JPH0235759B2

JPH0235759B2 - Sefuarosuhorinjudotaioyobigaijudotaioganjusuruyakuzai

Info

Publication number: JPH0235759B2
Application number: JP23455282A
Authority: JP
Inventors: Shigeaki Muto; Koichi Niimura; Takao Ando; Masahiko Fujii; Takami Fujii; Akihiko Sugano; Takao Furusho; Chikao Yoshikumi
Original assignee: Kureha Corp
Current assignee: Kureha Corp
Priority date: 1982-12-29
Filing date: 1982-12-29
Publication date: 1990-08-13
Anticipated expiration: 2002-12-29
Also published as: JPS59128388A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明はセフアロスポリン誘導体及び該誘導体
を含有する薬剤に関する。詳しくは、セフアロスポリン系抗生物質に化学
修飾をほどこすことにより抗菌活性は失なうが生
体内に吸収されると再度抗菌活性を回復すること
を特徴とする抗生物質とセフアロスポリン様活性
を有する薬剤に関する。セフアロスポリン系抗生物質は、現在広く用い
られ、その細菌に対する選択毒性のためにすぐれ
た薬剤である。しかしながら生体内に常在する有用菌叢に対し
ても等しく抗菌作用を有するために、生体内、特
に腸内の菌叢を乱すという重大な欠点がある。こ
の欠点は抗生物質を経口摂取した場合著しい。そ
の結果菌交代症等の病を引きおこし、場合によつ
ては大腸炎、下痢等にもなる。本発明者らは、これらの欠点のない、セフアロ
スポリン様活性を有する抗生物質を鋭意検討した
結果、一般式（）で示されるセフアロスポリン
系誘導体が有効であることを見い出し、本発明に
至つた。したがつて、本発明の目的はセフアロスポリン
系抗菌剤の有効成分として有用であるセフアロス
ポリン誘導体を提供することにある。以下本発明を詳しく説明する。本発明の特徴は、一般式（）：〔式中、R₁は−Ｈ、−OH、−CONH₂又は−
（CH₂）nCOOH（式中、その塩及びエステルを含
有し、ｎ＝０又は１）、ｌは０、１又は２である〕で示されるセフアロスポリン誘導体にある。また、本発明の特徴は上記一般式（）で示さ
れるセフアロスポリン誘導体を有効成分とする抗
菌剤にある。一般式（）で示される化合物〔以下本物質と
称す〕はセフアロスポリン系抗生物質に化学修飾
をほどこすことによつて得たものであるが、薬剤
投与時に生体内常在菌叢に、影響を与えずに吸収
され、血中に入つて始めて抗菌活性を有するよう
になるまつたく新しいタイプの抗生物質であり、
又その急性毒性も低い極めて安全な物質である。本物質は以下の方法によつて得られる。一般式（）：で示される７−（アダマンタン−１−アセトアミ
ド）セフアロスポラン酸が用いられる。上記カルボキシ基における反応性誘導体として
は酸クロライド・酸ブロマイド・酸アジドアルキ
ルリン酸混合無水物、アルキル炭酸混合無水物、
脂肪族カルボン酸混合無水物、酸無水物、活性ア
ミド、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、ア
ンモニウム塩またはトリメチルアミン、ジシクロ
ヘキシルアミン等を用いることが出来る。この系に一般式（）：〔式中、R₁は−Ｈ、−OH、−CONH₂又は−
（CH₂）nCOOH（式中、その塩及びエステルを含
