JPS61218525A - 傷の治癒を促進する為に形質転換性成長因子の使用 - Google Patents
傷の治癒を促進する為に形質転換性成長因子の使用Info
- Publication number
- JPS61218525A JPS61218525A JP61014906A JP1490686A JPS61218525A JP S61218525 A JPS61218525 A JP S61218525A JP 61014906 A JP61014906 A JP 61014906A JP 1490686 A JP1490686 A JP 1490686A JP S61218525 A JPS61218525 A JP S61218525A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- tgf
- wounds
- growth factor
- healing
- amino acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L26/00—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form
- A61L26/0009—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form containing macromolecular materials
- A61L26/0028—Polypeptides; Proteins; Degradation products thereof
- A61L26/0047—Specific proteins or polypeptides not covered by groups A61L26/0033 - A61L26/0042
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/495—Transforming growth factor [TGF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
上皮及び基質の創傷が多くの原因、たとえば熱傷、擦過
傷、切傷、外科手術の過程及び他の外傷から生じること
ができる。そのような創傷の念めの長い治癒期間が特に
問題であシ、そして合併症たとえば感染、痛み、及び遅
れた回復をもたらすことがある。
傷、切傷、外科手術の過程及び他の外傷から生じること
ができる。そのような創傷の念めの長い治癒期間が特に
問題であシ、そして合併症たとえば感染、痛み、及び遅
れた回復をもたらすことがある。
角膜基質の創傷の治癒が主な問題である。たとえば、基
質切開に続く角膜移植は、治癒するのに６〜９力月を要
し、この間患者は不十分な視力及び創傷における高い感
染の危険性にさらされる。
質切開に続く角膜移植は、治癒するのに６〜９力月を要
し、この間患者は不十分な視力及び創傷における高い感
染の危険性にさらされる。
創傷の治癒、特に角膜創傷の治癒を促進するための薬は
、日常の臨床的使用のために現在手に入れることができ
ない。
、日常の臨床的使用のために現在手に入れることができ
ない。
従って、角膜上皮及び角膜基質の創傷を治療するための
方法及び薬を提供し、それらの急速な治癒を促進するこ
とが好ましいであろう。特に、そのような創傷の治癒用
組成物を多量にしかも臨床治療のために適した製剤で提
供することが好ましいであろう。
方法及び薬を提供し、それらの急速な治癒を促進するこ
とが好ましいであろう。特に、そのような創傷の治癒用
組成物を多量にしかも臨床治療のために適した製剤で提
供することが好ましいであろう。
種々の薬が角膜基質の切開の治療において、使用する可
能性について研究されて来た。非経口的に投与されるア
スコルビン酸塩（ビタミンＣ）ｆｆｉ、ウサギの角膜中
の十分な厚さの切開部に局所的に適用したがしかし治癒
の間、強化された引張強さをもたらさなかった（ Ｐｆ
ｌｓｔｏｒなど、。
能性について研究されて来た。非経口的に投与されるア
スコルビン酸塩（ビタミンＣ）ｆｆｉ、ウサギの角膜中
の十分な厚さの切開部に局所的に適用したがしかし治癒
の間、強化された引張強さをもたらさなかった（ Ｐｆ
ｌｓｔｏｒなど、。
Ｔｎｖｓｇｔ 、 Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ、 （１９８
１） ２１ ： ８０〜８６）。
１） ２１ ： ８０〜８６）。
中胚葉成長因子（マウスの顎下線から調製された、一部
精製されたタンパク質）の局部投与がウサギの角膜中の
不完全々厚さの切開部において基質の線維芽細胞誉活性
化すると思われた（Ｒｌｃｈなど、。
精製されたタンパク質）の局部投与がウサギの角膜中の
不完全々厚さの切開部において基質の線維芽細胞誉活性
化すると思われた（Ｒｌｃｈなど、。
Ａｒｃｈ、 Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ、 （１９７９）
９７ ： １３２６〜１３３０）。
９７ ： １３２６〜１３３０）。
マウスの顎下線から精製された表皮成長因子は、ウサギ
の角膜中の十分な厚さの切開部の引張強さを強化するこ
とが示された（１９８３年９月２３日、マブナ、−セッ
ッのがストンでの第１３回ＢｉｅｎｎｉａｌＣｏｒｎｅ
ａｌ Ｒ＠５ｅａｒｃｈ Ｃｏｎｆｅｒ＠ｎｃｅで
Ｂｒｌｇｈｔｗｅｌｌなどによって口頭発表された）。
の角膜中の十分な厚さの切開部の引張強さを強化するこ
とが示された（１９８３年９月２３日、マブナ、−セッ
ッのがストンでの第１３回ＢｉｅｎｎｉａｌＣｏｒｎｅ
ａｌ Ｒ＠５ｅａｒｃｈ Ｃｏｎｆｅｒ＠ｎｃｅで
Ｂｒｌｇｈｔｗｅｌｌなどによって口頭発表された）。
皮膚創傷の治療におけるマウスの表皮成長因子の使用に
ついて種種の研究が行なわれた。Ｃ１１ｔ＋、 Ｅｘｐ
、 Ｄ＠ｒｍａｔａｌ。
ついて種種の研究が行なわれた。Ｃ１１ｔ＋、 Ｅｘｐ
、 Ｄ＠ｒｍａｔａｌ。
（１９８０） ５ ： １０１−１０３においてＧｒｅ
ａｖ＊ｓは、ヒト被検者の水庖傷上にマウスＥＧＦが適
用された。
ａｖ＊ｓは、ヒト被検者の水庖傷上にマウスＥＧＦが適
用された。
塩溶液中のｍＥＧＦが、創傷が治癒するまで毎日一度適
用された。表皮層の成長の促進は観察されなかりた。マ
ウスの開放性創傷へのマウスＥＧＦの局所的適用は、種
々の程度で治癒を促進するととが見出された。たとえば
、Ｎ１ａｌｌなどｅ＠Ｊ−８１１ｒｇ、Ｒ＠１−（１９
８２） ３３ ： １６４〜１６９ ： Ｔｈｏｒｔ＋
ｔｏｎなど、。
用された。表皮層の成長の促進は観察されなかりた。マ
ウスの開放性創傷へのマウスＥＧＦの局所的適用は、種
々の程度で治癒を促進するととが見出された。たとえば
、Ｎ１ａｌｌなどｅ＠Ｊ−８１１ｒｇ、Ｒ＠１−（１９
８２） ３３ ： １６４〜１６９ ： Ｔｈｏｒｔ＋
ｔｏｎなど、。
Ｂａｒｙｓｓ （１９８１） ８ ： １５６〜１６０
を参照のこと。
を参照のこと。
ある形質転換された細胞が内因性形質転換成長因子を産
生ずるという仮説が、形質転換された細胞からのイプチ
ド因子の単離によって支持されている（ Ｄｅｌｉｒｃ
ｏ及びＴｏｄａｒｏ、、 Ｐｒｏｅ、Ｎａｔｌ。
生ずるという仮説が、形質転換された細胞からのイプチ
ド因子の単離によって支持されている（ Ｄｅｌｉｒｃ
