JPH01279840A - 新規外用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔発明の背景〕 技術分野 本発明は、新規な外用組成物に関する。さらに詳細には
、本発明は、成長因子、その構成成分の一部に相当する
ペプチド、これらの誘導体、またはこれらの塩（以下「
成長因子等」ということがある。）と蛋白分解酵素阻害
作用を有する化合物とを実質的な有効成分とする外用組
成物に関するものである。

先行技術 成長因子（Ｇｒｏｗｔｈ　ｆ’ａｃｔｏｒ）とは、ｒｉ
ｎｖｉｖｏまたはｔｎ　ＶｉｔｒＯにおいて動物細胞の
成長を促進するものであって栄養物質でないもの」であ
り、（Ａｎｎ、　Ｒｅｖ、　Ｂｌｏｃｈｅｍ、、　４５
．５３１−５５８（１９７Ｂ））　、従来のホルモンや
その担体なども成長因子の範鴎に入る。

このような因子は、現在、約４０８類知られており、主
な成長因子としては、例えばインスリン族に分類される
もの（インスリン、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−Ｉ
、ＩＣＦ−ｎ等）、乳腺刺激因子（Ｍ　Ｓ　Ｆ　＞）、
神経成長因子（Ｎ　Ｇ　Ｆ　））等）、上皮細胞成長因
子族（上皮成長因子族ともいう）に分類されるもの（上
皮細胞成長因子（（上皮成長因子とも言う、ＥＧＦ）、
トランスフォーミング成長因子類（ＴＧＦ　　、ＴＧＦ
β、ＴＧＦ７等）、α 血小板由来成長因子族に分類されるもの（血小板由来成
長因子（（Ｐ　Ｄ　Ｇ　Ｆ　））　、骨肉腫由来成長因
子（ＯＤ　Ｇ　Ｆ　））、繊維芽細胞成長因子（Ｆ　Ｇ
　Ｆ　））等）、その他（コロニー形成刺激因子（（Ｃ
Ｓ　Ｆ　））、Ｔ細胞増殖因子、腫瘍血管新生因子（Ｔ
　Ａ　Ｆ　））、ＤＮＡ合成促進因子（Ｄ　Ｓ　Ｆ　）
、腫瘍由来細胞成長因子類、繊維芽細胞由来成長因子（
Ｆ　Ｄ　Ｇ　Ｆ　））等）がある。

これらの成長因子のうち、上皮細胞成長因子はヒトや馬
の尿中からも、ウサギ、ラットおよびマウスの顎下腺か
らも単離され、哺乳動物中にその種を越えて存在してい
ることが知られている（Ａｄｖ、　Ｍｃｔａｂ、　Ｄｌ
ｓ、＋　８．２６５（１９７５）、特開昭５６−２５１
１２号公報等〕。なかでも、ヒト上皮細胞成長因子（ｈ
ｕ＠ａｎ　Ｅｐｉｄｅｒｓａｌ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｆａｃ
ｔｏｒ：１１ＥＧＰ）は、１９７５年にコーエン（Ｓ、
　Ｃｏｈｅｎ）らにより人尿中からＱｊ離された上皮組
織の増殖角化を促進するヒト由来の因子として紹介され
（Ｐｒｏｃ。

Ｎａｔ　Ｉ　、＾ｃａｄ、　Ｓｅｔ、　ＵＳＡ、　７２
．１３１７（１９７５））　、また同年グレゴリ−（Ｈ
，Ｇｒｅｇｏｒｙ）らによって人尿中から単離された胃
酸分泌抑制作用をもつヒトウロガストロン（ｈｕｓａｎ
　Ｕｒｏｇａｓｔｒｏｎｅ：ｈ−ＵＧ）として紹介され
た（Ｎａｔｕｒｅ、　２５７．３２５（１９７５））ポ
リペプチドと同一物質であって、分子量が約６０００で
５３残基のアミノ酸によりなっていてその分子中に３本
のジスルフィド結合を有するポリペプチド〔代謝、１７
．５１〜５８（１９８０））であるということが現在わ
かっている（以下上皮細胞成長因子をＥＧＦと記す）。

