JPH02191291A - 抗生物質ｋｏ―３９８８ａ並びにｋｏ―３９８８ｂ及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、新規な抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びにＫＯ
−３９８８Ｂ、およびその製造方法に関する。

（従来の技術） 抗生物質は、微生物によって生産され、微生物その他の
細胞の発育を阻害する物質である。一般に、抗生物質は
選択毒性が高いので、他の化学療法剤と比べ副作用が小
さいという利点を有する一方、耐性菌の出現によりその
効果が激減するという欠点を有している。この欠点を克
服する方法には、既存の抗生物質を化学修飾することに
より効力を増強することなどがある・。しかしながら、
化学修飾にも限界があり、新規な抗生物質が望まれてい
る。

（発明が解決しようとする課題） 本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、新規
な抗生物質およびその製造方法を提供することを目的と
する。

（課題を解決するための手段） 本発明によって提供される新規抗生物質は、以下に詳述
する特徴を有する抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びにＫＯ
−３９８８Ｂである。

また、本発明によって提供される製造方法は、ストレプ
トマイセス属に属する抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びに
ＫＯ−３９８８Ｂ生産菌を培地に培養し、培養物中に抗
生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８Ｂを蓄積
させ、該培養物から抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びにＫ
Ｏ−３９８８Ｂを採取することを特徴とする。

以下、本発明の詳細な説明する。

発明の経緯 本発明者等は、新規な抗生物質の検索を目的として種々
の土壌から菌株を分離し、その生産する代謝産物につい
て鋭意研究を重ねた結果、新たに採取された土壌から分
離した菌株ＫＯ−３９８８の培養物中に、ダラム陽性菌
、ダラム陰性菌および真菌に対して抗菌活性を示さない
にもかかわらず、ヒーラ細胞（以下、ＨｅＬａ細胞とい
う）の増殖抑制作用を有する物質が産生されていること
を見出だした。該培養物から有効物質を分離、精製し、
その有効物質の理化学的性質を調査したところ、該有効
物質と同一の理化学的性質を有する物質は他に存在しな
いことが判明した。そこで、本発明者等は該有効物質を
抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８Ｂと呼
称することにした。

抗生物質産生菌 抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びに ＫＯ−３９８８Ｂを生産する菌は、ストレプトマイセス
属に属する菌である。例えば、本発明者等が分離したス
トレプトマイセス属に属する菌株ＫＯ−３９８８は、本
発明に最も有効に用いられる菌株の一例である。

菌株ＫＯ−３９８８の菌学的性質は、以下の通りである
。

（１）形態的性質 栄養菌糸は各種寒天培地上で良く発達し、分断は観察さ
れない。気菌糸は、チロシン寒天培地およびシュークー
ロス硝酸塩寒天培地で中程度に着生するが、他の培地上
での着生は貧弱である。色調はホワイトからブラウン系
を呈する。顕微鏡下での観察では、気菌糸は直線状をな
し、２０個以上の胞子の連鎖が認められる。胞子の大き
さは１．４Ｘ０．９μｍで円柱状であり、胞子の表面は
平滑である。なお、菌核、胞子のう、および遁走子は認
められない。

（ｎ）各種培地上での性状 種々の培地を用いて上記の抗生物質産生菌を培養し、イ
ー＊ビー＊’ｉ＋−リング（Ｅ、Ｂ、Ｓｈｌｒｌｌｎｇ
）とデー・ゴツトリーブ（Ｄ、Ｇｏｔｔｌｉｅｂ）の方
法（インターナショナル・ジャーナル・オブ・システィ
マチイック・バクテリオロジ−１６巻、３１３頁、１９
６６年）によって培養性状を調べた。使用した培養条件
ごとに、その結果を以下に示す。

なお、色調は標準色として、カラー・ハーモニー・マニ
ュアル第４版（コンテナー・コーポレーション・オブ・
アメリカ・シカゴ、１９５８年）を用いて決定し、色票
名とともに括弧内にそのコードを併せて記した。また、
特記しない限り、これらの結果は２７℃、２週間口の各
培地における観察の結果である。

