JPH0248582A - ３’，４’−アンヒドロビンブラスチンの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、３”、　　４’−アンヒドロビンブラスチン
を効率よく製造するための新規な方法に関するものであ
る。

本発明によって得られる化合物は、それ自体、抗腫瘍活
性等有用な生理活性を有するのみでなく、抗癌剤として
知られているビンブラスチン、ビンクリスチンの製造原
料としても有用である。

〔従来の技術〕

３’、　　４’−アンヒドロビンブラスチン（Δ１５″
。

八ｎｈｙｄｒｏｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ）は、抗腫瘍活
性を有する既知の化合物である（米国特許第４，０２９
，６６３号）。

３′、４′−アンヒドロビンブラスチンは、従来、ツル
ニチニチソウ属の植物であるＣａ　ｔｈａｒａｎ　ｔｈ
ｕｓｒｏｓｅｕｓ　（別名Ｖｉｎｃａ’　ｒｏｓｅａ、
Ｌ）中から抽出して得られるか、または、Ｃａｔｈａｒ
ａｔｈｕｓ　ｒｏｓｅｕｓから得られるカサランチンと
ビンドリンを化学的に反応させて得る事ができる。

しかしながら、抽出による方法では、植物中の含量がき
わめて少ない事および、植物中には同類の化合物が多数
存在し分離・精製に困難を要する。

一方、化学的な合成法としては、カサランチンを過酸に
より酸化し、生成したＮ−オキシドをアシル化後ビンド
リンと反応させた後ＮａＢＨ４などで還元する方法（米
国特許４，１４４．２３７号）と、カサランチンとビン
ドリンをＦｅ”の存在下にカップリングさせた後ＮａＢ
Ｈ４などで還元する方法が知られている。しかし、前者
の方法では、３′、４′−アンヒドロビンブラスチンの
単離収率は４１％と低く、また、１０％の異性体を同時
に生成するため、分離・精製に困難を要する。また、後
者の方法では、液体クロマトグラフィー収率ではあるが
６８．６％と高い値を示すものの、この反応も、１２．
３％のビンブラスチンを始め他にも種々の化合物が同時
に生成するため、分離・精製に困難を要する。

〔発明が解決しようとする課題］ 本発明は、カサランチンとビンドリンをＦｅ３′″の存
在下で反応させて３′、　　４’−アンヒドロビンブラ
スチンを製造する方法において、その収率をさらに向上
させる事を目的とする。

〔課題を解決するための手段〕

本発明は、上記目的を達成するためになされたものであ
って、前述の既知の方法の内、工業的見地から、カサラ
ンチン（Ｃａ　ｔｈａｒａｎ　ｔｈ　１ｎｅ）とビンド
リン（Ｖｉｎｄｏｌｉｎｅ）をｐ　ｅ　３　＋の存在下
でカップリングさせた後に還元する方法に注目した。そ
して各方面から検討した結果、従来、カップリング反応
後も反応系に残留せしめておいても無害であるとされて
いたＦｅ’°に敢えて着目し、Ｆｅ３＋を除去した後に
還元反応を行ったところ、従来の技術常識から予測され
るところから大きく反して、目的物質の収率が大幅に増
加するのみでなく、目的物質の分離回収に当ってクロマ
ト処理等煩雑な分離精製手段を要することなく直接結晶
化して容易に分離回収することができ名ので工業的方法
として特に適するという予期せざる効果を発見した。

この新知見を基礎として更に研究をすすめた結果、本発
明の完成に到った。すなわち、本発明の第１の発明は、
カサランチンとビンドリンとをＦｅ’。

の存在下に反応させた後、Ｆｅ３＋を除去し又はＦｅ３
＋を不活性化し、次いで還元することにより３′、　　
４’−アンヒドロビンブラスチンを製造する方法にある
。そして、第２の発明は上記方法において、Ｆｅ”の不
活性化を鉄配位子の添加により行い、３′、　　４’−
アンヒドロビンブラスチンを製造する方法にある。

