JPH01313500A - 抗凝固剤ペプチドアルコール類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は抗凝固剤として有用な新規なベブチ］・アルコ
ールに関する。

抗凝固剤は、薬理学的処理、例えば急性の深部静脈血栓
、肺塞栓症、急性の四肢の動脈塞栓、心筋梗塞、及び伝
染性静脈内凝固の治療に有用である。抗凝固剤の予防的
な投与は、リウマチ性又は動脈硬化性の心臓病を有する
患者の塞栓症の再発の防止及び手術によるある種の血栓
塞栓合併症の防止をすると信しられている。抗凝固剤の
投与は又冠状動脈及び脳血管病の治療に有用であること
が示されている。静脈面栓、特に心臓筋肉及び脳に供給
している動脈中のものは死亡の主要な原因である。

〔従来の技術及び発明が解決しようとする課題〕ヒルデ
イン（■１１・旧ｆｉｎ）は、蛭の唾液腺から単離され
た６５残基のポリペプチドである。これは抗凝固剤であ
って、それはトロンヒンに特異的な阻害剤である。これ
は非常に強力であるが蛭抽出物から単離されたヒルデイ
ンの臨床的な使用は、限られた量、高価であること、及
びこの寸法のあらゆる外来の蛋白質の投与に続いて一般
的におきるアレルギー反応のために出来そうもないこと
である。

〔課題を解決する手段〕

本発明者は、抗凝固活性に対し少なくとも部分的に寄与
しているヒルデインの特異的な領域を発見した。この領
域は化学的に合成され、そしてその類似体のあるものは
トロンビンの認識場所に結合するように見えるが空間的
に分離されている酵素開裂場所には結合しないよってあ
る。この合成ペプチドの結合は、フィブリノーゲンがト
ロンビンの認識場所に結合することを競走的に防止する
。

このトロンビンはフィブリンの生産及び凝塊形成に必要
なものである。本発明者は本発明に於いてこのペプチド
のある種の還元された誘導体を製造した。これらの新し
い誘導体のカルボン酸官能基は対応するアルコール官能
基に還元されている。

本発明のペプチドアルコールは、かなりの抗凝固活性を
有し、トロンビンの開裂場所に結合することなく認識場
所のみに結合ずろその並外れた能力は、化学的に興味が
有り、抗凝固療法に対し治療上有意義な補助を提供する
ものである。更に、アルコール官能基の存在は、強めら
れた効力及び作用の持続の延長を与えるものである。

式 ％式％ 〔式中 Ｘは水素、１〜６個の炭素原子の１又は２個のアルキル
基、又は２〜１０個の炭素原子の１又は２個のアシル基
、カルホベンシロキシ又はｔ−ブチロキシカルボニルか
ら選はれるアミノ末端残基てあり、Ａ１は結合であるか
又は任意のアミノ酸の１〜１１の残基を含有しているベ
アチト断片てあり、Ａ２は、Ｐ　ｌ＋　ｅ　、　Ｓ　Ｌ
ｌ　ｂ　Ｐ　ｔ＋　ｅ、β−（２−乃び３−チエニル）
アラニン、β−（２−及び３−フラニル）アラニン、β
−（２−、３−、及び４−ピリジル）アラニン、β−（
ヘンソチェニルー２−及び３−イル）アラニン、β−（
ｌ−及び２−ナフチル）アラニン、Ｔｙｒ、又はＴ１・
ｐであり、Ａ３はＧ　ｌ　ｕ又はＡｓｐであり、 Ａ４は任意のアミノ酸であり、 Ａ５はＩｌｅ、νａ１、Ｌ　ｅ　ｕ、Ｎｌｅ、叉はＰｈ
ｅてあり、Ａ６はＰｒｏ、Ｉｆ　ｙ　＋３．３，４−デ
ヒドロＰｒｏ、チアソリシン−４−カルホキシレー１−
１Ｓａｒ、ＮＭｅＰｇｌ、叉はＤ−Ａｌａであり、 Ａ７は１壬意のアミノ酸であり、 Ａ８は任意のアミノ酸であり、 Ａ９はＴｙｒ、Ｎ　ｅ　ｔ、、Ｔｒｐ、′Ｐｈｅ、　　
Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、　　Ｉｌｅ、　　Ｖａｌ、Ｃｈａ及び
Ｐｌ・Ｏがら選ばれる親油性アミノ酸であるか又はこれ
らの親油性アミノ酸の少なくとも一つを含有しているジ
ペプチドであり、 Ａ、。−オールは、炭素末端アミノ酸がそのアルコール
誘導体に還元されている０〜５つの任意のアミノ酸残基
を含有している還元されたペプチド断片である〕のペプ
チド誘導体は有用な抗凝固剤である。

