JPS61204132A - ＧＨＬ−Ｃｕの創傷治癒および抗炎症剤としての使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 技術分野 本発明は一般に動物における創傷の治療に関し、殊に人
スーパーオキシドジスムターゼ、グリシル−１−ヒスチ
ジル−１−リシン：銅（ｎ）の創傷治癒過程の増進に対
する使用に関する。

前景技術 人および他の動物における創傷槽重および組織修復の機
構はしばしば不適当かつ不完全である。

創傷治思は、年配者、化学療法または放射線療法の癌患
者、糖尿病をもつ人、および重い熱傷を患う個体におい
てしばしば実質的に損なわれる。自己免疫疾患、例えば
クローン病（Ｋｒｏｈｎ’ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ）または
骨関節炎、により生ずる障害はまた遅くかつ不十分な治
癒に特徴がある。一般に不十分に治癒した創傷は速やか
に感染され、人に痛みおよび苦しみを起し、さらに医療
処置を必要とする壊死部位に特徴がある。そのような創
傷が最後に治癒したときでも、「創傷領域」はしばしば
触覚刺激に対し反応する能力を欠き、またしばしば過度
に沈着したコラーゲンで満たされそれが取り除かれない
廠痕を生ずる。

創傷治癒は初めに、構造タンパク質コラーゲンを創傷領
域中へ分泌する免疫系の細胞および線維芽細胞の侵入に
より例示された非常に厳密に生物学的な過程である。後
に血管およびリンパ管が再形成され、神経軸索が傷害領
域中へ浸潤する。槽重過程を制御する生物学的過程の今
日の不完全な知識は比較的不適当な現在の治療法により
もたらされる。

現在の創傷の治療法には創傷治癒過程の促進に対する１
種の神経成長因子（米国特許第４，２８７．１８４号）
、アルブミンを含まないキャップ直情と直管拡張性ペプ
チド類（キニン類）との混合物（米国特許第４，１７７
．２６１号）の使用、並びに部分温浸ウシカゼイン、ポ
リビニルピロリジンおよびカラジーナンの治癒助剤とし
ての使用（米国特許第３、５５８．７７０号）が含まれ
る。他の処置には米国特許第３．７６７．７８４号にお
けるように創傷に対する保ｆｉ！藪を与えるためのウシ
ゼラチン、スクロース、コーンシロップ、オートミルお
よび他の塩の乳化水性混合物の使用並びに米国特許第３
，１９４．７３２号におけるように卵殻、膜製品の使用
が含まれる。

上記創傷治癒配合物中のすべてに関し、免疫学的考察は
られらの配合物の成分の外来性がドナ一種を除いて動物
中に抗体認識および次の炎症性反応を最も誘発すると思
われることを示唆する。過敏症またはアレルギー性の動
物または人の患者においてそのような反応はしばしば死
を招くことができる。

今日まで種々の創傷および組織創傷の治癒を促進するこ
とが証明された最も有望な組成物はスーパーオキシドジ
スムターゼといわれる種類の化合物、高反応性組織傷害
性のスーパーオキシドアニオンといわれる酸素ラジカル
を解毒する生物学的能力を有する化合物、である。多く
の種類の創傷組織傷害および老化関連退化状態の治癒ば
スーパーオキシドアニオンの過剰生成により遅延される
。

創傷または烈しいＭｉ繊織損傷後免疫系の細胞が傷害領
域に侵入し、多量の毒性酸素カシカルを分泌して侵入細
菌を殺す。同様に自己免疫疾患において免疫細胞はまた
疾患領域中へ酸素ラジカルを分泌して直示的に感染性生
物を殺し、それにより組織傷害および局在化炎症を誘発
する。

傷害治癒の場合においてしばしばスーパーオキシドアニ
オンの生成がさらに組織を傷害し、免疫細胞の新たな流
入をもたらしてそれにより悪性範囲の傷害事象を生じ、
それが治癒過程内の正常な連鎖を非常に遅延させること
ができる。傷害組織の適当な治癒を得るために疾患領域
中のスーパーオキシドアニオンの生成を終らせることが
一般に必要である。