本発明を実施するに際して、Ｆｅ”の存在下でのカサラ
ンチンとビンドリンとの反応は、従来どおりに行えばよ
い。

このカップリング反応終了後に、Ｆｅ”の除去を又は不
活性化処理を行うのであるが、Ｆｅ”の除去は、カップ
リング反応終了後に塩基性の化合物を添加してＦｅ”の
沈澱を生成せしめ、これを濾過、遠心分離等常用される
固液分離法によって系外へ除去して行う。ここで用いら
れる塩基性化合物としては、反応を妨害することな（Ｆ
ｅ”の沈澱を生成することができる塩基性の化合物をす
べて指すものであって、例えば次のものが例示される：
水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム
、水酸化バリウム、などの金属水酸化物、炭酸ナトリウ
ム、炭酸カリウム、炭酸アンモニウムなどの炭酸塩、重
炭酸ナトリウム、重炭酸カリウムなどの重炭酸塩、尿素
、メチルアミン、エチルアミン、ジメチルアミン、トリ
メチルアミンなどのアミン類、水酸化テトラエチルアン
モニウムなどの四級アンモニウムの水酸化物、アンモニ
ア水。

ｐ　ｅ　３　＋の不活性化処理とは、後の工程における
Ｆｅ”の悪影響や妨害作用等を除去ないし低減セしめる
処理を広く意味する。

したがって、Ｆｅ”″の不活性化処理には、後の工程に
おいて鉄が有用成分と配位することを抑制する処理ない
しは鉄の酸化作用を抑制する作用等も広く包含され、例
えば、Ｆｅ”の悪影響ないし妨害を除去するためにカッ
プリング終了後に鉄配位子を添加してＦｅ３＋を予じめ
不活性化する方法、Ｆｅ”　３＋を還元して金属鉄また
はＦｅ２°にかえ不活性化する方法、別種の配位子を作
用せしめて別種の配位子をそれぞれ生成せしめた後にこ
れらの錯体を複塩となして共沈または無毒の溶解物とす
る方法等が広く包含される。また、上記したＦｅ３°の
塩基性化合物との沈澱を全く除去しないで系内に残留せ
しめたり、あるいは該沈澱の一部を除去して他を残留せ
しめたりする方法も、好適な不活性化法の１例である。

Ｆｅ３＋不活性化処理の内、鉄配位子を添加して不活性
化する方法とは、鉄配位子すなわちＦｅ’＋に配位する
ような化合物を添加する方法である。本発明において使
用される鉄配位子としては下記の化合物が例挙されるが
、これら以外の錯化剤も広く使用できる： 低級脂肪酸：ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸
、トリメチル酢酸、カプロン酸、エナント酸、カプリル
酸等。

ジカルボン酸：脂肪族ジカルボン酸（シュウ酸、マロン
酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、マレイン酸、
フマル酸、ピメリン酸等）；芳香族ジカルボン酸（フタ
ル酸、イソフタル酸、テレフタル酸等）等。

ケトカルボン酸：ビルビン酸 ヒドロキシカルボン酸：脂肪族ヒドロキシカルボン酸（
グリコール酸、乳酸、ヒドロアクリル酸、グリセリン酸
、リンゴ酸、酒石酸、コハク酸、クエン酸等）；芳香族
オキシカルボン酸（サリチル酸、オキシ安息香酸、没食
子酸等）等。

