JPH01238594A - 多糖類および多糖類の高分子接合体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、ヘモフィルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍ
ｏｐｈｉｌｕｓ　　Ｉ　ｎｆ　１ｕｅｎｚａｅ）　ｂ耐
バクテリア上に見出されるポリ（リボシル−リビトール
−ホスフェート）のカプセル多糖類のオリゴマーのサブ
ユニットの合成に関する。本発明は、スペーサー要素を
使用することを必要としないで、これらの化合物を免疫
原蛋白質へ共有結合することを記載する。さらに、本発
明は、哺乳類におけるヘモフィルス（Ｈａｅｍｏｐｈｉ
ｌｕｓ）バクテリアの感染を防止するだめのワクチンと
して、これらの複合体を使用することを包含する。 ヘモフィルス・イン７ルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌ
ｕ５　　ｌ１ｆｌｕｅｎｚａｅ）によるバクテリアの髄
膜炎は、有効に抑制されていなかった子供のわずかの重
大なかつ生命を脅かす病気の１つとして残っている。抗
体の使用は、病気の致死率を９０％以上から５〜ｌＯ％
に減少した。しかしながら、生存体の３０〜５０％は永
久の神経学的続発症、例えば、視覚消失、聴覚消失、精
神薄弱および水頭症に悩まされる。現在、ヘモフィルス
・インフルエンザｘ　（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ　　Ｉ
ｎｆｌｕｅｎｚａｅ）　ｂ型（ＨＩ−ｂ）は、年令３月
ないし４年の子供の間に主として発生する、米国におけ
る地方病性の髄膜炎の主要な原因である［Ｍ、ソロトロ
フスキー（Ｓ０１ｏｔｏｒｏｖｓｋｙ）　、Ｍ、リン（
Ｌｙｎｎ）　、ＣＲＣクリティカル・リビューズ・オブ
・マイクロバイオロジー　（Ｃｒｉｔ、　　Ｒｅｖ、　
Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、）　、６．１　　（ｌｃｔ７８）
］。 有機体、ダラム陰性球桿菌（ｃｏｃｃｏｂａｃｉｌｌｕ
ｓ）は、酸書に、プ７エイファ−（Ｐ　ｆｅｉｆｆｅｒ
）によって、１８８９−１８９２年の広く流行の間イン
フルエンザを有すると診断された人の鼻咽腔がら分離さ
れた。 ピットマン（Ｐ　ｉｔＬｍａｎｎ）　　［Ｍ　、　　Ｊ
　、　Ｅ　ｘｐ−Ｍｅｄ、５８．４７１　（１９３１）
；１ｂｉｄ　　５８゜６８３　（１９３３）は、透明培
地上で増殖した脳を髄液からのへモフィルス拳インフル
エンサエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ　　Ｉ　ｎｆ　１ｕ
ｅｎｚａｅ）　ｂ型の株は、外観によって平滑（Ｓ）お
よび粗い（Ｒ）と記載される２つの型のコロニーを生成
したと記載した。 ＳＳよびＲの株は異なる病原性および抗原性を有した。 それを説明するために、ピットマンは、これらのＳ有機
体のヴイルレンスを増強する、Ｓ有機体上のカプセルの
存在を仮定した。次いで、カプセルの６つの抗原性の型
を立証し、そして文字ａ　−ｆで表示した。 ａ％　　ｂ％　Ｃ％ｄおよびｆ型のカプセル物質は、リ
ンを含有する型ｄを除外して、すべてが多糖類として同
定された［Ｃ，Ｆ、マクファーソン（Ｍ　ｃ　Ｐ　ｈｅ
ｒｓｏｎ）ら、ジャーナル・オブ・イムノロジー（Ｊ　
、　　Ｉ　ｍｍｕｎｏｌ、）　、５２．２０７　（１９
４６）］、ヘモフィルス（Ｈａｅｍｏｐｈ　ｉ　１ｕｓ
）髄膜炎からの最も頻繁に直面する、ｂ型はリボースを
含有した。１９５３年において、ゼイメンホ７（Ｚ　ａ
ｍｓｎｈｏｆ）ら［ジャーナル・オブ・バイオロジカル
・ケミストリー（Ｊ　、　Ｂ　ｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ、）
、２０３．６９５　（１９５３）］は、Ｈ１−ｂの型特
異的物質がリポース部分の間の３＝５−ホス７エートジ
エステル連結をもつポリリボースホスフェートから構成
されると仮定した。これらの鎖の２つは、１：ｌ−グリ
コシドの結合によって一緒に連結されていた。他の刊行
物［Ｅ、ロウゼンバーグ（Ｒｏｚｅｎｂｅｒｇ）　、Ｓ
　、ゼイメンホフ（Ｚ　ａｍｅｎｈｏｆ）　、ジャーナ
ル・オブ・バイオロジカル・ケミ　ス　ト　リ　−（Ｊ
　　、　　　Ｂｉｏｌ、　　　Ｃｈｅｍ、　　）　　、
　　２　３　６　．２８４５　（１９６１）　；　１ｂ
ｉｄ、　２３７．１０４０（１９６１）］は、二重リポ
ース単位をβ−り−ｒｉｂｆ−β−ｒｉｂｆとして確立
し、そして構造Ｉを提案した。 ■ リビトールがＨｌ−ｂからの分解生成物として後に発見
されたことに基づいて、ゼイメンホ７（Ｚ　ａｍｅｎｈ
ｏｆ）が提案した構造）は疑わしくなった。この問題を
解決するために、この構造の再研究はクリセル（Ｃｒｉ
ｓｅｌ）ら［ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミ
ストリー（Ｊ、Ｂｉｏｌ。 Ｃｈｅｍ、）　、２５０．４９２６　（１９７５）］　
によって実施され、彼はＨＩ−ｂ中のりビトールの存在
を確証し、そして等モルの比率のリポース、リビトール
およびホスフェートを発見した。過ヨウ素酸塩の酸化の
研究、酸性およびアルカリ性加水分解物のペーパークロ
マトグラフィー、および１３ＣＮＭＲスペクトルのデー
タは、ＨＩ−ｂの構造がポリリポフラシノシルリビトー
ルホスフエート（ＰＲＰ）ポリマーＩＩであることを示
しｔ；。 ３）　−Ｒｉｂｆ−（１−１）　−Ｒｉｂｉｔｏｌ−（
５−ｐｏ２ｏ− プレインフォースーヘランダー（Ｂ　ｒａｎｅｆｏｒｓ
　−Ｈｅｌａｎｄｅｒ）ら［アクタ・ケミ力・スカンジ
ナビ力（Ａｃｔａ　Ｃｈｅｍ、　５ｃａｎｄ、　）　Ｂ
ｓ　３０．２７６（１９７６）］は、リビトール部分が
Ｄ−立体配置をもつことを立証した。リビトール部分中
の他の主要位置に結合するホスフェートは、結局、Ｄ−
リビトール中のＯ−５に結合する。これは仮定した生合
成ルート［Ｊ、バッジレイ（Ｂ　ａｄｄｉｌｅｙ）、ア
カウンツ・オブ・ケミカル・リサーチ（Ａｃｃ、　Ｃｈ
ｅｍ、　Ｒｅｓ、　）　、３．９８（１９７０）１と一
致し、この道筋において、Ｄ−リビトールがＯ−５にお
いてリン酸化されているシチジンジホスフェートからほ
とんど多分りビトールホス７エートは誘導されｔ；。こ
れらの発見に基づいて、Ｈｌ−ｂの完全な立体的構造は
ＩＩＩとして提案された。−３）　−Ｄ−Ｒｉｂｆ−（
１−１）　−Ｄ　−Ｒ１ｂｉｔｏｌ−（５−○ＰＯ２０
− 旦 ヘモフィルス髄膜炎に対する保護はホルモンの免疫性と
関連する。抗体仲介免疫性の役割は、実験動物の受動的
保護およびヒトにおける首尾よい血清両方によって確立
された。ヘモフィルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍｏ
ｐｈｉｌｕｓ　　Ｉ　ｎｆ　１ｕｅｎｚａｅ）により引
き起こされる最も重大な病気はｂ型有機体に関連するの
で、型特異的カプセル物質は保護的免疫応答を誘発する
ことのできる抗深として使用するための論理的選択であ
った。ワクチンとして使用したＰＲＰは、寒天増殖有機
体の水性抽出物からアルコール沈殿によって調製された
。この物質はゲル濾過によって決定して約２００．００
０ダルトンの分子量を有した［Ｌ、ロドリゲス（Ｒｏｄ
ｒ　ｉｇｕｅｓ）ら、ジャーナル・オブ・イムノロジー
（Ｊ　、　　Ｉ　ｍｍｕｎｏｌ、）、１０７．１０７１
（１９７１）］。ｏ、１〜５０μｇの範囲のＰＲＰ投与
による大人のヒトの免疫化は、抗ＰＲＰ抗体の力価の増
大を誘発した［Ｇ、ペーターズ（ｐ　ｅｔｅｒｓ）ら、
［ヘモフィルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉ
ｌｕｓ　　Ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）　Ｊ　、Ｓ、　Ｈ。 Ｗ、シル（Ｓｉｌｌ）　、Ｄ、　Ｔ、カルシン（Ｋ　ａ
ｒｚｏｎ）編、バング−ビルト（Ｖ　ａｎｄｅｒｂｉｌ
ｔ）大学、プレス、ナツシュビレ、２８１　（１９７２
）］。大人と対照的に、子供におけるｌＯまたは５０μ
ｇの注射によって誘発された力価は２月後に減少した。 ＰＲＰに対する抗体の応答は子供の間で年令依存性であ
ることが発見された。 ＰＲＰは前もって存在する抗体レベルをもつ大人におい
て抗体の力価を増大するとき有効であるが、有効なワク
チンとしてのＰＲＰの有用性は病気感受性の若い子供の
応答に依存する。現在、年令が２才以下の子供は有意の
免疫応答を発生しないことが知られている［Ｄ、Ｈ，ス
ミス（Ｓｍｉｔｈ）　、Ｈｏ５ｐ、　Ｐｒａｃｔ、　、
１土、７１（１９７６）］。ヘモフィルス髄膜炎の場合
の７０％はこの年令の群において起こるので、ＰＲＰは
有効な免疫原であると思われない。抗ＰＲＰ抗体は、Ｐ
ＲＰ自体よりはむしろカプセル化したＰＲＰ有機体を注
射したとき、はじめて引き出されることが発見された。 こうして、ＰＲＰは、坦体を酸化を要求する、ハブテン
であることができる。 より効果的なワクチンをつくることに関する別のアプロ
ーチは、ＰＲＰ、劣った免疫原、をよりすぐれた免疫原
とすることであった［Ｐ、アンダーソン（Ａ　ｎｄｅｒ
ｓｏｎ）ら、ジャーナル・オブ◆インフェクシャス・デ
ィジージズ（Ｊ　、　　Ｉ　ｎｆａｃｔ。 Ｄｉｓ、）、１５２．６３４　（１９８５）；Ｄ、Ｍ。 グラノア　（Ｇｒａｎｏｆｆ）　、Ｋ、　Ｌ、ケイン（
Ｃａｔｅｓ）、ジャーナル・オブ・ペディアトリクス（
Ｊ。 Ｐ　ｅｄｉａｔｒ、）、１０７．３３０　（１９８５）
］。 これは、一部分、精製したＰＲＰまたはその酸加水分解
断片を調製、例えば、ジフテリアトキソイド［Ｌ、ゴー
トン（Ｇｏｒｄｏｎ）　、欧州特許出願第９８．５８１
号（１９８４）；Ｊ、ニスコラ（Ｅ　５ｋｏｌａ）ら、
ランセット（Ｌ　ａｎｃｅｔ）、１９８５、■、Ｎｏ、
８４３９．１１８４］またはＣＲＭ１９７［Ｐ、アンダ
ーラン（Ａ　ｎｄｅｒｓｏｎ）ら、感染および免疫性（
Ｉ　ｎｆｅｃｔ、　　Ｉ　ｍｍｕｎ、）　、３９．２３
３　（１９８３）　；　１ｂｉｄ、ジャーナル・オブ・
クリニカル・イベスチゲイション（Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　
　Ｉｎｖｅｓり、７６．５２　（１９８５）　　；　１
ｂｉｄ、　ジャーナル・オブ・ペディアトリクス（Ｊ　
、　Ｐ　ｅｄｉａｔｒ、）、１０７．３４６（１９８５
）］に接合することによって達成された。これらのワク
チンは、年令が６月程度に若い子供におけるヘモフィル
ス・インフルエンザエ（）（、ｆ　１ｆｌｕｅｎｚａｅ
）に対して保護的抗体応答を引き出した。技術的問題は
いずれの型のワクチンに使用をも制限する。自然ＰＲＰ
は病原体から分離されなくてはならないので、再現性、
変動する効力およびことに安全性の問題を処理しなくて
なかない。両者とも、ＰＲＰの臨床的使用ならびにその
製造の間に適用されるからである。 全体のＰＲＰ分子は保護的応答を引き出すために必要で
はない。これより小さい酸加水分解の断片は、免疫原蛋
白質に共有的に取付けると、動物の研究において自然物
質と同じように有効である［Ｐ、アンダーラン（Ａ　ｎ
ｄｅｒｓｏｎ）ら、感染および免疫性（Ｉ　ｎｆｅｃｔ
、　　Ｉ　ｍｍｕｎ、　）　、３９．２３３（１９８３
）］。化学的合成によって到達可能である、はんのわず
かのＰＲＰオリゴマー単位が十分である可能性が存在す
る。最小のＰＲＰ抗原を調製するための試みが２つのグ
ループによって発表された。ガレラグ（Ｇ　ａｒｅｇｇ
）らは１−０−β−Ｄ−リボフラノシル−Ｄ−リビトー
ル［カーポハイドレート・リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄ
、　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ）、５８，２１９　（１９７７）
］およびその対応する５−ホスフェートエステル［カー
ポハイドレート・リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄ、　Ｒｅ
ｓｅａｒｃｈ）、８６．２９３　（１９８０）］　を合
成した。後者は、七ツマ−のＰＲＰのすべての３つの構
造単位を含有し、免疫学的に活性でなかった。蛋白質坦
体に対する官能性を含有するホスフェートイソエステル
、４−アミノフェニルβ−Ｄ−リボフラノシド３−（Ｄ
−リビトー５−イルホスフェート）は同様によく合成さ
れた［Ｐ、Ｊ、ガレラグ（Ｇ　ａｒｅｇｇ）ら、カーポ
ハイドレート・リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄ、　Ｒｅｓ
ｅａｒｃｈ）、１５０．２８５　（１９８６）］。 より最近、７−ゲルバウト（Ｈｏｏｇｅｒｈｏｕｔ）ら
［テトラヘドロン・レターズ（Ｔ　ｅｔｒａｈｅｄｒｏ
ｎＬｅｔｔｅｒｓ）　、２８．１５５３　（１９８７）
］　は、物質を蛋白質に取り付けるためのＮ−（３−オ
キソ−１−プロピル）グリシンアミドのスペーサーを含
有する二量体および二量体のＰＲＰ誘導体（Ｉ　Ｖ、　
ｎ　＝　２または３）の調製を報告した。二量体は、破
傷風トキソイドに接合したとき、免疫原応答を引き出す
とき、自然ＰＲと同等であるか、あるいはそれよりすぐ
れると報告されている。しかしながら、この最後のアプ
ローチは、スペーサーを合成ＰＰＰと坦体蛋白質との間
に組込む必要があるということに悩まされる。スペーサ
ーに対する抗体の黄対しては、不必要な、なおさらに毒
性の免疫学的副反応に導くことがある。 ■ 大きい抗原、例えば、自然ＰＲＰそれ自体、は常には免
疫原蛋白質への接合を必要としないが、小さい抗原はそ
れを必要とする。これを達成するために種々の方法を利
用できる。最も普通の方法は、接合相手の上のアミンと
他方の上のアルデヒド（例えば、カルボアルデヒドの還
元性末端）との間のシップの塩基の形成、引続く還元を
包含する。 第２のアプローチ［Ｒ，シュネーアソン（Ｓｃｈｎｅｅ
ｒｓｏｎ）ら、ジャーナル−オブｅイクスペリメンタル
・メディシン（Ｊ　、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、　）、１５
２．３６１　（１９８０）］は、蛋白質を二宮能性分子
、例えば、アジピン酸無水物の１端に結合することを包