ｏ及びＴｏｄａｒｏ、、 Ｐｒｏｅ、Ｎａｔｌ。
Ｒｏｂｅｒｔｓなど、、 Ｎａｔｕｒｅ （１９８２）
２９５ ： ４１７〜４１９ ｅ、 ０ｚａｎｎｅな
ど、、 Ｆｅｄｎ、 Ｐｒｏｃ、 （１９８２）４１
：３００４〜３００７ ： Ａｎｚｍｎｏなど、、
Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ。
２９５ ： ４１７〜４１９ ｅ、 ０ｚａｎｎｅな
ど、、 Ｆｅｄｎ、 Ｐｒｏｃ、 （１９８２）４１
：３００４〜３００７ ： Ａｎｚｍｎｏなど、、
Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ。
（１９８２） ４２ ： ４７７６〜４７７８ ：及び
Ｍａｒｑｏａｒｄｔなど、、 ５ｃｌｅｎｃｓ （１９
８４） ２３３ ： １０７９〜１０８２）。
Ｍａｒｑｏａｒｄｔなど、、 ５ｃｌｅｎｃｓ （１９
８４） ２３３ ： １０７９〜１０８２）。
合成形質転換性成長因子の調製は、Ｔａｍなど、。
Ｎａｔｕｒｅ （１９８４） ３０９ ： ３７６〜３
７８に報造されている。
７８に報造されている。
以下余白
〔発明の要約〕
上皮及び基質の創傷を処理して、それらの急速な治癒を
促進するための方法及び組成物が提供される。この方法
は、形質転換された細胞から得られた天然に存在する形
質転換性成長因子−α（ＴＧＦ−α）の啼イトジエン活
性に類似するマイトジェン活性を有するポリペプチドを
含む治療用組成物を用い、そしてとの４リペグチドは、
ＴＧＦ−αと共に天然に存在する不純物を実質的に含ま
ない。この方法及び治療用組成物は、種々の外傷、たと
えば皮膚創傷、角膜創傷、及び体の中空上皮系器官の外
傷の治癒を促進するのに有効である。この組成物は、生
理学的に許容される担体又は基剤中において、患部に局
部的に適用される。
促進するための方法及び組成物が提供される。この方法
は、形質転換された細胞から得られた天然に存在する形
質転換性成長因子−α（ＴＧＦ−α）の啼イトジエン活
性に類似するマイトジェン活性を有するポリペプチドを
含む治療用組成物を用い、そしてとの４リペグチドは、
ＴＧＦ−αと共に天然に存在する不純物を実質的に含ま
ない。この方法及び治療用組成物は、種々の外傷、たと
えば皮膚創傷、角膜創傷、及び体の中空上皮系器官の外
傷の治癒を促進するのに有効である。この組成物は、生
理学的に許容される担体又は基剤中において、患部に局
部的に適用される。
との発明は、創傷、たとえば皮膚創傷、角膜創傷、及び
他の上皮及び基質の崩壊、たとえば慢性潰瘍、熱傷、外
科手術上の切開、外傷性創傷、及び中空上皮系器官、た
とえば食道、大腸及び小腸。
他の上皮及び基質の崩壊、たとえば慢性潰瘍、熱傷、外
科手術上の切開、外傷性創傷、及び中空上皮系器官、た
とえば食道、大腸及び小腸。
ロ、生殖路、及び尿路の外傷を治療するための方法を提
供する。この方法は、形質転換され九細胞から得られた
形質転換性成長因子（ＴＧＦ ）のそれに類するアミノ
酸配列及びマイトジェン活性を有するポリペプチドを含
む治療用組成物（生理学的に許容できる担体中にある）
の局部的適用による。
供する。この方法は、形質転換され九細胞から得られた
形質転換性成長因子（ＴＧＦ ）のそれに類するアミノ
酸配列及びマイトジェン活性を有するポリペプチドを含
む治療用組成物（生理学的に許容できる担体中にある）
の局部的適用による。
ポリペプチドはその天然源から精製によって、又は合成
方法、たとえば固相合成技法又は組換体ＤＮＡ技法によ
って得ることができる。３日間にわたって、治療用組成
物を創傷に局部的に適用することによって、治癒過程の
速度が実質的に速められた。
方法、たとえば固相合成技法又は組換体ＤＮＡ技法によ
って得ることができる。３日間にわたって、治療用組成
物を創傷に局部的に適用することによって、治癒過程の
速度が実質的に速められた。
形質転換性成長因子（ＴＧＦ ）は、単一鎖のＲＮＡ屋
レトロウィルスによって形質転換されている、種々の鳥
類の及び哺乳類の細胞、あるヒト腫瘍細胞系、及び限ら
れた数の化学的に形質転換された動物細胞系によって産
生される、５０のアミノ酸のポリペプチドである。ＴＧ
Ｆは、ＴＧＦ−α及びＴＧＦ−βと称する２つの形にお
いて存在し、そして両方の形についての生理学的役割は
現在知られていない。ＴＧＦ−αのアミノ酸配列は、Ｍ
ａｒｑｕａｒｄｔなど、、 ５ｃｉｅｎｃｅ （１９８
４） ２２３ ： １０７９〜１０８２において報告さ
れている。
レトロウィルスによって形質転換されている、種々の鳥
類の及び哺乳類の細胞、あるヒト腫瘍細胞系、及び限ら
れた数の化学的に形質転換された動物細胞系によって産
生される、５０のアミノ酸のポリペプチドである。ＴＧ
Ｆは、ＴＧＦ−α及びＴＧＦ−βと称する２つの形にお
いて存在し、そして両方の形についての生理学的役割は
現在知られていない。ＴＧＦ−αのアミノ酸配列は、Ｍ
ａｒｑｕａｒｄｔなど、、 ５ｃｉｅｎｃｅ （１９８
４） ２２３ ： １０７９〜１０８２において報告さ
れている。
この明細書において使用される場合、形質転換性成長因
子−αすなわちＴＧＦ−αは、公認されバイオアッセイ
〔たとえばＣ１ｆｏｎｅ及びｐ’１ｄｌｅｒ−＊１０３
９〜１０４３１及びＤ＠Ｌａｒｃｏ及びＴｏｄａｒｏ、
。
子−αすなわちＴＧＦ−αは、公認されバイオアッセイ
〔たとえばＣ１ｆｏｎｅ及びｐ’１ｄｌｅｒ−＊１０３
９〜１０４３１及びＤ＠Ｌａｒｃｏ及びＴｏｄａｒｏ、
。
４００１〜４００５ によって報告されたそれら〕に
おいて測定される場合、天然の形質転換性成長因子−α
タン／９り質の生物学的活性に類似する生物学的活性、
特にマイトジェン活性（すなわち、上皮及び基質細胞の
成長促進）を示すポリペプチド生成物に関するであろう
。このポリペプチド生成物は、５以下のアミノ酸によっ
て異なシ、普通３又はそれよシも少ないアミノ酸によっ
て異なる、天然のタンパク質と同じか又は実質的に同じ
アミノ酸配列を持つであろう。多くの場合、ＴＧＦアミ
ノ酸配列配列もしある場合、非極性アミノ酸、すなわち
脂肪族アミノ酸及び芳香族アミノ酸の間での置換によっ
て異なるであろう。天然アミノ酸配列からの偏移は、／
ＩＪ−ｅグチド生成物のマイトジェン活性又はその能
力に有意に影響を及びし、上皮及び基質の治癒を促進す
るであろう。すでに述べたように、ＴＧＦポリペプチド
は、適切な分離技法によって天然源から得られ、そして
精製され、その分離源の中に天然に存在する他のタン・
やり質及び物質が取シ除かれる。一方、ポリペプチドは
、合成技法、たとえばポリペプチドの固相合成によって
、又は適切な微生物宿主におけるＴＧＦ−α遺伝子の発
現によって製造され得る。そのような合成方法は、天然
に存在する不純物全実質的に含まない生成物を製造する
。
おいて測定される場合、天然の形質転換性成長因子−α
タン／９り質の生物学的活性に類似する生物学的活性、
特にマイトジェン活性（すなわち、上皮及び基質細胞の
成長促進）を示すポリペプチド生成物に関するであろう
。このポリペプチド生成物は、５以下のアミノ酸によっ
て異なシ、普通３又はそれよシも少ないアミノ酸によっ
て異なる、天然のタンパク質と同じか又は実質的に同じ
アミノ酸配列を持つであろう。多くの場合、ＴＧＦアミ
ノ酸配列配列もしある場合、非極性アミノ酸、すなわち
