JPH02289598A - Ｍｓ―１１４４物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は海綿からの抽出成分である新規環状ペプチド化
合物に関する。

（従来の技術） 海綿類からは，これまで幾つかの生埋活性物質が単離さ
れている。例えば伊豆半島田牛近海で採取されたディス
コデルミア　キャリクス（　Ｄｉｓｃｏｄｅｒｍｉａ　
ｃａｌｙｘ　）からは抗腫瘍活性を有するカリクリンＡ
（特開昭６２　−　１７８５９５号公報）が，また，デ
ィスコデルミア　キイイエンシス（　Ｄｉｓｃｏｄｅｒ
ｍｉａ　Ｋｉｉｅｎｓｉｓ　）からは抗菌作用を有する
テトラデカペプチドであるディスコデルミン類（特開昭
６１　−　１００５９７号公報）が単離されている。

（解決手段） 本発明者等は，我国産の海洋無脊椎動物からの生埋活性
物質の探索を行なってきたが，海綿テオネラ　エスピ−
（　Ｔｈｅｏｎｅｌｌａ　ｓｐ．　）の親水性抽出成分
中にトロンビン阻害活性を有する物質を認め，この物質
を単離・精製することにより本発明を完成した。

即ち，本発明は下記化学構造式で示されるＭＳ　−　１
１４４物質又はその塩に関する。

ここでＭＳ　−　１１４４物質の塩としては，塩酸，硫
酸等の無機酸との塩，酢酸，シュウ酸等の有機酸との塩
が挙げられる。

（製造法） ＭＳ　−　１１４４物質は海綿Ｔｈｅｏｎｅｌｌａ　ｓ
ｐ．をエタノールで抽出し，抽出成分を水とエーテルで
２層分配し，水層に残る成分の中から単離することがで
きる。

原料となる海綿は八丈島をはじめ，我国近海に生育して
おり，これを採取して使用することができる。海綿は粉
砕したのち抽出する。抽出は常温で行ない抽出に用いる
エタノールは７０％以上のものが用いられる。抽出は海
綿の約３倍量のエタノールを用い攪拌下に数回行なう。

抽出液を減圧濃縮したのち，水一エーテルによる２層分
配に付す。水層を更Ｋｎ−ブタノールで抽出し，プタノ
ール層に移行した成分をメタノールで抽出する。メタノ
ールに可溶な成分をゲルｒ過で繰り返し分画し，得られ
た活性成分を更に高速液体クロマトグラフィー等を用い
て精製し，純粋なＭＳ　−　１１４４物質を得る。

精製されたＭＳ　−　１１４４物質の理化学的性状は次
の通りである。

（１）　　溶解性　水，メタノールに易溶。エタノール
に難溶。

（２）　　Ｒｆ値　０．４８　（　Ｋｉｅａｅｌｇｅｌ
　６０　Ｆ２５４　ｍ展開溶媒；ｎ−プタノール：酢酸
：水＝４：１：２）（ｉｉｉ）　　呈色反応　Ｄｒａｇ
ｅｎｄｏｒｆｆ試薬及びＳ　ａｋａｇｕｃｈｉ試薬に陽
性 （い分子式　Ｃ３６Ｈ４ＳＮＱＯ＆ （Ｖ）分子量　７３１ （ｖｉ）　　赤外線吸収スペクトル（　Ｃｍ−ｔ．　　
ＫＢｒ　）３４００〜３３００，　　１６５０，　　１
５１０，１４４０，　　１２４５．　　１２００，　　
１１３０，　８４０，（ｕｉＤ　　紫外線吸収スペクト
ル（　ｎｍｌ　メタノール）λｍａｘ　　２７８（ε＝
１３００），　２８５ｓｈ（ε＝ｔｏｓｏ）Ｑ１１）加
水分解　６Ｎ塩酸で１１０℃，２４時間加水分解すると
　Ｌ−プロリン，Ｄ−フエニルアラニン，Ｌ−ジアミノ
ブロピオン（各１モル）及び未知の強酸基性アミノ酸を
与える。

（発明の効果） 本発明の化合物は強力なトロンビン阻害活性を有するこ
とから血液凝固阻止剤として心臓血管系の硬塞の予防，
術後血栓の予防・治療，動脈硬化症の予防・治療等に有
用である。