そして、ＥＧＦの生理活性および薬理活性として現在ま
でに報告されているものは、胃酸分泌抑制作用（Ｃｕｔ
、Ｉ６．１８７７（１９７５）　、Ｉｄｌｄ、、２３．
９５１（１９８２））　、抗潰瘍作用（Ｇｕｔ、２２．
９２７（１９８１）、Ｂｒ１ｄ。

Ｊ、Ｓｕｒｇ、、８４Ｊ３０（１９７７））　、消化管
粘膜保護作用〔特開昭６０−９６８６号明細書）、ＤＮ
Ａ合成促進作用（Ｇｕｔ、２２．９２７（１９８１）、
Ｊ、Ｐｈｙｓｌｏｌ、、　３２５　。

３５（１９８２））　、角膜修復作用〔特開昭５９−６
５０２０号公報〕、カルシウム遊離促進作用（Ｅｎｄｏ
ｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、１０７．２７０（１９８０））　
、創傷治癒促進作用（Ｐｌａｓｔ、　Ｒｌｃｏｎｓｔｒ
、　Ｓｕｒｇ、、　６４，７６６（１９７９）、Ｊ、　
Ｓｕｒｇ、　Ｒｅｓ、、３３．１８４（１９８２））　
、抗炎症作用（特開昭６０−１１５７８４号公報）、お
よび鎮痛作用（特開昭６０−１１５７８５号公報）等が
ある。

ところで、創傷または熱傷（火傷も含む）は、軽い症状
であっても、治癒の遅れ等により、症状を重くし、後遺
症（主に傷跡）、ショック症状あるいは合併症等を誘発
するケースが増えている。

そこで、上記成長因子、特にＥＧＦをこの分野に応用し
、直接外傷部分の皮膚新生を促し、創傷冶癌を促進させ
る試みがなされている（特開昭５９−５０１９０５、特
開昭５９−６５０２０、特開昭６０−２３３２５、特開
昭６１−５００６及びＷＯ〜８６１０２２７１号公報参
照）。

しかしながら、該因子単独では、外傷（特に創傷あるい
は熱傷）に対する治癒効果は、さほど著しいものではな
く、実用化に到ってないのが現状である。

従って、この様な問題点を解決すべく、外傷治癒作用の
強い外用剤が望まれている。

〔発明の概要〕

要旨 本発明は、上記問題を解決することを目的とし、鋭意研
究を重ねた結果、成長因子等と蛋白分解酵素阻害作用を
有する化合物とを組合せることにより、成長因子等の外
傷（創傷あるいは熱傷）に対する治癒促進作用が相乗的
に増強されることを見い出し、この知見をもとに新規な
外用組成物を完成し、これを提供することにより上記目
的を達成しようとするものである。

従って、本発明による外用組成物は、（イ）成長因子、
その構成成分の一部に相当するペプチド、これらの誘導
体またはこれらの塩と（ロ）蛋白分解酵素阻害作用を有
する化合物とを実質的な有効成分とすること、を特徴と
するものである。

効果 本発明の外用組成物は上記諸問題を解決すべく、下記の
様な利点を有するものである。

１）外傷に対して治癒効果が高く、すみやかな治療が可
能である。

従って、治癒の遅れによる傷跡、感染症あるいは合併症
等を防ぐことができる。

２）外傷による全身的な作用、例えば、体重減少、衰弱
等を予防または治療できることにより、外傷によるショ
ック症状またはそれによる死亡等を未然に防ぐことがで
きる。

〔発明の詳細な説明〕 成長因子等（成分（イ）） 本発明で「成長因子」とは、Ｉｎ　ｖｌｖｏまたはＩｎ
ＶＩｔｒＯにおいて動物細胞の成長を促進するものであ
って栄養物質でないものを指称し、従来のホルモンやそ
の担体なども成長因子の範鴫に入るということは前記し
た通りである。

