JPH02503094A - アロエ製品の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 アロエ製品の製造方法 関連出願 本出願は、米国出願シリアル番号８６９．２６１号の一部継続であり、その全内 容および開示がここで参考として具体的に組み込まれる。前記米国出願シリアル 番号８６９．２６１号は、１９８６年６月２０日に出願され、１９８７年１月１ ５日に国際公開番号Ｗ　Ｏ８７／　０００５２のもとに公開された国際出願番号 Ｐ　ＣＴ　／　Ｕ　Ｓ　８６１０１３３５号に対応しており、その全内容および 開示もまたここに参考として具体的に組み込まれる。 前記米国出願シリアル番号８６９，２６１号は、１９８５年１２月１７日に出願 された米国出願シリアル番号８１０．０２５号（現在、放棄された）の一部継続 であり、これは１９８５年７月１２日に出願された米国出願シリアル番号７５４ ，８５９号（現在、放棄された）の一部継続であり、これは１９８５年６月２８ 日に出願された米国出願シリアル番号７５０，３２１号（現在、放棄された）の 一部継続であり、これは１９８４年９月１２日に出願された米国出願シリアル番 号６４９．９６７号（現在、放棄された）の一部継続であり、これは１９８２年 ５月７日に出願された米国出願シリアル番号３７５．７２０号（現在、放棄され た）の一部継続である。前記シリアル番号８６９．２６１号は、アロエ製品の製 造方法、それにより得られた製品およびその組成物という表題のものである。前 記シリアル番号８１０．０２５号はアロエ製品の製造方法および該方法によって 得られた製品という表題のものである。前記シリアル番号７５４．８５９号、こ の発明はアロエ植物を処理し、この植物の一部を取り出して局所用ならびに内服 用の組成物に処理する技術ならびにこのアロエの部分を含む組成物に関する。 ２、従来技術の説明およびその他の情報アロエ　ベラは広く信じられていたよう なサボテン植物ではなく、むしろユリ科の仲間である。約３６０種のアロエ植物 が知られている。バーディング、アロエズ　オブ　ザある。それらは暑い乾燥し た地方に生育するようであり、地中海、中東、アフリカ、中国、日本、メキシコ およびアメリカ合衆国南部から広く散在している。その医薬特性のために用いら れるいくらかの重要な種に、アロエ　パルＡ、アフリカーナ（Ａ、　ａｆｒｉｃ ａｎａ）、Ａ、フェロックス（Ａ、　ｆｅｒｏｘ）およびアロエ　ベリイ（ＡＩ Ｏｅ　ｐｅｒｒ　＋）がある。 レイノルズ　アロエズ　オブ　トロピカル　アフリカアンド　マダガスカル（虹 並ｓ　ｏｆユ原担」１刃ｒｉｃａ　ａ熊胆並且閉Ｌ）　、ザ　トラスティーズ（ Ｔｈｅ　Ｔｒｕｓｔｅｅｓ）、アｏｘ記録基金（Ｔｈｅ　Ａｌｏｅ　Ｂｏｏｋ　 Ｆｕｎｄ）　、ババネ　スワジスミラーは、広く用いられ、いわれるところの最 も効果的な治療力のため、「真のアロエ」として一般的に認められているが、日 本ではＡ、アルボレッセンス　ミラー（８゜ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ　Ｈｉ　ｌ 　Ｉｅｒ＞が胃腸疾患から水虫までの範囲にわたる種々の病気のための民間治療 薬として、伝統的に用いられてきた。 アロエ　ベラは、ロゼツト模様で茎に結合しているふくらんだ緑の葉を持つ多年 生植物である。成熟した植物の葉は縁に沿ってのこぎり様の鋭い先を持ち、長さ ２５インチより大きくなりうる。 第１図および第２図に示したように葉を横断的に切ると、厚いクチクラで覆われ た表皮３の外壁が見える。表皮３の下に、柔組織として知られている葉緑組繊細 胞とより薄い壁で仕切られた細胞とに区別される葉肉がある。梁組ｍ細胞は透明 な粘液質のシェリー１を収容する。内に維管束鞘細胞を有する維管束２は緩下剤 特性を有する黄色の液汁を含み、また２つの主な細胞にはさまれている。植物細 胞で代謝副産物として生成されるシュウ酸カルシウムの針状結晶が、葉の中央部 分で主に見つかる。 アロエ　ベラは２つの主な液源、すなわち黄色のラテックス（滲出液）と透明ゲ ル（粘液）を含んでいる。アロエバルバデンシス　ミラーの葉の乾燥させた滲出 液をアロエという、商業的名称はクラカオ　アロエ（Ｃｕｒａｃａｏ　ａｌｏｅ ）である。それは主としてアロイン、アロエーエモジンおよびフェノールからな る。ブルース（Ｂｒｕｃｅ）、サウス　アフリカン　メディカル　ジャーナル（ Ｓｏｕｔｈ　Ａｆｒｉｃａｎ　ＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌ＞　、　４１　： 　９８４　　（１９６７）　：モｏ　−（ｓｏｒｒｏｗ）ら。 アーキ　ダーマトロジ−（Ａｒｃｈ、　Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇ　）、ユ耳：１０ ６４−１０６５　（１９８０）　、サレク（Ｓａｌｅｋ）ら、コロージョンプリ ペンション＆コントロール（Ｃｏｒｒｏｓｉｏｎ　Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ＆　ｃ ｏｎｔｒｏｌ　）　、　９−１０　（１９Ｂ３）　；　７ツプ（）ｌａｐｐ）ら 、ブランクメゾイカ（Ｐｌａｎｔａ　）ｌｅｄｉｃａ　）　、　１８：　　３６ １−３６５（１９７０）　；ランワルド（Ｒａｎｗａｌｄ）、アーキ　７フー７ ：７０ジー（紅０．■シｌ弘匣互肛）、川：　　４７７−４７８　　（１９８２ ）　。 アントラキノン類およびそのグリコシド類を含む多くのフェノール類が、薬剤的 に活性であることが知られている。 ブルース（８ｒｕｃｅ）、エクセルサ（ＥＸＣｅｌＳａ）旦：５７−６８（１９ ７５）　、スガ（ｓｕｇａ　）ら、コズメティック　アンド　トイレタリーズ（ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ　ａｎｄ　Ｔｏｉｌｅｔｒｉｅｓ）　、　９８：　１０５−１ ０８（１９８３）　。 その植物の柔組織細胞からの粘液質のシェリーをアロエベラ　ゲルという、ゲル が不適当な処理技術によって汚染されなければ、分解したり、ゲルの変色の原因 となるアントラキノンは通常存在しない。 アロエ　ベラ　ゲルは、約９８．５重量％水である。全固形分の６０％より多く が炭水化物起源のポリサッカライドからできている。有機酸および無機化合物、 特にシュウ酸カルシウムが固形分の残余を成す。 アロエ植物の葉全部、滲出液および新鮮なゲルが、人間の種々の苦痛のために用 いられてきた。医薬の治療薬としてそれを使用した証拠は、紀元前４００年のエ ジプト人にさかのぼることができる。アロエ　ベラはまた死体に防腐保蔵処理を 施し、かつ死を引き起こすものから死体の防腐保蔵処理者を保護するために用い られた。他の初期の文明はアロエ　ベラを、皮膚の手入れ、虫に刺されたりくわ れたりした傷の手当て、かき傷の処置、傷の治療、髪が失なわれたときのためや 下剤として、また潰瘍化した皮膚のために用いられた。それは駆虫剤として、下 剤として、健胃剤として、多くの文化の伝統的な薬であり、そしてとりわけ癩病 、火傷およびアレルギー性の病気のために用いられた。コール（ｃｏｌｅ）ら、 アーキブス　オン　ダーマトロジーアンド　シフイロロジー（Ａｒｃｈｉｖｅｓ 　ｏｆ　Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇ　　ａｎｄＳ　　ｈｉｌｏｌｏ　　）　、　４７ ：２５０（１９４３）　ニーｔブラ（ＣｈＯｐｒａ）ら、グロサリー　オン　イ ンディアン　メデイシナル　プランツルリサーチ（Ｃｏｕｎｃｉｌ　ｏｆ　５ｃ ｉｅｎｔｉｆｉｃ　ａｎｄ　ＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＲｅｓｅａｒｃｈ）　、ニュ ー　プリー（ＮｅＷ　Ｄｅｌｈｉ）　；シップ（ｓｈｉｐ）。 ジャーナル　オン　アメリカン　メディカル　アソシエーラス　オン　メディカ ル　ブラソフ　オン　ミドル　アチャールズ　Ｃ，）マス　Ｅ　Ｄ　、　（Ｃｈ ａｒｌｅｓ　Ｃ，ＴｈｏｍａｓＥＤ、）、　７８°−８０（１９８１）　；ディ ーズーマーチンズ（Ｄｉｅｚ−Ｍａｒｔｌｎｅｚ）　＋　ラ　ザビラ・（Ｌａ　 Ｚａｂｉｌａ）、　　コミユニカド阻４６ソブレ　レクルソス　ビオテイコス　 ポテンシャレス　デ（Ｍｅｘｉｃｏ）　　（１９８１）　　；ダスツール（Ｄａ ｓｔｕｒ）　＋　メデイシナル　ブラソフ　オン　インディア　アンド　パキス タンタラポレバラ　サンズ（Ｔａｒａｐｏｒｅｖａｌａ　５ｏｎｓ）＆　Ｃｏ、 、プライベー）　（Ｐｒｉｖａｔｅ）　Ｌ　ｔｄ、、ボンペイ（Ｂｏｍｂａｙ） 　　１Ｂ−１７（１９Ｂ２）。 アロエ　ベラは、「医薬」または「治療性」を持つとして素人の支持（ｌａｙ　 ａｃｃｅｐｔａｎｃｅ）の長い歴史を享受してきた。最近数年にわたって、科学 的基準を満たした多くの本や論文が、アロエ　ベラについて書かれてきた。アロ エベラ会議（Ａｌｏｅ　Ｖｅｒａ　Ｃｏｕｎｃｉｌ）のような組織および公認さ れた医学会が医者１．獣医および他の科学者の発表や事例史を通して「アロエ現 象」を信じてきた。アロエ　ベラは皮膚科学、特に放射線に原因する皮膚病の治 療の領域において広く重要な役割を演じてきた。マツキー（Ｍａｃｋｅｅ）　。 Ｘ−レイ　アンド　ラジウム　イン　ザ　トリートメント第３版、リー　アンド 　フエビガー（Ｌｅａ　ａｎｄ　Ｐｅｂｉｇｅｒ）　。 フィラデルフィア（ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ）　、　　：（１９−３２０（１ ９３ｇ）　　；ロバルティ　（Ｒｏｖａｌｔｉ）ら、インダストリアル　メデイ シン　アンド　サージエリ−（Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ　Ｍｅｄｌｃｉｎｅ　ａｎ ｄＳｕｒｇｅｒｙ）　、　２８：　　３６４−３６８（１９５９）　　；ザワリ ー（Ｚａｖａｈｒｙ）ら、クオテーションズ　フロム　メディカル　ジャーナル ズ　オン　アロエ　リサーチ（Ｑｕｏｔａｔｉｏｎｓ　Ｆｒｏｍ　Ｍｅｄｌｃａ ｌＪｏｕｒｎａｌｓ　ｏｎ　Ａｌｏｅ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）　、編集マックス（ Ｍａｘ）　Ｂ。 スコーセン（Ｓｋｏｕｓｅｎ）、アロエ　ベラ　リサーチ　インスティチュー） 　（Ａｌｏｅ　Ｖｅｒａ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｉｎ５ｔ１ｔｕｔｅ）　、　　シ ブレス（Ｃｙｌ）ｒｅｓｓ）、カリフォルニア（Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）、　１ ８−２３（１９７７）　；セラ（Ｃｅｒａ）ら、ジャーナル　オン　ジ　アメリ ６３３−６３８（１９８２）。殺ウイルス剤、殺菌剤および防カビ剤として消化 系統の問題における、また婦人科学的病気における医学的適用について記録した 一連の科学文献は広範囲であり、グリンドリー（Ｇｒｉｎｄｌｅｙ）とレイノル ズ（Ｒｅｖｎｏｌｄｓ）により一十分に概説された〔ジャーナル　オンエトノフ ァーマコロジ＝（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　　Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇ ｙ）　。 旦：　　１１７−１５１　（１９８Ｂ））　。 アロエにおいて見出された化学品の重要性はまた、それらが誰にも知られている 国定薬局方に載せられてきたという事実により示される。　Ｕ、　Ｓ、ファーマ コベイア（Ｕ、　Ｓ、　Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ）　、第２０改訂版、ザ　ナ ショナルフォーミニラリ−（Ｔｈｅ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ） 　、第１４版。 ユナイテッド　ステイツ　ファーマツペイアル　コンベンシラン（υｎ１ｔｅｄ 　５ｔａｔｅｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ　Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ）　。 Ｉ　ＤＣ，、Ｄ　”７クビル（Ｒｏｃｋｖｉ　ｌ　Ｉｅ）　、メリーランド、　 １９８０年７月１日。しかし、υ、Ｓ、ファーマコベイアはアロエの黄色の液汁 の薬効部について述べているが、粘液については述べていない、新鮮な保存され ていないゲルは約９８．５〜９９．２％が水である。水を除去した後に残ってい る全固形分は０．８から１．５％の範囲にある。固形分の主な構成成分は、粘液 、糖、繊維、タンパク質、灰分、脂肪、アロインおよび樹脂を含む、ロブソン（ Ｒｏｂｓｏｎ　）ら、ジャーナル　オンバーン　ケア　リハビリテーション（Ｊ ｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ＢｕｒｎＣａｒｅ　Ｒｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ）　、 　　３：　　１５７−１６３（１９８２）　、酵素、有機酸、無機塩、アミノ酸 およびアルカロイドを含む組成物の報告がなされている。ロウ（ＲＯＷｅ）ら、 ジャーナル　オン　ジ　アメリカン　ファーマシューティ力ル　アソシエーシａ 　ン（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕ ｔｉｃａｌＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）　、　３０：　　２Ｂ２〜２６６（１９４ １）　；　ｏボッ（Ｒｏｂｏｚ）ら、ジャーナル　オン　ジ　アメリカン　ケミ カル　ソサエティ（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｃｈｅ ｍｉｃａｌ　５ｏｃｉｅｔｙ）　。 ７０：　３２４ｇ−３２４９（１９４８）　　；ウォーラー（Ｗａｌ　Ｉｅｒ） ら、プロシーディングズ　オン　オクラホマ　アカデミ−オンサイエンス（Ｐｒ ｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　Ｏｋｌａｈｏｍａ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆＳｃｉｅ ｎｃｅ）　、　５８　：　６９−７６（１９７８）。いかにして葉を処理するか に依存して、粘液と糖が脱水したゲルの主成分である。 みつかった糖は、ガラクトース、グルコース、マンノース、ラムノース、キシロ ースおよびウロン酸である。相反する報告が見られるが、粘液は主にマンナンと グルコマンナンからなる。エベレンデュ（Ｅｂｅｒｅｎｄｕ）ら、ザケミカル　 キャラクタリゼーション　オン　キャリシン（Ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｈ ａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｌｏｎ　ｏｆ　Ｃａｒｒｉｓｙｎ　　（登録商標））（ 調製）；マンダル（Ｍａｎｄａｌ　）ら、カーボハイドレート　リサーチ（Ｃａ ｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）、　　８７　：　　２４９−２５６ （１９８０ｂ）　；　ｏボッ（Ｒｏｂｏｚ）ら、ジャーナル　オン　ジアメリカ ン　ケミカル　ソサエティ（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅＡｍｅｒｉｃａｎ　 Ｃｈｅｍｉｃａｌ　５ｏｃｉｅｔｙ）　、　７０　：　３２４８−３２４９（１ ９４ｇ）　；ゴーダ（Ｇｏｖｄａ）ら、カーボハイドレート　リサーチ（Ｃａｒ ｂｏｈｙｄｒａｔｅ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）　、　７２　：　２０１−２０５（１ ９７９）　；セガル（Ｓｅｇａｌ）ら、ロイディア（Ｌｌｏｙｄｉａ＞、　３１ ：　　４２３（１９６ｇ）。 現在、アロエ　ベラにおける活性物質の同一性に関する論争は静まっていない。 それ故に、ゲルに依存する成分と滲出液に見出された成分を明確に区別すること が重要である。ゲルの比較的多い部分は、少量の種々の他の化合物を含む主とし てポリサッカライド質の粘液である。観察される活性のいくつかにおいて、ポリ サッカライド主成分と他の成分との間の何らかの相乗作用（ＳＶｎｅｒｇｉＳｔ ｉＣａｃｔｉｏｎ）がありうると考えられる。ロイング（Ｌｅｕｎｇ）、エクセ ルサ（Ｅｘｃｅｌｓａ）　　８　：　６５−６８（１９７８）　：　ヘンリー（ Ｈｅｎｒｙ）　。 コズメティック　アンド　トイレタリーズ（Ｃｏｓｍｅｔｉｃ　ａｎｄＴｏｉｌ ｅｔｒｉｅｓ）　、　９４　：　４２−５０（１９７９）、例えば、傷の治療に 効果的な成分は、傷薬酸（ｔｒａｕｌｌｌａｔｉｃ　ａｃｉｄ）　（７レイタグ （Ｆｒｅｙｔ、ａｇ）　、　７７−？ライ−（ＰｈａｒｍａＺｉｅ）、　　９　 ：　７０５（１９５４））およびポリサッカライドの一種でありうるこＡｂｓｔ ｒａｃｔｓ＞　、　９３：　１３０７５（１９７９）　、上記のマツキー（）ｌ ａｃｋｅｅ）は、ゲル（外皮や滲出液ではなく）は、放射線火傷の治療に有益な 効果の原因となることを記し、そして彼は効果的な治療のために新鮮な葉を用い ることの重要性を強調した。ポリサッカライドは、時間とともに分解する。 そしである分子量サイズが特定の薬理学的応答を引き出す他の成分からの公知の 相乗作用的助力なしに薬理学的および生理学的活性を示すポリサッカライドにつ いて多くの例が文献にある。オオノ（０ｈｎｏ　）ら、ケム　ファーム　プル（ Ｃｈｅｍ、　　ＰｈａｒｌＩｌ、　　Ｂｕｌｌ）　、　３３：　２５６４−２５ ６８（１９８５）　：り一ボビシ（Ｌｅｉｂｏｖｉｃｉ）ら、ケム　パイオル　 インターラフ（１９８６）、；ウカイ（Ｌｌｋａｊ）ら、ケム　ファーム　プル （Ｃｈｅｗ、　Ｐｈａｒｍ、　Ｂｕｌｌ、）　、　　３１：　　７４１−７４４ （１９８３）　　：り一ボビシ（Ｌｅｉｂｏｖｉｃｉ）ら、アンチキャンサー　 リサーチ（Ａｎｔｌｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）　、　　５：　　５５３ −５５８（１９８５）　ｏ一般母集団における、特に血統的なコレステロール過 多血症（ｈｙｐｅｒｅｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｅｉｉａ）における脂肪過多血症（ ｈｙｐｅｒｌｉｐ１ｄｅｉ！ａ）は冠状動脈の心臓病および死と関連づけられる 。食物繊維の摂取量が高い国では、アテローム性動脈硬化症の発現は一般的では ない。トロウェル（Ｔｒｏｖｅｌ　Ｉ）ら編集、リファインド　カーボハイドレ ート　フード（Ａｃａｄｅｍｆｃ　Ｐｒｅｓｓ）、　　２０７（１９７５）ｏペ クチンおよびグアーは、正常者および脂肪過多血症患者においてコレステロール を低くすることが報告されている。