JPH01281098A

JPH01281098A - 光学活性カルボン酸及び光学活性カルボン酸エステルの製造方法

Info

Publication number: JPH01281098A
Application number: JP10753688A
Authority: JP
Inventors: Michio Ito; 美智夫伊藤; Yoshinori Kobayashi; 良則小林
Original assignee: Daicel Chemical Industries Ltd
Current assignee: Daicel Corp
Priority date: 1988-05-02
Filing date: 1988-05-02
Publication date: 1989-11-13

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、各種医農薬の合成中間体として極めて有用な
、光学活性カルボン酸及び光学活性カルボン酸エステル
の製造方法に関する。

（従来技術及び発明が解決しようとする課題）従来、光
学活性２−ヒドロキシカルボン酸および光学活性２−ヒ
ドロキシカルボン酸エステルの製造方法として、光学活
性なセリンから光学活性なグリシド酸を経て合成する方
法（特開昭６２−２１２３２９＞や、２−ゲ１へ−４フ
エニル酪酸誘導体の化学的不斉還元による方法（ＥＰ２
０６９９３）等が知られている。

しかしながら、これらの方法は高価な光学活性化合物を
原料としたり、反応工程が長く複雑であったり、必ずし
も工業的に潰れた方法とは言い難い。

このため、経済的に優れ、かつ、簡便な手段で光学純度
の高い光学活性２−ヒドロキシカルボン酸及び光学活性
２−ヒドロキシカルボン酸エステルを得る方法の確立が
望まれている。

（課題を解決するための手段）本発明者らは経済的に優れ、かつ、簡便な方法で、光学
純度の高い光学活性２−ヒドロキシカルボン酸及び光学
純度２−ヒドロキシカルボン酸エステルを得る方法とし
て、安価なラセミ体の２−ヒドロキシカルボン酸エステ
ルを原料とした酵素による製造方法に着目し、この目的
に適した酵素を得ることを目的に鋭意研究した結果、シ
ュードモナス属、タロモバクテリウム属、およびキャン
ディダ属の生産するリパーゼが、極めて効率良く２−ヒ
ドロキシカルボン酸エステルを不斉加水分解し、本発明
の目的を達成することを見出だし、本発明を完成するに
至った。

即ち、本発明は式（Ｉ）で表される２−ヒドロキシカル
ボン酸エステルに、これを不斉加水分解する能力を有す
る酵素を作用させ、生成する式＜ＩＩ）で表される光学
活性２−ヒドロキシカルボン酸と、残存する反対の光学
活性を有する式（Ｉ）で表される光学活性２−ヒドロキ
シカルボン酸エステルとを分離採取することを特徴とす
る光学活性カルボン酸及び光学活性カルボン酸エステル
の製造方法を提供するものである。

本発明で用いられる式（Ｉ）で表される２−ヒドロキシ
カルボン酸エステルに於いてＲで表されるアルキル基の
具体例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イ
ソプロピル基、ベンジル基等を挙げることができる。ま
た、基本骨格を成す２−ヒドロキシカルボン酸の具体例
としては、マンデル酸、フェニル乳酸、２−ヒドロキシ
−４−フェニル酪酸、２−ヒドロキシ−５−フェニル吉
草酸、２−ヒドロキシ−６−フェニルヘキサン酸等を挙
げることができる。

また、本発明において基質として用いられる２−ヒドロ
キシカルボン酸エステルは、ラセミ体に限定されるもの
ではなく、本発明は該基質の（Ｒ）体、（Ｓ）体の混合
比率がいかなるものにも適用できる。

本発明で用いることのできるリパーゼとしては、シュー
ドモナス属、タロモバクテリウム属、あるいはキャンデ
ィダ属に属する微生物の生産するりバーゼで本発明の目
的を達し得るものあればどのようなものでも良いが、好
適な例としては、シュードモナス・フルオレッセンス（
Ｐ　５ｅｄｏｎｏｎａｓ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ　）
　、クロモバクティラム・ビスコサム（Ｃｈｒｏｌｏｂ
ａｃｔｅｒｉｕｍ　ｖｉｓｃｏｓｕｎ　）　、キャンデ
ィダ・シリンドラセア（Ｃａｎｄｉｄａ　ｃｙｌ　１ｎ
ｄｒａｓｅａ）由来のリパーゼか挙げられる。これらの
リパーゼは、それを生産する微生物を培養することによ
って得られるが、その使用形態は、菌体培養液そのまま
、粗酵素、精製酵素として等、限定されるものではない
、また、シュードモナス・フルオレッセンス（Ｐ　５ｅ
ｄｏＩｌｏｎａｓ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ　）由来の
らのはリパーゼＰ「アマノＪ　（大野製薬製）として、
クロモバクティラム・ビスコサム（ＣｈｒｏＩｌｏｂａ
ｃｔｅｒｉｕｍ　ｖｉｓｃｏｓｕＩｌ）由来のものはリ
パーゼ（東洋醸造型）として、キャンディダ・シリンド
ラセア（Ｃａｎｄｉｄａ　ｃｙｌｉｎｄｒａｓｅａ）由
来のものはリパーゼＯＦ＜名糖産業製）として市販され
ており、これらを利用することは好ましい。