次の一般的なアミノ酸の短縮形がこの明！Ｓ書を通じて
使用される。

Ａｃ−アセチル Ａｌａ（又はＡ）−アラニン ＤＡ　Ｉ　ａ（又はａ）−Ｄ−アラニンＡｒｇ（又はＲ
）−アルキニン Ａ　ｓ　ｎ　（又はＮ）−アスパラキンＡｓｐ（又はＤ
）−アスパラキン酸 ｐｃｌＰｈｅ−パラクロロフェニルアラニンＣｈａ−シ
クロへキシルアラニン Ｃｙｓ（又はＣ）−システィン ３．４−デヒドロＰｒｏ−３，４−デヒトロブｌコリン
Ｇｌ！／（又はＧ）−グリシン Ｇ　Ｉ　ｕ　（又はＥ）−グルタミン酸Ｄ　−Ｇ　ｌ　
ｕ　（又はｅ）−〇−グルタミン酸Ｇｌｎ（叉は０）−
グルタミン Ｇ　ｌ　＋、−グルダリル Ｈｉｓ（叉はＨ）−ヒスチジン ）１ｙｐ−ヒドロキシプロリン Ｉｌｅ（叉は１）−イソロイシン Ｌｅｕ（又はし）−ロイシン Ｌｙｓ（又はＫ）−リジン Ｍａｌ−マレイル Ｎｅｔ（又はＭ）−メチオニン ＮＭｅＰｇｌ−Ｎ−メチルフェニルグリシンＮｐａ−β
−（ナフチル）アラニン ｐＮＯｐＰｈｅ−バラニトロフェニルアラニンＮ１ｅ−
ノルロイシン ０ｒｎ−オルニチン ｐ　Ｓ　ｕ　ｂ　Ｐ　ｈ　ｅ−パラ置換フェニルアラニ
ンＰｌ＋ｅ（又はＦ）−フェニルアラニンＰｇｌ−フェ
ニルグリシン Ｐｒｏ（又はＰ）−プロリン ５ａｒ−サルコシン（Ｎ−メチルグリシン）Ｓｅｒ（又
はＳ）−セリン Ｓ　ｕ　ｂ　Ｐ　ｈ　ｅ−オルソ、メタ、又はパラ、モ
ノ−又はシー置換フェニルアラニン Ｓ　ｕ　ｃ−サクシニル Ｔ　ｈ　ｒ　（又はＴ）−スレオニン Ｔ１・１）（又はり）−トリプトファンＴｙｒ（又はｙ
）−チロシン Ｖａｌ（又はＶ）−バリン 「炭素末端アミノ酸がそのアルコール誘導体に還元され
ている任意のアミノ酸の１〜５個の残基を含有する還元
されたペプチド断片」という表現は、本発明者は炭素末
端アミノ酸のカルボン酸基の炭素原子がヒドロキシメチ
ル基、−（＋］Ｉ２）０）１と置き換えられていること
を意図している。本発明のポリペプチドのＡ，。基は、
５個までのアミノ酸を含有し得るが炭素末端アミノ酸の
みが対応するアルコール誘導体に還元されていることを
意図している。

事実ペプチド結合が不可能となるから炭素末端アミノ酸
を除いて任意の曲のものがそのように還元されるのは可
能ではない。もちろん、Ａ，。が単一のアミノ酸である
場合には、この単一の酸はそのアルコール誘導体に還元
されている。そのような還元されたアミノ酸の構造式は
式 で表わされ得る。式中Ｒは各アミノ酸の特徴的な基であ
る。例えば、Ｒはグリシンの場合は水素であり、アラニ
ンの場合はメチルてあり、バリンの場合はイソプロピル
であり、フェニルアラニンのときはＪ＼ンシルてあり、
システィンのときはメルカプトメチルである。プロリン
の還元された形態は次の構造式のアルコールである。

ここて、そのアルコール誘導体に還元されたアミノ酸は
「オール」が後に続く三つの文字のコート（又は他の短
縮形）又は一つの文字のコードのいずれかを用いて短縮
される。例えばｒ　Ａｌａ−オール」又は「Ａ−オール
」はカルボン酸部分が対応するアルコールに還元された
アラニンを意味し、ｒＬｅｕ−オール」又は「Ｌ−オー
ル」は、カルボン酸部分が対応するアルコールに還元さ
れているロイシンを意味する。

アルキル基及びアルコキシ基のアルキル部分は直鎖、分
枝鎖、又は環状のアルキル基を含むものとし、例えば、
メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イ
ソブチル、第三ブチル、ペンチル、イソペンチル、第二
ペンチル、シクロペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、
シクロｌ−キシル及びシクロペンチルメチルである。２
〜ｌＯ個の炭素原子のアシル基は、直鎖、分枝鎖、環状
、飽和及び不飽和の、基当たり１〜２個のカルボニル基
を有するアシル基を含むものとし、例えば、アセチル、
ヘンソイル、サクシニル、マレイル、及びグルタリルで
ある。ハロゲン基はフルオロ、クロロ、アロモ又はヨー
ド基である。

「任意のアミノ酸」という用語は本明細書ではアミノ置
換基を有する任意のカルボン酸を含むものとは意図せず
、ポリペプチド誘導体の技術の当業者に一般的に使用さ
れるものとして使用され、天然のアミノ酸並ひに他の「
非蛋白」α−アミノ酸であって、天然のペプチドの合成
類似体を製造するときにペプチド化学技術で一般的に使
用されるものである。天然のアミノ酸はグリシン、アラ
ニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、メチ
オニン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、ト
リプトファン、システィン、プロリン、ヒスチジン、ア
スパラキン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミ
ン、アルギニン、オルニチン、及びリジンである。「非
蛋白」α−アミノ酸の例は、ノルロイシン、ノルバリン
、アロイソロイシン、ホモアルキニン、チアプロリン、
デヒドロプロリン、ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）、ホ
モセリン、シクロへキシルグリシン（（ｈｇ）、α−ア
ミノ−ｎ−酪ｔｌ（Ａｂａ）、シクロｌベキシルアラニ
ン（Ｃｈａ）、アミノフェニル酪酸（１’ｈａ）　、フ
ェニル部分のオルソ、メダ、又はバラ位置で１又は２個
の次のもので置換されているフェニルアラニン、即ち（
自〜Ｃ４）アルキル、（（、〜Ｃ４）アルコキシ、ハロ
ゲン、又はニトロ基で置換されたもの：又はメチレンジ
オキシ基て置換されたもの：β−２−及び３−チエニル
アラニン、β−２−及び３−フラニルアラニン、β−２
−、３−、及び４−ピリジルアラニン、β−（ベンゾチ
エニル−２−及び３−イル）アラニン、β−（１−及び
２−ナフチル）−アラニン：セリン、スレオニン、又は
チロシンの１〕−アルキル化誘導体、Ｓ−アルキル化シ
スティン、チロシンの〔１−サルフェートエステル、３
゜５−ショートチロシン及び天然のアミノ酸のロー異性
体である。