有する。ｎは０又は１を示す）、ｌは０、１又は
２を示す〕で表わされる化合物を加え反応させる。この一般式（）のアミノ基は塩酸塩、臭化水
素酸塩等の酸塩であつてもよい。一般式（）で示される化合物としては例えば
次の化合物があげられる。４−アミノフエニル酢酸、３−アミノフエニル
酢酸、２−アミノフエニル酢酸、４−トルイジ
ン、３−トルイジン、２−トルイジン、４−アミ
ノ馬尿酸、チラミン、４−アミノ安息香酸、３−
アミノ安息香酸、２−アミノ安息香酸、４−アミ
ノサリチル酸、３−アミノサリチル酸、２−アミ
ノサリチル酸、６−アミノニコチン酸、２−アミ
ノニコチン酸、又はこれらの塩又はエステルを包
含する。一般式（）で示される化合物と一般式（）
との反応は特に限定されないが、通常−30℃乃至
50℃、0.5乃至48時間反応が好ましい。この反応は通常、溶媒中で行われる。溶媒とし
てアセトン、テトラヒドロフラン、ベンゼン、塩
化メチレン、塩化エチレン、ジオキサン、アセト
ニトリル、クロロホルム、酢酸エチル、蟻酸エチ
ル、エーテル、ジメチルホルムアミド等が用いら
れるが反応に関与しないものであれば、特に限定
なく用いられる。これらの中、水溶性の溶媒は水
と混合して用いることもできる。反応系にカルボジイミド、クロル炭酸エチル、
クロル蟻酸エチル、オキザリルクロライド、キノ
リン、炭酸水素アルカリ金属、トルアルキルアミ
ン、ジアルキルアニリン、ピリジンを加えると好
ましい。反応後、必要に応じて保護基をはずし、
該反応系より目的物を溶媒洗浄、溶媒抽出、カラ
ム分離、再沈、溶媒留去、結晶化（再結晶化も含
む）等の手段を用いて採取する。本物質（）のその塩又はそのエステルはいず
れも医薬上許容されるものであればよい。本物質
（）合成後、常法によりカルボン酸の塩又はそ
のエステルに誘導してもよい。塩はナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム
塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミ
ン、アルギニン、オルニチン、リジン、ヒスチジ
ン等の塩基性アミノ酸等を包含する。エステルとしては低級アルキル、例えばメチ
ル、エチル、プロピル、ブチル、メトキシメチ
ル、エトキシメチル、イソプロポキシメチル、α
−メトキシエチル、α−エトキシエチル等のアル
コキシメチル、α−アルコキシエチル等のα−ア
ルコキシ−α−置換メチル基、メチルチオメチ
ル、エチルチオメチル、イソプロピルチオメチル
等のアルキルチオメチル基、またはピバロイルオ
キシメチル、α−アセトキシブチル等のアシルオ
キシメチル基またはα−アシルオキシ−α−置換
メチル基等が包含される。本物質の薬理学的効果は次のようにして調べ
た。 (a) 急性毒性 ICR−JOL系マウスを用いて腹腔内及び強制
経口投与による急性毒性を調べた。本物質は腹
腔内及び経口投与とも生理食塩水に分散し、こ
れを注射筒または胃ゾンデを用いて所定の量に
調整して与えた。投与後中毒症状の観察を続け、７日目までの
経時的死亡率からLD₅₀値を求めた。生存例、
死亡例とも解剖して所見を得た。LD₅₀値はリ
ツチフイールド・ウイルコクソン（Litchfield
−Wilcoxon）図計算法により求めた。結果は
いずれも腹腔内、経口を問わずLD₅₀値は10
ｇ／Kg以上であつた。 (b) 腸内菌に対する影響本物質をマウスに500mg／Kg２日間経口投与
して投与前と投与後１日目にマウス糞便を採取
した。この一部を各種培地で25℃又は37℃にて
１乃至５日間培養して大腸菌、緑膿菌、連鎖球
菌、乳酸菌、ビフイダス菌そしてバクテロイデ
ス菌について調べた。本物質の投与前と投与後において上記各菌数
はほとんど変らなかつた。腸内菌叢に影響しな