成長因子には、前記したように、上皮細胞成長因子族、
インスリン族、血小板由来成長因子族などがあって、い
ずれも本発明の対象となるが、これらのうちで代表的な
のは上皮細胞成長因子族のもの、たとえば上皮細胞成長
因子（ＥＧＦ）およびトランスフォーミング成長因子類
（ＴＧＦ）ならびにインスリン族のものたとえばインス
リンやインスリン様成長因子（ＩＧＦ−１，ＩＣＦ−１
１）および血小板由来細胞成長因子族のものたとえば繊
維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）である。

本発明は、天然に存在する上記成長因子そのもののみな
らず、それらの成長因子を構成するアミノ酸の任意の置
換、アミノ酸付加もしくは欠如等の点で上記因子とは相
違するが該成長因子と同様のあるいは類似の生理活性お
よび薬理活性を有するもの、いわゆるフラグメントや誘
導体、をも包含するものである。なお、ここで、誘導体
とじて任意に置換し得るアミノ酸は、成長因子の活性を
具備し得る限りどのようなアミノ酸でもよく、置換する
アミノ酸は天然のものであっても誘導体〔アナログ（例
えばケイ光性を具備するもの、脂溶性の高いもの等）〕
であってもよい。

また、さらには、該成長因子の誘導体は、フラグメント
の誘導体をも包含するものである。フラグメントとは少
なくとも成長因子受容体との結合活性を有する部分のこ
とであってもよく、該成長因子の一部の部分構造を有す
るものである。例えば、Ｃ末端やＮ末端からアミノ酸が
１個あるいは２個以上欠けたものやあるいはＣ末端やＮ
末端及び任意の部分から切断されてできたものでアミノ
酸２個以上から成るものを包含する。

また、上記因子および上記のようなその誘導体のうちで
末端のアミノ基およびカルボキシル基を化学修飾によっ
て失っていない誘導体は、遊離のアミノ基およびカルボ
キシル基を持っているから、酸との塩および塩基との塩
でもありうる。その場合には、製剤上許容される有機な
いし無機の酸および塩基が一般に使用可能であり、具体
的には、たとえば、塩酸−硫酸、酢酸、マロン酸、コハ
ク酸、水酸化ナトリウム、アミン類などを挙げることが
できる。

誘導体は、また、種々の化学修飾を施したものを包含す
るものである。このような誘導体は、たとえば、アルキ
ル化、酸化、還元、氷解等のそれ自体公知の化学修飾ま
たはこれらの組合せによる化学修飾によって得られる。

従って、本発明は、上記成長因子そのもののみならず、
それらの一部の部分構造を有するペプチド類（フラグメ
ント）それらの誘導体ならびにそれらの塩をも包含する
ものである。

なお、これら成長因子等は、生体（具体的には、血液、
唾液、尿、涙液、母乳各組織・臓器等）より抽出したり
（成長因子やその誘導体等は、種々の方法により調製す
ることができる〔日本組織培養学会編「細胞成長因子Ｊ
　　（１９８４年朝倉書店発行）に収録されている文献
参照〕）、化学合成、または遺伝子工学的合成手法等の
任意の方法に従っても調製することができる。このよう
にして調製された成長因子等は、高純度であることが好
ましい。

このような成長因子等の代表的なものとして、上皮細胞
成長因子がある。上皮細胞成長因子は、前記したように
、ヒト・や馬などの尿中からも、ウサギ、ラットおよび
マウス顎下腺からも単離され、哺乳動物中にその種を越
えて存在していることが知られている（Ａｄｖ、　Ｍｅ
ｔａｂ、　Ｄｉｓ、、　８．２６５（１９７５）、特開
昭５６−２５１１２号公報等〕。なかでも、本発明の薬
剤をヒトに適用する場合は、前記ｈＥＧＦが好ましい。