含する。これはカーポジイミドを使用して達成され、そ
して多分グルタミン酸またはアスパラギン酸の側基をも
つジアシル化ヒドラジンを生成する。次いで、この生成
物を臭化シアン活性化多糖類と反応させ、多分Ｏ−アル
キルー４−アシル化イソセミカルバジドを生成する。用
語「モノゲネリック（ｍｏｎｏｇｅｎｅｒｉｃ）スペー
サー」の接合体をこの型の生成物を記載するために使用
できることが示唆された。 第３のアプローチ［３，マーバーブ（Ｍ　ａｒｂｕｒｇ
）ら、ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサ
イアティ（Ｊ　、　Ａｍｅｒ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓａｃ、
）、１０８．５２８２　（１９８６）］は、「ビジエネ
リック（ｂｉｇｅｎｅｒｉｃ）スペーサー」の生成物を
生成し、反応の相手の各々を二官能性「スペーサー」分
子で官能化することを包含する。各々は、残りの原子価
がその反対の相手のそれと反応して安定な共有結合を形
成できるように、選択される。蛋白質接合体を調製する
ために精製した自然ＰＲＰそれ自体よりはむしろＰＲＰ
の合成の変形を使用することは、いくつかの利点を提供
する。合成物質を特別に放射線標識し、接合体の精製を
促進し、ならびに結合効率および炭水化物対蛋白質の比
の測定を可能とする。すぐれた合成の方法は、また、七
ノーまたはビジェネリック種を使用するとき包含される
複雑な多工程の手順を回避する。なぜなら、スペーサー
それ自体は合成物質中に構成することができ、そして必
要に応じて最大の接合効率のために変化させることがで
きるからである。さらに、自然ＰＲＰは一般に蛋白質坦
体にその主鎖に沿った不規則な点において架橋するが、
合成ＰＲＰは単一の点を介した接合することができる。 坦体蛋白質と抗原との間のスペーサー単位を使用するこ
とを必要とする接合手順は、宿主においてスペーサーに
対する免疫応答を引き出すとう危険を生ずる。この可能
性は、不必要な免疫学的副作用を生ずることがあるので
、スペーサーをまったく使用しないことの結論に導く。 したがって、１つの理想的なスペーサーは多糖類の分子
自体の代表的な部分から誘導されるものであろう。 本発明は、式な多糖類および前記多糖類の新規な高分子
接合体である。 本発明は、ヘモフィルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍ
ｏｐｈｉｌｕｓ　　Ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）　ｂ型のカ
プセルの多糖類の断片として反復単位のりピトールーホ
スホ−リボースを含有する分子の合成を教示する。 さらにとくに、本発明は式Ｉの新規な多糖類の合成に関
する。 式Ｉ 式中、ｎは２〜３０の整数であり、そしてＲは式ＩＩに
よって定義されるスペーサーの断片である。 Ｒ’−（ＣＨＯＨ）ｍ−ＣＨ，− 式ＩＩ 式中、ｍは０〜３の整数であり、そしてＲ′は官能基、
例えば、ＣＨＯ，ＣＯＹ、ＣＨ，Ｘ５ＣＨ。 ＮＨ，またはＣＨ，ＳＨであり、Ｙはカルボキシル活性
化官能性、例えば、ハロ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ
ド、ヒドラジノなどであり、モしてＸはアミノ反応性基
、・例えば、ハロゲン、メタンスルホニル、トリフルオ
ロメタンスルホニル、トルエンスルホニルなどでアル。 本発明は、また、式Ｉの化合物の高分子接合体の調製に
関し、式中Ｒ，ｎおよびｍは上に定義した通りであり、
そしてＲ′は 分子−Ｐ−５−３−ＣＨ２− υ 高分子−Ｎ　ＨＣＯ− 高分子−Ｎ　ＨＣＨ２− 高分子−Ｎ−ＣＨ− 高分子−〇　〇　Ｎ　ＨＣＨ、− 高分子−ＣＨ２ＮＨＮＨＣＯ− 高分子−ＣＨ−ＮＮＨＣＯ− 高分子−ＣＨ２ＮＨＮＨＣＯ− であり、高分子はある数の免疫原坦体、例えば、蛋白質
、例えば、破傷風毒素、破傷風トキソイド、ジフテリア
毒素、ジフテリアトキソイド、ＫＬＨ。 他の膜のプロリン蛋白質などであり、これらは合成他糖
順に対するＴ細胞依存性の応答を誘発することができる
。 本発明は、さらに、哺乳類を有効量の高分子接合体の単
独または他のワクチンの養生法と組み合わせてワクチン
接種することによって、ヘモフィルス・インフルエンザ
エ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ　　Ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ
）　ｂ型に対するＴ細胞依存性免疫応答を誘発する方法
である。 本発明は、さらに、哺乳動物の血清中のへモフイルス・
インフルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉ　ｌｕｓ　　Ｉ　
ｎｆｌｕｅｎｚａｅ）に対する中和性抗体の前もった存
在を決定するための診断試薬として、式Ｉの化合物を使
用することに関する。 さらに、本発明は、有効量の上に定義した化合物と製薬
学的に許容されうる坦体およびアジュバントとを含有す
る製薬学的組成物に関する。 本発明の他糖類の固相の合成は層のオリゴマー単位を生
成することが考えられる。 最後に、本発明は、上に記載したような化合物および免
疫学的接合体を調製する方法に関する。 本発明の化合物は、次の反応式に従って調製することが
できる。 上の反応式に従い、ヘモフィルスーインフルエンザエ（
Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ　　Ｉ　ｎｆ　Ｉｕｅｎｚａｅ
）　ｂ型カプセル多糖類の構造に基づくワクチンの合成
を下の７つの工程で記載することができる： （１）Ｒ’基を活性化リンとの結合のために除去できる
と同時にＲ２基を最終の脱ブロッキングの辞典まで保持
する、式Ｉ！のりビトールを構成する。 （２）式ＩＩのりビトールをＤ−リポース誘導体と結合
し、β−アノマーのみが生成するよようにとくに考慮す
る。 （３）０−３における保護基（式ｖのＲ４）をすべての
他の保護基の存在下に除去できるように、リポース単位
の３つのヒドロキシル基を保護する。 （４）１つのモノマー単位のＯ−１と他の単位の０−３
′との間にホスフェートエステルを導入し、そしてホス
フェートの残りの酸素が合成の間に生存しうる官能性で
保護されることを確実にする（式ＶｌのＲ’）。 （５）式Ｖｌｌへのオリゴマー化。 （６）免疫原坦体への結合のため式ＶｌｌのＲ′におけ
る適当なスペーサー単位の導入およびすべての保護基の
除去。 （７）生成物の免疫原坦体への接合。 リビトール単位の構成＝Ｄ−リポースのアルデヒド官能
を、まず、ジエチルジチオアセタール（式ＩＳＲ’およ
びＲ”−Ｈ）の生成によってマスクする。■の５−ヒド
ロキシル基を、試薬、例えば、塩化ｔ−ブチルジフェニ
ルシリル、塩化トリチル、またはそれらの誘導体（式■
、Ｒ”−Ｈ。 Ｒ’−トリチル、４−メトキシトリチル、またはｔ−ブ
チルジフェニルシリル）を使用することによって選択的
に保護する。実際には、ジエチルジチオリポース（式１
．Ｒ’およびＲ”−Ｈ）を塩化モノメトキシトリチルで
硝酸銀またはトリエチルアミンの存在下にテトラヒドロ
フラン中で処理することによって導入されたモノメトキ
シトリチル基は、規模を大きくするために好ましいこと
が証明された。次いで、ジメチルホルムアミド中で水素
化ナトリウムおよび臭化ベンジルを使用してベンジル化
すると、式■の完全に保護されたＤ−リポース（Ｒ１−
モノメトキシトリチル　Ｒ２−ベンジル）が得られる。 いったん式Ｉの２．３決定４−ヒドロキシル基か保護さ
れると、モノメトキシトリチル基は、必要に応じて、お
だやがな酸加水分解によって除去することができ、そし
てオリゴマー単位の構成にさらに有用な保護基と置換す
ることができる。こうして、Ｉ　（Ｒ’−Ｈ，Ｒ’−ベ
ンジル）を塩化トリメチルアセチルでエステル化するか
、ビス（４−ニトロフェニル）ジアゾメタン、塩化４−
メトキシベンジルまたは臭化アリルでエステル化するか
、あるいはミツノブ（Ｍ　１ｔｓｕｎｏｂｕ）条件下に
４−メトキシフェノールと反応させると、表■に記載す
る化合物を生成することができる。これらの保護基を除
去するための条件を、また、記載する。 表　　Ｉ モノメトキシトリチル　　　　３％のトリクロロ酢酸ト
リメチルアセチル　　　　ＣＨ，ＮＨ２ミツ ノブ　　ＨｇＣｌ／ＨｇＯ 保護されたアルデヒドのリポースのジチオアセタール官
能の加水分解および得られるアルデヒドの還元は、室温
においてアセトン−水中において塩化水銀（ＩＩ）およ
び炭酸カドミウムを使用して達成できる。得られる粗製
アルデヒドは、ジメトキシエタン中においてシアノホウ
水素化ナトリウムまたはメタノール中においてホウ水素
化ナトリウムを使用して還元して、式１１、Ｒ”−ベン
ジル　Ｒ１−ベンジル、モノメトキシトリチル、トリメ
トキシアセチル、４−メトキシフェニル、４．４′−ジ
ニトロベンズヒドリル、４−メトキシベンジルおよびア
リル、の化合物を生成する。 立体制御グリコシド化：β−アノマーを生成するために
炭水化物を立体特異的にグリコシド化するために多数の
方法を利用できるが、２つのこのような方法は本発明の
目的に対してとくに有用である。最初の方法は、リポー
スのジアセチルオルトエステル［弐ＩＩＩ、Ｒ３＝およ
びＲ４＝アセチル、Ｓ、ハネッシアン（Ｈａｎｅｓｓｉ
ａｎ）　、Ｊ　、バノウブ（Ｂ　ａｎｏｕｂ）　、カー
ポハイドレート・リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄ、　Ｒｅ
５ｅａｒｃｈ）　、４４、Ｃ１４（１９７５）］への転
化、ナトリウムメトキシドのよるアセテートの加水分解
（式Ｉ　Ｉ　Ｉ、Ｒ３およびＲ’＝Ｈ）、引続く塩化（
−ブチルジフェニルシリルによる再保護（式Ｉ　Ｉ　Ｉ
、Ｒ３およびＲ４富（−ブチルジフェニルシリル）を包
含する。この化合物は、触媒として塩化第二水銀の存在
下に式ＩＩのリビトールと反応させると、式Ｖの化合物
（例えば　Ｒ１−モノメトキシトリチル、Ｒ２−ベンジ
ル　Ｒ３およびＲ’−ｔ−ブチルジフェニルシリル、Ｒ
ｓ−アセチル）を生成し、これはリボース残基の２つの
第二ヒドロキシル基への異なる保護の利点を提供する。 式Ｖの七ツマ−のβ−リボシルリビトールを調製するよ
り好ましいルートは、Ｎ、Ｊ、レオナード（Ｌ　ｅｏｎ
ａｒｄ）およびに、Ｌ、カラウェイ（Ｃａｒｒａｖａｙ
）　、ジャーナル・オブ・ヘテロサイクリック・ケミス
トリー（Ｊ　、　Ｈｅｔ、　Ｃｈｅｒａ、）、３．４８
５　（１９６６）の方法を使用して、リポースをβ−メ
チル２．３−イソプピリジンリポースに転化し、この中
間体を臭化ベンジルおよび塩基の存在下にその５−ベン
ジルの相手に転化し、次いで２工程の手順において５−
ベンジルトリアセチルリボースを発生させ、ここでメチ
ル基およびベンジリデン基を酸性条件下に除去し、次い
で中間体を無水酢酸で処理して式ＩＶの化合物（Ｒ３＝
ベンジル、Ｒ’およびＲ５−アセチル、ｘ−ｏ−アセチ
ル）の化合物を生成することである。この化合物を、ま
ず臭化水素で処理し、次いでＮ、Ｎ−ジメチルホルムア
ミドジメチルアセタールで処理すると、弐１１１の化合
物（Ｒ３−ベンジル、Ｒ４−アセチル）が生成する。３
−０−アセチル基をアリル基で置換する（式１１１．Ｒ
３−ベンジル、Ｒ４−アリル）と、立体特異的なグリコ
ジル化の重要な中間体が生成する。これは、まず、リボ
シドを塩化トリメチルシリルで処理し、次いでアセトニ
トリル中で過塩素酸銀で処理することによって達成され
る。式ＩＩのリビトール（Ｒ２−ベンジル、Ｒ１−アリ
ル）を添加すると、式Ｖのβ−リボシルリビトール（Ｒ
２およびＲ３＝ベンジル、Ｒ１およびＲ４，−アリル）
が高い収率およびすぐれたアノマーの純度で生成する。 同様に、圧倒的優勢のβ−アノマーは、古典的ケーニス
ークノール（Ｋ　ｏｅｎｉｇｓ　−Ｋ　ｎｏｒｒ）グリ
コシド化反応の修正を用いて発生させることができる。 式ＩＶの化合物（Ｒ３、Ｒ４およびＲ’−７リル、Ｘ　
−Ｃ１マｆニー　ハＢｒ）を式ＩＩの化合物（Ｒ２＝ベ
ンジル、Ｒ１＝ベンジルまたはトリメチルシリル）の化
合物と過塩素酸銀および４Ａモレキユラーシーブの存在
下にアセトニトリル中において０〜６０℃で反応させる
と、式Ｖの三糖類（Ｒ３、Ｒ４およびＲ５＝アセチル、
Ｒ２−ベンジル、Ｒ′−ベンジル調製トリメトキシアセ
チル）が生成する。この三糖類は、塩基の加水分解およ
び引続く水素化によって式Ｖの脱保護された三糖類（Ｒ
１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ’−Ｈ）を生成すること
によって特徴づけられ、これは自然ＰＲＰの分解から分
離されるのと同一の三糖類と一致した物理的特性を示し
た。 リボ７ラノース保護基の修飾：式Ｖの三糖類からオリゴ
マーを構成するため、保護基Ｒ１またはＲ４をすべての
他の保護基の存在下に選択的にかつ独立に除去する能力
は必須である。式Ｖのリボフラノースの第一ヒドロキシ
ル基の反応性を使用して保護基Ｒ１を導入し、次いで式
ＶのＲ４またはＲ５を選択的に官能化する直接のアプロ
ーチは、保護基のいくつかの交換が所望の中間体を生成
する間接のアプローチはど好ましくない。式Ｖの化合物
（Ｒ’ｌ−リメトキシアセチル、Ｒ２−ベンジル　Ｒ３
、Ｒ４およびＲ５−アセチル）を加アミノ分解し、次い
で中間体（Ｒ’およびＲ２は定義した通すテアリ、Ｒ３
、Ｒ４およびＲ’−Ｈ）　を１．３−ジクロロ−１，１
，３，３−テトライソプロピルジシロキサンでピリジン
中またはジメチルホルムアミド／イミダゾール中で処理
すると、式Ｖの化合物（Ｒ’−トリメトキシアセチル、
Ｒ２−ベンジル、Ｒ３およびＲ４−緒になって−テトラ
イソプロピルジシロキサン−１，３−ジイル、Ｒ’＝Ｈ
）が生成する。２′−ヒドロキシル基の選択的保護は、
前の化合物を、例えば、塩化ベンジルオキシメチルとヨ
ウ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムおよびジイソプロ
ピルエチルアミンの存在下にテトラヒドロ７ラン中にお
いてほぼ室温において反応させるか、あるいは塩化ｔ−
ブチルジフェニルシリルと反応させる（それぞれ　Ｒ６
−ベンジルオキシメチルまたはｔ−ブチルジメチルシリ