以下にトロンビン阻害活性の測定方法及びその結果を示
す。

トロンビン阻害活性の測定 Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ　Ｒｅｓ．　１，　２６７　（１
９７２）に記載の方法に準じて，以下の方法で測定した
。

本発明の化合物を水溶液として種々の濃度に希釈し，ト
ロンビン１００μｔ　（　０．２Ｕ　）を加え，３７°
で５分間プレイン　キエペーションを行った。トロンビ
ンは５０　ｍＭ　トリス緩衝ｉ　ｐＨ　８．３に溶解し
て用いた。

次に合成基質　Ｓ　−　２２３８　（　Ｈ　−　Ｄ−フ
エニルアラニルーし−ピペコリルーＬ−アルギニノレ一
一ｐ−ニトロアニリド・２塩酸塩）　１００μｔ（８０
μｇ）を加えて反応を開始し，３３７°で５分間インキ
エベーションを行ない，２％クエン酸溶液１　ｍｌを加
えることによつ【停止させた。

トロンビンは合成基質Ｓ　−　２２３８に作用してｐ−
ニトロアニリンを遊離する。この遊離したｐ−ニトロア
ニリンを４０５　ｎｍにて比色定量することにより，ト
ロンビン阻害活性を測定した。

上記の方法で測定した本発明化合物のｉｎｖｉｔｒｏに
おけるトロンビン阻害作用のＩＣ５ｏは？．９　Ｘ　１
０−’Ｍであった。

本発明のＭＳ−１１４４物質はそのままの状態で医薬と
なり得るが，他の担体，希釈剤及び／又は他の薬埋作用
物質との混合物としても提供され得る。従って本発明の
ＭＳ　−　１１４４物質は経口的又は非経口的に投与す
るための形態を適宜に採り得る。例えば散剤，顆粒，錠
剤，糖衣錠，カプセル，液剤，乳剤，注射剤，エアゾー
ル剤等である。

本発明のＭＳ−１１４４物質の投与量は感受性差，年令
，性別，体重，投与方法，投与時期，症状等の原因によ
り変動する。

（実施例） 次に実施例を挙げて本発明化合物及びその製造法を更に
説明する。

実施例　１， 八丈島の水深１０〜２０ｍで採取した海綿Ｔｈｅｏｎｅ
ｌｌａ　ｓｐ．（内部が黄色なのが特徴）の凍結試料１
１．０ｋｇを３倍量の９９％エタノールでワーリングプ
レンダーを用い３回抽出した。抽出液を減圧濃縮後，水
とエーテルで２層分配した。水層を更にｎ−プタノール
で抽出し抽出液を減圧乾固して残渣２０ｇを得た。

この残渣にメタノールを加え繰返し抽出した。

得られたメタノール可溶部をゲルｆ過（　Ｓｅｐｈａｄ
ｅｘＬＨ　−　２０ｍ　４．５　Ｘ　８８　ｃｍ　）に
付し，メタノールで展開した。活性画分（７２０〜８４
０　ｍｌ画分）を更にゲルｒ過（　Ｔｏｙｏｐｅａｌ　
ＨＷ　−　４０　Ｓ　Ｆ，　２．５　Ｘ　８０　ａｍ　
）に付し，メタノールで展開した。２２０〜２５０　ｍ
１部分に溶出した活性画分をメタノールに溶解後１００
倍量のアセトンを加えて得られた沈殿を高速液体クロマ
トグラフィ−　（　Ａｓａｈｉｐａｋ　ＧＳ　３２０，
　　７　ｘ　５００　ｍｍ　）に付し，アセトニトリル
（　１０％〜２０％）で展開し活性画分を集めた。活性
を示したピークを更に高速液体クロマトグラフィ（　Ｓ
ｅｎｓｈｕｐａｋ　ＯＤＳ　−　Ｈ　−４２５Ｌ　　１
０　Ｘ　２５０　ｍｍ　）に付し，最初０．０５Ｍ硫酸
ナトリウム水溶液：メタノール（　６０　：　４０〜４
５　：　５５　）の混液により展開し精製したのち，０
．１％トリフルオロ酢酸を含むアセトニトリル溶液（　
１０％〜３０％）にて展開し，純粋な活性物質゜を得た
。得られたＭ　Ｓ　−　１　１．１＝１物質の埋化学的
性状は前記の通りであった。

特許出願人　山之内製薬株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で示されるＭＳ−１１４４物質又はその塩