架橋膜
の製造例である。
実施例1:止血膜の製造 初めに豚から得られた新鮮な腹膜から脂肪を可能な限り
除き、次にこれを流水で十分に洗浄する。
この材料をそれから24時間0.5%NaOH溶液で処
理してから、再び流水で洗浄する。次にこの材料をMC
Iで酸性化して、酸性化材料のpH値を約0.1にする
。この材料を次に流水で洗浄し、材料のpH値を約2.
5〜3.5にする。
この材料を次に圧搾してから、皮革工業で使われる内削
機の中で脂肪を機械的に除去する。かくして調製された
材料は本発明の方法に従ってあらゆるタイプの膜の製造
のために使用することができる。
アルカリ処理のために、材料を0.3重量%のNaOH
で約20日間処理する。材料中のアミド窒素含世は0.
36ミリモル/gの値に減少させられる。この処理は皮
なめし用の樽の中で行なわれ、そして材料は規則的に撹
拌される。
均等に膨潤した膜を次に流水で洗浄し、そして次に皮な
めし用の樽の中で3重量%のHCIで酸性化する。材料
のp+1値は速やかに1.0以下に減少する。この膜を
今度は動かしながら完全に酸性化する。この段階は約2
〜3時間続けられる。次に材料を流水で洗浄し、膜のp
H値を2.9に到達させる。膜の乾燥重量は約11%に
なる。膜を次に10重量%の食塩と100重量%の水か
ら成る洗浄液中に入れる(前記の2つの重量%の値は膜
の重量を基準にした値である)。この塩水の中に材料を
3時間留めておいてから、次に液を絞り出す。この材料
を引続いて流水で洗浄し、この洗浄を塩が残らなくなる
まで続ける。強く膨潤した膜を再び前記の如く食塩溶液
で処理する。
食塩溶液のpH値値は3.0に保たれる。これらの段階
を3回繰り返し、その段階において材料は膨潤状態から
収縮状態へと3回変化し、かくして組織を緩められる。
最後の収縮段階の後、膜は数多くの孔を有する。
材料を次にアセトンで3回処理し、これにより水を除去
しかつ材料を乾燥させる。
前記アセトン洗浄液に5重量%(膜の重量を基準とした
値である)の水を加える。アセトン処理後に膜を圧搾し
て液を絞り出す。加えられた水のために、膜は次にスト
レッチ状態で乾燥される。
乾燥段階の後で、膜は緩和状態でかつ平面状であり、そ
して繊維は可能な限り最大の表面を有する。
この材料は生理学的に完全であり、そして滅菌ののち止
血のために使用される。
実施例2 傷の手当用透明膜 原料は実施例1と同じであり、そして化学的処理も実施
例1に記載の方法と同じである。アミド窒素含量もまた
36ミリモル/gであり、それに続く塩処理までの処理
もまた実施例1と同じである。膜をアセトンを用いて3
回洗浄する。数滴の塩酸を前記のアセトン洗浄溶液に加
える。次に膜を空気中で乾燥させる。膜の水性抽出液の
pH値は2.8である。膜をそれからN−ヘキサンで2
回処理する。膜を変色させることもある、残存する脂肪
残渣をこのようにして除く。ヘキサン処理の後に、材料
を空気中で乾燥させ、引続いて十分に流水で洗浄する。
水のpH値は3.5である。膜は膨潤しており、それを
ガラス板のにへその状態でドロスする(押し出す)。こ
れに空気中での乾燥段階が続く。乾燥段階の間にコラー
ゲン繊維は互いに膠着されて、その結果傷の手当に特に
適する透明なフィルムが生じる。これは、傷が膜により
被覆された後に傷の観察を可能にする。これらの膜は調
製後、二重に包装され、そして滅菌ののち直ちに使用さ
れる。
実施例3 移植または傷の手当用の架橋膜原料は実施例
1と同じであり、そして化学処理も実施例1に記載の方
法と同じである。材料を塩処理の後アセトンで2回洗浄
する。炭酸カリ(potash)を第1回の洗浄段階の
間にすてにアセ)〜ンに加え、そして第2回洗浄段階に
も同様にする。
洗浄の後、水抽出液のpH値は6.8である(測定法:
水:膜の比率=80 + 20.20分間振とう、20
分後、遠心分離してpFI値測定)。材料を次に十分に
流水で洗浄する。その後、中性アセトンによる乾燥段階
を行なう。
乾燥された膜を次に400重量%のアセトンと2重量%
のヘキサメチレンジイソシアナートから成る洗浄液中に
入れる(前記の2つの重量%の値は膜の重量を基準とす
るものである)。膜を2時間子分に振とうする。2時間
後、膜を流水中で十分に洗浄し、HMDIIC(ヘキサ
メチレンジイソシアナート)の臭いの最後の痕跡が消え
てしまうまで洗浄]7てから、続いてアセトン中で乾燥
させるか、またはガラス板の上に押し出した後に乾燥さ
せる。材料の収縮温度は68℃である。
この材料は、次に打ち抜かれ、二重に包装され、そして
減菌されると、直ちに使用し得る。
[発明の効果] 以上の通り、本発明によれば、傷の手当や止血のためお
よび移植材料として好適に用いられる医療用コラーゲン
膜が提供された。
代理人 弁理士 中 村 静 男

