KR0131378B1 - 항응고성 펩티드 알코올 - Google Patents

항응고성 펩티드 알코올

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Abstract

내용 없음

Description

항응고성 펩티드 알코올
본 발명은 유용한 항응고제인 신규 펩티드 알코올에 관한 것이다.
항응고제는 약리적 치료, 예를 들면, 급성 심부(深部) 정맥 혈전증, 폐동맥 색전증, 말단 급성 동맥 색전증, 심근 경색증 및 파종성 혈관내 응고증의 치료에 있어서, 유용한 치료제이다.
항응고제의 예방적 투여는 류마티스성 또는 동맥경화성 심장 질환을 가진 환자들에 있어서 색전증의 재발을 예방하고, 외과의 특정한 혈전-색전증의 합병증을 예방해 주는 것으로 알려졌다. 또한 항응고제의 투여는 관상 동맥 및 대뇌혈관계 질병의 치료에 있어서 필요한 것으로 알려지고 있다. 특히, 심근 및 뇌에 혈액을 공급하는 동맥에 있어서 동맥 혈전증은 사망의 주된 원인이다.
하루딘(Hirudin)은 거머리의 타액서으로부터 단리시킨 65개의 잔기를 가진 폴리펩티드이다. 이것은 트롬빈 특히 억제제인 항응고제이다. 효능이 우수할지라도, 거머리 추출물에서 단리시킨 하루딘의 임상 사용은 그의 양이 한정되었고, 비용 및 이 정도크기의 이질성 단백질의 투여에 흔히 뒤따르는 알레르기 반응 때문에 바람직하지 못하다.
본 발명자들은 적어도 부분적으로 하루딘의 항응고작용에 원인이 되는 하루딘의 특이적 부분을 발견하였다. 이 부분은 화학적으로 합성되고, 그 유사체중 일부는 공간적으로 분리된 효소 절단 부위가 아닌 트롬빈의 인식 부위에 결합하는 것으로 나타났다. 합성 펩티드의 결합은 피브린 생성과 혈병 형성에 선행 조건인 트롬빈의 인식 부위에 대한 피브리노겐의 결합을 경쟁적으로 막아준다. 본 발명자들은 이 펩티드 화합물의 특정 환원 유도체를 제조하였다. 이 신규 유도체의 카르복실산 관능기는 대응하는 알코올 관능기로 환원되었다. 본 발명의 펩티드 알코올은 현저한 항응고 작용을 가지며, 트롬빈의 절단 부위에 결합하지 않고 단지 인식 부위에만 결합하는 이 펩티드 알코올의 예기치 못했던 결합능은 항응고성 치료에 대하여 과학적으로 흥미롭고, 치료학적으로 중요한 보조약을 제공하게 된다. 또한, 알코올 관능기의 존재는 효능의 증진과 작용 기간을 연장시킬 수 있다. 본 발명의 유용한 항응고제는 하기 구조식의 펩티드 유도체이다.
X-A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10-올
상기식 중에서,
X는 수소원자, 1 내지 6개의 탄소원자를 갖는 1개 또는 2개의 알킬기, 2 내지 10개의 탄소원자를 갖는 1개 또는 2개의 아실기, 카르보벤질옥시 또는 t-부틸옥시카르보닐기증에서 선택된 아미노 말단 잔기이고, A1은 결합이거나, 또는 1내지 11개의 임의 아미노산 잔기를 갖는 펩티드이고
A2는 Phe, SubPhe, β-(2- 및 3-티에닐)알라니,β-(2- 및 3-푸라닐)아라닌,β-2-, 3- 및 4-피리딜)알라닌, β-(벤조티에닐-2- 및 3-일) 알라닌, β-(1- 및 2-나프틸)알라닌, Tyr 또는 Trp이고,
A3는 Gul 또는 Asp이고,
A4는 임의의 아미노산이고,
A5는 Ile, Leu, Nle 또는 Phe이고,
A6는 Pro, Hyp, 3,4-데히드로Pro, 티아졸리딘-4-카르복실레이트, Sar, NMePgl 또는 D-Ala이고,
A7은 임의 아미노산이고, A8은 임의 아미노산이고,
A9는 Tyr, Met, Trp, Phe, Leu, Nle, Ile, Val, Cha 및 Pro 중에서 선택된 친지성 아미노산 또는 상기 친지성 아미노산들 중 적어도 1개를 함유하는 디펩티드이고, A10-올은 탄소 말단 아미노산이 그의 알코올 유도체로 환원된 0내지 5개의 임의 아미노산 잔기를 함유하는 환원 펩티드 단편이다.
하기 아미노산의 통상의 약자들은 본 명세서 전방에 걸쳐 사용된다.