「親油性のアミノ酸」という用語には、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ
、　Ｌｅｕ、Ｎ　ｅ　ｔ、　、　　Ｎ　Ｉ　ｅ、Ｉｌｅ
、〜’ａｌ、１（１ｓ及びＰｒｏが含まれる。

グリシンを例外として天然のアミノ酸は不斉炭素原子を
含有する。他に特定的に示されていない限り、本明細害
て述へられる光学活性アミノ酸は１４−立１本配置であ
る。例えば、八、叉はＡ４３．基の任意のアミノ酸は【
）−叉は１．−立体配置であり得る。慣例にしたがって
本明細臀で記載されるペプチドの構造はアミノ末端が鎖
の左側、カルボキシ末端が鎖の右側であるように記載さ
れる。

式１のポリペプチドは任意の無毒性の有機又は無機酸と
製薬上受は入れられる塩を形成できる。

適当な塩を形成ずろ無機酸の例には、塩酸、臭化水素酸
、硫酸、燐酸、及び酸金属塩、例えばオルト燐酸−水素
すトリウム及び硫酸水素カリウムが含まれる。適当な塩
を形成する有機酸の例にはモノ、ジ及びトリカルボン酸
が含まれる。そのような酸の例には、例えは酢酸、グリ
コール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グ
ルタル酸、フマール酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、
アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、
安息香酸、ヒ）・ロキシ安息香酸、フェニル酢酸、桂皮
酸、サリチル酸、２−フェノキシ安息香酸及びスルホン
酸、例えばメタンスルホン酸及び２−ヒドロキシエタン
スルボン酸が含まれる。カルボキシ末端アミノ酸の塩に
は任意の適当な無機又は有機塩基と形成される無毒のカ
ルボン酸塩が含まれる。

例示すればこれらの塩にはアルカリ金属、例えばすトリ
ウム及びカリウムとのもの、アルカリ土類金属、例えば
カルシウム、及びマグネシウムとのもの、ｍ　Ａ族のア
ルミニウムを含めた軽金属とのもの、及び有機第一級、
第二級及び第三級アミン、例えばトリエチルアミンを含
めたトリアルキルアミン、プロ力イン、ジｌ＼ンシルア
ミン、１−エタナミン、Ｎ、Ｎ’−ジＪ＼ンシルエチレ
ンシアミン、ジヒドロアビエチルアミン、Ｎ−（低級）
アルキルピペリジン、及び任意の他の適当なアミンが含
まれる。

化合物の任意の一般基がそうであるようにある基が好ま
しい。本発明者は式１のペプチド゛誘導体であって Ｘが水素、アセチル、又はサクシニルであるものが好ま
しいと考える。また、 Ａ、がＴｈｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇ　ｌ　ｎ−
５ｅｒ　−Ｈｉ　５−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｇ　１ｙ−ＡＳ
ｌｌ、 一５ｅ　ｒ−Ｔｈ　ｒ−Ｐ＋Ｏ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−＋Ｊ
ｌ　ｕ−５ｅｒ　−Ｉｔ　ｉ　５−Ａｓｎ−Ａｓｎ　−
Ｇｌｙ−Ａｓｐ、 −Ｈ１ｓ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−ら１ｙ−Ａｓｐ−１−Ａｓ
ｐ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−１−Ａｓｐ−Ｇｌ　ｙ−
Ａｓｐ−１ −Ｇｌｙ−Ａｓｐ−１ −Ａｓｐ−１又は結合であり、 Ａ２がＰ　ｈ　ｅ、β−２−又は３−チエニルアラニン
、Ｔｙｒ。

Ｔ　ｒ　ｐ、　Ｎ　ＩＩ　ａ又はｐｃｌＰｈｅであり、
Ａ３がＧ　ｌ　ｕてあり、 Ａ４がＧ１１」、Ａｓｐ、Ｐ　ｒ　ｏ又はＡｌａであり
、Ａ５がＩｌｅＳＬｅｕてあり蔦 Ａ６がＰｒｏ、Ｓａｒ、Ｄ−Ａｌａ、　Ｈｙｐ叉はＮＭ
ｅＰｇｌてあり、Ａ７がＧ　ｌ　ｕ　、　Ｇ　ｌ　ｎ、
Ａｓｐ又はＡｌａであり、Ａ８がＧ　Ｉ　ＩＩ　ＳＡ　
ｓ　ｐ又はＡｌａてあり、Ａ９がＰｒｏ＋Ａｌａ−Ｔｙ
ｒ、Ａｌａ−Ｃ’ｈａ＋Ｔｙｒ−Ｃｈａ＋Ｔｙｒ−Ｌｅ
ｕ。

Ａｌａ−Ｐｈｅ、　Ｔｙｒ−Ｔｙｒであり、Ａ、。−オ
ールがｆ′ｌｌ　＋＋−オール、Ａｓｎ−オール、Ｐｒ
ｏ−オール、Ｇｌｎ−オール、Ａｌａ−オール、Ｄ−Ｌ
ｙｓ−オール、Ｌｙｓ−オール、Ｄ−Ａｓｐ−オール、
０ｒｎ−オール又はＡＳＩ）−Ｇｌｕ−オールである ものが好ましい。

特に好ましいのは、式１のペプチド誘導体であって Ｘがアセチルてあり、Ａ、がＧｌｙ−Ａｓｐ叉はＡｓｐ
、又はＸがサクシニルであり、Ａ１が結合であって、Ａ
２がＰｈｅ、β−（２−チエニルアラニン）又はＴｙｒ
であり、 Ａ３がＧｌｎであり、 Ａ４がＧ　ｌ　１１又はＰｒｏであり、Ａ５がＩｌｅで
あり、 Ａ６がＰｒｏであり、 Ａ７がＧｌ　ｕてあり、 Ａ８がＧ　ｌ　ｕ又はＡｓｐてあり、 Ａ９がＴｙｒ−ＬｅｕＳＡｌａ−Ｔｙｒ、　Ｔｙｒ−Ｔ
ｙｒＳＡｌａ−Ｐｈｅ、　Ａｌａ−Ｃｈａ又はＰｒｏて
あり、 Ａｌｏ−オールがＡｌａ−オール、ｆ’ｉ　ｌ　ｎ−オ
ール、Ａｓｐ−オール、Ｐｒｏ−オール、Ｄ−Ａｓｐ−
オール、Ｄ−Ｌｙｓ−オール、Ｄ　−Ｇ　ｌ　ｕ−オー
ル又は−Ａ　ｃＮｌ）　−Ｇ　ｌ　＋、＋−オールであ
るものである。

