JPH01303152A - 止血材およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、Ｎ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合
材からなる生体適合性の浸れた医用材料およびその製造
法に関し、詳しくは、ｎ１傷カバー材、人工皮膚、人工
血管また。は止血材などに応用することのできる医用材
料およびその製造法に関する。

〔、技術の背景および従来技術の説明〕キトサンは、キ
チンを１アルカリの脱アセチル化処理によって得られる
Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンとＤ−グルコサミンか
らなる複合多糖類であって、脱アセチル化の程度によっ
てＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンとＤ−グルコサミン
の比率の種々異なったものが知られている。

コラーゲンは生体の結合組繊の主要成分であり、細胞の
基質として最も適しているために、生体適合性が極めて
優れている材料である。コラーゲンは蛋白質であるため
に異種間のインブラントにおいては抗原性が問題になる
が、コラーゲンの抗原性は比較的低いので、コラーゲン
は化粧品または医用材料として広く使用されている。さ
らにトロボコラーゲン（コラーゲン分子）をコラゲナー
ゼを除く蛋白質加水分解酵素で処理し、分子末端の非ヘ
リックス部分（テロベプタイド）を除去したものは抗原
性が極めて低く、アテロコラーゲンと呼ばれる。アテロ
コラーゲンは、その低伍原性のために、現在使用されて
いる医用材料のうちで、その生体適合性が最も優れてい
るなどの際だった特徴を有するが、コラーゲンを生体に
適用したときにコラーゲンはいずれ生体に吸収され、ま
たキトサンに比べて高価であるために、その使用範囲が
限定される。

キトサンとコラーゲンの特徴を生かして、それぞれの欠
点を補なうために、キトサン−コラーゲン複合材料が知
られている。（特開昭５６−１３３３４４号公報） しかしながらキトサンは生体に存在しない多糖類であり
、生体にとって明らかに異物であるので、これをそのま
ま生体に適用すると、コラーゲンに比べて大きな異物反
応が起り、光学顕微鏡では、キトサンの周囲に多くの巨
細胞が観察される。このように、キトサン単独では、医
用材料としての応用が困難であり、またコラーゲンを加
えて生体適合性を向上する方法も未だ不充分であって、
キトサンの臨床的な実用化に到っていない。

本発明者らは、キトサンおよびコラーゲンについて永年
にわたって研究を続けてきたが、キトサンを化学的に修
飾してキトサン誘導体、すなわちＮ−アシルキトサン、
としたものは医用材料として充分に使用できることを見
出し、さらにこれらのキトサン誘導体とコラーゲンを組
合せると、臨床的に実用しうろことを見出し、これらの
知見に基づいて本発明に到達した。

〔発明の目的および発明の要約〕

本発明の目的は、生体適合性を有し、臨床的に実用可能
なキトサン誘導体を提供することにあり、詳しくは、こ
れらのキトサン誘導体およびコラーゲンの生体適合性を
有し、臨床的に実用可能な複合材を提供することにある
。

本発明は、Ｎ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合
材からなる医用材料である。

本発明のＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材
におけるコラーゲンは、コラーゲン単体またはコラーゲ
ンを化学的に修飾したコラーゲン誘導体のいずれであっ
てもよい。

本発明のＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材
からなる医用材料は、Ｎ−アシルキトサンおよびコラー
ゲンの複合材の溶液、分散液またはゲルを凍結乾燥して
スポンジ状に加工する方法、またはＮ−アシルキトサン
およびコラーゲンの複合材を成形して、フィルム状また
は膜状に加工する方法によって製造される。

本発明のＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材
におけるＮ−アシルキトサンは、キトサンのアミノ基を
炭素数１〜３２の飽和または不飽和脂肪酸、および／ま
たは炭素数２〜８のジカルボン酸で修飾したキトサン誘
導体であることができ、またこのＮ−アシルキトサンは
Ｎ−アセチルキトサンまたはＮ−サクシニルキトサンで
あることもできる。

本発明のＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材
におけるコラーゲンは、サクシニル化コラーゲン、アセ
チル化コラーゲンまたはメチル化コラーゲンであること
ができる。

