JPH0253724A - 成人病治療用輸液 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は成人病等の患者に対する治療効果を有する脂肪
輸液に関し、特に水溶性のＮ−アシル化アミノ酸誘導体
含有輸液に関するものである。

（従来の技術） 脂肪輸液として市販されているものは、脂肪成分として
精製大豆油が使用されている。その際、精製大豆油は卵
黄リン脂質を界面活性剤として、粒子径１ｇｍ以下の脂
質微小球に加工されている。

即ち、脂肪輸液は精製大豆油のＯ／Ｗ型エマルジョンで
ある。栄養学的に、脂肪輸液は大豆油に由来するカロリ
ーと必須脂肪酸のリノール酸補給に重要であった。この
リノール酸の必須脂肪酸としての代謝経路に関して、リ
ノール酸は、Δ６−デサチュラーゼによりγ−リノレン
酸に変換され、その後、炭素鎖延長酵素でジホモ−γ−
リノレン酸に変換され、さらにΔ５−デサチュラーゼに
よりアラキドン酸へ代謝される。このジホモ−Ｔリルン
酸がＩ型のプロスタグランジンに、またアラキドン酸が
■型のプロスタグランジンに変換されて生理活性が発揮
されることが知られている。

近年の食習慣の変化に伴い、生体内でリノール酸から生
合成される前述のω−６系の高度不飽和脂肪酸の過剰摂
取の問題が生じている。この高度不飽和脂肪酸の生体内
におけるω−６系とω−３系のバランスの乱れが、動脈
硬化症や血栓性疾患等の要因と考えられている。

（発明が解決しようとする課題） 脂肪輸液の備えるべき条件としては、■脂質の大きさが
自然のカイロマイクロン（１−以下が望ましい）に近い
こと、■乳剤として安定であること、■完全に代謝され
ること、■無菌化できること、■副作用のないこと、■
製剤として長期の保存に耐え得ることが必要とされてい
る。

現在、市販の脂肪輸液は大豆油１０％に卵黄レシチン１
．２％を含み、浸透圧調整用にグリセリン２．５％を添
加して、超音波で分散微粒子化している。そのため、製
造直後は乳化系が安定で粒子径も一定であるが、乳化系
であるため保存中に脂肪粒が少しずつ既築して、粒子径
が増大し乳剤が不安定となる場合がある。また、保存中
に遊離脂肪酸が発生してｐＨが低下する（４０℃では数
ケ月でｐ）Ｉが５．０近く低下する）ので、２０℃以上
に保存することが望ましいとされてきた。この条件でも
定められた保存期間は２年以内である。保存を冷凍状態
にすれば保存期間の延長は可能であるが、乳剤の冷凍・
解凍によりＯ／Ｗ型エマルジョンの崩壊が起どり、脂質
相と水相が分離し使用不能の原因となる。

以上の如く、高度不飽和脂肪酸が油状の脂溶性誘導体で
あれば、輸液に用いる際に、乳化系を調製する必要が生
じるため、前述の様な問題点が生じてくる。

リノール酸の必須脂肪酸としての代謝に関しては、リノ
ール酸をプロスタグランジンに誘導する各代謝過程のフ
ァーストステップであるリノール酸をγ−リノレン酸に
合成するΔ６−デサチュラーゼが喫煙、飲酒、加齢等の
成人病のリスクファクターによって、その活性を低下す
ることが知られている。そのため、糖尿病、動脈硬化症
等の患者に対する必須脂肪酸の補給にリノール酸では不
適である。

また、近年の高度不飽和脂肪酸のω−６系とω−３系の
バランスの改善に、エイコサペンタエン酸やドコサヘキ
サエン酸およびそれらを含む魚油の投与により、このバ
ランスの乱れを改善する試みが実施され、ある程度の効
果は得られているが、この方法は、ω−６系のアラキド
ン酸の産生を抑制するのみである。即ち、成人病治療で
重要と考えられているω−６系の高度不飽和脂肪酸であ
り、またＩ型のプロスタグランジンの前駆体であるジホ
モ−γ−リノレン酸の増加には何ら効果を与えていない
。