そしてこのＥＧＦの調製には、例えば生体成分より単離
する方法〔特開昭５８−９９４１８号、同５８−２１９
１２４号、同５９−２０４１２３号公報等、特公昭４４
−１２７４４号、同５３−４５２７号、同５９−５０３
１５号、同５９−５０３１６号、同５９−４２６５０号
公報等〕や化学的に合成する方法〔特開昭５９−２７８
５８号公報等〕および遺伝子工学的手法により造成する
方法〔特開昭５７−１２２０９６号、同５８−２１６６
９７号、同５９−４２６５０号公報等］が提案されてい
る。

そして、ＥＧＦの生理活性および薬理活性として現在ま
でに報告されているものは、胃酸分泌抑制作用［Ｇｕｔ
、１８．１８８７（１９７５）　、１ｂｉｄ、　２３．
９５１（１９８２））　、抗潰瘍作用（Ｃｕｔ、２２．
９２７（１９８１）、Ｂｒ１ｔ。

Ｊ、Ｓｕｒｇ、、６４．８３０（１９７７））　、消化
管粘膜保護作用〔特開昭６０−９６８６号明細書）　、
ＤＮＡ合成促進作用（Ｇｕｔ、２２．９２７（１９８１
）、Ｊ、Ｐｈｙｓｌｏｌ、。

朋８５　（１９８２））　、角膜修復作用〔特開昭５９
−６５０２０号公報〕、カルシウム遊離促進作用（Ｅｎ
ｄｏｃｒｌｎｏｌｏｇｙ、Ｉｎ７．２７０（１９８０）
）　、創傷治癒促進作用（Ｐｌａｓｔ、Ｒｅｃｏｎｓｔ
ｒ、Ｓｕｒｇ、　、旦、７８Ｂ（１９７９）、Ｊ、Ｓｕ
ｒｇ、Ｒｅｓ、、８３．ｌ６４（１９８２））　、抗炎
症作用（特開昭６０−１１５７８４号公報）、および鎮
痛作用（特開昭６０−１１５７８５号公報）等があるこ
とは前記した通りである。

一方、ＥＧＦ誘導体としては、遺伝子工学的手法により
造成されたもの〔ヒトＥＧＦ　（ｈＥＧＦ）を構成する
５３アミノ酸残基巾Ｎ末端から２１番目をメチオニンの
かわりにロイシンとしたもの（〔Ｌｅｕ２１〕−ｈＥＧ
Ｆ　：特開昭６０−２８９９４号公報）〕が提案されて
いる。他のＥＧＦ誘導体として、ｈＥＧＦのＣ末端が２
個欠けたものであるｈＥＧＦ−１も得られている〔本発
明者らの共同研究者らによって提案された特願昭６０−
２２６３０号の明細書参照。なお、ここで本発明者らの
共同研究者らによって遺伝子工学的に調製されたｈＥＧ
Ｆは高純度（９９，９９６程度以上）であり、このよう
に高純度なものであることは成分（ロ）として好ましい
。〕。さらに他のＥＧＦフラグメントとして、ＥＧＦの
Ｃ末端が５個または６個欠けたものであるｄｅｓ−（４
９−５３）−ＥＧＦ　（ＥＧＦ　−５）　、ｄｅ　ｓ　
−（４ｇ−５３）−ＥＧＦ　（ＥＧＦ−６）［ＢＩｏｃ
ｈ−ｅｍｌｓＬｒｙ、１５．２８２４（１９７Ｂ）　　
、　Ｍｏ１．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、、　　１７゜３１４
（１９８Ｇ）　　、　ＶＩａＬｗ、Ｈｏｒｍ、、３７．
８９（１９７９）　　、　ＣｌＩｎ。

Ｒｅｓ、、　２５．３１２Ａ（１９７７）　）　、Ｅ　
Ｇ　Ｆがその種々の作用を発現するための最小単位と考
えられるＥＧＦ−（２０−３１）やその誘導体である［
（Ａｃｍ）Ｃｙｓ　　　　）ＥＧＦ−（２０３１）（Ｐ
ｒｏｃ。