本発明のＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材
にコンドロイチン、コンドロイチン−４−硫酸、デルマ
タン硫酸、コンドロイチン−６−硫酸、ヒアルロン酸、
フィブロネクチン、フィブリン、上皮細胞増殖因子およ
びＱ維芽細胞増殖因子のＩＮまたは２種以上を含ませた
ものは、創傷治癒にすぐれた効果を有していて、人工皮
膚および創傷カバー材としての応用に適しており、Ｎ−
アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材にヘパリンを
含ませたものはすぐれた抗血栓性を有していて、血管壁
に塗布したりまた人工血管としての応用に適しており、
さらにＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材に
プロタミンを含ませたものはすぐれた血液凝固作用を有
していて、止血材としての応用に適している− さらに本発明の医用材料において、スポンジ状に加工さ
れたＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材また
は基体に塗布されたものを、二官能性の栗鵬剤で処理す
るかまたは放射線の照射によって架構することもできる
。そしてこれをさらに滅菌して使用に供することもでき
る。

〔発明の詳細な説明〕

本発明の°Ｎ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合
材におけるＮ−アシルキトサンは、キトサンをアシル化
することによって得られるが、Ｎ−アシルキトサンの調
製に使用するキトサンは、キチンを儂アルカリによる脱
アセチル化して得られたものであって、酸に診解するも
のであれば、いかなるものであっても、これを使用する
ことができるが、脱アセチル化度が少なくとも４５％で
あるものを使用するのが好ましい。

Ｎ−アシルキトサンは、キトサンをカルボン酸無水物と
反応させて、キトサンのＮ−アシル化を行なうことによ
ってｔＡｎされるが、キトサンにコラーゲンを加えた後
に、キトサンのＮ−アシル化を行なうことによって調製
することもできる。

本発明のＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材
におけるコラーゲンは、コラーゲンおよびコラーゲンに
化学的な処理を１したコラーゲン誘導体のいかなるもの
であっても、これを使用することができるが、生体適合
性を向上したアテロコラーゲンまたはコラーゲンを化学
的に修飾して生体適合性を向上したコラーゲンを使用す
ることもできる。たとえばコラーゲンをコハク酸無水物
で処理したサクシニル化コラーゲンは批血栓性に浸れて
おり、またコラーゲンを無水メタノールで処理したメチ
ル化コラーゲンは、血小板との反応を増大するなどのそ
れぞれに特信の特性を有するので、その特性に応じて目
的に適った医用材料を得ることができる。

コラーゲンの化学的修飾は、コラーゲンと反応剤との反
応によって行なわれるが、コラーゲンをＮ−アシルキト
サンに加えた後に行なうこともできる。そしてコラーゲ
ンの化学的修飾を行なう反応剤がカルボン酸無水物であ
る場合は、キトサンにコラーゲンを加えて得た複合材料
をカルボン酸無水物と反応させてキトサンのＮ−アシル
化とコラーゲンの化学的修飾を同時に行なうこともでき
る。

コラーゲンの化学的修飾は、主としてコラーゲンのアミ
ノ基またはカルボキシル基に対して行なわれるが、コラ
ーゲンのアミノ基またはカルボキシル基に対して５〜１
００％（好ましくは３０〜１００％）の化学的修飾を施
すのが好ましい。

本発明のＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材
に、コンドロイチン、コンドロイチン−４＝硫酸、デル
マタン硫酸、コンドロイチン−６−硫酸またはヒアルロ
ン酸を加えることによって医用材料に保水性を付与する
ことができる。これらのムコ多［５は皮膚などに含まれ
ていて、水分の保持に重要な役割を果しており、たとえ
ば、本発明の医用材料を創傷の治療に応用する場合に、
創傷部の乾燥を防ぐなどの効果がある。

また本発明のＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複
合材にフィブロネクチンまたはフィブリンを加えること
によって創傷部の修復を促進することができる。

さらに本発明のＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの
複合材にヘパリンまたはプロタミンを加えることによっ
て血液との反応を制御することができる。

