CN113670800B - 样本分析仪及样本分析方法 - Google Patents

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Abstract

本申请实施例公开一种样本分析方法和一种样本分析仪，将待测样本与处理试剂混合反应得到待测试样液；使待测试样液中的粒子逐个通过光学检测系统的检测区并用具有第一波长的光和具有短于第一波长的第二波长的光照射通过检测区的粒子；获取待测试样液中的粒子经具有第一波长的光照射后产生的第一光学信息和经具有第二波长的光照射后产生的第二光学信息；根据第一光学信息和第二光学信息中的至少一种散射光强度信息以及第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞；根据第一光学信息和第二光学信息中的至少一种另外的光强度信息以及第二光学信息中的散射光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。

Description

样本分析仪及样本分析方法
技术领域
本申请涉及医疗检测领域，尤其是体外诊断领域，涉及但不限于一种样本分析仪及样本分析方法。
背景技术
流式细胞分析仪作为一种对体液(例如血液、尿液、脑脊液等)中的血细胞进行自动检测分析(例如白细胞五分类、有核红细胞识别和网织红细胞识别)的医学检测仪器，目前在医院临床检验中得到的了非常广泛的应用，是一种成熟且性能优异的检测仪器。目前，常用的流式细胞分析仪采用的光源主要为红色激光光源。对体液中病原体进行检测时，也可以采用流式细胞术。对于采用红色激光作为光源的血细胞分析仪而言，最小检测粒子为血小板，其平均直径约为2.7微米(μm)，最小直径约大于1μm。然而，病原体的直径通常在1μm以下，导致现有采用红色激光光源的流式细胞分析仪无法识别出病原体。
为了实现采用流式细胞分析仪检测出直径较小的粒子，例如病原体等，一些流式细胞分析仪厂商开发出了以短波长激光例如紫光或紫外光为光源的流式细胞分析仪。但是，在采用具有短波长光源的流式细胞分析对血细胞进行检测时，一方面，由于短波长光源对对微小粒子具有强大的放大作用，在血细胞检测时由于红细胞溶解而产生的碎片的信号被放大，干扰了血细胞检测；另一方面，短波长光源难以激发目前用于对血细胞进行染色的荧光染料。
因此，目前难以通过现有的细胞分析仪实现在同一检测通道中检测血细胞和病原体。
发明内容
有鉴于此，本申请实施例期望提供一种样本分析仪及样本分析方法，实现了在同一检测通道中对血细胞和病原体的同时检测，提高了流式细胞分析仪的筛查能力。
本申请第一方面提供一种样本分析仪，所述样本分析仪包括：
采样部，用于获取待测样本，并将所述待测样本输送到反应部；
试剂供应部，用于贮存试剂并根据需要将所述试剂供应到所述反应部；其中，所述试剂至少包括用于处理所述待测样本中红细胞或红细胞的细胞膜的溶血剂、用于对所述待测样本中的待检测细胞进行染色的第一荧光染料和用于对所述待测样本中的待检测病原体进行染色的第二荧光染料；
反应部，包括混合室，用于供所述待测样本与所述试剂混合反应以形成待测试样液；
光学检测系统，包括第一光源、第二光源、流动室、第一散射光检测器、第二散射光检测器、第一荧光检测器和第二荧光检测器，所述待测试样液中的粒子可在所述流动室内流动，所述第一光源用于对在所述流动室中流动的粒子照射具有第一波长的光，以便所述粒子产生第一光学信息，所述第二光源用于对在所述流动室中流动的粒子照射具有短于所述第一波长的第二波长的光，以便所述粒子产生第二光学信息，所述第一散射光检测器用于收集所述第一光学信息中的第一散射光强度信息，所述第二散射光检测器用于收集所述第二光学信息中的第二散射光强度信息，所述第一荧光检测器用于收集所述第一光学信息中的第一荧光强度信息，所述第二荧光检测器用于收集所述第二光学信息中的第二荧光强度信息；
输送装置，用于将所述反应部中经所述试剂处理后的待测试样液输送到所述光学检测系统的流动室中；
处理器，配置用于从所述光学检测系统中获取所述第一散射光强度信息、所述第二散射光强度信息、所述第一荧光强度信息和所述第二荧光强度信息；根据所述第一散射光强度信息和所述第二散射光强度信息中的至少一个以及所述第一荧光强度信息，分析所述待测试样液中的待检测细胞；根据所述第一散射光强度信息、所述第一荧光强度信息和所述第二荧光强度信息中的至少一个以及所述第二散射光强度信息，识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
本申请第二方面还提供了一种样本分析仪，所述样本分析仪包括：
采样部，用于获取待测样本，并将所述待测样本输送到反应部；
试剂供应部，用于贮存试剂并根据需要将所述试剂供应到所述反应部；其中，所述试剂至少包括用于处理所述待测样本中红细胞或红细胞的细胞膜的溶血剂和用于对所述待测样本中的待检测细胞进行染色的荧光染料；
反应部，包括混合室，用于供所述待测样本与所述试剂混合反应以形成待测试样液；
光学检测系统，包括第一光源、第二光源、流动室、第一散射光检测器、第二散射光检测器和荧光检测器，所述待测试样液中的粒子可在所述流动室内流动，所述第一光源用于对在所述流动室中流动的粒子照射具有第一波长的光，以便所述粒子产生第一光学信息，所述第二光源用于对在所述流动室中流动的粒子照射具有短于所述第一波长的第二波长的光，以便所述粒子产生第二光学信息，所述第一散射光检测器用于收集所述第一光学信息中的第一散射光强度信息，所述第二散射光检测器用于收集所述第二光学信息中的第二散射光强度信息，所述荧光检测器用于收集所述第一光学信息中的第一荧光强度信息；
输送装置，用于将所述反应部中经所述试剂处理后的待测试样液输送到所述光学检测系统的流动室中；
处理器，配置用于从所述光学检测系统中获取所述第一散射光强度信息、所述第二散射光强度信息和所述第一荧光强度信息；根据所述第一散射光强度信息和所述第二散射光强度信息中的至少一个以及所述第一荧光强度信息，分析所述待测试样液中的待检测细胞；根据至少所述第二散射光强度信息，识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
本申请实施例第三方面还提供了一种样本分析方法，所述方法包括：
将待测样本与试剂进行混合，反应得到待测试样液；其中，所述试剂至少包括用于处理所述待测样本中红细胞或红细胞的细胞膜的溶血剂、用于对所述待测样本中的细胞进行染色的第一荧光染料和用于对所述待测样本中的待检测病原体进行染色的第二荧光染料；
使所述待测试样液中的粒子逐个通过光学检测系统的检测区并且用具有第一波长的光和具有短于所述第一波长的第二波长的光照射通过所述检测区的粒子；
获取所述待测试样液中的粒子经具有第一波长的光照射后产生的第一光学信息和所述待测试样液中的粒子经具有第二波长的光照射后产生的第二光学信息；
根据所述第一光学信息和所述第二光学信息中的至少一种散射光强度信息以及所述第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析所述待测试样液中的待检测细胞；
根据所述第一光学信息和所述第二光学信息中的至少一种另外的光强度信息以及所述第二光学信息中的散射光强度信息，识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
本申请实施例第四方面还提供了一种样本分析方法，所述方法包括：
将待测样本与试剂进行混合，反应得到待测试样液；其中，所述试剂至少包括用于处理所述待测样本中红细胞或红细胞的细胞膜的溶血剂和用于对所述待测样本中的待检测细胞进行染色的荧光染料；
使所述待测试样液中的粒子逐个通过光学检测系统的检测区并且用具有第一波长的光和具有短于所述第一波长的第二波长的光照射通过所述检测区的粒子；
获取所述待测试样液中的粒子经具有第一波长的光照射后产生的第一光学信息和所述待测试样液中的粒子经具有第二波长的光照射后产生的第二光学信息；
根据所述第一光学信息和所述第二光学信息中的至少一种散射光强度信息以及所述第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析所述待测试样液中的待检测细胞；
根据至少所述第二散射光强度信息，识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
本申请实施例所提供的样本分析仪及样本分析方法，通过将待测样本与试剂进行混合，反应得到待测试样液后，使待测试样液中的粒子逐个通过光学检测系统的检测区并且采用两种具有不同波长的光同时照射通过检测区的粒子，收集粒子经过两种不同波长的光照射后产生的第一光学信息和第二光学信息，根据第一光学信息中的各光强度信息和/或第二光学信息中的各光强度信息的不同组合来分析待测试样液中的待检测细胞以及识别待测试样液中是否存在待检测病原体。或者说，通过采用两种具有不同波长的光同时照射同一份待测样试样液，获得待测样试样液经不同波长的光照射后产生的不同光信息，据此实现对血细胞和病原体的同时检测。由此，解决了目前不能通过同一份待测样试样液同时检测样本中的血细胞和病原体的问题，提高了流式样本分析仪的筛查能力，能够在病人感染病原体的早期发现血液异常，为后续的监控和治疗争取宝贵的时间。
