JPH05503532A - レトロウイルス感染治療用医薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 新規な用途 本発明は、レトロウィルス感染、特にＨＩＶ感染および後天性免疫不全症候群（ ＡＩＤＳ）およびＡＩＤＳ関連症候群（ＡＩ？Ｃ）にかかった患者の治療に使用 される可能性のある医薬を製造するためのＮ−フェニル−Ｎ−メチル−１．２− ジヒドロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−キノリン−３−カルボキ サミドまたはその医薬的に許容し得る誘導体の使用に関するものである。

リ 全世界的に重大性が高まっている致命的なヒトの疾患として、後天性免疫不全症 候群（ＡＩＤＳ）が出現した。このＡＩＤＳの治療に有効な治療は知られていな いので、新規な治療方法が緊急に必要でありそしてＡＩＤＳ撲滅する薬剤および ワクチンを開発するための非常な努力がなされている。

１９８３年にはじめて同定されたＡＩＤＳウィルスは、いくつかの名称によって 報告された。このものは３番目に知られたＴ−リンパ球ウィルス（ＩＩＴＬＶ− ｍ　）であって、免疫系の細胞内において複製する能力を有しており、それによ って７４Ｔ−細胞（またはＣＤ４細胞）に深甚な破壊を招来する。例えば、Ｇａ ｌｌｏ等、Ｓｃｉｅｎｃｅ　２２４、５００−５０３（１９８４）およびＰｏｐ ｏｖｉｃ等、同文献４９７−５００（１９８４）を参照されたい。

このレトロウィルスは、リンパ腺症一関連ウィルス（ＬＡＹ）またはＡＩＤＳ− 関連ウィルス（＾ＲＶ）としてそしてもっとも最近は、ヒト免疫不全ウィルス（ ＩＩＩＶ）として知られている。２つの別個のＡＩＤＳウィルスであるＨＩＶ− １およびＩＩＩＶ−２が報告されている。ＨＩｖ−１は、はじめにパリのパスツ ール研究所においてｌｌｏｎｔａｇｎｉｅｒおよび共同研究者により１９８３年 に同定されたウィルスであり〔＾ｎｎ、　Ｖｉｒｏｌ、　Ｌｎｓｔ。

Ｐａ５ｔｅｕｒ　１３５Ｅ、　１１９−１３４（１９１１ｔ４）］　、そして他 方、ＨＩＶ−２は、より最近の１９８６年にｌｌｏｎｔａｇｒ＋ｉｅｒおよび共 同研究者により単離されたものであるｌ：（Ｎａｔｕｒｅ　３２６．６６２（１ ９８７））。本明細書で使用するＨＩＶとは、一般的な観念においてこれらのウ ィルスを意味する。

ＡＩＤＳの分子生物学は解明および明確にされはじめてはいるけれども、更にこ の疾患について学びそして理解することが必要である。一方において、有望な使 用可能な抗ＡＩＤＳ薬剤およびワクチンを捜しめる多数の研究がなされている。

しかしＨＩＶに対する保護免疫の機構の理解の欠除、ウィルスの遺伝的変異の大 きさおよびＩＩＩＶ感染に対する有効な動物モデルの欠除のために、ＡＩＤＳワ クチンの開発は妨げられている。例えば、ＫｏｆｆおよびＨｏｔｈ。