脂肪族アミノ酸及び芳香族アミノ酸の間での置換によっ
て異なるであろう。天然アミノ酸配列からの偏移は、／
ＩＪ−ｅグチド生成物のマイトジェン活性又はその能
力に有意に影響を及びし、上皮及び基質の治癒を促進す
るであろう。すでに述べたように、ＴＧＦポリペプチド
は、適切な分離技法によって天然源から得られ、そして
精製され、その分離源の中に天然に存在する他のタン・
やり質及び物質が取シ除かれる。一方、ポリペプチドは
、合成技法、たとえばポリペプチドの固相合成によって
、又は適切な微生物宿主におけるＴＧＦ−α遺伝子の発
現によって製造され得る。そのような合成方法は、天然
に存在する不純物全実質的に含まない生成物を製造する
。
ＴＧＦポリペプチドは次のようにして天然源から単離し
そして精製することができる。このポリペプチドのため
の適切な天然源は、単一鎖のＲＮＡ型腫瘍レトロウィル
ス、たトエばマウスのモロニー肉腫ウィルス（ＭＳＶ）
、マウスのエーペンンシ白血病ウィルス（ＦａＳＶ）
、 ５ｙｎｄｅｒ −ＴｈｓｌｌｓｎＦ＠８Ｖ、 Ｍｃ
Ｄｏｎｏｕｇｈ Ｆ’ｅＳＶ 、及び同様のものによっ
て形質転換された種々の動物細胞、あるヒト腫瘍細胞系
、すなわち転移性ヒト黒色腫細胞系Ａ６７３及びＡ２０
５８．及び限られた数の化学的に形質転換され九動物細
胞系を包含する。形質転換された細胞系又は腫瘍細胞系
は、血漿を補った培地においてコンフルエンスに増殖さ
れ、そして次に、血漿を含まない培地に移され、ならし
培地を形成する。次に血漿を含まない培地は、定期的に
、たとえば１日に一度集められ、そして連続流遠心分離
によって透明にされる。濃縮後、ＴＧＦ−αはグルクロ
マトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、
又は同様のものによってならし培地から分離され得る。
そして精製することができる。このポリペプチドのため
の適切な天然源は、単一鎖のＲＮＡ型腫瘍レトロウィル
ス、たトエばマウスのモロニー肉腫ウィルス（ＭＳＶ）
、マウスのエーペンンシ白血病ウィルス（ＦａＳＶ）
、 ５ｙｎｄｅｒ −ＴｈｓｌｌｓｎＦ＠８Ｖ、 Ｍｃ
Ｄｏｎｏｕｇｈ Ｆ’ｅＳＶ 、及び同様のものによっ
て形質転換された種々の動物細胞、あるヒト腫瘍細胞系
、すなわち転移性ヒト黒色腫細胞系Ａ６７３及びＡ２０
５８．及び限られた数の化学的に形質転換され九動物細
胞系を包含する。形質転換された細胞系又は腫瘍細胞系
は、血漿を補った培地においてコンフルエンスに増殖さ
れ、そして次に、血漿を含まない培地に移され、ならし
培地を形成する。次に血漿を含まない培地は、定期的に
、たとえば１日に一度集められ、そして連続流遠心分離
によって透明にされる。濃縮後、ＴＧＦ−αはグルクロ
マトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、
又は同様のものによってならし培地から分離され得る。
他方、ＴＧＦ−リ４プチドは常用の固相合成技法、たと
えばＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、＋Ｊ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓ
ｏｃ。
えばＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、＋Ｊ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓ
ｏｃ。
（１９６３） ８５ ： ２１４９〜２１５６ により
て記載された技法によって調製され得る。そのアミノ酸
配列は、次のような既知のヒト及びラッ） ＴＧＦ−α
の配列：以下余白 ｈＴＧＦ −α Ｖａ ｌＶａ ＩＳ＠ｒＨ１ａＰｈｅＡｓｎＡｓｐＣｙ
ａＰｒｏＡｓｐＳｅ ｒＨｌ ｓＴｈｒＧｌｎＰｈｅＣ
ｙｓＰｈｅＨｌｓＧｌｙＴｈｒＣｙｍＡｒｇＰｈｓＬｅ
ｕＶａｌＧｌｎＧｌａＡｓｐＬｙｓＰｒｏＡｌａＣｙｓ
ＶａｌＣｙｓＨｌ ｍｓ＠ｒＧ１ｙＴｙｒＶａｌＧ１ｙ
Ａ１ａＡｒｇＣｙｓＧ１ｕＨｆｍＡｌａＡｓｐＬ＠ｏＬ
ｅｕＡ１ｍｒＴＧＦ −α ＶａｌＶａｌＳ＠ｒＨ１ｓＰｈｅＡｓｔ＋ＬｙｓＣｙｓ
ＰｒｏＡｍｐＳ＠ｒＨ１ｓＴｈｒＧｌｎＴｙｒＣｙｓＰ
ｈｅＨ１ｓＧ１ｙＴｈｒＬｙｓＡｒｇＰｈ＊しｓｕＶａ
ｌＧ１ｎＧｌｕＧｌｏＬｙｓＰｒｏＡｌａＣｙｓＶａｌ
ＣｙｍＨ１ｓＳ＠ｒＧｌｙＴｙｒＶａｌＧ１ｙＶａｌＡ
ｒｇＣｙｓＧ１ｕＨ１ｓＡｌａＡｓｐＬ＠ｕＬｅｕＡ１
ａに基ず〈。ｒＴＧＦ−αポリイプチドを合成するため
の特定グロトコールは、この後の実験の部に示される。
て記載された技法によって調製され得る。そのアミノ酸
配列は、次のような既知のヒト及びラッ） ＴＧＦ−α
の配列：以下余白 ｈＴＧＦ −α Ｖａ ｌＶａ ＩＳ＠ｒＨ１ａＰｈｅＡｓｎＡｓｐＣｙ
ａＰｒｏＡｓｐＳｅ ｒＨｌ ｓＴｈｒＧｌｎＰｈｅＣ
ｙｓＰｈｅＨｌｓＧｌｙＴｈｒＣｙｍＡｒｇＰｈｓＬｅ
ｕＶａｌＧｌｎＧｌａＡｓｐＬｙｓＰｒｏＡｌａＣｙｓ
ＶａｌＣｙｓＨｌ ｍｓ＠ｒＧ１ｙＴｙｒＶａｌＧ１ｙ
Ａ１ａＡｒｇＣｙｓＧ１ｕＨｆｍＡｌａＡｓｐＬ＠ｏＬ
ｅｕＡ１ｍｒＴＧＦ −α ＶａｌＶａｌＳ＠ｒＨ１ｓＰｈｅＡｓｔ＋ＬｙｓＣｙｓ
ＰｒｏＡｍｐＳ＠ｒＨ１ｓＴｈｒＧｌｎＴｙｒＣｙｓＰ
ｈｅＨ１ｓＧ１ｙＴｈｒＬｙｓＡｒｇＰｈ＊しｓｕＶａ
ｌＧ１ｎＧｌｕＧｌｏＬｙｓＰｒｏＡｌａＣｙｓＶａｌ
ＣｙｍＨ１ｓＳ＠ｒＧｌｙＴｙｒＶａｌＧ１ｙＶａｌＡ
ｒｇＣｙｓＧ１ｕＨ１ｓＡｌａＡｓｐＬ＠ｕＬｅｕＡ１
ａに基ず〈。ｒＴＧＦ−αポリイプチドを合成するため
の特定グロトコールは、この後の実験の部に示される。
ＴＧＦポリペグチドはまた、適切な微生物宿主中におい
てＴＱＦ−α遺伝子の発現によって産生され得る。この
ＴＧＦ遺伝子はフィルスＤＮＡ 、 ｅＤＮＡ 。
てＴＱＦ−α遺伝子の発現によって産生され得る。この
ＴＧＦ遺伝子はフィルスＤＮＡ 、 ｅＤＮＡ 。
合成りＮＡ 、又はそれらの組み合せ（たとえば、合成
りＮＡはｅ ＤＮＡと一緒になシ、ＴＧＦ−α遺伝子を
完成することができる）であることができる。
りＮＡはｅ ＤＮＡと一緒になシ、ＴＧＦ−α遺伝子を
完成することができる）であることができる。
便宜上、この発明はＴＧＦ−α（上記）のアミノ酸配列
に基づく合成りＮＡ配列を使用する。適切な合成りＮＡ
配列は、よく知られている技法、たとえば、Ｂｅａｕｃ
ａｇｅ及びＣａｒｒｕｔｈ＠ｒｓ、、 Ｔ’＠ｔｒａｈ
ｓｄｒｏｎＬ・ｔ＊ 、 （１９８１） ２２ ： １
８５９〜１８６２によって記載されたホスホラミシト法
によシ、単鎖のＤＮＡフラグメントを合成することによ
って調製され得る。
に基づく合成りＮＡ配列を使用する。適切な合成りＮＡ
配列は、よく知られている技法、たとえば、Ｂｅａｕｃ
ａｇｅ及びＣａｒｒｕｔｈ＠ｒｓ、、 Ｔ’＠ｔｒａｈ
ｓｄｒｏｎＬ・ｔ＊ 、 （１９８１） ２２ ： １
８５９〜１８６２によって記載されたホスホラミシト法
によシ、単鎖のＤＮＡフラグメントを合成することによ
って調製され得る。
相補的鎖が適切な条件下でアニールされ、好ましい二重
鎖の合成遺伝子がもたらされる。
鎖の合成遺伝子がもたらされる。
発現のためには、ＴＧＦ−α遺伝子は、好ましい宿主、
典型的にはＥ、ｅｏｌＩ又は酵母によって認識される複
製系、及びＴＧＦ−α遺伝子の発現を制御する転写及び
翻訳調節制御配列を含む染色体外因子に取シ込まれ得る