生体適合性を向上するには、生体に近い医用材料を造る
ことが必要であって、これまでに説明した化学的修飾や
生体の有用成分の添加は、この点において目的に適って
いる。

本発明の医用材料は、以上に説明したＮ−アシルキトサ
ンおよびコラーゲンの複合材の溶液、分散液またはゲル
を乾燥することによって造られるが、前記の複合材の溶
液または分散液をガラス板などの基体の表面に塗布した
後乾燥すると、フィルム状または膜状の医用材料を由る
ことができ、また前記の複合材料を凍結乾燥すると、ス
ポンジ状の医用材料を造ることができる。

本発明のＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材
の医用材料を二官能性の架橋剤で処理するか、または放
射線を照射することによって架濡し、それによって医用
材料の強度や吸水性を向上することができる。

医用材料の架１における二官能性の架橋剤は、二以上の
官能基を有するものであれば、いかなるものであっても
、これを使用することができるが、ヘキサメチレンジイ
ソシアネートまたはグルタルアルデヒドを使用するのが
好ましい。二官能性の架橋剤は、予めＮ−アシルキトサ
ンおよびコラーゲンの複合材の溶液または分散液に加え
、フィル膜状、膜状またはスポンジ状に成形した後に架
１反応をさせることもできるが、Ｎ−アシルキトサンお
よびコラーゲンの複合材をフィルム状、膜状またはスポ
ンジ状に成形した後、成形品を架槁剤の溶液に浸漬する
か、あるいは成形品に放射線を照射し、それによって架
橋反応を行なわせることもできる。放射線としては、紫
外線、ガンマ線またはアルファ線などの粒子線のいかな
るものであっても、これを使用することができるが、紫
外線またはガンマ線を使用するのが好ましい。

本発明のＮ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材
の医用材料は、フィルム状、膜状またはスポンジ状の成
形品の形で使用されるが、それ以外の医用材料と組合わ
せて使用することもできる。

フィルム状、膜状またはスポンジ状の成形品の形におい
て使用する例として創傷カバー材、人工皮膚、止血材ま
たは癒着防止膜としての使用があり、また他の医用材料
と組合せて使用する例としては、合成高分子材料でつく
られた人工血管やカテーテルの内面や外面のコーティン
グとしての使用がある。このような合成高分子の医用材
料のコーティングとして使用するには、Ｎ−アシルキト
サンおよびコラーゲンの複合材の溶液に合成高分子の医
用材６を浸漬した後乾燥する方法、Ｎ−アシルキトサン
およびコラーゲンの粘ちょうな音波または分散液を合成
高分子の医用材料に室毎した後乾燥する方法、または乾
燥以前に、カルボン酸焦水物または他の反応剤と複合材
を反応させて、化学的な処理を行なった後に乾愚する方
法がある。このような本発明のＮ−アシルキトサンおよ
びコラーゲンの複合材を他の医用材料と組合わせたもの
は、その表面が本発明のＮ−アシルキトサンおよびコラ
ーゲンの複合材によって被覆されており、乾燥して得ら
れた医用材料の表面はフィルム状または膜状であり、さ
らに凍結乾燥して得られた医用材料の表面はスポンジ状
であって、その生体適合性は向上したものとなっている
。

以下において、実施例により本発明をさらに詳細に説明
するが、本発明はこれらの例に限定されるものではない
。

実施例　１ （キトサンの調製） 紅ズワイガニの甲殻の粉砕品２００１１を５％塩酸２７
！に入れて、室温において、５時間撹拌した後、溶液を
濾過し、残さの固形物を水洗した。この固形物を５％水
酸化ナトリウム水溶液２７！に入れ、撹拌しながら９０
℃に２．５時間加熱した後、溶液を濾過し、残さの固形
物を水洗した。

ここに得られたキチンを５０％水酸化ナトリウム水溶液
２ｔに入れ、撹拌しなから９０’Ｃに２．５時間加熱し
た後、溶液を濾過し、沈降した固形物を充分に水洗し、
そして９５℃において乾燥し、脱アセチル化度９９％の
キトサン４Ｉ９を得た。

