JP7474239B2 - 架橋ヒドロゲルの動的濾過の方法 - Google Patents
架橋ヒドロゲルの動的濾過の方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7474239B2 JP7474239B2 JP2021505428A JP2021505428A JP7474239B2 JP 7474239 B2 JP7474239 B2 JP 7474239B2 JP 2021505428 A JP2021505428 A JP 2021505428A JP 2021505428 A JP2021505428 A JP 2021505428A JP 7474239 B2 JP7474239 B2 JP 7474239B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- biopolymer
- gel
- diafiltration
- based hydrogel
- range
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 title claims description 68
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 52
- 238000001914 filtration Methods 0.000 title claims description 39
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 107
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims description 39
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims description 38
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 claims description 38
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims description 38
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 claims description 29
- SHKUUQIDMUMQQK-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(oxiran-2-ylmethoxy)butoxymethyl]oxirane Chemical group C1OC1COCCCCOCC1CO1 SHKUUQIDMUMQQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 14
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 13
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 claims description 12
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 11
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 claims description 7
- 229920006037 cross link polymer Polymers 0.000 claims description 3
- 239000003193 general anesthetic agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 3
- 238000005086 pumping Methods 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 claims description 2
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 claims description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 11
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 10
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 6
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 4
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 4
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 3
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 3
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- -1 heparosan Chemical compound 0.000 description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 3
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 229940035674 anesthetics Drugs 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000011035 continuous diafiltration Methods 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical compound C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N heavy water Substances [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 2
- IQPQWNKOIGAROB-UHFFFAOYSA-N isocyanate group Chemical group [N-]=C=O IQPQWNKOIGAROB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KXCLCNHUUKTANI-RBIYJLQWSA-N keratan Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@H]3[C@H]([C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H](O)[C@@H]3O)O)[C@H](NC(C)=O)[C@H]2O)COS(O)(=O)=O)O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H]1O KXCLCNHUUKTANI-RBIYJLQWSA-N 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GJCOSYZMQJWQCA-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthene Chemical compound C1=CC=C2CC3=CC=CC=C3OC2=C1 GJCOSYZMQJWQCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 description 1