ル）ことによって達成できる。弐Ｖの化合物（Ｒ’＝ト
リメトキシアセチル、Ｒ２＝ベンジル　Ｒ３およびＲ４
−緒になって−テトライソプロピルジシロキサン−ｌ、
３−ジイル　Ｒ６−ベンジルオキシメチル）から３’、
５’−ジシリルエーテルをフッ化テトラブチルアンモニ
ウムで除去し、次いで塩化トリチルまたはヒンダード塩
化シリル、例えば、塩化ｔ−ブチルジメチルシリルとテ
トラヒドロフラン中において硝酸銀および４−（ジメチ
ルアミノ）ピリジンの存在下に反応させると、式Ｖの化
合物（Ｒ’−トリメトキシアセチル、Ｒ２−ベンジル、
Ｒ’−ｔ−ブチルジメチルシリル、Ｒ’−Ｈ，およびＲ
ゝ−ベンジルオキシメチル）が生成し、これはオリゴマ
ー化のために保護基の適切な向きを有する。保護基のそ
れ以上の調節は、前の化合物をリチウムトリエチルポラ
ンでテトラヒドロフラン中において処理してトリメトキ
シアセチル基（Ｒ１）を除去し、次いで塩化４−メトキ
シトリチルと反応させて弐Ｖの化合物（ＲＩ−モノメト
キシトリチル、Ｒ２−ベンジル。Ｒ３−ｔ−ブチルジメ
チルシリル、Ｒ’＝Ｈ，およびＲ６＝ベンジルオキシメ
チル）を生成する。 オリゴマーの構成のための他の構築ブロックは、リビト
ール単位の５−ヒドロキシル官能が保護されていないこ
とを必要とする（式Ｖ１Ｒ’−Ｈ）。 式Ｖの化合物（Ｒ’＝トリメトキシアセチル、Ｒ２−ベ
ンジル、Ｒ３−モノメトキシトリチル、Ｒ’ｆｉｔ−ブ
チルジメチルシリル、およびＲＢ−ベンジルオキシメチ
ル）から調製された１つのこのような中間体は、テトラ
ヒドロ７ラン中において塩化リチルムアルミニウムでＲ
１を選択的に除去する。 このタイプの中間体を調製する別の方法は、式Ｖの化合
物（Ｒ１−モノメトキシトリチル、Ｒ２＝ベンジル、Ｒ
３−

【−ブチルジメチルシリル、Ｒ’ｘＨ１およびＲ５
−ベンジルオキシメチル）をレブリン酸とジシクロへキ
シルカーポジイミドと反応させることであり、これは式
Ｖの化合物（Ｒ１＝モノメトキシトリチル　Ｒ２＝ベン
ジル、Ｒ１ｌ１−（−ブチルジメチルシリル、Ｒ４＝レ
ブリニル、およびＲ８−ベンジルオキシメチル）の化合
物を生成し、これは希酸で処理すると、０−５において
保護基をもたない化合物（式Ｖ、Ｒ’−Ｈ）を生成する
。０−５およびＯ−３′位置における選択的保護のなお
他の方法は、これらの２つの位置における保護基が最初
に同一であるとき、例えば、式Ｖの化合物（Ｒ１、Ｒ３
およびＲ″−ベンジル、Ｒ１およびＲ１−アリル）の化
合物において利用できる。両者のアリル基は、まず、ア
リル結合をビニルエーテルの結合に塩化トリス（トリフ
ェニルホスフィン）ロジウム（Ｉ　Ｉ）を使用して異性
化し、次いで塩化第二水銀および酸化第二水銀の存在下
に開裂して、式Ｖの化合物（Ｒ２、Ｒ３、およびＲｓ＝
ベンジル、Ｒ’８Ｊ：びＲ’＝Ｈ）１成することによっ
て除去される。後者の化合物を塩化モノメトキシトリチ
ルでピリジン中でジメチルアミノピリジンの存在下に処
理すると、〇−５ヒドロキシル基が選択的に保護される
（式■、Ｒ１−モノメトキシトリチル、Ｒ２、Ｒ１、Ｒ
６−べシリル、Ｒ’−Ｈ）。さらに、この化合物をリブ
リン酸と４−（Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジンおよ
びジシクロへキシルカーポジイミドの存在下に反応させ
、次いでトリクロロ酢酸で処理すると、リビトールの０
−５に遊離のヒドロキシル基をもつ化合物が生成する（
式Ｖ、Ｒ”、Ｒ３、決定Ｒ′冨ベンジル、Ｒ４＝レグリ
ニル、Ｒ’＝Ｈ）。 ホスフェートの官能性の導入：炭水化物の残基の間にホ
スフェートの官能性を導入する多数の方法、とくにＤＮ
ＡおよびＲＮＡの断片を合成に適用される方法、を利用
することができので、この出願において示される方法は
限定的であると考えるべきではない。さらに、記載した
ような最初のリン−酸素結合の形成はリボース単位の０
−３′へであり、かつ第２のりンー酸素結合の形成はり
ビトール０−５について達成されるが、この順序の逆転
は本発明の範囲内であると考えるべきである。 こうして、反応式に従い、式Ｖの化合物（Ｒ１−トリメ
トキシアセチル　Ｒ３−ベンジル、Ｒ３−モノメトキシ
トリチル、Ｒ’＝Ｈ，およびＲ８＝ベンジルオキシメチ
ル）を塩化ジイソプロピルメチルホスホルアミジン酸と
反応させて、式Ｖのホスホルアミダイト（Ｒ’＝）リメ
トキシアセチル、Ｒ２−ベンジル、Ｒ”−モノメトキシ
トリチル、Ｒ４−ジイソプロピルメチルホスホルアミジ
ル、オヨびＲ５−ベンジルオキシメチル）を生成する。 完全に保護された二量体の合成は、ホスホルアミダイト
を式Ｖのアルコール（Ｒ’−Ｈ，Ｒ２−ベンジル　Ｒ３
−モノメトキシトリチル、Ｒ’−ｔ−ブチルジメチルシ
リル、およびＲ８−ベンジルオキシメチル）と無水アセ
トニトリル中でテトラゾールの存在下に反応させ、次い
でヨウ素で酸化することによって達成され、これは塩化
ジイソプロピルメチルホスホルアミジン酸と式Ｖｌのホ
スホトリエステル（Ｒ’＝）リメトキシアセチル、Ｒ２
−ベンジル、Ｒ３−モノメトキシトリチル、Ｒ’−ｔ−
ブチルジメチルシリル、Ｒｓ−ベンジルオキシメチル、
およびＲ＠＝メチル）を生成する。同様に、式Ｖのアル
コール（Ｒ’−モノメトキシトリチル　Ｒ２−ベンジル
、Ｒ””ｔ−ブチルジメチルシリル、Ｒ’＝Ｈ，および
Ｒ５−ベンジルオキシメチル）を塩化ジイソプロピルメ
チルホスホルアミジン酸と反応させ、次いで式Ｖの化合
物の第一アルコール（Ｒ寛−Ｈ１Ｒ２−ベンジＪし、Ｒ
３＋ｍｔ−ブチルジメチルシリル、Ｒ４，−レブリニル
、およヒＲ６−ベンジルオキシメチル）を反応させ、中
間体のホスファイトをヨウ素で酸化すると、式Ｖｌの二
量体（Ｒ’−モノメトキシトリチル、Ｒ２−ベンジル、
Ｒ３＝ｔ−ブチルジメチルシリル、Ｒ６−ベンジルオキ
シメチル が生成する。リン−酸素の結合の形成は、結合剤として
塩化ジイソプロピルメチルホスホルアミジン酸の使用に
限定されない。例えば、式Ｖの化合物（Ｒ１−モノメト
キシトリチル、Ｒ　”、Ｒ　”、およびＲ５−ベンジル
、およびＲ’−Ｈ）は、塩化２−シアノエチル−Ｎ，Ｎ
−ジイソプロピルホスホルアミジン酸と反応させると、
同様にオリゴマー化に有用な中間体を生成す°る（式Ｖ
，Ｒ’−モノメトキシトリチル、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ
Ｓ−ベンジル、Ｒ’−２−シアノエチルジイソプロピル
ホスホルアミジル）。この中間体は、リビトールＣ−５
に遊離ヒドロキシル基を含有する化合物（式Ｖ％Ｒ’＝
ＨＳＲ”、Ｒ３、オヨびＲ　’　＝　ヘｙ　シル、Ｒ４
−レブリニル）とアセトニトリル中においてテトラゾー
ルの存在下に反応させ′、次いで前述のようにヨウ素で
酸化すると、式ＶＩの二量体（　Ｒ１−モノメトキシト
リチル、Ｒ”、Ｒ’％およびＲ″−ベンジノ呟Ｒ４ーレ
ブリニル、およびＲ６＝２−シアノエチル）が生成する
。式Ｖｌのモノメトキシトリチル基およびレプリニル基
は、この化合物を、それぞれ、希酸または酢酸およびピ
リジンの混合物中でヒドラジンで処理することによって
、独立にかつ選択的に除去することができる。 さらに、残りの保護基は次のようにして除去できる：ｔ
−ブチルアミンは高温においてメチル基を除去し、そし
てアモニアは２−シアノエチル保護基（Ｒ６）を除去し
、フッ化テトラブチルアンモニウムは【−ブチルジメチ
ルシリル基（Ｒ１）を除去し、そして、例えば、触媒と
して炭素担持パラジウムを使用する接触水素化はベンジ
ル基およびベンジルオキシメチル基を除去して、式ＶＩ
の完全に脱保護された二量体（Ｒ’％Ｒ２、Ｒ３、Ｒ′
、およびＲ’−Ｈ，Ｒ’−反対イオン、例えば、Ｎａつ
を生成する。 三糖類単位のオリゴマー化：保護基Ｒ１およびＲ４を選
択的にかつ独立に除去できるかぎり、式ＶＩＩの生成物
を調製する任意の数の方法および方法の組み合わせによ
ってオリゴマー化を達成できる。テトラマーの調製を下
に記載するが、同一の手順を式ＶおよびＶｌの化合物の
間の適当な取扱いからのトリマーの合成に適用すること
ができ、ヘキサマーは２つのトリマー、２つのシマー、
６つの七ツマ−１またはそれらの組み合わせの修飾によ
って調製することができ、オクタマーは２つのテトラマ
ー、４つのシマー、８つのモノマー、またはそれらの組
み合わせによって調製することができる。前述の条件下
に式ＶＩの化合物（Ｒ１＝モノメトキシトリチル　Ｒ２
−ベンジル、Ｒ３−（−ブチルジメチルシリル、Ｒ４！
レブリニル、Ｒｓ−ベンジルオキシメチル、およびＲ６
−メチル）からレブリニル基を加水分解し、そしてこの
ポリを塩化ジイソプロピルメチルホスホルアミジン酸で
酸化すると、式Ｖｌの化合物（Ｒ’−モノメトキシトリ
チル、Ｒ１−ベンジル、Ｒ３ｘｔ−ブチルジメチルシリ
ル、Ｒ４−ジイソプロピルメチルホスホルアミジル、Ｒ
″＝＝ベンジルオキシメチルよびＲ１−メチル）が生成
する。次いで、この化合物を式Ｖｔの第２二量体（Ｒ’
−ＨＸＲ”−ベンジル、Ｒ３ｘｔ−ブチルジメチルシリ
ル　Ｒ４＝レブリニル、Ｒ’＝ベンジルオキシメチル）
と乾燥アセトニトリル中でテトラゾールの存在下に反応
させ、次いでヨウ素で酸化すると、式Ｖｌｌの完全に保
護されたテトラマー（Ｒ１−モノメトキシトリチル、Ｒ
２＝ベンジル、Ｒ３＝ｔ−ブチルジメチルシリル　Ｒ４
−レブリニル　Ｒ６−ベンジルオキシメチル、Ｒ６−メ
チル、およびｎ−２）が生成する。再び、ＲＩまたはＲ
４は、追加のオリゴマー化のために、後者の化合物から
選択的にかつ独立に除去することができるか、あるいは
、必要に応じて、二量体の脱保護について前述した条件
下に、すべての保護基を除去して式ＶＩＩの化合物（Ｒ
Ｉ、Ｒ２、Ｒ１、Ｒ１、およびＲ’＝Ｈ，Ｒ’＝反対イ
オン、例えば、Ｎ　ａ　”、およびｎ−２）を生成する
ことができる。 スペーサー単位の導入二本発明の多くの区別される特徴
の１つは、それはＰＲＰのオリゴマー単位の調製を教示
するばかりでなく、かつまた免疫原蛋白質への接合のた
めのスペーサー単位の導入を提供することである。その
上、スペーサー単位はＰＲＰそれ自体の構造から誘導す
ることができ、そしてそのまま望ましくない免疫学的作
用それ自体を与えないスペーサーを使用する機会を提供
する。リビトールに基づく断片の構成を記載するが、類
似のまたは異なる構造の他のスペーサーは本発明の範囲
内であると考えられる。 １つのこのようなスペーサーを合成するため、Ｄ−リボ
ース、ベンズアルデヒド、ペンジルアルコーノ呟および
触媒量の硫酸の懸濁液を激しく撹拌して、ベンジル２，
３−ペンジリジネルリポフラノシドを生成する。この化
合物を塩化ジイソプロピルメチルホスホルアミジン酸と
反応させて、ベンジル２，３−ベンジリジン−５−（ジ
イソプロピルメチル）ホスホルアミジルリポフラノース
を生成する。次いで、このスペーサーを式ｖＩＩの化合
物（ＲＩ−モノメトキシトリチル、Ｒ２−ベンジル　Ｒ
３ｓａ　ｉ−ブチルジメチルシリル、Ｒ１！ＨＳＲ’＝
ベンジルオキシメチル、Ｒ１＃メチル、およびｎ−２）
と反応させ、次いでヨウ素で酸化して、式ｖＩＩの化合
物（Ｒｌ−モノメトキシトリチル　Ｒ”　！ベンジル、
Ｒ”＝ｔ−ブチルジメチルシリル ポフラノスー５ーイルメトキシホスホニル、Ｒ″＝＝ベ
ンジルオキシメチル鳴＝メチル、およびｎ＝２）を生成
し、ここでスペーサーは式ＶＩＩのＲ４に組込まれてお
り、そして免疫原への接合のためのマスクされたアルデ
ヒドを含有する。 保護基の除去および免疫原坦体への接合：保護基の除去
を異なる順序で実施できるが、安定性および種率の理由
で、次の順序に従うことが有利である：高温においてｔ
−ブチルアミンを使用してＲ６を除去し、溶媒、例えば
、テトラヒドロフラン中でフッ化テトラブチルアンモニ
ウムを使用してシリル基、例えば、Ｒ３を除去し、そし
て溶媒系、例えば、メタノール−水中の接触水素化によ
ってベンジル基およびベンジルオキシメチル基を除去す
る。適当なリン酸塩の反対イオン（例えば、Ｒ’−Ｎａ
つの導入は、イオン交換樹脂を使用して達成できる。上
の順序は、免疫原蛋白質への接合に適当な、式Ｖｌｌの
化合物（Ｒ’、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ’＝Ｈ，Ｒ’−リポスー
５−イルホスホ、Ｒ＠−反対イオン、例えば、Ｎ　ａ　
＋、およびｎ−２）を生成する。これは最も便利には、
最後に述べた化合物を参照して、この化合物をアミノ含
有免疫原高分子と反応させることによって達成される。 この場合において、反応はスペーサーのアルデヒドと高
分子のアミン基との間で起こってイミンを生成し、イミ
ンは、必要に応じて、還元剤、例えば、シアノホウ水素
化ナトリウムの添加によって還元して脂肪族アミン結合
にすることができる。化合物を免疫原高分子に接合する
ための他の方法は、同様に、本発明において考えられる
。前述のスペーサーのアルデヒドのおだやかな酸化はカ
ルボン酸を生成し、これは、例えば、カーポジイミンを
使用することによって、あるいはまずカルボキシル基を
その対応するヒドロキシスクシンイミドエステルの転化
することによって、アミン含有高分子に接合することが
できる。ヒドロキシスクシンイミドエステルは、さらに
、例えば、アシルヒドラジンに転化することができ、こ
れはアルデヒドまたはケトンの官能性を含有するように
修飾された免疫学的坦体に接合することができる。しか
しながら、末端スルフヒドリル官能性を含有するスペー
サー基（式ＶＩＩ、Ｒつを導入する場合、スルフヒドリ
ル含有免疫原高分子への接合は、酸化的条件下に、ある
いは、まず、高分子をミカエル（Ｍ　１ｃｈａｅｌ）受
容体、例えば、ｍ−マレイミドベンゾイル基で誘導化す
ることによって、達成することができる。スペーサー基
が第一アミノ基をその末端に含有するように、スペーサ
ー基を導入する場合、接合は免疫学的坦体を親核的置換
に向けて活性化することによって達成できる。 実施例１ ジエチルジチオ−Ｄ−リポース ２７５ｇのリポースおよび２７５ｍ１の濃塩酸の混合物
を水浴中で冷却し、そしてこれに２７５ｍ１のエタンチ
オールを添加した。この反応混合物を冷蔵庫中に一夜貯
蔵し、酢酸エチルおよび水で希釈し、そして水性炭酸ナ
トリウム溶液の注意した添加によって中和した。有機層
をブラインで洗浄し、乾燥し、そして種結晶を添加し、
所望の化合物のを結晶化した、融点８１−８３°Ｃ０実
施例２ 火 ２リツトルのテトラヒドロフラン中の２３８ｇのリポー