Ac-아세틸 Ala(또는 A)-아라닌, DAla(또는 a)-D-알라닌, Arg(또는 R))-아르기닌, Asn(또는 N)-아스파라긴, Asp(또는 D)-아스파르트산, pClPhe-파라-클로로-페닐알라닌, Cha-시클로헥실알라닌, Cys(또는 C)-시스테인, 3,4-데히드로 Pro-3.4-데히드로프롤린, Gly(또는 g)-글리신, Glu(또는 E)-글루타민산, D-Glu(또는 e)-D-글루탐산, Gln(또는 Q)-글루타민, Glt-글루타릴, His(또는 H)-히스티딘, Hyp-히드록시프롤린, Ile(또는 I)-이소로이신, Leu(또는 L)-로이신,Lys(또는 K)-리신, Mal-말레일, Met(또는 M)-메티오닌, NMePg1-N-메틸-페닐글리신, Npa-β-(나프틸)알라닌, pNO2Phe-파라-니트로-페닐알라닌, Nle-노르로이신, Orn-오르니틴, pSubPhe -파라 치환 페닐알라닌, Phe(또는 F)-페닐알라닌, Pgl-페닐글리신, Pro(또는 P)-프롤린, Sar-사르코신(N-메틸글리신), Ser(또는 S)-세린, SubPhe-오르토, 메타, 또는 파라, 모노-또는 디-치환 페닐알라닌, Suc-숙시닐, Thr(또는 T)-트레오닌, Trp(또는 W)-트립토판, Tyr(또는 Y)-티로신, Val(또는 V)-발린
탄소 말단 아미노산이 그의 알코올 유도체로 환원된 1 내지 5개의 임의 아미노산 잔기를 함유하는 환원 펩티드 단편의 표현으로써 본 발명자들은 탄소 말단 아미노산의 카르복실산기의 탄소원자를 히드록시메틸기,-(CH2)OH로 대체되는 것을 나타냈다. 본 발명의 폴리펩티드의 A10기가 최대로 5개의 아미노산을 함유할 수 있지만, 탄소 말단 아미노산만이 그의 대응하는 알코올 유도체로 환원되는 것을 의미한다. 물론, 탄소 말단 아미노산 이외의 다른 어느것은 이와같이 환원될 수 없는데,. 그이이유는 펩티드 결합이 불가능하기 때문이다. 물론, A10이 단일 아미노산인 경우에는, 이 단일 산은 그의 알코올 유도체로 환원된 산이다. 이와같은 환원 아미노산에 대한 구조식은 아래와 같이 나타낼수 있다.
상기식 중 R는 각 아미노산의 특징적인 기이다 예를 들면, 글리신의 경우에 있어서 R이 수소원자이고, 알라닌의 경우에 있어서 R이 메틸기이고, 발린의 urddn에 있어서 R이 이소프로필기이고, 페닐 알리닌의 경우에 있어서 R이 벤질기이고, 시스테인의 경우에 있어서 R이 메프갑토메틸기이다. 프롤린의 환원된 형태는 하기 구조식의 알코올이다.
Figure kpo00001
본 명세서에서, 그의 알코올 유도체로 환원된 아미노산은 3문자(또는 다른 단축형) 또는 1문자 코드에 -올 붙여서 약자로 표시한다. 예를 들며, Ala-올 또는 A-올은 카르복실산 부분이 대응하는 알코올로 환원된 알라닌을 의미하고, Leu-올 또는 L-올은 카르복실산 부분이 대응하는 알코올로 환원된 로이신을 의미한다.
알킬기 및 알콕시기의 알킬 부분은 직쇄, 분지쇄, 또는 시컬릭 알킬기, 예를 들면, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, tert-부틸, 펜틸, 이소펜틸, sec-펜틸, 시클로펜틸, 헥실, 이소헥실, 시클로헥실 및 시클로펜틱메틸기를 포함한다. 2내지 10개의 탄소 원자를 갖는 아실기는 1개의 기에 대해서 1또는 2개의 카르보닐 부분을 갖는 직쇄, 분지쇄, 시클릭, 포화 및 불포화 아실기, 예를 들면, 아세틸, 벤조일 숙시닐, 말레일 및 글루타릴기를 포함한다. 할로겐기는 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오드기이다.
본 명세서에서 사용된 용어 임의 아미노산은 아미노 치환체를 가지는 임의카르복실산을 포함하는 것을 의미하기 보다는 오히려 폴리펩티드 유도체의 기술분야의 당업자들에 의해서 흔히 사용되는 것이고, 천연 아미노산, 및 천연 펩티드의 합성 유사체를 제조하는 경우에 펩티드 화학 기술 분야에 잇는 사람들에 의해 통상 이용되는 기타 비단백질 α-아미노산을 포함한다. 천연 아미노산은 글리신, 알라닌, 발린, 로이신, 이소로이신, 세린, 메티오닌, 트레오닌, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 시스테인, 프롤린, 시스티딘, 아스파르트산, 아스파라긴, 글루탐산, 글루타민, 아르기닌, 오르니틴 및 리신이다. 비단백질 α-아미노산의 예로는 노프로이신, 노르발린, 알로이소로이신, 호모아르기닌, 티아프롤린, 데히드로프롤린, 히드록시프로린(Hyp), 호모세린, 시클로헥실 글리신(Chg), α-아미노-n-부티르산(Aba), 시클로헥실 알라닌(Cha), 아미노페닐부티르산(Pba), 페닐 부분의 오르토, 메타, 또는 파라위치에 하기의 치환기, 즉(C1-C4)알킬, (C1-C4)알콕시, 할로겐 또는 니트로기중 1개 또는 2개로 치환되거나, 또는 메틸렌디옥시기로 치환된 페닐 알라닌, β-2- 및 3-티에닐알라닌, β-2- 및 3-푸라닐알라닌, β-2-3- 및 4-피리딜알라닌,β-(벤조티에닐-2- 및 3-일)알라닌, β-(1 및 2-나프틸)알라닌, 세린, 트레오닌 또는 티로신의 0-알킬화 유도체, S-아칼화 시스테인, 티소신의 0-술페이트 에스테르, 3,5-디요오드티로신 및 쳔연 아미노산의 D-이성질체가 있다.