（アテロコラーゲンの調製） 新鮮な子牛の真皮を微細に粉砕し、この微細粉１００　
ｇを０．１Ｍ酢酸ナトリウム水溶液で繰り返し洗浄した
後、水洗した。ここに得られた微細粉ｌｏｇに０．５Ｍ
酢酸水溶液４ｔを加え、５°Ｃにおいて３日間撹拌した
後、沈デンした不溶性コラーゲンを濾別した。この不溶
性コラーゲンｌＯｇを０．１Ｍ酢酸＋００−に入れ、ペ
プシン（シグマ社製品、ｌ　：　６０．０００）　　０
．０１１１を加えて、２０°Ｃにおいて３日間撹拌し、
それによってアテロコラーゲン（ペプシン可溶化コラー
ゲン）溶液を得た。このアテロコラーゲン溶液をガラス
フィルターで濾過し、得られた濾液に水酸化ナトリウム
水音波を加えて、そのｐＨを７．５に調整し、それによ
って繊維状の沈デンが生成した。この沈デンの生成した
液を７，０００　Ｇ　、　８．００Ｏｒｐｍにおいて遠
心分離し、得られた沈デンを蒸沼水で３回洗浄して、ア
テロコラーゲン７ｇを得た。

（Ｎ−アセチルキトサン−アセチル化コラーゲンスポン
ジの調製） 上記で得た脱アセチル化度９９％のキトサン１８ｇ（０
，１２モル）に上記で得たアテロコラーゲン２ｇを混合
し、この混合物２０．９１を２％酢酸水溶液１／に溶解
した後、これをメタノール２Ｉ！で希釈した。この溶液
に無水酢酸２４ｇ　（キトサンのへキソサミニル残基当
り２モル当量に相当する）を混合し、−夜室温に放置し
て流水に浸漬し、酢酸とメタノールを除いて、Ｎ−アセ
チルキトサンおよびアセチル化コラーゲンの複合体の水
和ゲル３５０〜３８０ｇを得た。このゲルを入れた金属
製の容器をドライアイス−メタノール液５１に浸して急
速に凍結し、その後０．２ｘｘＨｇの真空において凍結
乾燥を行ない、Ｎ−アセチルキトサン−アセチル化コラ
ーゲンスポンジ２０ｇを得た。

（創傷カバー材の調製） Ｎ−アセチルキトサン−アセチル化コラーゲンスポンジ
をヘキサメチレンジイソシアネートの２％メタノール溶
Ｍ１０１に浸し、架橋を導入した。

２時間後に、Ｎ−アセチルキトサン−アセチル化コラー
ゲンスポンジを取り出し、メタノールおよび水でよく洗
浄した後、これを０．２　ＩＩＩ　ｌ１ｇの真空におい
て凍結乾燥した。ここに得られたスポンジを１鰭の厚さ
にスライスして、創傷カバー材を得た。

この創傷カバー材をヒトの創傷部に適用したところ［ｖ
Ｈな治癒過程が観察された。

実施例　２ （Ｎ−サクシニルキトサンの調製） 実施例１のキトサン２ｇを５％酢酸水溶液４０耐に溶解
した後、これを１６０ｍ１のメタノールで希釈した。こ
れとは別にコハク酸無水物１．４ｇ　（キトサンのアミ
ノ基１モルに対して０．９８モルに相当する）をアセト
ン５０−に溶解し、得られたコハク酸無水物のアセトン
溶液の全量を前記のキトサン溶液に加え、−夜装置した
。沈デン物を濾過した後、乾ＱしてＮ−サクシニルキト
サンの粉末２ｇを得た。このＮ−サクシニルキトサンの
アミノ基の修飾率は３５％であった。

（サクシニル化コラーゲンの調製） コラーゲン２ｇを濃塩酸１．６−と水＋００　ｄの混合
液に溶解し、撹拌しながら、これに５Ｎ水酸化ナトリウ
ム水溶液を徐々に加えて、ｐＨを１３に調整した。