附图说明
图1为本申请实施例提供的一种样本分析仪的结构示意图；
图2为本申请实施例提供的一种光学检测系统的结构示意图；
图3为本申请实施例提供的一种光学检测系统的光源的结构示意图；
图4为本申请实施例提供的具有第一前向散射光检测器的前向散射光收集装置的结构示意图；
图5为本申请实施例提供的具有第二前向散射光检测器的前向散射光收集装置的结构示意图；
图6为本申请实施例提供的具有第一前向散射光检测器和第二前向散射光检测器的前向散射光收集装置的结构示意图；
图7为本申请实施例提供的具有两个荧光检测器的荧光收集装置的结构示意图；
图8为本申请实施例提供的一种样本分析方法的流程示意图；
图9为本申请实施例提供的用于分析白细胞的侧向散射光强度-荧光强度二维散点图；
图10为本申请实施例提供的用于识别检测病原体的前向散射光强度-荧光强度二维散点图；
图11为本申请实施例提供的又一种样本分析方法的流程示意图；
图12为本申请实施例提供的一种样本分析装置的结构示意图。
具体实施方式
为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本申请实施方式中的附图，对本申请实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施方式仅仅是本申请的一部分实施方式，而不是全部的实施方式。基于本申请中的实施方式，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本申请保护的范围。
在整个说明书中，除非另有特别说明，本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此，除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在矛盾，本说明书优先。
需要说明的是，在本申请实施例中，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的方法或者装置不仅包括所明确记载的要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为实施方法或者装置所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括该要素的方法或者装置中还存在另外的相关要素(例如方法中的步骤或者装置中的单元，这里的单元可以是部分电路、部分处理器、部分程序或软件等等)。
需要说明的是，本申请实施例所涉及的术语“第一\第二\第三”仅仅是区别类似的对象，不代表针对对象的特定排序，可以理解地，“第一\第二\第三”在允许的情况下可以互换特定的顺序或先后次序。应该理解“第一\第二\第三”区分的对象在适当情况下可以互换，以使这里描述的本申请的实施例能够以除了在这里图示或描述的那些以外的顺序实施。
本申请第一方面提供了一种样本分析仪100、尤其是血液样本分析仪。参照图1所示，该样本分析仪100包括采样部110、样本制备装置120、光学检测系统130、输送装置(未示出)和处理器150。
采样部110用于获取待测样本并将待测样本输送到样本制备装置120。在一实施例中，采样部110可以具有带吸移管嘴的吸移管(例如采样针)并且具有驱动部，该驱动部用于驱动所述吸移管通过所述吸移管嘴定量吸取待测样本，例如采样针在驱动部的驱动下移到样本容器中吸取待测样本。
样本制备装置120具有反应部和试剂供应部(未示出)。反应部用于接收由采样部110吸取的待测样本。试剂供应部用于贮存试剂并根据需要将试剂供应到反应部，从而由采样部110所吸取的待测样本与由试剂供应部提供的处理试剂在反应部的混合室中混合反应，以制备成待测试样液。其中，处理试剂可以包括用于处理待测样本中红细胞或红细胞的细胞膜的溶血剂和用于对待测样本中的待检测细胞进行染色的第一荧光染料以及用于对待测样本中的待检测病原体进行染色的第二荧光染料。
光学检测系统130包括第一光源、第二光源、流动室、第一散射光检测器、第二散射光检测器、第一荧光检测器和第二荧光检测器，待测试样液中的粒子可在流动室内流动，第一光源用于对在流动室中流动的粒子照射具有第一波长的光，以便粒子产生第一光学信息，第二光源用于对在流动室中流动的粒子照射具有短于第一波长的第二波长的光，以便粒子产生第二光学信息。也就是说，第一光源和第二光源同时照射在流动室中流动的粒子，以便所述粒子产生第一光学信息和第二光学信息。第一散射光检测器用于收集第一光学信息中的第一散射光强度信息，第二散射光检测器用于收集第二光学信息中的第二散射光强度信息，第一荧光检测器用于收集第一光学信息中的第一荧光强度信息，第二荧光检测器用于收集第二光学信息中的第二荧光强度信息。
输送装置用于将反应部中经试剂处理后的待测试样液输送到光学检测系统的流动室中。输送装置例如可以包括输送液体的管路和驱动液体在管路中流动的动力源。
处理器150配置用于：从光学检测系统130中获取第一散射光强度信息、第二散射光强度信息、第一荧光强度信息和第二荧光强度信息；根据第一散射光强度信息和第二散射光强度信息中的至少一个以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞；根据第一散射光强度信息、第一荧光强度信息和第二荧光强度信息中的至少一个以及第二散射光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。例如，待检测细胞可以为白细胞或红细胞或血小板或网织红细胞，待测病原体可以为寄生虫。
因此，通过将待测样本与试剂进行混合，反应得到待测试样液后，使待测试样液中的粒子逐个通过光学检测系统的检测区并且采用两种具有不同波长的光同时照射通过检测区的粒子，收集粒子经过两种不同波长的光照射后产生的第一光学信息和第二光学信息，根据第一光学信息中的各光强度信息和/或第二光学信息中的各光强度信息的不同组合来分析待测试样液中的待检测细胞以及识别待测试样液中是否存在待检测病原体，实现对血细胞和病原体的同时检测，解决了目前不能通过同一份待测样试样液同时检测样本中的血细胞和病原体的问题，无需耗费额外的血液样本来检测病原体，提高了流式样本分析仪的筛查能力。
在一些实施例中，样本分析仪100还包括显示装置140，用于显示检测结果。例如，显示装置140构造为用户界面。
在一些实施例中，样本分析仪100还包括第一机壳160和第二机壳170。光学检测系统130和处理器150设置在第二机壳170的内部，分别设置在第二机壳170两侧。样本制备装置120设置在第一机壳160的内部。显示装置140设置在第一机壳160的外表面。
在一些实施例中，样本分析仪100还可以包括与光学检测系统130电连接的光电转换器(未示出)，该光电转换器用于将由光学检测系统130捕获到的光信号转换成电脉冲信号，以便分析。
在本申请其他实施例中，第二散射光检测器包括用于收集第二光学信息中的第二前向散射光强度信息的第二前向散射光检测器。相应地，处理器具体配置用于通过以下步骤来实现识别待测试样液中是否存在待检测病原体：根据第一散射光强度信息、第一荧光强度信息和第二荧光强度信息中的至少一个以及第二前向散射光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。第二前向散射光强度信息有利于病原体识别。优选地，处理器具体配置用于通过以下步骤来实现识别待测试样液中是否存在待检测病原体：根据至少第二荧光强度信息以及第二前向散射光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。由此能够更好地识别出病原体。
进一步地，第二散射光检测器除了第二前向散射光检测器之外还包括用于收集第二光学信息中的第二侧向散射光强度信息的第二侧向散射光检测器。相应地，处理器具体配置用于通过以下步骤来实现识别待测试样液中是否存在待检测病原体：根据第二前向散射光强度信息、第二侧向散射光强度信息和第二荧光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。