용어 친지성 아미노산은 Tyr, Phe, Leu, Met, Nle, Ile, Val, His 및 Pro를 포함한다.
글리신을 제외한 천연 아미노산들은 키랄 탄소 원자를 함유한다. 특별히 달리 기재하지 않는 한, 여기서 언급된 광학적으로 활성인 아미노산들은 L-배열의 아미노산들이다. 예를들면, A1또는 A10기의 아미노산들 중 어느 것이나 D- 또는 L-배열의 아미노산이 될 수 있다. 관례에 따라서, 본 명세서에 기재된 펩티드의 구조는 아미노 말단의 끝이 사슬의 왼편에 있고, 카르복시 말단의 끝이 사슬의 오른쪽편에 있는 구조이다.
일반식 1의 폴리펩티드는 임의의 비독성, 유기 또는 무기산으로 제약상 허용되는 염을 형성할 수 있다. 적합한 염을 형성하는 예시적인 무기산으로는 염산, 브롬화 수소산, 황산, 인산, 및 오르토인산 일수소나트륨 및 황산수소칼륨과 같은 산 금속염이 포함된다. 적합한 염을 형성하는 예시적인 유기산으로는 모노, 디, 트리카르복실산이 포함된다. 상기 산의 예로서 아세트산, 글리콜산, 락트산, 피루브산, 말론산, 숙신산, 글루타르산, 푸마르산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 말레산, 히드록시말레산, 벤조산, 히드록시벤조산, 페닐아세트산, 신남산, 살리실산, 2-페녹시벤조산, 및 메탄술폰산 및 2-히드록시에탄 술폰산과 같은 술폰산을 들수 있다. 카르복시 말단 아미노산 부분의 염으로는 임의의 적합한 무기 또는 유기염기로 형성된 비독성 카르복실산염이 포함된다. 예로서, 상기 염은 알칼리금속(예, 나트륨, 칼륨), 알칼리토금속(예, 칼슘, 마그네슘), 알루미늄을 포함한 IIIA 족의 경금속, 및 유기 일급, 이급 및 삼급 아민(예, 트리에틸 포함한 트리알킬아민, 프로카인, 디벤질아민, 1-에텐아민, N,N'-디벤질에 틸렌디아민, 디히드로아비에틸아밍, N-(저급)알킬 피페리딘 및 기타 적합한 아민)의 염을 들수 있다.
화학적 화합물의 일반적인 기와 같이 특정기들이 적합하다. 본 발명에서는 X가 수소 원자, 아세틸 또는 숙시닐기인 일반식 1의 펩티드 유도체가 적합하다. 또한, 다음과 같이 정의 되는 일반식 1의 화합물이 적합하다. 즉,
A1은 Thr-Pro-Lys-Pro-Gln-Ser-His-Asn-Asp-Gly-Asp-,
-Ser-Thr-Pro-Asn-Pro-Glu-Ser-His-Asn-Asn-Gly-Asp-,
-His-Asn-Asp-Gly-Asp-,
-Asn-Asp-Gly-Asp-,
-Asp-Gly-Asp-,
-Gly-Asp-,
-Asp-, 또는 결합이고,
A2는 Phe ,β-2 또는 3-티에닐알라닌, Tyr, Trp, Npa 또는 pClPhe이고,
A3는 Glu이고,
A4는 Glu, Asp, Pro 또는 Ala이고,
A5는 Ile, Leu 이고,
A6는 Pro, Sar, D-Ala, Hyp 또는 NMePg1이고,
A7는 Glu, Gln, Asp 또는 Ala 이고,
A8는 Glu, Asp 또는 Ala이고,
A9는 Pro, Ala-Tyr, Ala-Cha, Tyr-Cha, Tyr-Leu, Ala-Phe, Tyr-Tyr이고,
A10-올은 Glu-올, Asn-올, Pro-올, Gln-올, Ala-올, D-Lys-올, Lys-올, D-Asp-올, Orn-올 또는 Asp-Glu-올이다.
일반식 1의 펩티드 유도체 중 특히 적합한 것은 다음과 같이 정의되는 것이다.
X는 아세틸기이고, A1은 Gly-Asp 또는 Asp이거나,
X는 숙시닐기이고, A1은 결합이고, 여기서
A2는 Phe, β-(2-티에틸알라닌) 또는 Tyr이고,
A3는 Glu이고,
A4는 Glu 또는 Pro이고,
A5는 Ile이고,
A6는 Pro이고,
A7은 Glu이고,
A8은 Glu 또는 Asp이고,
A9는 Try-Leu, Ala-Tyr, Tyr-Tyr, Ala-Phe, Ala-Cha 또는 Pro이고,
A10-올은 Ala-올, Gln-올, Asp-올, Pro-올, D-Asp-올, D-Lys-올, D-Glu-올 또는 -Asp-Glu-올이다.