２０．３１ Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、、　８１．１３５１（１
９８４）や［ＡＩａ２０］ＥＧＦ−（１４−３１）　　
［Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃ１．。

８１．１３５１（１９８４）　）　、臭化シアンによっ
て処理することにより得られた誘導体であるＣＮＢｒ−
Ｅ　Ｇ　Ｆ　［Ｂｌｏｃｈｅｍｌｓｔｒｙ、　１５．２
８２４（１９７Ｅｉ）　］なども知られており、このよ
うな物質も本発明の成長因子等の範鴫に入るものとする
。

成長因子の一群として上皮細胞成長因子族かあって、そ
の−例が上記のＥＧＦおよびトランスフォーミング成長
因子（Ｔｒａｎｓｆ’ｏｒｓｌｎｇ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｆ
ａｃ−ｔｏｒ：ＴＧＦ）であることは前記したところで
ある。

このＴＧＦは、ＥＧＦとアミノ酸配列に大きな相似部を
持つものであって、現在は三つのクラスに分類されてい
る。すなわち、ＴＧＦ　　。

α ＴＧＦβおよびＴＧＦ７である。ＴＧＦβは、ＴＧＦ　
　あるいはＥＧＦと相乗的に作用して細胞α の成長を促進する。ＴＧＦ　　は、単独でこの作用γ を発揮する。ＥＧＦとこの三種のＴＧＦとは同じ成長因
子族の範驕に属し、特にＴＧＦ　　はＥＧＦα とアミノ酸配列の類似性が高く、ＴＧＦ　　の５０α 残基巾２１残基までがＥＧＦの相同の位置に見出されて
いる（Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃ１．．８１
．７３８３（１９８４））。また、ＴＧＦ　　はＥＧＦ
レセプターとα 結合し、これはＥＧＦと競合する〔「医学のあゆみ」上
ユ旦、１０４０−１０４４　（１９８５））。

さらに、ＴＧＦ　　はＥＧＦレセプターキナーゼをα 活性化し［Ｎａｔｕｒｅ、　２９２．２５９（１９８１
））　、抗ＥＧＦレセプター抗体はＴＧＦ　　のバラク
リン作用を止α める（Ｊ、Ｂｌｏｌ、Ｃｈ−ｅｓ、　２５８．１１８９
５（１９ｇ４））　、これらの事実から、ＥＧＦとＴＧ
Ｆとは非常に近似した作用を有するものと解される。ま
た、同様にインスリンとＴＧＦ類も、ＴＧＦ　とＥＧＦ
との関α 係のように類似した作用があることが報告されている（
Ａｄｖ、Ｍｃｔａｂ、Ｄｌｓ、、　８．２０３，２１１
．２３７（１’９７５）、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ
、１０７．１４５１（１９８０）　）　０そして、ＴＧ
Ｆ類は、インスリン様活性以外にも成長因子活性をも具
備している。本発明は、これらのように非常に近似した
作用を有する同族の因子をも含むものである。

本発明における蛋白分解酵素阻害作用を有する化合物と
は、蛋白分解酵素（プロテアーゼ）の活性を阻害する任
意の化合物をいい、動物由来のもの、植物由来のもの、
微生物由来のものあるいは化学合成されたもの等さまざ
ま存在する。これらの化合物は単品であっても組成物で
あってもよいことは、いうまでもない。特に好ましくは
、ＥＧＦの分解を抑制するものである。

これらの−具体例をあげれば、メシル酸ナファモスタッ
ト（薬理と治療、１２．４９４１　（１９８４））、メ
シル酸ガベキサート（医学のあゆみ、１３８　（１１）
。

８５３（１９８Ｂ））、ロイペチン（口本化薬製）、メ
シル酸カモスタット（医薬品研究、１３（３）、７５Ｂ
（１９８２））、ロキシスタチン（神経研究の進歩、２
４（４）、８０７（１９８０））　、アプロチニン（診
と薬、１５（１１）、２９０９（１９７ｇ））　、ウリ
ナスタチン（基と臨、１７（１２）。