在本申请其他实施例中，第一散射光检测器包括用于收集第一光学信息中的第一前向散射光强度信息的第一前向散射光检测器和用于收集第一光学信息中的第一侧向散射光强度信息的第一侧向散射光检测器中的至少一个。相应地，处理器具体配置用于通过以下步骤来实现分析待测试样液中的待检测细胞：根据第一前向散射光强度信息和第一侧向散射光强度信息中的至少一个以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。在一实施例中，第一散射光检测器包括用于收集第一光学信息中的第一侧向散射光强度信息的第一侧向散射光检测器，处理器相应配置用于根据第一侧向散射光强度信息以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。在另一实施例中，第一散射光检测器包括用于收集第一光学信息中的第一前向散射光强度信息的第一前向散射光检测器和用于收集第一光学信息中的第一侧向散射光强度信息的第一侧向散射光检测器，处理器相应配置用于根据第一前向散射光强度信息、第一侧向散射光强度信息以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。
在本申请其他实施例中，第二散射光检测器包括用于收集第二光学信息中的第二侧向散射光强度信息的第二侧向散射光检测器。相应地，处理器具体配置用于通过以下步骤来实现分析待测试样液中的待检测细胞：根据第二侧向散射光强度信息以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。
在本申请其他实施例中，待检测细胞可以为白细胞，处理器可以具体配置用于实现以下步骤：根据第一散射光强度信息和第二散射光强度信息中的至少一个以及第一荧光强度信息，将待测试样液中的待检测细胞至少分类为单核细胞亚群、淋巴细胞亚群、中性粒细胞亚群、嗜酸性粒细胞亚群，可选地识别待测试样液中是否存在幼稚粒细胞。优选地，处理器具体配置用于根据第一侧向散射光强度信息以及第一荧光强度信息(可选地还根据第一前向散射光强度信息)，将待测试样液中的待检测细胞至少分类为单核细胞亚群、淋巴细胞亚群、中性粒细胞亚群、嗜酸性粒细胞亚群。此时，溶血剂为用于裂解红细胞的试剂，第一荧光染料为能够对白细胞染色的染液，例如市场上售卖的迈瑞血球仪中的DIFF通道染液。也就是说，本申请实施例通过双光源和双染料的设计能够实现在现有的DIFF通道中实现白细胞分类和病原体识别，不需要为病原体检测开通新的检测通道，即无需耗费额外的血液样本。
在本申请其他实施例中，处理器可以具体配置用于根据所述第一散射光强度信息和所述第二散射光强度信息中的至少一个以及所述第一荧光强度信息，识别所述待测试样液中的白细胞或嗜碱性粒细胞，可选地识别所述待测试样液中是否存在有核红细胞。此时，溶血剂为用于裂解红细胞的试剂，第一荧光染料为能够对有核红细胞染色的染液，例如市场上售卖的迈瑞血球仪中的WNB通道染液。也就是说，本申请实施例通过双光源和双染料的设计能够实现在现有的WNB通道中实现白细胞计数/嗜碱性粒细胞识别/有核红细胞识别以及病原体识别，不需要为病原体检测开通新的检测通道。
在本申请其他实施例中，处理器可以具体配置用于根据所述第一散射光强度信息和所述第二散射光强度信息中的至少一个以及所述第一荧光强度信息，识别所述待测试样液中的网织红细胞、血小板和成熟红细胞中的至少一种。此时，溶血剂为用于轻度破坏红细胞的细胞膜并维持红细胞的形态的试剂，用于促进染料对红细胞的染色。第一荧光染料为能够对红细胞和/或血小板染色的染液。
在本申请其他实施例中，处理器配置用于在识别待测试样液中是否存在待检测病原体时执行以下步骤：根据第一散射光强度信息、第一荧光强度信息和第二荧光强度信息中的至少一个以及第二散射光强度信息，统计待检测病原体的数量，当该数量大于预设阈值时，待测试样液中存在待测病原体。
在本申请其他实施例中，处理器配置用于在分析待测试样液中的待检测细胞时，根据第一散射光强度信息和第二散射光强度信息中的至少一个以及第一荧光强度信息生成第一散点图，根据第一散点图分析待测试样液中的待检测细胞；以及
处理器配置用于在识别待测试样液中是否存在待检测病原体时，根据第一散射光强度信息、第一荧光强度信息和第二荧光强度信息中的至少一个以及第二散射光强度信息生成第二散点图，根据第二散点图识别待测试样液中是否存在待检测病原体。
在本申请其他实施例中，处理器还配置用于执行以下步骤：在识别出待测试样液中存在待检测病原体时，输出报警提示。
在本申请其他实施例中，第一波长大于600nm，第二波长小于等于600nm。优选地，第一光源配置用于发射红光，第二光源配置用于发射绿光或蓝光。例如第一波长为635nm，第二波长为375nm、405nm、450nm、488nm或520nm。
本申请第二方面还提供了一种样本分析仪，该样本分析仪包括：采样部、试剂供应部、反应部、光学检测系统、输送装置和处理器；其中：
采样部，用于获取待测样本，并将待测样本输送到反应部；
试剂供应部，用于贮存试剂并根据需要将试剂供应到反应部；其中，试剂至少包括用于处理待测样本中红细胞或红细胞的细胞膜的溶血剂和用于对待测样本中的细胞进行染色的第一荧光染料；
反应部，包括混合室，用于供待测样本与试剂混合反应以形成待测试样液；
光学检测系统，包括第一光源、第二光源、流动室、第一散射光检测器、第二散射光检测器和荧光检测器(第一荧光检测器)，待测试样液中的粒子可在流动室内流动，第一光源用于对在流动室中流动的粒子照射具有第一波长的光，以便粒子产生第一光学信息，第二光源用于对在流动室中流动的粒子照射具有短于第一波长的第二波长的光，以便粒子产生第二光学信息，第一散射光检测器用于收集第一光学信息中的第一散射光强度信息，第二散射光检测器用于收集第二光学信息中的第二散射光强度信息，荧光检测器用于收集第一光学信息中的第一荧光强度信息；
输送装置，用于将反应部中经试剂处理后的待测试样液输送到光学检测系统的流动室中；
处理器，配置用于从光学检测系统中获取第一散射光强度信息、第二散射光强度信息和第一荧光强度信息；根据第一散射光强度信息和第二散射光强度信息中的至少一个以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞；根据至少第二散射光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。
由此能够实现对血细胞和病原体的同时检测，解决了目前不能通过同一份待测样试样液同时检测样本中的血细胞和病原体的问题，提高了流式样本分析仪的筛查能力。
在本申请其他实施例中，第二散射光检测器包括用于收集第二光学信息中的第二前向散射光强度信息的第二前向散射光检测器和用于收集第二光学信息中的第二侧向散射光强度信息的第二侧向散射光检测器。相应地，处理器具体配置用于通过以下步骤来实现识别待测试样液中是否存在待检测病原体时：根据第二前向散射光强度信息和第二侧向散射光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。
在本申请其他实施例中，第一散射光检测器包括用于收集第一光学信息中的第一前向散射光强度信息的第一前向散射光检测器和用于收集第一光学信息中的第一侧向散射光强度信息的第一侧向散射光检测器中的至少一个。相应地，处理器具体配置用于通过以下步骤来实现分析待测试样液中的待检测细胞：根据第一前向散射光强度信息和第一侧向散射光强度信息中的至少一个以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。在一实施例中，第一散射光检测器包括用于收集第一光学信息中的第一侧向散射光强度信息的第一侧向散射光检测器，处理器相应配置用于根据第一侧向散射光强度信息以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。在另一实施例中，第一散射光检测器包括用于收集第一光学信息中的第一前向散射光强度信息的第一前向散射光检测器和用于收集第一光学信息中的第一侧向散射光强度信息的第一侧向散射光检测器，处理器相应配置用于根据第一前向散射光强度信息、第一侧向散射光强度信息以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。
在本申请其他实施例中，第二散射光检测器包括用于收集第二光学信息中的第二侧向散射光强度信息的第二侧向散射光检测器。相应地，处理器具体配置用于通过以下步骤来实现分析待测试样液中的待检测细胞：根据第二侧向散射光强度信息以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。
在本申请其他实施例中，处理器还配置用于执行以下步骤：在识别出待测试样液中存在待检测病原体时，输出报警提示。
在本申请其他实施例中，第一波长大于600nm，第二波长小于等于600nm。
在本申请其他实施例中，第一波长为635nm；和/或，第二波长为375nm、405nm、450nm、488nm或520nm。
本申请第二方面提供的样本分析仪的其他实施例可参见本申请第一方面提供的样本分析仪的各个实施例的描述，在此不再赘述。