본 발명은 단백질은 당업자에게 공지된 다양한 방법으로 용이하게 제조할 수 있다. 이런 방법들로서 고상 연속 및 블록 합성, 유전자 크로닝 및 이들 방법들의 조합이 포함된다. 고상 연속 방법은 확립된 자동화 방법, 예를들면 자동화 펩티드 합성기를 상용하여 행할 수 있다. 이 방법에서, 펩티드는 끝에서 두 번째 C-말단이 보호된 아미노산으로 시작되는 수지로 형성되었다. 사용되는 수지 지지체는 폴리펩티드의 고상 제조를 위해 이 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 수지 지지체는 폴리펩티드의 고상 제조를 위해 이 기술 f분야에서 통상적으로 사용되는 적합한 수지라면 어느 것이라도 사용할 수 있으며, 적합하기로는 0.5 내지 약 3% 디비닐벤젠으로 가교시킨 폴리스티렌이고, 이 폴리스티렌을 클로로메틸화시키거나 또는 히드록시메틸화시켜서 초기에 도입시킨 α-아미노보호 아미노산과 에스테를를 형성하기 위한 부위를 제공해준다. 서열의 커플링 반응을 종료시킨 후에, Boc 보호기를 그대로 두거나 또는 이 보호기를 제거하며, N-말단 아미노기를 아실화시켰다. 수지에서 보호 단편의 제거는 적당한 아미노 알코올을 사용해서 달성했다.
히드록시메틸 수지의 예는 보단스즈끼(Bodanszky) 등의 논문 Chem. Ind(런던), 제38호 1597-1598페이지(1966년)에 기재되어 있다. 클로로메틸화 수지는 캘리포니아주 리치몬드시에 소재하는 바이오 래드 연구소(Bio Rad Laboratories)에서 입수할 수 있으며, 이와 같은 수지의 제조는 스트와르트(stewart) 등의 논문 Solid Phase Peptide Synthesis(Freeman Co., San Francisco 1969), 제1장, 1-6페이지에 기재되어 있다. 상기 보호 아미노산은 기신(Gisin)의 Helv, Chem Acta, 제56호 1476페이지(1973년)에 기재된 방법으로 수지에 결합시킬수 있다. 수지에 결합된 많은 보호 아미노산들은 상업적으로 구입할 수 있다. 예로서, 카르복시말단 끝이 Thr 잔기인 본 발명의 폴리펩티들를 제조하기 위하여 벤질화 히드록시 메틸화시킨 페닐아세트아미도메틸(PAM) 수지에 결합된 tert-부틸옥시카르보닐(Boc) 보호 Thr이 사용될 수 있고, 이것은 상업적으로 구입할 수 있다.
수지 지지체에 α-아미노 보호 아미노산을 커플링시킨 후, 보호기를 적합한 방법, 예를 들며, 염화멜틸렌 중의 트리플루오로 아세트산, 트리풀루오로 아세트산 단독, 또는 디옥산증의 HCI을 상용하여 제거한다. 이 보호기 제거는 0℃ 및 실온 사이의 온도에서 행했다. 특정한 α-아미노 보호기를 제거하기 위하여 다른 표준 절단 시약 및 조건들이 사용될 수 있다. α-아미노 보호기를 제거한 후, 다른 아미노 보호 아미노산들은 소정의 순서로 단계적으로 커플링시켰다. 다른 방법으로서, 복수개의 아미노산기들을 수지로 지지시킨 아미노산 서열과 커플링시키기 전에 용액법으로 커플링시킬 수 있다.
폴리펩티드 서열로 도입된 각 아미노산과 함께 사용되는 α-아미노 보호기로서는 이 기술분야에 공지된 이와 같은 보호기들 중 어느 것이라도 좋다. 예기된 α-이미노 보호기의 부류 중에 다음과 같은 것들을 열거할 수 있다. (1)아실형 보호기, 예를 들면, 포프밀, 트리플루오로아세틸, 프탈릴, 톨루엔술포닐(토실), 벤젠술포닐, 니트로페닐술포닐, 트리틸술페닐, O-니트로페녹시아세틸 및 α-클로로부틸릴, (2) 방향족 우레탄형 보호기, 예를 들면 벤질옥시카르보닐 및 치환 벤질 옥시카르보닐[예,p-클로로벤질옥시카르보닐, p-니트로벤질옥시카르보닐, p-브로모벤질옥시카르보닐, p-메록시벤질옥시카르보닐, 1-(p-비페닐릴)-1-메틸에로시카르보닐, α.α-디메틸-3-5-디메록시벤질옥시카르보닐 및 벤즈히드릴 옥시카르보닐], (3) 지방족 우레탄 보호기, 예를들면 tert-부틸옥시카르보닐(Boc), 디이소프로필메톡시카르보닐, 이소프로필옥시카르보닐, 에톡시카르보닐 및 알릴옥시카르보닐, (4) 시클로알킬 우레탄형 보호기, 예를 들면 시클로펜틸옥시카르보닐, 아다만틸옥시카르보닐 및 시클로헥실옥시카르보닐, (5) 티오 우레탄형 보호기, 예를 들면 페닐 티오카르보닐, (6) 알킬형 보호기, 예를 들면 트리페닐메틸(트리틸) 및 벤질, 및 (7) 트리알킬시란기, 예를 들면 트리메틸실란, 이들 중 α-아미노보호기로서 적합한 것은 tert-부티옥시카르보닐이다.
