JPH01141581A - 細胞破砕装置 - Google Patents
細胞破砕装置Info
- Publication number
- JPH01141581A JPH01141581A JP29742487A JP29742487A JPH01141581A JP H01141581 A JPH01141581 A JP H01141581A JP 29742487 A JP29742487 A JP 29742487A JP 29742487 A JP29742487 A JP 29742487A JP H01141581 A JPH01141581 A JP H01141581A
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- laser beam
- cell
- cell disruption
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- Pending
Links
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Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分野］
本発明は、流体中を流れる一列の細胞にレーザービーム
を照射して細胞膜を破砕し、例えばその中へ特定の遺伝
子等を注入する細胞破砕装置に関するものである。
を照射して細胞膜を破砕し、例えばその中へ特定の遺伝
子等を注入する細胞破砕装置に関するものである。
［従来の技術］
従来、この種の装置は針により細胞表面に穴をあけて必
要な遺伝子等を注入している。また、レーザービームを
用いる場合にはマイクロスコープで拡大してレーザービ
ームを照射していた。しかし、この従来法は細胞に穴を
あけるために時間がかかるという欠点がある。
要な遺伝子等を注入している。また、レーザービームを
用いる場合にはマイクロスコープで拡大してレーザービ
ームを照射していた。しかし、この従来法は細胞に穴を
あけるために時間がかかるという欠点がある。
［発明の目的］
本発明の目的は、短時間で大量の細胞の破砕処理を可能
とした細胞破砕装置を提供することにある。
とした細胞破砕装置を提供することにある。
［発明の概要］
■一連の目的を達成するための本発明の要旨は、高速で
流れる粒子に第１のレーザービームを照射し、前記粒子
による散乱光から前記粒子の通過を検出する検出手段と
、前記粒子を破砕するための第２のレーザービームを前
記検出手段からの信号をトリガとして前記粒子に照射す
る照射手段とを有することを特徴とする細胞破砕装置で
ある。
流れる粒子に第１のレーザービームを照射し、前記粒子
による散乱光から前記粒子の通過を検出する検出手段と
、前記粒子を破砕するための第２のレーザービームを前
記検出手段からの信号をトリガとして前記粒子に照射す
る照射手段とを有することを特徴とする細胞破砕装置で
ある。
［発明の実施例］
本発明を図示の実施例に基づいて詳細に説明する。
第１図において、１はフローセルであり、その中心には
フロ一部２が形成されている。ブローセル１の側方には
第１のレーザー光源３が配置され、このレーザー光源３
とフローセル１を結ぶ光路Ｏ１には結像レンズ４が設け
られ、光路０１の延長線−Ｌのフローセルｌの反対側に
はストツバ５．１光レンズ６、バンドパスフィルタ７、
光検出器８が順次に配置されている。また、光路０１と
直交するフローセル１の側方には、集光レンズ９．ダイ
クロイックミラー１０．１１、反射ミラー１２が順次に
配置され、ダイクロイックミラー１０゜１１、反射ミラ
ー１２の各反射方向には、それぞし集光レンズ１３．１
４．１５．バンドパスフィルタ１６．１７．１８、光検
出器１９．２０．２１が配置されている。更に、光路０
１に対して斜め方向からフローセル１に第２のレーザー
光源２２が向けられ、この光路０２上に光シャッタ２３
、結像レンズ２４が配されており、光路０２のに！線上
のフローセル１の反対側にはストッパ２５が設けられて
いる。また、光検出器１９．２０．２１の出力は信号処
理部２６に接続され、この信号処理部２６の出力は光シ
ャッタ２３に接続されている。なお、第１のレーザー光
源３と第２のレーザー光源から出射されるレーザービー
ムは波長が異なるようにすることが好ましい。
フロ一部２が形成されている。ブローセル１の側方には
第１のレーザー光源３が配置され、このレーザー光源３
とフローセル１を結ぶ光路Ｏ１には結像レンズ４が設け
られ、光路０１の延長線−Ｌのフローセルｌの反対側に
はストツバ５．１光レンズ６、バンドパスフィルタ７、
光検出器８が順次に配置されている。また、光路０１と
直交するフローセル１の側方には、集光レンズ９．ダイ
クロイックミラー１０．１１、反射ミラー１２が順次に
配置され、ダイクロイックミラー１０゜１１、反射ミラ
ー１２の各反射方向には、それぞし集光レンズ１３．１
４．１５．バンドパスフィルタ１６．１７．１８、光検
出器１９．２０．２１が配置されている。更に、光路０
１に対して斜め方向からフローセル１に第２のレーザー
光源２２が向けられ、この光路０２上に光シャッタ２３
、結像レンズ２４が配されており、光路０２のに！線上
のフローセル１の反対側にはストッパ２５が設けられて
いる。また、光検出器１９．２０．２１の出力は信号処
理部２６に接続され、この信号処理部２６の出力は光シ