５ｃｉｅｎｃｅ　２４１．４２６−４３２（１９８ｇ）を参照されたい。

ＡＩＤＳの治療に対して米国のＦｏｏｄ　ａｎｄ　ＤｒｕｇＡｄｍｉｎｉｓｔｒ ａｔｉｏｎ（ＦＤ＾）により認可されたはじめの薬剤は、その以前の名称である アジドチミジン（ＡＺＴ）でよく知られているシトプシンである。化学的にこの 薬剤は、３′−アジド−３−デオキシチミジンである。この薬剤は、もともと、 試験管内試験においてウィルスの複製を阻害することが証明されたために、＾ｔ Ｄｓに対する有望な武器として選択された。しかしながら、ＡＺＴの重大な欠点 は、その毒性の副作用である。ＡＺＴ以外に、アナサマイシン、リボビリン、ジ デオキシシチジンおよびホスカーネットのような他の抗ウィルス剤が開発された 。しかしながら今までのところ、これらの抗ウィルス剤はＡＺＴよりより有利で あるとは思われない。また、ＩＦＮｓまたはＩＬ２、脚線ホルモンおよび因子、 伝達因子による免疫刺激または免疫応用（ｉｍ＋＊ｕｎｏａｄｏｐｔｉｖｅ）治 療、およびいわゆる免疫刺激薬剤、例えばイソブリノシン、アジメクソン、ラフ トシン、ベスタチン、シメチジンによる治療、胸腺移植およびｆｌＬＡ適合リン パ球輸注または子孫または一卵性双生児骨髄移植による治療が試験されているが 、２つの最近の評論にはっきり示されているように失敗しているように思われる ［Ｇｏｔｔｌｉｅｂ　ＭＳ　ｅｔ　ａｌ、　Ｉ＋ｇｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ　ｏ ｆｔｈｅ　ａｃｑｕｉｒｅｄ　ｉｍｍｕｎｅ　ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｓｙｎｄ ｒｏｍｅ、Ｉｎ　：　Ｇａ１ｌ−ｉｎ　ＪＩ、　Ｆａｕｃｉ　ＡＳ、　ｅｄｓ、 　＾ｄｖａｎｃｅｓ　ｉｎ　ｈｏｓ　ｄｅｆｅｎｓｅ園ｅｃｈａｎｉｓｍｓ、Ｎ ｅｗ　Ｙｏｒｋ　：　Ｒａｖｅｎ　Ｐｒｅｓｓ、１９８５　；　５　：　１４９ −７０゜ａｎｄ　Ｌｅｔｚｅ　ＭＴ、Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｉｓｍｕｎｏ ｌｏｇｉｃ　ｄｉｓｏｒｄｅｒｓｉｎ　ＡＩＤＳ、　Ｉｎ　Ｄｅ　Ｖｉｔａ　Ｖ Ｔ、　Ｈｅｌｌｍａｎ　Ｓ、　Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ　Ｓ＾ｅｄｓ、　ＡＩＤＳ　 ｅｔｉｏｌｏｇｙ、　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ、　ｔｒｅａｔｒｓｅｎｔ、　ａｎｄ 　ｐｒｅ−ｖｅｎｔｉｏｎ、Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ　Ｊ８　 ｃｏｍｐａｎｙ、　１９８５：２３５−６３）。

本発明によって、驚くべきことには、Ｎ−フェニル−Ｎ−メチル−１，２−ジヒ ドロ−４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−キノリン−３−カルボキサミ ドが、ヒトを包含する哺乳動物に対する■ＩＶ感染のようなレトロウィルス感染 およびＡＩＤＳおよび＾［ｌＣにかかった患者の治療に有用である性質を有して いるということが証明された。Ｎ−フェニル−Ｎ−メチル−１，２−ジヒドロ− ４−ヒドロキシ−１−メチル−２−オキソ−キノリン−３−カルボキサミドは、 またリノマイド■の名称およびロキニメックスの一般名称で知られている。本発 明はまた、レトロウィルス感染、特にＨＩＶ感染およびＡＩＤＳおよびＡＩＤＳ 開運症候群にかかった患者の治療用薬剤を製造するためのリノマイドＯまたはＮ ａまたはＣａ塩のようなその医薬的に許容し得る塩の使用に関するものである。

リノマイド［Ｆ］は、免疫刺激剤として最初に米国特許第４．５４７．５１１号 に記載されたものである。

リノマイド■を使用した科学的実験は、リノマイド■が多重免疫学的活性を有す ることを示す。すなわち、リノマイド［Ｆ］は、ＴおよびＢ細胞マイトジェンに 対する増殖応答を増大し［Ｌａｒｓｓｏｎ、Ｅ、Ｌ、、Ｊｏｉｋｉ、Ａ、Ｌ、お よびＳｔ＾１ｈａｎｄｓｋｅ、　Ｔ、　：　Ｉｌｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ａｃ ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｎｅｗｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒ　ＬＳ　２６ １６．　Ｉｎｔ、Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｓａｃｏｌ。

