JPH01221324A

JPH01221324A - ヒト単球−マクロファージコロニー刺激因子を有効成分とする造血器疾患治療剤

Info

Publication number: JPH01221324A
Application number: JP63046705A
Authority: JP
Inventors: Toru Masaoka; 正岡　徹
Original assignee: Green Cross Corp Japan; Morinaga Milk Industry Co Ltd; Research Development Corp of Japan
Current assignee: Japan Science and Technology Agency; Morinaga Milk Industry Co Ltd; Mitsubishi Tanabe Pharma Corp
Priority date: 1988-02-29
Filing date: 1988-02-29
Publication date: 1989-09-04
Anticipated expiration: 2009-02-09
Also published as: EP0331088A2; JPH0610137B2; EP0331088A3; CA1336679C; KR890012665A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】［産業上の利用分野］本発明は、造血器疾患治療剤に関し、さらに詳しくは造
血器疾患に対する（’！髄移植前後に本発明からなるヒ
ト単球−マクロファージコロニー刺激因子を投与し、ヒ
ト単゛球−マクロファージ系細胞及びその幹細胞に作用
して、単球−マクロファージの分化増殖を促進する造血
器疾患治療剤に関するものである。

［従来技術１コロニー刺激因子（以下Ｃ８Ｆと略記する）は、哺乳動
物の造血組織、例えば骨髄などに存在する造血幹細胞の
分化・増殖を刺激する造血因子であり、多くのＣ８Ｆは
糖蛋白質から成っている。これまで、単球−マクロファ
ージ系幹細胞に作用する因子（Ｍ　−ＣＳ　Ｆ又はＣ３
Ｆ−１）、顆粒球−単球系Ｖ？細胞に作用１因子（ＧＭ
−Ｃ８Ｆ）、顆粒球系Ｖ？矧胞に作用する因子（Ｇ−Ｃ
８Ｆ）、史に顆粒球、単球、赤血球及び巨核球に共通な
多能竹斡細胞に作用暖る因子（Ｍｕ　Ｉ　ｔ　１−Ｃ３
Ｆ。

インターロイ１ンー３又はＩＬ−３）の４棒が知られて
いる。

１）髄移植の目的は免疫適格細胞、造面ｍ胞の欠陥があ
る黒石に正常に機能する当該細胞の幹細胞（ｆ′１髄）
を移植し、機能の再構築を図ろうと４るところにある。

したがって造血組織や免疫適格細胞の原発性、二次性の
欠陥、欠損があるーｂのは勿論対象となるが、最近では
悪性腫瘍に対する免疫抑制療法に際し、損傷をう６」だ
これらの組織、細胞を再構築づることにより、より強力
な抗ＲΦ瘍効果を朋１）するという１」的に広く用いら
れている。

ｆｔ　ｆｃ［ｉ移植の対象となる疾患には原Ｑ性免疫不
全症、再生不ロ性貧面、進行性逍仏性血液ｌｌｌ胞機能
異常があることは勿論であり、造血器腫瘍である急性白
血病、慢性白血病、悪性リンパ師、形質細胞腫や進行性
固形腫瘍などもある。このように合口造血器疾患の治療
において、（１髄移植は強力な手段となっているが、移
植された骨髄の機能発揮が不」−分であるため感染症、
間質性肺炎、Ｇ　Ｖ　ＨＤ等の問題がある。

骨髄移植後にａ３けるｔ’＋　ｕ機能の発揮を［］的と
した物質としてはＨＧ　ｌ−糖蛋白質（正岡徹、特開昭
６２−３６３２６）及びＧＭ−Ｃ３Ｆ　（＾、１４゜ｔ
４ｉｅｎｈｕｉｓら、Ｊｏｕｒｎａｌ　　ｏｆ　Ｃｌ１
ｎｉｃａｌＩｎｖｅｓｔｅｏａｔｉｏｎ、　８０巻、５
７３−５７７頁、１９８７年）が報告されている。

［発明が解決しようとする問題点１ ’ＩＦ、血器疾患に対する骨髄移植療法は、血中の白血
球レベルがかなり低い状態で行われ、移植後も白血球の
低レベル状態がかなり長期間続く。この闇、患名は感染
症等の危険にさらされる。そこで、白血球のレベルを移
植後すばやく１脣させるため、白血球の産生を促進する
ことを目的として検詞を行った結果、本発明に係るヒ］
・単球−マクロファージコロニー刺激因子を骨髄移植前
後に投与することによって血中の白血球レベルの■−常
値への復帰が〒急に起こることを見出して本発明を完成
した。

