JPH02191222A - 抗マラリア剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はテトロカルシン類の少なくとも１種を含有する
ピロプラズマ病もしくはマラリアの予防および治療に有
効な抗ピロプラズマ剤もしくは抗マラリア剤に関する。

ピロプラズマ病は、バベシア科とタイレリア科の原虫を
合わせた広義のピロプラズマに起因した原虫病で、ダニ
類が媒介し発熱、貧血、黄痩、血色尿素を主機とした急
性または慢性の疾病である。

古来より各種治療法が試みられているが、防御すること
が非常に困難で、世界各地で頗発し経済的損失も美大な
ものがある。一方、国内に於いても放牧中に多発し、ま
た近年舎飼牛にも増加の傾向にあり問題化している。

薬剤としては、８−アミノキノリン誘導体などがあるが
、昨今とみに耐性株の出現が多く効果の点、毒性等から
みて実用的価値が殆ど認められないのが現状である。

そこで本発明者らは、小動物寄生のバペシア・ロドハイ
＝　（Ｂａｂｅｓｉａ　ｒｏｄｈａｉｎｉ）　　（以下
ＢＲという）を用い有効な抗ピロプラズマ剤について広
く研究を重ねているうちに、テトロカルシン類が強い抗
ピロプラズマ作用を有することを見い出し本発明を完成
するに至った。更にタイレリア・サージェンテ４　（Ｔ
ｈｅｉｌｅｒｉａ　ｓｅｒｇｅｎｔｉ）　　（以下ＴＳ
という）（薬剤耐性株を含む）を摘牌牛に感染させ、そ
の抗ピロプラズマ作用を確認したところ非常に強い抗ピ
ロプラズマ作用が認められ実用的価値についても明らか
になった。

テトロカルシン類は本出願人によって出願された１群の
抗生物質であり、次の構造を有する。

テトロカルシンＡ：上記化合物 テトロカルシンＢニジニガーＤにかえてＨテトロカルシ
ン類；シュガーＣ及びＤにかえてＨテトロカルシンＥ１
ニジニガーＢ〜ＤにかえてＨテトロカルシンＥ２ニジニ
ガーＢ−Ｄｌこかえてアセチル、Ａｍ中のＣＨ，Ｃ−０
−にかえてＨＯ−テトロカルシンＦ−１：シュガーＡ−
ＤにかえてＨテトロカルシンＦ−２ニジニガーＡ−Ｄｌ
ごかえてＨ１シニガーＥにかえてＨ テトロカルシ２６フ２３位　Ｃ）１０にかえてＣ）１２
０１１テトロカルシンＨ：２３位　ＣＨＯにかえてＣＤ
、）Ｉ又、上記以外にも類似構造を有するものとしてテ
トロカルシンＣ，Ｄ、　　Ｉ、　　Ｊ、　Ｋ、　　Ｌ、
　Ｍなどがある。

又、これらの化合物の９，２１位がアシル基となったも
の（ジアジレート）、９．１７．２１位がアシル基とな
ったもの（トリアシレート）も含まれる。これらのテト
ロカルシン類の出願は次の通りであるが、テトロカルシ
ンの名称は用いずＤＣ−１１−Ａ、　　ＤＣ−１１−Ｂ
等ＤＣ−１１の名称を付している場合がある：特開昭５
４１３８５０１　　（特公昭５６−３８１５９）、特開
昭５５−７９３２２．５６−１３９５００．米国特許第
４．３４６，０７５（以上テトロカルシンＡ）。

特開昭５６−１１５９７９４．５６−１２２３９２（以
上テトロカルシンＢ）、　特開昭５６−７５５００．５
６−１２２３９２　　（以上テトロカルシンＣ）、特開
昭５６−１２２３９．２　＜テトロカルシンＤ）、特開
昭５７−３８７９６　（テトロカルシンＥ１．Ｅ２　）
、特開昭５７−５３４９８（テトロカルシンＦ、Ｇ、Ｈ
）、特開昭５７＝１７１９９７　　（テトロカルシン１
．Ｊ、に、Ｌ。

