JPH0216988A - 濃縮された長鎖高度不飽和脂肪酸グリセリドの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は濃縮された長鎖高度不飽和脂肪酸（以下、ＰＵ
ＦＡと略記する。）グリセリドの製造方法に関し、詳し
くは食品、医薬品等として有用なＰＩＪＦＡグリセリド
を微生物を用いて濃縮されたＰＵＦＡを製造する方法に
関する。

〔従来の技術〕

従来、微生物起源のリパーゼを使用してＰＵＦＡグリセ
リドを濃縮する方法として、魚油をキャンディダ・シリ
ンドラシェ由来のリパーゼで処理する方法（特開昭５８
−１６’５７９６号公報）、油脂をアルカリ土類金属微
生物由来のリパーゼで処理する方法（特開昭６１−１５
６’９２号公報）油脂ヲアルスロバクター・ウレアファ
シェンス由来のリパーゼで処理する方法（特開昭６１−
１５６９３号公報）などが知られている。また、魚油の
脂肪酸低級アルコールエステルを各種起源のリパーゼで
処理してＰＵＦＡ低級アルコールエステルを濃縮する方
法も提案されている（特開昭５９−１４７９３号公報）
。

〔発明が解決しようとする課題〕

しかしながら、上記方法はいずれも高価なリパーゼを使
用するため、その適用範囲が制限される」二に、リパー
ゼで処理した後に遊離脂肪酸を除く操作が必要とするな
どの問題点があった。

〔課題を解決するだめの手段〕

そこで、本発明者は上記問題点を解消して効率よく濃縮
されたＰＵＦＡグリセリ１′を製造する方法について検
討を重ね、特定の微生物を使用することによって目的を
達せられることを見出し、かかる知見に基いて本発明を
完成した。

すなわち本発明は、ＰＵＦＡ含有油脂を油脂資化能を有
し、かつ実質的にＰＵＦＡ資化能を欠如する酵母と接触
させることを特徴とする濃縮されたＰＵＦＡグリセリド
の製造方法に関する。

本発明においてＰＵＦＡとは炭素数１６以上であって、
３個以上の二重結合を有する脂肪酸を意味する。具体的
にはγ−リルン酸、アラキドン酸、エイコサペンクエン
酸、ビス−ホモ−Ｔ−リルン酸、ドコサヘキサエン酸、
Δ６・９°１２・１５オクタデカテトラエン酸などがあ
る。このようなＰＵＦＡを含有する油脂としては、例え
ばγ−リルン酸を含有する月見草油１モルティエレラ属
。

ムコール属、コニディオボラス属等に属する糸状菌から
抽出れたＴ−リルン酸含有油脂、ビスホモ〜Ｔ−リルン
酸含有油脂、アラキドン酸含有油脂などを挙げることが
できる。そのほか、イワシ、サバ、サンマ、アジなどの
魚類の油（色違）や甲殻類、海産動物頚、藻頚などの油
脂も任意に使用することができる。これら油脂は単独で
用いるほか、２種以上を組合せて使用してもよい。

次に、油脂資化能を有し、実質的にＰＵＦＡ資化能を欠
如する酵母としては、トルロプシス属に属する酵母、例
えばトルロプシス・ボンビコーラ（Ｔｏｒｕｊｇｔｓｉ
ｓ　％　八ＴＣＣ２２２１４，トルロプシス・グロペン
ギイーセエリイ（Ｔ、　ｐｒｏ　ｅｎ　１ｅｓｓｅｒｉ
）ＩＦｏ　０６５９やキャンディダ・ルゴーザ（Ｃａｎ
ｄｉｄａ　７ＡＴＣＣ１４８３０等が挙げられる。ここ
で油脂資化能を有するとは、油脂を唯一の炭素源とする
培地で生育しうろこｋを意味する。また、実質的にＰＵ
ＦＡ資化能を欠如するとは、該資化能を全く有していな
いものやその資化能が弱いものを意味し、グルコースを
炭素源として培養したときに、菌体油脂中の脂肪酸とし
てＰＵＦＡを作らないか殆んど作らない。

上記微生物をＰＵＦＡ含有油脂と接触させてＰＵＦＡグ
リセリドを濃縮するには、ＰＵＦＡ含有油脂を炭素源と
して含む培地に上記微生物を接種し、培養すればよい。

炭素源としては、ＰＵＦＡ含有油脂のほか、グルコース
、でんぷん、廃Ｉｔ！Ｆ。

等のｖＭ類や酢酸ソーダなどを併用することができる。

また、窒素源としてアンモニウム塩、酵母エキス、麦芽
エキス、コーン・ステイープ・リカーペプトンなどを用
いることができ、無機塩類としてはマグネシウム塩、カ
ルシウム塩、リン酸塩。

鉄塩、＃Ａ塩などがあり、他に微量元素などを加えるこ
とができる。

培養にあたり、炭素源は培地に最初から全量を加えても
よいが、培養開始後適当な時期に適宜追加してもよい。

なお、炭素源を培地に最初から加える場合、初発添加量
が多過ぎると、微生物の生育に悪影響を及ぼすことがあ
るので、通常は１０〜２５０ｇ／ｊ！とする。また、培
養中に炭素源を追加する場合、その時期１回数などは適
宜決定すればよい。