９：４２５．　１９ｇ？）　、抗体産生を高め［Ｃａｒｌｓｔｅｎ、ｔｌ、。

Ｔａｒｋｏｗｓｋｉ、Ａ、およびＮｉ１ｓｓｏｎ、Ｌ−＾：　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅ ｃｔ　ｏｆｉｍｍｕｎｏｓｏｄｕｌａｔｉｎｇ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｎ　ｃ ｕｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅｌａｙｅｄｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　 ＭＲＬ（ｌｐｒ／ｌｐｒ）ｍｉｃｅ、ＡＰＭＩＳ　９７：７２ｇ、　１９８９］ そしてＮＫ細胞活性を増大する［ａｌｌａｎｄ、　Ｔ、。

Ａｉｍ、Ｇ、および５ｔＡ１ｈａｎｄｓｋｅ、Ｔ、　：＾ｕｇｗｅｎｔａｔｉｏ ｎ　ｏｆｍｏｕｓｅ　ｎａｔｕｒａｌ　ｋｉｌｌｅｒ　ｃｅｌｌ　ａｃｔｉｖｉ ｔｙ　ｂｙ　［、Ｓ　２６１６．　ａｎｅｗ　ｉ＋ｓｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏ ｒ、　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　１３４：　３９５６．１９８５］、［１［ａｌ ｌａｎｄ、　Ｔ、　：Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＮＫ　ｐｒｏｇｅｎｉｔｏ ｒｓ　：５ｔｕ−ｄｉｅｓ　ｗｉｔｈ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｉｍｉｕｎｏｍｏｄｕ ｌａｔｏｒ　ｗｉｔｈ　ｄｉｓｔｉｎｃｔｅｆｆｅｃｔｓ　ａｔ　ｔｈｅ　ｐｒ ｅｃｕｒｓｅｒ　１ｅｖｅ１．　Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、１４４：４４７２−６． １９９０）ことがこれまでに見出されている。

リノマイド■が１９２８球を刺激しそしてＩＬ−２の産生を増大することが証明 された事実の点からみて、Ｔ細胞成長ホルモンＩＬ−２にょるＩＩＩＶ感染患者 の治療の試みは疾患を促進するので、リノマイド■がレトロウィルスに対して作 用を示すことは予期することができない。疑いもなく　ＩＩＩＶ−感染の患者に おける１９２８球の刺激はもろ刃の剣であるということができる。Ｔリンパ−細 胞は免疫応答の発生において重要であるけれども、またＨｌｖ−ウィルスの復製 に対する貯蔵所でもある。また、免疫刺激剤による従来の実験が成功していない という事実の点からみて、リノマイド［Ｆ］の有望な結果を知ることは興味のあ ることである。

リノマイド［Ｆ］は、次の構造式を有している。

とＨ８ リンｌイド■は、それ自体または医薬的に許容し得る陽イオンの塩として使用す ることができる。さらに、リンｌイド■は、他の抗−ＡＩＤＳ剤と組み合わせて 使用することができる。

ＡＩＤＳの治療において考えられるリンｌイド■の投与量範囲は、１日当り約０ ．１〜１００ｍｇであるが、治療された特定の条件、特定の患者の年令および体 重および医薬投与に対する特定の患者の応答によってより大なる投与量にするこ とができる。正確な個々の投与量ならびに１日当りの投与量は医師の指示下、標 準医療原理によって決定される。

本発明により使用することのできる処方は、米国特許第４．５４７．５１１号Ｃ ｏ１．１１に記載されている。該特許明細書を参照によって本明細書に加入する 。

上述したようにリンｌイド■は、Ｔリンパ球の強力な刺激剤であり、モしてＩＬ −２の産生を増大する。しかしながら、免疫薬理学的プロフィルは、生体内にお けるＴ細胞活性に対するより低い作用とともにナチュラルキラー（ＮＵ）細胞活 性における大なる増加により支配される（Ｋａｌｌａｎｄ、　Ｔ、　：　Ｅｆｆ ｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏ＋ｇｏｄｕｌａｔｏｒ　ＬＳ２６１６　 ｏｎ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓ＋ｕｒ ｉｎｅ　Ｂ１６−Ｆ］Ｏｍｅｌａｎｏｍａ、　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、　４６： 　３０１８．１９８６）。特にＣＤ４発現細胞の頻度は、リンｌイド■によるマ ウスの処理中増加しない（実施例２）。この知見とレトロウィルス感染サルに対 する有望な結果との組み合わせからリンｌイド■のＴ細胞刺激性に関する潜在的 な危険にもかかわらず、リンｌイド［Ｆ］がＨＩＶ感染を包含するレトロウィル ス、ＡＩＤＳおよび＾ＲＣの治療に有用性を内在するものとされるのである。