ジオール：エチレングリコール、カテコールアスコルビ
ン酸等。

ポリアミノカルボン酸：　ＥＤＴＡ等。

糖誘導体ニゲルコース、果糖、シェフロース、アルブチ
ン等。

これらの塩類ニ ジアン化物ニジアン化カリウム、シアン化ナトリウム、
シアン化トリブチルアンモニウム等。

チオシアン化物：チオシアン化カリウム、チオシアン化
ナトリウム、チオシアン化トリブチルアンモニンム等。

　　１ フッ素化物：フッ化ナトリウム、フッ化カリウム等。

ピリジン誘導体：フェナントレン誘導体、ジピリビル誘
導体等。

リン酸および縮合リン酸：ポリリン酸、メタリン酸、ピ
ロリン酸、リン酸およびその塩。

これら鉄配位子は、Ｆｅ”に対して０．５〜２００倍モ
ル、好ましくは１〜１０倍モル添加するのが好ましい。

このようにしてＦｅ３＋を不活性化した後、反応系に還
元剤を加えて目的化合物を生成せしめる。

不活性化処理によってＦｅ”の沈澱が生じる場合には、
沈澱を除去した後の濾液等反応液体に上記処理を行って
もよい。一方、除去した沈澱は、有機溶媒で洗浄した後
、この洗液を上記濾液ないし上澄等反応液体と合し、減
圧濃縮して有機溶媒を除き、再び水を加えた後ＮａＢＨ
ｓなどの還元剤で還元するか、減圧濃縮する事なく　　
ｐＨ＜６とした後、分液し、水層にＮａＢＨ４などの還
元剤を加えて還元してもよい。また、不活性化処理によ
って生じた沈澱ば、これを除去することなく、また゛不
活性化処理が液状で行われた場合は、何もすることなく
そのまま、水層を有機溶媒で抽出し、得られた有機層を
減圧濃縮し、水を加えた後還元する方法などがある。

還元剤としては非限定的に次のものが例示される： 水素化合物：水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素カ
リウム、水素化ホウ素リチウム、シアン水素化ホウ素ナ
トリウム； 金属：亜鉛、鉄、スズ、アルミニウム、マグネシウム；
その他が挙げられる。

これらの還元剤は、還元力が強い場合には、使用量を減
らしたり還元剤自体を修飾ないしマスキングする等した
りすればよい。

カップリング反応は、空気雰囲気下で行っても良いが、
窒素雰囲気下ないしは窒素通気下で行うとより良い結果
が得られる。

これらの方法で生成した３′、　　４’−アンヒドロビ
ンブラスチンは、有機溶媒で抽出して得る事ができる。

本性によれば、目的化合物の純度が非常に高いので、自
由に結晶化させることができ、低収率の従来法の場合に
は必須であったカラム処理等分離精製を予じめ行う必要
がなく、再結晶で充分に回収することができる。このよ
うに、分離が容易であるので本性は工業的な方法として
非常に適している。

〔発明の効果〕

本発明の方法によって、３′、　　４′−アンヒドロビ
ンブラスチンの収率が液体クロマトグラフィー収率で、
６８．６％から８９％に向上するとともに、分離、精製
の必要なく高純度の結晶として３”、　　４’−アンヒ
ドロビンブラスチンが得られるようになった。

〔実施例〕

次に実施例によってこの発明をさらに具体的に説明する
が、これは本発明を限定するものではない。

実施例１ ５００ｍｌの反応容器に水１８０−を加えＮ２ガスを吹
き込みながら氷冷する。そこへ、カサランチンの２硫酸
塩１８４　ｍｇ　（４８０ｕ　ｍｏ　１）を水２０＋ｄ
に溶解したものと、ビンドリン２２０　ｍｇ　（４８０
ｕ　ｍｏ　１）を水２０ｍ１と２Ｎ−１ＩＣＩ　０．４
　ｒｎｌに溶解したものを加える。そこへ、ＦｅＣＩｚ
　・６ｏ２ｏ　ｓ、　１　ｇを水５０ｍｆに溶解したも
のを加え反応を開始する。Ｎ２を吹き込みながら、水冷
下で３時間撹拌後、Ｎａ０Ａｃ　１２．２ｇを水５０ｍ
ｆに溶解したものを加える。そこへ、ＮａＢＨ４２２７
■を固体のまま加え、３０分間撹拌する。反応混合物を
酢酸エチル１００艷で４回抽出し、有機層を無水硫酸ナ
トリウムで乾燥後減圧濃縮する。得られた残渣をクロロ
ホルム３０＋ｎｆに溶かした後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶
液５０ｄで洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾
燥後濃縮する。残渣にメタノール２−を加えるど結晶が
生成する。生成した結晶を濾過し３０４■の無色結晶と
してｍｐ　２００〜２０４（分解）’ｃの３”、　　４
’−アンヒドロビンブラスチンを得た。生成物の収率は
８０％であった。この化合物は’）Ｉ−ｎｍｒ（ＣＤＣ
Ｉ：＋）で３．８９　（３Ｈ，Ｓ）と３．５４（３Ｈ，
Ｓ）にシグナルを与え、天然型の３”、　　４”−アン
ヒドロビンブラスチンである。