即ら、本発明は、ヒト単球−マクロファージコロニー１
１ｍ因子を有効成分とする造血器疾患治療剤を提供する
ムのであり、また、有効成分であるヒ１〜甲球−マクロ
ファージコ〇ニー刺激因子が哺乳動物の単球−マク〔１
フアージ系細胞及びその幹細胞に作用して、単球−マク
ロファージの分化・増殖を刺激する造血器疾患治療剤を
提供するものである。

更に、本発明は、イｊ効°成分であるヒト単球−マクロ
ファージコロニー１ｄｌｌｙｌ因子人尿・ヒト単球−マ
クＬ］ファージコロニー刺激因子Ｈ生細胞の培養液又は
ヒ１−単球−マクロフアージコロニー刺激因子遺伝子組
換え細胞の培養液から得られる造血器疾患治療剤を提供
し、更にまた下記の理化学的性質を有する哺乳動物の単
球−マク【］ファージコロニー形成刺激因子を有効成分
とする造血器疾患治療剤を提供するものである。この因
子は本出願人の１人により既に特許出願（特願昭６２−
１７８６９７号）され、その製造方法及び理化学的性質
は同出願にｇＴ綱に記載されている。

ａ）分子式同一のサブユニットから成るホモ２量体であって、ドデ
シル硫酸ナトリウム・ポリアクリルアミドゲル電気泳動
で測定した分子量が７０゜０００〜９０．０００ダル１
〜ンであり、還元剤で解離させて生物活性を消失させた
勺ブコニッ１−についてドデシル・硫酸ナトリウムポリ
アクリルアミド電気泳動法で測定した分子間は３５゜Ｏ
ＯＯ〜４５．０００ダルトンである。

ｂ）Ｉｊ′ブユニットのアミノ酸配列ホモ２量体を構成するサブユニット蛋白質は、次に示す
２１４乃至２３８個のアミノ酸配シ１を右し、１２２番
目及び１４０番目のアスパラギンはそれぞれ７スバラギ
ン（Ａｓｎ）−ｘ−スレオニン（Ｔｈｒ）／セリン（Ｓ
　ｅ　ｒ　）で表される典型的なＮ−グリコシド結合部
位を有する。

ここでＸは任意のアミノ酸を示す。

Ｃ）等電点ポリアクリルアミドゲル等電点電気泳動法及びシュクロ
ース密度勾配等電点電気ｖＫ！ｌｌ法で測定した等電点
（ｐｌ）は３．１〜３．７である。

ｄ）糖鎖の構成単糖加水分解優ｔＳ速液体クロマトグラフィーで分析したと
ころ、同定された糖鎖の構成生詰は、マンノース、ガラ
クトース、Ｎ−ア廿チルガラクｌ−’）ミン及びＮ−ア
セデルノイラミン酸である。

ｅ）円二色性スペクトル円二色性分散８１による遠紫外部ＣＤスペクトルは波長
２０８　ｎｍ及び２２２ｎ−にそれぞれ極小ピークがあ
りα−ヘリックス構造を含んでいる。

ｔ）　熱安定性６０±０．５℃で６０分闇加熱しても生物活性ｔよ失わ
れない。

ｇ）　赤外線吸収スペクトル波数１６８０ｚ　　、１２００Ｑｌ−１、及び１１３０
ｍ　　に弾痕吸収、波数１５４０１−１、１４３０ｃＩ
Ｉ　及び１０７０ａ−’に中度吸収を示す赤外線吸収ス
ペクトラムを有する。

本発明の上記理化学的性質を有するＣ８Ｆは、Ｃ３Ｆ−
１と同様に糖鎖を含む二本のポリペプチドがジスルフィ
ド結合し、生物学的に活性なホモ２量体から構成されて
いて分子量は、７０．０００〜９０．０００ダルトンで
あり、Ｃ３Ｆ−１の分子量より大きい。更に、本発明の
Ｃ８Ｆを構成しているサブユニットのポリペプチドは、
少なくとも２１４乃至２３８個のアミノ酸から成り、分
子量２１，４００ダルトンであり、Ｃ３Ｆ−１のそれの
１４．０００〜１７．０００ダルトンよりも大きい。ま
た、ナプユニットのアミノ酸配列をＣ３Ｆ−１と比較す
ると、ＮＨ２−末端の１番から１４９番目までのアミノ
酸配列は同じであったが、１５０番から２１４乃至２３
８番目までのアミノ酸配列はＣ３Ｆ−１のｃＤＮＡから
推定されるものと、異なっており、Ｃ３Ｆ−１遺伝子−
しにコードされていなかった。従って、本発明のＣ８Ｆ
は、公知のＣ３Ｆ−１と別個な因子であることが判明し
た。また、前記公知の１−ＩＧＩ−糖蛋白質、ＧＭ−Ｃ
８Ｆとは生物学的活性及び理化学的性状が全く異なって
いる。