- 229920002148 Gellan gum Polymers 0.000 description 1
- 229920002971 Heparan sulfate Polymers 0.000 description 1
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 description 1
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 description 1
- 229920000288 Keratan sulfate Polymers 0.000 description 1
- 229920001954 Restylane Polymers 0.000 description 1
- BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N Silane Chemical compound [SiH4] BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010040954 Skin wrinkling Diseases 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 230000003416 augmentation Effects 0.000 description 1
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000337 buffer salt Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 1
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 1
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 1
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000002316 cosmetic surgery Methods 0.000 description 1
- 238000009295 crossflow filtration Methods 0.000 description 1
- 238000011157 data evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000007872 degassing Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 150000002118 epoxides Chemical group 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 239000000216 gellan gum Substances 0.000 description 1
- 235000010492 gellan gum Nutrition 0.000 description 1
- 229940052827 glytone Drugs 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N hyaluronan Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)C1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H](C(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N 0.000 description 1
- 229940099552 hyaluronan Drugs 0.000 description 1
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000010813 internal standard method Methods 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 239000013627 low molecular weight specie Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000002581 neurotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000618 neurotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 1
- 230000000399 orthopedic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 229910000077 silane Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 229940078499 tricalcium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 229910000391 tricalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019731 tricalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 1
- 229940124549 vasodilator Drugs 0.000 description 1
- 239000003071 vasodilator agent Substances 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 1
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 1
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/52—Hydrogels or hydrocolloids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
- A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
- A61K31/167—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide having the nitrogen of a carboxamide group directly attached to the aromatic ring, e.g. lidocaine, paracetamol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/716—Glucans
- A61K31/717—Celluloses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/716—Glucans
- A61K31/722—Chitin, chitosan
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/716—Glucans
- A61K31/723—Xanthans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
