JPH02144A - デカプレニル置換アミノ酸誘導体および抗ウイルス剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なデカプレニル置換アミノ酸誘導体および
その酸付加塩ならびにそれらを活性成分として含有する
抗ウィルス剤に関する。これらの化合物はを推動物のウ
ィルス感染を抑制するのに有用である。

従来、を推動物を宿主とするウィルスによって惹起され
る疾病を予防または緩解する効果を有するものと判定さ
れた物質、あるいは有意に抗体活性を増大させ、且つ症
状を抑えることができるものと認められた物質が知られ
ている。

報告されている抗ウイルス性物質はインターフェロン、
インターフェロンを誘起せしめる物質、すなわち誘起剤
（インターフェロンインデュサ−）、そしてアマンタジ
ン塩酸塩またはメチサゾンのようにウィルス増殖に対し
て直接作用する合成物質である。インターフェロンはを
椎動物細胞がウィルスの感染を受けた場合に細胞自体が
つくり出す抗ウイルス性糖蛋白であって、広範囲のウィ
ルスに対して有効である。ウィルス感染以外の方法でを
椎動物にインターフェロンを誘起させるインデューサー
としては、ある種のバクテリアファージの二重鎖リボ核
酸のような天然高分子物質、あるいはポリイノシン酸−
ポリシチジル酸で代表される二重鎖リポ核酸のような合
成高分子物質、さらにチロロンのような低分子インデュ
ーサーが知られている。

しかしながら、インターフェロンはその精製において問
題があり、実際上経済的な生産方法はいまだに開発され
ていない。また従来のインターフェロンインデューサー
は主としてその毒性のために実用化されていない。今日
市販されているウィルス増殖に対して直接作用する合成
抗ウィルス剤は、それによって治療できるウィルス感染
症の範囲がどちらかといえば狭いので新しい合成抗ウィ
ルス剤の出現が常に望まれている。このようなことから
本発明者らは高力価のインターフェロンを産生じ、しか
も動物レベルで抗ウィルス作用を有する化合物を見い出
すへ（種々研究を重ねた結果、インターフェロン誘起能
を示し、かつ動物試験において優れた抗ウィルス作用お
よび抗腫瘍作用を有し、従って医薬として期待される後
記一般式Ｉで表わされる新規なデカプレニル置換アミノ
酸誘導体およびその酸付加塩を得ることに成功した。

本発明に係る新規なデカプレニル置換アミノ酸誘導体は
一般式 （式中人は−ＮＨ−の２価の基を示し、セしてＲはアラ
ニン、フェニルアラニンまたはアラニルグルタ５ン酸の
残基を示す）で表わされる。一般式（１）で表わされる
デカプレニル置換アミノ酸誘導体およびその酸付加塩を
製造するには、式Ｒはメチルまたはベンジルでありそし
てＲ′は低級アルキルを意味する。

（ん　カルボキシル基活性化法 １）酸塩化物法 で表わされるデカプレニル酢酸あるいは式で表わされる
デカプレニルアミンに既知のベプチＰ結合形成反応を適
用することにより製造することができる。適用されるペ
プチド結合形成１１）アジＰ法 エステル化　　　　　　　　　　　ＮＨ２ＮＨ２Ｑ−Ｃ
Ｈ２ＣＯＯＨＱ−ＣＨ２−ＣＯＯＲ’Ｎ０５ Ｑ−ＣＨ２−ＣＯＮＨＮＨ２−一→Ｑ−ＣＨ２−ＣＯＮ
３記においてＱはＨ＋ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２片で
あり、１１１）混合酸無水物法 Ｒ ０Ｈ Ｑ−ＣＨ２−Ｃｏ−ｂＴＨ−ＣＨ−ＣＯＯＲ’−一−−
−−−−伽Ｑ−ＣＨ２−ＣＯ４ＨＲ＼ −ＣＨ−Ｃ００Ｈ ＩＶ）　　カルボジイミド法 ０Ｈ ＣＯＯＲ’　−ｍ−→Ｑ−ＣＨ２ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ−Ｃ
ＯＯＨ（ＤＣＣ＝Ｎ、Ｎ’−ジシクロへキシルカルボジ
イミド）■）活性１７ｆ２法　　　　　□ ＮＨ２−ＣＨ−Ｃｏ○Ｒ′ Ｑ−ＣＨ２−Ｃ’○０Ｈ−−→Ｑ−ＣＨ２−ＣＯ−ＰＱ
−ＣＨ２−Ｃｏ−ＮＨ−Ｃ’Ｈ−ＣＯＯＲ’　→Ｑ−Ｃ
Ｈ２Ｃｏ−ＮＨ−ＣＨ−ＣＯＯＨこの中の一つを具体的
に云えば、デカプレニル酢酸とＮ−保護アミノ酸または
デカプレニルアミンとアミノ酸エステルとを脱水剤の存
在下に反応させることによって製造される。この反応に
使用する脱水剤としてはＮ、Ｎ’−ジシクロへキシルカ
ルボジイミド、１−シクロヘキシル−３−（２−モルホ
リノエチル）カルボジイミｒ１１−シクロヘキシル−３
−（４−ジエチルアミノシクロヘキシル）カルボジイミ
Ｐ、１−エチル−３−（３−ジエチルアミンゾロビル）
カルボジイミド等が挙げられる。反応に用いる有機溶媒
としてはアセトニトリルまたは塩化メチレンが好ましい
。反応温度は、０〜室温が最適である。反応後さらに塩
基（例えば水酸化カリウムまたは水酸化ナトリウム）の
存在下でエステルをけん化した後、抽出、濃縮、カラム
クロマトグラフィー、結晶化等の通常の単離精製手段に
よって所望のデカプレニル置換アミノ酸誘導体を製造す
ることができる。