多数の生物学的および合成の分子がスーパーオキシドア
ニオンの分解および阻害を触媒し、その若干は治癒を促
進し炎症を低減する作用をする臨床的に有用な性質を有
することが証明された。しかし、そのような分子はすべ
てそれらの臨床的効力を鋭く制限する実質的な欠陥を有
する。

１つの方法はスーパーオキシドジスムターゼ活性を有す
る一定の低分子量銅キレート化合物、例えばサリシラー
トー桐またはジイソプロピルサリシラートー渭、を使用
することであった。これらの錯体もまた抗炎症および治
癒作用を有するけれども、それらは有機成分の銅に対す
る結合親和力が低くて生理的条件のもとで銅を保持しな
いので、注射後解離する傾向がある。さらに、これらの
小さいｍ錯体は水性条件のもとでＭ溶性である傾向があ
り、組織刺激、可溶化剤とともに投与しなければならな
い。他のこれらの銅キレート化合物、ペニシラン−銅錯
体、はしばしば皮膚発疹および「ペニシラン精神病」と
して知られる人格変化を生ずる。

約３３．０００の分子量を有し、スーパーオキシドジス
ムターゼ活性を示す他の化合物はオルゴテインとして知
られる銅および亜鉛キレート化合物である。オルゴテイ
ンは抗炎症性および抗外傷性を有し、痔、凍傷、皮膚剥
離、軟組織損傷、並びに自己免疫疾患に関連する組織傷
害例えば関節炎およびクローン病の治癒を促進すると思
われている。オルゴテインは米国特許第３．７５８．６
８２号および第３，８３２，３３８号に記載のようにウ
シＭｉ織から分離され、エステル化オルゴテインは米国
特許第４．０２２．８８８号に記載された。しかし、オ
ルゴテインは人において抗原反応を誘発し、治療に適用
したときに細胞自体への浸透とは反対にそれらの作用を
細胞外組織区画中に及ぼす。

従って、創傷治癒過程を増進しまた炎症を低減し、さら
に抗原反応を誘発しない有効な非毒性の方法に対する技
術的要求が存在する。

発明の開示 簡単に示すと、本発明はグリシル−１−ヒスチジル−１
−リシン：ｔｌｉｉ（ＩＩ）を含む組成物の治療有効量
を動物に投与することを含む動物における創傷治癒過程
を促進する改良法を開示する。組成物は静脈注射、局所
塗布、あるいは創傷または創傷周囲領域中への注射によ
り適用することができる。あるいは組成物はさらに有効
量のジメチルスルホキシドを含むことができる。

本発明の他の観点はグリシル−１−ヒスチジル−１−リ
シン：銅（ＩＩ）を含む組成物の抗炎症有効量を動物に
投与することを含む動物における炎症状態を治療する方
法を開示する。

本発明の他の観点はグリシル−１−ヒスチジル−１−リ
シン；銅（Ｉｆ）を含む組成物の治療有効量を動物に投
与することを含む損傷動物における血液フィブリノゲン
の増加を抑制する方法を開示する。

さらに本発明はグリシル−１−ヒスチジル−１〜リジン
：銅（ＩＩ）を含む組成物の抗炎症有効量を動物に投与
することを含む大組織傷害の後に生ずる動物における外
傷性効果を低減する方法を開始する。

本発明の他の観点は次の詳細な説明を参照すると明らか
になろう。

発明を実施する最良の形態 上記のように多数の創傷治癒配合物における免疫学的考
察は配合物中に用いる成分がドナ一種以外の動物中に抗
体認識および後の炎症性反応を誘発することを示唆する
。さらに、他の一般にスーパーオキシドジスムターゼと
して知られるものは水性条件のもとで難溶性であるかま
たは受容体に抗原反応を誘発する傾向がある。

創傷治癒は適当な治癒のために調和を保たねばならない
多くのきわめて調和した事象を含む非常に特異的な生物
学的反応である。免疫細胞は細菌および傷害組織を創傷
から取り除き、次いで他の過程例えば喪失皮膚の再上皮
形成、一時的創傷強度を与える構造タンパク質コラーゲ
ンの線維芽細胞の沈着、神経、血管およびリンパ網の再
生、創傷領域の収縮、並びに新形成皮膚中の毛包の回復
、を起さねばならない。いずれかの過程が不相応に優先
すれば治癒は部分的かつ不適当である０例えば過度のコ
ラーゲンの沈着は永続的廠痕を生じ、また過度の血管成
長は血管腫を起すことができる。