ケイ（Ｋａｙ）ら、アメリカン　ジャーナル 　オン　クリニカル　ニュートリジョン（Ａｍｅｒ４ｃａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　 ｏｆ　Ｃ１１ｎｌｃａｌ　Ｎｕｔｒｌｔｉｏｎ）　、　３０　：１７１−１７５ （１９７７）　、　／’リエンジュの豆（Ｌｏｃｕｓｔ　ｂｅａｎ）のガムは、 マンノースとガラクトースからなるポリサッカライドであり、これは正常者およ び血統的コレステロール過多血症の人の場合にリポタンパク、コレステロールレ ベルを減少させた。ザボラル（Ｚａｖｏｒａｌ）ら、アメリカン　ジャー（１９ ８３）。炭水化物食にグアーガムを添加すると、正常者および糖尿病の人の両方 において、食後のグルコースの上昇を抑えた。ジエンキンズ（ＪｅｎｋｉｎＳ） ら、ランセット（Ｌａｎｃｅｔ）　、　　２：　　７７９−７８０（１９７７） 　、クール（にｕｈｌ）らは、グアーガムが妊娠しているインシュリン依存糖尿 病患者の血糖制御を示すことを証明した〔ダイアビーツ　ケア（Ｄｉａｂｅｔｅ ｓ　Ｃａｒｅ）　、　　６：　（２）　：　　１５２−１５４（１９８３）　） 。 ポリサッカライドの抗腫瘍活性は広く報告されて肛虹眞並」旦）から調製したポ リサッカライドは、腫瘍に対して宿主防御を増加させることが知られている。レ ティ（Ｒｅｔｈｙ＞ら、アヌアルス　オン　イムノロジー　ハンガジー（Ａｎｎ ｕａｌｓ　ｏｆ　　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇ　　Ｈｕｎｇａｒ　）　、　２１　：　 　２８５−２９０（１９８１）。ウィルスや腫瘍の侵入に対しての高程度の宿主 防御活性を引き出す、マツシュルーム、イースト又はバクテリア抽出物由来のポ リサッカライドについていくつかの報告がある。チハラ（Ｃｈｉｈａｒａ）ら、 ネイチャー　（Ｎａｔｕｒｅ）　、　　２２２：　　６８７（１９６９）：シュ ワルツマン（Ｓｃｈｗａｒｔｚｇｌａｎ）　、ブロク　ツク　イクスベ　バイオ ルメッド（Ｐｒｏｃ、　Ｓｏｃ、　Ｅｘｐｅｒ、　Ｂｉｏｌ、　Ｈｅｄ、）　、 　２９：　７３７（１９３２）　；レティ（Ｒｅｔｈｙ）　、　Ｉックス　イン ターナショナルコンブレス　オン　ミクロバイオロジー；モスクワ（Ｘ。 Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｎｇｒｅｓｓ　ｏｆ　）ｌｉｃｒｏｂｉｏｌ ｏｇ　；　ＭＯ３ＣＯＷ）　。 ６４２（１９６６）　、スズキ（Ｓｕｚｕｋｉ）らはまた、菌類、グリフォラ　 フロンドサ（Ｇｒｉｆｏｌａ　ｆｒｏｎｄｏｓａ）の培養した子実体（ｆｒｕｉ ｔｉｎｇ　ｂｏｄｉｅｓ）から抽出したポリサッカライド画分の抗腫瘍活性につ いて報告した〔ジャーナル　オン　ファーム　ディン（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　 Ｐｈａｒｍ、　Ｏｎ、）　、　　７：　４９２−５００（１９８４））　、両分 （ＧＦ−１）は、腹腔内（ＩＰ）、静脈内（ＩＶ）および腫瘍内（ＩＴ）投与し た時に、より高い阻害活性の等価レベルを示した。しかし、経口投与（ＰＯ）は 効果的でないことが報告された。ＧＦ−１はまた、マウスでメタ（）ｌｅｔｈ） Ａ繊維肉腫およびＭＭＡ６癌の固体形に対して、抗腫瘍活性を示した。レンチナ ン（ｌｅｎｔｉｎａｎ）はＧＦ−１に似た６−分枝Ｂ−１３−結合グルカンであ り、これはメタＡ繊維肉腫に対して効果がない。チホラ（Ｃｈｉｈｏｒａ）　、 抗腫瘍ポリサッカライド　レンチナン：総覧；「宿主防御機構の操作（Ｍａｎｉ ｐｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｏ５ｔ　ＤｅｆｅｎｓｅＭｅｃｈａｎｉｓｍ）」ニ アオキ（Ａｏｋｉ）ら編、エクセープタ　メゾイカ（Ｅｘｃｅｒｐｔａ　）ｌｅ ｄｉｃａ）　、化オランダ、　　１−１６（１９８１）　：ササキ（Ｓａｓａｋ ｉ）ら、カーボハイドレート　リサーチ（Ｃａｒｂｏｈ　ｄｒａｔｅ　Ｒｅ５ｅ ａｒｃｈ）　、　４７　：　９９−１０４（１９７６）　、合成した分校ポリサ ッカライドは腫瘍に対して生物活性を示すことが報告された。マツザキ（Ｈａｔ ｓｕｚａｋｉ　）ら、マクロモルケム（Ｍａｋｒｏｎ＋ｏ１．　Ｃｈｅ＋＋＋、 ）　、　　１８６：　４４９（１９８５）　、マツザキ（Ｈａｔｓｕｚａｋｉ　 ）らは、著しい活性を示す、アイポリ−ナツト（ｉｖｏｒｙ　ｎｕｔ）マンナン 由来の分校ポリサッカライドである。Ｂ−（１−４＞−Ｄ−マンノピラノースお よびＢ−（１−４）−結合グルコマンナンを合成した〔マクロモル　ケム（Ｈａ ｋｒｏｍｏｌ、　Ｃｈｅｗ、）　、　１８７　　：　　３２５−３３１（１９８ Ｂ＞　）　、ディクチオフォリア　イントウシアタフィッシュ（Ｄｉｅｔｙｏｐ ｈｏｒｉａ　Ｉｎｄｕｓｉａｔａ　Ｆｉｓｃｈ）の子実体から抽出した、部分的 にアセチル化された線状Ｂ−（１−３）−Ｄ−マンナンは抗腫瘍活性を示した。 ハラカンタイブのポリマーは、Ｂ−（１−４）　　−グルカンおよびヘミセルロ ース性ポリマーより高い抗腫瘍活性を示すので、抗腫瘍活性はポリマー主鎖の種 類およびその重合の程度に依存するようである。マツザキ（Ｍａｔｓｕｚａｋｉ ）ら、マクロモル　ケム（Ｍａｋｒｏｍｏｌ、　Ｃｈｅｎ＋、）　、　　１８７ 　：　３２５　−３３１（１９８Ｂ）。細菌の培養濾過液から得たＢ−（１−３ ）　　−グルカンのカルボキシメチル化誘導体は、確立されたサルコーマ１８０ 腫瘍から、誘導体の注入後２時間以内に重大な細胞損失を引き起こした。ババ（ Ｂａｂａ）ら、ジエー　オン　イムノファーマコロジー（Ｊ、　ｏｆ　Ｉｍｍｕ ｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ）　、　　８：５６９　−５７２（１９８Ｂ＞。 同じ著者は、その物質の注入による、多形核白血球での代償的な増加を観察した 。ところで、ベスタチン（ｂｅｓｔａｔｉｎ）は、免疫調節および抗腫瘍活性を 持つことが知られているジペプチドであり〔イシズカ（Ｉｓｈｉｚｕｋａ）ら、 ジャーナル　オン　アンチバイオティックス（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｎｔｌ ｂｌｏｔｉｃｓ）　、　３２：　６４２−８５２（１９８０）　）、これは腫瘍 発生にも多形核白血球の総数にも影響を及ぼさなかった。ババ（Ｂａｂａ）ら、 上記。 ヘパライン（ｈｅｐａｒａｉｎ）　（ジョレス（Ｊｏｌ　１ｅｓ）ら、アクタ１ ６：　　６８２−６８５（１９６０）　；スエ？ス（Ｓｕｅｍａｓｕ）ら、ガン （艶皿）、旦：　１２５　−１３０（１９７０））　、硫酸塩化したラミナラン （ｌａｍｉｎａｒａｎ）およびデキストランを含む硫酸塩化したポリサッカライ ドの抗腫瘍効果に′ついて多くの報告がある。ジョレス（ＪＯＩ　Ｉｅｓ）ら、 ブリティッシュ　ジャーナルイン　キャンプ−（Ｂｒｉｔｉｓｈ　Ｊｏｕｒｎａ ｌ　ｏｆ　Ｃａｎｃｅｒ）　、　１７：１０９−１１５（１９６３）、ヤマモト （ｙａｍａｍｏｔｏ）らは、さらに硫酸塩化することにより、フコイダン（ｆｕ ｃｏｉｄａｎ）画分の抗腫瘍活性を高めることを報告した〔ジャパン　ジャーナ ル　オン　エクスペリメンタル　メディシン　（Ｊａｐａｎ　ＪＯｔｌｒｎａｌ ｏｆ　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ＞　、　５４：　１４３　 −１５１（１９８４））。 硫酸塩化した生成物はＬ　−１２１０白血病に対する活性を示した。著者らは、 抗腫瘍活性の機構は部分的に、腫瘍細胞と中皮細胞（ｍｅｓｏｔｈｅｌｉａｌ　 ｃｅｌｌ）との間の静電気的反発作用から生じるＬ　−１２１０細胞の侵入生長 の阻害によるものでありうると仮定した。ヤマモト（Ｙａｍａｍｏｔｏ）ら、上 記、ＴＩＬ酸塩基を持つ所すサッカライドはまた、ヒトのＴ細胞マイトゲン（ｍ ｉｔｏｇｅｎ）およびネズミ科のポリクローナルＢ細胞活性化剤であることが報 告されている。スガワラ（ｓｕｇａｗａｒａ）ら、ミクロバイオロジカル　イム ノロジー（Ｈｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇ　）　、　２ ８　：　８３１−８３９（１９８４）。 一般に、硫酸塩基を有する高分子量のホモポリサッカライドはこれらの特性を持 っている。ドリーズ（Ｄｏｒｒｉｅｓ）ら、ヨーロピアン　ジャーナル　オン　 イムノロジー（Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇ 　）　、　　４：　（１９）　：スガワラ（Ｓｕｇａｗａｒａ）ら、セル　イム ノロジー（辿几匹匣江ｕ＞　、　７４　：　　１６２−１７１（１９８２）　。 イーストのサツカロマイセス　セルビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍ　ｃｅｓ　ｃｅ ｒｂｉｓｉａｅ）から抽出したグルカンは細胞性および体液性免疫を調節するも のであることが報告された。ウーレス（Ｗｏｏｌｅｎ）ら、サイエンス（Ｓｃｉ ｅｎｃｅ）　。 １４２　：　１０７Ｂ−１０８０（１９６３）。ポリサッカライドはまた、ネズ ミ科の多能性造血幹細胞、顆粒球−マクロファージコロニー形成細胞および骨髄 性および赤血球コロニー形成細胞の増殖を刺激した。ボスピシル（Ｐｏｓｐｉｓ ｉｌ）ら、エクスベリエンティア（Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ）　、　３８　：　 １２３２−１２３４（１９８２）　；ブルガレタ（ＢＵｒｇａｌｅｔａ）ら、キ ャンサー　リサーチ（ＣａｎＣｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ）　、　３７　：　１７３ ９−１７４２（１９７７）。マイシン（Ｒａｉｓｉｎ）らはまた、χ線にさらさ れることに対するネズミ科の造血幹細胞の保護を引き起こし、それによってその ようにさらされたマウスの死亡率を減少させる、ポリサッカライドのＩＶ投与を 報告した〔ラジエーション　リサーチ（ＲａｄｉａｔｉｏｎＲｅｓｅａｒｃｈ） 　、　１０５　：　２７６−２８１（１９８６）　）　。 セルジエリッド（Ｓｅｌｊｅｌ　ｉｄ）らは、不溶性またはゲル形成性グリカン がインビトロ（ｉｎ　ＶｉｔｒＯ）でマクロファージを活性化し、一方対応する 可溶性のグリカンは活性化しないことを観察した〔エクスペリメンタル　セル　 リサーチ（Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｃｅ１ｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）　、　１ ３１　：　１２１（１９８１）　）　。 彼らは、グリカンが単核食細胞に提示される方法が活性化のために決定的である と仮定した。ボグワルド（Ｂｏｇｗａ　Ｉ　ｃｌ　）らは、インビトロでマクロ ファージに刺激的効果を持つグリカンを固定した〔スカンド　ジャーナル　イン 　イムノロジー（Ｓｃａｎｄ、　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏ　　 ）　、　２０：　　３５５−３６０（１９８４））。これにより著者らは、グリ カンの固定したまたは立体的配置の程度がインビトロでのマクロファージへの効 果に決定的であると信することとなった。カンジダアルビカンス（Ｃａｎｄｉｄ ａ　ａｌｂｉｃａｎｓ）から単離した精製ポリサッカライドは人間の末梢血液リ ンパ球によりインビトロでの抗体応答を引き起こした。ウィルツ（Ｗｉｒｚ）ら 、２０９（ｉ９８４）　、正常およびカンジダ感染個体の血清中の抗カンジダ抗 体の間には著しい差があった。ウィルツ（ＷｉｒＺ）　、上記。 ポリサッカライドおよびペプチドに結合したポリサッカライドの抗ウィルス活性 が観察された。スズキ（ＳＵＺｕｋｉ）体から抽出したペプチドマンナン（ＫＳ −２）の抗ウィルス作用を報告した。経口（ＰＯ）投与および腹腔内（ＩＰ）投 与のいずれも、ウィルス感染に対してマウスを保護する最大血清インターフェロ ン力価を増加させる結果となった。 これは、マウスに静脈内（ＩＶ）または腹腔内（ＩＰ）投与した場合のみインタ ーフェロンのより高い力価を引き起こすデキストランホスフェート（ＤＰ−４０ ）　　［スズキ（Ｓｕｚｕｋｉ）ら、ブロク　ツク　エクスブ　パイオル　メッ ド（Ｐｒｏｃ、　Ｓｏｃ、　Ｅｘｐ、　Ｂｉｏｌ、　Ｍｅｄ、）、　１４９：　 １０６９−１０７５（１９７５））および９−メチルストレブトイミドン（９− ＭＳ）（サイトウ（Ｓａｉｔｏ）ら、アンチミア　エージェント＆ケモセラピー （Ａｎｔｉａｉｌｅｒ　Ａｇｅｎｔ　＆　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ）　、　　 １０　：　１４−１９（１９７６）　）とは異っていた。 アロエ　ベラ　ゲルの抗炎症活性は、口頭の証言および尊重されている科学雑誌 の両方により広く報告されてきた。ルベル（Ｒｕｂｅｌ）は、アロエ　ゲルの抗 炎症効果の可能な機構について十分論じた〔コスメティックス　アンド実体から 抽出したポリサッカライドにおける抗炎症活性にカライドは、浮腫を引き起こす カラギーナンでの著しい阻害効果を証明した。ポリマーの１つであるＯ−アセチ ル化−Ｄ−マンナン（Ｔ　−２−ＨＮ）は、さらに、フェニルブタシンより火傷 の痛覚過敏症におけるより顕著な阻害効果を証明した。ウカイ（Ｕｋａｌ）ら、 上記。ポリサッカライドがタンパク質および脂質から遊離していると言われる事 実は、抗炎症効果がアセチル化されたマンナンのみによることを強く示唆してい る。他の研究者達はまた、複合ポリサッカライド〔サエキ（５ａｅｋｉ　）ら、 ジャパン　ジェー７ｙ−７：７Ｄジー（Ｊａｐａｎ　Ｊ、　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ ｏ　　）、　２４：　１０９−１１８（１９７４）　）　、グリコプロティン〔 アリタ（Ａｒｉｔａ）ら。 ジエー　ファーマコロジー（ム」厘ユ匹復匹狽、２４：８６１−８６９（１９７ ４）　）および硫酸塩化したポリサッカライド〔口片（ＲＯＣｈａ）ら、バイオ クミ力ル　ファーマツロジ−（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏ 　　）　、　１８：　１２８５−１２９５　（１９６９）　）の抗炎症効果につ いて報告した。 薬理学的および生理学的活性を証明するポリサッカライドの文献報告は、よく尊 重される科学雑誌のページへ殺到し続けている。それ故に、アロエ　ベラの粘液 質のゲルが本質的にポリサッカライドであり、これがアロエ　ベラの医薬特性に 秘密を持つことは非論理的ではない。ポリサッカライドがグルコマンナン、マン ナン、ペクチンまたはいくつかの他の組成物であるかどうかについての不一致は 、化学的精製段階の結果である０本発明によるアロエの製造により、部分的にア セチル化されたポリマンノースが薬理学的活性を有する主要ポリサッカライドと して一貫して単離された。ヤギ（ｖａｇ　ｔ　）らは、少し変形した抽出法を用 いて、アロエ　アルボレッセンス　ミラー　バー　ナタレンシス（Ａｌｏｅ　ａ ｒｂｏｒｅｓｓｅｎｓ　Ｍｉｌｌｅｒ　ｖａｒ、　ｎａｔａｌｅｎｓｉｓ）から アセチル化されたマンナン（アロエマンナン）を単離した〔ブランク　メゾイカ （Ｐｌａｎｔａ　Ｈｅｄｉｃａ）、　３１　：　１７−２０（１９７７）　）　 、　Ｌかし、オボドバ（０ｖｏｄｏｖａ）は、同じア’ｏｘ種の主成分としてペ クチンをより早くに単離しな〔キムプライアー　ソエディン（Ｋｈｉｍ、　Ｐｒ １ｏｒ、　５ｏｅｄｉｎ）　、　８３：９３８３３（１９７５）　）。 発明の要約 本発明はアロエ植物中の活性化学物質をアロエの梁全体から物理的に抽出する方 法に向けられている。この化学物質は実質的に非分解性であり、定められた量で 投与されることができる。 本発明はまた、上記した方法により生成した形でのアロエ植物中の活性化学物質 に向けられている。この活性化学物質は、実質的にアセチル化されたマンノース モノマーの実質的に非分解性の凍結乾燥した線状ポリマーであることが見出され た。マンノースモノマーは好ましくはβ（１−４）結合により互いに結合される 。この活性化学物質は、分析化学の手法により、測定され、標準化され、そして 特徴づけられた。 ここで使用されたような用語「活性化学物質」とは、アロエ　ベラの傷の治療性 および他の有益な特性の原因となる物質を意味する。ここで使用されたような用 語「実質的に非分解性」とは、２年間に亘り分子量の減少が５％未満である物質 であって、かつ２年間に亘りその生物活性を９５％より多く維持する物質を意味 する。ここで使用されたような用語「実質的にアセチル化されたマンノースモノ マー」とは、部分的にまたは実質的に完全にアセチル化されたマンノースモノマ ーを意味する。 本発明の方法は、アロエ植物の葉から、アロエ植物中の活性化学物質を抽出する ための１つの方法であり、少なくとも以下の工程を基本的に含む： （ａ）アロエの葉を殺菌性溶液で洗浄して、実質的にすべての表面の汚れとバク テリアを除去すること；（ｂ）前記洗浄した葉から、少なくとも第１の端部を除 去すること； （Ｃ）前記の切断し洗浄した葉からアントラキノンに富む液汁を排液し、保存し 、採集すること； （ｄ）前肥葉から外皮を除去して実質的にアントラキノンを含まないアロエ　ゲ ル　フィレットを製造すること；（ｅ）前記実質的にアントラキノンを含まない アロエ　ゲルフィレットを挽きそして均質化して、実質的にアントラキノンを含 まない、可溶化物を有するアロエジュースを製造すること； （ｆ）アロエジュースに、水溶性低級脂肪族極性溶媒を添加して活性化学物質を 析出させ、それにより不均一溶液を形成させること； （ｇ）不均一溶液から、水溶性低級脂肪族極性溶媒および可溶化物を除去して析 出した活性化学物質を単離すること；および （ｈ）析出した活性化学物質を乾燥すること。 この技術分野の当業者は、いかなる可能な手段でも、アロエの葉から可溶化物を 有するアロエジュースを得ることができ、次いでこのジュースを工程（ｆ）、（ ｇ）および（ｈ）に供して活性化学物質を抽出することができることを認識する であろう。 確かにこの技術分野の当業者は、工程（ｂ）、　（ｃ）および（ｄ）に替えて代 わりに（ｂ）洗浄したアロエの葉を砕きそして（ｅ）砕いた葉を透析して好まし くない両分、すなわちアントラキノン、無機物および酸、ならびに外皮を化学的 に除去して実質的にアントラキノンを含まないゲルを生成し、次いで工程（ｅ） 　−（ｆ）　、　（ｇ）および（ｈ）に供して活性化学物質を抽出することがで きるということを認識するであろう。 この技術分野の当業者はまた、工程（ｂ）　、（ｃ）　、　（ｄ）および（ｅ） に替えて代わりに洗浄したアロエの葉を砕きそして可溶化物を有するアントラキ ノンに富んだアロエジュースを押し出し、次いでアロエジュースを工程（ｆ）、 　（ｇ）および（ｈ）に供して活性化学物質を抽出することができるということ を認識するであろう。