本発明は、生体内にγ−リノレン酸及び、ジホモ−γ−
リノレン酸を増加させて、成人病の治療効果を与えるこ
とができる水溶性のＮ−アシル化アミノ酸誘導体含有輸
液を提供することを目的としている。

（課題を解決するための手段） 本発明の成人病治療用輸液は、構成脂肪酸中にγ−リノ
レン酸およびジホモ−γ−リノレン酸の一種以上とエイ
コサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸の一種以上
とを含む混合脂肪酸から得られるＮ−アシル化アミノ酸
誘導体を含有することを特徴とする。

本発明においては、ω−３系とω−６系の高度不飽和脂
肪酸が共存することが必要条件である。

ω−６系の高度不飽和脂肪酸としては、γ−リノレン酸
およびジホモ−γ−リノレン酸の一種以上を用いる。糖
尿病や動脈硬化症等の成人病患者では、リノール酸から
γ−リノレン酸を生合成するΔ６−デサチュラーゼ活性
が低下しており、特に、実験的糖尿病動物においては、
これらの生合成が阻害され、この酵素がインシュリン依
存性を示すことから、前記ω−６系の高度不飽和脂肪酸
は必須成分である。また、これらのω−６系の高度不飽
和脂肪酸と共存するω−３系の高度不飽和脂肪酸として
は、エイコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸の
一種以上を用いる。エイコサペンタエン酸やドコサヘキ
サエン酸を含む魚油はジホモ−γ−リノレン酸からアラ
キドン酸を生合成するΔ５−デサチュラーゼ活性を阻害
することができる。この酵素の阻害は体内でジホモ−γ
−リノレン酸の増加およびジホモ−γ−リノレン酸を基
質とするＩ型プロスタグランジンの増加が期待される。

ω−３系とω−６系の高度不飽和脂肪酸の組合せによっ
て生理効果が発揮されるには、各県の高度不飽和脂肪酸
が５％以上ずつ共存することが好ましい。ω−６系の高
度不飽和脂肪酸のうちγ−リノレン酸は月見草油、糸状
菌産生脂質、スグリ属種子油等に含まれる。ジホモ−γ
−リノレン酸は生体臓器脂質や血液脂質に含まれるが、
市販品を利用することができる。また、ω−３系の高度
不飽和脂肪酸であるエイコサペンタエン酸やドコサヘキ
サエン酸は、イワシ、サバ、アジ、カツオ、マグロ等の
、一般の魚油中に豊富に含まれている。

特にγ−リノレン酸は月見草油に８〜１０％含まれるの
で、エイコサペンタエン酸とドコサヘキサエン酸を２０
〜３０％含む濃縮魚油と配合して、その構成脂肪酸の各
県の高度不飽和脂肪酸を５％以上ずつ共存させることが
出来る。

上記の如き高度不飽和脂肪酸は、アミノ酸誘導体に変え
ることにより水溶化させることができる。

水溶性を付与したＮ−アシル化アミノ酸誘導体は、２０
％以上の水溶液の調製が可能であり、従来、１０％のＯ
／Ｗ型エマルジョンの形成に依存していた脂肪乳剤に比
べて非常に調製が容易となる。また、このＮ−アシル化
アミノ酸誘導体は、グリセリン、生理食塩水、リン酸緩
衝生理食塩水等による等張化も容易であり、毒性の低い
物質である。

本発明に使用される高度不飽和脂肪酸のＮ−アシル化ア
ミノ酸誘導体を調製するために、高度不飽和脂肪酸のク
ロライド化物を使用することができる。高度不飽和脂肪
酸のクロライド化に際しては、その活性が失なわれない
様に、即ち、高度不飽和脂肪酸の異性化を生じさせない
ようにする。

例えば、ω−３系とω−６系の高度不飽和脂肪酸が一定
の割合で共存する脂肪酸組成物をヘキサンに溶解し、不
活性ガス気流下、−１０℃以下でオキサリルクロライド
を滴下し、０℃で一晩反応させて異性化のない脂肪酸ク
ロライド化物を得る。該クロライド化物の異性化に際し
ては、ＩＲ，ＵＶ。