整形外科はしばしば外科創傷の遮蔽に用いる植皮片また
は皮膚弁の不十分な定着のために不適当な結果を与える
こともまた認められた。

創傷の適当な治癒における種々の過程のＩ３Ｉ雑な相互
作用のために創傷治癒過程を増進する優れた方法は抗原
反応を誘発することなくこれらのそれぞれの過程を適当
に維持することを含むべきである。本発明はそのような
方法を例証し、さらに他の関連する利点を与える。

本発明の目的のため「創傷」という用語は、ＴＩ）外科
または不慮の組織の切開または除去、伐）急性または慢
性の傷害（例えば床ずれ）　、（３１熱傷またはイオン
化放射線により生ずる組織傷害、あるいは（４）異なる
位置に対する組織の移動または移植（例えば植皮片）、
のどの種類も含むと規定される。そのような創傷はすべ
て、次に正常または健康な状態を回復する新組織の局所
再生が続く初期の炎症期に特徴がある。

本発明は、動物中の創傷治癒過程を増進するため実質的
にグリシル−１−ヒスチジル−１−リシン：銅（■）（
以下ｒＧＩ（Ｌ−Ｃｕ　Ｊとして示す）からなる組成物
の治療有効量を使用する。ＧＨＬのＣｕに対する割合は
多少変更してなお著しい創傷治癒過程を保有できること
は当業者に明らかであろう。例えば２：１のＧ）（Ｌの
Ｃｕに対する比は一定の創傷治癒過程に殊によ（適する
ことができる０本発明に用いるＧＨＬ−Ｃｕは市販ＧＨ
Ｌ（Ｂ　Ａ　ＣＨＥ　Ｍ％　Ｔｏｒｒｅｎｃｅ、Ｃａ、
）から製造することができる。市販ＧＨＬは約９５％の
純度であるが、しかし、しばしば少量の軽神経毒物質を
含み、それ自体さらに精製すべきである。

ＧＨＬ−Ｃｕは生理的ｐＨで著しいスーパーオキシドジ
スムターゼ活性を有し、他のスーパーオキシドジスムタ
ーゼのように抗炎症および創傷治癒特性を有する。Ｇ　
ＨＬ　−Ｃｕは血小板凝集並びに直管収縮および血栓痙
誘発ホルモン、トロンボキサン、の産生を抑制する。

ＧＨＬ−Ｃｕはスーパーオキシドジスムターゼ活性を有
する他の薬理活性分子に優る多くの利点を有する。殊に
それば人におけるオルゴテインの抗原性を欠き、ともに
人因子であり、非常に小さくて長期適用後でも免疫Ｕ１
．ｖａを誘発しない、さらに、それは容易に水に溶解し
、生理的緩衝液およびジメチルスルホキシドを含む水性
緩衝液に配合することができる。ＧＨＬ−Ｃｕは動物中
で非常に非毒性で、貯蔵下に少くとも４年間安定である
。

ジメチルスルホキシドと組合せて投与するとＧＨＬ−Ｃ
ｕは一層有効である。ＧＨＬ−Ｃｕは組織傷害酸素ラジ
カルを解毒するスーパーオキシドジスムターゼとして作
用することができ、重量を基にして他の臨床的に使用さ
れたスーパーオキシドジスムターゼ分子より２０倍も効
力がある。

さらにＧＨＬ−ＣｕはＣｕ　　（ＩＩ）に対するその高
い親和力（ｐＫ＝　１６．４　）のためにスーパーオキ
シドジスムターゼ活性を有する低分子量分子に優る利点
を有する。この親和力は血液タンパク賞アルブミン上の
銅（ＩＩ）輸送部位（ｐＫ＝　１６．２　）に等しい〔
ローはか（Ｌａｕ　ａｎｄ　５ａｒｋａｒ）　、バイオ
ケミカル・ジャーナル（Ｂｉｏ−Ｃｈｅｍ、Ｊ、）、１
９９：６４９〜６５６　（１９８１）；ラニエルはか（
Ｒａｉｎｉｅｒ　ａｎｄ　Ｒｏｄｅ）　、インオルガニ
力・キミカ・アクタ（Ｉｎｏｒｇ、Ｃｈｉｓ、Ａｃｔａ
）、９２　：　１〜７　（１９８４））。