- A61K31/727—Heparin; Heparan
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
- A61K31/728—Hyaluronic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/731—Carrageenans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/732—Pectin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/734—Alginic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/737—Sulfated polysaccharides, e.g. chondroitin sulfate, dermatan sulfate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/20—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D61/00—Processes of separation using semi-permeable membranes, e.g. dialysis, osmosis or ultrafiltration; Apparatus, accessories or auxiliary operations specially adapted therefor
- B01D61/14—Ultrafiltration; Microfiltration
- B01D61/145—Ultrafiltration
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D63/00—Apparatus in general for separation processes using semi-permeable membranes
- B01D63/16—Rotary, reciprocated or vibrated modules
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D69/00—Semi-permeable membranes for separation processes or apparatus characterised by their form, structure or properties; Manufacturing processes specially adapted therefor
- B01D69/02—Semi-permeable membranes for separation processes or apparatus characterised by their form, structure or properties; Manufacturing processes specially adapted therefor characterised by their properties
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
- C08L5/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
- A61L2300/204—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials with nitrogen-containing functional groups, e.g. aminoxides, nitriles, guanidines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
- A61L2300/402—Anaestetics, analgesics, e.g. lidocaine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/34—Materials or treatment for tissue regeneration for soft tissue reconstruction
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D2313/00—Details relating to membrane modules or apparatus
- B01D2313/24—Specific pressurizing or depressurizing means
- B01D2313/243—Pumps
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D2315/00—Details relating to the membrane module operation
- B01D2315/02—Rotation or turning
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D2315/00—Details relating to the membrane module operation
- B01D2315/16—Diafiltration
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D2325/00—Details relating to properties of membranes
- B01D2325/02—Details relating to pores or porosity of the membranes
- B01D2325/0283—Pore size
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
- Processes Of Treating Macromolecular Substances (AREA)
Description
本発明は、架橋生体高分子ベースのヒドロゲルを動的濾過して、ゲルから不要な分子を除去する方法に関する。特に、本発明は、回転式および半透性のフィルターディスクを備えた動的濾過構造を使用するヒアルロン酸ヒドロゲルの動的濾過に関する。
ヒアルロン酸は体に自然なポリマーであり、整形外科や眼科などの医学のさまざまな分野で用いられている。今日、ヒアルロン酸は美容医学や形成外科でますます使用されている。ヒアルロン酸の用途が幅広いのは、特に水の結合能力が非常に高いためである。水性媒体中では、低濃度のヒアルロン酸であっても、粘弾性ゲルが形成され、これは生分解性であり、有利な特性を有する。
純粋なヒアルロン酸は、人体内で比較的速く分解される。このため、ヒアルロン酸分子は互いに化学的に架橋していることが多く、それによって分解が大幅に減少し、約６～１２ヶ月の期間は望ましい効果が維持される。したがって、架橋ヒアルロン酸ゲルは、とりわけ、しわの治療、上唇および下唇の輪郭づけおよび量の増加、頬および顎の輪郭の改善、ならびに鼻の矯正などのために美容医学で頻繁に使用される。
既知のヒアルロン酸ゲルは、大まかに２つの異なるタイプ、すなわち単相ゲルと二相ゲルに分類することができる。単相ヒアルロン酸ゲルは単相で構成され、非粒子状である。そのような単相ゲルの調製は、例えば、ＷＯ２００８／０６８２９７、ＵＳ８，４５０，４７５、ＵＳ８，４５５，４６５、ＵＳ７，７４１，４７６、およびＵＳ８，０５２，９９０に開示されている。知られている市販の単相ヒアルロン酸ゲルは、例えば、Ｊｕｖｅｄｅｒｍ（登録商標）、Ｔｅｏｓｙａｌ（登録商標）、Ｇｌｙｔｏｎｅ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ（登録商標）、ならびにＢｅｌｏｔｅｒｏ（登録商標）、Ｅｓｔｈｅｌｉｓ（登録商標）、Ｆｏｒｔｅｌｉｓ（登録商標）Ｅｘｔｒａ、およびＭｏｄｅｌｉｓ（登録商標）Ｓｈａｐｅとして知られる単相二重架橋ヒアルロン酸ゲルである。