Ｍ）、特開昭５７−７４５５　（テトロカルシンＦ−１
，Ｆ−２）、特開昭５７−７４７９　（ジアジレート、
トリアシレート）。

テトロカルシン類は上記のごとく動物、特に牛に対する
抗ピロプラズマ剤として有用であるが、さらに研究の結
果ヒト又は動物（例えば家きん）の抗マラリア剤として
も有用なことが判明した。

テトロカルシン類は、ヒトまたは他の動物に経口的に、
または非経口的に投与しうる。すなわち、注射剤の場合
は水又は生理食塩水に直接溶解してもよく又、抗酸化剤
（ピロ亜硫酸ナトリウム等）。

無痛化剤（塩酸プロ力イン等）、保存剤（バラオキシ安
息香酸メチル、バラオキシ安息香酸プロピル等）、ｐＨ
調整剤（水酸化す）　リウム等）等をさらに加えてもよ
い。

又、テトロカルシン類は希釈剤（例えば、デンプン、シ
ミ糖、乳糖、炭酸カルシウム、カオリンなど）、増量剤
（例えば、乳糖、デンプン、炭酸カルシウム、リン酸カ
ルシウム、カオリン、ベントナンド、タルクなど）、滑
沢剤（例えば、ステアリン酸、パラフィン、ホウ酸、シ
リカ、安息香酸ナトリウム、ポリエチレングリコールな
ど）などの製薬成分を添加して、粉末、錠剤、頴粒剤、
カプセル、坐剤、懸濁剤、乳剤などに成型して投与する
こともできる。

テトロカルシン類を抗ピロプラズマ剤として使用する場
合には、投与量０．１〜２０．０■／ｋｇ（特に０．３
２９．６ｍｇ／ｋｇ）　　（テトロカルシン類として）
、投与回数は１日１回投与で１〜７回を１クールとし、
連続又は間歇的に投与する。投与方法としては静脈内注
射が一般的であるが、皮下、筋注、腹腔内投与、経口投
与も可能である。

テトロカルシン類を抗マラリア剤として使用する場合に
は、投与量０．５〜１０　ｍｇ／ｋｇ　（テトロカルシ
ン類として）とし、投与回数、投与方法は上記と同様で
よい。

以下に本発明の態様を実施例によって示す。

実施例Ｉ ＢＲｇ染マウマウス採血し、生理食塩水で原虫数が８．
６　ＸＩＯ３コ１０．２−となるように感染血球を調製
し、１群５匹ずつのマウスにｉ、　ｐ、接種し感染マウ
スとした。

テトロカルシンＡ及びＢは、全群感染と同時から１匹当
り１日１回連続７日間皮下注射した。テトロカルシンＡ
の投薬量は、第１表に示すものを０．１ｒｎｆ！ずつと
し、テトロカルシンＢは０゜１　ｍｇ／　０．１−液を
０．１ｉずつとした。

マウスの生存率は第１表に示される。

無投薬対照群５匹は７日目に１匹、８日目に４匹と全例
が死亡し剖検で著名な貧血、肝の種火、貧血、牌の種火
、腸間膜リンパ節の種火が明瞭で時に黄療も著名に認め
られた。赤血球内にはＢＲの寄生が高度に認められる。

一方テトロカルシンへを０．０２５ｍｇ／日／マウス以
上及びテトロカルシンＢ０．１ｍｇ／日／マウスをＢＲ
感染当日から連続７日間投薬すると全例が１カ月以上生
き残り有効である。

第　　　　１　　　　表 第 表 実施例２゜ 実施例１と同様の方法で作り出した感染マウスを用いて
試験をした。テトロカルシンＡを第２表に示す投薬量で
投与し、皮下投薬回数は１〜５回と短縮した。その結果
を第２表に示す。