この結合親和力の接近はＧＨＬ−Ｃｕ内の銅が究極的に
身体から取り除かれ、銅の過負荷毒性を生じない。

さらに、ＧＨＬ−Ｃｕは全溶液重量の２５％を超える量
で可溶性であり、その溶解度は分子に対する脂肪基の付
加により変動することができる。

他のスーパーオキシドジスムターゼと同様に、ＧＨＬ−
Ｃｕは大組織傷害の後に生ずる外傷性効果を低減する。

本発明の目的のため「外傷」という用語は組織損傷に続
いて起る効果、例えばフィブリノゲン過剰血症、血栓塞
栓症、ショックおよび外来欲望の喪失を含むと規定され
る。

後記する実施例を要約すると、実施例１にはリン酸塩緩
衝塩水中にＧＨＬ−Ｃｕを含む溶液の創傷に対する局所
適用が示される。実施例■にはリン酸塩緩衝塩水中のＧ
ＨＬ−Ｃｕの創傷の下層組織中への注射が記載される。

実施例■にはリン酸塩緩衝塩水中のＧ　ＨＬ　−Ｃｕの
創傷の外側周囲中への注射が記載される。実施例■には
ＧＨＬ−Ｃｕの静脈注射が記載される。実施例Ｖには組
織傷害により生ずる外傷の低減に対するＧＨＬ−Ｃｕの
腹腔内注射が記載される。実施例■には熱傷創傷の治癒
を促進するためのＧ　ＨＬ　−Ｃｕの適用が記載される
。実施例■には植皮片で覆った創傷の治癒におけるＧＨ
Ｌ、−Ｃｕの使用が記載される。

次の実施例は例示のために提供され、限定のためではな
い。

実施例 動物に使用するＧＨＬ　　Ｃｕの製造 ＧＨＬはガラス容器中の蒸留水（５０■／ｍＡ）に溶解
し、次いで３℃で１時間２０，０００ｇで遠心分離する
ことにより精製した。これは合成手順から残留する難水
溶性物質を除去する。上澄み液を凍結乾燥し、次いで０
．５％酢酸の溶媒中でセファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅ
ｘ）　Ｇ　−Ｉ　Ｑカラムに３℃で通した。溶媒先端の
後に溶出する主ピーク（２５４ナノメートルにおける吸
収によりモニターした）を凍結乾燥する。ＧＨＬ−Ｃｕ
は精製ＧＨＬと等モル量の酢酸第二銅および水酸化ナト
リウムとを配合し、次いで発表された方法〔パーキンス
（Ｐｅｒｋｉｎｓ）ほか、インオルガニ力・キミカ・ア
クタ（Ｉｎｏｒｌ、Ｃｈｉｓ、Ａｃｔａ）　、６エ：　
９３〜９９　（１９８４））によりエタノールの添加お
よび低温の使用により沈殿させることにより製造した。

実施例■ マウスにおいて側腹部上の切開創傷（動物当り６個の１
．５　ｅｌｌの創傷）を毎日生理的１）Ｈにおけるリン
酸塩緩衝塩水（Ｐ　Ｂ　Ｓ）中にＧＨＬ−Ｃｕ（１００
マイクログラム毎＊／）を含む溶液またはＰＢＳのみで
拭った（各群１２匹の動物）。５日後に創傷を、完全閉
鎖に対し】、０、部分閉鎖に対し０．５、および非閉鎖
に対し０．０と記録した（表１．）。

表１ 実施例■ 豚において、皮膚および皮下脂肪をヨークシャー豚（１
０〜１２ｋｇ）の上背部から切除した（　２．５　ａｍ
平方、３片毎側）。動物の１側においてＰＢＳ中のＧＨ
Ｌ−Ｃｕ　　（５０マイクログラム）を下層組織中へ注
射し、対何創傷はＰＢＳのみをを注射した。創傷領域は
コラーゲンパッド、脱水豚皮膚または生体豚皮層（自己
植皮片）で覆った。