二相ヒアルロン酸ゲルは、液相に分散している架橋ヒアルロン酸材料を含む。そのようなゲルは粒子状であり、例えば、ＥＰ０４６６３００に記載されているように作ることができる。市販の二相ゲルは、例えば、Ｈｙｌａｆｏｒｍ（登録商標）、Ｒｅｓｔｙｌａｎｅ（登録商標）、およびＰｅｒｌａｎｅ（登録商標）である。
架橋ヒアルロン酸ゲルの作製は、多段階プロセスによって行われ、ＷＯ２００５／０８５３２９により詳細に記載されている。
ヒアルロン酸などの多糖に基づくゲルを作製する方法は、ＷＯ２０１４／０６４６３３、ＵＳ２０１３／２１０７６０、ＵＳ２０１３／２０３６９６、ＷＯ２０１０／１１５０８１、ＷＯ２０１２／０６２７７５、ＷＯ２０１３／１８５９３４、ＷＯ２００９／０７７３９９、およびＷＯ２００８／０３４１７６にさらに開示されている。
ヒアルロン酸ゲルを透析するための従来の方法は、しばしば比較的長い手作業時間と労力を必要とする。これは、品質と再現性が低下し、製造時間とコストが増加するため、これまでのところ不利である。さらに、微生物汚染のリスクは、透析ステップの処理時間とともに増加する。
多くの場合、１，４－ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）が、ヒアルロン酸ヒドロゲルの架橋剤として使用されている。しかしながら、ＢＤＤＥは有毒であることがあり、不要な分子が少ないヒドロゲルを製造する必要がある。
発明の目的
本発明は、架橋生体高分子ベースのヒドロゲルの製造中に生成される不要な分子を除去するための改善された方法を提供するという目的に基づいている。
本発明は、架橋生体高分子ベースのヒドロゲルの製造中に生成される不要な分子を除去するための改善された方法を提供するという目的に基づいている。
本発明は、不要な分子を除去する半透性フィルターディスク（複数可）を備えた動的濾過装置を使用して、架橋生体高分子ベースのヒドロゲルを動的濾過する方法に関し、ｉ）２０ １／分～５００ １／分の範囲内の回転速度、および０．５～６バールの範囲内の過圧を適用することによって、所定の濃度までゲルを濃縮するか、または動的濾過装置の処理チャンバ内へゲルを直接ポンプ注入するステップと、ｉｉ）２０ １／分～５００ １／分の範囲内の回転速度と、０．５～６バールの範囲内の過圧を適用することによって、不要な分子を減らすために透析濾過を行うステップと、を含む。
本発明は、本発明の以下の詳細な説明およびそこに含まれる実施例を参照することにより、より容易に理解することができる。
本明細書で使用される「動的濾過装置」という用語は、中空シャフト上で可動に配置された板またはディスクの形状の中空フィルター要素を使用する手段を指す。要素の相対運動により、濾過される媒体に乱流が発生し、それによってフィルター要素の表面が清掃される。このようなフィルター装置は、例えば、ＷＯ００／４７３１２に記載されている。回転式フィルター要素により、オーバーフロー速度を膜間圧（ＴＭＰ）から分離することができる。動的濾過モジュールの遠心力と剪断力の組み合わせにより、カバー層の蓄積の制御が改善される。この技術を使用することにより、目詰まり層の形成が減少する。さらに、相対運動により、濾過機内の保持液の混合が保証される。このような動的濾過装置は、さまざまな企業、例えば、Ａｎｄｒｉｔｚ ＡＧ（本社Ｇｒａｚ Ａｕｓｔｒｉａ）から入手できる。動的濾過装置の重要な要素は膜ディスクである。その直径、ディスクの数、および配置は、目的のスケールによって異なり得る。
本発明によれば、動的濾過の方法は、様々な架橋生体高分子ベースのヒドロゲル（以下、「ヒドロゲル（複数可）」とも呼ばれる）に適用することができる。架橋生体高分子ベースのヒドロゲルの製造方法は当技術分野で周知であり、例えば、架橋ヒアルロン酸ゲルの作製は、ＷＯ２００５／０８５３２９Ａ１に記載されている。多糖に基づくゲルを作製するさらなる方法は、ＷＯ２０１４／０６４６３３、ＵＳ２０１３／２１０７６０、ＵＳ２０１３／２０３６９６、ＷＯ２０１０／１１５０８１、ＷＯ２０１２／０６２７７５、ＷＯ２０１３／１８５９３４、ＷＯ２００９／０７７３９９、およびＷＯ２００８／０３４１７６に開示されている。
一態様では、本発明は、架橋生体高分子ベースのヒドロゲルの動的濾過の方法に関し、
ａ）半透性フィルターディスク（複数可）を備えた動的濾過装置に架橋生体高分子ベースのヒドロゲルを移し、ゲルを透析濾過するステップであって、
ｉ）２０ １／分～５００ １／分の範囲内の回転速度および０．５～６バールの範囲内の過圧を適用することによって所定の濃度までゲルを濃縮するか、または動的濾過装置の処理チャンバにゲルを直接ポンプで送るステップと、
ｉｉ）２０ １／分～５００ １／分の範囲内の回転速度、および０．５～６バールの範囲内の過圧を適用することによって、不要な分子を低減するために透析濾過を行うステップと、を含む、透析濾過するステップと、
ｂ）任意選択で、非架橋ポリマー、特に非架橋ヒアルロン酸および水を含む混合物をゲルに加えるステップと、を含む。
ａ）半透性フィルターディスク（複数可）を備えた動的濾過装置に架橋生体高分子ベースのヒドロゲルを移し、ゲルを透析濾過するステップであって、
ｉ）２０ １／分～５００ １／分の範囲内の回転速度および０．５～６バールの範囲内の過圧を適用することによって所定の濃度までゲルを濃縮するか、または動的濾過装置の処理チャンバにゲルを直接ポンプで送るステップと、
ｉｉ）２０ １／分～５００ １／分の範囲内の回転速度、および０．５～６バールの範囲内の過圧を適用することによって、不要な分子を低減するために透析濾過を行うステップと、を含む、透析濾過するステップと、
ｂ）任意選択で、非架橋ポリマー、特に非架橋ヒアルロン酸および水を含む混合物をゲルに加えるステップと、を含む。
本明細書で使用される場合、「透析濾過」という用語は、濾液が生成されるのと同じ速度で保持液に水または新しい緩衝液を加えることによって、保持液（試料）内に元からある緩衝液塩または他の低分子量種を洗い流すことを伴う、連続透析濾過（定量透析濾過とも呼ばれる）を意味するように使用される。
本明細書で使用される「不要な分子」という用語は、非反応性または非結合のポリマー架橋剤分子（例えば、ＢＤＤＥ）およびそれらの分解生成物を指す。
驚くべきことに、本発明による方法は、回転式フィルターディスクから生じる剪断応力にもかかわらず、ゲルの構造的安定性が維持されている間、ゲルから不要な分子を顕著に除去することが見出された。さらに、驚くべきことに、本発明による方法を実施するために必要な処理時間および必要な緩衝液が、従来の透析と比較して顕著に削減されたことが見出された。本発明による方法のさらなる利点は、従来のクロスフロー濾過と比較して流束速度が増加し（２～１０倍）、保持液をより高濃度に濃縮することができることである。これらの利点は、架橋された高粘度のヒドロゲルから不要な分子を除去するための改善された方法につながる。
生体高分子ベースのヒドロゲルは、生分解性ポリマー、例えば、ヒアルロン酸、ヘパロサン、アルギネート、ペクチン、ジェランガム、コンドロイチン硫酸、ケラタン、ケラタン硫酸、ヘパリン、ヘパリン硫酸、セルロース、キトサン、カラギーナン、キサンタン、またはそれらの塩もしくは誘導体、またはそれらの組み合わせから作られる。「ヒアルロン酸」という用語は、「ヒアルロナン」という用語と同義的に使用される。