。染色体外因子は他の多くの特徴、九とえば選択可能マ
ーカー（染色体外因子の操作を促進する）′を含むこと
ができる。
典型的にはＥ、ｅｏｌＩ又は酵母によって認識される複
製系、及びＴＧＦ−α遺伝子の発現を制御する転写及び
翻訳調節制御配列を含む染色体外因子に取シ込まれ得る
。染色体外因子は他の多くの特徴、九とえば選択可能マ
ーカー（染色体外因子の操作を促進する）′を含むこと
ができる。
適切な染色体外因子が調製された後、これを用いて適切
な宿主全形質転換することができ、そしてその宿主中で
発現されたポリイブチー生成物が回収され、そしてこの
発明の治療用組成物に使用するために精製される。この
ポリーｅ、ａチド生成物の精製は、種々の方法、たとえ
ばイオン交換クロマトグラフィー、高性能液体クロマド
グ２フイー。
な宿主全形質転換することができ、そしてその宿主中で
発現されたポリイブチー生成物が回収され、そしてこの
発明の治療用組成物に使用するために精製される。この
ポリーｅ、ａチド生成物の精製は、種々の方法、たとえ
ばイオン交換クロマトグラフィー、高性能液体クロマド
グ２フイー。
及び同様のものによシ達成され得る。ＴＧＦ−αは純度
７０チよシも高く、好ましくは少なくとも純度８０俤、
よシ好ましくは少なくとも純度９０慢であることが望ま
しい。
７０チよシも高く、好ましくは少なくとも純度８０俤、
よシ好ましくは少なくとも純度９０慢であることが望ま
しい。
この発明の組成物は、すべての皮膚創傷、角膜創傷、及
び体の中空上皮系器官の外傷を含む広範囲の種類の創傷
全治療するために有用であろう。
び体の中空上皮系器官の外傷を含む広範囲の種類の創傷
全治療するために有用であろう。
この治療のために適切な創傷は、熱傷、擦過傷。
切傷、及び同様のものから生ずる創傷、並びに外科手術
過程、たとえば外科手術上の切開及び皮膚移植からの創
傷全包含する。この発明の組成物による治療に適切な他
の状態は、慢性状態、たとえば慢性潰瘍、糖尿病性潰瘍
、及び他の非治癒性（栄養性）状態を含む。この組成物
は角膜の上皮層、基質層及び内皮層に影響を及ぼす創傷
を含む角膜及び強膜創傷を治療するのに特に使用される
であろう。この発明による治療は、角膜の内皮層の細胞
分裂を促進するであろう。
過程、たとえば外科手術上の切開及び皮膚移植からの創
傷全包含する。この発明の組成物による治療に適切な他
の状態は、慢性状態、たとえば慢性潰瘍、糖尿病性潰瘍
、及び他の非治癒性（栄養性）状態を含む。この組成物
は角膜の上皮層、基質層及び内皮層に影響を及ぼす創傷
を含む角膜及び強膜創傷を治療するのに特に使用される
であろう。この発明による治療は、角膜の内皮層の細胞
分裂を促進するであろう。
このプリペプチドは患部に適用するために生理学的に許
容される担体中に導入されるであろう。
容される担体中に導入されるであろう。
この担体の性質は広く異なシ、そして予定される適用の
場所に依存するであろう。皮膚への適用のためには、ク
リーム又は軟膏の基剤が普通好ましく、適切な基剤は、
ラノリン、Ｓｉｌマ１ｄｓｎｅ”（Ｍａｒｉｏｎ） （
特に熱傷の治療のために）。
場所に依存するであろう。皮膚への適用のためには、ク
リーム又は軟膏の基剤が普通好ましく、適切な基剤は、
ラノリン、Ｓｉｌマ１ｄｓｎｅ”（Ｍａｒｉｏｎ） （
特に熱傷の治療のために）。
Ａｑｕａｐｈｏｒ■（Ｄｎｋｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉ
ｅｓ ＊ ＳｏｕｔｈＮｏｒｗａｌｋ＊ Ｃｏｎｎ＠ｃ
ｔｉｃｕｔ ） 、及び同様のものを含む。好ましくは
、ＴＧＦ−担体組成物を包帯及び他の傷用包帯中に導入
し、傷口へのＴＧＦの連続的畢露をも九らすことが可能
であろう。エーロゾル適用器もまた、使用することがで
きる。
ｅｓ ＊ ＳｏｕｔｈＮｏｒｗａｌｋ＊ Ｃｏｎｎ＠ｃ
ｔｉｃｕｔ ） 、及び同様のものを含む。好ましくは
、ＴＧＦ−担体組成物を包帯及び他の傷用包帯中に導入
し、傷口へのＴＧＦの連続的畢露をも九らすことが可能
であろう。エーロゾル適用器もまた、使用することがで
きる。
角膜の治療のためには、との担体は目への適用のために
適切なものであろう。適切な担体は、軟膏、無菌の塩溶
液、及び等張の塩溶液、たとえば５ｏｒｂｌ −ｃａ
ｒｅ （Ａｌｌｅｒｇａｎ Ｐｈｍｒｍａｅ
ｅｕｔｉｃａｌ）。
適切なものであろう。適切な担体は、軟膏、無菌の塩溶
液、及び等張の塩溶液、たとえば５ｏｒｂｌ −ｃａ
ｒｅ （Ａｌｌｅｒｇａｎ Ｐｈｍｒｍａｅ
ｅｕｔｉｃａｌ）。
Ｎ＊ｏｄｅｅａｄｏｎ■（Ｍ＠ｒｃｈ 、 ５ｈａｒｐ
及びＤｏｈｍｅ ）、及び同様のものを含む。適切な軟
膏基剤は適標Ｌａａｒｉｌａｂ・■ として売られてい
る。点眼用担体はそれらが製剤された後すぐに適用され
ない場合には、防腐薬、たとえば塩化ペンデルコニウム
及びエデト酸二ナトリウムを通常含むであろう。
及びＤｏｈｍｅ ）、及び同様のものを含む。適切な軟
膏基剤は適標Ｌａａｒｉｌａｂ・■ として売られてい
る。点眼用担体はそれらが製剤された後すぐに適用され
ない場合には、防腐薬、たとえば塩化ペンデルコニウム
及びエデト酸二ナトリウムを通常含むであろう。
しばしば、リヂソーム中にＴＧＦ−αを導入し、長時間
にわたって、典型的には２４〜４８時間、ＴＧＦ−αを
放出せしめることが好ましい。そのような導入は、ＴＧ
Ｆ−αが上記のように傷用包帯中に導入される場合、特
に好ましいかもしれない。
にわたって、典型的には２４〜４８時間、ＴＧＦ−αを
放出せしめることが好ましい。そのような導入は、ＴＧ
Ｆ−αが上記のように傷用包帯中に導入される場合、特
に好ましいかもしれない。
治療用組成物中のポＩＪ 、ｅグチドの濃度は、臨界的
でなく、普通ポリ（グチドは少なくとも約１μＶｄ１普
通１０μｍ１／ｍｌ〜１０歿々ｊの間で存在するであろ
う。その組成物は典型的には眼への点眼剤として、又は
皮膚へのクリーム、軟膏もしくはローン、ンとして、患
部に局所的に適用されるであろう。眼の場合、頻繁に治
療することが好ましく、普通４時間又はそれよシも短い
間隔で適用される。
でなく、普通ポリ（グチドは少なくとも約１μＶｄ１普
通１０μｍ１／ｍｌ〜１０歿々ｊの間で存在するであろ
う。その組成物は典型的には眼への点眼剤として、又は
皮膚へのクリーム、軟膏もしくはローン、ンとして、患
部に局所的に適用されるであろう。眼の場合、頻繁に治
療することが好ましく、普通４時間又はそれよシも短い
間隔で適用される。
皮膚に関しては、治癒の間、１日当シ２〜４回又はそれ
よシも頻繁に治療用組成物を患部に連続して適用し続け
ることが好ましい。
よシも頻繁に治療用組成物を患部に連続して適用し続け
ることが好ましい。
場合によっては、この発明の治療用組成物を、典壓的に
は約０．００１重量〜２重量％の有効量の麻酔薬、抗生
物質、防腐剤、及び他の薬と共に混合することができる
。
は約０．００１重量〜２重量％の有効量の麻酔薬、抗生
物質、防腐剤、及び他の薬と共に混合することができる
。
次の実験結果は、限定的でなく、例として提供されてい
る。
る。
実験
材料及び方法
Ｍｍｒｑｕａｒｄｔなど、、前記によって報告された、
ネコ肉腫ウィルスによりて形質転換されたラットのＦｉ
ｓｈ・ｒ胚繊維芽細胞のならし培地から精製されたＴＧ
Ｆについてのアミノ酸配列に基づいて、ＴＧＦ−αポリ
′（グチドを合成した。この配列は次のとうりであった