無投薬対照群５匹は９日目までに全例が死亡し、剖検所
見、原虫検索成績は実施例１の対照群と同様であった。

実施例３゜ 実施例１と同様の方法で試験を実施した。投薬は０．１
−で、投薬スケジュールは第３表に示される。

第　　　　３　　　　表 チャレンジ：感染後１カ月以上生き残った群では、一部
のマウス（例えば金側生き残った群では５匹中３匹）に
ついて、接種時と同数のＢＨの腹腔内接種によりチャレ
ンジを行った。

血清反応：チャレンジ後生き残ったマウスはチャレンジ
しなかった生き残りのマウスとともに、チャレンジ後１
カ月以上経過してから殺処分し血漿を採取した。この血
漿とバラシテミア（Ｐａｒａｓｉｔｅｍｉａ）　（赤血
球中に原虫がでてくる状態をいう）最盛期に採取した血
漿抗原との間に寒天ゲル内沈降反応を実施した。結果を
第４表に示す。

＊感染当日を０日日とする。

血液塗抹検査：経過の途中で一部の例につき血液塗抹を
作成し、ＢＲ感染の有無を検査した０、４■、１回投薬
群では０，２及び４日目投薬、０．２■、２回群では０
〜１．２〜３．４〜５及び６〜７日目に投薬、０．１■
、３回群では４〜６日目役目投薬、０５ｍｇ、７回投薬
により、初感染後金側生き残り有効であった。

感染経過中に調べたバラシテミア発現の有無、生き残り
例に対するチャレンジの成績及び最終殺処分時の血清の
寒天ゲル内沈降反応の成績などを加えて総合的に見ると
、途中のパラシテミアが陰性でチャレンジ後にマウスが
全滅したのは、■及び０群だけで感染初期に０．４■、
１回または０．２■、２回投与するときわめて有効なこ
とが明らかとなった。

実施例４゜ 小動物寄生のＢＲを用いた試験の結果、テトロカルシン
Ａ及びテトロカルシンＢが非常に有効であることが明ら
かとなったので、前者テトロカルシン八について牛を用
いて、ＴＳに対し有効且つ実用性の有無を調べた。

膵臓を摘出した２００ｋｇ前後の牛にＴＳ福島株を皮下
に１回Ｉ　ＸＩＯ’個宛接種感染させＴＳ感染牛とした
。

投薬方法はすべて静脈内注射とし、投薬量は１頭当り０
．３２ｍｇ／ｋｇ及び３．２ｍｇ／ｋｇで、投薬回数は
２〜３回連日又は隔日とした。その結果は第１〜３図に
示される。

０、３２　ｍｇ／ｋｇ／日／牛の場合、ＴＳの寄生率が
２５％を越えた時点で１日１回連続３日間投薬した。

３．２ｍｇ／ｋｇ／日／牛２回投薬の場合は、ＴＳの寄
生率が２３％を越えた時点で１回投薬した。寄生率が投
薬７日目３．５％となったので更に同量を１回投薬した
ところ２日目に０１％と可成りの減少が認められた。

３．２ｍｇ／ｋｇ／日／牛隔日３回投薬の場合は、ＴＳ
の寄生率が２２．５％を越えた時点から投薬を開始した
。寄生率は急速に低下し投薬終了後４日目には０．１％
、６日目には０％と減少し有効であることが明らかとな
った。