以下では、本発明をヒアルロン酸ヒドロゲルを用いて説明するが、これは、本開示が決してヒアルロン酸ヒドロゲルに限定されることを意味するものではない。むしろ、ヒアルロン酸ヒドロゲル、特に上記の例示的なポリマーのうちの１つから作られるヒドロゲルの代わりに、任意の生体高分子ベースのヒドロゲルを使用することができる。
生体高分子ベースのヒドロゲルは、化学架橋剤によって架橋されており、ヒドロゲルは、使用された化学架橋剤の余剰分を含んでいる。余剰の化学架橋剤は、本発明による方法によりヒドロゲルから除去される。さらに、他の不要な分子もまた、本発明による方法によってヒドロゲルから除去され得る。
「架橋剤」という用語は、生体高分子ベースのヒドロゲルの１つ以上の官能基と反応し、同じ官能基、例えば、ヒドロキシル基と架橋することができる、少なくとも２つの基を有するすべての化合物を含む。架橋のための架橋剤の適切な基は、カルボキシル基、エポキシド基、ハロゲン基、ビニル基、イソシアネート基、または保護されたイソシアネート基から選択され得る。架橋剤として使用できる例示的な化合物は、例えば、１，４－ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）、ポリビニルシラン（ＰＶＳ）、ＰＥＧベースの架橋剤、ジビニルスルホン（ＤＶＳ）である。特定の実施形態では、本発明による方法は、ヒドロゲルから未結合または過剰の１，４－ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）および／または他の不要な分子を除去する。
好ましくは、架橋生体高分子ベースのヒドロゲル（特にヒアルロン酸で作られたヒドロゲル）は、１０～７０ｍｇ／ｇ、好ましくは２０～５０ｍｇ／ｇの範囲の初期濃度を呈する。本発明に関して、ヒドロゲルの濃度は、ヒドロゲルの総量（ｇで表される）に基づく架橋生体高分子の量（ｍｇで表される）を意味する。典型的には、初期濃度は、ステップａ）で動的濾過装置に移され、任意選択で、ステップｉ）で濃縮または処理チャンバに直接ポンプ注入されるヒドロゲルの濃度である。
本発明の別の実施形態では、ヒドロゲルは、例えば、充填を容易にするために、動的濾過装置に移される前に（例えば、透析濾過に適用される緩衝溶液を使用して）希釈され、好ましくは、透析濾過の前に任意選択のステップｉ）で濃縮され得る。好ましくは、ヒドロゲルは、任意選択のステップｉ）において、３～３０ｍｇ／ｇ、好ましくは５～２０ｍｇ／ｇ、より好ましくは５～１０ｍｇ／ｇの範囲のヒドロゲルの濃度から開始して濃縮される。
好ましくは、ヒドロゲルは、任意選択のステップｉ）において、所望の濃度に到達し、最大で７０ｍｇ／ｇの最大濃度に到達するまで濃縮される。特に、任意選択の濃縮ステップｉ）の後のヒドロゲルの濃度は、１０～７０ｍｇ／ｇ、好ましくは２０～５０ｍｇ／ｇ、より好ましくは２０～３５ｍｇ／ｇの範囲である。
好ましくは、ステップｉｉ）における透析濾過は、１０～７０ｍｇ／ｇ、好ましくは２０～５０ｍｇ／ｇ、より好ましくは２０～３５ｍｇ／ｇ、また好ましくは２３～７０ｍｇ／ｇの範囲のヒドロゲルの濃度で行われる。典型的には、ヒドロゲル（特にヒアルロン酸で作られたヒドロゲル）の濃度は、透析濾過ステップｉｉ）の間、ほぼ同じレベルに維持される。
好ましくは、ステップｉｉ）における透析濾過は、ヒドロゲル中の不要な分子（ＢＤＤＥなど）の量が定量限界を下回るまで行われる。例えば、ステップｉｉ）における透析濾過は、１～８時間、好ましくは２～６時間の期間行われる。
好ましくは、ステップｉｉ）における透析濾過は、緩衝溶液、好ましくはリン酸緩衝溶液、例えば、Ｎａ２ＨＰＯ４およびＮａＨ２ＰＯ４などのリン酸ナトリウムベースの緩衝溶液を使用して行われる。特に、ステップｉｉ）における透析濾過は、６～８、好ましくは６．５～７．５の範囲のｐＨ値を有する緩衝溶液を使用して行われる。
好ましくは、ヒドロゲルは、ステップｉ）において、７０ １／分～５００ １／分、好ましくは７０ １／分～３００ １／分、より好ましくは１００ １／分～３００ １／分の範囲の回転速度を適用することによって濃縮される。好ましくは、ヒドロゲルは、ステップｉ）において、１～３バールの範囲の過圧によって濃縮される。
好ましくは、ステップｉｉ）における透析濾過は、７０ １／分～５００ １／分、好ましくは７０ １／分～３００ １／分、より好ましくは１００ １／分～３００ １／分の範囲の回転速度を適用することによって実施される。好ましくは、ステップｉｉ）における透析濾過は、１～３バールの範囲の過圧を適用することによって実施される。
特定の実施形態では、本発明による方法で使用される動的濾過装置は、５ｎｍ～２μｍの孔径、より詳細には３０ｎｍ～６００ｎｍの孔径、より詳細には８０ｎｍ～３００ｎｍの孔径、特に、５ｎｍ～６０ｎｍの孔径を呈する半透性フィルターディスク（複数可）を備えている。
特定の実施形態では、本発明による方法で使用される動的濾過装置は、１枚以上の半透性フィルターディスクを備えている。好ましい実施形態では、動的濾過装置は、１～１０枚、好ましくは４～６枚の半透性フィルターディスク（複数可）を備えている。半透性フィルターディスクは、同じ寸法または異なる寸法を呈する場合がある。驚くべきことに、ヒドロゲルの粘度および架橋構造に悪影響を与えることなく、半透性フィルターディスク（複数可）の数を最大１０枚、または好ましくは最大６枚まで増やすことができることが見出された。通常、剪断力は、ディスクの数が増え、回転速度が上がると増加する。
特定の実施形態では、動的濾過装置は、セラミック、金属、またはポリマー材料で作られた半透性フィルターディスク（複数可）を備えている。
特定の実施形態では、生体高分子ベースのヒドロゲルはヒアルロン酸で作られており、ゲルは、約２０ １／分～１５０ １／分の範囲内の回転速度および約０．５～２バールの範囲内の圧力を適用して、１０～３０ｍｇ／ｇの最終濃度まで濃縮され、透析濾過は、２０ １／分～１５０ １／分の範囲内の回転速度および０．５～２バールの範囲内の圧力を適用することによって実施される。
好ましい実施形態では、生体高分子ベースのヒドロゲルはヒアルロン酸で作られており、ステップｉｉ）における透析濾過は、２０ １／分～５００ １／分、好ましくは７０～３００ １／分の範囲内の回転速度、および０．５～３バール、好ましくは１～３バールの範囲内の圧力を適用することによって実施され、ステップｉｉ）の透析濾過は、１０～７０ｍｇ／ｇ、好ましくは２０～５０ｍｇ／ｇ、より好ましくは２０～３５ｍｇ／ｇの範囲のヒドロゲルの濃度で行われる。
好ましい実施形態では、生体高分子ベースのヒドロゲルはヒアルロン酸で作られており、ゲルはステップ（ｉ）で動的濾過装置の処理チャンバに直接ポンプで送られ（すなわち、任意選択の濃縮ステップなし）、ステップｉｉ）における透析濾過は７０ １／分～５００ １／分、好ましくは７０～３００ １／分の範囲内の回転速度、および１～３バールの範囲内の圧力を適用することによって実施され、ステップｉｉ）における透析濾過は、１０～７０ｍｇ／ｇ、好ましくは２０～３５ｍｇ／ｇの範囲のヒドロゲルの濃度で行われ、動的濾過装置は、１～１０枚、好ましくは４～６枚の半透性フィルターディスク（複数可）を備えている。
ヒドロゲルの透析濾過中または透析濾過後に、さらなる物質、例えば、塩、緩衝物質、ビタミン（例えば、ビタミンＥ、Ｃ、Ｂ６）、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸またはその誘導体、酸化亜鉛）、ポリオール（例えば、グリセロール、マンニトール）、リン酸三カルシウム粒子（例えば、αリン酸三カルシウムおよびβリン酸三カルシウムならびにヒドロキシアパタイト粒子）、薬剤（例えば、麻酔薬、抗炎症剤、刺激低減剤、血管収縮剤または血管拡張剤、抗凝固剤、湿度提供物質、免疫抑制剤、抗生物質など）、ならびに成長因子、ペプチド、またはタンパク質（例えば、ニューロトキシン）が、ゲルに添加され得る。特に、リドカインなどの麻酔薬が、ゲルに添加され得る。好ましくは、リドカインは、組成物の総重量に対して０．０５～５．０重量％、０．１～２．０重量％、０．１～１．０重量％、０．１～０．５重量％、０．１～０．４重量％、０．２～０．４重量％、または０．２～０．３重量％の濃度でゲル中に含まれる。
