JPH02150278A - ヒトパピローマウイルスタイプ57、そのdnaおよびそれによってコードされるタンパク質 - Google Patents
ヒトパピローマウイルスタイプ57、そのdnaおよびそれによってコードされるタンパク質Info
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- JPH02150278A JPH02150278A JP1204535A JP20453589A JPH02150278A JP H02150278 A JPH02150278 A JP H02150278A JP 1204535 A JP1204535 A JP 1204535A JP 20453589 A JP20453589 A JP 20453589A JP H02150278 A JPH02150278 A JP H02150278A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
ヒトパピローマ(乳頭腫)ウィルス(HP V )は、
50種以上の異なるタイプのグループを形成する。HP
Vは、良性(床、外陰部領域の温床)および悪性(皮膚
および腟の癌腫)上皮腫瘍に関連して見出されてきた。
50種以上の異なるタイプのグループを形成する。HP
Vは、良性(床、外陰部領域の温床)および悪性(皮膚
および腟の癌腫)上皮腫瘍に関連して見出されてきた。
パピローマウィルスは、培養では増殖できない。したが
って、遺伝子操作の方法が、ヒトパピローマウィルスタ
イプ57DNA (I(PV57DNA)の診断補助物
としておよび発現産生物の獲得のための使用、抗原とし
てのそれらの使用、抗体の単離、および対応する診断補
助物および治療剤の調製のために、要求される。
って、遺伝子操作の方法が、ヒトパピローマウィルスタ
イプ57DNA (I(PV57DNA)の診断補助物
としておよび発現産生物の獲得のための使用、抗原とし
てのそれらの使用、抗体の単離、および対応する診断補
助物および治療剤の調製のために、要求される。
本発明は、HPV57の初めての単離、そのゲノムの部
分的特徴付け、およびpUc19におけるクローニング
に基づいている。これによってζHPV57に関連のあ
る腫瘍(口腔、生殖器部分および皮膚の腫瘍)の診断の
道が開ける。
分的特徴付け、およびpUc19におけるクローニング
に基づいている。これによってζHPV57に関連のあ
る腫瘍(口腔、生殖器部分および皮膚の腫瘍)の診断の
道が開ける。
本発明は、特許請求の範囲に定義される通りである。本
発明のさらなる態様は、以下に詳述される通りである。
発明のさらなる態様は、以下に詳述される通りである。
f(P V 57のクローニングによって、56の他の
HP Vとの比較が可能になった。HPV2およびHP
V 27はきわめて密接に関連していて、γα相での
ハイブリダイゼーションでは、それぞれ17%および2
5%の相同性を示した。HPV57の、HPV2および
HPV27との共直線性(co! 1nearity)
を決定して(第1図)、制限酵素切断部位の物理的ゲノ
ム地図(第2図)を構築した。
HP Vとの比較が可能になった。HPV2およびHP
V 27はきわめて密接に関連していて、γα相での
ハイブリダイゼーションでは、それぞれ17%および2
5%の相同性を示した。HPV57の、HPV2および
HPV27との共直線性(co! 1nearity)
を決定して(第1図)、制限酵素切断部位の物理的ゲノ
ム地図(第2図)を構築した。
これは、腫瘍(生殖器および皮膚の腫瘍)、とくに頭の
腫瘍、をHP V 57の存在について試験するための
道を開き、また適切な場合には、HPV57タンパク質
に対する抗体を介しての治療的アプローチを可能にした
。
腫瘍、をHP V 57の存在について試験するための
道を開き、また適切な場合には、HPV57タンパク質
に対する抗体を介しての治療的アプローチを可能にした
。
1、 エビソームHPV57DNAの単離高分子量の
DNAを記載の用法(Gissmannら=(19B2
)、Int、 j、 Cancer 29.143−[
46)にて上顎前壁(maxillary 5inus
)の反転させた乳頭腫(1nverted papi
l Ioma)から単離した。
DNAを記載の用法(Gissmannら=(19B2
)、Int、 j、 Cancer 29.143−[
46)にて上顎前壁(maxillary 5inus
)の反転させた乳頭腫(1nverted papi
l Ioma)から単離した。
2、1ラスミドpUc19におけるH P V 57の
クローニング 既y口のプラスミドp U C19(Yanish−P
erronら: (1985)、Gene 33.11
3−119)をクローニングベクターとして選択した。
クローニング 既y口のプラスミドp U C19(Yanish−P
erronら: (1985)、Gene 33.11
3−119)をクローニングベクターとして選択した。
HPV57を含む細胞性二本鎖DNAをEcoRIで切
断して、次いで、p UC19(Maniatisら:
(19B2)、MolecularCIoning:
A Laboratory Manua!、
Co1d Springllarbo「Labor
atory Press、、New York)にクロ
ーニングした。組換えクローンをβ−ガラクトシダーゼ