： Ｈ−Ｖａｌ−ｖａｌ−８＠ｒ−Ｈｌｓ−Ｐｈ＠−Ａａｎ
−Ｌｙ＠−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ −Ａｍｐ−８ｅｒ−Ｈｌｓ
−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｌａ−
Ｇｌｙ −Ｔｈｒ−Ｃｙａ−Ａｒｇ−Ｐｂｅ−Ｌｅａ−
ｖａｌ −Ｇｉｎ−Ｇｌｕ−Ｇｌｏ−Ｌｙｓ −Ｐｒｏ
−Ａｉｍ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｍ−Ｈｌｓ−８ｅをＧ
ｌｙ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ −Ｇｌｙ−Ｖａ ｌ −Ａｒｇ
−Ｃｙａ−Ｇｌ ｕ −Ｈｌ ａ −Ａｌ ａ−Ａｓ
ｐ −Ｌｅ ｕ−Ｌｅａ −Ａｌａ −ＯＨ。
ネコ肉腫ウィルスによりて形質転換されたラットのＦｉ
ｓｈ・ｒ胚繊維芽細胞のならし培地から精製されたＴＧ
Ｆについてのアミノ酸配列に基づいて、ＴＧＦ−αポリ
′（グチドを合成した。この配列は次のとうりであった
： Ｈ−Ｖａｌ−ｖａｌ−８＠ｒ−Ｈｌｓ−Ｐｈ＠−Ａａｎ
−Ｌｙ＠−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ −Ａｍｐ−８ｅｒ−Ｈｌｓ
−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｌａ−
Ｇｌｙ −Ｔｈｒ−Ｃｙａ−Ａｒｇ−Ｐｂｅ−Ｌｅａ−
ｖａｌ −Ｇｉｎ−Ｇｌｕ−Ｇｌｏ−Ｌｙｓ −Ｐｒｏ
−Ａｉｍ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｍ−Ｈｌｓ−８ｅをＧ
ｌｙ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ −Ｇｌｙ−Ｖａ ｌ −Ａｒｇ
−Ｃｙａ−Ｇｌ ｕ −Ｈｌ ａ −Ａｌ ａ−Ａｓ
ｐ −Ｌｅ ｕ−Ｌｅａ −Ａｌａ −ＯＨ。
Ｎ“−アミノ末端についてのをプチルオキシカルゴニル
と側鎖についてのベンジルアルコール誘導体との通常の
組み合せを用いる、異なる酸不安定性保護基法を使用し
て、Ｍ＠ｒｒ１ｆｌｓｌｄ 、前記によって記載された
一般原理に続いて、遂次的固相アプローチによって、ｒ
ＴＧＦ−αの化学的合成を相互的に実施した。改曳され
た、一層酸安定性ベンジルエステル結合（ポリマー支持
体に保護されたアミノ酸を固定している）を使用し、反
復酸処理の間、ペプチドの損失を最小にした（Ｍｉｔｃ
ｈａｌｌなどａ＠ Ｊ、 Ａｍ、 Ｃｈｓｍ、 Ｓｏｃ
、 （１９７６） ９８ ： ７３５７〜７３６２ ）
。ペプチドの完全な脱保護及び樹脂からのペプチドの脱
離を、低濃度〜高濃度のＨＦ法（ｌｏｗ−ｈｉｇｈ Ｈ
Ｆ ｍ＠ｔｈｏｄ ） （Ｔｍｍなど、。
と側鎖についてのベンジルアルコール誘導体との通常の
組み合せを用いる、異なる酸不安定性保護基法を使用し
て、Ｍ＠ｒｒ１ｆｌｓｌｄ 、前記によって記載された
一般原理に続いて、遂次的固相アプローチによって、ｒ
ＴＧＦ−αの化学的合成を相互的に実施した。改曳され
た、一層酸安定性ベンジルエステル結合（ポリマー支持
体に保護されたアミノ酸を固定している）を使用し、反
復酸処理の間、ペプチドの損失を最小にした（Ｍｉｔｃ
ｈａｌｌなどａ＠ Ｊ、 Ａｍ、 Ｃｈｓｍ、 Ｓｏｃ
、 （１９７６） ９８ ： ７３５７〜７３６２ ）
。ペプチドの完全な脱保護及び樹脂からのペプチドの脱
離を、低濃度〜高濃度のＨＦ法（ｌｏｗ−ｈｉｇｈ Ｈ
Ｆ ｍ＠ｔｈｏｄ ） （Ｔｍｍなど、。
１０５ ： ６４４２〜６４５４ ：ｌ によって達
成した。
成した。
この方法は希釈ＨＦ溶液中におけるＳＮ２メカニズムに
よってベンジル保護基を除去した。これは通常のＳＮＩ
Ｎ保脱法において発生するカル？陽イオンによる危険な
副反応を最小にせしめる。それはまた、多数のジスルフ
ィド結合を含むタン・々り質の合成を妨げるかも知れな
いシスチニル副反応を最小にせしめる。
よってベンジル保護基を除去した。これは通常のＳＮＩ
Ｎ保脱法において発生するカル？陽イオンによる危険な
副反応を最小にせしめる。それはまた、多数のジスルフ
ィド結合を含むタン・々り質の合成を妨げるかも知れな
いシスチニル副反応を最小にせしめる。
ＨＦ処理後そしていずれかの精製の前、粗製でしかも還
元された合成ｒＴＧＦ−α全酸化し、そして還元された
グルタチオン及び酸化されたグルタチオンの組み合せの
存在において、混合ジスルフィド法によりて再生した（
Ａｈｍ＠ｄなど、。
元された合成ｒＴＧＦ−α全酸化し、そして還元された
グルタチオン及び酸化されたグルタチオンの組み合せの
存在において、混合ジスルフィド法によりて再生した（
Ａｈｍ＠ｄなど、。
これは、精製の間−リマー物質の形成を防止した。
再生された粗ｒＴＧＦ−αは、天然のｒ ＴＧＦ−αと
比較する場合、４０〜５０％のＥＧＦ放射性受容体活性
及びチロシン−特異的プロティンキナーゼ活性を含んで
いた。粗合成ｒＴＧＦ−αｙＦ！：３つの段階 ：すな
わち、（１） ＢｉｏＧｅｌ Ｐ−１０カラムによるグ
ルテ過、（２） ＣＭ −５ｅｐｈａｄ＠ｘカラムによ
るイオン交換クロマトグラフィー、及び（３）Ｃ１６逆
相カラムによる分離用高性能液体クロマトグラフィー（
ＨＰＬＣ）において均質に精製した。全収率は、アラニ
ンから樹脂への出発負荷に基づいて、３１％であった。
比較する場合、４０〜５０％のＥＧＦ放射性受容体活性
及びチロシン−特異的プロティンキナーゼ活性を含んで
いた。粗合成ｒＴＧＦ−αｙＦ！：３つの段階 ：すな
わち、（１） ＢｉｏＧｅｌ Ｐ−１０カラムによるグ
ルテ過、（２） ＣＭ −５ｅｐｈａｄ＠ｘカラムによ
るイオン交換クロマトグラフィー、及び（３）Ｃ１６逆
相カラムによる分離用高性能液体クロマトグラフィー（
ＨＰＬＣ）において均質に精製した。全収率は、アラニ
ンから樹脂への出発負荷に基づいて、３１％であった。
精製されたｒＴＧＦ−αポリペプチドを、５０ｎｌ／ダ
の濃度で等張（２８５ミリオスモル）の無菌リン酸塩に
よυ緩衝された塩溶液（ｐＨ７，４）と混合した。
の濃度で等張（２８５ミリオスモル）の無菌リン酸塩に
よυ緩衝された塩溶液（ｐＨ７，４）と混合した。
全体の長さにそって前眼房内まで及び長さ５２ｎｍの完
全に貫通する切開全成熟した雌のマカカ・ファシクラリ
ス（ＭＢＣ＠６＠ ｆｌｅｌｃｕｌａｒｉｇ ） 霊
長類の中央角膜に行なった。右眼は対照として取シ扱わ
れ、そして等張（２８５ミリオスモル）の無菌リン酸塩
によシ緩衝されたｒＴＧＦ−αを含まない塩溶液（ｐＨ
７，４）の２滴を１日に３回処理した。
全に貫通する切開全成熟した雌のマカカ・ファシクラリ
ス（ＭＢＣ＠６＠ ｆｌｅｌｃｕｌａｒｉｇ ） 霊
長類の中央角膜に行なった。右眼は対照として取シ扱わ
れ、そして等張（２８５ミリオスモル）の無菌リン酸塩
によシ緩衝されたｒＴＧＦ−αを含まない塩溶液（ｐＨ
７，４）の２滴を１日に３回処理した。
左眼は上記の治療用製剤によシ同じ計画で処理された。
処理の３日後、角膜の縁を通して前眼房内に小孔針（２
５ｒ−ジ）を挿入することによって創傷の強さ全量的に
測定した。この針金アネロイド圧力計に連結し、そして
傷がまず漏れ始め、そして次に破裂するまで、圧力をゆ
つ〈υ絶え間なく高めた。この方法は、Ｗｅｅｎｅ 、