これらのリパーゼは、それぞれ単独でも、あるいは必要
に応じて混合して用いることもできる９また、これらを
常法により固定化して用いることらできる。

加水分解反応を行うに際しては、反応液のＰＨを使用す
る酵素の１ｎｐＨに合わせて行うのが好ましく、このた
めには、適当な緩衝液を用いても良いし、水酸化ナトリ
ウム、水酸化カリウム等の水溶液を用い、Ｔ）　ｌ−１
スタツ）〜により反応中のｐＨをコントロールしても良
い。反応温度も用いる酵素により異なるが、通常、１０
〜６０°Ｃの範囲、好ましくは、２５〜５０°Ｃで行わ
れる。反応液中の基質濃度は、通常、０．１〜５０％、
好ましくは、５〜３０％で行われる。また、反応液中の
酵素濃度は、市販品を用いる場合それぞれの酵素標品の
酵素活性に応じて決めることかできるが、例えば０．１
〜１０％を例示することかできる。反応は、攪拌下、あ
るいは静置下いずれの方法でも行うことができるが、好
ましくは撹拌下で行われる。反応終了後は、反応液に適
当な有ｔｌｌ溶剤、例えば、酢酸エチル等を加え、生成
物を抽出した後、常法により、蒸溜あるいは、カラムク
ロマトグラフィー等により精製することがで゛きる。

以下、本発明を実施例を挙げて説明するが、本発明はこ
れらの実施例により限定されるものではない。

（実施例１）直径２１ｍの試験管に表１に示すリパーゼ００２ｇを収
り、ＩＭリン酸ｙ１衝液（ｐＨ７，５）２ｍ＋、２−ヒ
ドロキシー４−フェニル酪酸エチルエステル０．５ｇ及
び水６　ｍｌを加え、３０℃で２時間’ｆＡ盪した０反
応終了後、反応液に６Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を加え
ｐＨを９〜１０に調整した後、残存する２−ヒドロキシ
−４−フェニル酪酸エチルエステルを酢酸エチル５　ｍ
ｌで２回抽出した。

この酢酸エチル層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後
、無水ＶＡ酸ナトリウムで乾燥した後、光学異性体分離
カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー（カラム：
ダイセル化学工業製キラルセルＯＢ、ｉ媒：ｎ−ヘキサ
ン／２−プロパノ−ルー１９：１）により反応生成物を
分析、定量し、反応収率、絶対配置及び光学純度を求め
た。

得られた結果を表１に示す。

（以下余白）表　　　　　　　　１（実施例２）リパーゼの使用数を０．０１ｇにした以外は実５施例１
の場合と全く同様にして２４時間酵素反応を行った。反
応終了後、実施例１の場合と同様にして残存する２−ヒ
ドロキシ−４−フェニル酪酸エチルエステルを抽出した
。また、残った水層については、ａ硫酸を加えｐＨを１
以下にした後、生成物を＃酸エチル５　ｍｌで２回抽出
した。この酢酸エチル層は飽和塩化ナトリウム水溶液で
洗浄後、無水硫酸す１〜リウムで乾燥した０次いで、常
法により、硫酸とエチルアルコールによりエチルエステ
ル化した後、実施例１と同様にして分析定量を行った。

得られた結果を表２に示す。

（以下余白）（発明の効果）本発明の光学活性２−ヒドロキシカルボン酸及び光学活
性２−ヒドロキシカルボン酸エステルの製造方法は、簡
便に光学純度の高い光学活性２−ヒドロキシカルホン酸
及び光学活性２−ヒドロキシカルボン酸エステルを！８
！造する事を可能にさせるしのであり、工業的に極めて
有利である。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒは置換基を有する、あるいは有しないアルキル
基、ｎは０〜４の整数を表す）で表される２−ヒドロキシカルボン酸エステルに、これ
を不斉加水分解する能力を有する酵素を作用させ、生成
する式（II） ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中ｎは０〜４の整数を表す）で表される光学活性２−ヒドロキシカルボン酸と、残存
する反対の光学活性を有する式（ I ）で表される光学
活性２−ヒドロキシカルボン酸エステルとを分離採取す
ることを特徴とする光学活性カルボン酸及び光学活性カ
ルボン酸エステルの製造方法。
（２）光学活性２−ヒドロキシカルボン酸が（Ｓ）−２
−ヒドロキシカルボン酸である請求項（１）に記載の製
造方法。
（３）酵素がシュードモナス（Ｐｓｅｄｏｍｏｎａｓ）
属、クロモバクテリウム（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ）属、あるいはキャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属
の生産するリパーゼである請求項（１）に記載の製造方
法。