過酸化物量、キャピラリーガスクロマトグラフィ等の分
析により、その構造をチエツクすることができる。

本発明を実現させたＮ−アシル化アミノ酸誘導体は、脂
肪酸のカルボニル基とアミノ酸のアミノ基が反応したア
ミノカルボニル結合を有する。水溶性の面からは、アミ
ノ酸のカルボキシル残基は、アルカリ金属塩が好ましい
。

アミノ酸としては、天然物または合成物のアスパラギン
酸、グルタミン酸、バリン、チロシン、メチオニン、シ
スチン、トリプトファン、フェニルアラニン、グリシン
、リジン、セリンおよびＴ−アミノ酪酸等が挙げられる
が、Ｃ末端を有するオリゴペプチドも対象となり得る。

好ましくは、アスパラギン酸やグルタミン酸の如き三塩
基性酸である酸性アミノ酸が水溶化には、より望ましい
。

該脂肪酸組成を有するＮ−アシル化アミノ酸誘導体は、
親水性溶媒と水からなる混合溶媒を反応溶媒として、ア
ミノ酸と該脂肪酸組成物のクロライドとをアルカリ存在
下で縮合させる方法でも得られる。この場合に使用され
る親水性溶媒としては、ケント類、ジオキサン、テトラ
ヒドロフラン等が挙げられる。

この様にして得られた該Ｎ−アシル化アミノ酸のアルカ
リ金属塩は、完全な水溶性であり、その溶液は無色透明
で、溶解に際し加熱する必要もない。さらに、本物質は
親水性乳化剤に類似した強い界面活性を有し、薬効のあ
る乳化剤として、従来の脂肪乳剤に油脂と共に使用する
ことができる。

（発明の効果） 本発明の輸液は、Ｎ−アシル基に生理活性の強いω−３
系とω−６系の特定の高度不飽和脂肪酸残基を有するＮ
−アシル化アミノ酸誘導体を含有しているので、糖尿病
、動脈硬化症、血栓性疾患等の成人病に有効であり、そ
の治療に利用できる。

また、これに用いるＮ−アシル化アミノ酸誘導体は、水
溶性であるから輸液の調製が容易であり、体内での吸収
や分配特性が優れており、経口、経腸、あるいは静注な
どの方法で投与することができ、従来、油性であるため
に使用に制限のあった分野に、水溶性を付与して簡便に
利用することができる。

さらに、このＮ−アシル化アミノ酸誘導体は、生体中に
存在する脂肪酸とアミノ酸から構成されており、両者と
も本来的には毒性のない物質であり、抗原やバイロゲン
の原因にはなり得す、しかも両者を縮合しているアミノ
カルボニル結合を代謝するペプチターゼは極めて生体内
に広く分布されていて、その分解性は問題とならず、極
めて安全である。

（実施例） 以下、本発明を実施例により、さらに具体的に説明する
。

実施例１ 月見草油（サミソト製油側、γ−リノレン酸８．７％、
リノール酸７２．５％）７０ｇと道東産マイワシ油（エ
イコサペンタエン酸１２．７％、ドコサヘキサエン酸７
．３％）３０ｇを配合した混合油を、エタノール性水酸
化カリウム溶液でケン化分解し、塩酸で中和後、ヘキサ
ン抽出を行い、白土を充填したカラムを通して脱溶媒後
、混合脂肪酸８７ｇを得た。

この混合脂肪酸８０ｇをヘキサン４８０−に溶解し、オ
キサリルクロライド４８ｇを窒素気流下、攪拌しながら
滴下漏斗を用いて一１０℃でｍｌずつ滴下し、滴下終了
後Ｏ℃で一晩、撹拌を続けた。反応終了後、未反応物と
溶媒を減圧除去し、７２ｇの黄褐色液状の混合脂肪酸ク
ロライドを得た。