Claims (9)

    【特許請求の範囲】
  1. (1)牛、豚又はその他の家畜のコラーゲンから得られ
    るコラーゲン原料を、機械的な脂肪残渣除去処理し、希
    釈されたアルカリまたは酸および必要ならば酵素で処理
    し、これらの段階の間で十分に洗浄して、コラーゲン原
    料を清浄化し、かつ随伴する汚染物を除去し、そしてさ
    らに加工して約25重量%の乾燥重量を有するコラーゲ
    ンマトリックスを得る医療用コラーゲン膜の製造方法に
    おいて、 a)コラーゲン原料を、アミド窒素含量が0.35ミリ
    モル/g以下になるまで強アルカリで処理すること、 b)前記原料を次に強酸により1以下のpH値で処理し
    、さらに水で洗浄し、かくして10〜14重量%の乾燥
    重量とし、この段階においてpH値を2.5〜3.5に
    増加させること、 c)前記原料を無機塩溶液の添加により収縮させること
    、 d)段階c)において得られた材料を圧搾して40〜5
    0重量%の乾燥重量に到達させること、 e)段階c)およびd)を数回繰り返えすこと、 f)次にかくして得られてマトリックスから水を、溶媒
    を加えることにより除去すること、 g)必要ならば、さらに他の物質(架橋剤、軟化剤)に
    よる処理を行なうこと、 h)かくして得られたマトリックスを最後にストレッチ
    状態に乾燥すること、 を特徴とする前記コラーゲン膜の製造方法。
  2. (2)段階a)におけるアルカリ処理をNaOHにより
    行なうことを特徴とする請求項(1)に記載の方法。
  3. (3)酸処理をHClにより行なうことを特徴とする請
    求項(1)または(2)に記載の方法。
  4. (4)食塩水溶液を段階c)において無機塩溶液として
    使用することを特徴とする請求項(1)より(3)まで
    のいずれか1項に記載の方法。
  5. (5)有機溶媒を段階f)において溶媒として使用する
    ことを特徴とする請求項(1)より(4)までのいずれ
    か1項に記載の方法。
  6. (6)アセトンを溶媒として使用することを特徴とする
    請求項(5)に記載の方法。
  7. (7)段階g)における架橋処理を架橋剤を加えること
    により行なうことを特徴とする請求項(1)より(6)
    までのいずれか1項に記載の方法。
  8. (8)ヘキサメチレンジイソシアナートまたはポリエチ
    レングリコールジグリシドールエーテルを架橋剤として
    使用することを特徴とする請求項(7)に記載の方法。
  9. (9)グリセリンを軟化剤として加えることを特徴とす
    る請求項(1)より(8)までのいずれか1項に記載の
    方法。
JP1059474A 1988-03-11 1989-03-10 コラーゲン膜の製造方法 Expired - Fee Related JPH069606B2 (ja)

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EP88103884A EP0331786B1 (de) 1988-03-11 1988-03-11 Verfahren zur Herstellung von Kollagenmembranen für Hämostase, Wundbehandlung und Implantate

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JPH0263462A true JPH0263462A (ja) 1990-03-02
JPH069606B2 JPH069606B2 (ja) 1994-02-09

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DE (1) DE3850956D1 (ja)
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