実施例５゜ 実施例４と同様の方法でＴＳ感染牛を作り出し、テトロ
カルシンへの効力を調へた。

テトロカルシンＡの投薬量は１頭当たり６．４　ｍｇ／
ｋｇで隔日２〜３回静脈内投薬した。結果は第４゜５図
に示される。

６．４ｍｇ／ｋｇ／日／牛隔日２回投薬の場合ＴＳの寄
生率が１４％を越えた時点から投薬を開始した。

寄生率は急速に低下減少し、投薬終了後３日目には１．
０％、６日目には０％となり有効であることが明らかと
なった。

６．４ｍｇ／ｋｇ／日／牛隔日３回投薬の場合ＴＳの寄
生率が２０％を越えた時点から投薬を開始した。

寄生率は投薬終了日に既に０．６％となり、２日目０．
０５％、３日目には０％となり、きわめて強い抗ピロプ
ラズマ作用が認められた。その後も寄生率０％の状態が
７選間以上続き抗ピロプラズマ作用の持続性も認められ
た。

実施例６゜ 実施例４と同様の方法でＴＳ感染牛を作り出しテトロカ
ルシン八と、市販の抗ピロプラズマ剤である、ジミナジ
ンアセチュレート製剤（ガナゼソク）及び８−アミノキ
ノリン製剤（バマキン）との効力比較試験を実施した。

テトロカルシンＡの投薬量は１頭当り６．４　ｍｇ／ｋ
ｇ隔日２回静脈内投薬とし、ガナゼックは１頭当り１０
．０ｍｇ／ｋｇ連続２日間筋肉内投薬、パマキンは１頭
当り１．６　ｍｇ／ｋｇ連続２日間皮下注射した。

投薬は、それぞれ牛のＴＳ寄生率が２０％を越えた時点
で実施した。その結果テトロカルシンＡを投薬した牛は
寄生率が急速に低下減少し、４日目には１．５％、７日
目には０％となり有効であることが明らかとなった。

一方、ガナゼック投薬牛は、６日目に５％まで寄生率が
低下減少したが、それ以後は殆ど減少せず、１４日後に
は逆に１５％まで増加し、効果が認められなかった。

パマキン投薬牛は、６日目に１０％まで寄生率が低下減
少したが、それ以後は殆ど減少せず１４日後には、増加
傾向が認められ、効果はなかった。

実施例７゜ 実施例４と同様の方法でＴＳ感染牛を作り出し、皮下注
射時のテトロカルシンＡの効力を調べた。

テトロカルシンＡの投薬量は３．２ｍｇ／ｋｇ及び６．
４ｍｇ／ｋｇ隔日２回とし、ＴＳの寄生率が２５％を越
えた時点から投薬を開始した。

３、２　ｍｇ　／　ｋｇ隔日２回投薬の場合、投薬終了
７日目には０．２％となり有効であることが明らかとな
った。

６．２ｍｇ／ｋｇ隔日２回投薬の場合、投薬終了３日目
には１．２％、６日目には０％となり、静脈内投薬の場
合と同様、有効であることが明らかとなった。なお、投
薬時における硬結、浮腫、発熱等の副作用は全く認めら
れなかった。

実施例８゜ テトロカルシンＡ投薬による牛の安全性中１頒当たり、
０．３２Ｉ１ｇ１ｋｇ〜２０．０　ｍｇ／ｋｇを日１回
連続２〜７日間静脈内、皮下、筋肉内、腹腔内、経口投
薬しても発熱、食欲不振、嘔吐、疼痛、硬結、浮腫等、
臨床所見、及び血液検査所見からの副作用は全く認めら
れなかった。

実施例９゜ プラスモディウム・ベルガイ（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ　
ｂｅｒｇｈｅｉ）（以下ＦＢという）感染マウスより採
血し生理食塩水で原虫数が約２Ｘ１０’個／　１０．２
−となるように感染血球を調製し、１群５匹ずつのマウ
スにｉ、　１１．接種し感染マウスとした。テトロカル
シンＡは全群感染と同時から１匹あたり１日１回連続７
日間皮下注射し、経過を観察した。テトロカルシンＡの
投薬量は０．０２５．０．０５および０．１＋ｇ／マウ
ス／日とした。