［発明の具体的／に説明］（１）造血各疾患治療剤の製造方法本発明の上記理化学的性質を右する造血各疾患治療剤は
、例えば次のようにしてＩＪ　ｍされる。健康人の尿を
ｐＨ８，０・〜９．０に調整し、尿中の粘性物質を沈澱
・除去し、モの上澄を分子部１０゜０００〜５０，００
０ダル１−ンを通過させる限外濾過膜を用いて濃縮と脱
塩を行う。少なくとも２００侶以上に濃縮（蛋白質温度
として１％（Ｗハ）以上）した模ｐ１１を６．５〜７．
５に調整し、６０℃で１０時間加熱処理（ウィルス等の
不活化）する。形成された沈澱物を遠心除去し、陰イオ
ン交換体、例えばＤＥＡＥ−セル０−ス等に有効成分を
吸着させる。

次に０．０５〜０．１Ｍの緩衝液（ｐＨ５，５〜７．５
）で該イオン交換体を洗浄した後０．２Ｍ〜０．４Ｍの
！１笥液（ｐＨ５，５〜７．５）で有効成分を溶出する
。該溶出液を必要ならば限外濾過膜で濃縮し、１Ｍ〜４
Ｍの塩類、例えば硫安、食塩等を含有Ｊる緩衝液（ｐＨ
６，５〜７．５）で平衡化させゲル濾過剤、例えば５ｃ
ｐｈａｃｒｙｌＯ８−３００（Ｐｈａｒｍａｃｉａネ１
製）でゲル濾過し、分子吊範凹が７０．０００〜１５０
，０００ダルトンの両分を回収する。次に該両分を上記
１Ｍ〜４ＭＪ：Ａ含有緩衝液で平衡化させた疎水性親和
体、例えばＰｈｃｎｙｌ−３ｃｐｈａｒｏｓｅ”　（Ｐ
ｈａｒ＋ｎａｃｉａ社製）に吸着させ、０．５Ｍ〜１．
０Ｍの塩含有緩衝液（０１１６，５〜７．５）で溶出す
る。該溶出液を限外濾過膜で濃縮し、高速液体ゲル濾過
カラム、例えばＴＳＫＧ−３０００８Ｗ　（東洋費達製
）でゲル濾過し、分子量範囲が７０．０００〜１５０．
０００ダルトンの両分を回収する。法両分を再度、濃縮
し、０．１％トリフルＡ口酢酸（ＴＦΔ）溶液（１）Ｉ
１１〜２）で平衡化した高速液体逆相カラム、例えばｔ
ｌ−Ｐｏｒｅ■２１４ＴＰ（パイバック社製）に吸着さ
せ、０．１％ＴＥＡを含む溶剤、例えばアセトニトリル
又はイソプロパノールの直ｓ９ｇａ勾配溶出法により溶
出する。活性画分を回収し凍結乾燥する。このようにし
て得られた本発明のＣＳ　Ｆ剤は、比活性１×１０８単
位■・蛋白質以上をイｉする純粋な物質である。次に凍
結乾燥画分に１１１球−マクロファージ刺激因子の安定
剤としての人血清アルブミン、糖類を含む″Ｗ衝液（ｐ
１１６□５〜７．５）を加え溶解調製し無菌濾過した後
、無菌的に凍結乾燥し造血各疾患治療剤を製造づる。