本発明のペプチドは当業者に容易に知られ得る種々の手
順で製造できる。そのような手順には同相連続及びブロ
ック合成、遺伝子クローニング及びこれらの技術の絹み
合わせが含まれる。固相速読手順は自動化されたペプチ
ド合成機の使用によるなと確立された自動方法を用いて
実施できる。

この手順に於いてペプチドは最後から二番目のＣ−末端
保護アミノ酸から始め樹脂上で構築される。

使用される樹脂支持体は、慣用的にこの技術でポリペプ
チドの固相合成に用いられる任意の適当な樹脂であり得
、好ましくは０．５〜約３％のジビニルベンセンて架橋
されているポリスチレンで、クロロメチル化又はヒドロ
キシメチル化のいずれかがされていて、最初に導入され
るαアミノ保護アミノ酸とエステル形成の場所が与えら
れているものである。連続の結合が完了した後にＢｏＣ
保護基がその場所に残されるか又は除去され、モしてＮ
−末端アミノ基がアシル化される。樹脂から保護フラグ
メントを置き換えることは適当なアミノアルコールを用
いて達成できた。・ ヒドロキシメチル樹脂の例はボダンスキー等、Ｃｈｅｍ
、　ｌｎｄ、　（Ｌｏｎｄｏｎ）　３８．１５９７−９
８　（１９６６）に記載されている。クロロメチル化樹
脂はバイオ　ラドラボラトリ−、カリフォルニア州、リ
ッチモントから市販されており、そのような樹脂の製造
はスチュワート等、「同相ペプチド合成」　（フリーマ
ン　アント　カンパニー、サンフランシスコ　１９６９
）１章、１〜６頁に記載されている。保護されたアミノ
酸はギシン、ｔｌｅｌｖ、　ｔシｈｅｍ、　Ａｃｔ、ａ
、　５６．１４７６　（１９７３）の手順によって樹脂
に結合できる。多くの樹脂結合保護アミノ酸が市販され
ている。例としてカルボキシ末端がＴ　ｈ　ｒ残基であ
る本発明のポリペプチドを製造するには、第三級ブチル
オキシカルボニル（Ｂｏｃ）保護Ｔ　ｈ　ｒてあって、
Ｊ＼ンジル化されたヒドロキシメチル化されたフェニル
アセタミドメチル（ＰＡＭ）樹脂に結合されたものを使
用出来、これは市販されている。

α−アミノ保護アミノ酸を樹脂支持体に結合した後に保
護基を任意の適当な手順、例えば塩化メチレン中のトリ
フルオロ酢酸、トリフルオロ酢酸のみ、又はジオキサン
中のＨＣＩを使用することによって除去される。脱保護
は０℃から室温の間の温度で実施される。特定のα−ア
ミノ保護基の除去のための他の標準の開裂試薬及び条件
を使用できる。α−アミノ保護基の除去の後、他のアミ
ノ保護アミノ酸を所望の順序で段階的に結合する。

別の方法として複数のアミノ酸基を樹脂支持アミノ酸配
列と結合する前に溶液方法で結合することが出来る。

ポリペプチド配列に導入される各アミノ酸とともに使用
するアミノ保護基は、任意のこの技術で知られた保護基
であり得る。α−アミノ保護基の類の内、考慮に入れら
れているものは（１）アシル型保護基、例えばホルミル
、トリフルオロアセチル、フタリル、トルエンスルホニ
ル（ｔ、ｏｓｙｌ）、ペンセンスルホニル、二１・ロフ
ェニルスルフェニル、トリチルスルフェニル、０−二ト
ロフエノキシアセチル及びα−クロロブチリル、（２）
芳香族ウレタン型保護基、例えはヘンシロキシカルボニ
ル及び置換ヘンシロキシカルボニル、例えばｐ−クロロ
ベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロ今ンジルーカル
ボニル、１）−ブロモベンジルオキシカルボニル、ｐ−
メトキシベンジルオキシカルボニル、１−（１）−ビフ
ェニリル）−１−メチルエトキシカルボニル、α、α−
ジメチルー３．５−シメＩ・キシベンジロキシカルボニ
ル及びベンズヒドロキシカルボニル、（３）脂肪族ウレ
タン保護基、例えは第三ブチルオキシカルボニル（Ｂｏ
ｃ）、ジイソプロピルメトキシカルボニル、イソプロピ
ルオキシカルボニル、エトキシカルボニル及びアリロキ
シカルボニル、く４）シクロアルキルウレタン型１呆護
基、例えばシクロペンチロキシカルボニル、アダマンチ
ロキシカルボニル及びシクロヘキロキシ力ルボニル、（
５）チオウレタン型保護基、例えはフェニルチオカルボ
ニル、（６）アルキル型保護基、例えばトリフェニルメ
チルクトリチル）及びＪ＼ンシル、及び（７）トリアル
キルシラン基、例えばトリメチルシランである。好まし
いα−アミノ保護基は第三フ゛トキシカルボニルである
。