スジエチルジチオアセクールおよび１４３ｍ１のトリエ
チルアミンの撹拌した溶液に、塩化４−モノメトキシト
リチルを少しずつ約４５分にわたって添加した。室温に
おいて一夜撹拌した後、反応混合物をろ過して沈殿した
トリエチルアミン塩酸塩を除去し、そして蒸発させて６
１２Ｇのオレンジ色油を得た。この油を１．５リツトル
のエーテル中に再溶解し、そして各々４００ｍ１の５％
の重炭酸ナトリウム、水、およびブラインで洗浄した。 有機層を誘導体し、そして蒸発すると５１４ｇのオレン
ジ色油が得られ、これをそれ以上精製しないで使用した
。分析用試料を調製するため、生成物の一部をシリカゲ
ルのクロマトグラフィーにかけ、まず、ヘキサン中の２
０％の酢酸エチルで、次いでヘキサン中の３０％の酢酸
エチルで溶離して、所望の化合物を淡黄色の油として得
た、［ａ］ｏ”＝４°±１（ｃ＝１．１９、クロロホル
ム）。 実施例３ 実施例２からの生成物の２６６ｇの部分をｌすットルの
ジメトキシエタン中に溶解し、そして５００ｍ１のジメ
トキシエタン中に懸濁した撹拌したヘキサン洗浄６０％
の水素化ナトリウムの１２１ｇに滴々浜加した。添加の
間、フラスコを氷浴中で冷却し、そしてアルゴンを泡立
てて反応混合物中に通人した。出発物質のすべてを添加
し、そして水素の発生がやんだ後、２８４ｇの臭化ベン
ジルを約１時間かけて滴々添加した。室温において約１
８時間撹拌した後、残留する水素化ナトリウムを２００
ｍ１のエタノールの滴々添加によって破壊した。反応混
合物をセライト（ｃｅｆｉｔｅ）のパッドを通してろ過
し、このパッドをエーテルでよく洗浄し、そして溶媒を
蒸発させｔ：。粗生成物を１リツトルのエーテル中に溶
解し、そして３つの部分の水でおよび５００ｍ１のプラ
インで１回洗浄した。有機層を乾燥し、そして蒸発させ
ると、３９７ｇの粗生成物がオレンジ色油として得られ
、これをそれ以上精製しないで使用した。分析用試料を
調製するため、５ｇの生成物を８ｇのシリカゲル上に予
備吸着させ、３５０ｇのシリカゲルのクロマトグラフィ
ーにかけ、ヘキサン中の５％の酢酸エチルで溶離した。 これにより薄い黄色の油が得られた、［αｌ　Ｄ”＝　
１１’±３（ｃ−０，３７５、クロロホルム）。 実施例４ １リツトルのエーテル／メタノール（１：　ｌ）中の実
施例３からの粗生成物の３９２ｇに、１５ｇのトルエン
スルホン酸−水和物を添加し、そしてこの溶液を室温に
おいて一夜撹拌した。重炭酸ナトリウム（ｌｏｇ）を少
しずつ撹拌した溶液に添加し、沈殿をろ過し、そして溶
媒を蒸発させると、オレンジ色油が得られた。粗生成物
をシリカゲル上でバッチ式に精製し、ヘキサン中の５−
１５％の酢酸エチルの勾配で溶離すると、淡黄色油が得
られた、［αｌ　Ｄ”−３５°±１（ｃ−１、，１、ク
ロロホルム）。 実施例５ ２．３．４−トリス−０−（フェニルメチル）−５−Ｏ
−（トリメトキシアセチル）−Ｄ−リポ−８ｍ１の塩化
メチレン中の８００ｍｇの実施例４からの生成物、３６
１ｍｇのピリジンおよび２８ｍｇの４−ジメチルアミノ
ピリジンの溶液に、２７５ｍｇの塩化トリメトキシアセ
チルを添加した。得られる混合物を０℃において３０分
間そして室温において５．５時間撹拌した。水性１０％
の重炭酸ナトリウムを添加した。この混合物を減圧下に
濃縮し、残留物を塩化メチレンで希釈し、そして希塩酸
溶液およびブラインで洗浄した。有機相を無水硫酸ナト
リウムで乾燥した。減圧下に溶媒を除去した後、残留物
をシリカゲルの短いカラムで精製すると、所望のエステ
ルが得られた；’ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ）１．１８　
（ｔ、３Ｈ。 ５ＣＨＩＣＨ３）、１．１９　（ｔ、３Ｈ，ＳＣＨ。 ＣＨ３）、１．２５　［ｓ、９Ｈ，ｃ　（ｃＨｓ）ｚｌ
、２．５１−２．６９　（ｍ、４Ｈ，５ＣＨｘＣＨｘ）
、３．９３　（ｄｄ、ＩＨ，ＩＨ，（、−Ｈ；　ＩＨ。 Ｃｓ　　Ｈ）　、４−４６　（ｄ　ｄ、ｌ　Ｈ９Ｃｓ　
　Ｈ）、４．６３−５．１２　　（ｍ、６Ｈ，ＯＣＨ！
Ｐｈ）　、７．２　１−７．４０　　（ｍ、　　ｌ　　
５Ｈ，Ａｒ−Ｈ）　　。 実施例６ ７ｍ１のジクロロメタン中の６５ｍｇの実施例４のアル
コールおよび１０６ｍｇのビス（４−二トロフェニル）
ジアゾメタンを含有する隔膜で密閉したフラスコに、ア
ルゴン下に一４０℃において、０．０３２ｍ１の新しく
蒸留した三フッ化ホウ素エーテレートを滴々添加した。 得られる赤色溶液を一４０℃で１８時間撹拌した。水性
重炭酸ナトリウムを添加し、次いでジクロロメタンを添
加した。有機相を再び水性重炭酸ナトリウムおよび水で
洗浄し、そして無水硫酸ナトリウムで乾燥しｔ；。溶媒
を真空蒸発させｔ；。残留物をシリカゲルの７ラツシユ
クロマトグラフイーにかけると、所望分離は無色油とし
て得られた。’ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ）１．１５およ
び１．１７（ｔ、６Ｈ，５ＧＨｚＣＨｉ）　、２．６３
および２．６５（２Ｑ、４Ｈ，５ＣＨｚＣＨｘ）　　、
　３．６２　　（ｄ、２Ｈ。 Ｃ３−Ｈ）、３．９６　　（ｄｄ、　　ＩＨ，Ｃ，−Ｈ
）、４．１　５　　（ｍ、２Ｈ，Ｃｓ、４　　　Ｈ）　
　、　４．２　１（ｄ、　　ＩＨ，Ｃ＋−Ｈ）　、４．
５４　　４．９５　　（ｍ。 ６Ｈ，ＣＨｘＰ　ｈ）　、５．８７　　［ｓ、　　Ｉ　
Ｈ，ＣＨ（ＰｈＮＯ２）２］　　、７−２２　　７．４
０　　（ｍ、ｌ　９Ｈ，Ａｒ−Ｈ）　、８．０７　　（
ｍ、４Ｈ，ＰｈＮ０゜上のＣ３’、５　’−Ｈ）。 ０℃におけるジメチルホルムアミド中の３５０ｍｇの実
施例４のアルコールの溶液に、３１ｍｇの水素化ナトリ
ウムを添加した。この溶液を窒素下に室温において３０
分間撹拌し、次いで０℃に冷却した。２ｍｌのジメチル
ホルムアミド中の塩化４−メトキシベンジルを滴々添加
した。得られる混合物を周囲温度に加温し、そして４時
間撹拌した。氷冷水を反応混合物に注意して添加し、そ
してこの溶液を減圧下に濃縮した。残留物を水で希釈し
、モしてジエチルエーテルで抽出した。−緒にした抽出
液を乾燥し、蒸発させ、そして残留物をシリカゲルのク
ロマトグラフィーにかけて所望化合物を無色油として得
た。’ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ）ｌ−１９および１．２
２　（２ｔ、６Ｈ。 ＳＣＨ，ＣＨ３）　、２．６３　（Ｑ、４Ｈ，５ＣＨ２
ＣＨｓ）　、３．７１　（ｍ、２Ｈ，Ｃ５−Ｈ）　、３
．７９（ｓ、３Ｈ，０ＣＨｓ）　、３．９８　（ｄｄ、
ＩＨ。 Ｊ２．ｌ＝３．２Ｈｚ、ＣＩ−Ｈ）、４．４０　（ｓ。 ２Ｈ，ＣＨ２０Ｐｈ）　、４，５７　４．４０　（ｓ。 ２Ｈ，ＣＨ，０Ｐｈ）　、４．５７−４．９５　（ｍ。 ６Ｈ，ＣＨ，０Ｐｈ）　、６．８４　（ｄ、２Ｈ，Ｊ−
８−２Ｈｚ　、　Ｐ　ｈ　Ｎ　Ｏｆ上のＣ３’、５’−
１（）、７．１９　７．４０（ｍ、１７Ｈ，Ａｒ−Ｈ）
。 実施例８ １．５ｍｌのテトラヒドロフラン中の２１０ｍｇの実施
例４のアルコール、１３６ｍｇのトリフェニルホスフィ
ンおよび１４９ｍｇの４−メトキシフェノールの溶液に
、１ｍｌの“テトラヒドロ７ラン中の９０．４ｍｇのジ
エチルアゾジカルボキシレートを嫡々添加した。得られ
る混合物を３時間還流しｔ：。溶媒を蒸発させ、そして
残留物をクロマトグラフィーにかけると、所望のジチオ
アセクールが油として得られた。高い解像力の質量スペ
ク）　ル：　ＣｓｓＨｓｔｏ　ｓ　（Ｍ　＋　Ｈつにつ
いて（ＣＩ、Ｎ　Ｈ３、ｍ　／　ｚ　）　、計算値５２
９．２５９０、実測値５２９．２５９０゜ 実施例９ ６０％の油分散液として水素化ナトリウムの２．５１ｇ
の試料を、２００ｍ１のテトラヒドロ７ラン中の２２ｇ
の実施例４かものアルコールおよび１．５４５ｇのヨウ
化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムの溶液に添加した。 この混合物を室温において３０分間撹拌した後、１６ｍ
１の臭化アリルを注意して添加し、そして溶媒を蒸発し
た。得られる油をエーテル中に溶解し、そしてこれをブ
ラインで洗浄した。エーテル層を乾燥し、そして蒸発さ
せると、粗製の所望の生成物が得られた。 実施例１０ ５５ｍｌの６％の水性アセトン中の３．１１２ｇの実施
例３のジチオアセタール、２．１１８ｇの塩化水銀（Ｉ
Ｉ）および２．１１２ｇの黄色水銀酸化物の混合物を室
温において２時間撹拌した。 ヘキサンを添加し、そしてこの混合物をセライトを通し
てろ過した。ろ液を濃縮し、そして再びセライトを通し
てろ過した。有機相を５％の水性ヨウ化カリウムおよび
水で洗浄した。乾燥後、溶媒を蒸発させると、粗製アル
デヒドが油として得られた。５０ｍ１のメタノール中の
このアルデヒドに、４．４２６ｇのホウ水素化ナトリウ
ムおよび２３２ｍｇのナトリウムメトキシドを添加した
。 ２時間後、反応混合物をクロロホルムで希釈し、そして
セライトを通してろ過した。−緒にしたう液を水で洗浄
し、乾燥し、そして蒸発すると、粗製生成物が得られ、
これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製すると
、所望のアルコールが得られた、　［ｆｆｌ　、”−−
１８，４°（ｃ−１０，９、クロロホルム）。 実施例ｔｉ ３０ｍ１の５１　（Ｖ／Ｖ）アセトン−水中の８６０ｍ
ｇの実施例５のジチオアセタール、９５６ｍｇの塩化水
銀（Ｉ　Ｉ）および６０８ｍｇの炭酸カドミウムの混合
物を２時間還流した。溶媒を蒸発させ、残留物を塩化メ
チレンで希釈し、そしてライトを通してろ過した。−緒
にしたろ液および洗浄液を水性ヨウ化カリウムおよびプ
ラインで洗浄し、そして乾燥した。溶媒を減圧下に除去
すると、所望のアルデヒドが得られた。このアルデヒド
（６８０ｍｇ）を５０ｍ１の１．２−ジメトキシエタン
中に溶解し、そして１７０ｍｇのシアノホウ水素化ナト
リウムを添加した。得られる混合物を室温において５〜
６時間撹拌した。この溶液をライトを通してろ過し、そ
して蒸発させｔ；。残留物をシリカゲルのクロマトグラ
フィーにかけると、溶液溶液のアルコールが得られた、
［σ］。”−＋４．３９’（ｃ−１１，７５、クロロホ
ルム）。 実施例１２ トール 実施例８のジチオアセタールを実施例１０に記載するよ
うに水素化し、そして還元すると、標題化合物が油とし
て得られた。質量スペクトル：（ＣＩＳＮＨ，、％）　
５４６　（Ｍ＋ＮＨ，＋、ｔｏｏ）、５２９　（Ｍ＋Ｈ
”、６２．２）。 実施例１３ 実施例６のジチオアセクールを実施例１１に記載する方
法により処理すると、標題アルコールが淡黄色油として
得られた。質量スペクトル：（ＣＩ、ＮＨ３、％）　６
７９　（Ｍ＋ＮＨ１＋、１２．２［ＭＨ＋　ＣＨ（Ｐｈ
ＮＯｚ）ｚ、■００］。 実施例１４ 実施例７のジチオアセタールを実施例１１に記載する方
法により処理すると、標題化合物が油として得られた。 ’ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ）２．２９　（ｂｒ　　ｓ、
ＩＨ，ＯＨ）、３．６４−３．７３　（ｂｒ　　ｍ、５
Ｈ，Ｃ＋＋ｉ＋ｓ　　Ｈ）、３．７８　（ｓ、３Ｈ，０
ＣＨｓ　）　、３．８６　（ｂ　ｒｑ、ＩＨ，Ｃ４−Ｈ
）％　３．９５　（：ｂｒ　　ｑ、１Ｈ，ＣＩ　Ｈ）　
、４．４２　　（ｓ、２Ｈ，ＯＣＨ，Ｐｈ）、４．５６
　　（ｓ、２Ｈ，０ＣＨｚＰ　ｈ）　　。 ４．６３　　４．６８　　（ｍ、４Ｈ，０ＣＨｚ　　Ｐ
ｈ）、６．８４　　（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈｚ、Ｐｈ
０ＣＨ１上のＣｓ’、＊’　　Ｈ）　、７−２０　７．
３３　（ｍ。 １７Ｈ，Ａｒ−Ｈ）　　。 実施例１５ ５０ｍｌのアセトニトリル中の２０ｇの実施例９からの
粗生成物の溶液を、−１５℃において３００ｍ１の７０
％の水性アセトニトリル中の１１−８ｇのＮ−クロロス
クシンイミドおよび１５ｇの硝酸銀の撹拌した溶液に添
加した。１０分後、１００ｍ１の飽和酢酸アンモニウム
を添加した。この溶液をろ過し、蒸発させると、油が得
られた。これをエーテル中に溶解し、プラインで洗浄し
、乾燥し、そして再び蒸発させた。残留物を２００ｍ１
のメタノール中に溶解し、そして２．６７ｇのホウ水素
化ナトリウムをゆっくり添加した。３０分後、反応をア
セトンの添加によって急冷し、次いで実施例１１に記載
するように仕上げると、所望の化合物が得られた。高解
像力の質量スペクトル：　Ｃ２ＳＨ３５０Ｓ　（Ｍ　＋
　Ｈ”）について（ＣＩ、ＮＨ，）計算値：４６３．２
４８３６；実測値：４６３．２４８４５゜ ニヱ メタノール中の１．５．４ｇのオルトエステル１゜２−
０−メトキシピリジン−３，５−ジー０−アセチル−σ
−Ｄ−リポース［Ｓ、ハネッシアン（Ｆ（ａｎ６ｓｓｉ
ａｎ）、Ｊ、バノウブ（Ｂ　ａｎｏｕｂ）　、カーボハ
イドレート・リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄ、　Ｒｅｓｅ
ａｒｃｈ）　、４４、Ｃ１４（１９７５）に記載される
方法に従って調製した］の溶液を、メタノール中の０．
０５モルのナトリウムメトキシドの１０．６ｍｌで、室
温において１時間処理した。この反応混合物を中和し、
次いで水を添加し、そして混合物をろ過した。ろ液をベ
ンゼンで３回同時蒸発させると、油状残留物が得られ、
これをそのままそれ以上精製しないで使用した。 実施例１７ 実施例１６のジオールの塩化ｔ−ブチルジフェニルシリ
ルによるシリル化は、Ｅ、Ｊ、コレイ（ｃＯｒｅｙ）、
Ａ、ペン力テスヮルル（Ｖ　ｅｎｋａｔｅｓｗＢｒｌｕ
）　、ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサ
イアテ４　（Ｊ　、　Ａｍｅｒ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ
、　）、９４．６１９０　（１９７２）に記載される方
法に従い実施した。粗生成物をクロマトグラフィーによ
り精製した。所望の化合物は白色結晶として得られた、
融点３７−３８°Ｃ０ 実施例１８ キシフェニル）ジフェニルメチル］−２，３，４−トリ
ス−０−（フェニルメチル）−Ｄ−リビトール 実施例１７のオルトエステル（４８１ｍｇ）および７２
０ｍｇの実施例ＩＯのりビトールを６ｍｌのニトロメタ
ン中に溶解した。メタノールを一定体積において２時間