１γ７養は好気的条件下、供試微生物の性質を考慮して
適当な温度、Ｐｌ−１７時間にて続ければよく、通常は
２０〜３２°Ｃ１好ましくは２５〜３０°Ｃ，ｐｌ＋３
〜７、好ましくは３．５〜６にて６０〜１２０時間、好
ましくは７０〜１００時間行えばよい。

微生物をＰＵＦＡ含有油脂と接触させる別の態様として
、前記微生物の休止菌体を用いてＰＵＦＡ含有油脂と接
触させてもよい。

培養終了後、菌体を遠心分離等によって除き、得られた
培養上清からエタノール、ヘキサン等の油脂抽出溶剤を
用いてＰＵＦＡ含有油脂を回収することができ、かくし
てＰＵＦＡ含有油脂を濃縮できる。なお、ＰＵＦＡ含有
油脂はグリセリド、特にトリグリセリドとして得られる
。このＰＵＦＡ含有油脂を常法によって加水分解すれば
、ＰＵＦＡを効率よく得ることができる。

〔実施例〕

次に、実施例により本発明の詳細な説明するが、本発明
はこれによって制限されるものではない。

実施例１ ムコール属糸状菌を培養して得たＴ−リルン酸含有油脂
２％３酵母エキス０．３％、麦芽エキス０．３％および
ペプトン０．５％を含み、ｐ１１６に調整された液体培
地にトルロプシス・ボンビコーラＡＴＣＣ２２２１４を
接種し、２８°Ｃで３日間培養した後、培養液を遠心分
離して菌体を除いた上清をヘキサンで抽出し、油分を回
収した。

原料油脂のγ−リルン酸含有量は３０．６％であったの
に対し、酵母との接触処理後の油脂のγリルン酸含有量
は４９．３％であった。したがって、γ−リルン酸は約
１．６倍に１４ｍされたことになる。なお、油脂の回収
率は３０％であった。この油脂の脂肪酸組成を第１表に
示す。また、回収した油脂はトリグリセリドの形であり
、これを苛性ソーダ等を用いて加水分解することにより
容易に遊離γ−リルン酸を得ることができる。

実施例２ 実施例１においてトルロプシス・ボンビコーラＡＴＣＣ
２２２１４の代りにトルロプシス・グロペンギィーセエ
リイ　ＩＦＯ０６５９を用いたこと以外は実施例１と同
様に行った。その結果、γ−リルン酸は約１．５倍に濃
縮された。また、回収した油脂の脂肪酸組成を第１表に
示す。

比較例１〜３ 実Ｊ’６　例１において１−ルロプシス・ボンビコーラ
ＡＴＣＣ２２２１４の代りに油脂資化能とＰＵＦＡ資化
能を有する微生物を用いたこと以外は実施例１と同様に
行った。その結果、回収した油脂中のＴリルン酸含有量
は、いずれの場合も原料油脂中の含有量よりも減少して
いるか、殆んど濃縮されていなかった。また、回収した
油脂中の脂肪酸組成を第１表に示す。

第」」聚 ＊２　アスペルギルス・ニガー＋１ｔｌＴ　２０７８使
用＊３　ムコール・サーシネロイデスＩＩＵＴ　１１２
１使用＊４　Ｔ−リルン酸 ＊５　　ｍ成分析は次の方法により行った。

（１）トリグリセリドの確認 薄層クロマトグラフ（シ、リカゲル６０．メルク社製）
を用い、試料１０ｔｔｇ程度を着点し、ヘキサン：エー
テル：酢酸（８０：３０：ｌ）で展開後、ヨウ素萎気に
より発色させ、生じたスポットを標準のスポットと比較
し、トリグリセリドを確認した。なお、遊離脂肪酸は認
められなかった。

（２）油脂の脂肪酸組成の分析 油脂２０〜３０ｆｆ１ｇに対し０．５ＮＮａＯＨ１ｍｌ
を加え、８０℃で１５分間ケン化し、次いで７％ＢＦ、
メタノール溶液１７＃ｌを加え、８０°Ｃで５分間反応
させメチルエステル化する。しかる後、水２ｍ！、ヘキ
サン５ｄを加えてよく振り、ヘキサンで脂肪酸メチルエ
ステルを抽出し、このヘキサン層をガスクロマド分析（
島津ＧＣ−９Ａ使用、カラム：ユニリール３０００．ガ
スクロ工業製、カラム温度＝２００°Ｃ１注入口温度＝
２５０℃）にかける。

Ｃ発明の効果〕 本発明によれば、高価なリパーゼを使用しないでＰＵＦ
Ａグリセリドを効率よく濃縮することができる。しかも
、濃縮の際に遊離脂肪酸を除去する操作が不要であり、
実用性の高い方法である。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）長鎖高度不飽和脂肪酸含有油脂を油脂資化能を有
   し、かつ実質的に長鎖高度不飽和脂肪酸資化能を欠如す
   る酵母と接触させることを特徴とする濃縮された長鎖高
   度不飽和脂肪酸グリセリドの製造方法。
2. （２）油脂資化能を有し、かつ実質的に長鎖高度不飽和
   脂肪酸資化能を欠如する酵母がトルロプシス属に属する
   酵母である請求項１記載の製造方法。