ャッタ２３に接続されている。なお、第１のレーザー光
源３と第２のレーザー光源から出射されるレーザービー
ムは波長が異なるようにすることが好ましい。
第１のレーザー光源３からのレーザービームは結像レン
ズ４でフローセル１の中心に集光される。このフローセ
ルｌのフロ一部２をシース液に包まれたサンプル液と共
に流れる粒子の前方散乱光は、集光レンズ６、バンドパ
スフィルタ７を経て光検出器８へ入射し光信号に変換さ
れる。バンドパスフィルタ７は粒子を破砕するための第
２のレーザー光源２２からの光が光検出器８へと入射し
ないためのものである。また、粒子からの側方散乱光は
集光レンズ９を介してダイクロイックミラー１０の方向
へ導かれる。この側方散乱光は集光レンズ１３を通り、
ダイクロイックミラー１１．１２、反射ミラー１３によ
り選択され、バンドパスフィルタ１６．１７．１８によ
りそれぞれ選択された光のうち光検出器１９に入射した
光信号から側方散乱光が測定される。また、光検出器２
０に入射した光信号から第１の蛍光成分、光検出器２１
に入射した光信号から第２の蛍光成分が測定される。光
検出器１９〜２１の出力信号は信号処理部２６に入力し
、信号処理部２６からの出力は第２のレーザー光源２２
から出射されるレーザービームの制御を行う、即ち、光
シャッタ２３をオン・オフして、必要に応じてレーザー
ビームをフロ一部２の中を流れる粒子に照射する。
ズ４でフローセル１の中心に集光される。このフローセ
ルｌのフロ一部２をシース液に包まれたサンプル液と共
に流れる粒子の前方散乱光は、集光レンズ６、バンドパ
スフィルタ７を経て光検出器８へ入射し光信号に変換さ
れる。バンドパスフィルタ７は粒子を破砕するための第
２のレーザー光源２２からの光が光検出器８へと入射し
ないためのものである。また、粒子からの側方散乱光は
集光レンズ９を介してダイクロイックミラー１０の方向
へ導かれる。この側方散乱光は集光レンズ１３を通り、
ダイクロイックミラー１１．１２、反射ミラー１３によ
り選択され、バンドパスフィルタ１６．１７．１８によ
りそれぞれ選択された光のうち光検出器１９に入射した
光信号から側方散乱光が測定される。また、光検出器２
０に入射した光信号から第１の蛍光成分、光検出器２１
に入射した光信号から第２の蛍光成分が測定される。光
検出器１９〜２１の出力信号は信号処理部２６に入力し
、信号処理部２６からの出力は第２のレーザー光源２２
から出射されるレーザービームの制御を行う、即ち、光
シャッタ２３をオン・オフして、必要に応じてレーザー
ビームをフロ一部２の中を流れる粒子に照射する。
粒子がリンパ球である場合に成る特定のリンパ球のみを
破砕するには、このリンパ球にのみ特異的に反応する蛍
光標識されたモノクロナール抗体と反応させる０例えば
、第２の蛍光成分の光検出器２０からの信号と、前方散
乱光用の光検出器８の両者の信号が出力されたとき、即
ち前方散乱光により粒子が通過したということの確認、
かつ特定のモノクロナール抗体と抗原抗体反応したとい
う確認の後で、第２図に示すように成る時間内に距敲夕
だけリンパ球Ｂが進んだ時点で、光シャッタ２３を制御
して第２のレーザー光源２２のレーザービームをりンバ
球Ｂに照射する。このレーザービームによりリンパ球Ｂ
は破砕され、シース液中に特定の移入物質を入れておけ
ばリンパ球Ｂ内に物質の移入が行われる。この距［に対
応する時間の差は、予めフロ一部２を流れる粒子の速度
が判れば容易に調整が可能である。
破砕するには、このリンパ球にのみ特異的に反応する蛍
光標識されたモノクロナール抗体と反応させる０例えば
、第２の蛍光成分の光検出器２０からの信号と、前方散
乱光用の光検出器８の両者の信号が出力されたとき、即
ち前方散乱光により粒子が通過したということの確認、
かつ特定のモノクロナール抗体と抗原抗体反応したとい
う確認の後で、第２図に示すように成る時間内に距敲夕
だけリンパ球Ｂが進んだ時点で、光シャッタ２３を制御
して第２のレーザー光源２２のレーザービームをりンバ
球Ｂに照射する。このレーザービームによりリンパ球Ｂ
は破砕され、シース液中に特定の移入物質を入れておけ
ばリンパ球Ｂ内に物質の移入が行われる。この距［に対
応する時間の差は、予めフロ一部２を流れる粒子の速度
が判れば容易に調整が可能である。
他の方法としては、光検出器工９で得られる側方散乱信
号と光検出器８で得られる前方散乱信号の両方の成る領
域内のものと蛍光信号とな、破砕のためのパラメータと
して選択することが可能である。また、他の応用として
直接人体の血液を抽出し、ト述した方法で細胞に何らか
の標識をし、その細胞のみを把えてレーザービームで焼
殺することも可能であり、治療機として使用することも
できる。
号と光検出器８で得られる前方散乱信号の両方の成る領
域内のものと蛍光信号とな、破砕のためのパラメータと
して選択することが可能である。また、他の応用として
直接人体の血液を抽出し、ト述した方法で細胞に何らか
の標識をし、その細胞のみを把えてレーザービームで焼
殺することも可能であり、治療機として使用することも
できる。
［発明の効果］
以上説明したように本発明に係る細胞破砕装置は、フロ
ーサイトメータと他の光源を用いて細胞表面を破砕して
大量の細胞の処理を短時間で実施できる。また、細胞の
パラメータとして前方散乱で粒子の大きさ、側方散乱で
顆粒性、蛍光で表面抗原を検出するようにすれば、これ
らから細胞を分類して処理することも可能となる。
ーサイトメータと他の光源を用いて細胞表面を破砕して