ニトロメタンを添加しながら連続的蒸留によって除去し
た。臭化水銀（１１）（５６，５ｍｇ）を添加し、そし
て溶媒を一定体積においてニトロメタンを連続的に添加
しながら３時間蒸留した。この混合物をろ過し、濃縮し
、そして生成物をクロマトグラフィーによって単離する
と、所望のグリコシドが油として得られた。質量スペク
トル：　（ＦＡＢ、グリセロール、％）４０３　［Ｍ”
−６９３（リビトールの鎖）、２９．７］。 実施例１９ ５００ｍｌのテトラヒドロフラン中の５０ｇのメチル−
２，３−ジー０−（メチルエチリデン）−β−Ｄ−リボ
フラノシド（Ｎ、Ｊ、レオナード（Ｌｅｏｎａｒｄ）　
、Ｋ　、　Ｌ　、カラウェイ（Ｃａｒｒａｖａｙ）、ジ
ャーナル・オブ・ヘテロサイクリック・ケミストリー（
Ｊ　、　Ｈｅｔ、　Ｃｈａｍ、）　、３．４８５（１９
６６）の方法に従って調製した】およびヨウ化テトラ−
ｎ−ブチルアンモニウムの溶液に、１０．９ｇの水素化
ナトリウムを６０％の分散液として添加した。３０分後
、２２ｍ１の臭化ベンジルをゆっくり添加した。１８時
間後、２０ｇのフロリシル（Ｆ　１ｏｒｉｓｉｌ）を添
加し、そしてテトラヒドロフランを蒸発させた。残留物
をペンタンでよく洗浄し、そしてペンタンの蒸発から得
られる油を蒸留、沸点＝１３０−１３５°Ｃ！　（０，
１ｍｍ）、すると、所望の化合物が無色油として得られ
た。 ３００ｍ１の７０％の酢酸中の２０ｇの実施例ｌ９から
の生成物の溶液を８０°Ｃに６時間加熱した。溶媒を蒸
発させると油が得られた。これを４４ｍ１のピリジンお
よび０．８３０ｇの４−（Ｎ。 Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジンを含有する３００ｍ１の
塩化メチレン中に溶解し、そして２５ｍ１の酢酸をゆっ
くり添加した。３０分間撹拌した後、２００ｍ１の飽和
水性重炭酸すｌ−ＩＪウム溶液を添加し、次いで溶液が
塩基性となるまで固体の炭酸カリウムを添加した。この
溶液をＩＮ塩酸で酸性になるまで洗浄し、乾燥し、そし
て蒸発させると、黄色油が得られた。ＮＭＲはこの生成
物が２５対７５のα対βの比で存在することを示した。 実施例２１ ２００ｍ１の塩化メチレン中の１３．５ｇの実施例２０
からの生成物の溶液に、室温において３分間、乾燥臭化
水素を泡立てて通人した。溶媒を蒸発さＳｌそして残留
物を３回１５０ｍ１のトルエン中に取り、各回蒸発させ
た。得られる油を２００ｍ１の塩化メチレン中に溶解し
、そして５２ｍ１のジメチルホルムアミドジメチルアセ
タールを添加した。３時間撹拌した後、溶液をシリカゲ
ルのパッドを通してろ過し、酢酸エチルで洗浄した。 蒸発すると、所望の化合物が褐色０コとして旧られた。 質量スペクトル（ＣＩ、ＮＨ，、％）：３５６　（Ｍ＋
ＮＨ４”、３６．７）　　；　３０７　（Ｍ”−ＭｅＯ
ｌｌｏｏ）。 実施例２２ ２００ｍ１のメタノール中のｌ１ｇの実施例２１からの
生成物の溶液に、室温において１９２ｍｇのナトリウム
メトキシドを添加した。３時間後、溶媒を蒸発させ、残
留物を２５０ｍ１のベンゼン中に溶解し、そして２．８
４ｇの水素化ナトリウムを６０％の油分散液として添加
し、次いで２４ｍ１の臭化アリルを添加した。１８時間
後、ブラインをこの混合物にゆっくり添加し、そしてコ
レラエーテルで抽出した。残留物をシリカゲルのクロマ
トグラフィーにかけると、所望の化合物が淡黄色油とし
て得られた。高分解能質量スペクトル：Ｃｌ８Ｈｚ５０
６について（ＣＩ　、　ＮＨ３）（Ｍ＋Ｈ”）：計算値
３３７．１６５２４；実測値：３３７．１６５１１゜ 実施例２３ 乾燥塩化メチレン中のテトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−
リポフラノースの溶液に、室温において３分間、無水臭
化水素を急速に通入した。この溶液を室温においてさら
に３分間放置し、そして急速に蒸発させると、シロップ
が得られた。このシロップを乾燥ベンゼンおよび塩化メ
チレンとともに３回同時蒸発させた。もっばらβ−アノ
マーの形態の淡黄色シロップの臭化物を次の工程に直ち
に使用した。 標題塩化物は、同様な方法で調製したが、ただし、塩化
水素で飽和後、反応溶液を冷蔵庫に一夜保持した。 実施例２４ 新しく蒸留した塩化トリメチルシリル（７，６５ｍ１）
を、乾燥塩化メチレン中の６．７５ｇ（７）実施例２２
からの生成物の溶液に添加した。１時間後、溶媒を蒸発
させ、得られる油を１０ｍ１の乾燥アセトニトリル中に
溶解し、そしてこれを２０ｍ１の乾燥アセトニトリルち
ゅの４．５７４ｇの過塩素酸銀および９ｇの粉末状４Ａ
モレクラ−シーブの懸濁液に一４０°Ｃにおいて添加し
た。反応混合物を１時間撹拌した後、ｌｏｍ＋のアセト
ニトリル中の４．６４１ｇの実施例１５からの生成物番
ゆっくり添加した。４時間後、反応混合物をろ過し、蒸
発させ、そして所望の生成物をシリカゲルのクロマトグ
ラフィー１こよって車両製しｔこ。ＩＨＮＭＲ（２００
ＭＨｚ）＋　２．１４　（ｓ、−Ｃ０ＣＨ，）　、３．
５６　３．６７８　（ｍ、５Ｈ）、３．７１−４．２１
　　（ｍ、　　ｌ　ＯＨ）、４．５０−４７３　（ｍ、
８Ｈ，ＣＨｚＰ　ｈ）　、５．１４−５．３３　（ｍ、
５Ｈ，−ＣＨ−ＣＨり、５．６４−５．９４　（ｍ、２
Ｈ，−ＣＩ−１＝）　、７．２５−７．３８　（ｍ、２
０Ｈ，−Ｐｈ）。 実施例２５ ３５ｍ１のアセトニトリル中の３．１８５ｇの乾燥過塩
素酸銀および３．７ｇの４Ａモレキユラーシーブの混合
物を、室温において約１０分間撹拌し、次いで一４０°
Ｃに冷却した。２５ｍ１のアセトニトリル中の４．３０
４ｇの実施例２３のリポフラシノシルクロライドの溶液
を嫡々添加した。 ４０　分’ｄｋ、３０　ｍｌのアセトニトリル中の３．
７ｇの実施例１１のリビトールの溶液を滴々添加し、そ
して得られる黄色溶液を一４０°Ｃにおいて２時間撹拌
した。重炭酸ナトリウム粉末（３，０ｇ）を添加し、そ
してこの混合物を室温に加温した。 反応混合物をライトを通してろ過し、塩化メチレンで洗
浄し、そして−緒にしたろ液および洗浄液を蒸発させる
と、シロップが得らられな。残留物をフラッシュクロマ
トグラフィーにかけると、所望生成物が油として得られ
た、［α］　Ｄ”−−１２，７９”　（ｃ　＝　１６．
５、クロロホルム）。 実施例２６ ２．３．５−１−リスー〇−アセチルーβ−Ｄ−リポフ
ラシルクロライド（実施例２３）および２゜３．４．５
−テトラ−０−ベンジルリビトール［ガレグ（Ｇ　ａｒ
ｅｇｇ）ら、アクタ・ケミ力・スカンジナビ力（Ａｃｔ
ａ　　Ｃｈｅｍ、　５ｃａｎｄ、　）　、２７．１５９
５　（１９７３）に従って調製した］から実施例２５の
方法に従って調製した標題化合物を、油として単離した
。’ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ）１．９８．２．０６およ
び２．０９　（３ｓ、９Ｈ。 ３ＣＯＣＨ３）　、３−６８　（ｍ、４Ｈ）　、３．８
６（ｍ、４Ｈ）　、４．０９　（ｍ、ＩＨ）　、４．２
６（ｍ、２Ｈ）、４．４９　４．７７　（ｍ、８Ｈ，Ｃ
Ｈ２Ｐｈ）　、４．９４　（ｓ、Ｌ　Ｈ，Ｃｒ　　Ｈ）
、５．２７　（ｄ、ＬＨ，Ｃｚ　　Ｈ）、５−３２　（
ｔ。 ＩＨ，Ｃ３−Ｈ）　、７．３０　（ｍ、２０Ｈ，Ａｒ−
Ｈ）。 実施例２７ １上 ２５ｍ１のメタノール中ｔ７５３　ｇの実施例２４から
の生成物の試料に、２１ｍｇのナトルムメトキシドを添
加した。２時間後、メタノールを蒸発させ、０．２５１
ｇの水素化ナトリウムを６０％の分散液としたおよび０
．７２３ｇのヨウ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムを
、５０ｍ１のテトラヒドロフラン中に溶解した残留物に
添加した。１時間後、０６４ｍ１の臭化ベンジルを添加
し、そして撹拌を一夜続けた。実施例９に記載するよう
に仕上げた後、所望生成物を単離した。、ＨＮＭＲ（２
００ＭＨｚ）＋３．５４−３．７０　（ｍ、５Ｈ）、３
．９５−３．９８　（ｍ、ｌ０Ｈ）　、４．２８−４．
３２　（ｍ、ＩＨ，Ｈ−４）　、４−４９１−４．６８
　（ｍ、１０Ｈ，ＣＨｚ　Ｐｈ）　、５．０４（ｓ、Ｌ
Ｈ，Ｈ−１）、５．１３−５．３１　（ｍ。 ４Ｈ，＝ＣＨｚ）　、５．８１　５．９７　（ｍ、２Ｈ
。 −ＣＨ＝）　、７．２４＝７．３７　（ｍ、２５Ｈ。 Ｐｈ）。 実施例２８ ７５ｍ１の１０％の水性エタノールおよび２５ｍ１のト
ルエン中の５．９２１ｇの実施例２７からの生成物、０
．６７３ｇの塩化トリス（トリフェニウルホスフィン）
ロジウム（１）　およＵｏ、２４４ｇのジアザビシルオ
ロクタンの溶液を６時間還流させた。溶媒を蒸発させ、
１０％の水性アセトンで置換し、次いで５．９２５ｇの
塩化第二水銀を添加した。室温において１時間撹拌した
後、この溶液をろ過し、そして溶媒を蒸発させると、油
が得られた。残留物を塩化メチレン中に溶解し、５％の
水性ヨウ化カリウム、ブラインで洗浄し、乾燥し、再び
蒸発させた。シリカゲルのクロマトグラフィーにかける
と、所望化合物が油として得られた。’ＨＮＭＲ（２０
０ＭＨｚ）　　：　２．２９（ｂ　ｒ　　ｔ、ｌ　Ｈ，
Ｃ−５’ＯＨ）　、２．６０　（ｄ。 ＩＨ，Ｃ−３−ＯＨ，Ｊ−８，５Ｈｚ）、３．５０−４
．１７　（ｍ、１２Ｈ）、４−４８−４．６９（ｍ、ｌ
　ＯＨ，ＣＨｚＰｈ）　、５．０１　（ｓ、ｌ　Ｈ。 Ｈ−１）　、７．２８−７．３１　（ｍ、２５Ｈ，Ｐｈ
）。 実施例２９ 一β−Ｄ−リボフラノシルー５−０−　［（４−トール 室温において１．２０ｍ１のピリジンおよび０．３０２
ｇの４−（Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジンを含有す
る８０ｍ１の塩化メチレン中の３．６０９の実施例２８
からの生成物の溶液に、１．９８５ｇの塩化モノメトキ
シトリチルを添加した。１５時間後、この溶液を飽和水
性重炭酸ナトリウムおよびブラインで洗浄し、乾燥し、
そして溶媒を蒸発させた。残留物をシリカゲルのクロマ
トグラフィーにかけると、所望の生成物が白色の泡とし
て得られた。’ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ）：　２．５７
　（ｄ、ＩＨ，Ｃ−３０Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）；３．４
１−４．１０　（ｍ、ＩＨ，Ｈ−１）；６．７５　（ｄ
、２Ｈ，ｐｈｏｃＨ，上のＨ−３＆Ｈ−５）；　７．２
１−７．４９３　（ｍ、３７Ｈ，Ｐｈ）。 実施例３０ ３’−０−（１，４−ジオキシペンチル）−２’。 ９８ｍｇの４−（Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジンを
含有する２５ｍ１のテトラヒドロフラン中の５３５ｍｇ
の実施例２９からの生成物の溶液に、０．０８ｍ１のり
プリン酸を添加し、次いで２ｍｌのテトラヒドロ７ラン
中に溶解した２２０ｍｇのジシクロへキシルカーポジイ
ミドを添加した。溶液を２４時間撹拌し、反応混合物を
濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残留物をシリカゲル
のクロマトグラフィーにかけると、所望化合物が白色の
泡として得られた。１ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ）：　２
．１３　（ｓ、３Ｈ，ＣＨｓＣＯ）；２．５８−２．６
６　（ｍ、４Ｈ，−ＣＯＣＨ，ＣＨ２）；３．４７　（
ｍ、２Ｈ）；３．４８　（ｄ、２Ｈ。 Ｈ−５’、Ｊ＝４．９Ｈｚ）；３．５０　（ｍ、ＬＨ）
；　３．７５　（ｓ、３Ｈ，０ＣＨ３）；　３．８７　
（ｍ。 ４Ｈ）；４．０７　　（ｃｔｃｔ、ＩＨ，Ｈ−２，Ｊ＋
＋ｚ−１，８Ｈｚ、Ｊ＝ｔ＋ｚ４．９Ｈ２）；　４．３
１　　（ｄｄ。 ＩＨ，Ｈ４，Ｊ３，４−１０．９Ｈ２）：　５．１３（
ｄｄ、ｌ　ＨＩ　　Ｈ−３１１２＋ｓ−５，２７Ｈｚ％
Ｊ３，４＝ＩＯ，６Ｈ２）；　６．７４　　（ｄ、２Ｈ
，Ｐｈ０ｃＨ，上のｍ−Ａｒ−Ｈ）；　７．２０−７．
４８　　（ｍ、３７Ｈ，Ｐｈ）。 塩化メチレン中の３％のトリクロロ酢酸の１０ｍ１中の
４８２ｍｇの実施例３０からの生成物の溶液に、室温に
おいて１５分間撹拌した。得られるオレンジ色の溶液を
１０％の水性重炭酸ナトリウムで急冷した。この混合物
を塩化メチレンで希釈し、ブラインで洗浄し、乾燥し、
そして蒸発した。’ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ）：　２．
１４　（ｓ。 ３Ｈ，ＣＨ，Ｃ○−）；２．２７　（Ｂｒ　　ｔ、ＩＨ
。 −０Ｈ）：　２．６０−２．６８　　（ｍ、４Ｈ，−Ｃ
Ｈ２ＣＨ２ＣＯ−）；　３．５３　　（ｄ、２Ｈ，Ｈ−
５゜５’、Ｊ−５，０Ｈｚ）；　３．７３　４．０７　
（ｍ。 ７Ｈ，’）ピトー４）；４．１０　　（ｄｄ、ＩＨ。 Ｈ−２，Ｊ、、ｔ＝２．１ｔｚ）、Ｊ、、３＝５．１Ｈ
ｚ）；４．３３　（ｄｄ、ＩＨ，Ｈ＝４．Ｊ３．４−１
０．５Ｈ２，Ｊｉ、Ｓ−５，ＩＨｚ）；　４．４４−４
．６８　　（ｍ、ＩＯＨ，ＣＨ，ｒＰｈ）；　５．０２
（ｄ、ＩＨ，Ｈ−１，Ｊ＝２．１Ｈｚ）；５．１７（ａ
ｄ、ＩＨ，Ｈ−３，Ｊｉ、ｓ−５，３ＨｚｏＪ３，４−
Ｉｏ、６Ｈｚ）；７．２７−７．３０　　（ｍ、２５Ｈ
，Ｐｈ）　　。 実施例３２ １００ｍｌのアンモニア−飽和メタノール中の１．２７
ｇの実施例２５のトリアセテートの溶液を１日間０°Ｃ
で撹拌した。溶媒を蒸発させ、そして残留物酢を酸エチ
ルで希釈した。この溶液をイオン交換樹脂で処理し、そ
して濾過した。溶媒を蒸発させ、そしてソリ力ゲルのク
ロマトグラフィーにかけると、所望トリオールが得られ
た。’ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ）１．１１　　［ｓ、９
Ｈ。 Ｃ（ＣＨ３）　ｓＪ　、３．１５　（ｂ　ｒ　　ｓ、　
３Ｈ，３０Ｈ）　、３．５６−３．６４　（ｍ、２Ｈ）
、３．７３−４．２０　（Ｂｒ　　ｍ、９Ｈ）、４−メ
トキシ７、ニル、３３　（Ｂｒ　　ｔ、ＩＨ）、４．６
１−４．６５　（ｍ、６〜．ＣＨｔＯＰｈ）　、４．８
５（ｓ　、　　ｌ　Ｈ，Ｃｒ、−Ｈ）　、７．２４−７
．３５（ｍ、１５−、Ａｒ−Ｈ）。 実施例３３ ０℃において２０ｍ１のピリジン中の２．２２ｇの絵ｅ
ｘ３２のトリオールの溶液に、１．２１ｍ１の１．３−
ジクロロ−１，１，３，３−テトライソプロピルシロキ