試験(Messingら二(1977)、Proc、
Nat、 Acad。
断して、次いで、p UC19(Maniatisら:
(19B2)、MolecularCIoning:
A Laboratory Manua!、
Co1d Springllarbo「Labor
atory Press、、New York)にクロ
ーニングした。組換えクローンをβ−ガラクトシダーゼ
試験(Messingら二(1977)、Proc、
Nat、 Acad。
Sci、 USA 75.3641−3646)にて同
定して、直ちにDNAを抽出して、連結されたDNAフ
ラグメントを分析した(H,L、 Birnboimお
よびJ、 Doly:(1979)、NIJCl、Ac
1ds、Res、7.1513−1523)。
定して、直ちにDNAを抽出して、連結されたDNAフ
ラグメントを分析した(H,L、 Birnboimお
よびJ、 Doly:(1979)、NIJCl、Ac
1ds、Res、7.1513−1523)。
3 、 HP V 57の物理的ゲノム地図Eco
RI切断によってベクターから取り出したHPV57D
NAを、制限エンドヌクレアーゼで消化して、対応する
物理的ゲノム地図を一般に既知の方法にて構築した。そ
の結果は、第2図に要約する通りである。ここで、唯一
のEc oR1切断部位を用いてHPV57分子を直線
化した。
RI切断によってベクターから取り出したHPV57D
NAを、制限エンドヌクレアーゼで消化して、対応する
物理的ゲノム地図を一般に既知の方法にて構築した。そ
の結果は、第2図に要約する通りである。ここで、唯一
のEc oR1切断部位を用いてHPV57分子を直線
化した。
表は、各々の制限酵素フラグメントの長さを示すもので
ある。
ある。
−〇 〇
= へ 〜
匡 ■ L) 0 LLI Ll−〇4、 他の
HPVとの比較 HPV57ゲノムのDNAを、種々の程度の緊縮度(s
tr i ngency)下においてのDNA/DNA
ハイブリダイゼーションによって、56種の人手可能な
HPVタイプのD N A (E、 M、 5outh
ern(+975)、J、 No1. Biol、 9
8.5O−517)と比較した。
HPVとの比較 HPV57ゲノムのDNAを、種々の程度の緊縮度(s
tr i ngency)下においてのDNA/DNA
ハイブリダイゼーションによって、56種の人手可能な
HPVタイプのD N A (E、 M、 5outh
ern(+975)、J、 No1. Biol、 9
8.5O−517)と比較した。
高い緊縮条件下(融解温度Tm=−20℃)で、HP
V 57 D N AはHPV2およびHPV27とハ
イブリダイズする。
V 57 D N AはHPV2およびHPV27とハ
イブリダイズする。
ハイブリダイゼーション実験を基にしたHPV18との
共直線性(colinearity)は、第1図に示す
通りである。
共直線性(colinearity)は、第1図に示す
通りである。
既知のHPV 18DNA配列(Coleら:(198
7)、J、 Mo1. Biol、 193.59
9−608)から、HPV57の転写解読枠(open
reading frame)を想定することが可能
で、したがって、−船釣な方法にてサブクローニングし
てから原核細胞または真核細胞発現系(system)
で発現することによって、HPV57タンパク質を得る
ことができる。
7)、J、 Mo1. Biol、 193.59
9−608)から、HPV57の転写解読枠(open
reading frame)を想定することが可能
で、したがって、−船釣な方法にてサブクローニングし
てから原核細胞または真核細胞発現系(system)
で発現することによって、HPV57タンパク質を得る
ことができる。
HPV57を含むptJc19プラスミドI) N八は
、1988年6月13日にDeutscl+e Sam
mlungfffr Mikroorganismen
(German MicroorganismCol
1ection)にブダペスト条約に従って寄託され
た。その寄託番号は05M4694である。
、1988年6月13日にDeutscl+e Sam
mlungfffr Mikroorganismen
(German MicroorganismCol
1ection)にブダペスト条約に従って寄託され
た。その寄託番号は05M4694である。
第1図は、HPV57のHPV2および27との共直線
性を図示する、説明図である。 第2図は、HP V 57ゲノムの制限酵素切断地図を
図示する、説明図である。環状ゲノムをそのEcoRI
切断部位を介してクローニングした。 図中、フラグメントを表す文字に続く数字は、塩基対(
+) l) )の長さを示す。一つの切断部位を有する
制限酵素は、Xho1、HindlIおよびSac 1
である。制限酵素Xba I、5alI、BamHI、
Hi ndlIIおよびHI) a Iは、切断しな
い。四つの500 b pの長ざのPstlフラグメン
トの正確な位置は決定されなかった。
性を図示する、説明図である。 第2図は、HP V 57ゲノムの制限酵素切断地図を
図示する、説明図である。環状ゲノムをそのEcoRI
切断部位を介してクローニングした。 図中、フラグメントを表す文字に続く数字は、塩基対(
+) l) )の長さを示す。一つの切断部位を有する
制限酵素は、Xho1、HindlIおよびSac 1
である。制限酵素Xba I、5alI、BamHI、