、 Ａｎａｌ 。
５ｒ−ジ）を挿入することによって創傷の強さ全量的に
測定した。この針金アネロイド圧力計に連結し、そして
傷がまず漏れ始め、そして次に破裂するまで、圧力をゆ
つ〈υ絶え間なく高めた。この方法は、Ｗｅｅｎｅ 、
、 Ａｎａｌ 。
Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ （１９８３） １５ ： ４３
８によりて詳しく記載されている。
８によりて詳しく記載されている。
結果
第１表に示された結果は、ＴＧＦ−αによシ処理された
角膜の破裂強さが塩溶液によシ処理された対照角膜よシ
有意に強いこと金示す。
角膜の破裂強さが塩溶液によシ処理された対照角膜よシ
有意に強いこと金示す。
第１表
水銀のｍｍ
サルＰ−２１２５３０＊ ２１０ ２２５＊サ
ルＰ−２０３５９０＊ １５５ ）３００＊
＊ を４０，０、Ｐ（０，０２５、対Ｔ−検定。
ルＰ−２０３５９０＊ １５５ ）３００＊
＊ を４０，０、Ｐ（０，０２５、対Ｔ−検定。
この発明に従えば、皮膚創傷、角膜創傷、及び体の中空
上皮系器官の創傷を含む上皮及び基質の創傷の急速な治
ｆＭ金促進せしめる傷用治療組成物が提供される。この
組成物は、天然の形質転換性成長因子のそれに対応する
アミノ酸配列及びマイトジェン活性を有するポリペグチ
−生成物を含む。
上皮系器官の創傷を含む上皮及び基質の創傷の急速な治
ｆＭ金促進せしめる傷用治療組成物が提供される。この
組成物は、天然の形質転換性成長因子のそれに対応する
アミノ酸配列及びマイトジェン活性を有するポリペグチ
−生成物を含む。
この組成物は角膜中の十分な厚さの切開の治癒をひじょ
うに高めることが見出され九〇 前述の発明は、明確に理解するために例示的及び測的に
いくらか詳細に記載されているが、この発明の範囲内で
変化及び変更を行なうことができる。
うに高めることが見出され九〇 前述の発明は、明確に理解するために例示的及び測的に
いくらか詳細に記載されているが、この発明の範囲内で
変化及び変更を行なうことができる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、上皮及び基質の創傷を処理して、それらの治癒を促
進せしめるための方法であって、創傷部の治癒を促進す
るのに有効な量の形質転換性成長因子−α（ＴＧＦ−α
）を適用することを含んで成る方法。 ２、前記ＴＧＦ−αを角膜の創傷部に適用する特許請求
の範囲第１項記載の方法。 ３、前記ＴＧＦ−αを角膜基質の創傷部に適用する特許
請求の範囲第２項記載の方法。 ４、前記ＴＧＦ−αが１μｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌの
範囲の濃度で生理学的に許容される担体中に存在する特
許請求の範囲第１項記載の方法。 ５、前記ＴＧＦ−αがｉｎ ｖｉｔｒｏで合成され、そ
してｒＴＧＦ−αのアミノ酸配列を有するものである特
許請求の範囲第１項記載の方法。 ６、前記ＴＧＦ−αを固相合成によって調製する特許請
求の範囲第１項記載の方法。 ７、上皮及び基質の創傷の治療のための組成物であって
、クリーム、軟膏、及び無菌の塩溶液から成る群から選
択された生理学的に許容される担体中に１μｇ／ｍｌ〜
１０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する、天然不純物を実質的
に含まない形質転換因子−α（ＴＧＦ−α）を含んで成
る組成物。 ８、前記ＴＧＦ−αがｒＴＧＦα＾−である特許請求の
範囲第７項記載の組成物。 ９、前記ＴＧＦ−αがｉｎ ｖｉｔｒｏで合成され、そ
してｒＴＧＦ−αのアミノ酸配列を有するものである特
許請求の範囲第７項記載の組成物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US69598385A | 1985-01-29 | 1985-01-29 | |
| US695983 | 1985-01-29 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61218525A true JPS61218525A (ja) | 1986-09-29 |
Family
ID=24795239
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61014906A Pending JPS61218525A (ja) | 1985-01-29 | 1986-01-28 | 傷の治癒を促進する為に形質転換性成長因子の使用 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0190018B1 (ja) |
| JP (1) | JPS61218525A (ja) |
| AT (1) | ATE87828T1 (ja) |
| AU (2) | AU5249786A (ja) |
| CA (1) | CA1253071A (ja) |
| DE (1) | DE3688203T2 (ja) |
Families Citing this family (28)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4863899A (en) * | 1983-05-09 | 1989-09-05 | Todaro George J | Biologically active polypeptides |
| US5240912A (en) * | 1983-05-09 | 1993-08-31 | Todaro George J | Transforming growth factor (TGF) peptides |
| US5165938A (en) * | 1984-11-29 | 1992-11-24 | Regents Of The University Of Minnesota | Wound healing agents derived from platelets |
| US5130300A (en) * | 1986-03-07 | 1992-07-14 | Monsanto Company | Method for enhancing growth of mammary parenchyma |
| US4983580A (en) * | 1986-04-04 | 1991-01-08 | Allergan, Inc. | Methods and materials for use in corneal wound healing |
| US4981841A (en) * | 1986-04-04 | 1991-01-01 | Allergan, Inc. | Methods and materials for use in corneal wound healing |
| US5527772A (en) * | 1987-10-20 | 1996-06-18 | Holick; Michael F. | Regulation of cell proliferation and differentiation using peptides |
| GB8806893D0 (en) * | 1988-03-23 | 1988-04-27 | Unilever Plc | Cosmetic composition |