下面结合图2至图7详细描述本申请实施例提供的光学检测系统，该光学检测系统可用于本申请第一方面和第二方面提供的样本分析仪。
在一实施例中，如图2所示，光学检测系统包括第一光源A、第二光源B、光路合束器C、流动室D、用于收集前向散射光的前向散射光收集装置E、第一分光器F、用于收集侧向散射光的侧向散射光收集装置G和用于收集荧光的荧光收集装置H。
第一光源A可以构造为能够发射具有第一波长的第一激光束的第一激光器，第二光源B可以构造为能够发射具有不同于第一波长的第二波长的第二激光束的第二激光器，第一激光器发射的第一激光束和第二激光器发射的第二激光束经光路合束器C进行光路耦合，从而将两路光路耦合为一路光路，得到目标激光束，对在流动室D中流动的粒子进行照射，以便粒子产生第一光学信息和第二光学信息。
示例性的，如图3所示，第一光源A发出的第一光束经过第一前光处理组件I1处理后入射到光路合束器C上并透射经过光路合束器C，第二光源B发出的第二光束经过第二前光处理组件I2处理后入射到光路合束器C上并被光路合束器C反射，从而实现将第一光束和第二光束进行光路耦合得到目标激光束并在粒子的流动方向上聚焦在流动室D的中心，照射在流动室D中流动的粒子。在此，第一前光处理组件I1和第二前光处理组件I2例如可以分别包括聚焦透镜以及可选地包括光束准直透镜。
在目标激光束的传播方向上，前向散射光收集装置E可以与流动室D布置在一条直线上并且前向散射光收集装置E布置在流动室D下游。在流动室D的一侧，第一分光器F与所述直线成一定角度、例如45°角布置。通过流动室D中的粒子发出的侧向光，一部分透过第一分光器F并且被与第一分光器F成一定角度、例如45°角布置在第一分光器F后面的荧光收集装置H捕获，而另一部分侧向光被第一分光器F反射，被与第一分光器F成一定角度、例如45°角布置在第一分光器F前面的侧向散射光收集装置G捕获。
在本申请一实施例中，如图4所示，前向散射光收集装置E可以包括第一汇聚透镜J1、第一小孔光阑K1和第一前向散射光检测器E1，第一前向散射光检测器用于收集第一光源照射流动室中流动的粒子后产生的第一光学信息中的第一前向散射光强度信息。具体地，在流动室D中流动的粒子经第一波长的光照射后产生的第一前向散射光被第一汇聚透镜J1聚焦在第一小孔光阑K1处，进而入射到第一前向散射光检测器E1中。此时，这样设计第一小孔光阑K1，使得第一小孔光阑K1阻挡在流动室D中流动的粒子经第二波长的光照射后产生的大部分第二前向散射光以及偏离焦点的第一前向散射光。进一步地，由于第一小孔光阑K1可能不能完全阻挡全部第二前向散射光，因此还可以在第一小孔光阑K1与第一前向散射光检测器E1之间设置第一滤光片L1，用于滤除穿过第一小孔光阑K1后继续向前传播的第二前向散射光。需说明的是，小孔光阑的孔径一般在0.2mm～2mm之间；滤光片一般为业界通用滤光片，只要能透过第一前向散射光并衰减第二前向散射光即可，本发明实施例不作具体限定。流动室D中的虚线D1为粒子流动路径。
在本申请一实施例中，如图5所示，前向散射光收集装置E可以包括第一汇聚透镜J1、第二小孔光阑K2和第二前向散射光检测器E2，第二前向散射光检测器用于收集第二光源照射流动室中流动的粒子后产生的第二光学信息中的第二前向散射光强度信息。与图4类似地，在流动室D中流动的粒子经第二波长的光照射后产生的第二前向散射光被第一汇聚透镜J1聚焦在第二小孔光阑K2处，进而入射到第二前向散射光检测器E2中。此时，这样设计第二小孔光阑K2，使得第二小孔光阑K2阻挡在流动室D中流动的粒子经第一波长的光照射后产生的大部分第一前向散射光以及偏离焦点的第二前向散射光。进一步地，在第二小孔光阑K2与第二前向散射光检测器E2之间设置第二滤光片L2，用于滤除穿过第二小孔光阑K2后继续向前传播的第一前向散射光。
在本申请一实施例中，如图6所示，前向散射光收集装置E可以包括第一汇聚透镜J1、第一小孔光阑K1、第二小孔光阑K2、第一前向散射光检测器E1和第二前向散射光检测器E2，第一前向散射光检测器用于收集第一光源照射流动室中流动的粒子后产生的第一光学信息中的第一前向散射光强度信息，第二前向散射光检测器用于收集第二光源照射流动室中流动的粒子后产生的第二光学信息中的第二前向散射光强度信息。通过流动室D中的粒子发出的前向散射光经过第一汇聚透镜J1后，一部分透过第二分光器M并且被与第二分光器M成一定角度、例如45°角布置在第二分光器M后面的第一前向散射光检测器E1捕获，而另一部分前向散射光被第二分光器M反射，被与第二分光器M成一定角度、例如45°角布置在第二分光器M前面的第二前向散射光检测器E2捕获。在此，这样设计布置在第二分光器M与第一前向散射光检测器E1之间的第一小孔光阑K1和第一滤光片L1，使得基本上仅第一前向散射光进入第一前向散射光检测器E1。类似地，这样设计布置在第二分光器M与第二前向散射光检测器E2之间的第二小孔光阑K2和第二滤光片L2，使得基本上仅第二前向散射光进入第二前向散射光检测器E2。
在本申请一实施例中，侧向散射光收集装置G可以包括第一侧向散射光检测器和第二侧向散射光检测器中的至少一个。第一侧向散射光检测器用于收集第一光源照射流动室中流动的粒子后产生的第一光学信息中的第一侧向散射光强度信息，第二侧向散射光检测器用于收集第二光源照射流动室中流动的粒子后产生的第二光学信息中的第二侧向散射光强度信息。需说明的是，侧向散射光收集装置G的具体结构设计可以参照对图4至图6中的前向散射光收集装置E的描述，其中相应的元器件的功能进行相应的改变，此处不再详细赘述。
在本申请一实施例中，荧光收集装置H可以包括第一荧光检测器和可选地包括第二荧光检测器。第一荧光检测器用于收集第一光源照射流动室中流动的粒子后产生的第一光学信息中的第一荧光强度信息，第二荧光检测器用于收集第二光源照射流动室中流动的粒子后产生的第二光学信息中的第二荧光强度信息。需说明的是，荧光收集装置H的具体结构设计可以参照对图4和图6中的前向散射光收集装置E的描述。如图7所示，以荧光收集装置H包括第一荧光检测器H1和第二荧光检测器H2为例，通过流动室D中的粒子发出的侧向光经过第二汇聚透镜J2后，一部分侧向光(荧光)透过第一分光器F并且被与第一分光器F成一定角度、例如45°角布置在第一分光器F后面的荧光收集装置H捕获，而另一部分侧向光(侧向散射光)被第一分光器F反射，被与第一分光器F成一定角度、例如45°角布置在第一分光器F前面的侧向散射光收集装置G捕获。其中，透过第一分光器F的侧向光的一部分透过第三分光器N并且被与第三分光器N成一定角度、例如45°角布置在第三分光器N后面的第一荧光检测器H1捕获，而另一部分侧向光被第三分光器N反射，被与第三分光器N成一定角度、例如45°角布置在第三分光器N前面的第二荧光检测器H2捕获。在此，这样设计布置在第三分光器N与第一荧光检测器H1之间的第三小孔光阑K3和第三滤光片L3，使得基本上仅第一荧光进入第一荧光检测器H1。类似地，这样设计布置在第三分光器N与第二荧光检测器H2之间的第四小孔光阑K4和第四滤光片L4，使得基本上仅第二荧光进入第二荧光检测器H2。
在本申请一实施例中，第一前向散射光检测器、第二前向散射光检测器、第一侧向散射光检测器、第二侧向散射光检测器、第一荧光检测器和第二荧光检测器等光检测器可以是光电二极管或光电倍增管等。第一分光器、第二分光器和第三分光器可以是二向色镜。
下面将结合前述的样本分析仪以及相应的附图8至11详细说明本申请提出的样本分析方法。该样本分析方法可以由本申请实施例提供的上述样本分析仪的处理器实施。
本申请第三方面提供一种样本分析方法，该方法可应用于本申请第一方面提供的样本分析仪，参照图8所示，该方法包括以下步骤：
步骤201、将待测样本与处理试剂进行混合，反应得到待测试样液，其中，处理试剂至少包括用于处理待测样本中红细胞或红细胞的细胞膜的溶血剂、用于对待测样本中的细胞进行染色的第一荧光染料和用于对待测样本中的待检测病原体进行染色的第二荧光染料。
在本申请实施例中，待测样本一般指待进行检测的血液样本，在一些应用场景中，还可以是包括血细胞的体液。溶血剂可以是用于裂解待测样本中红细胞的试剂，或者可以是用于轻度破坏红细胞的细胞膜并维持红细胞的形态，以便促进第一荧光染料对红细胞的染色。在一些应用场景中，处理试剂除溶血剂、第一荧光染料和第二荧光染料外，还可以包括用于稀释待测样本的稀释液。
第一荧光染料可以包括一种或多种用于对血细胞进行染色的染料，第二染料也可以包括一种或多种可以对待检测病原体进行染色的染料。示例性地，第一荧光染料例如可以是市场上售卖的迈瑞血球仪中的DIFF通道染液和/或WNB通道染液，第二荧光染料可以是对病原体的核酸、蛋白质、细胞膜、细胞器等至少一种进行染色的染料。示例性地，第一荧光染料和第二荧光染料可以独立包装，也可以混合在同一个试剂瓶或试剂袋中。
步骤202、使待测试样液中的粒子逐个通过光学检测系统的检测区，并且用具有第一波长的光和具有短于第一波长的第二波长的光照射通过检测区的粒子。