次いで創傷をペトロラタムガーゼ（Ｃｈｅｅｓｂｏｒｏ
ｕｇｈＰｏｎｄｓ、ＦＪｒａｅｎｗｉｃｈ、　Ｃｔ、　
）、次に乾燥ガーゼで覆った。

接着テープおよび「ベトラップ（Ｖｅｔｒａｐ）　Ｊ（
３Ｍ、　Ｓｔ、Ｐａｕｌ、Ｍｎ、　）で包帯を適所に保
持り、？Ｃ０動物はすべてペニシリン１００，０００単
位およびストレプトマイシンＬｏｗ毎呟体重を与えた。

試験した】０匹の豚すべてにおいてＧＨＬ−Ｃｕ処置創
傷は対何対照より早く治癒した。５日までに処置創傷は
対照より多少小さかった。この効果は創傷後３週間増加
した。２１日にＧＩ（Ｌ−Ｃｕの１処置が、この期間に
観察した８匹の豚の１４創傷において残存創傷大きさを
６４．９％（±２２．１）Ｉ小した（プールしたデータ
に対しｐ−０，００２３）。この創傷の縮小は創傷遮蔽
物の種類に無関係に生じた〔脱水豚皮膚（４創傷）＝−
７７，３％（±１６．３）、自己植皮片（２創傷）＝　
−８２，０％（±１．４）、ゼラチンフイルムバ、。

ド（６創傷）＝−５８，８％（±１６．４＞、創傷上無
遮蔽（２創傷）＝−４１，５％（±３−５））。

実施例■ ラットにおいて、背部から皮膚の円形断片を切除して試
験を開始した。創傷の外側周囲にＰＢＳ中５Ｑ＃ｇのＧ
ＨＬ−Ｃｕ　　（１０ラツト）または対照としてＰＢＳ
のみ（６ラツト）を創傷直後、２４時間に第２回、およ
び４８時間に第３回を注射した。創傷は創傷後５日、１
０日、１５日および２５日に写真撮影した。データは、
写真中の創傷の周囲の電算機処理デジタル化により創傷
周囲を測定し、次いでスケールバーで補正して写真間の
倍率の変動を補償することにより分析した。時点および
群の情報はデジタル化のときにコード化して主観的偏り
を排除した（表２）。

表２ 勺イの台　におけるＧＨＬ−Ｃ’ｕ　　処置の六時間　
　　　創傷の周囲　　　　　　差異の有意性創傷後日数
　砂以二並孤Ｉ　　対　曜　（Ｐ−値）５　　　５．１
７±０．２４　　５．０３±０．２０　．２９１０　　
　　　３．０４±０．４０　　　３．２０±０．３６　
　．２２１５　　　１．６０±０．１７　　２−１１±
０．３５　、．００３８２０　　　　　．６７±０．４
８　　　１５３±０．３３　　．０００５２５　　　　
　−２０±０．３０　　　１．０９±０．１７　　．０
０００５これらの効果の追加盲検において、２５日の創
傷の写真を４名の外科医により完全治癒または不完全治
癒として判断させ、次いでその判断をフィッシャー・エ
クザクト・テスト　（Ｆｉｓｈｅｒ　ＥｘａｃｔＴｅｓ
　ｔ）により統計的に分析した（表３）。

表３ 完全治癒　　　　　　６０ 不完全治胤　　　　　４６ 差異の有意性、Ｐ＝０．０４ 実施例■ 炎症性の足水腫をカラジーチン１．５　ｑの注射、次に
３０分後にＧＨＬ−ＣｕＯ，５■の静脈注射によりラッ
トに誘発させた。カラジーチン後３時間において足の直
径を測定した。対照ラットは足に塩水注射した。各群は
１０ラツトであった（表４）。

表４ 対照ラット　　　　　　　　　　　３．９±０．３力ラ
ジーナンおよび塩水　　　　６．９±０．５カラジーナ
ンおよびＧＨＬ−Ｃｕ　　　５．０　＋：０−３統計差
異： （カラジーチンおよび塩水）対（カラジーチンおよびＧ
ＨＬ−Ｃｕ　）　　：　Ｐ＜０．００１実施例Ｖ ＧＨＬ−Ｃｕは組織傷害により誘発された外傷を低減す
る。ラットにおいて、各後足の筋肉塊中へ無菌テルペン
チン（Ｌ２５ａ＋Ｊを注射することにより組織傷害を誘
発させた。この手順は組織傷害、広範な脈管内凝固、ス
トレス関連タンパク質の急性期産生、および全身性ショ
ック効果を誘発する。