適当な結合剤の選択は、当業者の行い得る範囲内のもの
である。特に適した結合剤であって加えられるべきアミ
ノ酸がＧｌｎ、Ａ　Ｓ　ｎ又はＡｒｇであるものはＮ、
Ｎ’−ジイソブロビル力ルポジイミト及び１−ヒドロキ
シペンツトリアソールである。これらの試薬の使用はニ
トリル及びラクタムの形成を防止する。他の結合剤は（
１）カルボジイミド類（例えば、Ｎ、Ｎ’−ジシクロへ
キシルカルボジイミド゛及びＮ−エチル−Ｎ′−（γ−
ジメチルアミノブロピル力ルボジイミト））、（２）シ
アナミド類（例えば、Ｎ、Ｎ−ジヘンジルシアナミド）
、（３）ケテンイミン類、（４）イソキサゾリウム塩（
例えば、Ｎ−エチル−５−フェニル−イソキサゾリウム
−３′−スルフオネ−１・）、（５）１〜４個の窒素原
子を環中に含む芳香族性の単環式窒素含有複素環アミド
、例えばイミダソリト類、ビラゾリド類、及び１，２．
４−　）リアゾリト類である。有用な特定の複素環アミ
ド類にはＮ、Ｎ’−カルポニルシイミダソール及びＮ、
Ｎ−カルボニル−ジー１０２．４−１−リアゾール、（
６）アルコキシ化アセチレン（例えば、エトキシアセチ
レン）、（７）アミノ酸のカルボニル部分と混合無水物
を形成する試薬（例えば、エチルクロロホルメート及び
イソブチルクロロホルメート）又は結合されるべきアミ
ノ酸の対称的な無水物（例えば、Ｂｏｃ−Ａｌａ−０−
Ａｌａ−Ｂｏｃ）及び（８）　−−）の環窒緊上ニヒド
ロキシル基を有する窒素含有複素環化合物（例えは、Ｎ
−ヒドロキシフタルイミド、Ｎ−ヒドロキシ−２！−］
　− コハク酸イミド及び１−ヒドロキシベンゾ！・リアソー
ル）である。他の活性化試薬及びペプチド結合に於ける
それらの用途は、カブール、　、１．　Ｐｌ＋ａｒｍ。

Ｓｃｉ、、　５９．’　１−２７頁（１９７０）により
記載されている。

本発明者等は結合試薬として対称無水物を使用するのが
Ａｒｇ、　Ａｓｎ及びＧ１ｎ以外の全てのアミノ酸に対
し好ましいと考えている。

各々の保護されたアミン酸又はアミノ酸配列は、約４倍
の過剰で同相反応器に導入されカップリングをジメチル
ホルムアミド対塩化メチレン（１：Ｉ）の媒体中又はジ
メチルホルムアミド単独の中、又は好ましくは塩化メチ
レン単独の中で実施する。

不完全なカップリングが生した場合には、カップリング
手順を同相反応器中の次のアミノ酸のカップリングの前
にα−アミノ保護基の除去前に繰り返す。合成の各段階
に於けるカップリンク反応の成功はイー、カイザー等、
　Ａｎａｌｙｔ、　Ｂｉｏｃｌ＋ｅ＋ｎ、　３４゜５９
５　（、＋９７０）により記載されるニンヒドリン反応
によってモニターする。

所望のアミノ酸配列が得られた後にペプチドを樹脂から
除去する。これは加水分解、例えば樹脂結合ポリペプチ
ドを炭素末端アミノアルコール残基、酢酸、及びジクロ
ロメタン（ＤＣＭ）で処理することによって成し得る。

固相ペプチド合成の技術で知られるようにアミノ酸の多
くは鎖製造の間に保護を要する官能基を有している。適
当な保護基の使用及び選択は当業者の能力の範囲内にあ
るものであって、保護されるべきアミノ酸及びペプチド
上の他の保護されるアミノ酸残基の存在に依存する。そ
のような側鎖保護基の選択はα−アミノ部分の保護基の
開裂の間開裂によって除去されないものでなければなら
ないという点で臨界的である。例えは、リジンｔこ対す
る適した側鎖保護基はヘンシロキシカルボニル及び置換
ベンジロキシカルボニルであり、そのような置換基はハ
ロ（例えば、クロロ、ブロモ、フルオロ）及びニトロ（
例えば、２−クロロヘンシロキシカルボニル、ｐ−二ト
ロヘンジロキシ力ルボニル、３，４−ジクロロヘンシロ
キシカルボニル）、トシル、ｔ−アミロキシカルボニル
、ｔ−ブチロキシカルボニル及びジイソプロピルメトキ
シカルボニルから選ばれる。スレオニン及びセリンのア
ルコール性ヒトロギシル基は、アセチル、ベンゾイル、
第三アチル、トリチル、Ｊ＼ンシル、２，６−ジクロロ
Ｊ＜ンジル又はヘンシロキシカルボニル基で保護され得
る。好ましい保護基はベンジルである。

これらの基はこの技術で良く知られた手順で除去できる
。典型的には医護基の除去はペプチド鎖合成が完了した
後であるが、保護基は任意の他の適当なときに除去する
ことも出来る。

本発明のアルコールペプチド誘導体の抗凝固投与量は、
治療されるべき患者血栓症状のひどさ、及び選ばれるベ
ブチ１ζ誘導体に依存し、−日当たり患者体重キロクラ
ム当たり０．２ｍｇ〜２５０ｍｇである。

れ得る。好ましくは１〜４回の毎日の投与がなされ典型
的には投与量たり５Ｂ−１００ｍｇの活性化合物が投与
される。本発明のペプチドアルコールの体外媒体、例え
ば保存された全血中に於ける血液凝固を防止するか又は
抑制するのに要する量は、容易に当業者により決定され
得る。

□ 抗凝固療法は種々の血栓症状、特に冠状動脈及び脳血管
病の処置及び予防に示唆されている。この分野で経験を
積んだ者は、抗凝固療法を要求するような状況に容易に
気がつく。本明細書で使用する「患者」という用語は、
哺乳類、例えば人を含めた霊長類、羊、馬、牛、豚、犬
、猫、ラット及びマウスを意味するものとする。血液凝
固の抑制は、血栓症状を有する個人の抗凝固療法に有用
であるのみらなす血液凝固の抑制が望ましい場合、例え
ば保存された全血の凝固の防止及び試験又は貯蔵のため
の他の生物学的試料に於ける凝固の防止などに於いてな
どあらゆる場合に有用である。