在本申请实施例中，待测试样液中的粒子包括血液中的各种类型的血细胞，例如红细胞、白细胞、血小板等，而且可能包括病原体等。
示例性地，第一波长的光和第二波长的光被耦合为一路光束并聚焦在光学检测系统的检测区。光学检测系统的检测区一般是指光学检测系统中的流动室。
在本申请实施例中，第一波长可以大于600nm，第二波长可以小于等于600nm。进一步的，第一波长可以为635nm；和/或，第二波长可以为375nm、405nm、450nm、488nm或520nm。
步骤203、获取待测试样液中的粒子经具有第一波长的光照射后产生的第一光学信息和待测试样液中的粒子经具有第二波长的光照射后产生的第二光学信息。
在本申请实施例中，第一光学信息包括第一波长的光照射待测试样液中的粒子后产生的第一散射光强度信息和第一荧光强度信息，第二光学信息包括第二波长的光照射待测试样液中的粒子后产生的第二荧光强度信息和第二散射光强度信息。第一散射光强度信息可以包括第一前向散射光强度信息和第一侧向散射光强度信息中的至少一个，第二散射光强度信息可以包括第二前向散射光强度信息和第二侧向散射光强度信息中的至少一个。其中，前向散射光信号(Front Scattering，FS)反映细胞粒子的大小，侧向散射光信号(Side Scattering，SS)反映细胞粒子内部结构的复杂程度，荧光信号(Fluorescence，FL)反映细胞粒子内的例如脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic Acid，DNA)和核糖核酸(Ribonucleic Acid，RNA)等可被荧光染料染色物质的含量。此外，光学信号信息例如可以包括光学信号的脉宽和/或光学信号的脉冲峰值等。
步骤204、根据第一光学信息和第二光学信息中的至少一种散射光强度信息以及第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。
在本申请实施例中，从第一光学信息包括的第一前向散射光强度信息和第一侧向散射光强度信息以及第二光学信息包括的第二前向散射光强度信息和第二侧向散射光强度信息中任意获取一个或者两个散射光强度信息，并根据任意获取一个或者两个散射光强度信息和第一光学信息中的第一荧光强度信息来分析待测试样液中的待检测细胞。也就是说，对待测试样液中的待检测细胞进行分析时需要使用第一光学信息中的第一荧光强度信息和至少一个另外的散射光强度信息，该至少一个另外的散射光强度信息选自第一前向散射光强度信息、第一侧向散射光强度信息、第二前向散射光强度信息和第二侧向散射光强度信息中的至少一个。
步骤205、根据第一光学信息和第二光学信息中的至少一种另外的光强度信息以及第二光学信息中的散射光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。
在本申请实施例中，从第一光学信息包括的第一前向散射光强度信息、第一侧向散射光强度信息和第一荧光强度信息以及第二光学信息包括的一种散射光强度信息(例如第二侧向散射光信息)和第二荧光强度信息中任意获取一个或者两个光强度信息，并根据任意获取的一个或者两个光强度信息和第二光学信息包括的另一种散射光强度信息(例如第二前向散射光信息)来分析待测试样液中的待检测病原体。
因此，本申请第三方面所提供的样本分析方法，通过采用两种具有不同波长的光同时照射通过检测区的粒子，收集粒子经过两种不同波长的光照射后产生的第一光学信息和第二光学信息，根据第一光学信息中的各光强度信息和/或第二光学信息中的各光强度信息的不同组合来分析待测试样液中的待检测细胞以及识别待测试样液中是否存在待检测病原体，实现对血细胞和病原体的同时检测，解决了目前不能通过同一份待测样试样液同时检测样本中的血细胞和病原体的问题，提高了流式样本分析仪的筛查能力。
在本申请其他实施例中，所述至少一种散射光强度信息包括第一光学信息中的第一前向散射光强度信息和/或第一侧向散射光强度信息；或者，所述至少一种散射光强度信息包括第二光学信息中的第二侧向散射光强度信息。
具体地，在一实施例中，步骤204可以由步骤a11来实现：
步骤a11、根据第一光学信息中的第一前向散射光强度信息和第一侧向散射光强度信息中的至少一个以及第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。
在优选的实施例中，步骤204可由步骤a12来实现：
步骤a12、根据第一光学信息中的第一侧向散射光强度信息以及第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。
在优选的实施例中，步骤204可以由步骤a13来实现：
步骤a13、根据第一光学信息中的第一前向散射光强度信息、第一侧向散射光强度信息以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。
在另一实施例中，步骤204可以由步骤a14来实现：
步骤a14、根据第二光学信息中的第二侧向散射光强度信息以及第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。
在本申请其他实施例中，待检测细胞可以为白细胞，对应的步骤204可以由以下步骤来实现：根据第一散射光强度信息和第二散射光强度信息中的至少一个以及第一荧光强度信息，将待测试样液中的待检测细胞至少分类为单核细胞亚群、淋巴细胞亚群、中性粒细胞亚群、嗜酸性粒细胞亚群，可选地还可以识别待测试样液中是否存在幼稚粒细胞。优选地，根据第一前向散射光强度信息、第一侧向散射光强度信息以及第一荧光强度信息，将待测试样液中的待检测细胞至少分类为单核细胞亚群、淋巴细胞亚群、中性粒细胞亚群、嗜酸性粒细胞亚群。此时，溶血剂为用于裂解红细胞的试剂，第一荧光染料为能够对白细胞染色的染液，例如市场上售卖的迈瑞血球仪中的DIFF通道染液。
在本申请其他实施例中，步骤204也可以由以下步骤来实现：根据第一散射光强度信息和第二散射光强度信息中的至少一个以及第一荧光强度信息，识别待测试样液中的白细胞或嗜碱性粒细胞，可选地识别待测试样液中是否存在有核红细胞。此时，溶血剂为用于裂解红细胞的试剂，第一荧光染料为能够对有核红细胞染色的染液，例如市场上售卖的迈瑞血球仪中的WNB通道染液。
在本申请其他实施例中，步骤204也可以由以下步骤来实现：根据第一散射光强度信息和第二散射光强度信息中的至少一个以及第一荧光强度信息，识别待测试样液中的网织红细胞、血小板和成熟红细胞中的至少一种。此时，溶血剂为用于轻度破坏红细胞的细胞膜并维持红细胞的形态的试剂，用于促进染料对红细胞的染色。第一荧光染料为能够对红细胞和/或血小板染色的染液。
在本申请其他实施例中，步骤205可以由步骤b11来实现：
步骤b11、根据第一光学信息和第二光学信息中的至少一种另外的光强度信息以及第二前向散射光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。
在本申请其他实施例中，步骤b11可以由以下步骤来实现：根据至少第二光学信息中的第二荧光强度信息以及第二前向散射光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。
在本申请实施例中，可以根据第二荧光强度信息以及第二前向散射光强度信息，来识别待测试样液中是否存在待检测病原体，或者，还可以根据第二前向散射光强度信息、第二侧向散射光强度信息和第二荧光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。由此能够更好地识别出病原体。
在本申请其他实施例中，步骤205可以由步骤b12来实现：
步骤b12、根据第二侧向散射光强度信息和第二前向散射光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。
在本申请其他实施例中，步骤205和步骤b11中的“识别待测试样液中是否存在待检测病原体”具体可以由以下步骤来实现：根据第一散射光强度信息、第一荧光强度信息和第二荧光强度信息中的至少一个以及第二散射光强度信息，统计待检测病原体的数量；当该数量大于预设阈值时，待测试样液中存在待测病原体。
在本申请其他实施例中，步骤204、步骤a11、步骤a12、步骤a13和步骤a14中的“分析待测试样液中的待检测细胞”具体可以由以下步骤来实现：根据第一散射光强度信息和第二散射光强度信息中的至少一个以及第一荧光强度信息生成第一散点图，根据第一散点图分析待测试样液中的待检测细胞。
对应的，样本分析仪执行步骤205、步骤b11和步骤b12中的“识别待测试样液中是否存在待检测病原体”具体可以由以下步骤来实现：根据第一散射光强度信息、第一荧光强度信息和第二荧光强度信息中的至少一个以及第二散射光强度信息生成第二散点图，根据第二散点图识别待测试样液中是否存在待检测病原体。