적합한 커플링제는 당업자가 용이하게 선택할 수 있다. 부가되는 아미노산이 Gln, Asn 또는 Arg인 커플링제 중 특히 적합한 것은 N,N-디이소프로필카르보디이미드 및 1-히드록시-벤조트리아졸이다. 이 커플링제를 사용함으로써 니트릴 및 락탐 형성을 방지해준다. 기타 커플링제로서 (1) 카르보디이미드(예, N,N-디시클로헥실카르보디이미드 및 N-에틸-N'-(Y디메틸아미노프로필카를보이미드) (2) 시안아미드(예, N,N-디벤질시안아미드) 3) 케테이민, (4)이소사졸륨염(예, N-에틸-5-페닐-이속사졸륨-3'-슬포네이트), (5) 이미다졸리드, 피라졸리드 및 1,2,4-트리아졸리드와 같은 고리중에 1 내지 4개 질소를 함유하는 방향족 특성의 헤테로 시클릭 아미드를 함유하는 모노시클릭 질소. 유용한 헤테로시클릭 아미드 중 구체적인 것으로, N,N'-카르보닐디이미다졸 및 N,N-카르보닐- 디 1,2,4-트리아졸을 포함한다(6) 알콕시화 아세틸렌(예, 에톡시아세틸렌(7)) 아미노산의 카르복실 부분과 환합 무수물을 형성하는 시약(예, 에틸클로로포를메이트 및 이소부틸클로로포르메이트) 또는 커플링되는 아미노산의 대칭 무수물(예, Boc-Ala-O-Ala-Boc) 및 (8) 1개의 고리 질소에 히드록실기를 갖는 헤테로시클릭 화합물을 함유하는 질소(예, N-히드록시프탈이미드, N-히드록시숙신이미드 및 1-히드로시벤조트리아졸)가 있다. 펩티드 결합에 있어서 기타 활성화제 및 그의 용도는 카푸르(Kapoor)의 논문, J. Pharm. Sci. 제59호, 제1-27페이지(1970년)에 기재되어 있다. 본 발명에서는 Arg, Asn 및 Gln을 제외한 모든 아미노산의 커플링제로서 대칭 무수물을 사용하는 것이 적합하다.
각개의 보호 아미노산 또는 아미노산 서열을 고상 반응기에 약4배 과량으로 도입하고, 커플링은 디네틸포름 아미드: 염화메틸렌(1:1), 또는 디메틸포름아미드 단독, 또는 적합하기로는 염화메틸렌 단독의 매질중에서 행했다. 불완전한 커플링 발생하는 경우에는, 고상 반응기 중에서 다음 아미노산을 컬플링시키기 전에, 커플링 과정을 α-아미노 보호기를 제거하기 전에 반복해서 행했다. 합성의 각 단계에서의 커플링 반응의 성공을 카이저(E. Kaiser)등의 논문, Analyt. Biochem. 34호, 595페이지(1970년)에 기재된 바와 같은 닌히드린 반응으로 모니터하였다.
목적하는 아미노산 서열을 얻은후, 수지에서 펩티드를 제거하였다. 이것은 폴리 펩티드가 결합한 수지를 탄소말단 아미노 알코올 잔기, 아세는산 및 디크로로메탄(DCM)으로 처리하는 것과 같은 가수분해에 의해 행할 수 있다.
고상 펩티드 합성의 기술 분야에서 공지된 바와 같이, 아미노산 중 대부분은 사슬 제조 동안 보호를 필요로 하는 관능기를 갖는다. 적합한 보호기의 사용 및 선택은 이 당업자들이 용이하게 결정할 수 있으며, 이것은 보호되는 아미노산 및 펩티드 상의 다른 보호 아미노산 잔기들의 존재에 의존한다. 이와 같은 측쇄 보호기의 선택은 중요한데, 여기서 이것은 α-아미노 부분의 보호기의 절단중 절단에 의해 제거되지 않는 것이어야 한다.
예를들면, 리신에 대한 적합한 측쇄 보호기는 벤질옥시카르보닐 및 치환 벤질옥시카르보닐[여기서, 치환체는 할로(예, 클로로, 브로모, 플루오로) 및 니트로(예, 2-클로로벤질옥시카르보닐, p-니트로벤질옥시카르보닐, 3-4-디클로로벤질옥시카르보닐) 중에서 선택됨], 토실, t-아밀옥시카르보닐, t-부틸옥시카르보닐 및 디이소프로필 메로시카르보닐이 있다. 트레오닌 및 세린의 알코올성 히드록실기는 아세틸, 벤조일, tert-부틸, 트리틸, 벤질, 2,6-디클로로벤질 또는 벤질옥시카르보닐기로 보호시킬 수 있다. 이중 적합한 보호기는 벤질기이다.
이 기들은 이 기술분야에서 공지된 방법으로 제거시킬 수 있다. 전형적으로 보호기 제거는 펩티드 사슬 합성이 종료된 후 행하지만, 보호기 제거는 다른 적당한 시간에서 제거시킬 수 있다.
본 발명의 알코올 펩티드 유도체의 항응고제의 복용량은 0.2㎎/㎏-250㎎/㎏(체중)/일이고, 이 복용량은 환자, 치료될 혈전증의 상태의 심도, 선택된 펩티드 유도헤체 따라 달라진다. 특정 환자에 대한 적합한 복용량은 용이하게 결정할 수 있다. 적합하기로는, 1일 내지 4일 복용을 전형적으로 1회 복용당 활성 화합물 5㎎내지 100㎎으로 투여할 수 있다. 보존전혈(stored whole blood)과 같은 체외 매질에 있어서의 혈액응고의 억제 또는 예방에 필요한 본 발명의 펩티드 알코올 양은 당업자에 의해 용이하게 결정할 수 있다.