活性化学物質は、アントラキノンおよびイオンが水溶性で あり、液体溶媒相に残り、かつ析出しないので、この方法によりアントラキノン および有害なイオンから効果的に分離される。 この技術分野の当業者はまた、工程（ｂ）　、　（Ｃ）　、　（ｄ）および（ｅ ）に替えて代わりに洗浄したアロエの葉全部を挽き、有するアントラキノンに富 んだアロエジュースを生成することができることを認識するであろう。次いでア ロエジュースを工程（ｆ）　、　（ｇ）および（ｈ）に供して活性化学物質を抽 出することができる。活性化学物質は、上記した理由のためにこの方法によりア ントラキノンおよび有害なイオンから効果的に分離される。 この技術分野の当業者は、アロエ植物の葉からアロエ植物中の活性化学物質を抽 出するための別の方法が以下の工程を含むことを認識するであろうミ“ ａ）アロエの葉を殺菌性溶液で洗浄して実質的にすべての表面の汚れとバクテリ アを除去すること；ｂ）前記葉から外皮を除去して、アロエ　ゲル　フィレット を製造すること； Ｃ）前記アロエ　ゲル　フィレットを挽きそして均質化して、可溶化物を有する アロエジュースを製造すること；ｄ）アロエジュースに、水溶性低級脂肪族極性 溶媒を添加して活性化学物質を析出させ、それにより不均一溶液を形成させるこ と； ｅ）不均一溶液から、水溶性低級脂肪族溶媒および可溶化物を除去して、析出し た活性化学物質を単離すること；および ｆ）析出した活性化学物質を乾燥すること。 上記したように、アントラキノンおよびイオンが水溶性であり、液体溶媒相に残 り、かつ析出しないので、活性化学物質はこの方法により、アントラキノンおよ び有害なイオンから効果的に分離される。 ここで用いられているように「実質的にすべての表面の汚れとバクテリア」の除 去とは（１）残存する汚れが葉の重量の０．１重量％未満となる程度まで汚れを 除去すること、および（２）残存する表面のバクテリアが葉１ｇ当り１００個未 満となるように表面バクテリアを殺すことを意味している。 さらに私の好ましいプロセスは、さらにアロエジュースもしくはアロエ　ベラ画 分を浸透圧的に調節するためにあるいはアントラキノンの濃度をさらに５　ｐｐ ｍ未満あるいはさらに１００重量ｐｐｂ未満にさえ引下げるために限外濾過の工 程を含むことができる。 これらの工程は加工業者が大きな葉あるいは１年未満の小さな葉さえを使用する ことを可能にする。というのは成熟した葉に見られるポリマーサイズがより小さ い未成熟の葉から選別され処理され得るからである。 このプロセスの利点の１つは、強風や採集方法が適切でなかったことにより使用 不可能と従来は考えられていた損傷した葉を処理することができること、および 望ましくない汚染物を透析によって除去することができることである。 この限外濾過（透析）工程は膜技術を含んでいる。この膜技術は切断されたアロ エの葉の状態に依存して、異なったポアサイズを有するフィルターの選択を可能 にし、次のいかなる組合せも達成することができる：（１）必要な場合にはアロ エ　ベラ　ゲルから水と塩を分離する小さなポアサイズのフィルター（好ましく は約１００ダルトン）。 （２）必要な場合にはアロエ　ベラ　ゲルから酸を分離することができる大きな ポアサイズのフィルター（好ましく（３）必要な場合にはアロエ　ベラ　ゲルか ら黄色い液汁成分を分離することができるさらに大きなポアサイズのフィルター （好ましくは約２０００ダルトン）。 （４）およびゲルマトリクスポリマーを分間し、分子量によってこれらを分割す ることができるさらに大きなポアサイズのフィルター（好ましくは約１０，００ ０〜１００．０００ダルトン）。 限外濾過装置としてはロミコン　４−カラム（ロミコン社、１００　　カミング スパーク、ウォーバーン、　ＨＡ　０１８０１゜モデル　ＮαＨＦ４　ＳＳＳ　 、メンブランクイブＰ）Ｉ　５０　、メンブランＮ（ｌＨ５２６，５−４３５− ４３−ｐ　（Ｒｏｉｉｃｏｎ　４−ｃｏｌｕｍｎ　（Ｒｏｍｉｃｏｎ　Ｃｏ、。 ｔｏｏ　Ｃｕ＋ｎｎ＋ｉｎｇｓ　Ｐａｒｋ、　Ｗｏｂｕｒｎ、　ＨＡ　０１８０ １．　）ｔｏｄｅｌ　Ｎｏ、ＨＦｄＳＳＳ、）ｌｅｍｂｒａｎｅ　Ｔｙｐｅ　Ｐ Ｈ５０，）ｌｅｍｂｒａｎｅ　Ｎｏｓ、　Ｈ５２６，５−４３５−４３−ｐ　） が推奨される。 別の好ましい実施態様として、このプロセスの洗浄工程は前記フィレットを砕く のに先立ってタンブラ−ウオッシャ−中で実質的にアントラキノンを含まないア ロエ　ゲル　フィレットを洗浄することを含むことができる。 アロエ　ベラ　ゲルから活性物質を抽出する上記した方法のすべての間に、少量 の有機物質および無機物質が生成物といっしょに析出することが見出される。無 機塩の多い両分はシュウ酸カルシウムを含む。シュウ酸カルシウムのような無機 塩の存在は生成物のコンシスチンシーのため、および健康上の理由で除去される かまたは少なくとも最少限に押えなくてはならない。アルコールの添加に先立つ てゲルのｐＨを約３．０から約３．５に調整するために有効量の鉱酸を添加する ことにより、生成物が実質的により低い濃度のシュウ酸塩および他の無機塩類を 有するという結果になることが、驚くべきことにここで見出された。したがって 、アロエ植物の葉からアロエ植物中の活性化学物質を抽出するための上記の方法 のすべてにおいて、ゲルのｐＨは、アルコールの添加に先立って約３．０から約 ３．５に調整されることが好ましい。 好ましくは、アロエ植物の葉からアロエ植物中の活性化学物質を抽出する上記す べてのプロセスにおいて、１容量のアロエジュースに対して４倍量の水溶性低級 脂肪族極性溶媒を加えて活性化学物質を析出させることが好ましい。 好ましい水溶性低級脂肪族極性溶媒は、メタノール、エタノールおよびプロパツ ールである。最も好ましい溶媒はエタノールである。この技術分野の当業者は、 活性化学物質がそれから沈澱する限り、好ましい溶媒の代わりにその他の水溶性 低級脂肪族極性溶媒を使用することができることを認識するであろう。 上記抽出プロセスにおいて、活性化学物質が水溶性低級脂肪族極性溶媒とアロエ ジュースの混合物から約４時間で放置沈澱せしめられることが好ましい。この混 合物を４時間で放置沈澱せしめると最適収量の活性化学物質が得られること、４ 時間を越えると沈澱した活性化学物質が分解を始めることがわかった。しかし２ ４時間の沈澱期間後にかなりの量の活性化学物質が回収されるということもわか った。 この技術分野の当業者は、最適の沈澱時間が周囲温度、圧力ならびに水溶性低級 脂肪族極性溶媒の性質に依存するということを認識するであろう。 上記抽出プロセスにおいて、熱ぼ活性化学物質の加水分解や分解を助長しうるの で、沈澱した活性化学物質はオーブン乾燥するよりも凍結乾燥によって乾燥する ことが望ましい。 上記抽出プロセスのすべてにおいて、アロエジュース中に含まれる何らかの繊維 状物質（セルロース）も水溶性低級脂肪族極性溶媒によって析出される（　ｐｒ ｅｃｉ　ｐｉ　ｔａｔｅｄ）が、これはこの溶媒の添加によって早期に析出し、 活性化学物質より密度が低い。この繊維状物質は、活性化学物質が沈降せしめら れた後、溶媒の表面に停まる。従って極めて容易にこれを取り除くことができる 。この技術分野の当業者は、溶媒を添加する前に、代りにアロエジュースを濾過 して繊維状物質を除去することができることを認識するであろう。 さらに好ましくは、上記プロセスのすべてにおいてアロエの葉または植物全体は 、洗浄工程を省略することができる程に十分に清浄な畑から採集されうる。 乾燥した析出活性成分は所望によりガンマ線またはマイクロ波を照射して前記活 性化学物質を殺菌し保存することができる。 従って本発明は、アロエベラ製品の製造のための新規かつ改良された方法を提供 すると信じる。 本発明はさらに、アロエ植物の葉の明瞭に特徴的な部分の望ましくない組合せま たは混合を防止するやり方でアロエ　ベラ植物の葉を処理する改良された方法を 提供するとさらに信じる。 本発明はさらに、仕上がった抽出物中の望ましくない成分の濃度を最少にする、 アロエ　ベラ植物の葉の種々の抽出物を製造するための改良された方法を提供す るとさらに信じる。 本発明はまた、アロエ　ベラ植物の葉の特定の部分又はセグメントを特徴づける 成る成分の濃度を最大にし、かつその葉の他の部分又はセグメントを特徴づける 成る成分を最少にし、もしくはなくすような、アロエ　ベラ植物の葉の抽出物を 製造するための新規かつ改良された方法を提供すると信じる。 本発明はまた、アロエ　ベラ植物の葉の黄色い液汁の濃度が低い、アロエ　ベラ 植物の葉からの抽出物を製造するための新規かつ改良された方法を提供すると信 じる。 本発明は最後に、アロエ　ベラ　ゲル中の活性化学物質を抽出する方法を提供す ると考えられる。この化学物質は非毒性免疫刺激化合物としての有用性を持つ。 この物質は以下で、カリジン（Ｃａｒｒｉｓｙｎ）　（商標）またはアセマンナ ン（ａｃｅｍａｎｎａｎ）と呼ぶことにする。上記のようにアセマンナンは、分 析化学の手法により標準化されそして特徴づけられた実質的にアセチル化された マンノースモノマーの実質的に非分解性の凍結乾燥された線状ポリマーであるこ とがわかった。 図面の説明 第１図および第２図は、アロエ　ベラの葉の切取った部分を示している。 第３図は、本発明の方法に使用される好ましい葉洗浄装置の概略図を示す。 第４図はアロエ　ベラの葉を切断し浸漬するための好ましい装置の概略図を示す 。 第５図はアロエの切断物を細断してフィレットにし、かつ粗砕する好ましい装置 の概略図を示す。 第６図は微細に均質化しかつ濾過するための好ましい装置の概略図を示す。 第７図は処理されたアロエ材料をさらに分離するための透析装置の好ましい使用 を示す概略図を示す。 第８図は異なるｐＨ条件下でカリジンの２つのサンプルについての赤外線スペク トルを示す。 第９図はカリジンの示差温度記録図を示す。 第１０図はシュウ酸カルシウムで汚染されたカリジンの示差温度記録図を示す。 第１１図はカリジンの特性化の概略図を示す。 第１２図はプルラン（ｐｕｌｌｕｌａｎ）ポリサッカライド標準物のサイズ排除 クロマトグラムを示す。 第１３図はカリジンのサイズ排除クロマトグラムを示す。 第１４図はプロテアーゼ処理されていないカリジンの赤外線スペクトルを示す。 第１５図はプロテアーゼ処理したカリジンの赤外線スペクトルを示す。 第１６図はカリジンの示差温度記録図を示す。 第１７図はグルコース、ガラクトース、マンノースおよびイノシトールの標準混 合物のＨＰＬＣクロマトグラムを示す。 第１８図はカリジンのＨＰＬＣクロマトグラムを示す。 第１９図はラムノース、フコース、アラビノース、キシロース、マンノース、ガ ラクトース、グルコースおよびイノシトールの、それらのグリシドールアセテー トとしての、標準混合物のＧＬＣクロマトグラムを示す。 第２０図はカリジンのＧＬＣクロマトグラムを示す。 第２１図はアセマンナンの量に対するマンノース／イノシトール比の標準曲線を 示す。 第２２図はカリジンの部分的にメチル化した、かつ部分的にアセチル化したグリ シドールの総イオンクロマトグラム第２３図はカリジンの部分的にアセチル化し たグリシドールのマススペクトルを示す。 第２４図は部分的にメチル化したマンニトールアセテートの概略図を示す。　　 　゛ 第２５図はマススペクトル分析下でメチル化したマンニトールアセテートのフラ グメントイオンの概略図である。 ｐｏｒｔｉｏｎｓ）がこれらの細分部分に特徴的な特性をもっていること、従っ てそれらからの抽出物が相互に潜在的に識別し得る用途をもっていることを発見 し、これを認識した。 これらの識別し得る部分、これらの特性のいくつかのもの、黄色い液汁（１）沈 澱物　　緩下剤、防ばい剤（ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ）、抗生物 薬剤（ａｎｔｉｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ）、殺虫剤および日焼は止め 剤 （２）上澄み液　　　粘膜保護作用、 日焼は止め剤 内部ゲル　（１）粘　　液　　　浸透剤、低アレルギー剤マトリクス　　　　　 　　　　　　（ｈｙｐｏａｌ　Ｉｅｒｇｅｎｉｃ）、湿潤剤 （２）ゲ　ル　　　　潰瘍保護剤、細胞刺激剤、フィレット　湿潤剤、創傷治癒 （３）間質繊維　天然防腐剤、止血剤 （４）残存マトリックス　細胞生長刺激剤外　　　皮　　　　　　　　　　殺虫 性昆虫忌避剤、紙バルブ繊維 上記の知識ならびに認識に基づき、かつその意図された用途に依存して最終抽出 物中の望ましい成分の質および濃度を最適化するために、本発明のプロセスはア ロエ　ベラ植物の葉を特定の識別し得る部分と上記の細分部分に先ず分画するこ と、ならびに上記に定義したような細分部分の特定成分を分離し、かつ単離する ことに向けられている。 このようなプロセスの具体的な詳細ならびに特徴は、以下の詳細な説明からさら に容易に理解され、また認識されることになろう。本発明はまた、上記プロセス によって単離される特定の成分に向けられている。 本発明のプロセスによって製造される生成物は好ましくは、成熟した、戸外で生 育したアロエ　ベラ植物の外部の低い部分の葉から得られる。２年ものの植物は 通常成熟している。しかし４年〜５年ものの植物のより広い葉は、望まれる抽出 物を一般により大量に含んでおりまた取扱いもより容易である。テキサス州のり オグランデバレーに生育するアロエ　バルバデンシス　ミラーの４年〜５年もの の葉は最も好ましい。これらの葉は、一般にそれぞれ約１．５〜２．５ボンドの 重さがある。望まれる特定の用途または製品に依存して、これらの葉は植物から それらを切り取った直後に処理することができ、あるいはこれらは処理される前 に種々の時間適当な条件の下に貯蔵することができる。さらに、葉の種々の成分 の濃度は、葉が受ける季節的変動および環境条件によって影響を受ける。これら はすべて、植物の抽出物が向けられるべき特定の意図された用途に従って考慮さ れなければならない。 葉は、好ましくは処理に先立って葉のいかなる部分も損傷することなしに、植物 の根元近くから切り取るか引き抜かれるべきである。好ましくはポケットナイフ のような６インチ未満の小さなナイフを用い、茎のすぐ上の根元で葉を切り取り 、澄んだ細胞のゲルの漏出または黄色い液汁によるゲルの汚染を防止するために 茎から葉を剥ぎ取る。葉の何らかの損傷は、識別し得る部分の好ましくない混合 をもたらし、従って葉の特徴的成分の好ましくない混合をもたらす。 植物から除去した後、葉は通常これを適切な洗剤の溶液〔例えばヨークケミカル 社（テキサス州ダラス）が販売しているＯＬＹＭＰＩＣＰＯＯＬ　ＣＨＬＯＲ６ ５（商標）〕を用いて穏やかにこすりであるいはスプレーして洗浄することによ りきれいにされる。時には、このクリーニングは柔らかいブラシを用いて行う。 清浄した後、葉を清浄な水の中で十分に濯いで、洗剤溶液の痕跡を除去する。 各々の葉の底の白いもしくは明るい色の部分とその先端部分は、小さな鋭いナイ フを用いて注意深く切ることにより除去される。葉の両端を実質的に構成してい るこれらの部分は、別途に処理してそこから黄色い液汁を得ることができ、この 黄色い液汁は上記の黄色い液汁の特性をもった成分を有する製品を製造すること が望ましい用途に向けられる。 各々のアロエ　ベラの葉の残存部分は次に、横に切断して短い断片、好ましくは 長さが０．５インチの断片にし、各断片を高張性、等張性もしくは低張性である ことができる水溶液（好ましくは脱イオン水）中に直立に置き、もって断片から 黄色い液汁を排出する。あるいは、上記の特徴を有するその他の製剤に使用する ために黄色い液汁を採取することが望ましい用途においてはこれらの断片を、好 ましくはステンレススチール製のワイヤメツシュの底をもったステンレススチー ル製の、乾燥採集容器中に直立に置き、放置排液させ、そして水と接触させるた めに水でもって葉を透析させることができる。 このようにして断片は、約２０〜３０分間排液することを許される。切断した断 片は最終的にシールを形成し排液を停止する。集められた黄色い液汁は次に適当 な時間放置すると、２つの細分部分すなわち沈澱物と上澄みにそれぞれ分離する 。黄色い液汁は無傷の皮膚（損傷されていない皮膚）に対する良好な日焼は止め をつくるのに有用であり、オリーブ色の日焼けした色をもった皮膚を与え、かつ また緩下剤の製造に有用である。 切断した葉の断片から黄色い液汁を除去する操作が完了した後、この断片を次に ワイヤー（すなわち家庭用チーズ）スライサーまたは剥皮ブレード（例えば剥皮 ナイフ〉のような任意の適当な道具を用いてフィレット（ｆｉｌｌｅｔｓ）を形 成するように皮を剥いで、外皮すなわち葉の断片の皮およびこの外皮のすぐ下に ある層を除去する。葉の断片を凍結してこの剥皮操作を容易にすることができる 。剥皮した後、残存しているものは内部ゲルマトリクス部分（フィレット）であ り、この部分を検査し、付着している皮もしくは変色した部分を除いて残存して いる黄色い液汁をそこから取り去るべく指できれいにする。この黄色い液汁の残 りの除去を容易にするために、穏やかな水のスプレー好ましくは脱イオン水（か つアルコールを含まない）のスプレーを用い、あるいはゲルマトリクス部分をき れいな流水に沈める。 得られたフィレット（内部ゲルマトリクス）を次に約１時間排液することができ る。この排液操作の間に、通常粘液質の被膜がこのゲルマトリクスの表面に生成 する。この被膜は、重力によっであるいは遠心分離のような適当な手段によって 補助されて採集される。この集められた被膜は上記粘液細分部分である。 ゲルマトリクスストリップの形をしたゲルマトリクスの残りを次に摺りつぶし、 細断し、あるいはブレンドしてその内部に存在する間質繊維を破壊し、あるいは ゲルマトリクスストリップを液化のためにワイヤメツシュまたはフィルタースク リーンを強制的に通過させることができる。この得られた物質を次に続いて均質 化することができる。あるいはこのゲルマトリクスストリップを凍結し、解凍し 、次に混合して繊維を有する液状物質を製造する（この物質は上記ゲルフィレッ トの細分部分を構成する）。次にこの物質を濾過して、間質繊維細分部分を得る と共に、上記残存マトリクス細分部分を残す。 このようにして得られた均質化された抽出物は、典型的には約４〜５のｐＨ１好 ましくは約４のｐｌをもっている。 記載されたプロセスにおけるすべての工程はほぼ室温で行なわれる。 第３図〜第７図はこのプロセスの好ましい実施態様をさらに詳細に開示している 。具体的には第３図には、葉の洗浄装置が開示されている。アロエ　ベラの葉の 洗浄装置〔トンプソン　マニュファクチニアリング社、バーリントン、テキサス 州（Ｔｈ６ｍｐｓｏｎ　Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ　　Ｃｏｍｐａｎｙ。 マニュファクチュアリング社から提供されたものである。 で検査され、それによって葉は視覚的に検分され、十分にきれいかどうか決めら れる。