４１３３（１９８３））あるいはチオール・プロテアー
ゼ阻害剤（ＴＰＩ）等がある。

その他の蛋白分解酵素阻害作用を有する化合物について
は、ｒＢａｒｒｅｔｔ、＾、Ｊ、＆　５ａｌｖｅｓｅｎ
、Ｇ。

ＲＲＯＴＥＩＮＡＳＥ　　ｌＮ１１１ＢＩＴＯＲ８，Ｉ
Ｅｌｓｅｖｌｅｒ、Ａｍｓｔｅｒｄａｍ。

１９１１６Ｊを参照をされたい。

本発明における好ましい一興体例としては、後記実験例
で示したグアニジン誘導体の１つであるメシル酸ナファ
モスタットがある。

外用組成物 本発明における外用組成物は、前記成長因子等と蛋白分
解酵素阻害作用を有する化合物とを実質的な有効成分と
するものであって非経口的に投与可能なものであれば、
任意のものであってよい。

この様な外用組成物の剤形について具体例をあげれば、
乳剤、パスタ剤、ハップ剤、リニメント剤、半割、エア
ゾール剤、眼科用成剤、硬□膏剤および軟膏剤（クリー
ム剤、ゲル剤ならび眼軟膏剤も含む）等がある。これら
の剤形は、治療目的に応じて適宜選択できることは、い
うまでもない。

本発明における好ましい一興体例としては、後記実施例
で示した軟膏剤がある。

ここでいう軟膏剤とは、容易に皮膚に塗布できる適当な
稠度を有する全質均等な半固形の外用剤であり、クリー
ム剤、ゲル剤ならびに眼軟膏剤も含むものである。

これらの軟膏剤は、適応部位の状態に合せて以下の様な
軟膏基剤を適宜選択または組合せることにより調製する
ことができる（各基剤に関しては、「広用書店発行、最
新薬剤学、昭和５４年９月１５日、増補版」参照のこと
）。

好ましい具体例としては、後記実施例で示した様に油性
基剤を基に調製することができる。

（１）疎水性基剤 ａ）油性基剤・・・例えば動植物性油脂、ロウ、ワセリ
ン、流動パラフィン、単軟膏ま たはシリコン等。

（２）親水性基剤 ａ）乳剤性基剤 イ）吸水性基剤（Ｗ２Ｏ型）・・・親水ワセリン、精製
ラノリン、アクアホール、オ イセリン、ネオセリン、加水ラノ リン、吸水軟膏あるいはコールド クリーム等。

口）親水性基剤（０／Ｗ型）・・・親水軟膏あるいはバ
ニシングクリーム等。

ｂ）水溶性基剤・・・マクロゴール類等。

また、調製法は、常法（例えば熔融法、乳化法あるいは
練合法等）に従い調製することができる。

なお、上記一連の外用組成物は、必要に応じて吸収促進
剤を添加し、吸収性を増強させることもできる。

このような吸収促進剤としては、例えば１−ドデシルア
ザシクロへブタン−２−オン（米国特許節３．９８９．
８１６号明細書）およびチオゲルコール酸カルシウム（
Ｃｈｃｌｍｌｃａｌ、Ｐｈａｒｍ、Ｂｕｌ　Ｉ。

３２（１）、２Ｈ（１９ｇ４））という特定の化合物の
他に（１）ピロリドン誘導体、（２）シクロデキストリ
ン［ｉ、（３）脂肪酸アルコールエステル類、（４）エ
ナミン誘導体、（５）サリチル酸誘導体、（６）直鎖飽
和脂肪酸塩類、（７）界面活性剤、（８）胆汁酸誘導体
、（９）サポニン類、（１０）コラーゲン誘導体、（１
１）水溶性キレート剤（ＥＤＴＡ等）等がある。

なお、上記サリチル酸誘導体は抗炎症剤として有効なも
のであるが、これ以外の抗炎症剤も吸収促進剤として使
用することができる（これらについては、特願昭６２−
２９３３４号明細書参照のこと）。