次に本発明のデカプレニル置換アミノ酸誘導体の製造例
を示す。

製造例　Ｎ−デカプレニル−ＤＬ−アラニンアミＰ塩酸
塩 Ｎ−）リフルオロアセチル−ＤＬ−アラニンＺ１ｔ１お
よび、Ｎ、Ｎ−・ジシクロへキシルカーボ・ジイミｒ９
ｏｆを含有する塩化メチレン溶液５〇−を０℃に冷却し
ながらデカプレニルアミン２０ｔを加え、１時間攪拌し
、さらに、室温で一夜攪拌する。析出した・クシクロヘ
キシル尿素の結晶を戸別し、そしてテ液を減圧下に濃縮
する。

濃縮物２Ｂ、９ｆをシリカゲル３００ｔを充填したクロ
マトカラム上でクロロホルム−酢酸エチルの混液を用い
て処理して油状物質２６．：ｌを得る。

次に、この油状物質を１０％水酸化カリウムのエタノー
ル溶液１００ｄ加え、１時間加熱還流する。反応液を冷
却後、水２００４を加え、そしてイソプロピルエーテル
で抽出する。抽出液を水および飽和食塩水で洗い、無水
硫酸す）　ＩＪウムで乾燥しそして減圧下に濃縮する。

この濃縮物２４．３ｆをシリカゲル２５０ｔを充填した
クロマトカラム上でクロロホルム−メタノールの混液を
用いて処理して油状物２α３ｆを得る。油状物をアセト
ン１００−に溶解し、塩化水素−エーテル溶液を加えて
弱酸性にし、２時間室温に放置する。析出した結晶を戸
別および乾燥して式で表わされるＮ　−ＤＬ−アラニル
デカプレニルアミン塩酸塩２０．１　ｆを得る。このも
のの物性値を示せば下記のとおりである。

融　　点　　４５，１℃ Ｎ、Ｍ、Ｒ，（ＣＤＣｌ２中、δ値）（遊離塩基）ｙ、
０−４５　　　（ＩＨ，ｂｒ、Ｄ２０消失）４．８３〜
５．４５　　（１０Ｈ，ｂｒ）５．６５〜４．００　　
　（ＩＨ，ｂｒ）１．９８　　　　　　（４０Ｈ，ｂｒ
）１．５８　　　　　　（３６Ｈ，ｂｒ）元素分析値（
ＣｓｏＨｓｓＮ−ＨＣＬ１１２　Ｈ２Ｏとして）計算値
　　　　実測値 Ｃ（ホ）　　　８α５４　　　８０．４７Ｈ（％　　　
１ｔ７６　　　１１．６５Ｈ％　　　　１．８８　　　
　１．８１以下の構造式中、Ｄはデカゾレニル基、を示
す。