항응고제 치료는 각종 혈전증 질환, 특히 관상 동맥 및 대뇌혈관계 질병의 치료 및 예방에 중요하다. 이 분야에 경험이 많은 사람들은 항응고제 치료에 요구되는 상세한 사항을 잘 알고 있다. 본 명세서에서 사용되는 용어 환는 사람을 포함한 영장류, 양, 말, 소 돼지, 개, 고양이, 주 및 마우스와 같은 포유류를 의미한다. 혈액 응고의 억제는 혈전증 질환을 가진 개개인들의 항응고 치료에 유용할 뿐만 아니라, 혈액 응고의 억제가 요구된 경우, 예를 들면 보존 전혈의 응고 예방 및 검사 또는 보관을 위한 생물학적 시료의 응고 예방의 경우에도 유용하다.
펩티드 유도체 중 일부가 경구투여 후 장기를 통한 통과에서 잔존할 수 있다할지라도, 본 발명의 펩티드 유도체는 비경구 투여, 예를 들면 피하, 정맥내, 근육내 또는 복강내 투여, 저장소 주사에 의한 투여, 삽입식 제제물, 점막에 적용, 예를 들면 코, 후두 및 기관지관의 경우에 본 발명의 펩티드 유도체를 넣은 에어로졸 캔을 사용하여 분부형 또는 건조 분말형으로 투여하는 것이 적합하다.
비경구 투여에 있어서, 상기 화합물은 물 및 오일과 같은 멸균액이 될 수 있는 제약학적 담체와 함께 계면활성제 및 기타 제약상 허용되는 보조약을 첨가하거나 또는 첨가하지 않은 생리학적으로 허용되는 희석제 주의 화합물의 용액 또는 현탁액의 주사 가능한 투여양으로 투여할 수 있다. 이 제제물에 사용될수 있는 오일의 예는 석유 동물성유, 식물성유, 또는 합성원, 예를 들면 낙화생유, 대두유, 공유를 들 수 있다. 일반적으로, 물 염수, 수용성 덱스트로오스 및 관련 당용액, 에탄올 및 글리콜(예, 프로필렌글리콜 또는 폴리에틸렌글리콜)이 적합한 액체 담체이고, 특히 주사액에 적합하다.
상기 화합물들은 유효 성분의 지속성 방출을 허용하는 방식으로 제제할 수 있는 저장소 주사 또는 삽입식 제제물 형태로 투여할 수 있다. 유효성분은 펠릿트제 또는 소형 실린더형 약제로 압착시킬 수 있으며, 저장소 주사 또는 삽입물과 같이 피하 또는 근육내로 삽입시킬 수 있다. 삽입물은 미생물로 분해시킬 수 있는 중합체 또는 합성 실리콘(예를 들면, Silastic, Dow-Corning Corporation)에 의해 제조된 실리콘고무)과 같은 불활성 물질을 사용할 수 있다.
본 발명을 하기 비제한 실시예에 의해 설명한다.
실시예 1.
탄소말단 펩티드 알코올의 제조
펩티드를 데그라도(Degrado)와 카이저(Kaiser)의 노문(J. Org. Chem. 45호,1295-1300페이지(1980년))에 기재된 방법에 의해 제조된 p-니트로벤즈히드릴리덴이소니트로소수지(오심 수지)를 상용하여 합성하였다. 옥심 수지(0.54g, 0.52밀리몰/0.97 밀리몰/g치환)를 응용 바이오 시스템 모델 430A 펩티드 합성기의 용기에 넣었다. Boc-보호 아미노산을 그의 대칭 무수물과 같이 2배 과량으로 연속해서 단일 커플링시켰다. 이용되는 축쇄 보호는 다음과 같다. 즉 Asp(Chx), Glu(B키), 각 사이클에 대한 하기 실험 계획안을 얻기 위해 상기합성기의 프로그램을 기재하였다.
(1) 미리 제조한 대칭 무수물 1밀미몰을 첨가.
(2) DIEA 5% 부가 용적을 첨가.
(3) 1시간 동안 와동시킴.
(4) 배수.
(5) DGM으로 세척(5회/1분).
(6) DCM 중 20% TFA로 세척(1분).
(7) DCM 중에서 20% TFA로 15분동안 처리
(8) DCM (3회/0.5분)으로 세척.
(9) 이소프로판올로 세척(4분).
(10) 세척(3회/0.5분)
(11) 이소프로판올로 세척(4분)
(12) DCM으로 세척(3회/0.5분)
(13) 이소프로판올로 세척(4분).
(14) 세척(3회/0.5분).
합성 종료 후 수지를 진공중에서 건조시켰다. 이어서, 수지를 DCM중에서 알라닌올을 2당량(초기 수지 치환을 기준) 및 아세트산 1당량으로 실온에서 20시간 동안 처리하였다. 수지를 여과하였다. 여액을 동결 건조시켰다. 잔류물을 2% 아니졸을 함유하는 액체 HF로 5℃에서 30분동안 처리하였다. 아세토니트릴을 사용해서 추출하고, 동결건조시켰다. 잔류물을 아세토니트릴/0.1% TFA시스템을 사용하여 예비 HPLC(Dynamax C18 21.4 ×150 ㎜ 컬럼)으로 정제하였다. 이 방법으로 얻은 펩티드는 FAB-MS에 의한 목적하는 분자 이온 피크를 나타냈고, 목적하는 펩티드에 따라서 아미노산 분석치를 가졌다. 이 방법으로, 상기 특성들을 갖는 하기 펩티드를 제조했다.