ペプチド誘導体の幾つかは経口投与の後隅を通過しても
生延び得るが、本発明者は非経口投与、例えば皮下、静
脈内、筋肉内又は腹腔内投与、デポ−注射による投与、
移植製剤による投与又は粘膜への適用、例えば鼻、喉及
び気管支に対する適用、例えは本発明のペプチド誘導体
をスプレー又は乾燥粉末形で含有しているエロゾルの缶
に於ける投与が好ましいと考えている。

化合物の非経口投与は、表面活性剤及び他の製薬上受は
入れられる助剤の添加有り又は無しで、水又は油の様な
滅菌液体であり得る製薬担体と共に生理学的に受は入れ
られる希釈剤中の化合物の溶液又はＶ、濁液の注射可能
な投与物として投与され得る。これらの製剤中で使用で
きる油の例は石油、動物、植物、叉は合成起源のもの、
例えばピーナツ油、大豆油、及び鉱油である。一般に、
水、塩水、デキストロース水溶液及び関連糖溶液、エタ
ノール及びグリコール類、例えばプロピレングリコール
又はポリエチレングリコールが好ましい液体担体で、特
に注射溶液に良い。

化合物は、デポ−注射叉は移植製剤の形態で投与するこ
とが出来、これらは活性成分の持続放出を可能とするよ
うな方法で処方され得る。活性成分は、ベレット又は小
シリンダー形に圧縮され皮下又は筋肉内にデポ−注射叉
は移植片として移植される。移植片は生物分解可能な重
合体又は合成シリコシ、例えはシラスチック、即ちダウ
ーコ一一３４＝ ニング　コーポレーションにより製造されたシリコンゴ
ムなどの不活性物質を使用することが出来る。

〔実施例〕

本発明は、改の非限定実施例により説明される。

実施例　１ 炭素末端ペプチドアルコールの製造 ペプチドをデグラト及びカイザー（、，１，Ｏｒｇ、　
Ｃｈ６ｍ’、　４５．１２９５−１３００　（１９８０
））の方法により製造したｐ−二トロベンズヒトリリデ
ンイソニトロソ樹脂（オキシム樹脂）を用いて合成した
。オキシム樹脂　（０，５４ｇ、　０．５２ミリも１１
１０．９７ミリモ１１／ｇ置換）　を　ア　ブライド　
バイオシステムズモデル４３０Ａ　ペプチドシンセサイ
ザーの容器中に入れた。Ｂｏｃ−保護アミノ酸を二倍過
剰でそれらの対称無水物として順次単一結合させた。使
用した側鎖（呆護は、次の通りである。Ａ　Ｓ　１１　
（Ｃｈ　ｘ　）、Ｇｌｕ（Ｂｚｌ）、Ｔｙｒ（２−Ｂｒ
Ｚ）。シンセサイザーのプログラムは、各サイクルに対
し次のプロトコルを与えるように記載された。

１）　　ｌミ１Ｈ１１の予め形成された対称無水物を加
える、 ２）５％の追加的な容量の旧ＥＡ（？）を加える、３）
　　１時間攪拌する、 ４）排出、 ５）　　ＤＣＭで洗浄する（　５Ｘ　７１分）、（ｉ　
）　　Ｄ　ＣＭ中の２０％ＴＦＡで洗浄する（１分）、
？）　　Ｉ）ｃＭ中の２０％ＴＦＡて１５分間処理する
、８　）　　Ｄ　ＣＭて洗浄する　（３Ｘ　１０．５分
）、９）イソプロパツールで洗浄する（４分）、１０）
洗浄する（３Ｘ’１０．５分）、＋１）イソプロパツー
ルで洗浄する（４分）、＋２）　ＤＣＭで洗浄する　（
３Ｘ　１０．５分、）１３）イソプロパツールで洗浄す
る（４分）、１４）洗浄する（　３Ｘ　１０．５分）。

合成の完了の後、樹脂を真空で乾燥する。樹脂を次に２
当量のアラニノール（最初の樹脂置換に基づく）及び０
６Ｍ中の１当量の酢酸で室温で２０時間処理する。樹脂
を濾過する。濾液を凍結乾燥する。

残留物を一５℃で３０分間、２％アニソールを含有する
液体ＨＦで処理する。真空でＨＦを除去したらペプチド
を３０％アセトニトリルで抽出し、凍結乾燥する。残留
物を調製用ＨＰＬＣ（ダイナマックス　Ｃｌ８２１．４
Ｘ　１５０ｍｍカラム）によってアセトニトリル０、１
％ＴＦＡ系を用いて精製する。この方法で得られたペプ
チドはＦ　Ａ　Ｂ　−　Ｍ　Ｓにより所望の分子イオン
ピークな与え、そして所望のペプチドに従うアミノ酸分
析を有していた。この方法で次の述べられた性質を有す
るペプチドが作られた。