これらの外傷効果はテルペンチン注射後１時間、２４時
間および４８時間の時間にＧＨＬ−Ｃｕ　２■の腹腔的
注射により非常に小さくなった。Ｍｉ織織傷後後ラット
非常に少ししか動かず、−緒にうずくまり、２〜３日間
毛づくろいしない（非常に粗い外被により立証された）
。対照的にＧＨＬ−Ｃｕで処置したラットではテルペン
チン注射後２４時間までにはパ正常な活動および毛づく
ろいパターンを回復する（表５）。

表５ 外傷性組織損傷後のショック効果に 創傷２４時間後 対照ラット　　　　　　　　　１０中０ＧＨＬ−Ｃｕ処
置ラット　　　１０中８創傷２５時間後 対照ラット　　　　　　　　　１０中１ＧＨＬ−Ｃｕ処
置ラット　　　１０中１０創傷４８時間後 対照ラット　　　　　　　　　　１０中４ＧＨＬ−Ｃｕ
処置ラット　　　１０中１０創傷４８時間後 対照ラット　　　　　　　　　１０中４ＧＨＬ−Ｃｕ処
置ラント　　　１０中１０さらに、ＧＨＬ　　Ｃｕ処置
動物において損傷後の血液タンパク質フィブリノゲンの
増加が低減される（表６）、、損傷後の血液フィブリノ
ゲンの急性期増加はしばしば血液粘度の上昇、並びに赤
血球凝集および血栓塞栓症エピソードの誘発により回復
を悪化させる。

表６ 対照ラットｆ６１　　　　　　　　２．８±０．３損傷
ラツト（６）　　　　　　　　　５．３±０．５損傷ラ
ツト十ＧＨＬ　−Ｃｕ（６）　　　　３．９±０．４統
計有意差： （創傷ラット対創傷ラット＋ＧＨＬ−Ｃｕ）　ｐ　＜　
０．００１実施例■ Ｇ　ＨＬ　−Ｃｕの適用はマウスにおける熱傷創傷の治
癒を著しく促進する。熱傷は直径１−５　ｃｍの黄銅シ
リンダーを１００℃で５秒間、麻酔した動物の毛をそっ
た背部に当てることによりスイス・ウェブスター（Ｓｗ
ｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ）マウスに誘発させた。

熱傷後、並びに２４時間および４８時間後に悲傷領域に
注射用無菌水（＾ｂｂｏｔｔ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅ
ａ製、保存剤として０．９％のベンジルアルコールを含
む水）Ｑ、０５ａｌ中のＧＨＬ　　Ｃｕ　　（各銅原子
に対しＧＨＬ２分子のモル比を有する）３μｇを浸潤さ
せた。対照動物は無菌水のみを注射した。熱傷の１０日
後に原皮層は壊死し、８匹中１匹の動物のみに熱傷皮膚
の部分的回復があった。対照的にＧＨＬ−Ｃｕ処置群で
はもとの皮膚が動物１５匹中１３匹に正常外観および毛
の成長を有し熱傷外傷から回復した。

表７ 対照　　　　　　　　　　　８中１ ＧＨＬ−Ｃｕ処置　　　　１５中１３ ｐ値差異　＜ｏ、ｏｏｔ 実施例■ ＧＨＬ−Ｃｕは植皮片で覆った創傷の治癒および植皮片
の定着を改善する。ヨークシャー豚において皮膚および
下層の脂肪を１．５値平方除いて創傷を作った。そいだ
厚さの植皮片を動物の他の部分から調製して創傷領域の
上に縫合せた。ＧＨＬ−Ｃｕは０．６２５の比を用いて
標準手順によりリポソームビヒクル中へ配合した。ＧＴ
（Ｌ−Ｃｕを含有するリポソーム（ＧＨＬ、−Ｃｕ　５
０μｇを含むリポソームＱ、１ｍＪ）を移植片の下の組
織中へ浸潤させ、一方対照移植片はＧＨＬ　　Ｃｕのな
いリポソームを与えた。移植の１５日後にＧＨＬ−Ｃｕ
を含有するリポソームで処置した群の植皮片は創傷領域
を滑らかに覆い、隣接皮膚中へ滑らかに融合した。対照
的にＧＨＬ−Ｃｕがないと付加した植皮片の中心部のみ
が定着し、創傷周辺の縁はなお癲痕組織で覆われた。新
たに定着した皮膚の平均面積は、ＧＨＬ−Ｃｕ処置動物
における４、３（±０．７）平方１に対して対照動物に
おいては１．２（±０．３）平方値であった（差異のｐ
値く０．００１）。