本発明の造血各疾患治療剤のＷＩＡ造例を参考例とし、
参り例１より得られた治療剤の生物学的活性を実施例と
して次に示す。

参考例１廿−ｉ；ｊ、、人の尿１０００ＬをｐＨ８，５に調整し
、沈澱物を濾過除去し、分画分子ｆｆ１５０．０００ダ
ルトンの限外濾過膜（アミコン社、１］１０　Ｘ　５０
　）でｍ縮と脱塩を行った。次に、濃縮液をｐＨ１７，
０に調整し、密封容器中で６０℃、１０時間加熱殺菌し
た。殺菌後、遠心分１１ｔ（５，０００ｘｇ　３０分聞
）して沈澱物を除去した後、０．０２Ｍリン酸緩衝液（
ｐＨ７，２）で平衡化したＤＥＡＥ−セルロースと混合
し、吸着させた。１）ＥＡＥ−セルロースを０．０２Ｍ
リンＭＭ衝液、０．０５Ｍ食塩添加０．０２Ｍリン酸緩
衝液（ｐＨ１７，２）で洗浄した後、０．２５Ｍ食塩添
加リンｖｉ緩衝液（ｐＨ７，２＞で溶出させた。溶出液
を限外濾過膜（アミコン社ＨＩＯＰＩＯ）で濃縮して、
５ｅｐｈａｃｒｙｌ　Ｓ　−３００（ファルマシア社、
直径２０α×高さ８０α）を用い、ＩＭｌａ安添加緩自
液（ｐＨ７，２）でゲル濾過した。ゲル濾過での分子量
範囲７０．０００〜１５０．０００ダルトンの両分をＬ
記１Ｍ硫安添加緩衝液で平衡化したＰｈｅｎｙｌ−３ｅ
ｐｈａｒｏｓｅ　　４　Ｂカラム（ファルマシア社製直
径１０×長さ２０　ｃｙｒ　）に吸着させ、次いで０．
５Ｍ硫安添加ａ衝液（ｐＨ１７，２）で溶出させた。溶
出液を限外濾過膜（アミコン社製１−１１　Ｐ　１０）
で濃縮して、ＴＳＫＧ−３０００ＳＷカラム（東洋曹″
ａ製、径２，５Ｘ６０Ｃｊ＋）で＾速液体りロマトグラ
フィーにかけ、分子量範囲７０，０００〜１５０．００
０ダルトンの両分を得た。この両分を重度濃縮し、１ｌ
ｉ−Ｐｏｒｅ　２１４　’ｒ　Ｐ　（パイダツクネ１、
径２．２×長さ２５　ｃｍ　）の逆相カラムで０．１％
トリノルオｉ〕酢酸を含む、アセトニトリルＯ−１００
％（ｐＨ２，０）の直線濃度勾配による高速液体クロマ
トグラフィにかけＣ８Ｆを溶出し、凍結乾燥し本発明の
Ｃ８Ｆ約４１１Ｉ！Ｊ＠−得た。この方法を反復して実
施し本発明のＣ３Ｆ２０ＩＩＱを得た。次に凍結乾燥画
分に本発明のＣ８Ｆの安定剤としくの入面□清アルブミ
ン、糖類を含むリン耐α１７１（ρ１１７．２）を加え
溶解調製した掛、孔拌０．２２μｍのメンブランノイル
ターを装着した濾過除菌装置（ミリボア社製）を用いて
濾過して除菌し、あらかじめ１８０℃２時間乾熱滅菌し
たガラス製バイアル瓶へ１１ＩＩずつ無菌的に分注し、
無菌的に凍結乾燥し、バイアル瓶を密封し、本発明のＣ
５Ｆを含む造血器疾忠治療剤約５００本を得た。

参考例２参化例１の方法にお＆Ｎ　テ５ｅｐｈａｃｒｙｌ　Ｓ　
−３００を丁５ＫＧ３．０ＯＯ３Ｗ（東洋四速’！Ｊ）
、Ｐｈｅｎｙｌ−３ｅｐｈａｒｏｓｅ　　　４　　Ｂ　
を　ｒ　Ｓ　　Ｋ　ｐｈｅｎｙｌ　−５Ｐ　Ｗ（東洋舎
達製）にかえて、全て＾速液体り０マドグラフイーによ
り精製した本発明のＣ８Ｆを実施例１と同様な方法で無
菌濾過、凍結乾燥し、本発明のＣ８Ｆを含む造＋ｆｈ器
疾患治療剤約５００本を得た。゛実施例１　コ［ｌニー刺激活性及び比活性本発明のＣ８
Ｆのコロニー刺激活性は、１ｎｖｉｔｒｏのマウス骨［
１胞による単層軟寒天ゲルでのコロニー形成試験法ぐ測
定した。試料を０．３％寒天、２０％牛脂児血清（Ｆｅ
２）及びマウス骨髄細胞１×１０５個を含むＨｃＣｏｙ
’ｓ　５Ａ培地１−と況合し、７．５％Ｃ０２通気下、
３７℃で７日１１１培養した。培養後、５０個以上の細
胞集塊をコロニーと判定し、形成されたコロニー数を計
測した。