（１）シュークロース・硝酸寒天 ■生育　　　　　中程度に生育 アラバスタ−ティント （１３ｂａ） ■裏面　　　　　アラバスタ−ティント（１３ｈａ） ■気菌糸　　　　中程度に着生 ホワイトからアラバスタ−テ インド （ａから１３ｂａ） ■可溶性色素　　産生じない （２）グルコース・アスパラギン寒天（ＩＳＰ）■生育
　　　　　良好に生育 ライトタン（３ｇｃ） ■裏面　　　　　ライトアンバー（３１ｃ）■気菌糸　
　　　わずかに着生 ホワイト（ａ） ■可溶性色素　　産生じない （３）グリセロール争アスパラギン寒天（ＩＳＰ）■生
育　　　　　良好に生育 ヌードタン（４ｇｃ） ■裏面　　　　　ヌードタン（４ｇｃ）■気菌糸　　　
　中程度に着生 （５ｃｂ） ■可溶性色素　　ダステイーピーチ （５ｅｃ） （４）スターチ・無機塩寒天（ＩＳＰ）■生育　　　　
　良好に生育・ パールピンクからヌードタン （３ｃａから４　ｇｃ） ■裏面　　　　　パールピンクからライトスパイスブラ
ウン （３ｃａから１１ｇ） ■気菌糸　　　　中程度に着生 ホワイトからベージュグレイ （ａから３１ｈ） ■可溶性色素　　バーチタン（５ｇｃ）（５）チロシン
寒天（ＩＳＰ） ■生育　　　　　良好に生育 マスタードブラウン（２ｎｉ） ■裏面　　　　　マスタードタン（２１ｇ）■気菌糸　
　　　良好に着生 ホワイトからナチュラル （ａから２　ｄＣ） ■可溶性色素　　カバードブラウン （２＋１） （６）オートミール寒天（ＩＳＰ） ■生育　　　　　中程度に生育 バンブー（２ｇｃ） ■裏面　　　　　バンブー（２ｇｃ） ■気菌糸　　　　着生しない ■可溶性色素　　産生じない （７）酵母エキス・麦芽エキス寒天（ＩＳＰ）■生育　
　　　　貧弱に生育 ■裏面 ■気菌糸 ■可溶性色素　　− （８）栄養寒天 ■生育　　　　　中程度に生育 バンブー（２ｇｃ） ■裏面　　　　　バンブー（２ｇｃ） ■気菌糸　　　　着生しない ■可溶性色素　　バンブー（２ｇｅ） （９）グリセロール・リンゴ酸カルシウム寒天■生育　
　　　　良好に生育 キャメル（３）ｅ） ■裏面　　　　　キャメル（３１ｅ） ■気菌糸　　　　着生しない ■可溶性色素　　ダスティーコーラル（６ｇｃ）（１０
）グルコース争ペプトン寒天 ■生育　　　　　良好に生育 コルクタンからタイルレッド （４１ｅから５　ｎｅ） ■裏面　　　　　ラストブラウン（５ｐｇ）■気菌糸　
　　　着生しない ■可溶性色素　　タイルレッド（５ｎｅ）（１１）ペプ
トン・酵母エキス寒天（ＩＳＰ）■生育　　　　　中程
度に生育 ナチュラル（３ｄｃ） ■裏面　　　　　ナチュラル（３ｄｃ）■気菌糸　　　
　着生しない ■可溶性色素　　スパイスブラウン（３ｐｎ）（１２）
グルコース・硝酸塩寒天 ■生育　　　　　良好に生育 ライトタン（３ｇｅ） ■裏面　　　　　キャメル（３１ｅ） ■気菌糸　　　　着生しない ■可溶性色素　　ライトタン（３ｇｃ）（ＩＩＩ）生理
学的諸性質 （・１）メラニン色素の生成 （イ）チロシン寒天　　　　　　　　陽性（ロ）ペプト
ン・イースト鉄寒天　　陽性（ハ）グルコース・ペプト
ン・　　　陽性ゼラチン培地（２１〜２３℃） （ニ）トリプトン・イースト液　　　陽性（２）チロシ
ナーゼ反応　　　　　　　　陽性（３）硫化水素の生産
　　　　　　　　　陽性（４）硝酸塩の還元　　　　　
　　　　　陰性（５）ゼラチンの液化（２１〜２３℃）
　陽性（グルコース争ペプトン・ゼラチン培地）（６）
スターチの加水分解　　　　　　　陽性（７）脱脂乳の
凝固（２７℃）　　　　　陰性（８）脱脂乳のペプトン
化（２７℃）　　陽性（９）生育温度範囲　　　１５〜
３５℃生育至適温度　　　　　　２７℃ （１０）炭素源の利用性（ブリーダム・ゴトリーブ寒天
培地） ・Ｄ−グルコース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−キシロース
、Ｄ−マンニトール、 Ｄ−フルクトース、およびｉ−イノシトールを利用する
。