実施例２ ５０ｍ１の反応容器に水（１０ｍＮ）を入れ水冷しなが
ら３０分間窒素とバブリングさせた後１１．９ｍＭカサ
ランチン２硫酸塩水溶液２００　ｕ　ｉ　（２，３９ｕ
　ｍｏｌ）、１２．０ｍＭヒシドリンの塩酸溶液２００
　ｕ　１　（２，４１ｕ　ｍｏｌ）及び１．２Ｍ塩化第
２鉄水溶液１．　Ｏｍｆｆ１（１，２０ｍｍｏｌ）をこ
の順序で加えて水冷上窒素をバブリングさせながら３時
間攪拌する。２５％アンモニア水１　ｍｆｌを加えてア
ルカリ性にし、酸酢エチル１０ｄで３度抽出する。

抽出液をまとめて減圧乾固した後水（１０ｄ）、２ＮＨ
Ｃ１２４μ２に溶かし、水素化ホウ素ナトリウムの２２
７ｍＭ水溶液１　ｒａｉｌ　（２２７ｕ　ｍｏｌ）を加
えて３０分攪拌する。その後、２５％アンモニア水２ｄ
を加えて、酸酢エチル１０ｄで３度抽出する。

抽出液を合し、４０°Ｃ以下で減圧乾固したのち高速液
体クロマトグラフィーにより下記の条件で分析した。そ
の結果、３”、　　４’−アンヒドロビンブラスチンを
収率８９％で得た。

カラム：　ＹＭＣ−Ｐａｃｋｅｄ　ｃｏｌｕｍｎ　ＡＭ
−３１２（Ｓ−５１２０八〇〇Ｓ） 溶媒：　ＣＨ３ＣＮ：０．０１Ｍ炭酸アンモニウム水溶
液−３：２ 流速：　１　ｉｆ／ｍｉｎ カラム温度：４５°Ｃ 検出波長：　２５４ｎｍ リテンションタイム：３”、４’−アンヒドロビンブラ
スチン（４０，８分） 実施例３ 実施例２において２５％アンモニア水１戚にかえて、Ｌ
−アスコルビン酸６３４■（３，６ｍｍｏｌ）を加えた
後、水素化ホウ素ナトリウムの２２７ｍＭ水溶液１ｄ　
（２２７μｍｏｌ）を加えて３０分攪拌した他は実施例
２と同様の処理を行い３’、　　４’−アンヒドロビン
ブラスチンを収率８８％で得た。

実施例４ 実施例３においてＬ−アスコルビン酸にかえて、クエン
酸３アンモニウムを加えた他は実施例３と同様の処理を
行い３′、　　４’−アンヒドロビンブラスチンを収率
８７％で得た。

実施例５ 実施例３においてＬ−アスコルビン酸にかえて、ピルビ
ン酸ナトリウムを加えた他は実施例３と同様の処理を行
い３”、　　４’−アンヒドロビンブラスチンを収率８
５％で得た。

実施例６ 実施例３においてＬ−アスコルビン酸にかえて、シュウ
酸を加えた他は実施例３と同様の処理を行い３”、　　
４’−アンヒドロビンブラスチンヲ収率８７％で得た。

実施例７ 実施例３においてＬ−アスコルビン酸にかえて、リンゴ
酸を加えた他は実施例３と同様の処理を行い３′、　　
４’−アンヒドロビンブラスチンを１１８８％で得た。

実施例８ 実施例３においてＬ−アスコルビン酸にかえて、マレイ
ン酸を加えた他は実施例３と同様の処理を行い３’、　
　４’−アンヒドロビンブラスチンを収率８４％で得た
。

実施例９ 実施例３においてＬ−アスコルビン酸にかえて、フッ化
ナトリウムを加えた他は実施例３と同様の処理を行い３
′、　　４’−アンヒドロビンブラスチンを収率８５％
で得た。

実施例１０ 実施例３においてＬ−アスコルビン酸にかえて、アルブ
チンを加えた他は実施例３と同様の処理を行い３′、　
　４’−アンヒドロビンブラスチンを収率８２％で得た
。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、カサランチンとビンドリンとをＦｅ＾３＾＋の存在
   下に反応させた後、Ｆｅ＾３＾＋を除去し又はＦｅ＾３
   ＾＋を不活性化し、次いで還元することを特徴とする３
   ′，４′−アンヒドロビンブラスチンの製造方法。 ２、鉄配位子を添加することによりＦｅ＾３＾＋の不活
   性化を行うことを特徴とする請求項１記載の３′，４′
   −アンヒドロビンブラスチンの製造方法。