次に本発明のイソプレニルアミン誘導体の生理学的効果
を詳細に説明する。

（１）　　ワクシニア・ウィルス感染マウスに対する効
果体重１ｓｔ前後のＩＣＲ雌性マウス１群１０匹にワク
シニア・ウィルスの希釈液０．１　ａｌを尾の基部から
２ｃｒｎのところに静脈内注射し、接種後８日目に尾の
表面に出現した病変を１％−フルオレセイン−０，５％
メチレンブルー混液で染色して数えた。供試化合物は界
面活性剤を用いて懸濁液としてウィルス接種２４時間前
にｓｏｑ／に！９で腹腔内投与し、界面活性剤のみの投
与群に対する病変数との対比により抗ウィルス作用を評
価した。各供試化合物の阻止率を第１表に示す。

第１表 Ｄ−ＮＨ−ＤＬ−Ａｔ＆−ＨｃＬ　　　　　　　　２８
．７（２）　　　毒　　性 ５０％致死量は２０〜２５２のｄｄＹ雄性マウスを使用
して静脈内投与により求めた。その結果を第２表に示す
。

／ 第２表 第３表 （３）　　ヒトインターフェロン誘発作用（ｉｎ　ｖｉ
ｔｒｏ）ヒト由来正常二倍体細胞（繊維芽様細胞）に供
試化合物の２５　ｎ　ｍｏｌ濃度の懸濁液（エタノール
溶液とじＰＢＳ（−）で希釈）を作用させ、　ｇｄｗａ
ｒｄＡ　Ｈａｖｅ１１氏等の方法に準拠してインターフ
ェロンを誘発させた。Ｈ，ｌ５ｈｉｔｓｕｋａ氏等のラ
ジオアイソトープマイクロアクセ−法を用いて５Ｈ−ウ
リ・ジン取込阻害率で誘発されたインターフェロンを測
定した。各供試化合物の３Ｈ−ウリジン取込阻害率を第
３表に示す。

以上の試験結果から明らかなように本発明の活性成分は
生体内でのインターフェロン誘起能を有するのみならず
、毒性が低く且つ優れた抗ウィルス作用を有する。また
、当該活性成分はインターフェロン活性と個々の抗ウィ
ルス作用とはかならずしも相関しないことから、当該活
性成分の動物レベルでの抗ウィルス作用は必ずしもイン
ターフェロンのみならず、それ以外の宿主介在性の防禦
メカニズムが関与している可能性も考えられる。ウィル
スに起因する疾病としては、例えばヒトでは単純胞疹な
とのヘルイス感染症、インフルエンザはしかなどの多数
の症状が知られている。したがって、本発明の活／ 性成分をウィルス感染予防および治療に対して使用する
場合は、経口、経気道、ならびに皮下、筋肉および静脈
注射等の方法で投与される。投与量は患者の年令、症状
および投与経路などの条件に応じて０．５〜２０（勺の
範囲、好ましくは３〜５　ｑ７ｋｇの範囲で１日数回（
２〜４回）使用される。

本発明の活性成分は任意の慣用方法で投与用組成物例え
ば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、粉末剤、経口用液剤、眼
科用液剤、坐剤、軟膏剤、注射剤等に調製することがで
きる。

本発明の活性成分を経口投与する場合には錠剤、カプセ
ル剤、顆粒剤または粉末剤とすればよい。これら経口投
与用固形剤は通常用いられる賦形剤、例えば無水けい酸
、メタけい酸アルミン酸マグネシウム、合成けい酸アル
ミニウム、乳糖、砂糖、とうもろこし殿粉、微結晶セル
ロース、ヒドロキシプロピル−スターチまたはグリシン
、結合剤例えばアラビヤがム、ゼラチン、トラガント、
ヒドロキシプロピルセルロースまたはポリビニルピロリ
ドン、潤滑剤例えばステアリン酸マグネシウム、タルク
またはシリカ、崩壊剤例えば馬鈴薯殿粉、カルボキシメ
チルセルロースカルシウム、あるいは湿潤剤例えばポリ
エチレングリコール、ソルビタンモノオレート、ポリオ
キシエチレン硬化とマシ油、ラウリル硫酸ナトリウム等
を含有してもよい。また特に、ソフトカプセル剤とする
には、ポリエチレングリコールあるいは通常用いられる
油脂性基剤であるデマ油、落花生油、胚芽油、ミグジオ
ール０等の分別ココナツツ油等に溶解または懸濁させて
製造することができる。錠剤、および顆粒剤は常法に従
ってコーティングしてもよい。