在本申请其他实施例中，在识别出待测试样液中存在待检测病原体时，输出报警提示。其中，报警提示可以采用语音的形式输出，也可以采用文本和/或图片的形式输出，还可以语音和文本两者结合的形式输出。
示例性的，样本分析仪的采样部采集到血液样本后，将血液样本输送到反应部。同时贮存包括溶血剂、用于对白细胞进行染色的第一荧光染料、用于对寄生虫进行染色的第二荧光染料的试剂供应至反应部。在反应部的混合室处将血液样本与试剂进行混合，反应得到待测试样液。使待测试样液在流动室中流动，同时采用波长为635nm的第一激光束和波长为375nm的第二激光束耦合成的目标激光光束照射流动室中流动的粒子。样本分析仪采集第一光学信息和第二光学信息，其中，第一前向散射光检测器获取波长为635nm的激光对应的第一前向散射光强度信息，第二前向散射光检测器获取波长为375nm的激光对应的第二前向散射光强度信息，第一荧光检测器获取波长为635nm的激光对应的第一荧光强度信息，第二荧光检测器获取波长为375nm的激光对应的第二荧光强度信息，第一侧向散射光检测器获取波长为635nm的激光对应的第一侧向散射光强度信息，第二侧向散射光检测器获取波长为375nm的激光对应的第二侧向散射光强度信息。样本分析仪根据第一侧向散射光强度信息和第一荧光强度信息生成如图9所示的第一二维散点图，根据第一二维散点图实现对白细胞进行血细胞分类。其中，图9所示的横坐标为第一侧向散射光强度信息，纵坐标为第一前向散射光强度信息。在图9中，N1区域内的散点为淋巴细胞，N2区域内的散点为单核细胞，N3区域内的散点为中性粒细胞，N4区域内的散点为嗜酸性粒细胞，N5区域内的散点为溶血产物，即血影。样本分析仪根据第二前向散射光强度信息和第二荧光强度信息生成如图10所示的第二二维散点图，根据第二二维散点图实现对待检测病原体例如寄生虫的检测。其中，图10中的横坐标为第二前向散射光强度信息，纵坐标为第二荧光强度信息。由于寄生虫体积小的特点，所产生的第二前向散射光强度小，因此可以确定寄生虫主要分布在横坐标上的低值段，且对寄生虫进行特异性染色后，寄生虫颗粒具有较大的荧光强度，所以在纵轴上具有比血影区更高的位置，由此可以确定P1区域内的散点为寄生虫，P2区域内的散点为血影。统计P1区域内的散点的数量，若P1区域内的散点的数量大于预设数量，可确定存在寄生虫，样本分析仪输出存在寄生虫的提示信息。
进一步的，样本分析仪还可以对图9所示的N1、N2、N3、N4和N5对应的每一区域内散点的数量进行统计，并将统计得到的每一区域内的数量输出显示。
需说明的是，本申请第三方面提供的样本分析方法的其他实施例可参见本申请第一方面提供的样本分析仪的各个实施例的描述，在此不再赘述。
本申请第四方面还提供一种样本分析方法，该分析方法可应用于本申请第二方面提供的样本分析仪，参照图11所示，该方法包括以下步骤：
步骤401、将待测样本与处理试剂进行混合，反应得到待测试样液。
其中，处理试剂至少包括用于处理裂解待测样本中红细胞的溶血剂和用于对待测样本中的待检测细胞进行染色的第一荧光染料。
步骤402、使待测试样液中的粒子逐个通过光学检测系统的检测区，并且用具有第一波长的光和具有短于第一波长的第二波长的光照射通过检测区的粒子。
在本申请一实施例中，第一波长可以大于600nm，第二波长可以小于等于600nm。进一步的，第一波长可以为635nm；和/或，第二波长可以为375nm、405nm、450nm、488nm或520nm。
步骤403、获取待测试样液中的粒子经具有第一波长的光照射后产生的第一光学信息和待测试样液中的粒子经具有第二波长的光照射后产生的第二光学信息。
在本申请实施例中，第一光学信息可以包括第一波长照射待测试样液中的粒子产生的第一散射光强度信息和第一荧光强度信息，第二光学信息可以包括第二波长的光照射待测试样液中的粒子产生的第二散射光强度信息。
步骤404、根据第一光学信息和第二光学信息中的至少一种散射光强度信息以及第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。
在本申请实施例中，对待测试样液中的待检测细胞进行分析时应使用第一荧光强度信息，若对待测试样液中的待检测细胞进行二维散点图分析时，对应的其他一维光学信息可以为以下任意一个：第一前向散射光强度信息、第一侧向散射光强度信息、第二侧向散射光强度信息、第二前向散射光强度信息；若对待测试样液中的待检测细胞进行三维散点图分析时，对应的其他两维光学信息可以为以下任意两个：第一前向散射光强度信息、第一侧向散射光强度信息、第二侧向散射光强度信息、第二前向散射光强度信息。
步骤405、根据至少第二散射光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。
优选地，识别待测试样液中是否存在待检测病原体时采用第二散射光强度信息中的第二前向散射光强度信息。若采用二维散点图分析识别待测试样液中是否存在待检测病原体时，对应的其他一维光学信息可以为以下任意一个：第一荧光强度信息、第一前向散射光强度信息、第一侧向散射光强度信息、第二侧向散射光强度信息；若采用三维散点图分析识别待测试样液中是否存在待检测病原体时，对应的其他两维光学信息可以为以下任意两个：第一荧光强度信息、第一前向散射光强度信息、第一侧向散射光强度信息、第二侧向散射光强度信息。
在本申请其他实施例中，步骤404可以由步骤c11来实现：
步骤c11、根据第一前向散射光强度信息和第一侧向散射光强度信息中的至少一个以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。
在本申请其他实施例中，步骤404也可以由步骤c12来实现：
步骤c12、根据第二侧向散射光强度信息以及第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞。
在本申请其他实施例中，步骤405可以由步骤d11来实现：
步骤d11、根据第二前向散射光强度信息和第二侧向散射光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体。
需说明的是，本申请第四方面提供的样本分析方法的其他实施例可参见本申请第一方面和第二方面提供的样本分析仪的各个实施例和本申请第三方面提供的样本分析方法的各个实施例的描述，在此不再赘述。
本申请实施例所提供的样本分析方法，采用至少两种不同波长的光照射经试剂混合处理后的待测试样液中的粒子，并通过检测到的两种不同波长的光照射粒子后得到的第一光学信息和第二光学信息中的至少一种散射光强度信息以及第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析待测试样液中的待检测细胞，以及通过检测到的第二光学信息中的散射光强度信息以及第一光学信息和第二光学信息中的至少一种另外的光强度信息，识别待测试样液中是否存在待检测病原体，实现对血细胞和病原体的同时检测，解决了目前不能通过同一份待测样试样液同时检测样本中的血细胞和病原体的问题，提高了流式样本分析仪的筛查能力。
本申请实施例还提供了一种样本分析装置，图12为本申请实施例提供的样本分析装置6的结构示意图，该样本分析装置6包括至少一个处理器61以及存储器62，该存储器62存储至少一个处理器61可执行的指令，该指令在被至少一个处理器61执行时上述样本分析方法的部分或全部步骤。
此外，该样本分析装置6还可以包括至少一个网络接口64和用户接口63。样本分析装置6中的各个组件通过总线系统65耦合在一起。可理解，总线系统65用于实现这些组件之间的连接通信。总线系统65除包括数据总线之外，还包括电源总线、控制总线和状态信号总线。但是为了清楚说明起见，在图12中将各种总线都标为总线系统65。
其中，用户接口63可以包括显示器、键盘、鼠标、轨迹球、点击轮、按键、按钮、触感板或者触摸屏等。