前記から本発明の特定態様が例示のために記載さ丸たけ
れども、発明の精神および範囲から逸脱することなく種
々の変更をなしうろことが認められよう。従って、本発
明は特許請求の範囲によることを除いて制限されない。

手続神正書（方式） 昭和　　年　　月　　日 特許庁長官　　宇　賀　道　部　　殿　　　　　昏１、
事件の表示　　　昭和６１年特許願第１３５９９号２、
発明の名称　　　ＧＨＬ−Ｃｕの創傷治癒および抗炎症
剤としての使用 ３、補正をする者 事件との関係　　出願人 名　称　　アイアマ　インコーポレーテブド４、代理人 ６、補正の対象　　　　明細書 ７、補正の内容

Claims (21)

【特許請求の範囲】
1. （１）活性治癒物質として使用するグリシル−１−ヒス
   チジル−１−リシン：銅（II）を含む組成物。
2. （２）　有効量のジメチルスルホキシドを含む、特許請
   求の範囲第（１）項記載の組成物。
3. （３）製剤に許容されるビヒクルと混合された、特許請
   求の範囲第（１）項記載の組成物。
4. （４）製剤に許容されるビヒクルが生理的ｐＨにおける
   リン酸塩緩衝塩水である、特許請求の範囲第（３）項記
   載の組成物。
5. （５）創傷治癒剤として使用するグリシル−１−ヒスチ
   ジル−１−リシン：銅（II）を含む組成物。
6. （６）有効量のジメチルスルホキシドを含む、特許請求
   の範囲第（５）項記載の組成物。
7. （７）製剤に許容されるビヒクルと混合された、特許請
   求の範囲第（５）項記載の組成物。
8. （８）製剤に許容されるビヒクルが生理的ｐＨにおける
   リン酸塩緩衝塩水である、特許請求の範囲第（７）項記
   載の組成物。
9. （９）炎症性状態の治療に使用するグリシル−１−ヒス
   チジル−１−リシン：銅（II）を含む組成物。
10. （１０）有効量のジメチルスルホキシドを含む、特許請
    求の範囲第（９）項記載の組成物。
11. （１１）製剤に許容されるビヒクルと混合された、特許
    請求の範囲第（９）項記載の組成物。
12. （１２）製剤に許容されるビヒクルが生理的ｐＨにおけ
    るリン酸塩緩衝塩水である、特許請求の範囲第（１１）
    項記載の組成物。
13. （１３）血液フィブリノゲンの増加の抑制に使用するグ
    リシル−１−ヒスチジル−１−リシン：銅（II）を含む
    組成物。
14. （１４）有効量のジメチルスルホキシドを含む、特許請
    求の範囲第（１３）項記載の組成物。
15. （１５）製剤に許容されるビヒクルと混合された、特許
    請求の範囲第（１３）項記載の組成物。
16. （１６）製剤に許容されるビヒクルが生理的ｐＨにおけ
    るリン酸塩緩衝塩水である、特許請求の範囲第（１５）
    項記載の組成物。
17. （１７）大組織傷害の後の外傷性効果の低減に使用する
    グリシル−１−ヒスチジル−−１−リシン：銅（II）を
    含む組成物。
18. （１８）有効量のジメチルスルホキシドを含む、特許請
    求の範囲第（１７）項記載の組成物。
19. （１９）製剤に許容されるビヒクルと混合された、特許
    請求の範囲第（１７）項記載の組成物。
20. （２０）製剤に許容されるビヒクルが生理的ｐＨにおけ
    るリン酸塩緩衝塩水である、特許請求の範囲第（１９）
    項記載の組成物。
21. （２１）グリシル−１−ヒスチジル−１−リシン：銅（
    II）を含む組成物の治療有効量を動物に投与することを
    含む動物における創傷治癒過程を増進する方法。