１）　ＳｕｃＦＥＰＩＰＥＹＬ−オールＭ臂１０９２．
６　ＦＡＲ−ＭＳ　（Ｍｌ（）＝　１０９４．０　ｔＲ
１７．５３Ｅ２ｅｏ　１５７３　　ペプチド含！７９．
８％ＧＩＸ（２）　　Ｐｒｏ（２）、　Ｉｌｅ（１）　
　Ｔｙｌ・（＋）　　Ｐｌ＋ｅ（１）２、０８　　　＋
．０＋　　　０．９４　　　０．９９　　　０．９８２
）　ＳｕｃＦＥＰＩＰＥＥＹＣｈａＡ−オールＭ讐　１
３３２．７　　ＦＡＲ−ＭＳ　　Ｏ団）”　　１３３３
．４　　５　　２０．２分Ｅ２ｇ０　１７５５　　ペプ
チド含！７３％Ｇｌｘ（３）　　Ｐｒｏ（２）　　Ｉｌ
ｅ（１）　　Ｔｙｒ（１）　　Ｐｈｅ（１）３、０４　
　　２．０３　　　０．９２　　　＋．００　　　０．
９７Ｃｈａ（１） ０、９５ ３）　ＳｕｃＦＥＰＩＰＥＥＹＬ−オールＭ１＋ｌ　　
１２２１．６　　ＦＡＲ−ＭＳ　　（ＭＨ）＝　　１２
２２．８　　１．Ｒ　１Ｇ．８３Ｅ２ＱＯ　１６８６　
　ペプチド含量７２．１％ＧＩＸ（２）　　Ｐｒｏ（２
）　　Ｉｌｅ（１）　　Ｔｙｒ（］）　　Ｐｌ＋ｅ（１
）３、Ｑ．９　　　、１．９８　　　　０．９６　　　
　０．９７　　　　１．００出願人　メレルダウ　ファ
ーマスーティヵルズインコーボレーテット