その結果、無投薬対照群５匹は７日目に２匹、８日目に
２匹、９日目に１匹と金側が死亡し、剖検時、金側に感
染血球を認めた。

一方、テトロカルシンＡ群は０．０２５■／マウス／日
の場合、連続７日間投与しても８日目に１匹、１０日目
に２匹、１１日目に２匹と金側が死亡し、無投薬対照区
とあまり差が認められなかった。

０．０５■／マウス／日連続７日間投薬群は１６日目、
１９日目、２０日目、２５日目に各１匹ずつ死亡したが
、１匹は４０日目以上生残し若干効果が認められた。

０．１■／マウス／日連続７日間投薬群では金側全く発
症がみられず４０日以上生残し有効であることが明らか
となった。この群のマウスは１５日目に尾静脈から採血
して、マラリア原虫の検査を行ったが金側陰性であった
。また４４日目に殺処分したが全鋼感染血球を認めず剖
検でも著変を認めず、肝、牌、肺、腎、心、胸腺、脳の
塗抹標本中にもマラリア原虫を認めなかった。

そこで５匹分の上記７１１器をプールして生理食塩水懸
濁液とし、２匹を２代目マウスにｉ、ｐ、接種した。２
代目マウスは２匹とも全く発症せず経過したので接種後
３６日目に殺処分した。剖検で著変を認めず、肝、牌、
肺、腎、心、胸腺の臓器塗抹標本中にマラリア原虫を認
めず、薬の効果が明らかとなった。

実施例１０゜ 実施例９と同様の方法で作り出したＰＢ感染マウスを用
いて試験を行った。

テトロカルシンＡの投薬量は１匹あたり０．１．０．２
及び０．４■／マウス／日とし、皮下投薬回数は１日１
回７日間連続とした。

その結果、無投薬対照群は８日目までに全例死亡したが
テトロカルシンＡをＯ，ｌ　ｍｇ／マウス／日以日没上
投薬群は金側が発症することなく経過し生残ったので４
０日目に殺処分した。この間１５日目および殺処分時の
原虫検査成績は陰性であり殺処分時に初代マウスの臓器
乳剤をｉ、Ｉ）、接種した２代目マウスも発病すること
、なく経過し、４０日目に殺処分したが、原虫検査成績
は陰性であり薬の効果が認められた。

実施例１１゜ 実施例９と同様の方法で作り出したＰＢ感染マウス１群
５匹を用いて試験を行った。

テトロカルシンＢの投薬量は１匹あたり０．１．０．２
及び０．４　ｍｇ／マウス／日とし皮下投与回数は１日
１回７日間連続とした。その結果、無投薬対照群５匹は
８日目までに全例死亡し、剖検時、金側に感染血球が認
められた。

一方、テトロカルシンＢ投与群は０．１　ｍｇ／マウス
／日の場合、生存日数の延長が若干みられたが１０日目
、１３日目、１７日目、２０日目、２３日目に各１匹ず
つ計５匹全部死亡した。

０、２　ｍｇ及び０．４ｍｇ／マウス／日の場合は金側
が発症することなく経過し生残ったので４０日目に殺処
分した。この間１５日目および殺処分時に原虫検査成績
は陰性であり殺処分時初代マウスの臓器乳剤を１．ｐ、
接種した２代目マウスも発病することなく経過し、４０
日目に殺処分したが、原虫検査成績は陰性であり、薬の
効果が認められた。

【図面の簡単な説明】

第１〜５図はＴＳ感染摘牌牛に対するテトロカルシンへ
の投薬効果を示す。第１〜５図において縦軸は赤血球１
０００個あたりの原虫寄生赤血球数を示し、横軸は日数
を示す。矢印は投与時点を示し、各１つの矢印は第１図
では０．３２■／ｋｇ投与を、第２．３図では３．２ｍ
ｇ／ｋｇ投与を、第４．５図では６．４ｍｇ／ｋｇ投与
を示す。 巳 ト 巳 ｔ（

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. テトロカルシン類の少なくとも１種を含有する抗マラリ
   ア剤