経口用液体製剤は水性または油性乳濁剤溶液、シロップ
剤等にすればよく、あるいは使用する前に適当なビヒク
ルで再溶解し得る乾燥生成物にしてもよい。このような
液体製剤は普通に用いられる添加剤例えば乳化補助剤で
あるソルビットシロップ、メチルセルロース、ゼラチン
、ヒＰロキシエチルセルロースなど、マタ乳化剤例工ば
レシチン、ソルビタンモノオレート、ポリオキシエチレ
ン硬化ヒマシ油、非水性ビヒクル例えば分別ココナツツ
油、アーモンＰ油、落花生油、防腐剤例えばｐ−ヒＰロ
キシ安息香酸メチル、ｐ−ヒＰロキシ安息香酸ゾロビル
またはソルビン酸を添加してもよい。さらにまたこれら
の経口投与用製剤には必要に応じて保存剤、安定化剤な
どを含有せしめてもよい。

また本発明の活性成分を非経口的な生薬の形態で投与す
る場合はカカオ脂、ウイテプゾール［有］等の親油性基
剤、ポリエチレングリコール等の親水性基剤等を用いて
通常の方法により製造するか、またはポリエチレングリ
コール、コ０マ油、落花生油、胚芽油、分別ココナツツ
油等の混合液をゼラチンシートに包んで直腸カプセルと
して用いることができる。直腸カプセルは必要に応じて
ワックス状物質でコーティングしてもよ〜Ａ０ 次にこの化合物を注射剤に用いる場合には油溶液、乳化
液、水溶液のような形態にすればよく、これらの溶剤は
通常用いられる乳化剤、安定化剤などを含有させてもよ
い。

これら組成物は投与方法により当該化合物を１％以上、
好ましくは５％〜５０％を含有させることができる。

次に本発明の製剤例を示す。

製剤例１　経日用硬カプセル剤 Ｎ−ＤＬ−７ラニルデカプレニルアミン塩酸塩２５２お
よびポリオキシエチレンヒマシ油７．５２をアセトンに
溶解し、次に無水けい酸２５９を混合する。アセトンを
蒸発した後さらにカルボキシ１メチルセルロースカルシ
ウムｓｒ、と５もろこし殿粉５？、ヒＰロキシゾロビル
セルロース７．５　？および微結晶セルロース２０ｆを
混合し、５ａａｔの水を加えて練合しそして粒状化する
。これを４２４メツシユ（Ｂ、Ｓ、）のスクリーンを付
した造粒機（エツクペレツター・不二）ぞウダル社製）
にて造粒した。顆粒は水分５％以下に乾燥しそして＆１
６メツシユ（Ｂ、８．）のふるいでふるった。次にこの
粒子をカプセル充てん機で１カプセル当り１９０ｍ＋９
１Ｃ充填した。

製剤例２　経口用軟カプセル剤 Ｎ　−ＤＬ−アラニルデカプレニルアミン塩酸塩５０？
およびポリエチレングリコール（マクロゴール−４００
）　１３０　ｒを混合して均一な溶液とする。別にゼラ
チン９５？、グリセリン１９ｔ、Ｄ−ソルビトール１０
？、ノｅラオキシ安息香酸エチル０．４？、パラオキシ
安息香酸プロピル０．２２および酸化チタン０．４９の
組成からなるゼラチン溶液を調製しこれをカプセル皮膜
剤として手動式平板打法により内容物１８０Ｗ９を含有
するソフトカプセルを製造した。

製剤例３　注射剤 Ｎ　−ＤＬ−アラニルデカプレニルアミン塩酸塩１、Ｏ
ｆ、ニラコールＨＣＯ６０（Ｎｉｋｋｏｌ　ＨＣＯ６０
（商品名）〕（水素添加ヒマシ油ポリオキシエチレン−
６０モル−エーテル）５、Ｏｆ、ｆロピレングリコール
２０ｔ、グリセロール１０ｙ、エチルアルコール５．Ｏ
ｆを混合し、これに蒸留水１００−を加えて攪拌する。

本溶液を無菌操作によりアンプル１．４−に分注して蔵
開する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ａは−ＮＨ−の２価の基を示し、Ｒはアラニン、
   フェニルアラニンまたはアラニルグルタミン酸の残基を
   示す）で表わされるデカプレニル置換アミノ酸誘導体お
   よびその酸付加塩。 ２）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ａは−ＮＨ−の２価の基を示し、Ｒはアラニン、
   フェニルアラニンまたはアラニルグルタミン酸の残基を
   示す）で表わされるデカプレニル置換アミノ酸誘導体お
   よびその酸付加塩を活性成分として含有する抗ウィルス
   剤。