十分にきれいでない場合には、ス州シーゴビルのダラス　ミル　ライト社 （Ｄａｌｌａｓ　ＭｉｌｌＷｒｉｇｈｔ　Ｃｏ、　ｏｆ　Ｓｅａｇｏｖｉｌｌｅ 、　Ｔｅｘａｓ）により提供された。すすぎ噴霧器１１はテキサス州シーゴビル のケイ　ブランピング（Ｋｅｙ　ＰＩｕａ＋ｂ１ｎｇ　Ｓｅａｇｏｖｉｌｌｅ、 　Ｔｅｘａｓ）により提供された。 ステンレスチールバットＵは３１６ステンレススチール製であり、テキサス州ダ ラスのナショナル　シート　メタル社（Ｎａｔｉｏｎａｌ　５ｈｅｅｔ　Ｍｅｔ ａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ　ｏｆ　Ｄａｌｌａｓ、　Ｔｅｘａｓ）による特別注文品 である。 洗浄後、第４図に示したように葉は切断され浸漬される。 る、トレ、イ旦は、テキサス州ダラスのナショナル　シートメタル社（Ｎａｔｉ ｏｎａｌ　５ｈｅｅｔ　）４ｅｔａｌ　Ｃｏｎ＋ｐａｎｙ　ｏｆ　　Ｄａｌｌａ ｓ。 Ｔｅｘａｓ）により提供された３１６ステンレススチール製の切断および浸漬装 置ｑの部分である。この装置は特別注文製である。トレイ■の上で葉は、大川を 通してごみ容器（示していない）へ処分される先端と尾端を・有する両端のとこ ろで手で切断される。切断した葉旦は次に、ステンレススチール族のワイヤーメ ツシュの底を各々有するステンレススチールの多数のバスケット基のいずれか１ つの中に積まれる０次にこれらのバスケット基はステンレススチール族のトラッ クの中に置かれる。このトラックは台形のロートＨの上部を形成し、もこのロー トＨによって黄色い液汁がバスケットを通して葉の底部から排液され、ロートＨ の底部に落下する。黄色い液汁は定期的に取り出され、貯蔵のこの工程の後、バ スケット基の中にまだ残っている切断された葉旦は、台形のロートＨに最も近接 した位置で水浴卦に手で移される。自流の流れの中で水が台形ロート■から最も 隔たった点において入ロ水パイプ亘から浴旦の中に入り、次に台形ロートＨに最 も近接した点で出ロ水パイプ並を通って排出される。トレーは台形ロート■から 遠ざかる方向に水浴中を手動で徐々に動かされ、バスケットが水浴ｕ内に停ま？ ている洗浄工程はおよそ１時間かかる。 洗浄後、バスケットは乾燥のためにトレーＵの上に置かれ、これは僅か数分間継 続する。ワイヤーメツシュ、黄色い液汁の排出および自動洗浄装置を含めて、バ スケットに関する第４図のアッセンブリ全体はやはり、テキサス州ダラスのナシ ョナルシートメタル社によって特注製作された３１６ステンレススチール製であ る。 洗浄後、トレイ且の上のバスケット基の中の積まれた切断された葉旦は次いで、 第５図に示すようにさらに切断してフィレットにするための領域に移動される。 実質的に透明な材料だけが残るように、外皮双がフィレットから取り除かれる。 外皮Ｕの残部は捨てられる０次フィレット１は粗粉砕機旦に原料供給するトラフ 銭の中に置かれる。このトラフ競はテキサス州ダラスのナショナル　シート　メ タル社によってつくられた３１６ステンレススチール製である。 この粉砕機はモデルＮα５１５０−Ｎ−シンクーイレーター（テキサス州ダラス のワトソン　フード　サービス　インダストリーズ社）　　（Ｗａｔｓｏｎ　Ｆ ｏｏｄ　５ｅｒｖｉｃｅ　Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ、　Ｉｎｃ、。 Ｄａｌｌａｓ、　Ｔｅｘａｓ）である。粉砕機見によって粗粉砕した後、この粉 砕機から出てくる処理された材料に一は、３１６ステンレススチール製の垂直単 殻タンクを有するおよそ１００パントーン社を通して販売されているペルマーサ ン製）（Ｐｅｒｍａ−８ａｎ、　Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅｒ、　ｄｉｓｔｒｌｂ ｕｔｅｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ＶａｎＴｏｎｅ、　Ｉｎｃ、、　Ｄａｌｌａｓ、　 Ｔｅｘａｓ）を通る。粗砕フィレット７’はベルマーサン撹拌機（モデルＮＩＡ ＡＰＨ２）（これもテキサス州ダラスのパントーン社から販売されている）によ ってタンクＥ内で撹拌される。 粗均質化の後、タンク旦からの物質は微細均一化および（任意的な）濾過のため の別途の領域に送られる。第６図においてタンクＥからの材料は、オハイオ州ク リーブランドのりライアンス　エレクトリック社のリライアンスモータ　モデル ＮＩＢ　７６Ｑ２１３９Ｍ　−Ｖ　Ｆ　（Ｒｅｌｉａｎｃｅ　ＭｏｔｏｒＭｏｄ ｅｌ　ｈｈＢ　７６Ｑ２１Ｂ９Ｍ　−Ｖ　Ｆ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｒｅ１ｉａｎｃｅ 　ＥｌｅｃｔｒｉｃＣｏｍｐａｎｙ、　Ｃ１ｅｖｅｌａｎｄ、　０ｈ１ｏ）によ って駆動されるポンプ基〔テキサス州ダラスのクレパコ社（Ｃｒｅｐａｅｏ、　 Ｉｎｃ、、　Ｄａｌｌａｓ。 Ｔｅｘａｓ）によって販売されているステンレススチール族の遠心ポンプモデル ｈｈ、４Ｖ　−８１３によって微細ホモゲナイザーＦ（テキサス州ダラスのクレ パコ社モデルＮＯ，３Ｄ　Ｄ　１３）にポンプ輸送される。微細均質化の後、こ の材料は３１６ステンレススチール製の大きな１０００ガロン垂直単殻混合タン クＧ（テキサス州ダラスのパントーン社に販売されているベルマーサン製）に送 られる。微細に粉砕されたフィレットΔはベルマーサン撹拌機２６ａ（テキサス 州ダラスのパントーン社から販売されているペルマーサン製のモデルＮαＡＡＰ Ｈ２＞によって撹拌される。タンク９中の材料Δは、これを取り出して、排気ラ イン並を通るパルプの除去のためのフィルター２７ｂｔ備えた１ユニツトを形成 するポンプυ１に送られることができる。ポンプ石１とフィルターη上はロマー ト珪藻土フィルター［テキサス州ダラスのアレン　リクリエーション社（ＡＩｌ ｅｎ　Ｒｅｃｒｅａｔｉｏｎｃｏｍｐａｎｙ）によって販売されているモデルＮ Ｑ９９−２１３８）の一部を形成している。濾過された材料は次にタンク旦にポ ンプ輸送される。このタンク旦はタンク旦と同じようにふたハを備えることがで きる。 第７図において微粉砕されたフィレットＡは、部分的に濾過され、ミキサー輩に よって撹拌され、ポンプ基によって透析器にポンプ輸送される。ミキサー輩は、 ベルマーサン撹拌機（テキサス州ダラスのパントーン社販売のモデルＮｃｈＡＡ ＰＨ２）である。ポンプ基は、スベリアステンレススチール製モデル５Ｃ３４５ プロセスポンプ（ウィスコンシン州デラバンのスペリアステンレス社製）である 。プロセスポンプ観には４．４５Ｏｒｐｍのバンド−モーター製の３馬力のモー ター遅相−〔アーカンソー州、　Ｆｒ、スミスのバルドーエレクトリック社のカ タログＮ（ｌ　ＣＭ　３５５９Ｔ　（Ｃａｔ　Ｎｏ、　ＣＨ３５５９Ｔｏｆ　ｔ ｈｅ　Ｂａ１ｄｏｒ　Ｅｌｅｃｔｒｉｃ　Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｆｔ、　Ｓｍ１ｔ ｈ　Ａｒｋａｎｓａｓ）　）が取り付けられている。ポンプ基によってポンプ輸 送された材料は、４個のフィルター即（図示されていない）を有する透析ユニッ トｌ（マサチューセッツ州つオバーン、ロミコン社製のロミコンモデルＨＦ４Ｓ ＳＳ限外沢過システム）　（Ｒｏｍｉｃｏｎ　Ｍｏｄｅｌ　ＨＦ４ＳＳＳ　ｕｌ ｔｒａｆｉｌｔａｔｉｏｎ　ｓｙｓｔｅｍ　ｍａｄｅｂｙ　Ｒｏｍｉｃｏｎ　Ｉ ｎｃ、、νｏｂｕｒｎ、　Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ）を通過する口に取り出 され得るような地点まで垂直に通過する。その他望まれているアロエの画分およ び求められている最終製の水とミネラルが除去される必要がある場合には、小さ なポアサイズの限外フィルターを用いて水とミネラルを分離で、この生成物を透 析ユニットを通して単に循環することによって繰り返されることができる。この プロセスは２つ以上の透析工程を含むことができる。例えば先に説明したように 、塩、低分子量の酸および非所望のアントラキノン類は第１透析工程で取り除く ことができる。非所望の材料ルトンのボアを有する限外フィルターを用いること によって行われる。次に１０．０００ダルトンの限外フィルターを同じくロミコ ン社から得られる５０．０００ダルトンの限外フィルターで置き換え、透析プロ セスを繰り返す。この透析プロセスはここでゲルマトリクスポリマーを２つの両 分に分離する。第１画分は１０．０００〜５０．０００ダルトンのサイズのゲル マトリクスポリマーからなり、分離排出ライン３５から排出され、第２画分はサ イズが５０．０００ダルトンより大きいゲルマトリクスポリマーからなり、バッ トＩに戻される。このプロセスは、与えられた生成物から取り出すことが必要と される塩および水の量に依存して数分間ないし数時間にわたって継続することが できる。 第７図において分離返送ライン３６は、テキサス州ダラスのテキサス　ラバー　 サプライ社（Ｔｅｘａｓ　Ｒｕｂｂｅｒ　ＳｕｐｐｌｙＣｏｍｐａｎｙ、　Ｄａ ｌｌａｓ、　Ｔｅｘａｓ）によって供給されるタイボン（Ｔｙｇｏｎ）チューブ （食品グレード）製である。分離排出ライン３５は、テキサス州ダラスのパント ーン社販売の３１６ステンレススチール製バイブである。 残りのマトリクス細分部分は次いで処理されて、アロエベラ　ゲル中の活性化学 物質であるアセマンナンを分離し、単離し、そして精製することができる。残り のマトリクス細分部分からアセマンナンを分離するために、過剰の水溶性低級脂 肪族極性溶媒を残りのマトリクス細分部分に添加する。するとアセマンナンはこ の混合物から沈殿し始める。 この溶液は、できるだけ多くの活性成分を溶液から沈殿させるのに十分であるが 、アセマンナンが分解しはじめるほど長くてはいけない時間、放置される。この 時間の後、鎮静した沈殿物を乱すことなく上澄をデカントするかまたは吸い上げ て除去する。次に沈殿物および残っている溶液を適当な遠心分離装置に入れ、沈 殿物を集めてペレットにする。遠心分離後、上澄をデカントし、捨てる。所望な らば、このペレットを水溶性低級脂肪族極性溶媒の新鮮なもので洗浄し、再び集 め、上澄を再度捨てる。このペレットは次に凍結乾燥し、そして１晩乾燥を許す 。得られた生成物はアセマンナンの実質的に非分解性の凍結乾燥形である。得ら れた生成物はすりつぶして粉末にすることができる。好ましくは、低級脂肪族極 性溶媒の添加に先立って、適当な酸をアロエ　ベラ　ゲルに添加する。除去を容 易にするために、酸を加えてアロエ　ベラ　ゲル中に含まれるシュウ酸カルシウ ムを可溶化する。好ましくはシュウ酸カルシウム不純物を可溶化させるために十 分であるが、アセマンナンポリマー鎖を分解しない濃度で酸を加える。 アセマンナンを分離し、かつ単離するために代わりうるそして好ましい方法は以 下の工程を含む。 成熟した戸外で生育したアロエ　ベラ植物からの葉を植物の根元に近いところか ら、引き抜くか切り取る。これは好ましくは処理に先立って葉のいかなる部分も 損傷することなしに行なう。透明な細胞のゲルの漏出または黄色い液汁でのゲル の汚染を防止するために、葉は好ましくは茎のすぐ上の植物の根元で切り取り、 茎から剥ぎ取る。 植物から除去した後、葉の尾端および先端部分を除去し、切り取った葉は分画プ ロセスにおいて上記したように、皮を剥いでフィレットを形成させる。 得られたフィレット（内部ゲルマトリクス）を次に、すりつぶし、細断しまたは ブレンドしてその内部に存在する間質繊維を破壊し、または内部ゲルマトリクス を液化のためにワイヤーメツシュもしくはフィルタースクリーンを強制的に通過 させることができる。この得られた液化内部ゲルマトリクスを次に均質化する。 かくして得られる均質化された抽出物は典型的には約４から約５、好ましくは約 ４のｐＨを有する。均質化された抽出物は次に濾過して間質繊維を除く。均質化 され濾過された抽出物は次いで、すぐ前で述べた残りのマトリクス細分部分と同 一の手法で処理してアセマンナンを分離し、そして単離することができる。 アセマンナンを分離しかつ単離するために別の代わりうるそして好ましい方法は 以下の工程を含む。 成熟した戸外で生育したアロエ　ベラ植物を植物の根元に近いところから引き抜 くか切り取る。これは好ましくは処理に先立って葉のいかなる部分も損傷するこ となしに行なう。透明な細胞のゲルの漏出または黄色い液汁でのゲルの汚染を防 止するために、葉は好ましくは茎のすぐ上の植物の根元で切り取り、茎から剥ぎ 取る。 葉は次に適当な手段、例えばテキサス州ハーリンゲンのトンプソン　マニュファ クチュアリング社によって作られたｒトンプソン　アロエ押出機Ｊ　（”ＴｈＯ ｍｐＳＯｎ　Ａｌ０ｅＥｙ：ｔｒｕｄｅｒ″ｍａｄｅ　ｂｙ　Ｔｏｍｐｓｏｎ　 ）ｌａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ　Ｃｏｍｐａｎｙ。 Ｈａｒｌｉｎｇｅｎ、　Ｔｅｘａｓ）によって押しつぶされて、アロエジュース を押し出すことができる。この押し出されたアロエジュースは次に、前に述べた 残りのマトリクス細分部分と同一の手法で処理してアセマンナンを分離し、かつ 単離することができる。 記載した方法のすべての工程は、好ましくは約−５０℃で行なう凍結乾燥工程を 除いて、はぼ室温で行なわれる。 本発明の開示されたプロセスおよび組成物の種々の改変ならびに代替的改良、変 形ならびに均等物は上記一般的な説明を読めばこの技術分野の当業者に明らかに なるであろう。以下の実施例は単に例示的なものであって、この１うな改変、均 等物もしくは変形をカバーする添付されたクレームの範囲を制限することを意図 したものではない。 実施例　１ アセマンナンを分離及び単離するための工程Ａ、予備的作業： ■、予め清掃したタンク、ミキサーおよび付属器具類を５０％イソプロピルアル コール（ＩＰＡ）溶液で消毒し、熱い脱イオン水で濯いでＩＰＡを除去した。 ２、ポンプ及び付属のホースを５％“ＨＴＨ”塩素水泳プール溶液を通して洗い 、次いで水を勢いよく流して洗った。 ３、このポンプと付属のホースを５０％イソプロピルアルコール溶液で消毒した 。ポンプと付属のホースを熱い脱イオン水を用いてイソプロピルアルコールがな くなるまで勢いよく流して洗った。 ４、ホモゲナイザーと付属ホース及びポンプを５０％イソプロピルアルコール溶 液で消毒した。このホモゲナイザーと付属のホースを熱い脱イオン水を用いてイ ソプロピルアルコールがなくなるまで勢いよく流して洗った。 リオグランデバレーから採集したアロエ　バルバデンシ７＝工之二の葉を収穫し た後、８時間以内に４０〜４５°Ｆの冷蔵トラックに移し、処理するまで４０〜 ４５°Ｆで冷蔵して分解を少なくした。 次に貯蔵した葉２０〜６０ボンドを室温の次亜塩素酸カルシウムの水溶液の予備 洗浴中に入れ、実質的に葉から表面の汚れを除去しかつ葉に付いた表面のバクテ リアを殺した。 次亜塩素酸カルシウムの水溶液は、１ｐの水に９８％次亜塩素酸カルシウムを約 ０．１２５．加えて遊離塩素５０ｐｐｍを含む溶液をつくることにより調製した 。葉は、予備洗浴中に約５分間滞留させた。 次に、実質的に汚れとバクテリアを含まない葉をテキサス州ハーリンゲンのトン プソン　マニュファクチャリング社（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ　）ｌａｎｕｆａｃｔｕ ｒｉｎｏ　Ｃｏｍｐａｎｙ、　Ｈａｒｌｉｎｏｅｎ、　Ｔｅｘａｓ）製のトンプ ソンアロエウオッシャ−の水平コンベアベルトの上に乗せた。このトンプソンア ロエウオッシャ−は、室温の水で葉を洗浄して葉から表面の汚れ及び次亜塩素酸 カルシウムの水溶液を除去した。再びこの葉を視覚的に検査し、必要により手で こすって葉の表面に残存する表面の汚れを除去した。この葉を次に室温の水で濯 いだ。 次に先端部分及び基部をそれぞれの葉から取り除き、この葉をロート状のステン レススチール製コレクターの頂部に一緒に配置した複数のステンレススチール製 バスケット型コンテナの中に入れた。それぞれのコンテナはメツシュの底をもっ ている。黄色い液汁は、約３０分間葉から排出することを許された。黄色い液汁 はステンレススチールバスケットのメツシュ底を通過し、ロート状コレクターに 集められた。 アロエの葉を入れているステンレススチール製バスケット型コンテナをコレクタ から取り外し、次に第２のステンレススチール製容器に沈めた。この第２のステ ンレススチール製容器は上記のコンテナに対して向流に動く連続的に水平に流れ る濯ぎ水の室温の水浴を含んでおり、前記コンテナは約３０分間〜１時間で前記 容器の一端から多端まで手でゆっくり動かされる。このことは、黄色い液汁がさ らに葉から排出することを許す。この葉は、この溶液に３０分間浸漬されるこを 許した。 次に葉をこの溶液から取り出し、鋭いナイフまたはワイヤーチーズスライサーを 用いてそれぞれの葉から外皮を除去して、それぞれの葉の部分からアロエ　ゲル 　フィレットをつくる。このアロエ　ゲル　フィレットは目で検査され、特徴的 な黄色い変色によって検出される何らかの汚染されたアロエ　ゲル　フィレット もしくはフィレット部分は捨てられた。汚染されていないアロエ　ゲル　フィレ ットの全体の量は、葉の大きさ及び条件に依存して、初めの葉の重量の２０〜６ ０％であった。 次に汚染されていないアロエ　ゲル　フィレットを、７５０座席のレストラン用 のステンレススチール製屑処理ユニットに入れた。このユニットはフィレットを 濃厚であるがしかし自由に流動する（粗均質化）液体のコンシスチンシーをもつ 平均粒子サイズまで粗砕した。このステンレススチール製の屑処理ユニットはＮ −シンクーイレイターデビジョン　オプ　エマーゾン　エレクトリック社（Ｎ− ３ｉｎｋ−ｅｒａｔｏｒ　Ｄｉｖｉｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｅｍｅｒｓｏｎ　Ｅｌｅｃ ｔｒｉｃ　Ｃｏ、、　Ｒａｃｉｎｅ、　ＷＩ）製のモデルＮＱＳＳ　−１５０− １３，シリアルＮα１１５１３２であった。 次にこの粗砕アロエ　ゲル　フィレットを１００ガロンのステンレススチール製 保持バットに移した。この保持バットはプロセスイクイップメント社（ｐｒｏｃ ｅｓｓ　ＥｑｕｉｐｍｅｎｔＣｏｒｐ、、　Ｂｅｌｄｉｎｇ、　Ｈｉｃｈｉｇａ ｎ）製のモデルＮ（１１００ガロンＯＶＣ、シリアルＮα４０８６５−３であっ た。 この保持バットから粗砕アロエ　ゲル　フィレット溶液をホモゲナイザーにポン プで輸送した。ホモゲナイザーはクレパコ　フード　イクイップメント　アンド 　リフリジレーション社（イリノイ州シカゴ）　　（Ｃｒｅｐａｃｏ　Ｆｏｏｄ ナイザーは、ミルクの均質化のために酪農プロセスにおいて一般的に使用されて いるタイプのものであった。粗砕アロエ　ゲル　フィレット溶液は、約１，５０ ０ｐｓｉの圧力で微細に均質化された。 ホモゲナイザーから微細に均質化されたアロエ　ゲルフィレット溶液をステンレ ススチール製貯蔵タンクにポンプ輸送した。