大量の細胞の処理を短時間で実施できる。また、細胞の
パラメータとして前方散乱で粒子の大きさ、側方散乱で
顆粒性、蛍光で表面抗原を検出するようにすれば、これ
らから細胞を分類して処理することも可能となる。
図面は本発明に係る細胞破砕装置の一実施例を示し、第
１図はその構成図、第２図はフローセル部の拡大図であ
る。 符号１はフローセル、２はフロ一部、３．２２はレーザ
ー光源、４，２４は結像レンズ、５．２５はストッパ、
６．１３，１４．１５は集光レンズ、７．１６．１７．
１８はバンドパスフィルタ、８，１９．２０．２１は光
検出器、９は集光レンズ、１０．１１はグイクロイック
ミラー。 １２は反射ミラー、２３は光シャッタ、２６は信号処理
部である。 特許出願人 キャノン株式会社
１図はその構成図、第２図はフローセル部の拡大図であ
る。 符号１はフローセル、２はフロ一部、３．２２はレーザ
ー光源、４，２４は結像レンズ、５．２５はストッパ、
６．１３，１４．１５は集光レンズ、７．１６．１７．
１８はバンドパスフィルタ、８，１９．２０．２１は光
検出器、９は集光レンズ、１０．１１はグイクロイック
ミラー。 １２は反射ミラー、２３は光シャッタ、２６は信号処理
部である。 特許出願人 キャノン株式会社
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、高速で流れる粒子に第１のレーザービームを照射し
、前記粒子による散乱光から前記粒子の通過を検出する
検出手段と、前記粒子を破砕するための第２のレーザー
ビームを前記検出手段からの信号をトリガとして前記粒
子に照射する照射手段とを有することを特徴とする細胞
破砕装置。 ２、前記検出手段で検出する散乱光は前方散乱光とした
特許請求の範囲第１項に記載の細胞破砕装置。 ３、前記粒子は蛍光標識された検体とし、前記検出手段
は該検体からの蛍光を検出するようにした特許請求の範
囲第１項に記載の細胞破砕装置。 ４、前記第１のレーザービームと第２のレーザービーム
は一定の時間間隔で前記粒子に照射するようにした特許
請求の範囲第１項に記載の細胞破砕装置。 ５、前記粒子はシースフロー方式でサンプル液と共にフ
ローセル中を流し、該サンプル液を包むシース液中に前
記粒子内へ注入する物質を含むようにした特許請求の範
囲第１項に記載の細胞破砕装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29742487A JPH01141581A (ja) | 1987-11-27 | 1987-11-27 | 細胞破砕装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29742487A JPH01141581A (ja) | 1987-11-27 | 1987-11-27 | 細胞破砕装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01141581A true JPH01141581A (ja) | 1989-06-02 |
Family
ID=17846331
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP29742487A Pending JPH01141581A (ja) | 1987-11-27 | 1987-11-27 | 細胞破砕装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH01141581A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002315682A (ja) * | 2001-04-19 | 2002-10-29 | Toto Ltd | 手洗装置 |
| JP2008263990A (ja) * | 2000-10-24 | 2008-11-06 | Oncosis Llc | 三次元の検体内の細胞を選択的に標的化する方法およびデバイス |
| US8559922B2 (en) | 2005-07-14 | 2013-10-15 | Thomson Licensing | System and method for receiving user-specific information over digital radio |
-
1987
- 1987-11-27 JP JP29742487A patent/JPH01141581A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008263990A (ja) * | 2000-10-24 | 2008-11-06 | Oncosis Llc | 三次元の検体内の細胞を選択的に標的化する方法およびデバイス |
| JP2002315682A (ja) * | 2001-04-19 | 2002-10-29 | Toto Ltd | 手洗装置 |
| US8559922B2 (en) | 2005-07-14 | 2013-10-15 | Thomson Licensing | System and method for receiving user-specific information over digital radio |
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