| EP0339905A3 (en) * | 1988-04-25 | 1991-05-08 | Ethicon, Inc. | Wound healing compositions containing growth factors and retinoids |
| US5360611A (en) * | 1988-10-03 | 1994-11-01 | Alcon Laboratories, Inc. | Pharmaceutical compositions and methods of treatment of the cornea following ultraviolet laser irradiation |
| US5271939A (en) * | 1988-10-03 | 1993-12-21 | Alcon Laboratories, Inc. | Pharmaceutical compositions and methods of treatment to prevent and treat corneal scar formation produced by laser irradiation |
| US5124392A (en) * | 1988-10-03 | 1992-06-23 | Alcon Laboratories, Inc. | Pharmaceutical compositions and methods of treatment to prevent and treat corneal scar formation produced by laser irradiation |
| US4939135A (en) * | 1988-10-03 | 1990-07-03 | Alcon Laboratories, Inc. | Pharmaceutical compositions and methods of treatment to prevent and treat corneal scar formation produced by laser irradiation |
| US5102870A (en) * | 1989-04-14 | 1992-04-07 | Schering Ag | Treatment and prevention of oral mucositis with growth factors |
| US5182261A (en) * | 1989-07-13 | 1993-01-26 | The Rockefeller University | Modified transforming growth factor alpha oligopeptides and pharmaceutical compositions thereof |
| US5242902A (en) * | 1989-09-06 | 1993-09-07 | The Regents Of The University Of California | Defensin peptide compositions and methods for their use |
| US5824297A (en) * | 1990-06-25 | 1998-10-20 | Oncogene Science, Inc. | Tissue-derived tumor growth inhibitors, methods of preparation and uses thereof |
| AU8532691A (en) * | 1990-08-01 | 1992-03-02 | Chiron Ophthalmics Inc. | Method for treating corneal endothelial wounds |
| US5817625A (en) * | 1992-09-21 | 1998-10-06 | Oncogene Science, Inc. | Methods of prevention of oral mucositis with transforming growth factor beta |
| WO1995009003A1 (en) * | 1993-09-29 | 1995-04-06 | Alcon Laboratories, Inc. | Compositions containing growth factors and antimetabolites |
| US5624893A (en) * | 1993-10-14 | 1997-04-29 | Alcon Laboratories, Inc. | Pharmaceutical compositions and methods of treatment of the cornea following laser irradiation |
| US6063757A (en) * | 1995-11-29 | 2000-05-16 | Urso; Richard G. | Wound treatment method with nerve growth factor |
| US7745106B2 (en) | 1997-06-24 | 2010-06-29 | Cascade Medical Enterprises, Llc | Methods and devices for separating liquid components |
| US6979307B2 (en) | 1997-06-24 | 2005-12-27 | Cascade Medical Enterprises Llc | Systems and methods for preparing autologous fibrin glue |
| AU2763099A (en) | 1998-06-22 | 2000-01-10 | Charles E. Worden | Enriched platelet wound healant |
| ATE364315T1 (de) * | 1999-04-26 | 2007-07-15 | Applied Protein Sciences Llc | Tgf-alpha polypeptide, funktionelle fragmente und verfahren zu ihrer anwendung |
| US6649072B2 (en) | 2001-11-16 | 2003-11-18 | Robert Brandt | Method for producing autologous platelet-rich plasma |
| KR101021197B1 (ko) * | 2008-04-11 | 2011-03-11 | (주)케어젠 | 성장인자―미미킹 펩타이드 및 그의 용도 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3382562D1 (de) * | 1982-09-24 | 1992-06-25 | Us Health | Wiederherstellung von gewebe bei tieren. |
| IE57724B1 (en) * | 1983-05-09 | 1993-03-24 | Todaro George Joseph | Biologically active polypeptides |