本発明を、さらに以下の実施例により説明する。

実施例　Ｉ ＮＫ活性に対するリンｌイド［Ｆ］の作用細胞傷害％ 処理　１００：１本　５０：　１本　２５：　１本比較対照　１８±４　１２± ２　８±２リノマイド＠２９±５　２０±４　１４±４＊エフエクター細胞二標 的細胞比 リンｌイド■（１６０ｍｅ／　＆ｇ／日）を、４日間飲料水中で与えモしてＹＡ Ｃ−１細胞に対する膵臓ＮＫ活性度を、報告されている在来の５１（、ｒ−放出 試験（Ｋａｌｌａｎｄ、Ｔ、、＾１＋＋、Ｇ。

および５ｔＡｌｈａｎｄｓｋｅ、Ｔ、：　Ａｕｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍ ｏｕｓｅｎａｔｕｒａｌ　ｋｉｌｌｅｒ　ｃｅｌｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｂｙ　 ＬＳ　２６１６．　ａ　ｎｅｗｉｍｍｕｎｏｓｏｄｕｌａｔｏｒ、　Ｊ、　Ｉ＋ ＊ｍｕｎｏ１．１３４：　３９５６．１９８５）により測定した。１処理グルー プ当り３匹のＣ５７Ｂ１／６マウスを使用した１回の実験からの結果は、リンｌ イド［Ｆ］がＮＫ活性度を有意に増大することが示されそして証明された。

実施例　２ 膵臓Ｔリンパ球すブボブユレーション（５ｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ）に対する リンｌイド［Ｆ］による処理の作用蛍光細胞％ 処理　Ｔｈｙ　１．２　ＣＤ４　ＣＤ８比較対照　４４±４　３１±２１１±２ リノマイド　４２±５　２８±２１０±３Ｃ５７Ｂ１／６マウスにリンｌイド＠ （１６０翼９／に９７日）を４日間飲料水中で与えた。比較対照動物には普通の 飲料水を与える。牌臓細胞を報告されているように調製しくＫａｌｌａｎｄ、Ｔ 、、Ａｉｍ、Ｇ、および５ｔＡ１ｈａｎｄｓｋｅ、Ｔ　：＾ｕｇ−ｍｅｎｔａｔ ｉｏｎ　ｏｆ　ｍｏｕｓｅ　ｎａｔｕｒａｌ　ｋｉｌｌｅｒ　ｃｅｌｌ　ａｃｔ ｉｖｉｔｙｂｙ　ＬＳ　２６１６．　ａ　ｎｅｗ　ｉｌｅｍｕｎｏｍｏｄｕｌａ ｔｏｒ、Ｊ、Ｉｍ＋ａｕｎｏｌ。

１３４：　３９５６．　１９８５］そして直接的な免疫蛍光によって細胞表面マ ーカーの発現について検査した。次のＦＩＴＣ−標識モツクローナル抗体を使用 した。１１０−１３４　（Ｔｈｙｌ、２）、ＧＫｌ、　５（ＣＤ４）および１９ ．１７８ｃ（ＣＤ８）　（抗体に関して次の文献、すなわち、Ｋａｌｌａｎｄ、 Ｔ、　：Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＮＫ　ｐｒｏｇｅｎｉ−ｔｏｒｓ　：　 ５ｔｕｄｉｅｓ　ｗｉｔｈ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｉｍｍｕｎｏｗｏｄｕｌａｔｏｒ 　ｗｉｔｈｄｉｓｔｉｎｃｔ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ａｔ　ｔｈｅ　ｐｒｅｃｕｒｓ ｅｒ　１ｅｖｅｌ、　Ｊ、　Ｉ＋＊ｍｕ−ｎｏｌ、１４４：　４４７２−６．　 １９９０参照〕。陽性の細胞の数を、エビフルオロセンス装備ライツ顕微鏡で４ ００の細胞をカウントすることにより測定した。価は、３匹のマウスの平均±Ｓ Ｄを示す。データは、リンｌイド［Ｆ］がＴリンｌく球サブボブニレーシコンの 分布を有意に変化しなし）ことを示唆した。