可以理解，存储器62可以是易失性存储器或非易失性存储器，也可包括易失性和非易失性存储器两者。其中，非易失性存储器可以是只读存储器(ROM，Read Only Memory)、可编程只读存储器(PROM，Programmable Read-Only Memory)、可擦除可编程只读存储器(EPROM，Erasable Programmable Read-Only Memory)、电可擦除可编程只读存储器(EEPROM，Electrically Erasable Programmable Read-Only Memory)、磁性随机存取存储器(FRAM，ferromagnetic random access memory)、快闪存储器(Flash Memory)、磁表面存储器、光盘、或只读光盘(CD-ROM，Compact Disc Read-Only Memory)；磁表面存储器可以是磁盘存储器或磁带存储器。易失性存储器可以是随机存取存储器(RAM，Random AccessMemory)，其用作外部高速缓存。通过示例性但不是限制性说明，许多形式的RAM可用，例如静态随机存取存储器(SRAM，Static Random Access Memory)、同步静态随机存取存储器(SSRAM，Synchronous Static Random Access Memory)、动态随机存取存储器(DRAM，Dynamic Random Access Memory)、同步动态随机存取存储器(SDRAM，SynchronousDynamic Random Access Memory)、双倍数据速率同步动态随机存取存储器(DDRSDRAM，Double Data Rate Synchronous Dynamic Random Access Memory)、增强型同步动态随机存取存储器(ESDRAM，Enhanced Synchronous Dynamic Random Access Memory)、同步连接动态随机存取存储器(SLDRAM，SyncLink Dynamic Random Access Memory)、直接内存总线随机存取存储器(DRRAM，Direct Rambus Random Access Memory)。本申请实施方式描述的存储器62旨在包括这些和任意其它适合类型的存储器。
存储器62包括但不限于：三态内容寻址存储器、静态随机存储器能够存储所接收的传感器信号等多种类数据以支持样本分析装置6的操作。
处理器61可以是中央处理单元(Central Processing Unit，CPU，还可以是其他通用处理器、数字信号处理器(Digital Signal Processor，DSP)、专用集成电路(Application Specific Integrated Circuit，ASIC)、现成可编程门阵列(Field-Programmable Gate Array，FPGA)或者其他可编程逻辑器件、分立门或者晶体管逻辑器件、分立硬件组件等。通用处理器可以是微处理器或者该处理器也可以是任何常规的处理器等。
此外，本申请实施例还提供了一种计算机可读存储介质。该计算机可读存储介质上存储有可执行指令，该可执行指令被处理器61执行时实现前述样本分析方法的各个步骤。该计算机可读存储介质可以是前述存储器或其部件，其中存储了计算机程序，并由处理器61执行，以完成前述方法步骤。计算机可读存储介质可以是FRAM、ROM、PROM、EPROM、EEPROM、Flash Memory、磁表面存储器、光盘或CD-ROM等，也可以是包括上述存储介质之一或任意组合的各种设备。
应理解，在说明书、权利要求书和附图中提及的特征、结构和优点，只要在本申请的范围内是有意义的，均可以任意相互组合。针对本申请实施例的样本分析仪所说明的特征、结构和优点以相应的方式适用于本申请实施例的样本分析方法、样本分析装置和计算机可读存储介质，反之亦然。
应理解，在本申请的各种实施例中，上述各过程的序号的大小并不意味着执行顺序的先后，各过程的执行顺序应以其功能和内在逻辑确定，而不应对本申请实施例的实施过程构成任何限定。上述本申请实施例序号仅仅为了描述，不代表实施例的优劣。
以上，仅为本申请的实施方式，但本申请的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本申请揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本申请的保护范围之内。因此，本申请的保护范围应以权利要求的保护范围为准。

Claims (26)

1.一种样本分析仪，其特征在于，所述样本分析仪包括：
采样部，用于获取待测样本，并将所述待测样本输送到反应部；
试剂供应部，用于贮存试剂并根据需要将所述试剂供应到所述反应部；其中，所述试剂至少包括用于处理所述待测样本中红细胞或红细胞的细胞膜的溶血剂、用于对所述待测样本中的待检测细胞进行染色的第一荧光染料和用于对所述待测样本中的待检测病原体进行染色的第二荧光染料；
反应部，包括混合室，用于供所述待测样本与所述试剂混合反应以形成待测试样液；
光学检测系统，包括第一光源、第二光源、流动室、第一散射光检测器、第二散射光检测器、第一荧光检测器和第二荧光检测器，所述待测试样液中的粒子可在所述流动室内流动，所述第一光源用于对在所述流动室中流动的粒子照射具有第一波长的光，以便所述粒子产生第一光学信息，所述第二光源用于对在所述流动室中流动的粒子照射具有短于所述第一波长的第二波长的光，以便所述粒子产生第二光学信息，所述第一散射光检测器用于收集所述第一光学信息中的第一散射光强度信息，所述第二散射光检测器用于收集所述第二光学信息中的第二散射光强度信息，所述第一荧光检测器用于收集所述第一光学信息中的第一荧光强度信息，所述第二荧光检测器用于收集所述第二光学信息中的第二荧光强度信息；
输送装置，用于将所述反应部中经所述试剂处理后的待测试样液输送到所述光学检测系统的流动室中；
处理器，配置用于从所述光学检测系统中获取所述第一散射光强度信息、所述第二散射光强度信息、所述第一荧光强度信息和所述第二荧光强度信息；根据所述第一散射光强度信息和所述第二散射光强度信息中的至少一个以及所述第一荧光强度信息，分析所述待测试样液中的待检测细胞；根据所述第一散射光强度信息、所述第一荧光强度信息和所述第二荧光强度信息中的至少一个以及所述第二散射光强度信息，识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
2.根据权利要求1所述的样本分析仪，其特征在于，所述第二散射光检测器包括用于收集所述第二光学信息中的第二前向散射光强度信息的第二前向散射光检测器，所述处理器配置用于根据所述第一散射光强度信息、所述第一荧光强度信息和所述第二荧光强度信息中的至少一个以及所述第二前向散射光强度信息，识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
3.根据权利要求2所述的样本分析仪，其特征在于，所述处理器配置用于根据至少所述第二荧光强度信息以及所述第二前向散射光强度信息，识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
4.根据权利要求3所述的样本分析仪，其特征在于，所述第二散射光检测器还包括用于收集所述第二光学信息中的第二侧向散射光强度信息的第二侧向散射光检测器，所述处理器配置用于根据所述第二前向散射光强度信息、所述第二侧向散射光强度信息和所述第二荧光强度信息，识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述第一散射光检测器包括用于收集所述第一光学信息中的第一前向散射光强度信息的第一前向散射光检测器和用于收集所述第一光学信息中的第一侧向散射光强度信息的第一侧向散射光检测器中的至少一个，所述处理器配置用于根据所述第一前向散射光强度信息和所述第一侧向散射光强度信息中的至少一个以及所述第一荧光强度信息，分析所述待测试样液中的待检测细胞；或者
所述第二散射光检测器包括用于收集所述第二光学信息中的第二侧向散射光强度信息的第二侧向散射光检测器，所述处理器配置用于根据所述第二侧向散射光强度信息以及所述第一荧光强度信息，分析所述待测试样液中的待检测细胞。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述待检测细胞为白细胞，所述处理器配置用于根据所述第一散射光强度信息和所述第二散射光强度信息中的至少一个以及所述第一荧光强度信息，将所述待测试样液中的待检测细胞至少分类为单核细胞亚群、淋巴细胞亚群、中性粒细胞亚群、嗜酸性粒细胞亚群，可选地识别所述待测试样液中是否存在幼稚粒细胞。
7.根据权利要求1至5中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述处理器配置用于根据所述第一散射光强度信息和所述第二散射光强度信息中的至少一个以及所述第一荧光强度信息，识别所述待测试样液中的白细胞或嗜碱性粒细胞，可选地识别所述待测试样液中是否存在有核红细胞。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述处理器配置用于在识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体时，根据所述第一散射光强度信息、所述第一荧光强度信息和所述第二荧光强度信息中的至少一个以及所述第二散射光强度信息，统计待检测病原体的数量，当该数量大于预设阈值时，所述待测试样液中存在所述待测病原体。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述处理器配置用于在分析所述待测试样液中的待检测细胞时，根据所述第一散射光强度信息和所述第二散射光强度信息中的至少一个以及所述第一荧光强度信息生成第一散点图，根据所述第一散点图分析所述待测试样液中的待检测细胞；以及