サンをゆっくり添加した。得られる混合物を０°Ｃにお
いて３時間、そして室温において１時間撹拌した。水を
添加し、そして溶媒を減圧下に濃縮した。次いで、塩化
メチレンを添加し、そしてこの溶液を水、５％のＣｕ　
Ｓ　Ｏａおよびブラインで洗浄し、そして無水硫酸ナト
リウムで乾燥した。蒸発後、生成物をシリカゲルのクロ
マトグラフィーにより精製すると、所望のアルコールが
結晶質固体として得られた。’ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ
）：　１．００−１．１０　［ｍ、２１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ
ｓ）ｚ］　、１．１８　［ｓ、９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）］、
２．９７　（ａ、ＩＨ，ＯＨ）、３．６１　４．１９　
（Ｂｒ　　ｍ、ｌ　２Ｈ）　、４．５２−４．７５　（
ｍ、６Ｈ，ＣＨ，○Ｐｈ）、４．８８　（ｓ、ＩＨ，Ｃ
ｒ、　−Ｈ）、７．３０　（ｍ、１５Ｈ，Ａｒ−Ｈ）。 実施例３４ ［（フェニルメトキシ）メチル］−Ｍ−０−β−Ｄ−リ
ボフラノシル−５−０−（トリメチル室温において２０
ｍ１のテトラヒドロフラン中の１．０６８ｇの実施例３
３からのアルコール、１．１６３ｇのジイソザロピルエ
チルアミンおよび４４８ｍｇのヨウ化テトラ−ｎ−ブチ
ルアンモニウムの溶液に、０．８４４ｍ１のベンジルク
ロロメチルエーテルを添加し、次いで７４ｍｇの４−（
Ｎ、Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジンを添加した。 得られる黄色の懸濁液を４日間撹拌し、次いで１０％の
水性重炭酸ナトリウム溶液を添加し、そしてこの混合物
を蒸発させた。残留物を塩化メチレン中に溶解し、そし
て１０％の水性重炭酸ナトリウム溶液および水で洗浄し
た。乾燥後、溶媒を蒸発させ、そして残留物をクロマト
グラフィーによって精製した。’ＨＮＭＲ（２００ＭＨ
ｚ）１．０２　［Ｂ　ｒ　　ｄ、　２１Ｈ，ＣＨ（ＣＨ
））　２］、１．２０　［ｓ、９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）３］
　、３．６６（ｍ、ＩＨ）、３．７７　３．９２　（Ｂ
ｒ　　ｍ、４Ｈ）　、３．９７−４．０８　（ｍ、　２
Ｈ）　、４．１．１−４．２２　　（ｍ、２Ｈ）　、４
．５０　　（ｄｄ、　　ＩＨ）、４．５１　　（ｍ、　
　ＩＨ）、４．５２−４．７５　　（ｍ。 ６Ｈ，ＣＨｚＯＰ　ｈ）、　　４．８３　　（ｓ、　　
Ｉ　Ｈ，Ｃ１゜−Ｈ）、４．３４および４．４４　（２
ｄ、２Ｈ，。 ＣＨ２０Ｂｎ）、７．２３　　７．３７（ｍ、２０Ｈ。 Ａｒ−Ｈ）　　。 実施例３５ 実施例３３の生成物（１５０ｍｇ）を３ｍｌのジメチル
ホルムアミド中で６０ｍｇの塩化ｔ−ブチルジメチルシ
リルおよび５３ｍｇのイミダールで処理した。１時間後
、反応混合物を通常の方法で仕上げると、所望のシリル
エーテルを生成した。 ’ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ）：　０．０５および０．０
７　　（２ｓ、　　６Ｈ，２ＳｉＣＨｓ）、　０．８８
［ｓ、９Ｈ，Ｓ　ｉＣ（ＣＨｓ）３］　　、　１．０　
１　　［ｍ。 ２８Ｈ，４３ｉＣＨ（ＣＨ３）２］　　、　１−１７　
　［ｓ。 ９Ｈ，ＱＣ（ＣＨ３）　　３］　　、３．７０　　（Ｂ
　ｒ　　　ｄ。 ２Ｈ）、３．８３　　４．０７　　（Ｂｒ　　　ｍ、７
Ｈ）　、４．１６　　（ｄａ、　　ＩＩＨ）、４．４０
　　（ｄａ、　　ＩＨ）　　、　４．５２　　（ａａ、
　　ＬＨ）　　、　４．５９−４．７３　　（ｍ、６Ｈ
，ＣＨｚＰ　ｈ）　　、　４．７７　　（ｓ　、　　Ｉ
　Ｈ。 Ｃ＋、　　Ｈ）　　、７−２８　　（ｍ、　　ｌ　　５
Ｈ，Ａ　ｒ　　　Ｈ）　　。 実施例３６ ２０ｍ１のテトラヒドロフラン中の１．１８ｇの実施例
３４からの生成物の溶液に、８４２ｍｇの７フ化テトラ
−ｎ−ブチルアンモニウム三水和物を添加した。反応混
合物を１時間撹拌し、そして水を添加した。この混合物
を濃縮し、そして残留物をクロロホルムで抽出した。−
緒にした抽出液をブラインで洗浄し、そして無水硫酸ナ
トリウムで乾燥した。溶媒を蒸発した後、残留物をクロ
マトグラフィーにかけると、所望のジオールが得られ　
ｔこ　。　　’ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ）　　　１．１
　　４　　　［ｓ。 ９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）１１．２．３７　（ｄｄ、ＩＨ。 ５′−〇Ｈ）、２．６０　（ｄ、ＩＨ，３’−０Ｈ）、
３．５０−４．１５　（Ｂｒ　　ｍ、ＩＩＨ）、４．３
６　（ｍ、ＬＨ）　、４．４１−４．７０　（ｍ、８Ｈ
。 ＣＨ２０Ｐ　ｈ）　、４．８４　（Ｓ　、　２　Ｈ，０
ＣＨ２０Ｂｎ）　、４．９５　（ｓ、ＩＨ，ＣＩ＋　　
Ｈ）、７．１９−７．３４　（ｍ、２０Ｈ，Ａｒ−Ｈ）
。 実施例３７ ３０ｍ１のテトラヒドロフラン中の７６５ｍｇの実施例
３６からの生成物の溶液に、順次に、２２３ｍｇの硝酸
銀、３９９ｍｇのピリジンおよび４０５ｍｇの塩化モノ
メトキシトリチルを添加した。得られる混合物を室温に
おいて４時間撹拌し、そしてセライトを通して濾過し、
塩化メチレンで洗浄した。濾液を濃縮し、そして１０％
の重炭酸ナトリウムを添加した。これを塩化メチレンで
抽出し、そして乾燥した。蒸発およびクロマトグラフィ
ーによる精製後、所望の生成物が油として得られた。質
量スペルトル：　（ＦＡＢ、ＤＥＡ。 ｍ　／　ｅ　、％）（ＭＨ”−ＯＲ，Ｒ−リビトール鎖
、０．５）　、６３１　（５２６＋ＤＥＡ１０．１４）
。 実施例３８ 実施例３７の生成物を、実施例３に記載するように、塩
化ｔ−ブチルジメチルシリルと反応させると、油として
所望化合物が得られた。’ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ）０
．Ｏｌｉｉよび０．０３（２ｓ、６Ｈ，２Ｓ　ｉＣ（Ｃ
Ｈ３）　、０．７７　（［ｓ。 ９Ｈ，５ｉＣ（ＣＨ，）ｘ］、１．１９　　［ｓ、９Ｈ
。 ＱＣ（ＣＨ３）３］　、３．１３　（ｄｄ、ＩＨ）、３
．７１　　（ｓ、３Ｈ，０ＣＨｓ）　、３．８７　（ｍ
。 ４Ｈ）　、３．９９　（ｄ、ＩＨ，ｃ、−Ｈ）、４．０
３　　（ｍ、ＩＨ）、４．１８　（ｍ、２Ｈ）、４．２
９（ｄｄ、ＩＨ，Ｃｓ　　Ｈ）　、４．５０　（ｍ、Ｉ
Ｈ）、４−４５　４−７１　　（ｍ、　　８　Ｈ，ＣＨ
ＡＰ　ｈ）、４．８４および４．８９　（２ｄ、２Ｈ，
ＯＣＨ，０Ｂｎ）　、５．１１　　（ｓ、ｌ　Ｈ，（：
＋、　　　Ｈ）、６．７７　（ｄ　、　　２　Ｈ、Ｐ　
ｈ　ＯＣＨ３上）ｃ　３＋５−Ｈ）、７．１３−７．５
０　（Ｂｒ　　’ｍ、３２Ｈ。 Ａｒ−Ｈ）　　。 実施例３９ ３．４４リス−〇−（フェニルメチル）−Ｄ−リビトー
ル 室温において２ｍｌのテトラヒドロフラン中の実施例３
８かもの生成物の溶液に、９．１ｍｇの水素化リチウム
アルミニウムを添加した。３０分後、１０％の重炭酸ナ
トリウム溶液を添加し、そして混合物をセライトを通し
て濾過した。蒸発後、残留物をシリカゲルのクロマトグ
ラフィーにかけると、所望のアルコールが油として得ら
れた。 ’ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ）−０，０３および一〇、ｌ
　６　（２ｓ、　６Ｈ，２Ｓ　ｉ　ＣＨ３）　、Ｏ−８
１［ｓ、９Ｈ１Ｓ　ｉＣ（ＣＨ３）３］　、２−’２５
　（ｔ。 ＩＨ，ＯＨ）、３．１３　（ａｄ、ＩＨ）、３．３４（
ｄｄ、１．Ｈ）　、３．７１　（ｓ、３Ｈ，０ＣＨｓ）
、３．７２　（ｍ、３Ｈ）　、３．８７　（ｍ、３Ｈ）
、４．００　（ｄ、ＩＨ，Ｃ２，−Ｈ）、４．Ｈ）、４
．２１　（ｍ、ＩＨ）、４．３１　（ｄｄ、ＬＨ。 Ｃ，−Ｈ）、４−メトキシフェニル、４２−４．７２　
（Ｂｒ　　ｍ、８Ｈ，○ＣＨ２Ｐｈ）、４．８２および
４．８７　（２ｄ、２Ｈ，０ＣＨ２０Ｂｎ）　、５．１
３　（ｓ、ＩＨ，Ｃ，、−Ｈ）、６　、９７　（ｄ　、
　　２　Ｈ、Ｐ　ｈ　ＯＣＨｓ上のＣ３＋　６−Ｈ）　
　、７．１　３−７．５０　　（ｍ、３２Ｈ，Ａｒ　−
Ｈ）。 実施例４０ １５０ｍｌのテトラヒドロ７ラン中の実施例３６のジオ
ール（９，８６０ｇ）、３．６４６ｇの硝酸銀および１
．５８９ｇのジメチルアミノピリジンの混合物を室温に
おいて１０分間撹拌した。 この懸濁液に、３．１３７ｇの塩化上−プチルジメチル
シリルを一度に添加した。得られる混合物を室温におい
て８時間撹拌し、そして１０％の重炭酸ナトリウム溶液
を添加した。５分後、この混合物をセライトを通して濾
過し、そして塩化メチレンで洗浄した。濾液を水および
ブラインで洗浄し、そして乾燥した。溶媒を除去し、そ
して残留物をシリカゲルのクロマトグラフィーにかける
と、所望のシリルエーテルが油として得られた。ＩＨＮ
ＭＲ（２００ＭＨｚ）０．０４および０．０６（２ｓ、
５ｉＣＨｓ）、０．８９　［ｓ、９Ｈ，ＳｉＣ（ＣＨ３
）　３１．１．１８　［Ｓ、　９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）］　
、２．６０　（ｄ、ＬＨ，３’−０Ｈ）、３．６９−４
．０５　（Ｂｒ　　ｍ、９Ｈ）、４−メトキシフェニル
、ｌ　６　（ｍ、２Ｈ）　、４．５３　（ｍ。 １　ｈ）　、４５５　４．７５　（ｍ、８Ｈ，ＣＨ＊０
Ｐｈ）　、４．８５　（ｓ、２Ｈ，０ＣＨ２０Ｐｈ）、
４．８５　（ｓ、２Ｈ，ＯＣＨ，０Ｂｎ）　、５．０３
（ｓ、ＩＨ，Ｃ，、−Ｈ）　、７．３１　（ｍ、２０Ｈ
。 Ａｒ−Ｈ）。 実施例４１ 室温において窒素下に６０ｍ１のエーテル中の１１．７
ｇの実施例４０からのエステルの溶液に、５分かけて３
０ｍ１のホウ水素化トリエチル（１，０モル）を添加し
た。次いで、この混合物をセライトを通して濾過し、そ
して蒸発させた。 残留物を塩化メチレン中に溶解し、水およびブラインで
洗浄し、そして乾燥した。溶媒を除去し、そして残留物
をクロマトグラフィーにかけた後、所望のジオールがシ
ロップとして得られた。′ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ）０
．０１および０．０３（２ｓ、５ｉＣＨ３）、０．８９
　［ｓ、９Ｈ，ＳｉＣ（ＣＨｓＭ　、２．２３　（ｔ、
ＩＨ，５−０Ｈ）、２゜５５　（ａ、ＩＨ，３’−０Ｈ
）、３．６４−４．２１　（Ｂｒ　　ｍ、１２Ｈ）、４
．５０−４．７１　（ｍ、８Ｈ，ＣＨｚＯＰｈ）　、４
−８５　（ｓ。 ２Ｈ，０ＣＨｚＯＢｎ）　、５．Ｏｌ　（ｓ、１〜。 Ｃ，、−Ｈ）　、７．２２　（ｍ、２０Ｈ，Ａｒ−Ｈ）
。 実施例４２ （４−メトキシフェニル）ジフェニルメチル］−２．３
．４−　トリス−０−（フェニルメチル）−Ｄ−リビト
ール 室温において窒素下に１００ｍ１の塩化メチレン中の６
．６９ｇの実施例４１からのジオアール、２．０６ｍ１
のピリジンおよび５１９ｍｇのジメチルアミノピリジン
の溶液に、３．４０８ｇの塩化モノメトキシトリチルを
２つの部分で３０分の間に添加した。得られる混合物を
室温において２４時間撹拌し、次いでメタノールを添加
し、次いで５分以内に１０％の水性重炭酸ナトリウム溶
液を添加した。次いで、反応混合物を塩化メチレンで希
釈し、１０％の水性重炭酸ナトリウム溶液、５％の硫酸
銅溶液およびブラインで洗浄した。溶液を乾燥し、蒸発
させ、そして残留物シリカゲルのクロマトグラフィーに
かけると、所望のトリチルエステルが黄色油として得ら
れた。’ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ）０．０１および０．
０３（２ｓ。 ６Ｈ，Ｓ　ｉ　ＣＨ３）　、０．８８　［ｓ、９Ｈ，Ｃ
（ＣＨ３）　３１．２．５６　（ｄ、ＩＨ，ＯＨ）　、
３．５６（ｍ、２Ｈ）　、３．６８　（ｍ、３Ｈ）　、
３．７６（ｓ、　　３Ｈ，０ＣＨｘ）、　３−８２　　
３−８７　　（Ｂｒｍ、５Ｈ）、４−メトキシフェニル
、０２（Ｂｒ　　ｄ、ＬＨ，ＣＩ　　Ｈ）、４．１４　
（ｂｒｑ、ＬＨ，Ｃｉ＋　　Ｈ）　、４．４４　４．７
７（ｂｒ　　ｍ、８Ｈ，ＣＨｚＯＰｈ）、４．８２　（
ｓ。 ２Ｈ，ＯＣＨ，０Ｂｎ）、４．９９　（ｓ、ＩＨ。 Ｃ，、−Ｈ）　、６．７４　（ｄ、２Ｈ，Ｐｈ０ＣＨ。 上のｍ−Ａｒ　　Ｈ）　、７．０９　７−５６　（ｍ。 ３２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）。 実施例４３ 室温においてアルゴン下に２５ｍ１のエーテル中の２．
１９ｇの実施例４２からのアルコール、３６０ｍｇのり
プリン酸および３７９ｍｇのジメチルアミノピリジンを
含有する隔膜密閉フラスコに、２０ｍ１のエーテル中の
８３５ｍｇのジシクロへキシルカーポジイミドの溶液を
添加した。得られる混合物を室温において２４時間撹拌
し、次いでセライトを通して濾過した。濾液を濃縮し、
そして残留物をクロマトグラフィーにかけると、所望の
エステルが黄色シロップとして得られた。 ’ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ）０．００および０．０２　
（２ｓ、６Ｈ，Ｓ　１ｃＨｓ）　、０．８６［ｓ、９Ｈ
，Ｃ（ＣＨ３）３］　、２．１５　（Ｓ。 ３Ｈ，ＣＨｓＣＯＣＨｚＣＨ＊）、２．６１および２．
７０　（２ｂｒ　　ｔ、４Ｈ，Ｃ旦、Ｃ０ＣＨ２ＧＨｚ
）　、３．５４　（ｍ、２Ｈ）　、３．６３　（ｄ　ａ
。 １１Ｈ）　、３−７５　（ｓ、３Ｈ，０ＣＨ３）、３．
８０−３．９６　（ｂｒ　　ｍ、３Ｈ）、４．１４（ｍ
、　　ｌ　Ｈ，Ｃ４，Ｈ）　、４．４４　４−７２（ｍ
　、　　８　Ｈ、ＣＨ２０Ｐ　ｈ　）、４．７５　（ｄ
、２Ｈ。 ＯＣＨ！０ＢＮ）　、５．００　（ｄ、ＩＨ，Ｃ，。 Ｈ）、５．１５　（ｔ、ＩＨ，Ｃｓ、　　Ｈ）、６．７
３　（ｓ、２Ｈ，Ｐ　ｈＯｃＨｓ上のｍ−Ａｒ−Ｈ）、
７．０９−７．４５　　（ｍ、３２Ｈ，Ａｒ　−Ｈ）。 実施例４４ 止 室温において１０ｍ１の塩化メチレン中の２．４０ｇの
実施例４３のトリチルエーテルの溶液に、塩化メチレン
ちゆうの３％のトリクロロ酢酸の７５ｍ１を添加した。 得られる赤色溶液を１５分間撹拌し、そして１０％の水
性重炭酸ナトリウム溶液で処理した。次いで、この混合
物を水および塩化メチレンの間で分配した。有機相をブ