壷メリビオースおよびＬ−ラムノースをやや利用する。

・ラフィノースおよびシュークロースは利用しない。

（１１）セルロースの分解　　　　　　　陰性（ＩＶ）
細胞壁組成 細胞壁のジアミノピメリン酸はＬＬ型である。

以上、本抗生物質生産菌の菌学的性状を詳しく記載した
が、これを要約すると以下の通りである。

本菌の細胞壁中のジアミノピメリン酸はＬＬ型である。

気菌糸の形態は直線状で、長い胞子鎖を形成しており、
胞子の表面は平滑である。

培養上の諸性質としては、栄養菌糸はブラウン系の色調
を呈し、気菌糸はホワイトあるいはブラウン系の色調を
呈する。なお、可溶性色素はブラウン系の色素を産生ず
る。

以上の結果から、本菌株はストレブトマイセス属に属す
る菌種であり、ブリドハムとトレスナーの分類（バーシ
ス・マニュアル・オブ・デターミネーティブ・バクテリ
オロジー、第８版、７４８〜８２９頁、１９７４年）に
よるホワイトあるいはレッドシリーズに属する菌種であ
ると考えられる。

なお、本菌株はストレプトマイセス・エスピー−Ｋ　　
Ｏ−３９８８（Ｓｔｒｅｐｔｓｙｃｅｓ　　ｓｐ、Ｋｏ
−３９８８）　　として、工業技術院微生物工業技術研
究所に寄託されている（微工研菌寄第１０３６９号）。

以上、抗生物質ＫＯ−３９８８ＡおよびＫＯ−３９８８
Ｂ生産菌について説明したが、一般的に放線菌の菌学的
性状は極めて変異し易く、一定したものではない。放線
菌は、自然的にあるいは通常行なわれている紫外線照射
、Ｘ線照射または変異誘発剤（例えば、Ｎ−メチル−Ｎ
−二トローＮニトロソグアニジン、およびエチルメタン
スルホネート等）を用いる人為的な変異手段により変異
することは周知の事実である。このような人為的変異株
は勿論、自然変異種も含め、ストレプトマイセス属に属
し、抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８Ｂ
を生産する能力を有する菌株はすべて本発明に使用する
ことができる。

抗生物質の製造 本発明において、まず初めに抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ
およびＫＯ−３９８８Ｂ生産菌を適当な培地に培養する
。本田の培養においては、一般に放線菌の培養方法が用
いられる。培地としては、微生物が同化し得る炭素源、
消化し得る窒素源、さらに必要に応じて無機塩などを含
有させた栄養培地が用いられる。