これとは別にコハク酸無水物０．０７ｇ〈コラーゲンの
側鎖のＣ−アミノ基１モルに対して１モルに相当する）
をアセトン１０艷に溶解し、その全量を前記のコラーゲ
ン溶液に徐々に加えた後、５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液
でｐｌ＋を常に１３に調整しながら、−夜撹拌した。沈
デン物を濾過し、充分に水洗した後、乾燥してサクシニ
ル化コラーゲン２ｇを得た。このサクシニル化コラーゲ
ンのε−アミノ基の修飾率は３０％であった。

（人工血管の調製） 上記で得たＮ−サクシニルキトサン０．９ｇおよびサク
シニル化コラーゲン０．１．９を水＋００−に溶解し、
これに表面をプラズマ処理したダクロン製人工血管（内
径６ＩＬ１１１長さ５ｃｒｎ）を浸漬し、取り出した後
風乾した。この操作を２０回繰り返した後、このダクロ
ン製人工血管をｐＨ１３に調整したグルタルアルデヒド
の１％水溶液に１時間浸漬して架構を導入した。このダ
クロン製人工血管を充分水洗した後、風乾して、表面が
Ｎ−サクシニルキトサンとサクシニル化コラーゲンの混
合物のフィルムからなる人工血管を得た。

この人工血管を生体に植え込んだが、良好な抗血栓性を
示した。

実施例　３ （Ｎ−サクシニル−Ｎ−オクタノイルキトサンとサクシ
ニル化コラーゲン混合物の調製）実施例２のＮ−サクシ
ニルキトサン９ｇおよびサクシニル化コラーゲン１ｇを
水５００−に溶解し、これをメタノール２１で希釈した
。この溶液にオクタン酸無水物（カプリル酸無水物）２
２ｇ　（キトサンのへキソサミニル残基当り２モル当量
に相当する）を加え、これを−夜室温にｔ署し、Ｎ−サ
クシニル−Ｎ−オクタノイルキトサンとサクシニル化コ
ラーゲン混合物の溶液を得た。

（医用材料フィルムの調ｍ） このＮ−サクシニル−Ｎ−オクタノイルキトサンとサク
シニル化コラーゲン混合物のｍＭをガラス板上に塗布し
た後風乾してＮ−サクシニル−Ｎ−オクタノイルキトサ
ンとサクシニル化コラーゲン混合物のフィルム（厚さ０
．Ｉｔｓ＋）とし、これに紫外線を照射して架橋を導入
した。

このフィルムをＷ１着防止膜として腹膜に応用したとこ
ろ癒着は全くみられず、良好な結果を示した。

実施例　４ （メチル化コラーゲンの調製） 実施例１のアテロコラーゲン２ｇを無水メタノールの塩
酸酸性溶液１２に２週間浸漬して、コラーゲンの側鎖の
カルボキシル基をメチル化し、メチル化コラーゲン２ｇ
を得た。

（スポンジの調製） 実施例１のキトサン１８ｇに、前記で得たメチル化コラ
ーゲン２ｇおよび市販の硫酸プロタミン〔和光純薬（株
）ａｌｌｉ品〕　１ｇを混合し、得られた混合物を２％
酢酸水溶液ｌｔに溶解した。これをメタノール４１で希
釈し、これに無水酢酸２４ｇ（キトサンのへキソサミニ
ル残基当り２モル当量に相当する）を混合し、混合液を
一夜室温で放置して、Ｎ−アセチルキトサン、メチル化
コラーゲンおよびプロタミンの混合ゲル５に９を得た。