所述处理器配置用于在识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体时，根据所述第一散射光强度信息、所述第一荧光强度信息和所述第二荧光强度信息中的至少一个以及所述第二散射光强度信息生成第二散点图，根据所述第二散点图识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述样本分析仪包括显示装置，所述处理器配置用于在识别出所述待测试样液中存在待检测病原体时，使所述显示装置输出报警提示。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述第一波长大于600nm，所述第二波长小于等于600nm。
12.根据权利要求11所述的样本分析仪，其特征在于，所述第一波长为635nm；和/或，所述第二波长为375nm、405nm、450nm、488nm或520nm。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述待测病原体为寄生虫。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述光学检测系统还包括光路合束器，所述第一光源为发射具有所述第一波长的第一激光束的第一激光器，所述第二光源为发射具有所述第二波长的第二激光束的第二激光器，所述光路合束器用于将所述第一激光束和所述第二激光束合成为目标激光束，对在所述流动室中流动的粒子进行照射，以便所述粒子产生所述第一光学信息和所述第二光学信息。
15.一种样本分析仪，其特征在于，所述样本分析仪包括：
采样部，用于获取待测样本，并将所述待测样本输送到反应部；
试剂供应部，用于贮存试剂并根据需要将所述试剂供应到所述反应部；其中，所述试剂至少包括用于处理所述待测样本中红细胞或红细胞的细胞膜的溶血剂和用于对所述待测样本中的待检测细胞进行染色的荧光染料；
反应部，包括混合室，用于供所述待测样本与所述试剂混合反应以形成待测试样液；
光学检测系统，包括第一光源、第二光源、流动室、第一散射光检测器、第二散射光检测器和荧光检测器，所述待测试样液中的粒子可在所述流动室内流动，所述第一光源用于对在所述流动室中流动的粒子照射具有第一波长的光，以便所述粒子产生第一光学信息，所述第二光源用于对在所述流动室中流动的粒子照射具有短于所述第一波长的第二波长的光，以便所述粒子产生第二光学信息，所述第一散射光检测器用于收集所述第一光学信息中的第一散射光强度信息，所述第二散射光检测器用于收集所述第二光学信息中的第二散射光强度信息，所述荧光检测器用于收集所述第一光学信息中的第一荧光强度信息；
输送装置，用于将所述反应部中经所述试剂处理后的待测试样液输送到所述光学检测系统的流动室中；
处理器，配置用于从所述光学检测系统中获取所述第一散射光强度信息、所述第二散射光强度信息和所述第一荧光强度信息；根据所述第一散射光强度信息和所述第二散射光强度信息中的至少一个以及所述第一荧光强度信息，分析所述待测试样液中的待检测细胞；根据至少所述第二散射光强度信息，识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
16.根据权利要求15所述的样本分析仪，其特征在于，所述第二散射光检测器包括用于收集所述第二光学信息中的第二前向散射光强度信息的第二前向散射光检测器和用于收集所述第二光学信息中的第二侧向散射光强度信息的第二侧向散射光检测器，所述处理器配置用于根据所述第二前向散射光强度信息和第二侧向散射光强度信息，识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的样本分析仪，其特征在于，所述第一波长大于600nm，所述第二波长小于等于600nm。
18.一种样本分析方法，其特征在于，所述方法包括：
将待测样本与处理试剂进行混合，反应得到待测试样液，其中，所述处理试剂至少包括用于处理所述待测样本中红细胞或红细胞的细胞膜的溶血剂、用于对所述待测样本中的细胞进行染色的第一荧光染料和用于对所述待测样本中的待检测病原体进行染色的第二荧光染料；
使所述待测试样液中的粒子逐个通过光学检测系统的检测区并且用具有第一波长的光和具有短于所述第一波长的第二波长的光照射通过所述检测区的粒子；
获取所述待测试样液中的粒子经具有第一波长的光照射后产生的第一光学信息和所述待测试样液中的粒子经具有第二波长的光照射后产生的第二光学信息；
根据所述第一光学信息和所述第二光学信息中的至少一种散射光强度信息以及所述第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析所述待测试样液中的待检测细胞；
根据所述第一光学信息和所述第二光学信息中的至少一种另外的光强度信息以及所述第二光学信息中的散射光强度信息，识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
19.根据权利要求18所述的方法，其特征在于，所述第二光学信息中的散射光强度信息包括第二前向散射光强度信息和/或第二侧向散射光强度信息；和/或，所述至少一种另外的光强度信息包括所述第二光学信息中的第二荧光强度信息。
20.根据权利要求18或19所述的方法，其特征在于，所述至少一种散射光强度信息包括所述第一光学信息中的第一前向散射光强度信息和/或第一侧向散射光强度信息；或者，所述至少一种散射光强度信息包括所述第二光学信息中的第二侧向散射光强度信息。
21.根据权利要求18至20中任一所述的方法，其特征在于，所述待检测细胞为白细胞；
其中，根据所述第一光学信息和所述第二光学信息中的至少一种散射光强度信息以及所述第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析所述待测试样液中的待检测细胞，包括：
根据所述第一光学信息和所述第二光学信息中的至少一种散射光强度信息以及所述第一光学信息中的第一荧光强度信息，将所述待测试样液中的待检测细胞至少分类为单核细胞亚群、淋巴细胞亚群、中性粒细胞亚群、嗜酸性粒细胞亚群，可选地识别所述待测试样液中是否存在幼稚粒细胞。
22.根据权利要求18至20中任一项所述的方法，其特征在于，根据所述第一光学信息和所述第二光学信息中的至少一种散射光强度信息以及所述第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析所述待测试样液中的待检测细胞，包括：
根据所述第一光学信息中的第一散射光强度信息和所述第二光学信息中的第二散射光强度信息中的至少一个以及所述第一荧光强度信息，识别所述待测试样液中的白细胞或嗜碱性粒细胞，可选地识别所述待测试样液中是否存在有核红细胞。
23.根据权利要求18至22中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括：
在识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体时，根据所述至少一种另外的光强度信息以及所述第二光学信息中的散射光强度信息，统计待检测病原体的数量；
当该数量大于预设阈值时，所述待测试样液中存在所述待测病原体。
24.根据权利要求18至23中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：
在识别出所述待测试样液中存在待检测病原体时，输出报警提示。
25.根据权利要求18至24中任一项所述的方法，其特征在于，所述第一波长大于600nm，所述第二波长小于等于600nm。
26.一种样本分析方法，其特征在于，所述方法包括：
将待测样本与处理试剂进行混合，反应得到待测试样液，其中，所述试剂至少包括用于处理所述待测样本中红细胞或红细胞的细胞膜的溶血剂和用于对所述待测样本中的待检测细胞进行染色的荧光染料；
使所述待测试样液中的粒子逐个通过光学检测系统的检测区并且用具有第一波长的光和具有短于所述第一波长的第二波长的光照射通过所述检测区的粒子；
获取所述待测试样液中的粒子经具有第一波长的光照射后产生的第一光学信息和所述待测试样液中的粒子经具有第二波长的光照射后产生的第二光学信息；
根据所述第一光学信息和所述第二光学信息中的至少一种散射光强度信息以及所述第一光学信息中的第一荧光强度信息，分析所述待测试样液中的待检测细胞；
根据至少所述第二光学信息中的第二散射光强度信息，识别所述待测试样液中是否存在待检测病原体。
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