リンｌイド［Ｆ］を使用して得られたそして実施例１および２で与えられた結果 はリンｌイド［Ｆ］が■ＩＶ−感染の治療における潜在的な使用可能性を有して いることを示す。

実施例　３ ＳＩＶウィルスを使用した以下の実験は、試験管内試験結果において上記結果を 支持する。

試験モデルの背景 ＨＥＷ−ウィルスは、ラットおよびマウスのような大部分の普通使用される実験 動物に感染しないので、生体内における潜在的な薬剤の作用を検査するために、 他のモデルが利用された。２つの原理的に異なる方法をとることができる。５Ｃ ＩＤマウスは、ヒト造血細胞で有利に再構成されそしてＨＩｖ−ウィルス感染リ ンパ球を有し得ることが判っている［Ｎａｍｉｋａｗａ、Ｒ，、Ｋａｎｅｓｈｉ ｍａ、Ｈ，。

Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ、　Ｍ、、　Ｗｅｉｓｓｓａｎ、１．Ｌ、、　ＭｃＣｕｎｅ 、Ｊ、ｉｌ、　：Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　５ＣＩＤ−ｈｕ　ｍｏｕ ｓｅ　ｂｙ　ＨＩＶ−１，５ｃｉｅｎｃｅ２４２：　１６８４−６．１９８８） 。しかしながら、このモデルの適切さは特に直接ウィルス複製を妨げないで、宿 主細胞に対してのみ作用する薬剤の調査に対して若干長間である。

種々な種類のサルが、種々なＨＩＴまたはＳＩＶウィルスに対するベヒクルとし て試験されている。カニクイザルのＳＩＴ感染は、ヒトにおけるＡＩＤＳの感染 と多（の類似点をもって感染する［Ｐｕｔｋｏｎｅｎ、Ｐ、、ｆａｒｓｉｅｄｔ 、Ｋ、。

Ｔｈｏｒｓｔｅｎｓｓｏｎ、Ｒ，、Ｂｅｎｔｈｉｎ、Ｒ，、＾１ｂｅｒｔ、Ｊ、 。

Ｌｕｎｄｇｒｅｎ、　Ｂ、、　Ｏｂｅｒｇ、　Ｂ、、　Ｎｏｒｂｙ、　Ｅ、、　 Ｂｉｂｅｒｆｅｌｄ、　Ｇ、。

Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　１ｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ 　ｍｏｎｋｅｙｓ（置ａｃａｃａ　Ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）ｗｉｔｈ　５１ ｍ１ａｎ　ｉｍａｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓ（ＳＩＶｓｍ）、Ｊ、 ＡＩＤＳ　Ｒｅｓ、２：３５９−３６５．　１９８９）　、ウィルスは、特定の 感染段階においてリンパ球様細胞およびリンパ節から単離することができるそし てＳＩＶに対する抗体は容易に検出することができる。さらに、ＣＤ４“細胞の 絶対数および相対的な数の大いなる減少が、−貫して観察される。動物は、拡大 したリンパ節、日和み感染体重損失および消耗症候群により特徴づけられる臨床 疾患を示す。このモデルは、おそらくヒトのＢＩＴ−感染を治療するために企図 されるワクチンおよび薬剤の生体内試験に対してもっとも適切に対応するもので ある。

材料および方法 艶や ９匹のカニクイザル（Ｍａｃａｃａ　Ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）を、この研究 において使用した。平均体重は２６００ｇでありそしてその範囲は２２６０−２ ９３０９であった。サルは生物安全３レベル施設の単一のおりの中で飼育した。