このゲルを０．２　ｍ　ＨＨの真空において凍結乾燥し
て、Ｎ−アセチルキトサン−メチル化コラーゲン−プロ
タミンのスポンジを得た。

このスポンジを厚さ５朋にスライスした後、５メガラド
のガンマ線を照射してスポンジに架橋を導入９、滅菌を
行なった。

ここに得たスポンジを止血材として外科手術に使用した
ところ、止血材として擾れた効果を示した。

実施例　５ 実施例３で得たＮ−サクシニル−Ｎ−オクタノイルキト
サンとサクシニル化コラーゲン混合物の溶液を真空乾燥
（０，１ｔｏｒｒ）　Ｌ／、Ｎ−サクシニル−Ｎ−オク
タノイルキトサンとサクシニル化コラーゲン混合物の粉
末！Ｏｇを得た。この粉末１０１を水５０−に溶解し、
これにコンドロイチン−４−硫酸００１ｇ、デルマタン
硫酸０．１，９、ヒアルロン酸ｏ、ｏｓ　ｇ　、フィブ
ロネクチン０．０００１　ｇおよびフィブリン０．００
１　Ｅｌを加え、溶液をホモジナイザーで撹拌した。こ
の溶液を０．２　ｔｏｒｒにおいて真空凍結乾燥し、得
られたスポンジ状の乾燥物を２％へキサメチレンジイソ
シアネート（メタノール溶液）に浸漬した後、引き上げ
てメタノールでよく洗浄した。これを再び０．２　ｔｏ
ｒｒにおいて真空乾燥した後、１龍の厚さにスライスし
た。このスポンジ〔２０１ＩＩＩ×２０ｊＩｊ＋×１＃
１厘（厚さ）〕の中にラット皮膚の線維芽細胞を植え付
け、３７°Ｃにおいて２！Ｊ４間培養して細胞を組み込
んだ人工皮膚を得た。ここに得られた人工皮膚をラット
の背部の皮膚が完全に欠損した部分に移植し、その人工
皮膚の上に表皮の小片を移植したところ、表皮が再生し
、完全な治癒が観察された。

実施例　６ 実施例１で得たＮ−アセチルキトサンとアセチル化コラ
ーゲンのゲル５ｇに実施例４で得たメチル化コラーゲン
１ｇおよび水１００ｍｊ！を加えよく分散した後、ＩＮ
塩酸でｐＨを３に調整した。この溶液にプロタミン１ｇ
を加え、溶解した後、この溶液をテトロンのメツシュに
塗布し、これを２５″Ｃにおいて乾燥した。溶液の塗布
と乾燥を１０回繰り返し、テトロンのメツシュにＮ−ア
セチルキトサン、アセチル化コラーゲン、メチル化コラ
ーゲンおよびプロタミンの複合材をフィルム状に塗布し
た剣傷カバーせを得た。この創傷カバー材に１．５メガ
ラドのガンマ線を照射して、架橋と滅菌を行ない、医療
用の粘着テープにより皮膚の創傷面に留めたところ、創
傷部の出血を抑えて創傷部を保護し、創傷は良好な治癒
を示した。

実施例　７ （人工血管の調製） 実施例２で得たＮ−サクシニルキトサン０．９ｇ、実施
例２で得たサクシニル化コラーゲン０．１１９およびヘ
パリン２０■を水１００−に溶解し、これを実施例２と
同様にして人工血管を製造した。この人工血管は批血栓
性のすぐれたものであった。