いことがわかつた。 (c) 抗菌活性日本化学療法学会標準法に準拠して調べた。供試菌として Esherichia Coli IFO 12734 Staphylococcus aureus IAM 1011 を用い最小発育阻止濃度（MIO）を求めた。 (d) 体内に吸収された時に活性に変化することを
証明するために代謝活性化酵素〔ラツト肝ホモ
ジネート（８−9mixと称す）〕を用いて次の実
験を行なつた。 Staphylococcus aureus IAM 1011の前培養
液10⁸コ／mlを調整し、50倍量のMueller−
Hinton寒天培地に加え平板とした。平板上に径８mmのペニシリンカツプを置き、
その中に本物質又は本物質とＳ−9mixの培養
物0.1mlを加え、37℃、18時間培養し増殖阻止
円の径を測定した。比較としての出発物質の増殖阻止円の径を
100とした場合、本物質のみの系のそれは０乃
至33％であつた。一方本物質＋Ｓ−9mixの系
のそれは33乃至100であつた。即ち本物質はそのままでは抗菌性は低いが体
内に入つて酵素により活性化されることを示し
ている。 (e) 感染症に対する効果生体内で活性化されることを確かめるために
本物質を用いて感染症に対する治療実験を行な
つた。各群20匹のマウス腸腔内にEsherichia Coli
IFO又Staphylococcus aureus IAMを接種し
て感染させた後、各々の本物質を感染直後及び
４時間後に500mg／Kg経口投与し、７日間の感
染死の有難で判定した。無処理群は、２日間に
全例死亡したのに対し、いずれの本物質でも40
％以上の生存率を示して、経口抗感染症剤とし
て効果のあることが示された。以上述べたように本物質は安全にして腸内菌叢
に対しては影響がなく生体内に入つて活性型にな
る新しいセフアロスポリン系抗生物質であるとい
える。生体内でセフアロスポリン系抗生物質に変換さ
れるので用途としてはセフアロスポリン系抗生物
質とまつたく同じ分野の抗菌剤として用いること
が出来る。即ち、グラム陰性菌、グラム陽性菌に
作用する。本物質は一般式（）で示されるセフアロスポ
リンの少なくとも１種（塩又はエステルの場合は
医薬上許容され得る塩又はエステルとする）と医
薬として許容されうる担体、希釈剤又は助剤を含
有する医薬組成物として、更に単位投与形態とし
て用い得る。これらは経口、注射または直腸投与
による方法で投与出来る。経口投与は錠剤、カプ
セル、粉末、顆粒、散剤、丸剤、アンプル剤等の
形態であることが出来る。これらは充填剤、伸展剤、結合剤、湿潤剤、崩
壊剤、溶解遅効剤、再吸収促進剤、吸着担体、潤
滑剤等を包含する。具体的には殿粉、マンニトー
ル、ケイ酸、セルロース誘導体、ゼラチン、アル
ギン酸塩、グリセリン、寒天、炭酸カルシウム、
重炭酸ナトリウム、パラフイン、第四アンモニウ
ム化合物、グリセリンモノステアレート、カオリ
ン、ベントナイト、タルク、ステアリン酸カリウ
ム、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレング
リコールなどがあげられる。又医薬として許容されるエマルジヨン、溶液、
懸濁液等であつてもよい。坐薬はポリエチレングリコール及び脂肪酸又は
そのエステルを含み得る。シラツプ、エリキシールは、水またはパラフイ
ンのような不活性希釈剤を含有し、経口投与に適
当な液体組成物として使用し得る。これらは湿潤
剤、甘味剤、風味剤のような助剤を含有してもよ
い。注射投与に用いる組成物は無菌で、水性または
非水性の溶液、懸濁液またはエマルジヨンであつ
てもよく、例えばプロピレングリコール、ポリエ
チレングリコール、オリーブ油等を含むことが出
来る。本物質は組成物として用いる場合活性成分とし
て0.01乃至99.5％通常0.1乃至90％含有し得る。本物質はセフアロスポリン系抗生物質と同様の