本発明における外用組成物中のａ効成分の投与量は、患
者の年令、体重、病状に応じて決めればよく、通常成人
の１日当りの投与量を成長因子等として１Ｈｇ〜１０ｍ
ｇ程度であり、好ましくは１０μｇ〜１１ｇ程度である
。

また蛋白分解酵素阻害作用を有する化合物としては０．
１ｍｇ〜１ｇ程度であり、好ましくは１１１ｇ〜１００
ｍｇ程度である。

本発明の望ましい具体例は、この１日当りの投与量を１
日１回ないし数回投与させるための単位投与形態のもの
である。

また、患部の症状に応じて、抗生物質等の抗菌剤あるい
は抗炎症剤等の他剤を配合することもできる。

本発明による外用組成物は、この有効成分の一つである
成長因子等（ｈ　Ｅ　Ｇ　Ｆ）が雌雄マウス、ラット６
１群５匹に対して皮下注射で１０　Ｈ／　Ｋｇ。

静脈内注射で１０ａｇ／Ｋｇおよび経口投与で１０ｍｇ
／Ｋｇ（ヒト血中ＥＧＦ濃度の約１００万倍に相当）を
投与しても一般症状に変化がなく、また死亡例もないこ
とおよび、蛋白分解酵素阻害作用を有する化合物の一つ
であるメシル酸ナファモスタットのしＤ５ｏ（■ｇ／　
Ｋｇ、ラット）が１．ｖ、で１６．４〜１７、０である
こと等より、低毒性である。

外傷治療作用 本発明でいう外傷治療作用とは、火傷および熱傷、物理
的作用による創傷ならびに化学物質および微生物（ウィ
ルスまたは細菌類）により誘起される皮膚潰瘍等、あら
ゆる外皮または粘膜（目、口腔、耳腔、鼻腔、直腸、膣
腔内等の粘膜をいう）の損傷に対する治癒促進作用をい
う。

実験例 １６製剤化 油性基剤（白色ワセリン：流動パラフィン−４＝１）８
５％と精製ラノリン１５％から成る軟膏に、ｈＥＧＦ、
フサンＲ（メシル酸ナファモスタット：鳥居薬品（株）
）ならびにリゾチームを配合し、下表に示す４Ｐｆｔの
軟膏剤を調製した。

Ｎｏ、４の軟膏剤は本発明に係る実施例であり、Ｎ０２
１〜Ｎｏ、３の軟膏剤は比較例である。

２、外傷に対する効果 ａ、　（動物・欠損創作製方法〕 ウィスター系雄性ラット（２００ｇ−２２０ｇ）をベン
ドパルビタール麻酔後、背部の毛をバリカンおよびハサ
ミを用いて除毛し、直径１０ａ＋ｍのパンチを用いて正
中線に沿い対称な欠損側（直径１０ｍｍ）を作製した。

１）ｌ）Ｓ、１ｎａｙａＬＩａ、Ｋｅｌｏ、Ｊ。

Ｍｅｄ、、７．４３（１９７ｇ）　１週間別表に示した
各種軟膏を１日１回、０．２ｇの軟膏を塗り続け、塗布
後粘着性包帯およびサージカルテープで創部を保護した
。

ｂ、　［ラット体重成長曲線の測定〕 創部作製後、経口的にラット体重を測定した。

その結果は、第１図に示した通りである。コントロール
（Ｎｏ、　１　）にＥＧＦとフサンを配合した本発明に
係る軟膏剤（Ｎｏ、　４　）は、欠損側により起る体重
減少を、顕著に抑制した。

ｃ、　（創部乾燥ｆｆｉ量の測定〕 創部作製３日および７日後に欠損部位の組織を取り出し
、凍結乾燥後、創部乾燥重量をＭ１定した。

その結果は、第２図に示した通りである。コントロール
（Ｎｏ、　１　）にＥＧＦとフサンを配合した本発明に
係る軟膏剤（Ｎｏ、４）は、欠損側に対して、すみやか
な治癒促進効果を示した。