ラインで洗浄し、そして無水硫酸ナトリウムで乾燥下。 溶媒の除去および残留物のクロマトグラフィー後、所望
のアルコールは油として得られた。 皇ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ）０．０３および０．０５　
（２ｓ、６Ｈ，Ｓ　１ｃＨｘ）　、０．８９［ｓ、９Ｈ
，Ｃ（ＣＨ３）３］　、２−１７　（ｓ、３Ｈ，ＣＨ，
Ｃ０ＣＨ２ＣＨ，）　、２．２５　（ｔ　、ｌ　Ｈ。 ＯＨ）　、２．６３および２．７２　（２ｂｒ　　ｔ、
４Ｈ，ＣＨ３Ｃ０ＣＨ２ＣＨ２）　、３．６３−’３．
７８（ｍ、６Ｈ）、３．８２　（ｄ　　ｄ、ＬＨ）、３
．８９　（：　ｔ、ＩＨ）、３．９５　（ｄ　　ｄ、Ｉ
Ｈ）、４−メトキシフェニル、１９　（ｄ　ｃｔ、ＩＨ
，ｃ、。 −Ｈ）、４−メトキシフェニル、３２（ｄ　　ｄ。 ｌＨ，Ｃｚ、　　Ｈ）、４，５２　４．７０　（ｍ、８
Ｈ，ＣＨ，０Ｐｈ）　、４．７２および４．８０（２ｄ
、０ＣＨ２０Ｂｎ）、５．７０　（ｄ、ＩＨ，Ｃ，。 −Ｈ）、５．１７　（ｔ、ＩＨ，Ｃ３，−Ｈ）、７．３
３　（２０Ｈ，Ａｒ−Ｈ）。 実施例４５ リボ７ラノシルー５−０−　［（４−メトキシフェ５ｍ
ｌのテトラヒドロフラン中の４４０ｍｇの実施例２９か
らの生成物の溶液を、ｌｏｍｌのテトラヒドロフラン中
の０．１９ｍ１の２−シアオノエチルーＮ、Ｎ−ジイソ
プロピルクロロホスホルアミダイトおよび０．３１ｍ１
のジイソプロピルエチルアミンの溶液に添加した。この
溶液を室温において１８時間撹拌した後、それを酢酸エ
チルおよびブラインの５０＋５０混合物中に注いだ。層
を分離し、水性層を追加の酢酸エチルで洗浄し、そして
有機層を一緒にした。乾燥、蒸発、および残留物のシリ
カゲルのクロマトグラフィー後、所望化合物が無色の油
として得られた。’ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ；特性シグ
ナル）　　：　１．１１（ｄ　、　６　Ｈ，ＮＣ（ＣＨ
３）　２）、１．２２（ｄ。 ５Ｈ，ＮＣ（ＣＨ，）り。 実施例４６ ５’−０−［（１，１−ジメチルエチル）ジメチルシリ
ル］　−３’−０−［［ビス（ｌ−メチルエチ室温にお
いてアルゴン下に１５ｍ１のテトラヒドロフラン中の０
．８０ｇの塩化Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルメチルホスホン
アミジン酸および１．２８ｍ１のジイソプロピルエチル
アミンを含有する隔膜密閉フラスコに、４０ｍ１のテト
ラヒドロフラン中の１．９０　ｇの実施例４２のアルコ
ールの溶液を添加した。得られる曇った溶液を室温にお
いて一夜撹拌し、次いで酢酸エチルで希釈した。この混
合物を１５％の水性重炭酸ナトリウム溶液およびブライ
ンで洗浄した。乾燥後、溶媒を減圧下に除去した。残留
物をシリカゲルの短いカラムで精製すると、無色のシロ
ップとしてホスホルアミダイトが得られた。”Ｐ　　Ｎ
ＭＲ（１２１，４２ＭＨ２）１５１．７０．１５２．０
０゜実施例４７ 一すビトール ０．８５ｍ１のテトラヒドロフラン中の実施例３７から
のアルコールの１５０ｍｇの部分を、実施例４６に記載
するように、０．０７ｍ１の塩化Ｎ。 Ｎ−ジイソプロピルメチルポスボンアミジン、酸を反応
させて、所望化合物をシロップとして生成しｆ−。　”
Ｐ　　　　ＮＭＲ（１２１，４２ＭＨｚ）　　　：　　
１４９．９８および１５０．３７゜ 実施例４８ −Ｏ−［（４−メトキシフェニル）ジフェニルメチル］
　　−２，３，４−トリス−○−（フェニルメ５ｍｌの
乾燥アセトニトリル中の２３５ｍｇの実施例３１からの
生成物の溶液を、１ｍｌのアセトニトリル中の３７８ｍ
ｇの実施例４５からの生成物および１３２ｍｇの新しく
昇華したテトラゾールの溶液に室温において添加した。 ２４時間撹拌した後、この溶液を２　：　ｌ　（Ｖ／Ｖ
）のテトラヒドロ７ランー水中の０．１モルのヨウ素で
処理した。溶媒を蒸発させ、そして残留物を塩化メチレ
ンで抽出した。この溶液を５％の水性亜流酸ナトリウム
およびブラインで洗浄し、乾燥し、そして濃縮して所望
化合物を得た。 実施例４９ シホスフィニル）−２−０−［Ｃ７ｘニルメトキ室温に
おいてアルゴン下に２．１５ｇの実施例４６のホスホル
アミダイトおよび４９４ｍｇのテトラゾールを含有する
隔膜密閉フラスコに、３０ｍ１のアセトニトリル中の１
．９１ｇの実施例４４からのアルコールの溶液を添加し
た。得られる混合物を室温似おいて約２４時間撹拌し、
次いで１．６　ｍｌのピリジンをフラスコに添加した。 次いで、この反応混合物をテトラヒドロフラン−水中の
ヨウ素で、赤色が消失するまで、処理した。 １０分後、赤色溶液をクロロホルム中に注ぎ、そしてこ
れを５％の水性亜流酸ナトリウムおよびブラインで洗浄
した。水性相をクロロホルムで逆抽出した。−緒にした
有機相を乾燥し、そして溶媒を減圧下に除去した。粗製
生成物をシリカゲルで精製すると、２つのジアステレオ
マーとして所望の二量体が得られた。”Ｐ　　ＮＭＲ（
１２１，４２ＭＨｚ）：　１．８４９および２．１１０
８ｐｐ。 実施例５０ の５−エステル ２ｍｌのアセトニトリル中の９３ｍｇの実施例３９から
の生成物、１２５ｍｇの実施例４７からのホスホルアミ
ダイト、および３７ｍｇのテトラゾールの溶液を、実施
例４９に記載するように反応させ、そして酸化すると、
所望の二量体が油として得られた。”Ｐ　　ＮＭＲ（１
２１，４２ＭＨｚ）：Ｏ，１６６および０．２５７゜ 実施例５１ ル）−Ｄ−リビトールとの５−エステル実施例４９の二
量体の１６２ｍｇの部分を塩化メチレン中の３％のトリ
フルオロ酢酸の４ｍｌ中に溶解した。この溶液を１０分
間撹拌し、そして反応混合物を１０％の水性重炭酸ナト
リウム溶液で急冷した。この混合物を塩化メチレンで希
釈し、次いで１０％の水性重炭酸ナトリウム溶液で洗浄
した。有機相を乾燥し、蒸発させ、そしてシリカゲルの
クロマトグラフィーにかけると、所望のアルコールが無
色の油として得られた。ｌｌｐＮＭＲ（１２１，４２Ｍ
Ｈｚ）：　１．８５および２．１３゜ 実施例５２ ０−　［（フェニルメトキシ）メチル１−β−Ｄ−± 実施例４９の二量体を３ｍｌの塩化メチレン中に溶解し
、次いで酢酸−ビリジン（１：　４ｖ／Ｖ）中の０．５
モルのヒドラジンを添加した。得られる黄色溶液を室温
において１５分間撹拌し、次いで反応混合物を０．２ｍ
ｌの酢酸で急冷した。この溶液をクロロホルム中に注ぎ
、そして１０％の水性重炭酸ナトリウム溶液、水、５％
の硫酸銅溶液およびブラインで洗浄した。−緒にした水
性相をクロロホルムで逆抽出した。乾燥後、有機相を蒸
発させ、そしてシリカゲルのクロマトグラフィーにより
精製すると、所望のアルコールが黄色油として得られた
。”Ｐ　　ＮＭＲ（１２１，４２ＭＨｚ）：１．８５．
２．０９゜ 実施例５３ １−０−　　［５−０−［（１，１−ジメチルエチル）
ジメチルエチル］　−３−０−（ヒドロキシメトキシホ
スフィニル）−２−０−［（フェニルメトキ実施例５２
のアルコールからシロップを生成する実施例４６に記載
する条件を用いて化合物を調製した。”Ｐ　　ＮＭＲ（
１２１，４２ＭＨｚ）：０．０１３．０．３０５．１４
９．９７および１５０．２３゜ 実施例５４ シ）メチル］　−β−Ｄ−リポフラノンル］　−５−−
０−（フェニルメチル）−Ｄ−リビトールとの５−エス
テル １ｍｇのテトラヒドロフラン中において９５ｍｇの実施
例５３のホスホルアミダイト、６５．２ｍｇの実施例５
１のアルコールおよびｌ　３．１ｍｇのテトラゾールを
。実施例４９に記載するように、反応させ、そして酸化
して、所望の化合物を、ホスフェートエステルにおいて
エピマーである、対字体の混合物として生成した。対掌
体の１つをシリカゲルのクロマトグラフィーによって単
離した。３１Ｐ　　ＮＭＲ（１２１，４２ＭＨｚ）：０
−０８９．０．３３４．０．４０４゜ 実施例５５ フラノシル］−２，３，４−トリス−０−（フェニ実施
例５１の生成物の一部を、実施例５２の生成物の調製に
ついて記載したように、ヒドラジンで処理して、所望の
ジオールを無色油として得た。 コ’Ｐ　　　ＮＭＲ（１２１，４２ＭＨｚ）　　：０．
２２１および０．４７３゜ 実施例５６ 実施例５５からの生成物の６０ｍｇをｌｏｍｌのｔ−ブ
チルアミン中に溶解し、そしてこの溶液を２４時間還流
加熱した。反応混合物の上に窒素の流れを通すことによ
って、Ｌ−ブチルアミンを除去した。残留物をシリカゲ
ルのカラムに適用し、不純物を洗浄除去し、そして所望
化合物をシリカゲルを酢酸エチルおよびメタノールで洗
浄することによって得た。−緒にした溶離液を蒸発させ
て、化合物を油として得た。”Ｐ　　ＮＭＲ（１２１゜
４２ＭＨｚ）ニー０．６５４　ｐ　ｐｍ。 実施例５７ 実施例５６からの生成物を１．１ｍｇの０．１モルのフ
ッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム中に溶解し、そし
て室温において７時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、そし
て残留物を水性メタノール中に再溶解した。触媒、炭素
担持１０％パラジウム、を添加し、そしてこの混合物を
室温および１５ｐｓｉにおいて５時間水素化した。反応
混合物を濾過し、蒸発させ、水で希釈し、そしてエーテ
ルおよびヘキサンで抽出した。水性相をドウウェクス（
Ｄｏｗｅｘ）　５０　Ｗ　−Ｘ　８　（Ｎ　ａ＋型）イ
オン交換樹脂とともに撹拌し、次いで同一樹脂を充填し
たカラムを通して濾過し、水で溶離した。水を蒸発させ
、そして残留物を７リカゲルのクロマトグラフィーにか
けると、所望化合物が得られた。 ”Ｐ　　ＮＭＲ（１２１，４２ＭＨｚ）：１．１３６ｐ
ｐｍ。 実施例５８ １′−β−Ｄ−リボフラノシルー１−Ｄ−リビト巳 実施例４１の生成物に実施例５７に記載する脱保護手順
を適用すると、所望化合物が得られた。 ［α］、２３−−３５°　（ｃ　　４．０、Ｈ，Ｏ）；
’ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ、Ｄ２０）３．５８−３．７
２　（ｍ、４Ｈ）　、３．７４−３．８４　（ｍ。 ４Ｈ）、３．８９　（ｍ、ＩＨ）、４−００　（ｍ、Ｌ
Ｈ，Ｃ４，−Ｈ）　、４．２２　（ｄｄ、ＩＨ，Ｃ３、
Ｈ）　　；　”ＣＮＭＲ（７５，４３ＭＨｚ　、　　Ｄ
２０）：　　６５．１　０、６５．１　９、７１．３３
、７２．９５．７３．３０．７４．６７．７４．８９、
７７．０６．８５．４４．１０９．５９　；ＭＳ　（Ｃ
Ｉ、グリセロール、ｍ／ｅ、％）　３７７　（Ｍ＋ｇｙ
　］　＋１（”。 １．１）、２８５　　（Ｍ＋Ｈ”、３．８）　　；Ｃ，
。Ｈ２１０、についてのＨＲＭＳ　（ＣＩ　、グリセロ
ール。 Ｍ／Ｚ）（Ｍ＋Ｈつ、計算値２８５．１１８６、実測値
２８５．１１８７゜ 実施例５９ リボフラノシル］　　−２，３，４−トリス−〇−（）
実施例５４の生成物を実施例５に記載するようにヒドラ
ジンで処理して所望化合物を得た。 実施例６０ ベンジル２．３−０−ベンジリジン−β−Ｄ−リボフラ
ノシド １ｇのリポース、１．４１５ｇのベンズアルデヒドおよ
び２．８８４ｇのベンジルアルコールを含有するフラス
コを激しく震盪し、その間０．２ｍｌの濃硫酸を嫡々添
加した。得られる黄色溶液を室温において１８時間加熱
し、そして８０℃に１時間加熱した。それをエーテルで
希釈し、そしてエーテル相を１０％の水性重炭酸ナトリ
ウム溶液、濃硫酸水素ナトリウム溶液、次いで水で洗浄
した。有機相を乾燥し、溶媒を蒸発し、そして残留物を
シリカゲルのクロマトグラフィーにかけると、エンド−
およびエキソ−リボフラノシドの混合物が無色の結晶と
して得られた。融点４６−５０°Ｃ０ 実施例６１ ド ロｍｌのテトラヒドロフラン中において実施例６０から
の生成物（８００ｍｇ）、１．７ｍｌのジインプロピル
アミンおよび１．１６ｍｌのＮ、Ｎ−ジイソプロピロピ
ルメチルホスホルアミジン酸を、実施例４６に記載する
ように、反応させ、そして精製すると、所望のホスホル
アミダイトが油として得られた。”Ｐ　　ＮＭＲ（１２
１，４２ＭＨｚ）：１４９．３２および１４９．４４ｐ
ｐｍ。 実施例６２ ５０ｍ１の無水エタノール中の実施例１０がらのアルデ
ヒド（ホウ水素化ナトリウムの還元の前）の溶液に、２
．１５９ｇの酢酸ナトリウムおよび１７７ｍｇのシアノ
ホウ水素化ナトリウムを添加シタ。室温において３０分
間撹拌した後、エタノールを蒸発させ、そして残留物を
クロロホルム中に溶解した。この溶液をブラインで洗浄
し、乾燥し、そして蒸発させると、粗製中間体アミンが
得られた。アミンの全量を５０ｍ１の塩化メチレン中に
溶解し、そしてこの撹拌した溶液に１　、２　ｍ　ｌの
トリエチルアミン、次いで０．６４ｍ１のクロロホルム
を添加した。３０分後、３．５ｇのトリクロロ酢酸を添
加し、そして撹拌を１５分間続けた。有機溶液を水性重
炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥し、そして蒸発させ
た。シリカゲルのクロマトグラフィーにかけると、所望
化合物が油として得られた。ＭＳ　（ＣＩ　、　ＮＨ３
）　５５６　（Ｍ”＋１）。 実施例６３ ル、ｐ　４ｌ−ｏ−［５−０−［（１，１−ジメチルエ
チル）ジメチルシリル］　−３−０−（ヒドロ実施例４
９の生成物を実施例６１に記載するホスホルアミダイト
と反応させ、そして酸化して実施例４９に記載するよう
に所望化合物を得た。 実施例６４ ビトール、Ｐ→１−０−　［３−０−（ジヒドロキシメ
トキシホスフィニル）−β−Ｄ−リポフラノ実施例６３
の生成物を次の順序で完全に脱保護した：メチル基をホ
スフェートエステルからこの化合物をｔ−ブチルアミン
中で実施例５５に記載するようにして還流することによ
って除去した。 シリル保護基をフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム
を使用して除去し、そしてベンジル、ベンジリジン、お
よびモノメトキシトリチル基を実施例５７に記載するよ
うに炭素担持１０％パラジウムの存在下に接触水素化す
ることによって離脱させた。後者の手順からの濾液をエ
ーテルで抽出し、そして水性相をドウウェクス５０Ｗ−
Ｘ８イオン交換樹脂（Ｎａ＋型）とともに撹拌した。濾
液を蒸発させると、所望化合物が得られた。 新規な多糖類、例えば、実施例６２の多糖類、の高分子
接合体を、この多糖類を高分子と共有的に反応させるこ