〔発明の効果〕

本発明のキトサン誘導体とコラーゲンの複合材料からな
る医用材料は、優れた生体適合性を有するから、生体に
使用しても、抗原性が問題にならず、安全に使用するこ
とができ、各種誘導体の組合せにより創傷カバー材や人
工皮膚として使用した場合は、創傷面の治癒を促進し、
血栓性または仇血栓性を付与したものは、止血材または
人工血管として使用することができ、優れた効果を示す
。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）Ｎ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材、
   ならびにプロタミンからなる複合材料からつくられたこ
   とを特徴とする止血材。 （２）Ｎ−アシルキトサンが、キトサンのアミノ基を炭
   素数１〜３２の飽和または不飽和脂肪酸、および／また
   は炭素数２〜８のジカルボン酸で修飾したものであるこ
   とを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の止血材。 （３）Ｎ−アシルキトサンが、キトサンをアシル化して
   得たＮ−アセチルキトサンであることを特徴とする特許
   請求の範囲第１項に記載の止血材。 （４）Ｎ−アシルキトサンが、Ｎ−サクシニルキトサン
   であることを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の
   止血材。 （５）コラーゲンが、サクシニル化コラーゲンであるこ
   とを特徴とする特許請求の範囲第１項ないし第４項のい
   ずれかに記載の止血材。 （６）コラーゲンが、アセチル化コラーゲンであること
   を特徴とする特許請求の範囲第１項ないし第４項のいず
   れかに記載の止血材。 （７）コラーゲンがメチル化コラーゲンであることを特
   徴とする特許請求の範囲第１項ないし第４項のいずれか
   に記載の止血材。 （８）複合材料が、スポンジ状に加工されたものである
   ことを特徴とする特許請求の範囲第１項ないし第７項の
   いずれかに記載の止血材。 （９）複合材料が、フィルム状に加工されたものである
   ことを特徴とする特許請求の範囲第１項ないし第７項の
   いずれかに記載の止血材。 （１０）Ｎ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材
   、ならびにプロタミンからなる複合材料の溶液を凍結乾
   燥して、スポンジ状に加工することを特徴とする止血材
   の製造法。（１１）Ｎ−アシルキトサンが、キトサンを
   アセチル化して得たＮ−アセチルキトサンであることを
   特徴とする特許請求の範囲第１０項に記載の止血材の製
   造法。 （１２）Ｎ−アシルキトサンが、Ｎ−サクシニルキトサ
   ンであることを特徴とする特許請求の範囲第１０項に記
   載の止血材の製造法。 （１３）コラーゲンが、サクシニル化コラーゲンである
   ことを特徴とする特許請求の範囲第１０項ないし第１２
   項のいずれかに記載の止血材の製造法。 （１４）コラーゲンが、アセチル化コラーゲンであるこ
   とを特徴とする特許請求の範囲第１０項ないし第１２項
   のいずれかに記載の止血材の製造法。 （１５）コラーゲンが、メチル化コラーゲンであること
   を特徴とする特許請求の範囲第１０項ないし第１２項の
   いずれかに記載の止血材の製造法。 （１６）スポンジ状に加工された複合材料を、二官能性
   の架橋剤で処理することを特徴とする特許請求の範囲第
   １０項ないし第１５項のいずれかに記載の止血材の製造
   法。 （１７）スポンジ状に加工された複合材料を、放射線で
   架橋処理した後、滅菌処理することを特徴とする特許請
   求の範囲第１０項ないし第１５項のいずれかに記載の止
   血材の製造法。 （１８）Ｎ−アシルキトサンおよびコラーゲンの複合材
   、ならびにプロタミンからなる複合材料の溶液を基体に
   塗布した後、乾燥することを特徴とする止血材の製造法
   。 （１９）Ｎ−アシルキトサンが、キトサンをアセチル化
   して得たＮ−アセチルキトサンであることを特徴とする
   特許請求の範囲第１８項に記載の止血材の製造法。 （２０）Ｎ−アシルキトサンが、Ｎ−サクシニルキトサ
   ンであることを特徴とする特許請求の範囲第１８項に記
   載の止血材の製造法。 （２１）コラーゲンが、サクシニル化コラーゲンである
   ことを特徴とする特許請求の範囲第１８項ないし第２０
   項のいずれかに記載の止血材の製造法。 （２２）コラーゲンが、アセチル化コラーゲンであるこ
   とを特徴とする特許請求の範囲第１８項ないし第２０項
   のいずれかに記載の止血材の製造法。 （２３）コラーゲンが、メチル化コラーゲンであること
   を特徴とする特許請求の範囲第１８項ないし第２０項の
   いずれかに記載の止血材の製造法。 （２４）基体に塗布された複合材料を、二官能性の架橋
   剤で処理することを特徴とする特許請求の範囲第１８項
   ないし第２３項のいずれかに記載の止血材の製造法。 （２５）基体に塗布された複合材料を、放射線で架橋処
   理した後、滅菌処理することを特徴とする特許請求の範
   囲第１８項ないし第２３項のいずれかに記載の止血材の
   製造法。