好ましくは、ステップｉ）における任意選択の濃縮および／またはステップｉｉ）における透析濾過は、１５℃～８０℃、好ましくは２０℃～７０℃の範囲の温度で実施される。
好ましい実施形態では、ステップｉｉ）における透析濾過および任意選択の濃縮ステップｉ）は、６０℃～７０℃の範囲の温度で、好ましくは６０℃～７０℃の範囲の温度で、２～４時間（例えば、３．５時間）の期間実施される。ヒドロゲルの粘度が低下するため、特に６０℃～７０℃の範囲の温度が有利である。
特定の実施形態では、ステップａ）において、ゲルは、不要な分子を低減するためにさらに熱処理を受けており、最大４時間、６０℃が適用される。
動的濾過装置は、装置および／または通路を蒸気でリンスするための滅菌手段、好ましくは純粋な蒸気、滅菌流体、特に洗浄液、好ましくは濾過水、および／または滅菌された／粒子を含まない空気を含み得る。滅菌手段は、滅菌流体を含む供給ユニット、および滅菌流体のための貯蔵ユニットを含み得る。
特定の実施形態では、ゲルは、動的濾過装置内において１２１℃～１３５℃で約２～３０分の保持時間で滅菌される。
特定の実施形態では、本発明による方法は、１０時間未満、特に５時間未満で行われる。
本発明による方法は、
ｉ）真空（２０～２００ミリバール）下で気泡を除去するためにゲルを脱気するステップ、
ｉｉ）ゲルをシリンジに充填するステップ、
ｉｉｉ）オートクレーブ内で熱によりシリンジ内のゲルを滅菌するステップ、をさらに含み得る。
ｉ）真空（２０～２００ミリバール）下で気泡を除去するためにゲルを脱気するステップ、
ｉｉ）ゲルをシリンジに充填するステップ、
ｉｉｉ）オートクレーブ内で熱によりシリンジ内のゲルを滅菌するステップ、をさらに含み得る。
別の態様では、本発明は、本発明による方法によって得られる架橋生体高分子ベースのヒドロゲルに関する。
別の態様では、本発明は、審美的用途、特に軟組織増強のための、本発明による方法によって得られた架橋生体高分子ベースのヒドロゲルの使用に関する。
以下に、本発明による方法をより詳細に説明する。
実施例１：ゲルの希釈ステップ、濃縮ステップ、および透析濾過ステップを含む方法
ＢＤＤＥ（例えば、ＷＯ２００５／０８５３２９を参照）で架橋され、２４ｍｇ／ｇの初期濃度を呈するヒアルロン酸ヒドロゲルを、Ｎａ２ＨＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：０，９９４ｇ／Ｌ；ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：０．５１ｇ／Ｌ；マンニトール：４２ｇ／Ｌ、および注入用水を含む緩衝液を使用して、１：４～１：８の範囲で希釈した。希釈したゲルを容器に移し、パイプまたはチューブを介して動的濾過装置の入口に接続した。動的濾過装置は、１枚のフィルターディスク（０，０３４ｍ２のフィルター面積、直径１５２ｍｍ、孔径７ｎｍ）、ゲル貯蔵器としての１つの容器、および緩衝液貯蔵器としての第２の容器を有する、Ｋｒａｕｓｓ Ｍａｆｆｅｉ動的クロスフローフィルターＤＣＦ１５２／Ｓ（Ａｎｄｒｉｔｚ ＡＧ）で構成された。両方の容器は、チューブとボールバルブを介してＤＣＦ１５２／Ｓの入口ポートに接続され、さまざまな処理ステップでそれぞれの媒体を選択した。ＤＣＦ１５２／Ｓのハウジングのダブルジャケットを冷蔵サーキュレーターに接続し、ダブルジャケット内の温度を設定温度２０℃に維持した。ＤＣＦ１５２／Ｓの濾液を容器に集め、天秤上に置いて濾液の量を測定した。次のステップが適用された。
ｉ）希釈したゲルを含む閉じられたゲル容器に、圧力（１．５バール）を加えてゲルを濃縮し、ＤＣＦ１５２／Ｓの入口ポートへの道を開き、フィルターディスクと中空シャフトを介して濾液を除去するステップ（ＷＯ００／４７３１２を参照）。フィルターディスクは１５０ｒｐｍで回転させた。ゲル中のヒアルロン酸の濃度が２４ｍｇ／ｇになるまでゲルを濃縮した。
ｉｉ）緩衝液を含む閉じられた緩衝液容器に圧力（１．５バール）を加え、Ｎａ２ＨＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：０，９９４ｇ／Ｌ；ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：０．５１ｇ／Ｌ；マンニトール：４２ｇ／Ｌ、および注入用水を含む緩衝溶液で透析濾過を行い、ＤＣＦ １５２／Ｓの入口ポートへの道を開き、フィルターディスクおよび中空シャフトを介して濾液を除去するステップ（ＷＯ００／４７３１２を参照）。緩衝溶液にはリドカイン（０，２７～０．３３ｗ／ｗ％）が含まれている場合がある。別の方法として、リドカインは透析濾過後に添加され得る。フィルターディスクは１５０ｒｐｍで回転させた。ＢＤＤＥが定量限界未満になるまでゲルを濾過した。
ＢＤＤＥ（例えば、ＷＯ２００５／０８５３２９を参照）で架橋され、２４ｍｇ／ｇの初期濃度を呈するヒアルロン酸ヒドロゲルを、Ｎａ２ＨＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：０，９９４ｇ／Ｌ；ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：０．５１ｇ／Ｌ；マンニトール：４２ｇ／Ｌ、および注入用水を含む緩衝液を使用して、１：４～１：８の範囲で希釈した。希釈したゲルを容器に移し、パイプまたはチューブを介して動的濾過装置の入口に接続した。動的濾過装置は、１枚のフィルターディスク（０，０３４ｍ２のフィルター面積、直径１５２ｍｍ、孔径７ｎｍ）、ゲル貯蔵器としての１つの容器、および緩衝液貯蔵器としての第２の容器を有する、Ｋｒａｕｓｓ Ｍａｆｆｅｉ動的クロスフローフィルターＤＣＦ１５２／Ｓ（Ａｎｄｒｉｔｚ ＡＧ）で構成された。両方の容器は、チューブとボールバルブを介してＤＣＦ１５２／Ｓの入口ポートに接続され、さまざまな処理ステップでそれぞれの媒体を選択した。ＤＣＦ１５２／Ｓのハウジングのダブルジャケットを冷蔵サーキュレーターに接続し、ダブルジャケット内の温度を設定温度２０℃に維持した。ＤＣＦ１５２／Ｓの濾液を容器に集め、天秤上に置いて濾液の量を測定した。次のステップが適用された。
ｉ）希釈したゲルを含む閉じられたゲル容器に、圧力（１．５バール）を加えてゲルを濃縮し、ＤＣＦ１５２／Ｓの入口ポートへの道を開き、フィルターディスクと中空シャフトを介して濾液を除去するステップ（ＷＯ００／４７３１２を参照）。フィルターディスクは１５０ｒｐｍで回転させた。ゲル中のヒアルロン酸の濃度が２４ｍｇ／ｇになるまでゲルを濃縮した。
ｉｉ）緩衝液を含む閉じられた緩衝液容器に圧力（１．５バール）を加え、Ｎａ２ＨＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：０，９９４ｇ／Ｌ；ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：０．５１ｇ／Ｌ；マンニトール：４２ｇ／Ｌ、および注入用水を含む緩衝溶液で透析濾過を行い、ＤＣＦ １５２／Ｓの入口ポートへの道を開き、フィルターディスクおよび中空シャフトを介して濾液を除去するステップ（ＷＯ００／４７３１２を参照）。緩衝溶液にはリドカイン（０，２７～０．３３ｗ／ｗ％）が含まれている場合がある。別の方法として、リドカインは透析濾過後に添加され得る。フィルターディスクは１５０ｒｐｍで回転させた。ＢＤＤＥが定量限界未満になるまでゲルを濾過した。
ＢＤＤＥの量は、以下の方法に従って測定された。
１．試料調製：
ａ．ＨＡの酵素分解
ＨＡは、ヒアルロニダーゼ溶液を添加し、その後粘度が低下するまでわずかに振盪させながら１～４時間インキュベートすることにより分解した。