とによって調製する。 実施例６５ 免疫原蛋白質への接合 実施例６４のポリを０．４モルのリン酸カルシウム緩衝
液、ｐＨ＝６．７、中に５０ミリモルの最終濃度で溶解
する。坦体蛋白質の溶液を１％のβ−Ｄ−オクチルグル
コシド中において０．２３５ミリモルの濃度で調製した
。ねじの蓋をもつプＬスチック管内の実施例６４の生成
物の溶液の１ｍｌの試料に、１ｍｌの坦体蛋白質の調製
物、１００μｌの１０％のβ−Ｄ−オクチルグルコシド
、および５μモルのシアノホウ水素化ナトリウムを添加
した。この管を密閉し、そして混合物を３７°Ｃで６日
間撹拌した。この反応混合物を１％のβ−Ｄ−才クチル
りルコシドを含有するリン酸塩緩衝化塩類溶液に対して
透析して、精製された坦体蛋白質−合成ＰＲＰ接合温度
を生成した。 本発明のこの高分子接合温度は、表■におけるデータに
よって示されるように、ポリ（リボシル−リビトールホ
スフェート）抗体の形成を引き出し、そして病原体へモ
フイルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ
　　Ｉ　ｎｆ　１ｕｅｎｚａｅ）　ｂ型によって引き起
こされる感染に対して温血動物において活性な免疫化を
誘発するであろう。スプレィクーダウレイ（Ｓ　ｐｒａ
ｑｕｅ　−Ｄ　ａｖｌｅｙ）ラットを１週間順応化した
後、接合体のワクチン（０，５ｍｌ／投与）を１回／週
で３週間注射した。 本発明の主な態様および特徴は、次の通りである。 １１式： 式中、ｎは２〜３０の整数であり、モしてＲはＲ’−（
ＣＨＯＨ）ｍ−ＣＨ，− によって定義されるスペーサー断片であり、ここで品は
０〜３の整数であり、そしてＲ′はＣＨＯｌＣＯＹ、ｃ
Ｈ，ｘ、ＣＨ，ＮＨ２またはＣＨ，ＳＨであり、Ｙはハ
ロ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドまたはヒドラジノで
あり、そしてＸは／＼ロゲン、メタンスルホニル、トリ
フルオロメタンスルホニルまたはトルエンスルホニルで
ある、の化合物。 ２、ｎは４であり、ｍは３であり、そしてＲ′はＣＨＯ
である上記第１項記載の化合物。 ３、ｎは３であり、ｍは３であり、そしてＲ′はＣＨ２
ＮＨ２である上記第１項記載の化合物。 ４、ｎは３であり、ｍは３であり、そしてＲ′はＣＨ，
ＳＨである上記第１項記載の化合物。 ５、式： 式中、ｎは２〜３０の整数であり、モしてｍは０〜３の
整数であり、そしてＲ′は Ｐ−３−５−ＣＨ，− Ｐ−ＮＨＣ○− Ｐ−ＮＨＣＨ２− Ｐ−Ｎ＝ＣＨ− Ｐ　　　ＣＯＮ　ＨＣＨ！− Ｐ−ＣＨ，ＮＨＮＨＣＯ− Ｐ−ＣＨ２ＮＨＣＯ− Ｐ　　　ＣＨｘＮ　ＨＮ　ＨＣＯ− であり、モしてＰは高分子である、 の高分子接合体。 ６、高分子は免疫応答を誘発できる蛋白質である上記第
５項記載の化合物。 ７、蛋白質は破傷風毒素、破傷風トキソイド、ジフテリ
ア毒素またはジフテリアトキソイドである上記第６項記
載の化合物。 ８、製薬学的に有効量の式： 式中、ｎは２〜３０の整数であり、モしてｍはＯ〜３の
整数であり、そしてＲ′は Ｐ−５−９−ＣＨ２− Ｐ−ＮＨＣＯ− Ｐ−ＮＨＣＨ２− Ｐ−Ｎ−ＣＨ− Ｐ−ＣＯＮＨＣＨ２− Ｐ−ＣＨ２ＮＨＮＨＣＯ− Ｐ−ＣＨ＝　Ｎ　Ｎ　ＨＣＯ− Ｐ−ＣＨ２ＮＨＮＨＣＯ− であり、そしてＰは高分子である、 の高分子接合体を温血動物に投与することからなる、病
原体へモフィルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍｏｐｈ
ｉｌｕｓ　　Ｉ　ｎｆ　１ｕｅｎｚａｅ）　ｂ型により
引き起こされる感染に対して、温血動物において、ポリ
（リボシル−リビトール−ホスフェート）抗体の形成を
引き出しかつ免疫化を誘発する方法。 ９、式： 式中、ｎは２〜３０の整数であり、モしてｍはＯ〜３の
整数であり、そしてＲ′は Ｐ−５−５−ＣＨ２− Ｐ−ＮＨＣＯ− Ｐ−ＮＨＣＨ２− Ｐ−Ｎ＝ＣＨ− Ｐ　　　ＣＯＮ　ＨＣ８２− Ｐ−ＣＨ２ＮＨＮＨＣ〇− Ｐ−ＣＨ−ＮＮＨＣ○− Ｐ−ＣＨ２ＮＨＮＨＣＯ− であり、そしてＰは高分子である、 の高分子接合体からなる病原体へモフィルス・インフル
エンザｚ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ　　Ｉｎｆｌｕｅｎ
ｚａｅ）ｂ型に対するワクチン。 １０１式： 式中、ｎは２〜３ｏの整数であり、そしてＲ−はＲ’　
　（ＣＨＯＨ）　ｍ　　ＣＨｚ−によって定義されるス
ペーサー断片であり、ここでｍは０〜３の整数であり、
そしてＲ′はＣＨＯｌＣＯＹ、ＣＨ２Ｘ、ＣＨ，ＮＨ２
またはＣＨ，ＳＨであり、Ｙはハロ、Ｎ−ヒドロキシス
クシンイミドまたはヒドラジノであり、そしてＸはハロ
ゲン、メタンスルホニル、トリフルオロメタンスルホニ
ルまたはトルエンスルホニルである、の化合物を製造す
る方法であって、 ａ）リビトールの第二ヒドロキシル基土の保護基または
リポース単位から保護基を同時に除去しないで、Ｃ１お
よびＣ６の第一ヒドロキシル基土の保護基を選択的にか
つ独立に除去できるように、リビトール単位をリポース
から組立て、ｂ）リポース単位のＣ２およびＣ６におけ
るヒドロキシル上の保護基またはりビトール単位上の保
護基に対して独立に、Ｃ１における保護基を除去できる
ように、そのアノマーの炭素における活性化官能性およ
びその残部のヒドロキシル基における保護官能性を含有
するリポース単位を組立て、Ｃ）適当に保護されたりビ
トール単位を適当に保護および活性化されたリポース単
位と反応させて、リポースのＣＩを介して連結したりポ
ジルーリビトールのモノマーを発生させて、前記２つの
単位の接合点において実質的にβ−立体配置を生成し、 ｄ）末端リポース単位のＣ１における保護基を除去し、
同時にすべての他の保護基を完全な状態で残し、 ｅ）Ｃ，ヒドロキシル基を適当な塩化ホスホルアミジン
酸と反応させて、ホスホルアミダイト中間体を発生させ
、 ｆ）工程Ｃ）からの末端リポースの第一ヒドロキシルか
ら保護基を選択的に除去し、そしてこれを工程ｅ）から
のホスホルアミダイト中間体と反応させ、次いでホスホ
トリエステルに酸化し、ｇ）所望の数ｎの反復単位が組
立てられるまで工程ｄ）〜ｆ）を反復し、 ｈ）工程ｄ）およびｅ）を反復して、末端リポースのＣ
１にホスホルアミダイトを導入し、次いで末端リポース
のＣ１におけるホスホルアミダイトを通して、所望の官
能基Ｒ′を含有するスペーサ一部分Ｒを導入し、次いで
ホスホトリエステルに酸化する、 ことを含む前記方法。 １１、式： 式中、ｎは２〜３０の整数であり、そしてｍは０〜３の
整数であり、そしてＲ′は Ｐ−３−５−ＣＨ２− Ｐ−ＮＨＣＯ− Ｐ−ＮＨＣＨ，− Ｐ−Ｎ−ＣＨ− Ｐ−ＣＯＮ’ＨＣＨ２− Ｐ−ＣＨ２ＮＨＮＨＣＯ− Ｐ−ＣＨ−ＮＮＨＣＯ− Ｐ−ＣＨ，ＮＨＮＨＣＯ− であり、モしてＰは高分子である、 の高分子接合体を製造する方法であって、式：式中、ｎ
は２〜３０の整数であり、モしてＲはＲ’　　（ＣＨＯ
Ｈ）　ｍ　　ＣＨｚ＝によって定義されるスペーサー断
片であり、ここでｍはＯ〜３の整数であり、そしてＲ′
はＣＨＯ。 ＣＯＹ、ＣＨ２Ｘ５ＣＨ２ＮＨ２またはＣＨ２ＳＩ］で
あり、Ｙはハロ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドまたは
ヒドラジノであり、そしてＸはハロゲン、メタンスルホ
ニル、トリフルオロメタンスルホニルまたはトルエンス
ルホニルである、の化合物を免疫原の高分子と反応させ
ることからなる前記方法。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、ｎは２〜３０の整数であり、そしてＲはＲ′−（
   ＣＨＯＨ）＿ｍ−ＣＨ＿２− によって定義されるスペーサー断片であり、ここでｍは
   ０〜３の整数であり、そしてＲ′はＣＨＯ、ＣＯＹ、Ｃ
   Ｈ＿２Ｘ、ＣＨ＿２ＮＨ＿２またはＣＨ＿２ＳＨであり
   、Ｙはハロ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドまたはヒド
   ラジノであり、そしてＸはハロゲン、メタンスルホニル
   、トリフルオロメタンスルホニルまたはトルエンスルホ
   ニルである、の化合物。 ２、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、ｎは２〜３０の整数であり、そしてｍは０〜３の
   整数であり、そしてＲ′は Ｐ−Ｓ−Ｓ−ＣＨ＿２− ▲数式、化学式、表等があります▼ Ｐ−ＮＨＣＯ− Ｐ−ＮＨＣＨ＿２− Ｐ−Ｎ＝ＣＨ− Ｐ−ＣＯＮＨＣＨ＿２− Ｐ−ＣＨ＿２ＮＨＮＨＣＯ− Ｐ−ＣＨ＝ＮＮＨＣＯ− Ｐ−ＣＨ＿２ＮＨＮＨＣＯ− であり、そしてＰは高分子である、 の高分子接合体。 ３、製薬学的に有効量の式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、ｎは２〜３０の整数であり、そしてｍは０〜３の
   整数であり、そしてＲ′は Ｐ−Ｓ−Ｓ−ＣＨ＿２− ▲数式、化学式、表等があります▼ Ｐ−ＮＨＣＯ− Ｐ−ＮＨＣＨ＿２− Ｐ−Ｎ＝ＣＨ− Ｐ−ＣＯＮＨＣＨ＿２− Ｐ−ＣＨ＿２ＮＨＮＨＣＯ− Ｐ−ＣＨ＝ＮＮＨＣＯ− Ｐ−ＣＨ＿２ＮＨＮＨＣＯ− であり、そしてＰは高分子である、 の高分子接合体を温血動物に投与することことを特徴と
   する病原体ヘモフィルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍ
   ｏｐｈｉｌｕｓＩｎｆｌｕｅｎｚａｅ）ｂ型により引き
   起こされる感染に対して、温血動物において、ポリ（リ
   ポシル−リビトール−ホスフェート）抗体の形成を引き
   出しかつ免疫化を誘発する方法。 ４、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、ｎは２〜３０の整数であり、そしてｍは０〜３の
   整数であり、そしてＲ′は Ｐ−Ｓ−Ｓ−ＣＨ＿２− ▲数式、化学式、表等があります▼ Ｐ−ＮＨＣＯ− Ｐ−ＮＨＣＨ＿２− Ｐ−Ｎ＝ＣＨ− Ｐ−ＣＯＮＨＣＨ＿２− Ｐ−ＣＨ＿２ＮＨＮＨＣＯ− Ｐ−ＣＨ＝ＮＮＨＣＯ− Ｐ−ＣＨ＿２ＮＨＮＨＣＯ− であり、そしてＰは高分子である、 の高分子接合体を含有ことを特徴とする病原体ヘモフィ
   ルス・インフルエンザエ（ＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓＩｎ
   ｆｌｕｅｎｚａｅ）ｂ型に対するワクチン。 ５、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、ｎは２〜３０の整数であり、そしてＲはＲ′−（
   ＣＨＯＨ）＿ｍ−ＣＨ＿２− によって定義されるスペーサー断片であり、ここでｍは
   ０〜３の整数であり、そしてＲ′はＣＨＯ、ＣＯＹ、Ｃ
   Ｈ＿２Ｘ、ＣＨ＿２ＮＨ＿２またはＣＨ＿２ＳＨであり
   、Ｙはハロ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドまたはヒド
   ラジノであり、そしてＸはハロゲン、メタンスルホニル
   、トリフルオロメタンスルホニルまたはトルエンスルホ
   ニルである、 の化合物を製造する方法であって、 ａ）リビトールの第二ヒドロキシル基上の保護基または
   リボース単位から保護基を同時に除去しないで、Ｃ＿１
   およびＣ＿５の第一ヒドロキシル基上の保護基を選択的
   にかつ独立に除去できるように、リビトール単位をリボ
   ースから組立て、 ｂ）リボース単位のＣ＿２およびＣ＿５におけるヒドロ
   キシル上の保護基またはリビトール単位上の保護基に対
   して独立に、Ｃ＿３における保護基を除去できるように
   、そのアノマーの炭素における活性化官能性およびその
   残部のヒドロキシル基における保護官能性を含有するリ
   ボース単位を組立て、 ｃ）適当に保護されたリビトール単位を適当に保護およ
   び活性化されたリボース単位と反応させて、リボースの
   Ｃ＿１を介して連結したリボシル−リビトールのモノマ
   ーを発生させて、前記２つの単位の接合点において実質
   的にβ−立体配置を生成し、 ｄ）末端リボース単位のＣ＿３における保護基を除去し
   、同時にすべての他の保護基を完全な状態で残し、 ｅ）Ｃ＿３ヒドロキシル基を適当な塩化ホスホルアミジ
   ン酸と反応させて、ホスホルアミダイト中間体を発生さ
   せ、 ｆ）工程ｃ）からの末端リボースの第一ヒドロキシルか
   ら保護基を選択的に除去し、そしてこれを工程ｅ）から
   のホスホルアミダイト中間体と反応させ、次いでホスホ
   トリエステルに酸化し、 ｇ）所望の数ｎの反復単位が組立てられるまで工程ｄ）
   〜ｆ）を反復し、 ｈ）工程ｄ）およびｅ）を反復して、末端リボースのＣ
   ＿３にホスホルアミダイトを導入し、次いで末端リボー
   スのＣ＿３におけるホスホルアミダイトを通して、所望
   の官能基Ｒ′を含有するスペーサー部分Ｒを導入し、次
   いでホスホトリエステルに酸化する、 ことを特徴とする前記方法。 ６、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、ｎは２〜３０の整数であり、そしてｍは０〜３の
   整数であり、そしてＲ′は Ｐ−Ｓ−Ｓ−ＣＨ＿２− ▲数式、化学式、表等があります▼ Ｐ−ＮＨＣＯ− Ｐ−ＮＨＣＨ＿２− Ｐ−Ｎ＝ＣＨ− Ｐ−ＣＯＮＨＣＨ＿２− Ｐ−ＣＨ＿２ＮＨＮＨＣＯ− Ｐ−ＣＨ＝ＮＮＨＣＯ− −Ｐ−ＣＨ＿２ＮＨＮＨ− であり、そしてＰは高分子である、 の高分子接合体を製造する方法であって、式：▲数式、
   化学式、表等があります▼ 式中、ｎは２〜３０の整数であり、そしてＲはＲ′−（
   ＣＨＯＨ）＿ｍ−ＣＨ＿２− によって定義されるスペーサー断片であり、ここでｍは
   ０〜３の整数であり、そしてＲ′はＣＨＯ、ＣＯＹ、Ｃ
   Ｈ＿２Ｘ、ＣＨ＿２ＮＨ＿２またはＣＨ＿２ＳＨであり
   、Ｙはハロ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドまたはヒド
   ラジノであり、そしてＸはハロゲン、メタンスルホニル
   、トリフルオロメタンスルホニルまたはトルエンスルホ
   ニルである、 の化合物を免疫原の高分子と反応させることを特徴とす
   る前記方法。