用途に用いられ細菌由来の感染の治療に有用であ
る。薬剤は感染の度合、患者の状態によつてその
投与量は異なるが一般的に成人患者１人に１日
0.1〜10ｇを数回に分けて投与する。実施例１Ｎ−（４−カルボメトキシメチルフエニル）−７
−（アダマンタン−１−アセトアミド）セフア
ロスポラン酸アミド７−（アダマンタン−１−アセトアミド）セフア
ロスポラン酸2.24ｇ、４−アミノフエニル酢酸メ
チル0.83ｇおよびＮ、N′−ジシクロヘキシルカル
ボジイミド1.05ｇをテトラヒドロフラン30mlに溶
かし、その溶液を25℃で24時間撹拌した。混合物
中の結晶を濾取し、テトラヒドロフラン30mlで１
回洗浄した。残留物をエタノールで再結晶して、
1.2ｇ（収率40％）の白色粉末状結晶を得た。融
点は190〜192℃であつた。赤外吸収スペクトル；νmax、cm^-1（KBr） 2930、1785、1740、1663、1540、1230 紫外吸収スペクトル；λmax、nm（CH₃OH） 223、269 元素分析値はC₃₁H₃₇N₃O₇Sとして計算値（％）Ｃ、62.52；Ｈ、6.22；Ｎ、7.06 実測値（％）Ｃ、62.5 ；Ｈ、6.2 ；Ｎ、7.1 であつた。実施例２Ｎ−（４−ヒドロキシフエニル）−７−（アダマ
ンタン−１−アセトアミド）セフアロスポラン
酸アミド７−（アダマンタン−１−アセトアミド）セフ
アロスポラン酸4.48ｇ、４−アミノフエノール
1.09ｇおよびＮ、N′−ジシクロヘキシルカルボジ
イミド2.10ｇをテトラヒドロフラン60mlに溶か
し、その溶液を15℃で24時間撹拌した。混合物中
の結晶を濾取し、テトラヒドロフラン30mlで１回
洗浄した。残留物をエタノールで再結晶して、
2.1ｇ（収率39％）の白色粉末状結晶を得た。融
点は190〜191℃であつた。赤外吸収スペクトル；νmax、cm^-1（KBr） 2930、1788、1747、1663、1521、1227 紫外吸収スペクトル；λmax、nm（CH₃OH） 237、272 元素分析値はC₂₈H₃₃N₃O₆Sとして計算値（％）Ｃ、62.52；Ｈ、6.22；Ｎ、7.06 実測値（％）Ｃ、62.5 ；Ｈ、6.2 ；Ｎ、7.1 であつた。実施例３Ｎ−〔β−（４−ヒドロキシフエニル）エチル〕
−７−（アダマンタン−１−アセトアミド）セ
フアロスポラン酸アミド７−（アダマンタン−１−アセトアミド）セフ
アロスポラン酸4.48ｇ、チラミン1.37ｇおよび
Ｎ、N′−ジシクロヘキシルカルボジイミド2.10ｇ
をテトラヒドロフラン70mlに溶かし、その溶液を
10℃で34時間撹拌した。混合物中の結晶を濾取
し、テトラヒドロフラン30mlで１回洗浄した。残
留物をDMF−酢酸エチルで再結晶して、2.9ｇ
（収率51％）の淡黄色粉末状結晶を得た。融点は
154〜156℃（分解）であつた。赤外吸収スペクトル；νmax、cm^-1（KBr） 2930、1766、1735、1646、1520、1240 紫外吸収スペクトル；λmax、nm（CH₃OH） 223、265 元素分析値はC₃₀H₃₇N₃O₆Sとして計算値（％）Ｃ、63.49；Ｈ、6.53；Ｎ、7.41 実測値（％）Ｃ、63.6 ；Ｈ、6.5 ；Ｎ、7.4 であつた。実施例４腸内菌叢に対する影響上記の各薬剤をICR雌マウス（６週令）５匹を
１群とするものに500mg／Kg連日２日間経口投与
した。投与前ならびに投与後１日目に各マウスの糞便
を採取して、100倍量の嫌気性希釈液（リン酸緩
衝液）で希釈し磨砕し、その0.1mlを下記表に示
す各被測定菌の培地に塗布し37℃あるいは25℃で
１〜５日間好気培養ならびに嫌気培養（嫌気性グ
ローブボツクス法）を行なつて大腸菌、緑膿菌、
レンサ球菌、乳酸菌、ビフイダス菌およびバクテ
ロイデス菌の各菌数を測定した。