使用前に、動物を外診により臨床健康について管理しそしてＥＬｒＳＡによりＳ Ｔｖ抗体を有していないことが確認された［　Ｐｕｔｋｏｎｅｎ。

Ｐ、、　１ａｒｓｔｅｄｔ、　Ｋ−、Ｔｈｏｒｓｔｅｎｓｓｏｎ、　Ｒ，、Ｂｅ ｎｔｈｉｎ、　Ｒ，。

Ａｌｂｅｒｔ、　Ｊ、、　Ｌｕｎｄｇｒｅｎ、　Ｂ、、　Ｑｂｅｒｇ、　Ｂ、、 　Ｎｏｒｒｂｙ、　Ｅ、。

Ｂｉｂｅｒｆｅｌｄ、　Ｇ、　：Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　１ｎｆｅｃｔｉｏ ｎ　ｏｆ　ｃｙｎａｍａｌ−ｇｕｓ　ｍｏｎｋｅｙｓ　（Ｍａｃａｃａ　Ｆａｓ ｃｉｃｕｌａｒｉｓ）　ｗｉｔｈ　ｓｉ＋ａｉａｎｉｍｓｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅ ｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ（ＳＩＹｓｍ）、　Ｊ、ＡＩＤＳ　１９８９　：　２゜３５ ９−３６５］。さらに、サルのＰＢＩＩＣ（＝末梢血液単核細胞）をヒトＰＨ＾ −刺激ＰＢａｌＣと一緒に共培養しそして培養上澄液を逆転写酵素活性度につい て試験することによって、既存のレトロウィルスの不存在を調査した。

ウィルス源 １　上記研究におけるように［Ｐｕｔｋｏｎｅｎ、　Ｐ、、　Ｗａｒｓｔｅｄｔ 。

Ｋ、、Ｔｈｏｒｓｔｅｎｓｓｏｎ、Ｒ，、Ｂｅｎｔｈｉｎ、Ｒ，、Ａｌｂｅｒｔ 、Ｊ、。

Ｌｕｎｄｇｒｅｎ、Ｂ、、Ｏｂｅｒｇ、Ｂ、、Ｎｏｒｒｂｙ、Ｅ、、Ｂｉｂｅｒ ｆｅｌｄ。

Ｇ、　：　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　１ｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｙｎｏｍ ｏｌｇｕｓ　ｍｏｎｋｅｙｓ（ｌｌａｃａｃａ　Ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）ｗ ｉｔｈ　５１ｍ１ａｎ　１ｍ１ｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓ（ＳＩＶ ｓｓ）、　Ｊ、ＡＩＤＳ　１９８９：　２．３５９−３６５）　、自然に感染し たすす色のマンガベーサル（ＳＩＶｓｓ）から単離したＳＩＶ菌株を使用した。

このウィルスのストックは、予めサルにおいて生体内力価測定された。

実験計画 リンマイド■またはＮａＣ／にょる腔腔内処理を生ウィルスによる挑戦の４日前 に開始しそして次に追跡調査の期間中毎日（週末中でない）皮下的に処理する。

追跡調査は、生ウィルス挑戦後７５日である。

サルＬ１−３を低投与量のリンマイド■０．３ｗｑ／ｋｆｂｖｘ　２で処理した 。

サルＬ４−６を高投与量のリンマイド＠３麿ｇ／ｋｇ　ｂｗＸ２で処理した。

サルＬ７−９に塩化ナトリウム×２を与えた。

すべてのサルを生５ＩＶｓ■の１０−１００動物ＩＤ、。で挑戦した。

動物が死にかけたときに動物を犠牲にした。

ウィルス単離およびウィルス抗原検出 ウィルス単離は従来報告されているように（Ｐｕｔｋｏｎｅｎ。

Ｐ、、Ｗａｒｓｔｅｄｔ、Ｋ、、Ｔｈｏｒｓｔｅｎｓｓｏｎ、Ｒ，、Ｂｅｎｔｈ ｉｎ、Ｒ，。

Ａｌｂｅｒｔ、　Ｊ、、　Ｌｕｎｄｇｒｅｎ、　Ｂ、、　Ｏｂｅｒｇ、　Ｂ、、 　Ｎｏｒｒｂｙ、　Ｅ、。

Ｂｊｂｅｒｆｅｌｄ、　Ｇ、　：　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　１ｎｆｅｃｔｉ ｏｎ　ｏｆ　ｃｙｎｏｍｏｌ−ｇｕｓ　ｍｏｎｋｅｙｓ（Ｍａｃａｃａ　Ｆａｓ ｃｉｃｕｌａｒｉｓ）　ｗｉｔｈ　５１ｍ１ａｎ　ｉｉｍｕ−ｎｏｄｅｆｉｃｉ ｅｎｃｙ　ｖｉｒｕｓ（ＳＩＶｓｍ）、　Ｊ、　ＡＩＤＳ　１９８９：２．３５ ９−３６５］　、１つの重要な改善をもって遂行した。培養上澄液を、感受性Ｈ ＩＶ−２／ＳＩＴ抗原試験（Ｔｈｏｒｓｔｅｎｓｓｏｎ、　Ｒ，。