この貯蔵タンクは、プロセス　イク イップメント社（ミシガン州ベルディング）　（Ｐｒｏｃｅｓｓ　Ｅｑｕｉｐｍ ｅｎｔＣｏｒｐ、　ｏｆ　Ｂｅ１ｄｉｎｏ、　Ｈｉｃｈｉｃ＋ａｎ）製のモデル Ｎ（１１０００ガＤ　ンＯＶＣ，シリアルＮＱ４０８６６−２であった。均質化 されたアロエ　ゲル　フィレット溶液の全重量は、出発の葉の重量の２０〜６０ ％であった。次に必要により、均質化した生成物を限外沢過を用いて透析した。 次に、微細に均質化されたアロエ　ゲル　フィレット溶液ヲ、レスリー社（Ｌｅ ｓｌｉｅ）製ダイアトマセアス　アースフィルター（Ｄｉａｔｏｍａｃｅｏｕｓ 　Ｅａｒｔｈ　Ｆｉｌｔｅｒ）モデルＤＥ−４８を用いて濾過して、間質の繊維 を除いた。けいそう土の代わりに該間質繊維自体が瀘過媒体として用いられ、そ の繊維は、ナイロンメツシュ布のフィルター支持体によって支持される。十分な 量の繊維が濾過媒体として役立つほどに蓄積することが出来るように、出口を開 ける前数分間、ゲルをポンプでフィルターに通した。 次に、濾過したアロエ　ゲル　フィレット溶液２０ガロンを、１００ガロンのタ ンクにポンプで輸送し、１９０プルーフ（ｐｒｏｏｆ）の未変成エタノール〔エ チル　アルコール、１９０プルーフ、米国薬局方（Ｕ、　Ｓ、　Ｐ、）、厳格な 、Ｕ、　Ｓ、インダストリアル　ケミカルズ社（Ｕ、　Ｓ、　Ｉｎｄｕｓｔｒｉ ａｌ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ。 Ｃｏ、、イリノイ州６１９５３．タスコラ、私書箱２１８）を通じて入手される 、５４ガロンのパッチ　アイ　ディー（Ｂａｔｃｈ　Ｉ。 Ｄ、）　＃ＣＴ１８５　ＪＯ４）　８０ガロンを、アロエ　ゲル　フィレット溶 液に加えた。その溶液を、プロセス　イクイップメント社（Ｐｒｏｃｅｓｓ　Ｅ ｑｕｉｐｍｅｎｔ　Ｃｏｒｐ、、　　ミシガン州ベルディング）製ベルマーサン （Ｐｅｒｍａ−３ａｎ）プロペラ撹拌機（モデル＃ＡＡＰＧＦ−４Ａ）を用い、 ２０〜３０分間撹拌した。 次にそのアルコール−ゲル溶液を、直ちに、いくつかの直径１０．５インチ、高 さ８インチ、１８−８ステンレススチール製の１１フオートのパン〔ブルームフ ィールド　インダストリーズ社（Ｂｌｏｏｍｆｉｅｌｄ　Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ 　Ｉｎｃ、、イリノイ州シカゴ）製、ワトソン　フード　サービス　イクイップ メント　アンド　サブライズ社（Ｗａｔｓｏｎ　Ｆｏｏｄ　ＳｅｒｖｉｃｅＥｑ ｕｉｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　５ｕｐｐｌｉｅｓ、テキサス州ダラス、バーガーウェ イ３７１２）より入手される〕に移した。 アルコール−ゲル溶液を、次に約４時間沈降させた。 次に、透明液状上澄みを、パンの底に沈澱した沈澱物をかき乱さぬよう注意しな がら、デカントし、または吸い上げた０次に、沈澱物及び残った溶液を、４つの 、１バインドのステンレス鋼製遠心分離バケツ（ｂｕｃｋｅｔｓ）に、それぞれ のバケツに沈澱物及び残った溶液が約５００ｇ移されるように移した０次にバケ ツを２０００ｘｇで約１０分間、アイイージー　セントラ−７遠心分離機（ＩＥ ＣＣｅｎｔｒａ−７Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ、インターナショナル　イクイップメ ント社（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　ＥｑｕｉｐＩＩｌｅｎｔ　Ｃｏ、、　？ サチューセッツ州０２１９４、二−ダムハイツ、２番街３００）製、アメリカン 　サイエンティフィック　プロダクツ社（Ａｍｅｒｉｃａｎ　５ｃｉｅｎｔｉｆ ｉｃＰｒＯｄｕＣｔＳ、テキサス州７５０５０．ゲランドブレーリー、私書箱１ ０４８）より入手される〕を用いて回転させた。 遠心分離の後、上澄み液をデカントし、捨てた。次にそのベレットを新鮮な１９ ０プルーフの未変性エタノールで洗い、再び２０００ｘ　ｇで約１０分間収集し た。再度の回転の後、上澄み液を捨てた。 次に、そのペレットをいくつかの６００　ｍｌのバーチス（ＶＩＲＴＩＳ）凍結 乾燥ジャーに移し、液体窒素中で凍結するまで回転させた。この凍結乾燥ジャー を次に、ウェルチ　デュオ−シール（Ｗｅｌｃｈ　Ｄｕｏ−ｓｅａｌ　）真空ポ ンプ〔モデルＮＱ　１４０２　、サージェントーウェルチ（Ｓａｒ（ｌｅａｎｔ −ＷｅｌＣｈ。 テキサス州７５２３５　、グラス。私書箱３５４４５）より入手される〕、バー チス液浸コイル冷却器（Ｖｉｒｔｉｓ　Ｉｍｍｅｒｓｉｏｎ　Ｃｏ１１Ｃ００１ ｅｒ、モデルＮ（１６２０５−４３５０，クーラー、アセトン洛中）及びバーナ ス１８ボート真空ドラム　マニホールド（Ｖｉｒｔｉｓ１８　Ｐｏｒｔ　Ｖａｃ ｃｕｍ　Ｄｒｕｍ　Ｍａｎｉｆｏｌｄ、モデルＮ（１６２１１−０３５０）から 成る凍結乾燥装置に取り付けた。バーチス社の装置は全て、アメリカン　サイエ ンティフィック　プロダクツ社（ＡｍｅｒｉＣａｎ　５ｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　Ｐ ｒ０ｄＵＣｔＳ、テキサス州７５０５０　、ゲランドブレーリー、私書箱１０４ ８）より入手される。凍結乾燥ドラムは、−５０℃に保持したアセトンで満たさ れた。 そのサンプルを終夜、乾燥するまで凍結乾燥し、次にメトシー　ニーイー（Ｈｅ ｔｔｌｅｒ　ＡＥ）１６３の天びんで計量した。 残ったサンプルは、本質的に変質しない、凍結乾燥されたカリジン（登録商標） から成る。アロエ　ベラ　ゲル２０ガロンからの収量は、カリジン約１４５〜１ ５５ｇであった。 実施例　２ アセマンナンを分離及び単離するための工程冷蔵トラックに移し、処理するまで ４０〜４５’　Ｆで冷蔵して分解を少なくした。 先端部分及び基部をそれぞれの葉から取り除いた。次に鋭いナイフまたはワイヤ ーチーズスライサーを用いてそれぞれの葉から外皮を除去して、それぞれの葉の 部分からアロエ　ゲル　フィレットを作った。 次にアロエ　ゲル　フィレットを、７５０座席のレストラン用のステンレススチ ール製の屑処理ユニットに入れた。 このユニットはフィレットを濃厚であるがしかし自由に流動する（粗均質化）液 体のコンシスチンシーをもつ平均粒子サイズまで粗砕した。このステンレススチ ール製の屑処理ユニットは、Ｎ−シンクーイレイターデビジョン　イン、１７− ソン　エレクトリック社（Ｎ−ｓｉｎｋ−ｅｒａｔｏｒ　Ｄｉｖｉｓｌｏｎｏｆ 　Ｅｍｅｒｓｏｎ　Ｅｌｅｃｔｒｉｃ　Ｇｏ、、　Ｒａｃｉｎｅ、　Ｗｌ）製の モデルＮｌ５Ｓ−１５０−１３，シリアルＮｏ、１１５１３２であった。 次にこの粗砕アロエ　ゲル　フィレットを１００ガロンのステンレススチール製 保持バットに移した。この保持バットはプロセス　イクイップメント社（Ｐｒｏ ｅｅｓｓ　ＥｑｕｌｐｍｅｎｔＣｏｒｐ、、　Ｂｅｌｄｌｎｇ、　Ｍｉｃｈｉｇ ａｎ）製のモデルＮ０．１００ガロンＯＶＣ，シリアルＮＱ、４０８６５−３で あった。 この保持バットから粗砕アロエ　ゲル　フィレット溶液をホモゲナイザーにポン プで輸送した。ホモゲナイザーはクレバコ　フード　イクイップメント　アンド 　リフリジレーション社（イリノイ州シカゴ＞　　（Ｃｒｅｐａｃｏ　Ｆｏｏｄ Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　Ｒｅｆｒｉｇｅｒａｔｉｏｎ　Ｉｎｃ、、　ｏｒ 　Ｃｉｃａｇｏ、ｌｌｌ１ｎｏｉｓ）製のシリアルＮｃ０４−０３であった。こ のホモゲナイザーは、ミルクの均質化のために酪農プロセスにおいて一般的に使 用されているものであった。粗砕アロエ　ゲル　フィレット溶液は、約１　、５ ００ｐｓ　ｉの圧力で微細に均質化された。 ホモゲナイザーから微細に均質化されたアロエ　ゲルフィレット溶液をステンレ ススチール製貯蔵タンクにポンプ輸送しな、この貯蔵タンクは、プロセス　イク イップメント社（ミシガン州ベルディング＞　（Ｐｒｏｃｅｓｓ　Ｅｑｕｉｐｍ ｅｎｔＣｏｒｐ、、ｏｆ　Ｂｅｌｄｉｎｇ、　Ｈｉｃｈｉｇａｎ）製のモデルＮ （１１０００ガロンＯＶＣ，シリアルＮα４０８６６−２であった。均質化され たアロエ　ゲル　フィレット溶液の全重量は、出発の葉の重量の２０〜６０％で あった０次に必要により、均質化した生成物を限外濾過を用いて透析した。 次に、均質化されたゲルを、レスリー社（Ｌｅｓｌ　ｉｅ）製ダイアトマセアス 　アースフィルター（ＤｉａｔｏｌＩｌａｃｅｏｕｓ　ＥａｒｔｈＦｉｌｔｅｒ ）モデルＤＥ−４８を用いて枦遇し、間質の繊維を除いた。けいそう土の代わり に該間質繊維自体が沢過媒体として用いられ、その繊維は、ナイロンメツシュ布 のフィルター支持体によって支持される。次に、十分な量の繊維が濾過媒体とし て役立つほどに蓄積することが出来るように、出口を開ける前数分間ゲルをポン プでフィルターに通した。 次に、濾過したゲル２０ガロンを、１００ガロンのタンクにポンプで輸送し、１ ９０プルーフの未変性エタノール〔エチル　アルコール、１９０プルーフ、米国 薬局方（Ｕ、　Ｓ、　Ｐ）。 厳格な、Ｕ、　Ｓ、インダストリアル　ケミカルズ社（Ｕ、　Ｓ。 Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ　Ｃｈｅ＋ｇｉｃａｌｓ、　Ｃｏ、、　　イリノイ州６１ ９５３．タスコラ、私書箱２１８）を通じて入手される、５４ガロン　バッチア イディー　（Ｂａｔｅｈｌ、Ｄ、）　＃　ＣＴ　１８５Ｔ　０４）　８０ガロン を、アロエ　ゲル　フィレット溶液に加えた。その溶液を、プロセス　イクイッ プメント社（Ｐｒｏｃｅｓｓ　Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ　Ｃｏｒｐ、。 ミシガン州ベルディング）製ベルマーサン（Ｐｅｒｍａ−３ａｎ）プロペラ撹拌 機（モデル＃ＡＡＰＧＦ−４Ａ）を用い、２０〜３０分間撹拌した。 そのアルコール−ゲル溶液を、次に、直ちにいくつかの、直径１０．５インチ、 高さ８インチ、１８−８ステンレススチール製の１１クオートのパン〔ブルーム フィールド　インダストリーズ社（Ｂｌｏｏｍｆｉｅｌｄ　Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅ ｓ　Ｉｎｃ、、イリノイ州シカゴ）製、ワトソン　フード　サービス　イクイッ プメントアンド　サブライズ社（Ｗａｔｓｏｎ　Ｆｏｏｄ　５ｅｒｖｉｃｅ　Ｅ ｑｕｉｐｍｅｎｔａｎｄ　５ｕｐｐｌｉｅｓ、テキサス州ダラス、バーガーウェ イ３７１２）より入手される〕に移した。 アルコール−ゲル溶液を、次に、約４時間沈降させた。 次に、透明液状上澄みを、パンの底に沈澱した沈澱物をかき乱さぬよう注意しな がら、デカントし、または吸い上げた。次に、沈澱物及び残った溶液を、４つの 、１バインドのステンレススチール製遠心分離バケツ（ｂｕｃｋｅｔｓ）ｌ：、 それぞれのバケツに沈澱物及び残った溶液が約５０ポンドされるように、移した 。次にバケツを２０００Ｘ　ｇで約１０分間、アイイージー　セントラ−７遠心 分離機（ＩＥＣＣｅｎｔｒａ−７Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ、インターナショナル　 イクイップメント社（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｅｑｕｉｐａ＋ｅｎｔ　Ｃ ｏ、、　　７サチユーセツツ州０２１９４、二−ダムハイツ、２番街３００）製 、アメリカン　サイエンティフィック　プロダクツ社（Ａａ＋ｅｒｉｃａｎ　５ ｃｉｅｎｔｉｆｉｃＰｒｏｄｕｃｔｓ、テキサス州７５０５Ｇ、ゲランドブレー リー、私書箱１０４ｇ）より入手される）〕を用いて回転させた。 遠心分離の後、上澄み液をデカントし、捨てた。次にそのペレットを新鮮な１９ ０プルーフの未変成エタノールで洗い、再び２０００Ｘ　ｇで約１０分間回転し た。再度の回転の後、上澄み液を捨てた。 次に、そのペレットをいくつかの６００ｍ１のバーチス（ＶＩＲＴＩＳ）凍結乾 燥ジャーに移し、液体窒素中で凍結するまで回転させた。この凍結乾燥ジャーを 次に、ウエルチ　デュオ−シール（ｗｅｌｃｈ　Ｄｕｏ−ｓｅａｌ）真空ポンプ 〔モデルＮａ１４０２．サージエントーウエルチ（Ｓａｒｇｅｎｔ−Ｗｅｌｃｈ 、テキサス州７５２３５．ダラス、私書箱３５４４５）より入手される〕、バー チス液浸コイル冷却器（Ｖｉｒｔｉｓ　Ｉｍｍｅｒｓｉｏｎ　Ｃｏ１１Ｃｏｏｌ ｅｒ、モデル１ｌｈ６２０５−４３５０クーラー、アセトン浴中）及びバーナス １８ボート真空ドラムマニホールド（Ｖ１ｒｔｉｓ１８　Ｐｏｒｔ　Ｖａｅｃｕ ｍ　Ｄｒｕｍ　Ｍａｎｉｆｏｌｄ、モデルＮｏ、６２１１−０３５０）から成る 凍結乾燥装置に取り付けた。バーチス社の装置は全て、アメリカン　サイエンテ ィフック　プロダクツ社（Ａｍｅｒｌｃａｎ　　５ｅｉｅｎｔ１ｆｉｃ　Ｐｒｏ ｄｕｃｔｓ、　　テキサス州７５０５０゜ゲランドブレーリー、私書箱１０４Ｂ ）より入手される。凍結乾燥ドラムは、−５０℃に保持したアセトンで満たされ た。 そのサンプルを終夜、乾燥するまで凍結乾燥させ、次にメトシー　ニーイー（Ｍ ｅｔｔｌｅｒ　ＡＥ）１６３の天びんで計量した。 残ったサンプルは、本質的に変質しない、凍結乾燥されたカリジン（登録商標） から成る。アロエ　ベラ　ゲル２０ガロンからの収量は、カリジン約１４５〜１ ５５ｇであった実施例　３ カリジスを分離及び単離するための標準的な実験室規模のプロセス 約５０ポンドのアロエ　バルバデンシス　ミラーの葉を水で洗いそしてこすって 、汚れた乾燥したラテックスとその他の汚染物を除去した。次にそれぞれの葉の 外皮を除去し、フィレット全体を大きなビーカー（氷上）に入れた。 １．５リツトルバツチでアロエ　フィレット全体をワーリング　ブレンダー（ｖ ａｒｉｎｇ　ｂｌｅｎｄｅｒ）にかけた。フィレットを室温で２分間高速で２回 ブレンドした。このブレンドしたフィレットを次に４℃に冷却してブレンド操作 中に発生した泡を消失させた。 次にこのブレンドしたアロエジュースを４層のコツトン（クリーブランド　コツ トン）に通して濾過して繊維質のセルロース系パルプを除去した。次に濾過液を ６層のコツトンに通過させ、約４リツトルのアロエジュースを集めた。 次にこのアロエジュースを大きな５ガロンのステンレススチール製コンテナに入 れた。この濾過したジュースに、１６リツトルの冷却したエタノール（フィッシ ャーエタノール試薬級Ｃａｔ、　Ｎｃｉ、Ａ９９５）を加えた。このエタノール は、アロエジュースを撹拌しながらゆっくり加えた。綿状の析出物が形成された 。混合物を１５〜３０分間撹拌し、室温で約２時間静置した。 次に上澄み液をデカントして除き、ペレットを小さなブレンダーに入れ、このブ レンダーに１リツトルの脱イオン水を加えた。この混合物を低速で数分間ブレン ドしてペレットを洗浄し、次いで８リツトルのナルゲン（ｎａｌｇｅｎｅ）コン テナに入れた。この混合物にさらに４リツトルのエタノールを加え、混合物を３ ０分間撹拌した。生成した析出物を約２時間沈降させた。 上澄み液の大部分をデカントして除き、得られたペレットを室温で２０分間２０ ００Ｘ　ｇで遠心分離して、残りの溶媒をデカントし易くするために析出物をペ レット化した。 次にこのペレットを凍結乾燥フラスコに入れ、バーチス凍結乾燥機中で１晩凍結 乾燥した。 凍結乾燥された粉末の重量は１０．９ｇであった。収率は０．２７３％すなわち ２．７３Ｘ１０−３ｇ／ｍｌであった。 実施例　４ アロエ　ベラ中抽出物（アセマンナン）中のシュウ酸カルシウム夾雑物の減少 アロエ　ベラ　ゲルからアルコールによってアセマンナンを抽出する工程の間に 、少量の有機の及び無機の物質が生成物と共に共沈澱するのが認められる。無機 塩の大部分で、しかもアロエ　ベラ　ゲルからのアセマンナンのアルコールでの 抽出における更に主な夾雑物は、シュウ酸カルシウムである。シュウ酸カルシウ ムの存在は、光学顕微鏡、赤外線スペクトル及び熱重量分析より確められる。 シュウ酸カルシウムの量はバッチごとに変化し得るものの、全抽出物の約３０重 量％を成すシュウ酸カルシウムが認められた。実施例４に記載された工程の目的 は、アセマンナン中のシュウ酸塩含量を減少させることである。シュウ酸カルシ ウムは、水及びアルコール中で非常に溶けにくい。アロエ　ゲルをアルコールで 処理することにより、カリジン沈澱物中のシュウ酸塩が濃縮される。このシュウ 酸塩の濃縮は、シュウ酸塩のカルボニル非対称濃縮に起因する１６００〜１５８ ７ｃｍ−１の間のカリジンの強い赤外光吸収、及びその熱重量分析によるカリジ ンの高い灰分含量によって明示される。アセマンナンはカリジン中の活性物質で あるので、生成物の品質の一貫性及び健康に関する理由のために、シュウ酸カル シウムのような無機塩は除去または少なくとも最少限とすべきである。 シュウ酸塩及び他の無機塩を分離するための一つの方法は、膜透析によるもので あろう。しかしながら、この方法は多くの欠点及び不利益を有する。この方法は 、粗製カリジンを再水和し、アルコールで再抽出し、再び凍結乾燥しなければな らないので、時間を非常に浪費する。非常に重要なことに、透析段階で生成物が 保存されなければ、細菌による劣化及び腐敗が、非常に不活性なカリジンを生じ るであろう。 一般に、カルボン酸塩は薄い鉱酸で処理すると、それらの対応する酸に転化する 。シュウ酸カルシウムを塩酸で処理することにより、シュウ酸及びシュウ酸のカ ルシウム塩が、次の機構に従って生じるであろう。 （シュウ酸カルシウム） シュウ酸は水及びアルコールに非常に良く溶け、それ放水／アルコール混合物中 に優先的に抽出される。その結果、カリジンは、はるかに少量のシュウ酸塩及び 他の無機塩を有する。 あらかじめ５００ｐｓｉｇで均質化され、新しい水泳プールフィルターを通して 濾過した、約２ｆｌのアロエ　ベラ　ゲルを本実施例のために収集した。ゲルの 初ｐｌは撹拌後に測定した。重量機知のゲルサンプルをいくつかの８００ｍ１の ビーカー中に入れ、適当な酸、ここでは希鉱酸（好ましくは６Ｎ塩酸）、または 濃水酸化ナトリウム溶液で、ｐＨを適当に次のように調整した。 サンプル磁　　０１２３４５６７８ 重量（ゲル）　　１００．０　１００．０　９９Ｊ　　１００．０　１００．０ 　９９．７　１００．０　９９．９　９９．５ｐＨ４，５６４，０７２，４５３ ，３５５，０９１０，６６，１６７，０８，５ｇ各サンプルのｐＨを調整した後 、４体積の５ＤＡ−３Ａエタノールを、ゲルが規定のｐｌのちとにいる時間を最 小限にするために、できるだけ早く加えた。混合物の２分間未満の撹拌の後、各 混合物を約３〜４時間放置した。次に各抽出物を遠心分離し、凍結乾燥し、種々 のｐＨ条件下での収率を測定するため、秤にかけた。 九つの固体のカリジンサンプルの赤外光スペクトルは、適量の物質を臭化カリウ ム中に混合することによって作られたディスクより得られた。各ディスクに、ア イビーエム（ＩＢＭ）製フーリエ変換赤外分光計（ＦＴ−ＩＲｓｐｅｃｔｒｏｍ ｅｔｅｒ）にて、４０００〜４００ｃｍ−’　（波数）の走査を行った。種々の ｐＨ条件でのカリジンサンプルのスペクトルは、定量的に比較された。 熱重量分析 カリジンの熱的な重量損失は、明確な指紋特性を有する。 