ｄ、　（ヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）含量の定量〕・
・・コラーゲン生合成の指標 創部組織を凍結乾燥後、１１０℃、２４ｈ「、６Ｎ塩酸
水溶液中で加水分解を行い、その後、ＫＩＳＯ法２）２
）上尾裕昭、へ坂朗、杉町土蔵、夏田康則、中村輝久、
井口潔、基礎と臨床、１１．２３３（１９７７）により
Ｈｙｐ含量を測定した。

その結果は、第３図に示した通りである。コントロール
（Ｎｏ、　１　）にＥＧＦとフサンを配合した本発明に
係る軟膏剤（Ｎｏ、４）は、欠損側のコラーゲン新生を
促進することが予測される。

【図面の簡単な説明】

第１図は、コントロールにＥＧＦとフサンを配合した本
発明に係る軟膏剤の、創により起る体重減少抑制効果を
示したものである。 第２図は、コントロールにＥＧＦとフサンを配合した本
発明に係る軟膏剤の創治癒効果を示したものである。 第３図は、コントロールにＥＧＦとフサンを配合した本
発明に係る軟膏剤のヒドロキシプロリンの新生効果を示
したものである。 出願人代理人　　佐　　藤　　−雄 欠損側作成後の日数 ”、Ｐ＜０．０５．”、Ｐ＜Ｏ，Ｏｌｔ　　””、Ｐ＜
０，００１ｖｅｒｓｕｓ　ｃｏｎｔｒｏｌ、　（ｎｓｌ
ｌ−１５）第２図 欠損弁Ｍ午戒後の日数 ’Ｐ＜０．０１　ｖｅｒｓｕｓ　　ｃｏｔｒｏｌ、ｆｎ
＝ｌｌ−１５）第３図

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、（イ）成長因子、その構成成分の一部に相当するペ
   プチド、これらの誘導体またはこれらの塩と（ロ）蛋白
   分解酵素阻害作用を有する化合物とを実質的な有効成分
   とする外用組成物。 ２、成分（イ）が、上皮細胞成長因子族、インスリン族
   または血小板由来成長因子族である、請求項１記載の組
   成物。 ３、成分（イ）が、上皮細胞成長因子族である、請求項
   １記載の組成物。 ４、上皮細胞成長因子族が、ヒト上皮細胞成長因子（ｈ
   ＥＧＦ）、ｈＥＧＦを構成するアミノ酸５３残基巾Ｎ末
   端から２１番目のメチオニンがロイシンに交換されたも
   の（〔Ｌｅｕ＾２＾１〕−ｈＥＧＦ）、ｈＥＧＦを構成
   するアミノ酸５３残基巾Ｃ末端からロイシンおよびアル
   ギニンの２個がないもの（ｈＥＧＦ−II）、α形トラン
   スフォーミング成長因子（ＴＧＦ＿α）、またはβ形ト
   ランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ＿β）である、請
   求項２〜請求項３のいずれか１項に記載の組成物。 ５、上皮細胞成長因子族が、ヒト上皮細胞成長因子（ｈ
   ＥＧＦ）である、請求項２〜請求項３のいずれか１項に
   記載の組成物。 ６、成分（ロ）がグアニジン誘導体である、請求項１〜
   請求項５のいずれか１項に記載の組成物。 ７、グアニジン誘導体が、メシル酸ナファモスタット、
   ロイペチン、メシル酸ガベキサートお、よびメシル酸カ
   モスタットから選ばれたものである、請求項６記載の組
   成物。 ８、グアニジン誘導体が、メシル酸ナファモスタットで
   ある、請求項６記載の組成物。 ９、外用組成物が軟膏剤である請求項１〜請求項８のい
   ずれか１項に記載の組成物。 １０、外用組成物が外傷治療剤である、請求項１〜請求
   項９のいずれか１項に記載の組成物。 １１、外傷治療剤が創傷または熱傷（火傷も含む）治療
   剤である、請求項１０記載の組成物。