Ｗａｌｔｈｅｒ、　Ｌ、、　Ｐｕｔｋｏｎｅｎ、　Ｐ、、＾Ｉｂｅｒｔ、　Ｊ、 、　Ｂｉｂｅｒｆｅｌｄ。

Ｇ、：　＾　Ｃａｐｔｕｒｅ　ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ　ｏｆ　ｄｅｔｅｃｔｉ ｏｎ　ｏｆ　ＩＩＩＩＶ−２／ＳＩｖａｎｔｉｇｅｎ、Ｊ、ＡＩＤＳ　ｉｎ　ｐ ｒｅｓｓ〕によりスクリーンした。血清中のウィルス抗原の存在は、従来報告さ れているように［Ｔｈｏｒｓｔｅｎｓｓｏｎ、　Ｒ，、ｆａｌｒｈｅｒ、　Ｌ、 、　Ｐｕｔｋｏｎｅｎ。

Ｐ、、　Ａｌｂｅｒｔ、　Ｊ、、　Ｂｉｂｅｒｆｅｌｄ、　Ｇ、：　Ａ　ｃａｐ ｔｕｒｅ　ｉｍｍｕｎｏ−ａｓｓａｙ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈ ＩＶ−２／ＳＩＶ　ａｎｔｉｇｅｎ、　Ｊ、＾ＩＤ５ｉｎ　ｐｒｅｓｓ）証明し た。

血清学的試験 これまでは試験していない。

リンパ球表面マーカー 末梢血液中のＴ−リンパ球サブセットを従来報告されているように（Ｐｕｔｋｏ ｎｅｎ、Ｐ、、Ｗａｒｓｔｅｄｔ、Ｋ、。

丁ｈｏｒｓｔｅｎｓｓｏｎ、Ｒ，、Ｂｅｎｔｈｉｎ、Ｒ，、＾１ｂｅｒｔ、Ｊ、 。

Ｌｕｎｄｇｒｅｎ、　ＢｌＱｂｅｒｇ、　Ｂ、、　Ｎｏｒｒｂｙ、　Ｅ、、　Ｂ ｉｂｅｒｆｅｌｄ。

Ｇ、　：　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　１ｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｙｎｏａ ｏｌｇｕｓ　ｍｏｎｋｅｙｓＭａｃａｃａ　Ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）ｗｉｔ ｈ　５１ｍ１ａｎ　ｉ＋ｎ＋ｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓ（ＳＩＶｓ ｍ）、１．ＡＩＤＳ　１９８９：　２．３５９−３６５３免疫蛍光により測定す る。末梢血液試料をＦＩＴＣ−接合抗ＣＤ４　（ＯＫＴ４０ｒｔｈｏ）および抗 ＣＤ８（Ｌｅｕ２．　Ｂｅｃｔｏｎ　Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）と−緒に培養した。

試料はスペクトラム■フローサイトメーター（Ｏｒｔｈｏ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉ ｃｓ）で分析した。

糀！ ９匹のサルは、すべてウィルス単離により測定されるように感染した（表１）。

ウィルスは１４日、２８日および６２日目にすべての動物から単離された。血清 中のウィルス抗原の存在は、すべての９匹のサルにおいて挑戦後の１４日に証明 された。

サルＬ４、Ｌ６およびＬ９はひどい体重損失およびＣＤ４　”＠抱の急速な減少 （ＡＩＤＳ様疾患）のため、挑戦後７０〜８２日後に犠牲にした。同時に、サル Ｌ７もまた悪い臨床条件にあった。

末梢リンパ節の拡大は、サルＬ３およびＬ７において観察された。

サルＬ１−３は臨床的に健康のままであった。

体重曲線、ＣＤ４カウント、ＣＤ”１ｌｌｌ　胞％　オヨヒｃＤ４／８比ハ、第 １図〜第４ｖＡに示される通りである。

動物の体重は、第１図に示される通りである。０．６ｍｇ／に９／日のリンマイ ド［Ｆ］で処理したサルＬ１−３においては僅かな体重減少がみられるにすぎな い。これに反して、比較対照グループのそれぞれの１匹のサル（Ｌ９）および高 投与量のリンマイド［Ｆ］グループにおける１匹のサルは、著しい体重の減少を 示す。