窒素雰囲気下で、Ｌ−グルタミン酸３０ｇを６０％含水
アセトン中に溶解した。その溶液に攪拌下、水酸化ナト
リウム１６ｇを加えて水冷（２〜５℃）下で反応液が透
明な二相になるまで反応を行い、Ｌ−グルタミン酸ジナ
トリウム塩溶液とした。次に、３０％水酸化ナトリウム
水溶液４０ｍ１と上記混合脂肪酸クロライド７２ｇを各
々滴下漏斗を通して同時に約４０分かけて滴下した。さ
らに水冷下で２時間攪拌すると白濁し一部結晶が析出し
た。次いで５０〜６０°Ｃで１時間加熱還流し、反応物
に水３００ｍＩｌを加え、６規定塩酸４０ｍ１でｐＨ１
に調整した。

混合脂肪酸し一グルタミン酸エステルを含む反応液中の
澄明なアセトン層を分取し、溶媒を留去してから、この
固形残渣を少量のエタノールに溶解し、無水硫酸ナトリ
ウム層に通してから不溶物を濾別した。この沈澱物を、
さらに大量のエタノールに希釈し、１０％水酸化ナトリ
ウム溶液でｐＨ１１に調整し、沈澱が生じたことを確認
してから、エタノールを留去して、混合脂肪酸し一グル
タミン酸ジナトリウムの白色の粉末状結晶８１ｇを得た
。

分析値 Ｉ　Ｒ：　ｖ、、Ｘ（ｃｍ−’）　１３００．１４２０
．１６５０．１５５０１０５０〜９４０トランス酸痕跡 Ｕ　Ｖ　：　２３３ｍμ　共役ジエン酸　５％２６８ｍ
μ　共役トリエン酸　０％ 過酸化物量：電位差滴定法　２３ｍｅｑ／ｋｇキャピラ
リーガスクロマトグラフィー二カーボワソクス２０Ｍ、
５０ｍ、２００℃加水分解して得た混合脂肪酸をジアゾ
メタンでエステル化した。アーティファクトは検出され
なかった（γ−リノレン酸５．７％、エイコサペンタエ
ンＭ　４．２％、ドコサヘキサエン酸２．０％）。

生成物は白色粉末で水に易溶性であった。

上記のようにして得られた混合脂肪酸し一グルタミン酸
ジナトリウム７０ｇと、局方グリセリン１８ｇを、注射
用蒸留水に混合して、全液量を０．１１にし、超音波洗
浄機にて完全に溶解させ、混合脂肪酸アミノ酸ジナトリ
ウムをＩＯＷ／Ｖ％含有する脂肪輸液を調製した。この
液を１４５℃で３秒間、超高温瞬間加熱（ＵＨＴ）殺菌
装置で殺菌後、殺菌した共栓付ガラスシリンダーに分注
した。この溶液は無色透明で、粘度は１０ｃｐｓ以下で
あった。この溶液を６ケ月室温に放置しても、また、−
２０℃に冷凍後解凍しても、何ら変化は認られなかった
。

この輸液は、生理活性の強いγ−リノレン酸、エイコサ
ペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸を含むので、成人病
の治療に有効である。

なお、急性毒性試験の結果も下記の通り問題がなかった
。体重８００ｇから１　ｋｇの週令の若いニワトリのオ
スを１群５匹として、先に調製されたＱｎ？（１゜の急
性毒性を求めた。投与方法は、１０弱ハ％に調整された
水溶液を１−７分の速度で腹腔内への経路で投与した。

ＬＤ５０は４６ｍ１／ｋｇであった。

実施例２ サフラワー油分解脂肪酸９０ｇとジホモ−γ−リノレン
酸６ｇとドコサヘキサエン酸６ｇを窒素気流下で計測し
配合した。この混合脂肪酸１０２ｇをヘキサン６２０−
に溶解し、オキサリルクロライド６２ｇを窒素気流下、
攪拌しながら滴下漏斗を用いて＝１０℃で微量ずつ滴下
し、滴下終了後Ｏ℃で一晩、攪拌を続けた。反応終了後
、未反応物と溶媒を減圧除去し、７５ｇの黄褐色液状の
混合脂肪酸クロライドを得た。