各サンプル約１０ｍｇを、メトシー（Ｍｅｔｔｔｅｒ）熱分析機にて、２５℃か ら７８０℃へ、２０℃／分の速度で加熱した。温度が６００℃に到達するまでは 窒素ガス雰囲気を、引き続き７８０℃までは酸化条件を使用し、次に各サンプル がこの温度に２分間止まることを許した。重量損失温度分析図より、含水率、炭 水化物、酸化され得る炭素骨格、シュウ酸塩及び灰分の含量が求められた。 結果と考察 カリジンの酸処理で最も重要な要素は、物質の物理化学的特性が、この工程によ って不利な影響を受けたかどうかである。適当な酸が選択されなければならない ＝（１）合理的な量にて適当なｐＨ範囲（約３．０〜約３．５）を達成すること が可能な酸、（１１）有益な成分（多分散系アセマンナン）、溶媒混合物（エタ ノール）及び収容する容器及び装置と不利な反応をしないであろうもの、及び（ １１１）更に、アセマンナン鎖を減成しないような濃度で選択される。多くの薄 い鉱酸及び高濃度の有機酸が適当であるが、非酸素化鉱酸が、エステル及び減成 が最少限となるので、最も適当である。適当な酸、例えば６Ｎ塩酸を選択すれば 、不利な影響を受けるよりむしろ、カリジンの特性がより低いｐＨ条件にてかな り向上するようである。例えば、同じ濃度（重量／体積）のカリジンは、酸で処 理すると、より粘稠な再水和された溶液を与える。粘稠な溶液は、良い生成物を 意味する。溶液のサイズ排除クロマトグラフィーによる分離は、非処理のカリジ ンと同じクロマトグラフ特性を示す。 それ故、使用した条件下で、減成は観察されなかった。 次の結果は、ゲルの単位重量中の全固形分で表されるカリジンの収率は、酸処理 の後に減少すると言うことを示す。 サンプル、Ｎ１０１２３４５６７８ ｐＨ４，５６４，０７２，４５３，３５５，０９１０，５［ｉ　　６．１６　７ ．０　　ｇ、６ｇ収率（％）　　　０．２Ｂ　　　０．２２　０．１２　０．１ ４　０．２７　　　Ｇ、２３　０．２５　０．２６　０．２４しかしながら、赤 外線スペクトル及び熱重量分析による生成物の続く分析は、その高い収率がシュ ウ酸塩及び灰分含量に明らかに関係していたことを示す。 赤外線スペクトルは広く、カリジンの定性的及び定量的特徴付けの両方に用いる ことが出来る。より低いｐＨでのカシシンの、約１７４０ｃｍ−’に位置するア セチル基の吸収ピークの増大、及び約１５９０ｃｏ＋−’のシュウ酸塩のピーク の減少は、シュウ酸塩含量の減少を明示する（第８図）。 熱重量分析は温度と重量損失の特徴的なプロフィールを与える。一般に、純粋な カリジンは示差熱重量分析において、三つの主要なピーク；（ａ）水分３０〜ｌ ｏＯ’ｃ、（ｂ）炭水化物（アセマンナン）２００〜４００℃、及び（Ｃ）酸化 され得る炭素骨格６００〜６３０℃を示す（第９表）。一方、例えばシュウ酸カ ルシウムで汚染されたカリジンは、高い灰分含量による４５６〜５００℃及び６ ５０℃〜７２０℃に位置するさらに二つのピークを示す（第１０表）。 下記の第１Ａ−Ｅ表は、種々のｐＨ条件でのカリジンの熱重量分析結果を示す。 第１Ａ表 カリジンの熱重量分析結果（ｐＨ４，５６）第１Ｂ表 カリジンの熱重量分析結果（ｐＨ３，６０）第１Ｃ表 カリジンの熱重量分析結果（ｐＨ３，２０）第１Ｄ表 リサイクルされたカリジンの熱重量分析結果（２０分間撹拌）第１Ｅ表 リサイクルされたカリジンの熱重量分析結果（４０分間撹拌）これらの表は、下 記を示している： １、４．５６を超えるＩ）Ｈを有する出発ゲルより作られたカリジンは、それぞ れ５２．２％及び１８．１％の平均縁炭水化物及び残分（灰分）含量を示した。 ２、出発ゲルのｐ）１を約４．５６から３．６０に調整すると、炭水化物及び灰 分含量はそれぞれ７１．４％及び８．５５％であった。これはそれぞれ測定され たパラメータについて、３６．８％及び５２．８％の改善である。 ３、シかしながら、ｐＨ３，２０では、平均炭水化物含量が７９．３％にはね上 がっている一方で、灰分含量は３．８６％に減少しており、炭水化物が約５１． ２％増加し、灰分が７８．７％減少していることを示す。 ４、予備的データは、増加した炭水化物含量とより低い灰分量を有するカリジン のバッチがより良い抗ウィルス活性を示したことを示す。それ故、処理は３．０ ０と３．５０の間のｐＨにて行うことが推奨される。 第　　　２　　　表 カリジンの品質に対するｐＨの影響（ＴＧＡ法）ｐＨ２，４５３，３５４，０７ ４，５８５，０９Ｂ、１８　　７．００　　　ｇ、６ｇ水　　　　分　５．６７ ６２　８．２４３３　６．９７５０　８．４０３５　８．５９０５　　ｇ、８４ ３１　８．９８１９　９．７７０２アセマンナン　７３．９２５　６９．９３０ 　４Ｂ、９２９　３８．６５１　３７Ｊ４９　３６．７９Ｂ、　３５．５９３　 ３８．３１８炭素骨格１７．８１２１５．４５５１２．８４０１２．８４６１２ ．９６９１２．５０８１１．４８５１０．７６９灰　　　　分　１．９Ｂ４４　 ３．９４９４　１３．８１１　１５．９９９　１Ｂ、８４７　１７．９０８　１ ７．１９２　１７．１９８収率（％）０．１２　０．１４　０．２２　０．２Ｂ 　　０．２７　０．２５　０．２６　０．２４カリジン（全固形分）収率、シュ ウ酸カルシウム、灰分含量及び水分は、ｐＨが４〜５に上昇すると共に増加する ように見える。しかし、アセマンナン及び対応する炭素骨格は、ｐＨが下ると共 に増加する。それ故、もし灰分及びシュウ酸カルシウム含量を減少すべきである なら、４．０より高いｐＨは推奨されない。０．２％より高いカリジンの収率は 、シュウ酸カルシウム汚染について分析されねばならない。 アロエ　ベラ　ゲルを適当な酸、例えば薄い鉱酸、好ましくは塩酸で処理してゲ ルのｐＨを３．０〜３．５の間に調整し、続いてエタノールで抽出することは、 シュウ酸塩の量の有意な減少をもたらす。この工程により、シュウ酸カルシウム 及び灰分含量の両者を、８０％より多い程度だけ減少し得る。この処理はまた、 物理化学的分析方法によって示されたように、ポリマーの分解を伴うことなく、 活性カリジンの量を濃縮する。 カリジンのバッチ二つを、実施例１の記載のようにして、但し、エタノールによ る沈澱に先立ち、ｐＨ３，６に酸性化する追加的工程を用いて、作った。＃　７ ０３１５のロット中で、均質化されたアロエ　ベラ　ゲル２０ガロンに濃硝酸（ ６１ｍｌ）を加えた。＃　７０３２１のロット中で、均質化されたアロエベラ　 ゲル４５ガロンに濃塩酸（１７１ｍｌ）を加えた。収量はそれぞれ５５．６ｇ　 （０，０７％）及び１８８．６ｇ　（０，１１％）であった。 ＩＲ及びＴＧＡによる化学的分析は、両バッチが似かよった品質及び減少したシ ュウ酸カルシウムを有することを示した。これら二つのバッチの分析結果は、第 １Ｂ表中に含まれている。 硝酸は、塩酸または他の任意の適当な酸と同様、専ら酸性化のために用い得ると 言うことが、当業者に明らかとなったであろう。 カリジンの特徴付は 薬物のスクリーニング技術を用い、アロエ　ベラより抽出されたポリサツカリド が、アロエ　ベラ中の活性化学物質であることが今、見出された。このポリサツ カリドを以下、アセマンナンと呼ぶ。アセマンナンは実質的にアセチトラキノン 類、ビタミン及びアミノ酸は、カリジンの１％より少ない量を構成する。アロエ 　ベラ中のカリジンの濃度は、アロエ　ベラ　ジュースの約０．０５〜０．３重 量％であることが見出された。収率又は葉中のカリジンの濃度は、葉の成熟度に 依存する。 アセマンナンがアロエ　ベラ中の活性化学物質であることを証明する薬理学的デ ーターは、次のように要約することができる。 １、アセマンナンの投与量−効果（ｄｏｓｅ−ｒｅｓｐｏｎｓｅ）は、等量のア セマンナンを含むアロエ　ベラジュースと同じで２、アセマンナンは、さまざま な投与ルートすなわち静脈内、腹腔内および経口投与によって潰瘍保護モデルに おいて有効であった。 ３、アセマンナンは、薬理学的モ′デルの両者における効果の１００％を成す。 ４、全く異なる源、コンニャク（ｋｏｎｊａｃ）植物からのアセマンナンに類似 する物質である化学物質グルコマンナンは、いくつかの薬理学的作用を示した。 カリジンは、やけど、潰瘍その他皮膚及び胃腸管壁の創傷の治癒に対して関係す ることが知られている組織培養における繊維芽細胞の複製を４８時間で３００％ まで増加することが実験室の研究で示された。 カリジンはまた、繊維芽細胞の゛核中のＤＮＡ合成を増加することが示された。 そしてＤＮＡ合成の増加は、治癒プロセスにおける基礎的なステップである代謝 活性及び細胞複製の速度を大ぎくする。 カリジンは動物の治癒速度を増大することが制御された研究において示された。 カリジンはまた、動物の研究において胃潰瘍の有効な治療剤であることが示され た。その胃がヒトの胃と同様に反応する実験室用ラットが３年間に亘って試験さ れた。カリジンは、胃潰瘍の治療に使用されている現在の医薬と同様もしくはこ れより優れていることが見出された。このような製品の多くのものは、胃内の塩 酸を抑制するように作用する。カリジンは異なった原理に基づいて作用し、消化 酸の自然の流れを変えるものではない。 上記の通り、カリジンは、液化したアロエ　ベラ　ゲルに水溶性低級脂肪族極性 溶媒、好ましくはエチルアルコールを加えることによって析出させることができ る。カリジンの粉末は次に凍結乾燥することによってつくることができ、所望に より、この凍結乾燥製品をモウリネックスコーヒーグラインダー（テキサス州ダ ラスのジシーズ（Ｄｉｌｌａｒｄ’ｓ）から入手できる）のような粉砕装置を用 いて粉砕し粉末にすることができる。カリジンの粉末は、高度に静電性であり、 何らかのアントラキノン夾雑物の酸化状態に依存して黄ばんだ白色からピンクな いし紫色の無定形粉末である。カリジンは、加水分解を引き起こす水を除去する 凍結乾燥によって安定化され実質的に非分解性となる。 所定量のカリジンを含む凍結乾燥されたアロエ　ベラ　ゲルは、その有効性を２ 年間保持した。凍結乾燥した形のカリジンは１０年まで安定であると考えられる 。 粉末化したカリジンの製造において熱と時間が重要なファクターであることがわ かった。熱はカリジンの加水分解もしくは分解を助長し、所定の温度におけるカ リジンの加工時間が長くなればなるほど分解が多くなる。従って、高分子量のカ リジン粉末が望ましい場合には、アロエ　ベラの葉全体からカリジンを最も早く 抽出することができるプロセスを使用することが好ましい。低分子量のカリジン 粉末が望ましい場合には、アロエ　ベラの葉全体からカリジンを最もゆっくり抽 出することができるプロセスを使用することが好ましい。 ０．２〜１％の重量／容量濃度のカリジン粉末を再水和すると、新鮮なアロエ　 ベラのような粘稠な“ゲル°が再び形成された。カリジン粉末の再水和によって 復帰するこのゲルのようなコンシスチンシーは、カリジンの高分子量ポリサッカ ライドの性質を示している。一般に、ポリサッカライドは分解または加水分解さ れるとその粘度が低下する。 従って、再水和したカリジン粉末の粘度が品質の優れた表示を与え、品質保証の パラメーターとして使用されることができる。 本発明のプロセスに従って製造されたカリジンは、実質的にアセチル化されたマ ンノースモノマーの、好ましくは相互にβ（１−４）結合によって結合された実 質的に非分解性の凍結乾燥された線状ポリマーとして特徴付けることができる。 本発明の開示された組成物のさまざまな改変ならびに代替的改変、変形及び均等 物は上記一般的な説明を読めばこの技術分野の当業者に明らかになろう。次の実 施例（実施例５〜８）は、カリジンをさらに特徴付けかつ同定するために行われ た。以下の実施例は例示的なものであって、上記の改変、均等物もしくは変形を カバーする添付されたクレームの範囲を制限することを意図したものではない。 実施例　５ カリジンの分離、精製及び特徴付け Ａ、カリジンの分離 アロエの葉を洗浄、スライスして開き、切り分けた。 汚れのない内側のゲルを保持し、一方、緑色の外皮及び乳樹脂物質を捨てた。切 り分けた物質を均質化し、フィニシャーモデル７５　（Ｆｉｎｉｓｈｅｒ　Ｍｏ ｄｅｌ　７５．　ＦＭＣ，イリノイ州シカゴ）で強（濾過し、バルブの殆どを除 いた。その透明で粘稠なゲルを、希塩酸で約ｐＨ３，２０に酸性化して、通常存 在するカルシウム及びマグネシウムのシュウ酸塩及び乳酸塩を、それらの対応す る水溶性の酸へと可溶化させた。次に酸処理したゲルを、還流温度にて四体積の ９５％エタノールで４〜５時間抽出した。浮遊している繊維を除去し、次にアル コール／水混合物を吸い上げ、一方、固形分沈澱物を遠心分離によって収集した 。殆どの、アルコール／水に可溶性の物質例えば有機酸、オリゴ糖、単糖類、ア ントラキノン類及び無機塩が、この工程において除去された。次に固形分を新鮮 なアルコールで洗浄し、遠心分離、凍結乾燥し、砕いて白い無定形の粉末とした 。 Ｂ、精　製 この段階におけるカリジンは、一般にタンパク質、単糖類、オリゴ糖及び無機塩 によって汚染されている。これらの夾雑物は生成物の生物活性に影響を与えず、 それ故、製造されたバルクの物質に対しては、さらなる精製は必要でない。しか しながら、カリジンの特徴付けにおけるさらなる工程として、さらなる精製工程 を加えた。上述の夾雑物は、バルクの粉末をリン酸塩緩衝液に再溶解し、それを 非特異的プロテアーゼ（シグマロフト＃　５１４７）で処理し、続いて広範な透 析によって除去することができる。その濾過不能な生成物（このものは主にアセ チル化されたポリマンノースである）を凍結乾燥し、第１１図に示したように、 赤外線スペクトル、熱重量分析（ＴＧＡ）、ＨＰＬＣ。 ＧＬＣ及びＧＣ／ＭＳを包含する多くの分析法によって特徴付けた。 アロエ　ベラ生成物の標定には、ＨＰＬＣ及びＧＣが推奨される。ガス液体クロ マトグラフ（ＧＬＣ）法は、アロエ　ベラ　ゲル抽出物中のマンノースの分離及 び定性に用いられる。生成物へのマンノースの混入を防ぎ、より高いアロエ　ゲ ル含量を持つであろう製品を作るために、透析工程を加えても良い（分子量カッ トオフ１２．０００〜１４，０００）。 さらに、ローカスト豆ガム、グアーガムまたはグルコマンナンの混入は、マンノ ースに対するガラクトースまたはグルコースの高い比率によって感知される。 Ｃ３分子量測定 導入部： アセマンナン（ＡＭ）は植物より抽出されるポリサッカライドである。このもの は多分散であり、そのことはこのものが１より多い分子量サイズから成ることを 意味する。 目　　　　的： この研究の目的は、サイズ排除クロマトグラフィーにより、アセマンナンの分子 量分布を測定することである。 試薬及び薬品； ０．０５％アジ化ナトリウム 標　　準： ０．０５％アジ化ナトリウム中、Ｐｕ１ｌｕｌａｎ　８５３に、　　１００Ｋ及 び１２．１にダルトンの各標準を０．２％（重量／体積）機　　器： 高速液体クロマトグラフィー、モデル５９０〔ウォーターズ　アソシエーツ社（ Ｗａｔｅｒｓ　Ａｓ５ｏｃｉａｔｅｓ、　７サチユーセツツ州ミルフオード）製 〕 示差屈折計（Ｄｌｆｆｅｒｎｔｌａｌ　ｒｅｆｒａｃｔｏｍｅｔｅｒ）モデル１ ７７０〔バイオ−ラド社（Ｂｉｏ−ｒａｄ）製〕積分計Ｓ　Ｐ４２９０　［スベ クトシーフィジクス社（Ｓｐｅｃｔｒａ−Ｐｈｙｓｉｃｓ）製〕 サンプルの調製： テフロンで裏打ちしたキャップ付きのガラスびん（１０５Ｘ２５ｍｍ）中に、カ リジン２０ｍｇを秤り取った。 ０．０５％アジ化六゛トリウム１０ｍ１を加え、ジュニア　オービット振とう機 （Ｊｕｎｉｏｒ　ｏｒｂｉｔ　５ｈａｋｅｒ、　　ラブーラインインストラメン ツ社（Ｌａｂ−Ｌｉｎｅ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、イリノイ州メルローズパー ク）製〕中で振りまぜる（４時間）ことにより、溶解した。 １、：２μｍメンプラン（Ａｃｒｏｄｉｓｃ　（商標）、ゲルマン　サイエンシ ーズ社（Ｇｅｌｍａｎ　５ｉｅｎｃｅｓ）製〕を通して濾過。涙液をＨＰＬＣ中 への注入のために貯えた。 。速　　クロマトグラフ（ＨＰＬＣ）条件カラム：　Ｓｐｈｅｒｏｇｅｌ　ＴＳ Ｋ　５０００　ＰＷＨＲ）ベツクマンインストラメンツ社（Ｂｅｃｋｍａｎ　Ｉ ｎ５ｔｒｕ［ＤｅｎｔＳ）製〕検出器：示差屈折計（Ｄｉｆｆｅｒｎｔｉａｌ　 ｒｅｆｒａｃｔｏｍｅｔｅｒ）　（パイオルラド社製〉 移動層：０．０５％アジ化ナトリウム 流　速：４０℃で１ｍ１／分 注入量＝５０μｍ 結果： サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）により、プルラン（ｐＨｕｌａｎ）ポ リサッカライドを標準として測定すると、アセマンナンは、１０，０００ダルト ンより大きいポリマーを少なくとも１３％含む多分散ポリサッカライドである。 第１２図は、機知の分子量：それぞれ８５３に、　１００Ｋ及び１２．１にダル トンのプルラン（ｐＨｕｌａｎ）標準の、ＳＥＣクロマトグラムを表す、対応す るカリジンのクロマトグラムを第１３図に示す。そのクロマトグラムでは、Ａ、 Ｂ、Ｃと標識された三本の主ピーク部分が極立っている。ピークＡは１００　、 ０００ダルトンより大きいアセマンナン画分を表し、ピークＢは１０，０００ダ ルトンより大きいがしかし１００．０００ダルトンより小さい画分である。ピー クＣはより低い分子量の成分を表す。ピークＡ及びＢの合計が、活性画分を構成 導入部： アセマンナン（カリジンの活性な製品）の官能基は、特徴的な赤外振動数にて吸 収する。赤外線スペクトルはそれ故、この物質を特徴付ける重要な方法である。 目　　　的： この研究の目的は、赤外分光法により、カリジンをさらに特徴付けることである 。 試薬及び薬品： 赤外等級の臭化カリウム（ＫＢｒ）粉末〔マリンクロット社（Ｍａｌｌｉｎｃｋ ｒｏｄｔ　Ｉｎｃ、、ケンタラキー州パリ）製〕機　　器： １８Ｍ９０００コンピユータ及びプリンター／プロッターを備えた１８Ｍフーリ エ変換赤外（ｐｔ−Ｉｒ）分光器モデルＮ０．３２ サンプルの調製： ウィリー　ミル（Ｗｉｌｅｙ　Ｍｉｌｌ、　　トーマス　サイエンティフィック 社（Ｔｈｏｓａａｓ　５ｃｉｅｎｔ１ｆｉｃ　Ｃｏ、）製〕及び６０メツシユサ イズより小さい粒子を通過させるふるいにより、カリジンを微細な粉末に予備粉 砕した。 予備粉砕したサンプル５ｍｇを乾燥ＫＢｒ４９５ｍｇと混合して、合計５００ｔ ａｇの混合物とした。 その混合物を、メノウ乳鉢及び乳棒を用い、手で再び粉砕して、均一な物質とし た。 代表的なサンプル（８０〜１００ｍｇ）を、油圧ジヤツキ（商標１１１ａｌｋｅ ｒ）を用い、４０，０００ｐｓｉの圧力にてプレスして透明なディスクとした。 ディスクは４０００ｃｍ−”から４００ｃｍ−’まで走査した。シグナル対ノイ ズの比を向上させるため、分解能４ｃｍ−１にてマルチ走査（３０走査）を行っ た。 結　　果： 第１４図に示したスペクトルの分析結果では、次の特徴的な吸収ピーク振動数（ ｃｍ−’）が極立っている。 波数（ｃａ−１）　　　　帰　　　　属１０６８．８　　　　ピラノース環構造 のＣ−Ｏ伸縮３４２２．１　　　０−Ｈ伸縮 １２５０、ＯＣ−０−Ｃ伸縮（アセチル基）１７４０、ＯＣ−０伸縮（アセチル ） １３７７．３　　　　Ｃ−Ｈ曲げ １Ｂ４９，３　　　　Ｃ−０伸縮（アミドエ）５３０．５　　　　内部回転モー ド他 ５９９．