末梢血液中のＣＤ４　”　Ｔリンパ球の絶対的な数および％の測定は、実験中規 則的な間隔で行われた。ＣＤ４　”″リンパ球の数は、比較対照群においては７ ５日目にはげしく減少した（０．３３ｘ　１０’／　ｌ、出発値の２８％）が、 低投与量のリンマイド［Ｆ］処理グループにおいては僅かに減少した（０．９２ Ｘ　１０”／ｌ、出発値の７０％）にすぎない（第２図）。同様に、末梢血液の ＣＤ４″″細胞の％は、比較対照サルにおいては減少したが、低投与量のリンマ イド［Ｆ］で処理したサルにおいては本質的に変化しなかった（第３図）。高投 与量のリンマイド［Ｆ］処理は、感染したサルにおけるＣＤ４細胞の数または頻 度を有意に変化させなかった。定性的ウィルス単離試験においては、ウィルスは 挑戦の４日後においてすべてのサルから単離することができ、そしてウィルス抗 原は６２日まで実証された。このもっともおそい時間はこの試験に含まれていた （表１）。

リンマイド［Ｆ］の半減期は、動物種の間において著しく相違する。それはマウ スにおいては２時間、カニクイサルにおいては６時間、ラットにおいては２４時 間そしてヒトにおいては約４８時間である。本調査におけるリンマイド■の低投 与量（０，３ｇｇ／＆ｇＸ　２　１日当り）は、マウス、ラットおよびヒトにお ける半減期および最適の免疫調節活性度に対する外挿に基づく。多（の他の生物 学的応答変性剤と同様にリンマイド■の投与量一応答曲線はペルー形であること が示されているけれども、ウィルス複製に対するリンマイド［Ｆ］の可能な直接 的な作用を検査するために最適以上の投与量（３＋＋ｑ／ｋｑＸ２　１日当り） もまた包含させた。

ＦＩＧ、１ 低投与量のリンマイド０．３園ｇ／ｋｇＸ２高投与量のリンマイド３■ｇ／ｋｇ Ｘ２ＳＩｖｓ■で接種後の日数 ＦＩＧ、２ ＣＤ４カウント 高投与量のリンマイド ５ＩｖＳ−で接種後の日数 ＦＩＧ、３ ％ＣＤ４ 高投与量のリンマイド ＦＩＧ、４ ＣＤ４／ＣＤ８比 高投与量のリンマイド 比較対照動物 ５ＩＶｓ■で接種後の日数 国際調査報告 ＋、１１．＋ｔ−−＋ａ−ｎｃ、５−ｕ−ＰＣＴ／ＳＥ　９１１００１３６Ｉ＋ 悸りｎ−１−１ｈ１ムｅ＋＋１□【峠・＋Ｉ＋＠ρＣＴ／５Ｅ９１１００１］６ 国際調査報告

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. １．レトロウイルス感染の治療用の医薬を製造するためのリノマイド（Ｒ）また はその医薬的に許容し得る塩の使用。
2. ２．ＨＩＶ−感染を治療するための請求項１記載の使用。
3. ３．ＡＩＤＳおよびＡＲＣの治療のための請求項１記載の使用。
4. ４．リノマイド（Ｒ）を１種または２種以上の他の抗ＡＩＤＳ剤と組み合わせて 使用することを特徴とする前記請求項の何れかの項記載の使用。
5. ５．リノマイド（Ｒ）またはその医薬的に許容し得る塩の有効量を宿主に投与す ることからなるレトロウイルスに感染した宿主を治療する方法。
6. ６．リノマイド（Ｒ）またはその医薬的に許容し得る塩の有効量を患者に投与す ることからなるＨＩＶウイルスに感染した患者のＴ４細胞数を増加させる方法。
7. ７．リノマイド（Ｒ）を他の抗ＡＩＤＳ剤と組み合わせて投与する請求項６記載 の方法。
8. ８．投与を経口的に行う請求項１記載の方法。
9. ９．投与を非経口的に行う請求項１記載の方法。