同化し得る炭素源としては、ブドウ糖、糖蜜、澱分、デ
キストリン、セルロース、コーン・ステイープ・リカー
　グリセリン、および有機酸等が単独または組合わせて
用いられる。消化し得る窒素源としては、ペプトン、肉
エキス、酵母エキス、乾燥酵母、大豆粉、コーン・ステ
イープ・リカー綿実粕、カゼイン、大豆蛋白分解物、ア
ミノ酸および尿素等の有機窒素源、または硝酸塩および
アンモニウム塩等の無機窒素化合物が単独または組合わ
せて用いられる。その他、必要に応じてナトリウム塩、
カルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、およびリ
ン酸塩等の無機塩類を添加することができる。さらに、
必要に応じて、本田の生育や抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ
並びにＫＯ−３９８８Ｂの生産を促進する微量栄養素、
発育促進物質、あるいは前駆物質を適当に添加してもよ
い。

培養は、振とう培養または通気撹拌培養等の好気性条件
下で行なうのが好ましい。工業的には、深部通気撹拌培
養が好ましい。培地のｐＨは中性付近が好ましい。培養
温度は２０〜３７℃でも行ない得るが、通常は２４〜３
０℃、好ましくは２７℃付近に保つのがよい。培養時間
は、液体培養の場合、通常３〜６日培養を行なうと、本
抗生物質が生成蓄積される。好ましくは、培養中の蓄積
量が最大に達したときに培養を終了するのがよい。これ
らの培養組成、培地の液性、培養温度、撹拌速度、およ
び通気量等の培養条件は、使用する菌株の種類あるいは
外部条件等に応じて好ましい結果が得られるように便宜
調節あるいは選択する。液体培養において発泡がある場
合は、シリコン油、植物油および界面活性剤等の消泡剤
を便宜使用する。

このようにして得られた培養物中に、抗生物質ＫＯ−３
９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８Ｂが蓄積されている。特
に、抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８Ｂ
は、培養菌体中に含有されているので、必要に応じて培
養物をろ過補助剤（例えば、セライトおよびハイフロー
ス−パーセル）を加えてろ過するか、または遠心分離し
て培養ろ液と菌体とを分離し、培養ろ液および菌体のメ
タノール抽出物を濃縮したものの混合物から抗生物質Ｋ
Ｏ−３９８８Ａ並び１．：　Ｋ　Ｏ−３９８８Ｂを採取
するのが有利である。

抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びに ＫＯ−３９８８Ｂは、ヘキサンおよび水に不溶であり、
またアルコール系溶媒（例えば、メタノールおよびエタ
ノール）、クロロホルム系溶媒（例えば、ジクロロメタ
ンおよびクロロホルム）、およびケトン系溶媒（例えば
、アセトンおよびメチルイソブチルケトン）等の多くの
有機溶媒に可溶である塩基性物質であるので、培養菌体
から本抗生物質を分離精製するには、これらの性質を利
用した精製方法を用いる。通常、培養ろ液と菌体のメタ
ノール抽出物を別個に濃縮し、その後、それぞれの濃縮
物を混合し、この混合物から非親水性溶媒（例えば、酢
酸エチルおよびクロロホルム）を用いて、本抗生物質を
有機溶媒層に転溶させる。

このようにして得られた有機溶媒層は、必要に応じて金
属イオン等を除去するために、希薄なエチレンジアミン
四塩酸塩水溶液で洗浄した後、種々の脱水剤（例えば、
無水硫酸ナトリウムおよびビーズゲル）を加えて脱水す
る。次いで、脱水した有機溶媒層の溶媒を減圧下で除去
する。この濃縮操作において、抗生物質ＫＯ−３９８８
Ａ並びにＫＯ−３９８８Ｂは安定ではあるが、通常加熱
温度が５０℃以下となるように行なうのが好ましい。残
渣にヘキサンおよび石油エーテル等の有機溶媒を加えて
抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８Ｂを沈
澱させることができる。得られた沈澱物はヘキサン等で
数回洗浄後、吸引ろ過または遠心分離により、抗生物質
ＫＯ−３９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８Ｂの粗製物を採
取することができる。

上記粗製物をさらに精製するためには、抗生物質ＫＯ−
３９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８Ｂと混雑物との溶解度
の差、混合しない二液相関への分配の差、あるいは各種
吸着担体に対する吸着力の差を利用する多くの手段を用
いることができる。