窒素雰囲気下でＬ−アスパラギン酸１３．４　ｇ　（０
，１モル）を６０％含水アセトン中に溶解した。その溶
液に撹拌下、水酸化ナトリウム１６ｇ（０，４モル）を
加えて水冷（２〜５℃）下で反応させた。反応液が透明
な二相になった後、Ｌ−アスパラギン酸ジナトリウム溶
液を得た。次に３０％水酸化ナトリウム水溶液２０ｍ１
　（０，１５モル）と上記混合脂肪酸クロライド３８．
７　ｇ　（０，１２モル）を各々滴下漏斗を通して同時
に約４０分かけて滴下した。さらに水冷下で２時間撹拌
すると、その溶液は白濁し一部結晶が析出した。次いで
５０〜６０℃で１時間加熱還流し、反応物に水３００ｍ
１を入れ、６規定塩酸４ＱｍｌでｐＨ１に８周整した。

混合脂肪酸し一アスパラギン酸エステルを含む反応液中
の透明なアセトン層を分取し、溶媒を留去してから、こ
の固形残渣を少量のエタノールに溶解し無水硫酸ナトリ
ウム層に通してから不溶物を濾別した。この沈澱物を、
さらに大量のエタノールに希釈し、１０％水酸化ナトリ
ウム溶液でｐＨ１１に調整し、沈澱が生じたことを確認
してから、エタノールを留去して、混合脂肪酸アスパラ
ギン酸ジナトリウムの白色の粉末状結晶３６．２ｇを得
た。

分析値 ■Ｒニジ１１．．　（ｃｍ−’）　１３００．１４２０
．１６５０．１５５０１０５０〜９４０トランス酸痕跡 ｔＪ　Ｖ　：　２３３ｍμ　共役ジエン酸　４％２６８
ｍμ　共役トリエン酸　０％ 過酸化物量：電位差滴定法　３２ｍｅｑ／ｋｇキャビラ
リーガスクロマトグラフィー：カーボワソクス２０Ｍ、
５０ｍ、　２００°Ｃ加水分解して得た混合脂肪酸をジ
アゾメタンでエステル化した。アーティファクトは検出
されなかった（ジホモ−γ−リノレン酸５．４％、ドコ
サヘキサエン酸５．６％）。

生成物は白色粉末で水に易溶性であった。

上記と同様にして得られたアシル化アスパラギン酸ジナ
トリウム１６０ｇと、局方グリセリン２０ｇを、注射用
蒸留水に混合して、全液量を０．８Ａとし、超音波洗浄
機で完全に溶解させ、アシル化アスパラギン酸ジナトリ
ウムを２０Ｗ／Ｖ％含有する脂肪輸液を調製した。この
液を実施例１と同様に冷凍後解凍しても、何ら変化は認
られなかった。また、急性毒性試験の結果も問題がなか
った。

生物学的活性 血小板凝集抑制作用 （１）実験方法 体重約３Ｋｇの雄の家兎８匹を４匹ずつ２群に分け、−
群には実施例１の輸液を、もう−群には対照として大豆
油乳剤を投与した。投与は１日目と４日目に、それぞれ
の液剤１００ｍＡ！を３０分以内で腹腔内投与し、７日
目に、耳静脈より採血した。

採取血液より多血小板血漿を作製し、血小板凝集メータ
ー４３０型（Ｃｈｒｏｎｏ−Ｌｏｇ−Ａｔ（Ｓジャパン
製）を用い、アゾンシンニリン酸（終濃度５μＭ）を血
小板凝集惹起物として血小板凝集能を測定した。

血小板凝集能は透過率の変化を測定し、最大凝集率％で
表現した。

（２）実験成績 第１表のごとく 油乳剤群に比し、 実施例１の輸液投与群では大豆 血小板凝集能は抑制された。

第１表

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 構成脂肪酸中にγ−リノレン酸およびジホモ−γ−リノ
   レン酸の一種以上とエイコサペンタエン酸およびドコサ
   ヘキサエン酸の一種以上とを含む混合脂肪酸から得られ
   るＮ−アシル化アミノ酸誘導体を含有することを特徴と
   する成人病治療用輸液。