コロニー刺激活性はψ位で表現し、１甲位は１コロニー
を形成させるのに必要なＣ３ＦＩｌｔと規定した。また
比活性はＣ３Ｆ蛋白質ｌａｙ当り形成されるコロニー数
（１１位）で表わした。その結果、本発明のＣ８Ｆは、
１．４×１０８単位／＃９・蛋０賀の比活性をｔｒシて
いた。形成されたコロニーをへ７トキシリン一１オラン
染色して形態学的に分類したところ、９５％以上のコロ
ニーが単球−マクロファージから形成されていた。

実施例２　　ｉｎ　ｖｉｖｏにおＧ−するマウス告髄…
球−マクロファージ系幹細胞（ＣＦＵ−Ｍ）増殖促進作
用０５７ＢＬマウス（５匹／群）に対して体重Ｉ　Ｋｙ当
り０（生理食塩液）、８０×１０４単位、１６０×１０
　単位、３２０ｘｌＯ’１１位及び６４０Ｘ１０’１１
位のコロニー刺激活性を右する本治療剤を１０１回、Ｍ
続３日間腹腔内に投与した。投与終了の翌日に、各マウ
スより大１１１（１骨髄及び牌臓を摘出し、骨髄及び牌
臓中の単球−マクロファージ系幹細胞（ＣＦＬＪ−Ｍ）
数を、１，０００単位のＣ３Ｆを刺激因子とする前記軟
寒天平板法によるコロニー形成試験で測定した。その結
果は第１表及び第２表に示すとおりであった。

第１表　マウス骨髄ＣＦＬＪ−Ｍｌ！殖促進作用０）°
は１％の危険率で有意の芹が有ることを示す。

第２表　マウス牌臓ＣＦＵ−Ｍ増幀錠進作用Ｑ１）°は
１％の危険率で有意の差が有ることを示Ｊ０第１表及び第２表に示す如く、８０Ｘ１０４単位／に９
体重の薬剤投！ｊにより、ｆ）髄及び牌臓でのＣＦ　Ｕ
　−Ｍの増加が認められ、１６０Ｘ１０４単位／　Ｋ９
９体重上の投Ｌｊでは顕著な増加が認められた。

実施例３　骨髄移植マウスに対する回復促進作用ＢＡＬ
Ｂ／ｃマウス（５匹／群）に６００Ｏを７．８Ｇｙ全身
照躬した後同系マウスの骨Ｉ８細胞をマウス当り１．０
Ｘ１０６個尾静脈より移植した。

本治療剤を６０ＣＯ照射ｌｌ７ｔ５日間マウスに対し体
重Ｉ　Ｋｇ当りＯ（生理食塩水）及び６４０Ｘ１０’単
位１日１回、腹腔内に投与した。骨髄移植後７日、１４
日、及び２１日Ｂｋマウス尾静脈より採血した末梢白血
球数を計測し、また骨髄移植後１４日及び２１日Ｂｋ各
マウスより大腿骨及び牌臓を摘出し、骨髄及び牌臓中の
単球−マクロファージ系斡細胞（ＣＦＵ−Ｍ）数を１．
０００単位のにＳＦを刺激因子とする前記軟寒天平板法
によるコロニー形成法で測定した。（の結果は第１図及
び第３表に示す。対照群はＯ単位（生理食塩水）投与群
を示す。

第３表　骨髄移植マウスの骨髄及び牌臓中のＣＦ　ｔＪ
　−Ｍ回復促進作用（１１）ＣＦＬＪ−Ｍ数は大腿骨及び稗臓当りの数を示
°は５％の危険率で有意の差が有ることを示す。

第１図及び第３表に示す如く本治療剤には骨髄移植した
マウスの白血球数及び骨髄、詩臓中の単球−ンクロファ
ージ系９？細胞（ＣＦ　Ｕ　−Ｍ　）の顕若な回復促進
作用が認められた。

実施Ｐ１４４　　低濃度骨髄移植マウスに対する死亡率
低下作用ＢＡＬＢ／Ｃ？ウス（１０匹／群）に６０ｃｏを全身照
射した優同系マウスの骨髄細胞をマウス当り２Ｘ１０’
個尾静脈より移植した。本治療剤を骨髄移植前５日間又
は骨髄移植後５日間マウスに対し体重Ｉ　Ｋｇ当り、６
４０Ｘ１０’単位１日１回腹腔内投ちした。前者を前投
与群後者を後段Ｌｊ群とし、本治療剤を投与しない群を
対照群とした。