その中でも特に、クロマトグラフィーが有効な手段であ
る。本抗生物質の精製に有効なりロマトグラフィーは、
シリカゲル、アルミナ、活性炭セルロースおよびヒドロ
キシアパタイトＨＰ−２０等の吸着樹脂等を用いた吸着
クロマトグラフィーや、シラン化シリカゲルおよびオク
タデシルシラン化シリカゲル等を用いた逆相分配クロマ
トグラフィーや、セファデックスＬＨ−２０およびトヨ
パール等を用いた分子ふるいに基づくゲルろ過クロマト
グラフィーや、ＤＥＡＥ−セルロース、ＤＥＡＥ−セフ
ァデックスおよびＤＥＡＥ　）ヨパール等を用いたイオ
ン交換クロマトグラフィー等が挙げられる。

抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びに ＫＯ−３９８８Ｂは、上記クロマトグラフィー電気泳動
、向流分配、限外ろ過、および蒸留等の手段を単独ある
いは任意の順序で組合わせ、または反復して用いること
により分離精製することができる。例えば、上記粗製物
を少量のクロロホルムに溶解し、シリカゲルに吸着させ
、これをクロロホルム−メタノール系混合溶液を用いて
カラムクロマトグラフィーを行なう。次いで、得られた
活性画分を減圧濃縮後、少量のクロロホルムに溶解し、
これをクロロホルム−メタノール系混合溶液で分子ふる
いに基づくゲルろ過クロマトグラフィーを行なうことに
より、抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８
Ｂを分離精製することができる。

以下、抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８
Ｂの理化学的性質および生物学的性質について記述する
。

（１）理化学的性質 ＜ＫＯ−３９８８Ａ＞ ■元素組成：Ｃ２２Ｈ２６０７Ｃ高分解能マススペクト
ル） ■分子量：４０２（フィールド・デイソープシラン（Ｆ
Ｄ）マススペクトル） ■融点：１８２〜１８３℃ ■比旋光度＝　［α］　　　−−４６゜（Ｃ調０．５８
．クロロホルム） ■紫外部吸収スペクトル：第１図の通り（メタノール中
で測定） ■赤外部吸収スペクトル：＊２図の通り（ＫＢｒディス
ク法で測定） ■溶剤に対する溶解性：ヘキサンおよび水に不溶、メタ
ノール、エタノール、ジクロロメタン、クロロホルム、
酢酸エチル、酢酸ブチルおよびアセトンに可溶 ■核磁気共鳴スペクトラム：第３図および第４図の通り （重クロロホルム 中、７ＭＳ基準） ■塩基性、中性、酸性の区別：中性物質［株］呈色反応
：　Ｈ２Ｓ　０４　、およびヨード発色に陽性 ＜ＫＯ−３９８８Ｂ＞ ■元素組成：Ｃ２２Ｈ２６０７ （高分解能マススペクトル） ■分子量：４’０２（フィールド・ディソープション（
Ｆ　Ｄ）マススペクトル） ■融点：１０１〜１０４℃ ■比旋光度：　［α］　　　−−１３２゜（Ｃ−０，５
７，クロロホルム） ■紫外部吸収スペクトル：第５図の通り（メタノール中
で測定） ■赤外部吸収スペクトル：第６図の通り（ＫＢｒディス
ク法で測定） ■溶剤に対する溶解性：ヘキサンおよび水に不溶、メタ
ノール、エタノール、ジク　　ロロメタン、クロロホル
ム、酢酸エチル、酢酸ブチル、アセトンに可溶 ■核磁気共鳴スペクトラム：第７図および第８図の通り （重クロロホルム 中、７ＭＳ基準） ■塩基性、中性、酸性の区別：中性物質［株］呈色反応
：　Ｈ２Ｓ　０４　、およびヨード発色に陽性 （ｎ）生物学的性質 ■抗生物質ＫＯ−３９８８Ａの抗菌スペクトルスタフィ
ロコッカス・オーレウスＰＤＡ２０９Ｐスタフィロコッ
カス・オーリウスＡＴＣＣ６５３８Ｐバチルス・サブチ
ルスＡＴＣＣ８８３３バチルス・サブチルス１Ｆ０３０
０１ マイクロコツカス・ルナウスＡＴＣＣ９４３１マイコバ
クテリウム・スメグマチスＡＴＣＣ８０７エシユリヒア
・コリーＮＩＨＪ エシュリヒア令コリーＮ１）ＩＪ　ｊＣ−２クレブジイ
ラ・ブニュモニエＡＴＣＣ１００３１サルモネラΦチビ
ミュウム プロテウスΦブルガリスｌＰＯ３１６７シユウドモナス
φエルギノーザＩＦ０３０８０カンジダ・アルビカンス サツカロマイセス・セレビシェＡＴＣＣ９７６３クリプ
トコツカス・ネオフォルマン ミクロスポラム・ジブセラム トリコフィトン・メンタグロフィト ペニシリウム曇ヘルクエｌＰＯ４８７４ボトリチス・シ
ネレ スクレオチニア・シネレ ピリキュラリアψオリゼ ＞　１０００　ｃ ＞　１０００　ｃ ＞　１０００　ｃ ＞　１０００　ｃ ＞　１０００　ｃ ＞　１０００　ｃ ＞　１０００　ｃ ＞　１０００　ｃ 〉１０００　ｃ ＞　１０００　ｃ ＞　１０００　ｃ ＞　１０００　ｃ ）　１０００　ｄ ＞　１０００　ｄ ＞　１０００　ｄ ）　１０００　ｄ ）　１０００　ｄ ＞　１０００　ｄ ＞　１０００　ｄ ＞　１０００　ｄ ）　１０００　ｄ 夷アガーダイリュウシジン法、　ｂＭＩＣ−最小生育阻
止濃度；０栄養寒天使用（寒天は１．０％）；　６ポテ
ト寒天使用以上の結果より、抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ
は、グラム陽性菌、ダラム陰性菌、および真菌類に対し
て抗菌活性を示さないことが判明した。