| DE3587022T2 (de) * | 1984-02-17 | 1993-06-17 | Genentech Inc | Menschlicher transformationswachstumsfaktor und vorlaeufer oder fragment hiervon, zellen, dna, vektoren und verfahren zu ihrer herstellung, zusammensetzungen und produkte, die diese enthalten, sowie davon abgeleitete antikoerper und diagnostizierverfahren. |
-
1986
- 1986-01-20 AU AU52497/86A patent/AU5249786A/en not_active Abandoned
- 1986-01-24 DE DE8686300486T patent/DE3688203T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1986-01-24 EP EP86300486A patent/EP0190018B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1986-01-24 AT AT86300486T patent/ATE87828T1/de not_active IP Right Cessation
- 1986-01-28 JP JP61014906A patent/JPS61218525A/ja active Pending
- 1986-01-28 CA CA000500553A patent/CA1253071A/en not_active Expired
-
1989
- 1989-12-29 AU AU47384/89A patent/AU4738489A/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA1253071A (en) | 1989-04-25 |
| DE3688203T2 (de) | 1993-07-22 |
| AU4738489A (en) | 1990-05-03 |
| EP0190018A2 (en) | 1986-08-06 |
| EP0190018A3 (en) | 1988-01-27 |
| DE3688203D1 (de) | 1993-05-13 |
| EP0190018B1 (en) | 1993-04-07 |
| ATE87828T1 (de) | 1993-04-15 |
| AU5249786A (en) | 1986-08-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPS61218525A (ja) | 傷の治癒を促進する為に形質転換性成長因子の使用 | |
| US4959353A (en) | Promotion of corneal stroma wound healing with human epidermal growth factor prepared from recombinant DNA | |
| US5965530A (en) | Therapeutic uses of keratinocyte growth factor | |
| CA2159109C (en) | Therapeutic uses of keratinocyte growth factor | |
| US5545719A (en) | Nerve growth peptides | |
| JPH0665680B2 (ja) | 動物組織の修復 | |
| US5158935A (en) | Human epidermal growth factor having substitution at position 11 | |
| US5397770A (en) | Yeast-derived epidermal growth factor/urogastrone-like products | |
| EP0069232B1 (en) | Pharmaceutical composition comprising phenyl acetyl glutamine,a combination of this compound with phenylacetic acid or 3-(phenylacetylamino)piperidine-2,6-dione,a process for isolating the latter from urine and a process for the synthesis of 3-(phenylacetylamino)piperidine-2,6-dione | |
| WO1993003757A1 (en) | Muteins of epidermal growth factor exhibiting enhanced binding at low ph | |
| US7011965B2 (en) | Compositions and methods for stimulating wound healing and fibroblast proliferation | |
| ES2404669T3 (es) | Péptidos bioactivos cortos para modulación celular e inmunológica | |
| US4558057A (en) | Purified antineoplaston fractions and methods of treating neoplastic disease | |
| EP0410671B1 (en) | Acylated epidermal growth factor | |
| CA2100720C (en) | Medicinal composition comprising tcf-ii | |
| JPH02117698A (ja) | 血管内皮細胞成長因子 | |
| KR100302935B1 (ko) | 사람혈액응고인자xiii과아프로티닌을포함하는약제학적조성물 | |
| JP3931353B2 (ja) | 創傷治癒剤 | |
| US4559325A (en) | Purified antineoplaston fractions and methods of treating neoplastic disease | |
| JPH09500088A (ja) | 創傷治癒用組成物 | |
| JPH07316066A (ja) | 創傷治癒剤 | |
| US6559123B1 (en) | Tissue-derived tumor growth inhibitors, methods of preparation and uses thereof | |
| JPH01279840A (ja) | 新規外用組成物 | |
| JPH0912478A (ja) | 新規な皮膚欠損症治療剤 | |
| JPH0656692A (ja) | Ｔｃｆ−ｉｉを有効成分とする創傷治療剤 |