９　　　　内部回転モード他 ２９２８．３　　　　Ｃ−Ｈ伸縮 １５４１．３　　　　Ｎ−Ｈ変形（アミド■）８０６．３　　　　　　　　− ８９７．０　　　　環上の０１のアキシャルＨ７７３，８環の微動 カリジスのスペクトルは、約３４２２ｃｍ−”に、Ｏ−Ｈ伸縮に帰因する強い吸 収を示すことが留意される。アセチル基のカルボニル及びＣ−０−Ｃ伸縮はそれ ぞれ１７４ｏ及び１２５０ｃｍ−’付近に位置する。Ｃ−０−Ｃ系の強いシング ルバンドは、０−アセチル基がモノマ一単位にエフアトリア、、、−１のアミド カルボニル伸縮（アミドＩ）は、タンパク質／ブロテオグリカン不純物に帰因す る。 ９６０〜７３０（至）−１の間の吸収バンドは、アセマンナンの成る立体化学的 特徴と関連付けることができる。例えば、とは、該アセマンナンがＢ結合してい ることを示す。環の振動（９５５ｃｍ−’のショルダー）及び約７７３ｃ＋ｎ− ’に位置する環の微動は、ベーターグリコシド結合を持っＤ−マンナンを示す。 下の第３表は、強度に従って並べられた対応する吸光度を有するピーク吸収振動 数を示す。 第　　　３　　　表 プロテアーゼ非処理のカリジンのピーク吸光度振動数２　　　３４２２．１　　 ３４３３．７　　３４１０．６　　０．４７４．３　　　１２５０．０　　１３ ４８．４　　１２０１．８　　０．４３９４　　　１７４０．０　　１８２１． ０　　１６９９．５　　０．４３３５　　　１３７７．３　　１４１０．１　　 １３５０．３　　０．３４３６　　　１Ｂ４９．３　　１６９７．６　　１５８ ５．７　　０．３２５７　　　５３０．５　　５８２．Ｂ　　　４９３．８　　 ０．３１３８　　　５９９．９　　６３４．’７　　５８Ｂ、４　　０．２８２ ９　　　２９２ｇ、３　　２９９５．８　　２ｇ９９．４　　０．２４２１０　 　　１５４１．３　　１５８１Ｊ　　　１５２７．１１１　　０．２２６１１　 　　８０８．３　　　ｇ３５．３　　７８９．０　　０．２２４１２　　　　ｇ ９７．０　　９２０．２　　８４３．０　　０．２１０１３　　　７７３．６　 　７８７．１　　７５０．４　　０．２０７Ｅ、プロテアーゼ処理したカリジン の赤外線スペクトルバルクのカリジンの赤外スペクトルは、アミドＩ及びアミド ■ビークの存在によって示されるように、タンパク質またはプロテオグリカン不 純物の痕跡を示す。タンパク質またはプロテオグリカンを加水分解する非特異的 プロテアーゼ、引き続い゛ての広範な透析による、バルク物質のさらなる精製は 、これらの不純物を除去した。 プロテアーゼ処理したサンプルのスペクトルを第１５図に示す。このスペクトル の分析結果は、第１４図のプロテアーゼ非処理のカリジンと比べ、いくつかの相 違を示す。例えば、第１４図中の約１６４９及び１５４１　ｃｍ　−’に位置す るアミドＩ及びアミド■のピークは、プロテアーゼ処理したサンプルには存在し ない。さらに、約１８３９．７に位置する水分の吸収ピークが、明確に分割され ている。第４表は、プロテアーゼ処理したカリジンの数を強度に従って並べた対 応する吸光度と共にピーク吸収振動数を次のように示したものである。 第　　４　　　表 プロテアーゼ処理したカリジンのピーク吸光度振動数１　　　１０６４．８　　 １０９３．８　　１０４９．４　　０．９Ｂ９２　　　１．０３２．０　　１０ ４５．５　　９７０．３　　０．９６６３　　　３４２２、ｌ　　　３４３５． ６　　３４０４．８　　０．８１４４　　　１２４８．１　　１３４８．４　　 １２０１．８　　０．７２９５　　　１７４０．０　　１８３８．４　　１６９ ５．８　　０．６７９６　　　１３７７．３　　１４０６．３　　１３５０．３ 　　０．５９３７　　　５３０．５　　５４５．９　　４９ｇ、８　　０．５７ ５８　　　５９８．０　　６７７．１　　５８６．４　　０．５３２９　　　１ ６３９．７　　１６９５．６　　１５５４．８　　０．４９１１０　　　２９２ ８．３　　２９９０．０　　２９０３．２　　０．４２８１１　　　８９７．０ 　　９１８．２　　８８７．４　　０．４０９１２　　　８０６．３　　８３５ ．３　　７９０．９　　０．４０９１３　　　７７１．６　　７８９．０　　７ ４ｇ、５　　０．３８７吸光度の値は、定性的なものであり、また、サンプルデ ィスクの製造において同じ濃度を用いる企図がなされなかったので、第１４図の プロテアーゼ非処理のカリジンと強度を比較しえない。 赤外線スペクトルのみに基づけば、カリジンはＯ−アセチル基側鎖を有する、本 質的にＢ結合したＤ−マンノースのポリサッカライドである。Ｎ−アセチル基の 存在はプロティン／プロテオグリカン不純物に帰因するのであろう。 Ｆ、カリジンの熱重量分析（ＴＧＡ） 導入部： 熱重量分析（ＴＧＡ）は、ポリマーの研究のための重要な分析法である。温度変 化の結果としてのポリマーの分解における重量損失は、そのポリマーに特徴的な ものである。 さらに、ＴＧＡは粉末化された物質の水分（Ｈ２Ｏ）及び灰分含量の測定を助け る。 目　　　　的： 本研究の目的はＴＧＡを用い、カリジンをさらに特徴付けることである。 試薬及び薬品： なし 機　　器： Ｌ　ＴＣＩＯＡ評価及び制御コンピュータ（Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ａｎｄＣｏ ｎｔｒｏｌ　Ｃｏｍｐｕｔｅｒ＞　と、Ｍ３−０３ミクロ天秤を有するＴＧ５０ 炉とを特徴とする、メトシー熱分析機（ＭｅｔｔｌｅｒＴｈｅｒｎ＋ｏａｎａｌ ｙｚｅｒ）　Ｔ　Ａ　３５００システム。 ２、プリンター／プロッター、モデルＭＰ３（プリントスイス　マトリックス社 （Ｐｒｉｎｔ　５ｗ１ｓｓ　Ｍａｔｒｉｘ）製〕３、ファイル記憶のためのＩＢ Ｍ　　ＰＣサンプルの調製及び分析ニ ア０ｍｌのアルミナルツボ中に、サンプルＬｏｎｇを、ミクロ天秤にて、±１μ ｇの精度で秤り取った。 ルツボを、その内容物と共にＴＧ５０炉中、温度プログラム速度２０℃／分にて 加熱した。この加熱速度は該物質を分析するために標準的であり、から十分であ る。 加熱は、２５℃から６００℃までは窒素ガス雰囲気中で６０１℃から７８０℃ま では空気（酸化剤）雰囲気中で行った。 さらに２分間、温度を最後の温度に保った（７８０℃の最高温度は、有機及び無 機物質の両者が、この温度に到達するまでに分解する故に、選ばれた。）。 結　　果： カリシンの分解プロフィールは特徴的である。第１６図はカリジンの分解プロフ ィールの実時間のプロット及び対応する一次微分プロットを示す。アセマンナン （カリジンの活性物質）の分解パターンは、他のポリサッカライドのそれと異っ ている。例えば、同一の操作条件下で、アセマンナンの主な分解が起こる温度は 、セルロース、デキストランまたはアミラン（ａｍｙｌａｎ）のそれと異ってい る。アセマンナンに関係する重量損失は、２００〜６３０℃の間に位置する。カ リジンの分解の大半は、２００〜５４０℃及び８００〜６３０℃の間で起こって いる。アセマンナン画分は、これら二つの温度領域の寄与により決定される。一 方、灰分及び水分は共に約１０重量％寄与する。下の第５表は、ＴＧＡに第　　 　５　　　表 カリジンのＴＧＡ分析結果 １　　　９．４３９０　７．３Ｂ３１　３．８０３４　８２．２１１９　　２． ５５３２２　　　９．５８６０　７．３Ｂ４９　４．０１６３　８１゜８３８１ 　　２．７５４０３　　　９．５２１０　７．４９９２　４．２０１２　８１． ７５６Ｂ　　　２．９５１４４　　　９．４５３０　７．７１１８　４．１７８ ６　　Ｂ１．２０１０　　２．９６２０５　　　９．４０９０　７．７６９１　 ３．８７９３　　　Ｂ１．１３０７２　　２．９５４Ｂ６　　　９．５９６０　 ６．８６７４　３．９９１２　８２．０９Ｂ９　　３．１５７６７　　　９．４ ７４０　７．６２０９　４．１９０４　８１．６８６５　　２．８６０５８　　 　９．５７３０　７．３４３６　４．２４１１　　８１．０７１９　　３．３２ １８９　　　９．５５５０　７．９４３５　４．１１３０　８０．９Ｂ５２　　 ３．２４４４１０　　９．５２２０　７．７７１５　４．３３７３　　Ｂｏ、８ ０２３　　３．１６１１平均値＊＊９．５１２８７．５２５５４．０９５２　　 Ｂ１．５２３８　２．９９２０（Ｘ＞ ＊該灰分含量は、Ｃａ（１，５１＞　、　５ｉ（０，１）、　Ｎａ（０，５５） 、　Ｍ！１１（０，３７）　。 Ｆｅ（０，０２）及びＡＮ　（０，００）の酸化物より成る。 ＊＊この処理ではベースビークの２％より少ないピークを考慮していないので、 平均値は合計１００％とならないであろう。 この分析法は、定性性ならびに半定量的である０例えば、アセマンナンパーセン トは次のようにして決定することが出来る。 水分及び灰分含量は、粉末化された薬剤物質において、重要なパラメーターであ る。これらのパラメーターは、熱重量分析法を用い、容易に測定される。 Ｇ、　加　分解　び−速　体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣによるカリジンの糖 酸　の決導入部： ポリサッカライドを、酸または酵素加水分解により、その構成モノマーに加水分 解した。２Ｍのトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）は、グリコシド結合を加水分解する のに十分強いが、しかし硫酸と異り、十分に穏かでモノマーの糖残基を破壊しな いので、加水分解のために選択された。 目　　　的： カリシンのアセマンナン画分のモノマーの糖成分を決定することが目的である。 試薬及び薬品： １、内部標準としてイノシトール０．５■／　ｍｌを含有する２Ｍ　　ＴＦＡ ２、イソプロパツール １、自動サンプリング採取器ＨＰ　７９８４２　Ａ及び自動インジェクターＨＰ 　７９８４１Ａを備えたＨＰＬＣモデル１０８４Ｂ（ヒユーレット　パラカード 社（Ｈｅｗｌｅｔｔ　Ｐａｃｋａｒｄ）製〕２、バイオ−ラド社製示差屈折計モ デル１７７０サンプルの調製： 秤量紙上にカリジンを正確に２．０■秤り取り、テフロンで裏打ちされたキャッ プを持つ、１３Ｘ１００＋ｎｍの使い捨て培養管に定量的に移しな。 内部標準としてイノシトールを０．５■／　ｍｌを含有する２　Ｍ　　Ｔ　Ｆ　 Ａ’　１　ｍｌを加えた。 管を加熱ブロック〔ハイセル社（Ｈｙｃｅ　Ｉ　）製熱ブロック（Ｔｈｅｒｍａ ｌ　Ｂｌｏｃｋ）　）中に１２０℃で約１時問直いた。 その加水分解物混合物を、乾燥空気で、乾燥するまで蒸発させた。 その固形分をイソプロパツール１ｍｌに再分散し、乾燥空気で乾燥するまで蒸発 させた。 ＨＰＬＣカラム中への注入のための準備として、固体を脱イオン水１ｍｌ中に溶 解した。 ＨＰＬＣ条件： カラＡ　：　Ａｗ＋１ｎｅｘ　Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ　Ｈ’Ｐχ−８７Ｐ〔 バイオ−ラド社（カリフォルニア州すッチモンド）製〕移動相：脱イオン水（８ ０℃にて） 流速：０．６ｍｌ／分 オーブン温度＝４０℃ チャートスピード：０．２ｃｍ／分 検出器：　Ｒｅｆｒａｃｔｉｖｅ　１ｎｄｅｘ　（パイオーラド社製、＃１７７ ０） 減　　衰：２ 結　　果： 第１７図は、グルコース、ガラクトース、マンノースそれぞれ１■／　ｍｌ、及 び内部標準としてイノシトール０．５ｎｇ／ｍ１を含む標準混合物のクロマトグ ラムを示す。第１８図は、同一条件下のカリジンのクロマトグラムを示す。マン ノースがポリマーの主成物であることが認められ、ポリサッカライドが本質的に マンノース糖単位から成ることを示している。 Ｈ８′−クロマトグラフィーによる、カリジンの　離反び定１ 導入部： カリシンのポリサッカライドは実際、主として中性である。中性のポリサッカラ イドは、気−液クロマトグラフイー（ＧＬＣ）により、そのグリシドールアセテ ートとして、より良く分析される。 目　　　的： 本研究の目的は、糖モノマーをそのグリシドールアセテートとして、分離及び定 量することによって、カリジンをさらに特徴付けることである。この手法では、 グリシドールアセテートはキャピラリーカラムで分離され、炎イオン化法により 検出される。 試薬及び薬品： １、内部標準としてイノシトールを０．２■／　ｍｌ含有する２Ｍ　　ＴＦＡ ２、イソプロパツール ３、重水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ４）または水素化ホウ素ナトリウム（ Ｎ　ａ　Ｂ　Ｈ４）を１０■／　ｍｌ含有するＬＭ　　ＮＨ４０Ｈ ４、氷酢酸 ７、無水酢酸 ８、トルエン及びジクロルメタン ９、ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）等級アセトン機　　器： １、ガスクロマトグラフＶｉｓｔａ　６０００　（ヴアリアン　インストルメン トグループ（Ｖａｒｉａｎ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ　Ｇｒｏｕｐ　、カリフォル ニア州パロ　アルド）製〕 ２、積分計５Ｐ４２９０　（スペクトラーフイジクス社（ｓｐｅｃｔｒａ　−Ｐ ｈｙｓｉｃｓ、カリフォルニア州すンジョセ）製〕サンプルの調製： サンプル２ｍｌを正確に秤り取り、テフロンで裏打ちされたキャップを持つ培養 管（１３Ｘ１００票）中に移した。 加水分解ニ トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、イノシトール２００■／　ｍｌを含有する２Ｍ＞　 　５００μｍを加え、１２０℃で約１時間加熱（ハイセル社製Ｔｈｅｒｍａｌ　 Ｂｔｏｃｋ）した。 空気流の下でＴＦＡを除去しく４０℃の水浴）、残分をインプロパツールで洗浄 して残った酸を除去した。 還　　元： 残分を、重水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢ２Ｈ４）を１０■／ｍｌ含有するＩ 　Ｍ　　Ｎ　Ｈ４０Ｈ（３００ｍｌ　＞中に溶解し、室温で１時間放置した。 氷酢酸（泡立ちがなくなるまで数滴）で過剰の還元剤を分解し、空気の下で溶媒 を除去、残分を酢酸を１０％含有するメタノール（３Ｘ３００ＪｉＮ　）で洗浄 し、最後にメタノール（３Ｘ　３００μｍ）で洗浄した。 アセチル化： 乾燥した残分に、ビリ゛ジン２００μｇ及び無水酢酸２００μｍを加え、１２０ ℃で２０分間加熱した。 冷却した溶液にトルエン５００μｍを加え、空気の下で溶媒を除去、残分を水に 溶解し、ジクロルメタン中に抽出した。 有機層を汚れのない管に移し、空気の下で有機溶媒を除去、ＧＬＣに先立ち、残 分をアセトン（ｉｏｏμｐ）に溶かした。 ′−クロマトグラフィー　　（ＧＬＣ）カラム：　５Ｐ２３３０．１５ｍまたは ３０ｍ、内径０．２５ｗａ、液層厚み０．２５μｍ（スペルコ社（Ｓｕｐｅｌｃ ｏ、　Ｉｎｃ、）製〕キャリアーガス：ヘリウム オーブン温度：２３５℃（等温） インジェクション温度：２５０℃ 注入Ｊｉ：ｏ、ｓ〜１μ、Ｉ！（分割）結　　果： 第１９図は、ラムノース、フコース、アラビノース、キシロース、マンノース、 ガラクトース、グルコース、及びイノシトールの標準混合物をそれらのグリシド ールアセテートとしてのＧＬＣクロマトグラムを示す。カリジンのクロマトグラ ムを第２０図に示す０図中の主要なピークはマンノースに対応する。ガラクトー ス、グルコース、アラビノース、キシロース、及びフコースの痕跡が存在する。 これらは、細胞壁夾雑物に由来するものである。最後のピークは、内部標準のイ ノシトールアセテートである。 マンニトールアセテートは、加水分解及びアセチル化された物質における主要な 糖のピークであるので、カリジンは本質的にポリマンノースポリサッカライドで ある。 マンニトールアセテートのピークは、内部標準としてのイノシトールの助力で定 量することが出来る。第２１図は、機知の重量のアセマンナンに対して、マンノ ース／イノシトール面積比をプロットすることにより生じた標準カーブを示す。 標準カーブを用い、所与のカリジンサンプル中のアセマンナンの量を計算するこ とが出来る。 ■、カリジンのガスクロマトグラフィー　マススペクトル、　びグリコシド結合 分 導入部： ポリサッカライドは、糖単位が互いに結合する仕方を決定することによって特徴 付けられる。ポリサッカライドの化学的、物理的、及び生物的活性は、糖が、ヘ キソースの五つの可能な位置のうちのどこに結合するかに依存する。 目　　　　的： 本研究の目的は、カリジンポリサッカライドの糖単位が結合する仕方を決定する ことである。 試薬及び薬品： １、乾燥ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）２、ナトリウムニジメチルスルフィ ニルアニオン（２Ｍ）３、ヨウ化メチル ４．２Ｍ　　ＴＦＡ ５、イン１０パノール ７、氷酢酸 ８．１０％酢酸メタノール溶液 ９、無水酢酸 １０、炭酸水素ナトリウム １１、ジクロルメタン １２、０Ｃ等級のアセトン 機　　器： ガスクロマトグラフ／マススペクトロメーター　ＭＳＤ（ＨＰ　　５９７０） ＧＬＣ／ＭＳ及びグリコシド結合分析 カリジンの総合的な特徴付けは、ポリマーの結合の分析を包含する。カリジンは 、ダルビル（Ｄａｒｖｉｌ）他により記載された〔プラント　フィジオロジ−（ Ｐｔａｎｔ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｏｙ）６２巻（１９７８年）４１８〜４２２ペー ジ、引用することにより、その開示をここに含める〕方法によって過メチル化さ れ、マンノースに加水分解され、メチル化されたアルジトールアセテートに転化 される。その揮発性の誘導体を、ヒユーレット−パラカード社製ＧＣ／ＭＳシス テムで、スペルコ（Ｓｕｐｅｌｃｏ）　Ｓ　Ｐ　２３３０キヤピラリーカラム（ ３０ｍ　Ｘ　０．２５ｍａａ内径）にて分析した。マンノースの、メチル化グリ シドールアセテートのフラグメンテーションは、電子衝撃（Ｅ　Ｉ　）的にアセ チル化されたグリシドールとしての、誘導されたカリジンの全イオンクロマトグ ラム（ＴＩＣ”）を第２２図に示す０部分的にアセチル化されたマンニトールの マススペクトルを第２３図に示す。 全操作は次の通りである： （１）テフロンで裏打ちしたキャップを有する管の中に、サンプル（１■）を置 き、真空オーブン中、５０℃にて乾燥した。 （２）　　サンプルに乾燥Ｄ　Ｍ　Ｓ　Ｏ（２５０μｇ）を加え、サンプルが溶 解するまで撹拌（テフロン撹拌棒）した（超音波を役立てても良い）、管をアル ゴン（または窒素）で満たした。 （３）ポリサッカライド（ＤＭＳＯ中）にナトリウムニジメチルスルフィニルア ニオン（２Ｍ＞　　２５０μｐを加え、少なくとも４時間撹拌しな（アルゴン下 で反応を行わねばならない）、サンプルをアニオン溶液中に終夜放置するのがよ り好都合であろう。 （４）アニオン溶液を水中で冷却、ヨウ化メチル２００μｐをゆっくりと加え、 その溶液を約１時間撹拌した。 （５）　　この溶液に、約２．５ｍｌの水を加え、過剰のヨウ化メチルをアルゴ ンで除去した。 （６）この混合物を、１３．３Ｘ　２．１０（直径）の透析管〔分子量カットオ フ１２，０００〜１４，０００．スペクトル　メディカル社（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ 　Ｍｅｄｉｃａｌ、　Ｉｎｃ、、カリ７オルニ７州ロサンジエルス）製〕に移し た。 （７）　　透析不能な両分を、空気流（５０’Ｃ）下で濃縮。 （８）乾燥した残分に２Ｍ　　ＴＦＡ２５０μｊ！を加え、１２０℃で１時間加 熱。 （９）　　空気の下でＴＦＡを除き、残分をイソプロパツールで洗浄（２Ｘ　２ ５０μｐ）。 （１０）残分を、ＮａＢ”　Ｈ４を１０ｍｇ　／　ｍｌ含有するＮＨ４０Ｈ５０ ％アンモニア水メタノール溶液（２５０μｐ）に溶解し、室温で１時間放置。 （１１）過剰の還元剤を氷酢酸（数滴）で分解し、濃縮して乾燥させ、残分を１ ０％酢酸メタノール溶液で洗浄（３Ｘ２５０μｍ）。 （１２）乾燥した残分に、無水酢酸（１００μｐ）を加え、サンプルを１２０℃ で３時間加熱。冷却したサンプルに水（約１．５ｍ１）を、次に炭酸水素ナトリ ウムを、泡立ちが止まるまで加えた。誘導体をジクロルメタン中に抽出。 （１３）有機層を濃縮して乾燥し、ＧＬＣ及びＧＬＣ／ＭＳに先立ち、残分をア セトン１００μｐ中に溶解。 ＧＬＣ条件二 カラム：５Ｐ２３３０　　溶融シリカカラム（３０ｍ　Ｘ　０．２５ｍｍ　＞温 　度＝１７０℃で３分間、次に４℃／分で昇温し、２４０℃で１０分間保持 検出器：ＦＩＤ ＧＬＣ／ＭＳ条件： カラム：　Ｓ　Ｐ　２３３０　（３０ｍ　Ｘ　０．２５ｍｍ　）温　度：８０℃ で２分間、１７０℃までは３０℃／分で、次に２４０℃に４℃／分で上昇させ、 １０分間保持ＭＳ：ヒユーレット　パラカード社製　ＭＳＤメチル　　　による 、　ンプルの主　ｔグｌコシド。Δム汲定 この操作において、ポリサッカライドの全ての遊離ヒドロキシル基を、メチルエ ーテルに転化する（段階４）、メチル化したポリサッカライドを構成成分モノサ ッカライドに加水分解しく段階８）、メチル化されたアルジトールへと転化しく 段階９）アセチル化する（段階１０）。これらの揮発性の誘導体をＧＬＣ／ＭＳ で分析しく段階１３）そのフラグメンテーションパターンから、アリジトール上 の〇−メチル及び０−アセチル基の位置が決定される。 １及び４位を通して結合しているグリコジル（マンノシル）残分〔すなわち（１ −４）−結合したマンナン〕を考慮せよ。２．３及び６位のヒドロキシｌし基は 遊離であり、メチルエーテルに転化されることが出来る。 加水分解及び還元すると、１，４及び５位のヒドロキシル基は露出され、アセチ ル化されて誘導体１，４．５−　トリー０−アセチル−２，３，６−トリー〇− メチルへキシトール（第２４図）を生じることができる。マススペクトルの手法 ル基の間の開裂によって作られる。第二のフラグメントイオンは、酢酸、メタノ ール等の損失により作られる（第２５しての４−結合したマンナンのマススペク トルを示す。 カリジンの全イオンクロマトグラム（ＴＩＣ）及び結合分析に基き、カリジンは 主としてマンノースの（１−４）−結合した線形ポリマーであると推定される。 実施例　６ ３２才の患者は“多年の間”潰瘍性大腸炎の履歴を持っていた。活発な症状の発 現の間、彼女は４０■のプレドニソン（１）ｒｅｄｎｉＳＯｎｅ＞　、３　ｇの アサルフイジン（Ａｓｕｌｆｉｄｉｎｅ）、５０■の６−メルカプトプリンおよ びフラジル（Ｆｌａｇｙｌ）からなる日々の処方に対して応答しなかった。彼女 は腹部の痛みを継続して有し、１日に４〜８回血便があった。彼女は点滴を受け た。内視鏡の診断では、穏やかな肝臓ないし横筋潰瘍を伴う重い進行する結腸潰 瘍を示した。この患者は、彼女の他の医薬に加えて１日４回５０■のカリジンを 投与され、家に帰された。１週間で彼女の症状は実貫になくなった。この患者は 現在この時間において単独の薬物としてカリジンを継続している。身体検査およ び症状は、全て正常であると記録されている。 潰瘍性大腸炎とクローン病（Ｃｒｏｈｎ’ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ）に同様の応答を 示す５つの別のケースが認められた。−人の患者は、カリジンのカプセルを切ら した。４週間で軽い症状が再発して正常な排便症状に戻った。 実施例　７ 多数のエイズの患者が、毒性または副作用を伴うことなく長期間カリジンの大量 投与を受けな。これらのエイズ患者には、臨床症状の軽減および消滅ならびに感 染の機会の減少を伴って、Ｔ−４およびＴ−８リンパ球の比の上昇およびＴ−４ の絶対数の上昇が認められた。カリジンは患者において抗ウィルスもしくは免疫 調節効果を有することが示唆される。 これらの患者のリンパ球に対する刺激が観察された。このことはカリジンが免疫 調節に関与しているかもしれないことを示唆する。 実施例　８ カヤシンの　・に　ぼ　アルコール庁の多響操　　作： ヒルトップの葉（１５，９ボンド）を洗い、フィレット化し、ワーリングブレン ダーで粉砕し、次いで８層の綿布で濾過した。次にこのゲルを４個の１１クオー トステンレススチール製パンに移し、冷たいＵＳＰグレードのエチルアルコール をそれぞれに容量比で２：１，３：１．４：１．および５：１の割合で加えた。 その量は以下のように要約することができる： 比（エタノール　　　　　エチル ニアロエゲル　ゲｌしの量アルコール ２　　：　　１　　　　　　　　　　　　５００ｍｌ　　　　　　　　　　　１ ０００ｔｎ１３　　：　　１　　　　　　　　　　　　５００ｍｌ　　　　　　 　　　　　１５００ｎ＋１４　　：　　１　　　　　　　　　　　１６７０ｍｌ 　　　　　　　　　　　６６８０ｍ１５　　：　　１　　　　　　　　　　　　 ５００ｍｌ　　　　　　　　　　　２５００＋ｎｌ析出物を４時間沈降させ、次 いで残存するアルコール−ゲル溶液を注意深くデカントし、別の容器に蓄えた。 この析出物をＩＥＣセントラ−７遠心分離機を用いて２８０Ｏｒｐｍで１０分間 遠心分離し、アルコールで洗浄し、次いで同じ条件で再び遠心分離した。ペレッ トを６００ｍｌのジャーに移し、液体窒素で凍結し、１晩凍結乾燥した。 ２：１の比からの上澄み液に追加のアルコールを加え、室温で１晩沈降させた。 残存する上澄み液も室温で放置し１晩沈降させた。 翌日に、追加のアルコールで析出された２：１の比からのペレットを除き、先に 述べたように上澄み液から析出物を集めた。この場合、ペレットを凍結乾燥ジャ ーに移す際に約５〜１０ｍｌの水を加えた。 結果：はじめの４時間のアルコール析出の結果は、次ののように要約することが できる： さらにエチルアルコールを加えた後、２：１の上澄み液はさらに１７８■のカリ ジンを生成した。１晩沈澱させるだけにより、３：１および４：１の比の上澄み 液は、それぞれさらに８９■のおよび１０５■を生成した．５：１の比は、最初 に単離の後、はとんど沈澱を生成しなかった．従って再採集はしなかった。 ２：１の比からの２回目の析出（３：１）の場合に、凍結乾燥する前に５〜１０ ｍｌの水を用いて遠心パケットを濯いだ。これは、他のサンプルが生成した密度 の高い灰色のカリジンサンプルとは著しく異なる低密度の白色のふわふわしたカ リジンを生成した。 夏−一一致 カリシンはアロエ　へ乏粘液から抽出された、精製された白色無定形粉末である 。そのポリマーは本質的に線状Ｂ（１−４）−Ｄ−マンノシル単位からできてい る。それは、酸素原子を介してポリマーに結合したアセチル基を不規則に散在さ せた、長鎖のポリマーである。アセチル化の程度はアルカリ性ヒドロキサム酸塩 法（ａｌｋａｌｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｘａｍａｔｅｍｅｔｈｏｄ）　　（ヘストリ ン、Ｓ、：ジェー　パイオル　ケム（Ｈｅｓｔｒｉｎ、　Ｓ、　　：　Ｊ、　Ｂ ｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、）、　１８虹２４０（１９４９）この開示はこれにより参 考としてここで具体的に組み込まれる。〕により測定されたときに約０．８アセ チル基／モノマーである。中性糖結合の分析では、Ｄ−ガラクトピラノース残基 が各７０個の糖ごとに約１個の比で、おそらく（２−６＞結合を介して鎖に結合 していることを示している。マンノースのガラクトースに対する比が２０＝１で あることは、ガラクトース単位がまた主としてＢ　（１−４＞グリコシド結合に より互いに結合していることを示している。 ポリサッカライドの特性化の現在の技法を用いることによって明らかにされた化 学構造は以下のようである：カリシンは、１０，０００ダルトンより大きい分子 量を有する物質の少なくとも７０％で多分散されている。 ・および　８・轡　： （ａ）澄解五： カリシンは白ないしオフ−ホワイトの無定形粉末であり、水にゆっくりと溶解し て高粘度のコロイド溶液（０，４％Ｗ／Ｖ）になる、数時間勢いよく振りまぜる と１％（Ｗ／Ｖ）の粘稠なゲルが得られる。カリジンはプロピレングリコールを 含む一般的な有機溶媒には事実上溶解しない、しかし、水２０％およびプロピレ ングリコール８０％には溶解して、いつまでも安定なままでいるなめらかで粘稠 なゲルになる。 （ｂ）餅： ０．２％（ｗ／ｖ）のカリジン水溶液は約６．３１±０．３３のＩ）ｉｔを有す る。 （Ｃ）旋光葺： ０．４５μｍのメンブランフィルタ−〔ユニフロ（商標：Ｕｎｉｔｌｏ）　、ニ ューハンプシャー州キーンのシュライシャー及シェル社（Ｓｃｈｌｅｉｃｈｅｒ 　＆　５ｃｈｅｕｌｌ　Ｉｎｃ、、　Ｋｅｅｎｅ、　８８））を通過させること により透明化したカリジンの０．２％（Ｗ／Ｖ）水性溶液の比旋光度は： （）　５８９−−２０であり、これはＢ−結合を表している。脱イオン水をブラ ンクとして用いた。 （ｄ）二上汝旦処］： カリシンのアルカリ処理により、粘液性シェリーを形成する能力を破壊する脱ア セチル化が起こり、このことはカリジンの０−アセチル化が粘度に影響を及ぼす ことを示している。脱アセチル化の生成物は水には溶けず、これは明らかに、増 加した強い水素結合のためである。 （ｅ）希外緩困ユｌ上屋： カリシンの官能基は赤外線スペクトルにより同定しな（第１４図および第１５図 ）　、　１７４０ａｍ　　および１２５０偏−１付近の強いＩＲ吸収帯はアセチ ル化を表す、約３４２２ｃｍジ１０６６ｏｎ　　、　１６３９０１１−’、　　 ８９７ａｎ−’、　　８０６ｃｍ−’および７７３ｃｍ−’に位置する他の吸収 はＢ−マンノシル結合を有するポリサッカライドの特徴的な吸収である。弱いア ミド■およびアミド■の吸収がそれぞれ約１６４９ｃｎ−’および１５４１ｃｍ −１に位置しく第１４図）、これらはタンパク質の不純物に由来するものである 。というのは、カリジンをプロテアーゼで処理し、透析すると、これらのビーク が無い（第１５図）からである。 （ｆ）公ヱ１分産： カリシンは、サイズ排除クロマトグラフィーにより測定したとき、１０．ＯＤＤ ダルトンより大きい物質の少なくとも７３％で多分散されている。高圧液体クロ マトグラムの１例（第１３図）は、Ａ、ＢおよびＣと符号を付した３つの両分を 示している。ビークＡは１００，０００ダルトンより大きいカリジンを表し、そ してビークＢは１０，０００ダルトンより大きいが、ｉｏｏ、ｏｏｏダルトンよ り小さいカリジンを表す。 ビークＣはカリジンの分子量成分を表す、ビークＢおよびＣの面積はカリジンが 分解すると増加し、そしてこのことはビークＡの面積の減少を引き起こす。 この技術分野の者には、本発明の広い教示および例示的な実施例から、好ましい 列挙した化学品およびプロセス工程を、ここで挙げなかった化学品および工程で 置き換える可能性があることが容易に明らかとなろう。そのような挙げなかった 化学品および工程への言及がなくても、それらが本発明の範囲内にないことを示 すわけではなく、この教示が簡潔および正確であることが必要であるという理由 のみにより省略されている。 ＦＩＧ、２ 痣）ＦＰｒ喪！ ＦＩＣ；、　９ Ｆｌに、７０ ツウしラン湖ＵＴグクのブイスーｒＩＦ鱒５２０マトプ゛ラム、アロエ　　のア ルコール フリナ７−セ）４ＪＥ乙でしＩクレＩ秒グシンのＩへλイクｈｔ。 グＤデアーゼ°穴し更し７ＪグシンっＩ々スベクトルＦＩＧ、　　ブ９ ０　．２５　．５０　．７５　１．００１．２５１．５１．７５２．００Ｆｌに 、２２ ＦＩＣ；、２３ １，４５−トリー〇−アセテルー２．３，６−トリー〇−Ａ宍ルマンニトールＦ ＩＧ、２４ 町分φ勺し２メチル化しｒこマ〉ニド−ルア仁デート国際調査報告

Claims (32)

【特許請求の範囲】
1. １．アロエ植物の葉からアロエ植物における活性化学物質を抽出する方法におい て： ａ）可溶化物を有するアロエジュースを得ること；ｂ）前記アロエジュースのＰ Ｈを約３．００〜約３．５０に調整すること； ｃ）アロエジュースに、水溶性低級脂肪族極性溶媒を添加して活性化学物質を析 出させ、それにより不均一溶液を形成させること； ｄ）不均一溶液から、水溶性低級脂肪族極性溶媒および可溶化物を除去して析出 した活性化学物質を単離すること；および ｅ）析出した活性化学物質を乾燥することを含む方法。
2. ２．前記アロエジュースが、 ａ）アロエの葉を殺菌性溶液で洗浄して、実質的にすべての表面の汚れとバクテ リアを除去すること；ｂ）前記洗浄した葉から、少なくとも第１の端部を除去す ること； ｃ）前記の切断し洗浄した葉からアントラキノンに富む液汁を排液し、保存し、 採集すること；ｄ）前記葉から外皮を除去して実質的にアントラキノンを含まな いゲルフィレットを製造すること；およびｅ）前記実質的にアントラキノンを含 まないアロエゲルフィレットを挽きそして均質化して、実質的にアントラキノン を含まない、可溶化物を有するアロエジュースを製造すること により得られる請求項１記載のアロエ植物の葉からアロエ植物における活性化学 物質を抽出する方法。
3. ３．前記アロエジュースが、 ａ）アロエの葉を殺菌性溶液で洗浄して実質的にすべての表面の汚れとバクテア を除去すること；ｂ）洗浄したアロエの葉を砕くこと；およびｃ）砕いた葉を透 析して、砕いた葉の残存画分から実質的にアントラキノンを含まないゲルを化学 的に取出し分離すること により得られる請求項１記載のアロエ植物の葉からアロエ植物における活性化学 物質を抽出する方法。
4. ４．前記アロエジュースが、 ａ）アロエの葉を殺菌性溶液で洗浄して実質的にすべての表面の汚れとバクテア を除去すること；ｂ）洗浄したアロエの葉を砕くこと；およびｃ）前記砕いたア ロエ葉を挽きそして均質化して、可溶化物を有するアロエジュースを製造するこ とにより得られる請求項１記載のアロエ植物の葉からアロエ植物における活性化 学物質を抽出する方法。
5. ５．前記アロエジュースが、 ａ）アロエの葉を殺菌性溶液で洗浄して表面の汚れとバクテアを実質的に除去す ること； ｂ）前記洗浄したアロエの葉を挽くこと；ｃ）前記の挽いたアロエの葉をろ過し て、繊維状物質を除去すること；および ｄ）前記の挽いたアロエの葉を均質化して、アントラキノンに富む、可溶化物を 有するアロエジュースを製造すること により得られる請求項１記載のアロエ植物の葉からアロエ植物における活性化学 物質を抽出する方法。
6. ６．前記アロエジュースが、 ａ）アロエ植物の葉を砕いて、可溶化物を有するアロエジユースを押し出すこと により得られる請求項１記載のアロエ植物の葉からアロエ植物における活性化学 物質を抽出する方法。
7. ７．前記アロエジュースが、 ａ）アロエの葉を殺菌性溶液で洗浄して実質的にすべての表面の汚れとバクテリ アを除去すること；ｂ）前記葉から外皮を除去して、アロエゲルフィレットを製 造すること；および ｃ）前記アロエゲルフィレットを挽きそして均質化して、可溶化物を有するアロ エジュースを製造することにより得られる請求項１記載のアロエ植物の葉からア ロエ植物における活性化学物質を抽出する方法。
8. ８．前記析出物が照射され、それによって前記活性化学物質が殺菌され、保存さ れる請求項１記載のアロエ植物の葉からアロエ植物における活性化学物質を抽出 する方法。
9. ９．前記水溶性低級脂肪族極性溶媒体積を、アロエジュース体積に添加して前記 活性化学物質を析出させる請求項１記載のアロエ植物の葉からアロエ植物におけ る活性化学物質を抽出する方法。
10. １０．前記水溶性低級脂肪族極性溶媒が、メタノール、エタノールおよびプロパ ノールからなる群より選ばれる請求項１記載のアロエ植物の葉からアロエ植物に おける活性化学物質を抽出する方法。
11. １１．前記水溶性低級脂肪族極性溶媒が、エタノールである請求項１０記載のア ロエ植物の葉からアロエ植物における活性化学物質を抽出する方法。
12. １２．前記水溶性低級脂肪族極性溶媒が除去される前に、前記活性化学物質が前 記水溶性低級脂肪族極性溶媒およびアロエジュースから約４時間析出せしめられ る請求項１記載のアロエ植物の葉からアロエ植物における活性化学物質を抽出す る方法。
13. １３．前記の析出した活性化学物質が、凍結乾燥により乾燥される請求項１記載 のアロエ植物の葉からアロエ植物における活性化学物質を抽出する方法。
14. １４．ｆ）析出した活性化学物質をリン酸塩緩衝液に再溶解させること； ｇ）再溶解された、析出した活性化学物質を、非特異的プロテアーゼで処理し、 次いで広範な透析を行うこと；および ｈ）非ろ過性生成物を凍結乾燥することからなる段階をさらに含む請求項１記載 のアロエ植物の葉からアロエ植物における活性化学物質を抽出する方法。
15. １５．請求項１の方法により製造した生成物。
16. １６．請求項２の方法により製造した生成物。
17. １７．請求項３の方法により製造した生成物。
18. １８．請求項４の方法により製造した生成物。
19. １９．請求項５の方法により製造した生成物。
20. ２０．請求項６の方法により製造した生成物。
21. ２１．請求項７の方法により製造した生成物。
22. ２２．請求項８の方法により製造した生成物。
23. ２３．請求項９の方法により製造した生成物。
24. ２４．請求項１０の方法により製造した生成物。
25. ２５．請求項１１の方法により製造した生成物。
26. ２６．請求項１２の方法により製造した生成物。
27. ２７．請求項１３の方法により製造した生成物。
28. ２８．請求項１４の方法により製造した生成物。
29. ２９．無秩序に散在したアセチル基が、酸素原子を介してポリマーに結合してお り、かつＤ−ガラクトビラノースが、７０モノマー単位当たり約１つのＤ−ガラ クトビラノース残基の比でα（２−６）結合を介してポリマー結合しているとこ ろの、線状β（１−４）−Ｄ−マンノシル単位からなる実質的に非分解性の凍結 乾燥したポリマーを含む組成物。
30. ３０．前記ポリマーがガンマ線またはマイクロ波で照射される請求項２９記載の 組成物。
31. ３１．アセチル化の程度が、モノマー当たり約０．８アセチル基である請求項２ ９記載の組成物。
32. ３２． ▲数式、化学式、表等があります▼ を含む繰り返しモノマーを有し、ここでアセチル化の程度がポリマーのモノマー 当たり０．８アセチル基であり、ガラクトビラノース単位が７０モノマー単位当 たり約１の比でポリマーに結合しており、マンノースのガラクトースに対する比 が約２０：１である、実質的に非分解性の凍結乾燥した線状ポリマーを含む組成 物。