ｂ．ＢＤＤＥの抽出
ＢＤＤＥは、酢酸エチル（５％ｖ／ｖ）を添加し、４００ｒｐｍで２０分間軌道振盪させることにより、分解した試料（ａで説明）から抽出した。溶液を５０００ｒｐｍで１０分間遠心分離させて、有機相と水相を分離した。ＢＤＤＥを含む有機相をＧＣバイアルに移した。
２．ガスクロマトグラフ測定
ａ．５μＬの試料（１ｂで説明）をＧＣ（スプリットインジェクター、スプリット比１：５、２５０℃）に注入し、１００℃－４０℃／分－２８０℃の温度傾斜を使用して、および２８０℃で３０秒間の最終保持によって、ＤＢ－１カラム（ＡｇｉｌｅｎｔＤＢ－１、３０ｍ、内径０．２５ｍｍ、０．２５μｍフィルム）で分離した。検出器は、ＦＩＤを使用した。
ｂ．データ評価は、欧州薬局方第２．２．４６章に準拠した内部標準法によって実施された。
実施例１による一つの実験の結果を以下の表１に示す。
１．試料調製：
ａ．ＨＡの酵素分解
ＨＡは、ヒアルロニダーゼ溶液を添加し、その後粘度が低下するまでわずかに振盪させながら１～４時間インキュベートすることにより分解した。
ｂ．ＢＤＤＥの抽出
ＢＤＤＥは、酢酸エチル（５％ｖ／ｖ）を添加し、４００ｒｐｍで２０分間軌道振盪させることにより、分解した試料（ａで説明）から抽出した。溶液を５０００ｒｐｍで１０分間遠心分離させて、有機相と水相を分離した。ＢＤＤＥを含む有機相をＧＣバイアルに移した。
２．ガスクロマトグラフ測定
ａ．５μＬの試料（１ｂで説明）をＧＣ（スプリットインジェクター、スプリット比１：５、２５０℃）に注入し、１００℃－４０℃／分－２８０℃の温度傾斜を使用して、および２８０℃で３０秒間の最終保持によって、ＤＢ－１カラム（ＡｇｉｌｅｎｔＤＢ－１、３０ｍ、内径０．２５ｍｍ、０．２５μｍフィルム）で分離した。検出器は、ＦＩＤを使用した。
ｂ．データ評価は、欧州薬局方第２．２．４６章に準拠した内部標準法によって実施された。
実施例１による一つの実験の結果を以下の表１に示す。
ゲルの構造安定性は、２つの異なるゲルの比較を示す図１からわかるように、本発明による方法の間維持された。一方のゲルは本発明に従って処理され（「ＤＣＦゲル」）、他方のゲルは標準的な方法で処理された（「標準ゲル」）。
実線は、標準的な方法に従って生成された透析後のゲルのＧ’、Ｇ’’、およびηの特徴的な進行を表し、点線は、本発明に従って処理されたゲルの特徴的な進行を表す。
ゲルの特性評価に一般的に使用される周波数試験で示された曲線の進行に関して、有意差がなかったことは明らかである。本発明によるゲルに関連する曲線は、ゲルのＨＡ濃度がわずかに低いため、標準ゲルに関連する曲線よりもわずかに低い。ゲルの構造的安定性に関して、Ｇ’およびＧ’’の平行な増加（Ｇ’＞Ｇ’’）は、ゲルが本発明による方法の間、その架橋構造を維持したことを明確に示している。
さらに、図２は、両方のゲル（「ＤＣＦゲル」と標準ゲル」、上記参照）のフローポイントが同一であることを示し、これはさらに、本発明に従って処理されたゲルの構造安定性が維持されたことを示している。
実施例２：ゲルを希釈するステップなしでゲルを透析濾過する方法
ＢＤＤＥ（例えば、ＷＯ２００５／０８５３２９を参照）で架橋され、３２～３５ｍｇ／ｇの濃度を呈するヒアルロン酸ヒドロゲルが、動的濾過装置の処理チャンバに直接ポンプで送られた。ゲルには２２６．８ｐｐｍの非結合ＢＤＤＥが含まれていた。動的濾過装置は、１枚のフィルターディスク（０，０３４ｍ２のフィルター面積、直径１５２ｍｍ、孔径５ｎｍ）、ゲル貯蔵器としての１つの容器、および緩衝液貯蔵器としての第２の容器を有するＫｒａｕｓｓ Ｍａｆｆｅｉ動的クロスフローフィルターＤＣＦ １５２／Ｓ（Ａｎｄｒｉｔｚ ＡＧ）で構成された。両方の容器は、チューブとボールバルブを介してＤＣＦ １５２／Ｓの入口ポートに接続され、さまざまな処理ステップでそれぞれの媒体を選択するようにした。ＤＣＦ １５２／Ｓのハウジングのダブルジャケットを冷蔵サーキュレーターに接続し、ダブルジャケット内の温度を設定温度２０℃に維持した。ＤＣＦ １５２／Ｓの濾液を容器に集め、天秤上に置いて濾液の量を測定した。次のステップが適用された。
ｉ）緩衝液を含む閉じられた緩衝液容器に圧力（１．５バール）を加え、Ｎａ２ＨＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：５，９６ｇ／Ｌ；ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：２，５７ｇ／Ｌ；ＮａＣｌ：２，２９ｇ／Ｌ、および注入用水を含む緩衝溶液で透析濾過を行い、ＤＣＦ１５２／Ｓの入口ポートへの道を開き、フィルターディスクおよび中空シャフトを介して濾液を除去するステップ（ＷＯ００／４７３１２を参照）。緩衝溶液には、リドカイン（０，２７～０．３３ｗ／ｗ％）が含まれている場合がある。別の方法として、リドカインは透析濾過後に添加され得る。フィルターディスクを１５０ｒｐｍ（１／分）で回転させた。未結合のＢＤＤＥが定量限界（ＬＯＱ）未満になるまで、ゲルを濾過した。ＢＤＤＥの量は、上で説明したように測定された（実施例１を参照）。動的濾過処理は２時間１分以内に実施された。
さらなる実験の結果を次の表２に示す。
ＢＤＤＥ（例えば、ＷＯ２００５／０８５３２９を参照）で架橋され、３２～３５ｍｇ／ｇの濃度を呈するヒアルロン酸ヒドロゲルが、動的濾過装置の処理チャンバに直接ポンプで送られた。ゲルには２２６．８ｐｐｍの非結合ＢＤＤＥが含まれていた。動的濾過装置は、１枚のフィルターディスク（０，０３４ｍ２のフィルター面積、直径１５２ｍｍ、孔径５ｎｍ）、ゲル貯蔵器としての１つの容器、および緩衝液貯蔵器としての第２の容器を有するＫｒａｕｓｓ Ｍａｆｆｅｉ動的クロスフローフィルターＤＣＦ １５２／Ｓ（Ａｎｄｒｉｔｚ ＡＧ）で構成された。両方の容器は、チューブとボールバルブを介してＤＣＦ １５２／Ｓの入口ポートに接続され、さまざまな処理ステップでそれぞれの媒体を選択するようにした。ＤＣＦ １５２／Ｓのハウジングのダブルジャケットを冷蔵サーキュレーターに接続し、ダブルジャケット内の温度を設定温度２０℃に維持した。ＤＣＦ １５２／Ｓの濾液を容器に集め、天秤上に置いて濾液の量を測定した。次のステップが適用された。
ｉ）緩衝液を含む閉じられた緩衝液容器に圧力（１．５バール）を加え、Ｎａ２ＨＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：５，９６ｇ／Ｌ；ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ：２，５７ｇ／Ｌ；ＮａＣｌ：２，２９ｇ／Ｌ、および注入用水を含む緩衝溶液で透析濾過を行い、ＤＣＦ１５２／Ｓの入口ポートへの道を開き、フィルターディスクおよび中空シャフトを介して濾液を除去するステップ（ＷＯ００／４７３１２を参照）。緩衝溶液には、リドカイン（０，２７～０．３３ｗ／ｗ％）が含まれている場合がある。別の方法として、リドカインは透析濾過後に添加され得る。フィルターディスクを１５０ｒｐｍ（１／分）で回転させた。未結合のＢＤＤＥが定量限界（ＬＯＱ）未満になるまで、ゲルを濾過した。ＢＤＤＥの量は、上で説明したように測定された（実施例１を参照）。動的濾過処理は２時間１分以内に実施された。
さらなる実験の結果を次の表２に示す。
ゲルの構造的安定性が本発明による方法の間維持されたという事実のさらなる例を、図３に見ることができる。実施例２による方法が適用された後、ゲルの特性評価に一般的に使用される周波数試験を活用して、ゲルを分析した。使用した周波数範囲は０．１～１０Ｈｚであった。Ｇ’およびＧ’’（Ｇ’＞Ｇ’’）の平行な増加は、ゲル（「ＤＣＦゲル」）が実施例２による方法の間、その架橋構造を維持したことを明確に示している。
実施例３：ゲルを希釈するステップなしでゲルを透析濾過し、６枚のフィルターディスクを備えた動的濾過装置を使用する方法