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式 Ｘ−Ａ＿１−Ａ＿２−Ａ＿３−Ａ＿４−Ａ＿５−Ａ＿６
   −Ａ＿７−Ａ＿８−Ａ＿９−Ａ＿１＿０−オール 〔式中Ｘは水素、１〜６個の炭素原子の１又は２個のア
   ルキル基、又は２〜１０個の炭素原子の１又は２個のア
   シル基であり、 Ａ＿１は結合であるか又は任意のアミノ酸の１〜１１の
   残基を含有しているペプチド断片であり、 Ａ＿２は、Ｐｈｅ、ＳｕｂＰｈｅ、β−（２−及び３−
   チエニル）アラニン、β−（２−及び３−フラニル）ア
   ラニン、β−（２−、３−、及び４−ピリジル）アラニ
   ン、β−（ベンゾチエニル−２−及び３−イル）アラニ
   ン、β−（１−及び２−ナフチル）アラニン、Ｔｙｒ、
   又はＴｒｐであり、Ａ＿３はＧｌｕ又はＡｓｐであり、 Ａ＿４は任意のアミノ酸であり、 Ａ＿５はＩｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ＮｌｅＮ又はＰｈｅ
   であり、Ａ＿６はＰｒｏ、Ｈｙｐ、３，４−デヒドロＰ
   ｒｏ、チアゾリジン−４−カルボキシレート、Ｓａｒ、
   ＮＭｅＰｇｌ、又はＤ−Ａｌａであり、 Ａ＿７は任意のアミノ酸であり、 Ａ＿８は任意のアミノ酸であり、 Ａ＿９はＴｙｒ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｉ
   ｌｅ、Ｖａｌ、Ｃｈａ及びＰｒｏから選ばれる親油性ア
   ミノ酸であるか又はこれらの親油性アミノの少なくとも
   一つを含有しているジペプチドであり、 Ａ＿１＿０−オールは、炭素末端アミノ酸がそのアルコ
   ール誘導体に還元されている０〜５つの任意のアミノ酸
   残基を含有している還元されたペプチド断片である〕の
   アルコールペプチド誘導体。 ２、Ａ＿２がＰｈｅ、β−（２−又は３−チエニル）ア
   ラニン、又はＴｙｒである特許請求の範囲第１項に記載
   のアルコールペプチド誘導体。 ３、Ａ＿３がＧｌｕである特許請求の範囲第１項に記載
   のアルコールペプチド誘導体。 ４、Ａ＿４がＧｌｕ、Ａｌａ、又はＰｒｏである特許請
   求の範囲第１項に記載のアルコールペプチド誘導体。 ５、Ａ＿５がＩｌｅである特許請求の範囲第１項に記載
   のアルコールペプチド誘導体。 ６、Ａ＿６がＰｒｏである特許請求の範囲第１項に記載
   のアルコールペプチド誘導体。 ７、Ａ＿７がＧｌｕ又はＡｌａである特許請求の範囲第
   １項に記載のアルコールペプチド誘導体。 ８、Ａ＿８がＧｌｕ又はＡｓｐである特許請求の範囲第
   １項に記載のアルコールペプチド誘導体。 ９、Ａ＿９がＴｙｒ−Ｌｅｕ、Ａｌａ−Ｔｙｒ、又はＡ
   ｌａ−Ｃｈａである特許請求の範囲第１項に記載のアル
   コールペプチド誘導体。 １０、Ａ＿１＿０−オールがＧｌｎ−オール、Ａｓｐ−
   オール、Ｐｒｏ−オール、Ａｓｎ−オール、Ａｓｐ−Ｇ
   ｌｕ−オール、Ｇｌｕ−オール、Ａｌａ−オール、Ｄ−
   Ｌｙｓ−オール、Ｌｙｓ−オール、Ｄ−Ａｓｐ−オール
   、Ｄ−Ｇｌｕ−オール又はＯｒｎ−オールである特許請
   求の範囲第１項に記載のアルコールペプチド誘導体。 １１、ＸがＨ、アセチル、又はサクシニルである特許請
   求の範囲第１項に記載のアルコールペプチド誘導体。 １２、Ａ＿１がＳｅｒ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｇｌ
   ｙ−Ａｓｐ、Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ、 Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ、 Ｇｌｙ−Ａｓｐ、 Ａｓｐ、又は 結合 である特許請求の範囲第１項に記載のアルコールペプチ
   ド誘導体。 １３、Ａ＿１が−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇ
   ｌｎ−Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ａｓ
   ｐ−である特許請求の範囲第１項に記載のアルコールペ
   プチド誘導体。 １４、Ａ＿１が−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｐｒｏ−Ｇ
   ｌｕ−Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｓ
   ｐ−である特許請求の範囲第１項に記載のアルコールペ
   プチド誘導体。 １５、Ｈ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−
   Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇ
   ｌｎ−オールである特許請求の範囲第１項に記載のアル
   コールペプチド誘導体。 １６、Ｓｕｃ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｐｒ
   ｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−オール
   である特許請求の範囲第１項に記載のアルコールペプチ
   ド誘導体。１７、Ｈ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ
   −Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ａｌａ−
   Ｔｙｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−オールである特許請求の範囲
   第１項に記載のアルコールペプチド誘導体。 １８、Ｓｕｃ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｐｒ
   ｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−オール
   である特許請求の範囲第１項に記載のアルコールペプチ
   ド誘導体。１９、Ｓｕｃ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｉ
   ｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌ
   ｎ−オールである特許請求の範囲第１項に記載のアルコ
   ールペプチド誘導体。２０、Ｓｕｃ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−
   Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−ＴｙｒＬｅ
   ｕ−Ｇｌｎ−オールである特許請求の範囲第１項に記載
   のアルコールペプチド誘導体。 ２１、Ｓｕｃ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｐｒ
   ｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｌｙｓ−オ
   ールである特許請求の範囲第１項に記載のアルコールペ
   プチド誘導体。 ２２、Ｓｕｃ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｐｒ
   ｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−オール
   である特許請求の範囲第１項に記載のアルコールペプチ
   ド誘導体。２３、Ｓｕｃ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｉ
   ｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｃｈａ−Ｌｙ
   ｓ−オールである特許請求の範囲第１項に記載のアルコ
   ールペプチド誘導体。２４、Ｓｕｃ−Ｔｙｒ−ＧｌＵ−
   Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｃ
   ｈａ−Ｌｙｓ−オールである特許請求の範囲第１項に記
   載のアルコールペプチド誘導体。２５、Ｓｕｃ−Ｔｙｒ
   −Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−
   Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−オールである特許請求の範囲
   第１項に記載のアルコールペプチド誘導体。２６、Ｓｕ
   ｃ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｇｌｎ
   −Ｇｌｕ−Ａｌａ一Ｐｈｅ−Ｇｌ−オールである特許請
   求の範囲第１項に記載のアルコールペプチド誘導体。 ２７、Ｓｕｃ−Ｔｙｒ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｐｒ
   ｏ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｃｈａ−Ａｓｐ−オール
   である特許請求の範囲第１項に記載のアルコールペプチ
   ド誘導体。２８、特許請求の範囲第１〜２７項のうちの
   一つのアルコールペプチド誘導体の抗凝固有効量及び製
   薬上受け入れられる担体を投与することからなる必要と
   する患者の血液凝固を減少させる方法。 ２９、特許請求の範囲第１〜２７項の一つのアルコール
   ペプチドの血液凝固有効量と媒体とを接触させることか
   らなる媒体中の血液凝固を減少させる方法。 ３０、式 Ｘ−Ａ＿１−Ａ＿２−Ａ＿３−Ａ＿４−Ａ＿５−Ａ＿６
   −Ａ＿７−Ａ＿８−Ａ＿９−Ａ＿１＿０−オール〔式中 Ｘは水素、１〜６個の炭素原子の１又は２個のアルキル
   基、又は２〜１０個の炭素原子の１又は２個のアシル基
   であり、 Ａ＿１は結合であるか又は任意のアミノ酸の１〜１１の
   残基を含有しているペプチド断片であり、 Ａ＿２は、Ｐｈｅ、ＳｕｂＰｈｅ、β−（２−及び３−
   チエニル）アラニン、β−（２−及び３−フラニル）ア
   ラニン、β−（２−、３−、及び４−ピリジル）アラニ
   ン、β−（ベンゾチエニル−２−及び３−イル）アラニ
   ン、β−（１−及び２−ナフチル）アラニン、Ｔｙｒ、
   又はＴｒｐであり、Ａ＿３はＧｌｕ又はＡｓｐであり、 Ａ＿４は任意のアミノ酸であり、 Ａ＿５はＩｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、又はＰｈｅ
   であり、Ａ＿６はＰｒｏ、Ｈｙｐ、３，４−デヒドロＰ
   ｒｏ、チアゾリジン−４−カルボキシレート、Ｓａｒ、
   ＮＭｅＰｇｌ、又はＤ−Ａｌａであり、 Ａ＾７は任意のアミノ酸であり、 Ａ＿８は任意のアミノ酸であり、 Ａ＾９はＴｙｒ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、Ｎｌｅ、Ｉ
   ｌｅ、Ｖａｌ、Ｃｈａ及びＰｒｏから選ばれる親油性ア
   ミノ酸であるか又はこれらの親油性アミノ酸の少なくと
   も一つを含有しているジペプチドであり、 Ａ＿１＿０−オールは、炭素末端アミノ酸がそのアルコ
   ール誘導体に還元されている０〜５つの任意のアミノ酸
   残基を含有している還元されたペプチド断片である〕の
   ペプチドアルコールを製造する方法に於いて、 （ａ）Ａ＿９アミノ酸に対応する適当に保護されたアミ
   ノ酸を活性化された樹脂支持体に結合させ、 （ｂ）次に、他のαアミノ保護アミノ酸を、カルボキシ
   からアミノ末端への順序、即ちＡ＿８ないしＡ＿１の順
   序でアミノ保護基を除去することによって暴露させつつ
   成長しているペプチド鎖の末端アミノ末端に結合させ、 そして （ｃ）最後に樹脂結合ペプチドをジクロロメタン中の約
   ２当量のＡ＿１＿０−オールに対応するカルボキシ末端
   アミノアルコール及び約１当量の酢酸で処理してペプチ
   ドを樹脂から開放し、そして同時にカルボキシ末端ペプ
   チドアルコールをペプチドに結合させ、このようにして
   所望のペプチドアルコール誘導体を生じることからなる
   方法。