1) SucFEPIPEYL-올
MW 1092.6 FAB-MS (MH) + 1094.0tR17.53
E2801573 펩티드 함유율 79.8%
Glx(2) Pro(2) Ile(1) Tyr(1) Phe(1)
2.08 1.01 0.94 0.99 0.98
2) SucFEPIPEEYChaA-올
MW 1332.7 FAB-MS (MH) + 1333.4tR20, 2 min
E2801755 펩티드 함유율 73%
Glx(3) Pro(2) Ile(1) Tyr(1) Phe(1) Chr(1)
3.04 2.03 0.92 1.00 0.97 0.95
3) SucFEPIPEEYL-올
MW 1221.6 FAB-MS (MH) + 1222.8tR16.83
E2801686 펩티드 함유율 72.1%
Glx(3) Pro(2) Ile(1) Tyr(1) Phe(1)
3.09 1.98 0.92 0.97 1.00

Claims (27)

  1. 하기 일반식의 알코올 펩티드 유도체 X-A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10-올 상기식 중에서, X는 수소원자, 아세틸기 또는 숙시닐기이고, A1은 결합이거나, 또는 Asp 또는 Gly-Asp이고, A2는 Phe, Tyr 또는 Trp이고, A3는 Gul 또는 Asp이고, A4는 Glu, Pro 또는 Ala이고, A5는 Ile, Leu, Val 또는 Phe이고, A6는 Pro, Hyp, NMePgl 또는 D-Ala 또는 Sar이고, A7은 Glu, Ala 또는 Gl32n이고, A4는 Glu, Pro 또는 Ala이고, A5는 Ile, Leu, Val 또는 Phe이고, A6는 Pro, Hyp, NMePgl 또는 D-Ala 또는 Sar이고, A7은 Glu, Ala 또는 Gln이고, A8은 Glu, Asp 또는 Ala이고, A9는 Tyr-Leu, Thr-Cha, Leu, Ala-Phe, Ala-Cha, Ala-Leu 또는 Cha-Leu이고, A10-올은 탄소 말단 아미노산이 그의 알코올 유도체로 환원된 Gln-올, Pro-올, Ala-올, 결합-올, Lys-올, D-Lys-올, Glu-올, Asp-올, Asn-올, Asp-Glu-올, D-Glu-올 또는 D-Asp-올에서 선택되는 환원된 펩티드 단편이다.
  2. 제1항에 있어서, A2가 Phe 또는 Tyr인 알코올 펩티드 유도체.
  3. 제1항에 있어서, A3가 Glu인 알코올 펩티드 유도체.
  4. 제1항에 있어서, A4가 Glu, Ala 또는 Pro인 알코올 펩티드 유도체
  5. 제1항에 있어서, A5가 Ile인 알코올 펩티드 유도체.
  6. 제1항에 있어서, A6가 Pro인 알코올 펩티드 유도체.
  7. 제1항에 있어서, A7가 Glu, 또는 Ala 알코올 펩티드 유도체
  8. 제1항에 있어서, A8가 Glu, 또는 Asp인 알코올 펩티드 유도체
  9. 제1항에 있어서, A9이 Try-Leu, Ala-Try 또는 Ala-Cha 인 알코올 펩티드 유도체
  10. 제1항에 있어서, A10-올이 Gln-올, Asp-올, Pro-올, Asn-올, Asp-Glu-올, Glu-올, Ala-올, D-Lys-올, Lys-올, D-Asp-올, 또는 D-Glu-올인 알코올 펩티드 유도체.
  11. 제1항에 있어서, X가 수소원자, 아세틸 또는 숙시닐인 알코올 펩티드 유도체
  12. 제1항에 있어서, A1이 Gly-Asp, Asp 또는 결합인 알코올 펩티드 유도체.
  13. 제1항에 있어서, H-Gly-Asp-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Try-Leu-Gln-올인 알코올 펩티드 유도체
  14. 제1항에 있어서, Suc-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-올인 알코올 펩티드 유도체
  15. 제1항에 있어서, H-GLy-Asp-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Asp-Ala-Tyr-Asp-Glu-올인 알코올 펩티드.
  16. 제1항에 있어서, Suc-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Pro-올인 알코올 펩티드 유도체.
  17. 제1항에 있어서, Suc-Phe-Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-올인 알코올 펩티드 유도체.
  18. 제1항에 있어서, Suc-Phe-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-Gln-올인 알코올 펩티드 유도체.
  19. 제1항에 있어서, Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Phe-D-Lys-올인알코올 펩티드 유도체.
  20. 제1항에 있어서, Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Tyr-Lys-올인 알코올 펩티드 유도체.
  21. 제1항에 있어서, Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Cha-Lys-올인 알코올 펩티드 유도체.
  22. 제1항에 있어서, Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Cha-Lys-올인 알코올 펩티드 유도체.
  23. 제1항에 있어서, Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Phe-Glu-올인 알코올 펩티드 유도체.
  24. 제1항에 있어서, Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Phe-Gln-올인 알코올 펩티드 유도체.