【表】

【表】結果を第２表に示す。

【表】第２表より明らかなようにNo.５投与群では大腸
菌の増大がみられるが、本物質のそれぞれは投与
前とあまり変らない。又、No.５は乳酸菌が減少す
るのに対して本物質のそれぞれは投与前の乳酸菌
と変らない。実施例５抗菌活性を日本化学療法学会標準法に準拠して
寒天平板希釈法により測定した。試験方法供試菌 Esherichia coli IFO 12734 Staphylococcus aureus IAM 1011 上記菌株をMueller−Hinton培地に接種し、37
℃で18〜48時間培養した後、10⁶／mlに調整した
ものを供試菌液とした。各所定濃度の検体液を薬剤感受性測定用培地と
してMueller−Hinton培地にそれぞれ1/9量加え、
寒天平板を作製した。上記供試菌液を各平板に白金耳にて約２cm画線
塗抹した後、37℃で18時間〜24時間培養を行い、
完全に菌の発育が阻止された濃度をもつて最小発
育阻止濃度とした。結果を第３表に示す。

〔１ml中の組成〕

Ｓ−９ 0.5ml KCl 3.3μmol MgCl₂・6H₂O 8μmol Glucose・６・phosphate 5μmol NADH 4μmol NADPH 4μmol 0.2Mリン酸緩衡液（PH7.4） 0.5ml 検体液0.1mlとＳ−9mix0.9mlあるいは対照とし
て0.1Mリン酸緩衡液0.9mlを混和し、37℃にて20
分振とう培養し、感受性試験を行つた。 Staphylococcus aureus IAM 1011をMueller
−Hinton培地に接種し37℃18時間培養した後、
10⁸コ／mlに調整し50倍量のMueller−Hinton寒
天培地を混和し平板とした。その上にペニシリン
カツプ（径８mm）を置き、その中に上記反応液
0.1mlを加え４℃２時間放置後、37℃18時間培養
し、増殖阻止円の径を測定した。結果を第４表に
示す。

【表】実施例７マウス実験的感染症に対する効果 (1) ddY系SPFマウス各群20匹にEsherichia
Coli IFO 12734 1.4×10⁸をそれぞれ腹腔内接
種して感染させ、感染直後並びに４時間後の２
回、実施例１の物質を500mg／Kg経口投与し、
７日間感染死の有無を観察したところ、無処置
対照群では、感染４日目に全数死亡したが、本
物質投与群では、感染７日目でもなお、70％以
上の生存がみられた。 (2) ddY系SPFマウス各群20匹に
Staphylococcus aureus IAM 1011 2.3×10⁸
をそれぞれ腹腔内接種して感染させ、感染直後
並びに４時間後の２回、実施例１の物質を500
mg／Kg経口投与し、７日間感染死の有無を観察
したところ、無処置対照群では、感染３日目に
全数死亡したが、本物質投与群では、感染７日
目でもなお、60％以上の生存がみられた。実施例８ (1) 錠剤実施例１で得られた本物質 175mg 乳糖 16mg でん粉５mg ハイドロキシプロピルセルロース 3.0mg ステアリン酸マグネシウム 1.0mg （200mg／錠）本物質、乳糖を混合し、ハイドロキシプロピ
ルセルロース水溶液を加え練合してから乾燥粉
砕する。この粉砕物にあらかじめでん粉に分散
したステアリン酸マグネシウムを添加混合し、
通常の方法で打錠を行い錠剤とした。 (2) 顆粒剤実施例２で得られた本物質 176mg 乳糖 16mg でん粉４mg ハイドロキシプロピルセルロース４mg 本物質、でん粉、乳糖を混合しておき、ハイ
ドロキシプロピルセルロース水溶液を加え、混
合、乾燥、粉砕する。12乃至48メツシユの範囲
で篩別することにより顆粒剤を得た。

Claims

【特許請求の範囲】１一般式：〔式中、R₁は−Ｈ、−OH、−CONH₂又は−
（CH₂）nCOOH（ｎは０又は１であり、その塩又
はそのエステルを含む）、ｌは０、１又は２を示
す〕で表されるセフアロスポリン誘導体。２一般式：〔式中、R₁は−OH又は−（CH₂）nCOOH（ｎは
０又は１であり、そのC₁乃至C₄の低級アルキル
エステルを含む）、ｌは０、１又は２を示す〕で表される特許請求の範囲第１項に記載のセフア
ロスポリン誘導体。３一般式：〔式中、R₁は−Ｈ、−OH、−CONH₂又は−
（CH₂）nCOOH（ｎは０又は１であり、その塩又
はそのエステルを含む）、ｌは０、１又は２を示
す〕で表されるセフアロスポリン誘導体を含有する抗
菌剤。４一般式：〔式中、R₁は−OH又は−（CH₂）nCOOH（ｎは
０又は１であり、そのC₁乃至C₄の低級アルキル
エステルを含む）、ｌは０、１又は２を示す〕で表される特許請求の範囲第３項に記載の抗菌
剤。