■抗生物質ＫＯ−３９８８Ｂの抗菌スペクトルプロテウ
スＯブルガリスｌＰＯ３１８７シユウドモナス・エルギ
ノーザ１Ｆ０３０８０カンジダ・アルビカンス ＞　１０００　ｃ ＞　１０００　ｃ ＞　１０００　ｄ ミクロスポラム・ジブセラム ＞　１０００　ｄ ボトリチス・シネレ スクレオチニア・シネレ ピリキュラリア争オリゼ ＞　１０００　ｄ ＞　１０００　ｄ ）　１０００　ｄ ８アガーダイリュウション法：ｂＭＩＣ−最小生育阻止
濃度；０栄養寒天使用（寒天は１．ＯＸ）　　；　’ポ
テト寒天使用以上の結果より、抗生物質ＫＯ−３９８８
Ｂは、グラム陽性菌、ダラム陰性菌、および真菌に対し
て抗菌活性を示さないことが判明した。

■抗生物質ＫＯ−３９８８Ａおよび ＫＯ−３９８８Ｂの細胞毒性 １１ｅＬａ細胞に対する試験管内活性試験において、抗
生物質ＫＯ−３９８８Ａおよび ＫＯ−３９８８Ｂは、それぞれ３．１μｇ／ｍｌおよび
１．６μｚ　／　ｍｌの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を
示した。

（実施例） Ａ、ストレプトマイセスＫＯ−３９８８の培養グルコー
ス１，０％、ペプトン０．５％、肉エキス０．５％、食
塩０，３％、および寒天１．２％を含有する寒天斜面培
地を用い、ストレプトマイセスＫ　Ｏ−３９８８（ＦＥ
ＲＮ−Ｐ−１０８６９）を２７℃で６日間培養する。