  25. 제1항에 있어서, Suc-Tyr-Glu-Pro-Ile-Pro-Glu-Glu-Ala-Cha-Asp-올인 알코올 펩티드 유도체.
  26. 매질을 항응고 유효량의 제1항 내지 제12항 및 제15항 내지 제27항중 어느 한 항 기재의 알코올 펩티드와 접촉시키는 것으로 되는 매질 중에서 혈액응고를 감소 시키는 시험관 내 (in vitro) 방법.
  27. (a) A9아미노산에 대응하는 적당히 보호시킨 아미노산을 활성화 수지 지지체에 결합시키고, (b) 카르복시로부터 아미노 말단 단부, A8내지 A1의 순서로 다른 알파 아미노 보호 아미노산을, 그의 아미노 보호기가 제거되어 노출된 성장하는 펩티드 사슬의 말단 아미노 단부체 연속해서 결합시키고,(c) 최종적으로 펩티드를 결합시킨 수지를 디클로로메탄 중에서 A10-올에 대응하는 카르복시 말단 아미노 알코올 2당량 및 아세트산 약 1당량으로 처리하여 수지에서 펩티드를 방출시키고, 이와 동시에 카르복시 말단 펩티드 알코올을 펩티드에 결합시킴을 특징으로 하는 하기 일반식의 펩티드 알코올 유도체의 제조방법. X-A1-A2-A3-A4-A|5-A6-A7-A8-A9-A10-올 상기식 중에서, X는 수소원자, 아세틸기 또는 수시닐기이고, A1은 결합이거나, 또는 Asp 또는 Gly-Asp이고, A2는 Phe, Tyr 또는 Trp이고, A3는 Glu 또는 Asp이고, A4는 Glu, Pro 또는 Ala이고, A5는 Ile, Leu, val 또는 Phe이고, A6는 Pro, Hyp, NMePgl, D-Ala 또는 Sar이고, A7은 Glu, Ala 또는 Gln이고, A8은 Glu, Asp 또는 Ala이고, A9는 Tyr-Leu, Tyr-Cha, Leu, Ala-Tyr, Ala-Phe, Ala-Cha, Ala-Leu 또는 Cha-Leu이고, A10-올은 탄소 말단 아미노산이 그의 알코올 유도체로 환원된 Gln-올, Pro-올, Ala-올, 결합-올, Lys-올, D-Lys-올, Glu-올, Asp-올, Asn-올, Asp-Glu-올, D-Glu-올 또는 D-Asp-올에서 선택되는 환원된 펩티드 단편이다.
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Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU633128B2 (en) * 1987-01-23 1993-01-21 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Anticoagulant peptides
US5196404B1 (en) * 1989-08-18 1996-09-10 Biogen Inc Inhibitors of thrombin
US5240913A (en) * 1989-08-18 1993-08-31 Biogen, Inc. Inhibitors of thrombin
US6060451A (en) * 1990-06-15 2000-05-09 The National Research Council Of Canada Thrombin inhibitors based on the amino acid sequence of hirudin
US5574012A (en) * 1990-07-24 1996-11-12 Merrell Pharmaceuticals Inc. Analogs of hirudin having anti-platelet activity
JP3111075B2 (ja) * 1990-07-24 2000-11-20 メレルダウファーマスーティカルズ インコーポレイテッド 抗凝固ペプチド
AU640502B2 (en) * 1990-07-24 1993-08-26 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Analogs of hirudin having antiplatelet activity
US5242810A (en) * 1990-12-07 1993-09-07 Biogen, Inc. Bifunctional inhibitors of thrombin and platelet activation
CN1124964A (zh) * 1993-06-11 1996-06-19 默里尔药物公司 三功能抗凝血酶和抗血小板的肽
GB9426038D0 (en) 1994-12-22 1995-02-22 Iaf Biochem Int Low molecular weight bicyclic thrombin inhibitors
US6057314A (en) * 1995-12-21 2000-05-02 Biochem Pharma Inc. Low molecular weight bicyclic thrombin inhibitors

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3438296A1 (de) * 1984-04-18 1985-11-07 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Neue polypeptide mit blutgerinnungshemmender wirkung, verfahren zu deren herstellung bzw. gewinnung, deren verwendung und diese enthaltende mittel
CA1341032C (en) * 1987-01-23 2000-06-20 John L. Krstenansky Anticoagulant peptides
CA1328540C (en) * 1987-05-21 1994-04-12 John L. Krstenansky Cyclic anticoagulant peptides
CA1340646C (en) * 1987-05-21 1999-07-13 John L. Krstenansky Cyclic anticoagulant peptides

Also Published As

Publication number Publication date
KR900018138A (ko) 1990-12-20
PH26973A (en) 1992-12-28
FI892222A (fi) 1989-11-11
PT90504B (pt) 1994-08-31
EP0341607B1 (en) 1994-07-20
AU626070B2 (en) 1992-07-23
HUT51295A (en) 1990-04-28
EP0341607A3 (en) 1991-03-27
FI892222A0 (fi) 1989-05-09
DK226889D0 (da) 1989-05-09
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JP2916164B2 (ja) 1999-07-05
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NO891894L (no) 1989-11-13
AU3451789A (en) 1989-11-16
NO891894D0 (no) 1989-05-09
DE68916850D1 (de) 1994-08-25
DE68916850T2 (de) 1994-10-27
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