骨髄移植後１４日間のマウス死亡率を観察した。

その結果を第２図に示す。

第２図に示す如く本治療剤を低濃度骨髄移植マウスに骨
髄移植前後投与する事によりその死亡率を著しく低下せ
しめた。

【図面の簡単な説明】

第１図は６０ＣＯ照射マウスに骨髄移植した後、本発明
の造血器疾患治療剤を投与した場合の白血球同復促進作
用を末梢自白球数を経時的にカウントすることにより示
１゜０・・・治療剤投与群・・・・対照（’Ｊ理食塩水投与群）　　　　　　・・
・・・５％の危険率で右息差のあることを示づ。第２図は、骨髄移植ｓｉｎを第１図より少なくした場合
、移植前及び後にそれぞれ本発明の造血器疾患治療剤を
投与した１１のマウスの死亡率低重作用を経時的に示す
。０・・・前投与群 Δ・・・後投与群・・・・対照群

Claims

【特許請求の範囲】

（１）ヒト単球−マクロファージコロニー刺激因子を有
効成分とする造血器疾患治療剤。
（２）ヒト単球−マクロファージコロニー刺激因子が哺
乳動物の単球−マクロファージ系細胞及びその幹細胞に
作用して、単球−マクロファージの分化・増殖を刺激す
る特許請求の範囲第１項記載の造血器疾患治療剤。
（３）ヒト単球−マクロファージコロニー刺激因子が人
尿、ヒト単球−マクロファージコロニー刺激因子産生細
胞の培養液又はヒト単球−マクロファージコロニー刺激
因子遺伝子組換え細胞の培養液から得られる特許請求の
範囲第１項又は第２項記載の造血器疾患治療剤。
（４）ヒト単球−マクロファージコロニー刺激因子が次
の理化学的性質を有するものであることを特徴とする特
許請求の範囲第１項乃至第３項いずれかに記載の造血器
疾患治療剤。ａ）分子量同一のサブユニットから成るホモ２量体であつて、ドデ
シル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動で
測定した分子量が７０，０００〜９０，０００ダルトン
であり、還元剤で解離させて生物活性を消失させたサブ
ユニットについてドデシル硫酸ナトリウムポリアクリル
アミド電気泳動法で測定した分子量は３５，０００〜４
５，０００ダルトンである。ｂ）サブユニットのアミノ酸配列ホモ２量体を構成するサブユニット蛋白質は、次に示す
２１４乃至２３８個のアミノ酸配列を有し、１２２番目
及び１４０番目のアスパラギンはそれぞれアスパラギン
（Ａｓｎ）−ｘ−スレオニン（Ｔｈｒ）／セリン（Ｓｅ
ｒ）で表される典型的なＮ−グリコシド結合部位を有す
る。ここでｘは任意のアミノ酸を示す。【遺伝子配列があります】ｃ）等電点ポリアクリルアミドゲル等電点電気泳動法及びシユクロ
ース密度勾配等電点電気泳動法で測定した等電点（ｐＩ
）は３．１〜３．７である。ｄ）糖鎖の構成単糖加水分解後高速液体クロマトグラフィーで分析したとこ
ろ、同定された糖鎖の構成単糖は、マンノース、ガラク
トース、Ｎ−アセチルガラクトサミン及びＮ−アセチル
ノイラミン酸である。ｅ）円二色性スペクトル円二色性分散計による遠紫外部ＣＤスペクトルは波長２
０８ｎｍ及び２２２ｎｍにそれぞれ極小ピークがありα
−ヘリックス構造を含んでいる。ｆ）熱安定性６０±０．５℃で６０分間加熱しても生物活性は失われ
ない。ｇ）赤外線吸収スペクトル波数１６８０ｃｍ＾−＾１、１２００ｃｍ＾−＾１、及
び１１３０ｃｍ＾−＾１に強度吸収、波数１５４０ｃｍ
＾−＾１、１４３０ｃｍ＾−＾１及び１０７０ｃｍ＾−
＾１に中度吸収を示す赤外線吸収スペクトラムを有する
。
（５）造血器疾患に対する骨髄移植療法において用いら
れることを特徴とする特許請求の範囲第１項乃至第４項
に記載の造血器疾患治療剤。