これとは別に、５００ｍ１容坂ロフラスコに、グリセリ
ン２．０％、大豆粉２．０％、および食塩０．５％を含
有する液体培地（ｐＨ７，０）　１００　ｍｌを仕込み
、滅菌しておく。

上記寒天斜面培地から、ストレプトマイセスＫＯ−３９
８８を前記坂ロフラスコに１白金耳接種した。次いで、
レシプロカルシェーカー（振幅１７ｃｍ、毎分１２０回
往復）を用い、２７℃で７２時間振とう培養して種母を
得た。

その後、１００Ｎ容ジャーファーメンタ−にグルコース
２．０％、ペプトン０．５％、肉エキス０．５％、乾燥
酵母０．３％、食塩０．５％、および炭酸カルシウム ０．３％を含有する培地６０１１を仕込み滅菌した後、
上記種母６００　ｍｌを無菌的に移植し、通気撹拌培養
を行ない、培養液的６０ｊ２を得た。

上記Ａで得られた培養液に酢酸エチルを加え、十分撹拌
した後、しばらくのあいだ静置した。

分離した酢酸エチル層を分液し、これに無水硫酸ナトリ
ウムを加えて脱水した。その後、減圧濃縮して抗生物質
ＫＯ−３９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８Ｂを含有する油
状残渣約２００ｇを得た。

上記Ｂで得られた油状残渣を、予めクロロホルムを用い
てシリカゲル（メルク社製）を充填させたシリカゲルカ
ラム（内径３０ｍｍ、長さ４００ｍｍ）に吸着させ、展
開溶液をクロロホルムからメタノールへと連続的に変化
させながらクロマトグラフィーを行なった。得られた活
性画分を減圧濃縮して、純度的６０％程度の抗生物質Ｋ
Ｏ−３９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８Ｂを含有する粗精
製品４５０　ｍｇを得た。

上記Ｃで得られた粗精製品の純品を得るために、セファ
デックスＬＨ−２０を充填したカラム（内径３０ｍｍ、
長さ４００ｍｍ）を用い、粗精製品を少量のメタノール
に溶解してカラムに供した。展開溶媒にはメタノールを
用いた。順次、フラクシジンを集め、分析した結果、約
３００〜４００ｍ１の溶出部から抗生物質ＫＯ−３９８
８Ａの純品を約１００ｍｇ、並びに約５００〜７００　
ｍｌの溶出部から抗生物質ＫＯ−３９８８Ｂの純品を約
５０　ｍｇ得た。

本抗生物質ＫＯ−３９８８Ａ並びに ＫＯ−３９８８Ｂの理化学的性質および生物学的性質は
、先に記載した通りである。

（発明の効果） 上述の通り、本発明によって、新規な抗生物質ＫＯ−３
９８８Ａ並びにＫＯ−３９８８Ｂ、及びその製造方法が
提供される。

【図面の簡単な説明】

第１図は、抗生物質ＫＯ−３９８８Ａの紫外部吸収スペ
クトル図。 第２図は、抗生物質ＫＯ−３９８８Ａの赤外部吸収スペ
クトル図。 第３図は、抗生物質ＫＯ−３９８８Ａの１Ｈ−ＮＭＲス
ペクトル図。 第４図は、抗生物質ＫＯ−３９８８Ａの１３Ｃ−ＮＭＲ
スペクトル図。 第５図は、抗生物質ＫＯ−３９８８Ｂの紫外部吸収スペ
クトル図。 第６図は、抗生物質ＫＯ−３９８８Ｂの赤外部吸収スペ
クトル図。 第７図は、抗生物質ＫＯ−３９８８８のＩＨ−ＮＭＲス
ペクトル図。 第８図は、抗生物質ＫＯ−３９８８Ｂの１３Ｃ−ＮＭＲ
スペクトル図。 １・・・アルカリ性における抗生物質 ＫＯ−３９８８Ａの紫外部吸収、２・・・酸性における
抗生物質ＫＯ−３９８８Ａの紫外部吸収、３・・・中性
における抗生物質ＫＯ−３９８８Ａの紫外部吸収、４・
・・アルカリ性における抗生物質ＫＯ−３９８８Ｂの紫
外部吸収、５・・・酸性における抗生物質ＫＯ−３９８
８Ｂの紫外部吸収、６・・・中性における抗生物質ＫＯ
−３９８８Ｂの紫外部吸収 出願人代理人　弁理士　鈴江武彦