Hi ndlIIおよびHI) a Iは、切断しな
い。四つの500 b pの長ざのPstlフラグメン
トの正確な位置は決定されなかった。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、変異体(variants)および突然変異体を包
含する、単離ヒトパピローマウイルス57。 2、ヒトパピローマウイルス57タンパク質をコードす
る、変異体および突然変異体を包含する、単離ヒトパピ
ローマウイルス57DNA。 3、請求項2に記載のヒトパピローマウイルス57DN
Aから遺伝子操作によって得られる発現産生物タンパク
質。 4、請求項3に記載の発現産生物タンパク質の、抗体調
製のための使用。 5、ヒトパピローマウイルス57の発現産生物に対する
、モノクローナルおよびポリクローナル抗体。 6、請求項5に記載の抗体を含んでなる、診断補助物。 7、バイオブシーまたは塗抹材料を請求項6に記載の診
断補助物と接触させることからなる、ヒトパピローマウ
イルス57感染の診断法。 8、請求項3に記載のタンパク質をコードするDNA、
またはこのDNAの部分、の、遺伝子操作によるこれら
タンパク質の調製のための、使用。 9、請求項3に記載のタンパク質をコードするDNA、
またはこのDNAの部分、の、ヒトパピローマウイルス
57感染の診断のための、使用。 10、請求項3に記載のタンパク質をコードするDNA
、またはこのDNAの部分、を含んでなる診断補助物。 11、検査されるRNAまたはDNAを、請求項3に記
載のタンパク質、またはこれらタンパク質の部分、をコ
ードするDNAとハイブリダイズさせることからなる、
ヒトパピローマウイルス57感染の診断法。 12、請求項3に記載の産生物の、ワクチンおよび治療
のための使用。 13、請求項1に記載の産生物の、予防および治療のた
めの使用。
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DE3826793.4 | 1988-08-06 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH02150278A true JPH02150278A (ja) | 1990-06-08 |
JP3016794B2 JP3016794B2 (ja) | 2000-03-06 |
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Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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EP (1) | EP0354440B1 (ja) |
JP (1) | JP3016794B2 (ja) |
AT (1) | ATE124991T1 (ja) |
AU (1) | AU623424B2 (ja) |
CA (1) | CA1339268C (ja) |
DE (2) | DE3826793A1 (ja) |
ES (1) | ES2076178T3 (ja) |
FI (1) | FI98467C (ja) |
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US5447839A (en) * | 1988-09-09 | 1995-09-05 | Hoffmann-La Roche Inc. | Detection of human papillomavirus by the polymerase chain reaction |
US5639871A (en) * | 1988-09-09 | 1997-06-17 | Roche Molecular Systems, Inc. | Detection of human papillomavirus by the polymerase chain reaction |
AU778737B2 (en) * | 1999-04-14 | 2004-12-16 | Musc Foundation For Research Development | Tissue-specific and pathogen-specific toxic agents and ribozymes |
EP1539245A2 (en) * | 2002-06-26 | 2005-06-15 | The Penn State Research Foundation | Methods and materials for treating human papillomavirus infections |
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Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CA1337336C (en) * | 1987-05-26 | 1995-10-17 | Attila T. Lorincz | Human papillomavirus nucleic acid hybridization probes and methods for employing the same |
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