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. （１）以下の理化学的性質を有する抗生物質ＫＯ−３９
   ８８Ａ。 ［１］元素組成：Ｃ＿２＿２Ｈ＿２＿６Ｏ＿７（高分解
   能マススペクトル） ［２］分子量：４０２（フィールド・ディソープション
   （ＦＤ）マススペクトル） ［３］融点：１８２〜１８３℃ ［４］比旋光度：［α］＾１＾９＿Ｄ＝−４６°（Ｃ＝
   ０．５８、クロロホルム） ［５］紫外部吸収スペクトル：第１図の通り（メタノー
   ル中で測定） ［６］赤外部吸収スペクトル：第２図の通り（ＫＢｒデ
   ィスク法で測定） ［７］溶剤に対する溶解性：ヘキサンおよび水に不溶、
   メタノール、エタノール、ジクロロメタン、クロロホル
   ム、酢酸エチル、酢酸ブチル、およびアセトンに可溶 ［８］塩基性、中性、酸性の区別：中性物質［９］呈色
   反応：Ｈ＿２ＳＯ＿４、およびヨード発色に陽性
2. （２）以下の理化学的性質を有する抗生物質ＫＯ−３９
   ８８Ｂ。 ［１］元素組成：Ｃ＿２＿２Ｈ＿２＿６Ｏ＿７（高分解
   能マススペクトル） ［２］分子量：４０２（フィールド・ディソープション
   （ＦＤ）マススペクトル） ［３］融点：１０１〜１０４℃ ［４］比旋光度：［α］＾１＾９＿Ｄ＝−１３２°（Ｃ
   ＝０．５７、クロロホルム） ［５］紫外部吸収スペクトル：第５図の通り（メタノー
   ル中で測定） ［６］赤外部吸収スペクトル：第６図の通り（ＫＢｒデ
   ィスク法で測定） ［７］溶剤に対する溶解性：ヘキサンおよび水に不溶、
   メタノール、エタノール、ジクロロメタン、クロロホル
   ム、酢酸エチル、酢酸ブチル、およびアセトンに可溶 ［８］塩基性、中性、酸性の区別：中性物質［９］呈色
   反応：Ｈ＿２ＳＯ＿４、およびヨード発色に陽性
3. （３）ストレプトマイセス属に属する抗生物質ＫＯ−３
   ９８８Ａ生産菌を培地に培養し、培養物中に抗生物質Ｋ
   Ｏ−３９８８Ａを蓄積させ、該培養物中から抗生物質Ｋ
   Ｏ−３９８８Ａを採取することを特徴とする抗生物質Ｋ
   Ｏ−３９８８Ａの製造方法。
4. （４）ストレプトマイセス属に属する抗生物質ＫＯ−３
   ９８８Ａ生産菌が、ストレプトマイセスＫＯ−３９８８
   （ＦＥＲＭ−Ｐ−１０３６９）である請求項３記載の製
   造方法。
5. （５）ストレプトマイセス属に属する抗生物質ＫＯ−３
   ９８８Ｂ生産菌を培地に培養し、培養物中に抗生物質Ｋ
   Ｏ−３９８８Ｂを蓄積させ、該培養物中から抗生物質Ｋ
   Ｏ−３９８８Ｂを採取することを特徴とする抗生物質Ｋ
   Ｏ−３９８８Ｂの製造方法。
6. （６）ストレプトマイセス属に属する抗生物質ＫＯ−３
   ９８８Ｂ生産菌が、ストレプトマイセスＫＯ−３９８８
   （ＦＥＲＭ−Ｐ−１０３６９）である請求項５記載の製
   造方法。