実施例３は、上記の実施例２に従って実施されたが、使用された動的濾過装置は、（実施例１および実施例２のように１枚ではなく）６枚のフィルターディスク（フィルター面積０，０３４ｍ２、直径１５２ｍｍ、孔径５ｎｍ）を有するＫｒａｕｓｓ Ｍａｆｆｅｉ動的クロスフローフィルターＤＣＦ １５２／Ｓ（Ａｎｄｒｉｔｚ ＡＧ）である点が異なる。ＢＤＤＥ（例えば、ＷＯ２００５／０８５３２９を参照）で架橋され、６６ｍｇ／ｇの濃度を呈するヒアルロン酸ヒドロゲルを、実施例１および実施例２に記載の緩衝溶液を使用してファクター１：２で希釈した。約３３ｍｇ／ｇの濃度を有するヒアルロン酸ヒドロゲルを、動的濾過装置の処理チャンバに直接ポンプで送った。ゲルには２２６．８ｐｐｍの非結合ＢＤＤＥが含まれていた。
実施例３は、上記の実施例２に従って実施されたが、使用された動的濾過装置は、（実施例１および実施例２のように１枚ではなく）６枚のフィルターディスク（フィルター面積０，０３４ｍ２、直径１５２ｍｍ、孔径５ｎｍ）を有するＫｒａｕｓｓ Ｍａｆｆｅｉ動的クロスフローフィルターＤＣＦ １５２／Ｓ（Ａｎｄｒｉｔｚ ＡＧ）である点が異なる。ＢＤＤＥ（例えば、ＷＯ２００５／０８５３２９を参照）で架橋され、６６ｍｇ／ｇの濃度を呈するヒアルロン酸ヒドロゲルを、実施例１および実施例２に記載の緩衝溶液を使用してファクター１：２で希釈した。約３３ｍｇ／ｇの濃度を有するヒアルロン酸ヒドロゲルを、動的濾過装置の処理チャンバに直接ポンプで送った。ゲルには２２６．８ｐｐｍの非結合ＢＤＤＥが含まれていた。
透析濾過は、実施例２に記載されているように実施され、異なる処理条件が表３に示されている。透析濾過は、ＢＤＤＥが定量限界未満になるまで、通常は濾液の体積が濾過装置のチャンバの体積の７倍になるまで実施された。
ＬＯＱ：定量限界
ゲルのＢＤＤＥ：最初のＢＤＤＥ含量
ＤＣＦのＢＤＤＥ：濾過後のヒドロゲルの最終のＢＤＤＥ含量
ゲルのＢＤＤＥ：最初のＢＤＤＥ含量
ＤＣＦのＢＤＤＥ：濾過後のヒドロゲルの最終のＢＤＤＥ含量
ゲルの構造安定性は、図４（試行４）および図５（試行５）に示すように、実施例３による試行４および試行５によるＤＣＦ方法の間維持された。実施例３による方法が適用された後、ゲルは、ゲルの特性評価に一般的に使用される周波数試験を活用して分析された。使用した周波数範囲は０．１～１０Ｈｚであった。Ｇ’およびＧ’’の平行な増加（Ｇ’＞Ｇ’’）は、実施例３（試行４および試行５）による方法の間、ゲルがそれらの架橋構造を維持したことを明確に示している。
驚くべきことに、実施例２と比較して、フィルターディスクの数および回転速度が増加した場合、ヒドロゲルの構造が悪影響を受けない（すなわち、架橋構造が維持される）ことが見出された。典型的には、剪断力は、ディスクの数が増え、回転速度が上がると増加する。
Claims (15)
- 化学架橋剤によって架橋された構造を有する生体高分子系ヒドロゲルの動的濾過の方法であって、
５ｎｍ～２μｍの孔径を有する１～１０枚の回転式の半透性中空フィルターディスクを有する処理チャンバ、該処理チャンバに接続されるゲル貯蔵器及び緩衝液貯蔵器を備えた動的濾過装置を使用し、
下記のステップｉ）及びステップｉｉ）を含み、
ステップｉ）前記ゲル貯蔵器に０．５～６バールの過圧を適用して前記生体高分子系ヒドロゲルを前記処理チャンバに移送し、回転速度が２０ １／分～５００ １／分の前記半透性中空フィルターディスクを用いることにより、前記生体高分子系ヒドロゲルを１０～７０ｍｇ／ｇの濃度まで濃縮するか、または、前記処理チャンバに１０～７０ｍｇ／ｇの濃度の前記生体高分子系ヒドロゲルをポンプで直接移送するステップ、
ステップｉｉ）前記緩衝液貯蔵器に０．５～６バールの過圧を適用して緩衝液を前記処理チャンバに移送し、濾液が生成するのと同じ速度で前記処理チャンバに緩衝液を加えつつ、回転速度が２０ １／分～５００ １／分の前記半透性中空フィルターディスクを用いることにより透析濾過を行い、未反応の化学架橋剤及びその分解生成物を減らすステップ、
前記生体高分子系ヒドロゲルがヒアルロン酸、ヘパロサン、それらの塩若しくは誘導体、又はそれらの組み合わせから作られ、
前記化学架橋剤が１，４－ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）である、方法。 - 前記方法が、非架橋ポリマー及び水を含む混合物を前記生体高分子系ヒドロゲルに添加するステップを更に含む、請求項１記載の方法。
- 前記非架橋ポリマーが非架橋ヒアルロン酸である、請求項２記載の方法。
- 前記半透性中空フィルターディスクが、３０ｎｍ～６００ｎｍの孔径を有する、請求項１記載の方法。
- 前記半透性中空フィルターディスクが、８０ｎｍ～３００ｎｍの孔径を有する、請求項１記載の方法。
- 前記半透性中空フィルターディスクが、５ｎｍ～６０ｎｍの孔径を有する、請求項１記載の方法。
- 前記半透性中空フィルターディスクがセラミック、金属、またはポリマー材料で作られる、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記生体高分子系ヒドロゲルがヒアルロン酸から作られており、ステップｉｉ）における前記透析濾過が、２０ １／分～５００ １／分の範囲内の回転速度、および０．５～３バールの範囲内の圧力を適用することによって実施され、ステップｉｉ）における前記透析濾過が、１０～７０ｍｇ／ｇの範囲の前記生体高分子系ヒドロゲルの濃度で実施される、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
- 透析濾過中または透析濾過後に麻酔剤が前記生体高分子系ヒドロゲルに添加される、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
- 透析濾過中または透析濾過後にリドカインが前記生体高分子系ヒドロゲルに添加される、請求項９に記載の方法。
- ステップｉｉ）における前記透析濾過が、６０℃～７０℃の範囲の温度で、２～４時間実施される、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。
- ステップｉｉ）における前記透析濾過及び前記ステップｉ）が、６０℃～７０℃の範囲の温度で、２～４時間の時間実施される、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記生体高分子系ヒドロゲルが、２～３０分の保持時間の間、１２１℃～１３５℃で前記動的濾過装置内で滅菌される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ステップｉ）及び前記ステップｉｉ）が、１０時間未満で行われる、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ステップｉ）及び前記ステップｉｉ）が、５時間未満で行われる、請求項１４記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EPPCT/EP2018/071328 | 2018-08-07 | ||
| EP2018071328 | 2018-08-07 | ||
| PCT/EP2019/071096 WO2020030629A1 (en) | 2018-08-07 | 2019-08-06 | Method for dynamic filtration of a cross-linked hydrogel |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2021533975A JP2021533975A (ja) | 2021-12-09 |
| JP7474239B2 true JP7474239B2 (ja) | 2024-04-24 |
Family
ID=63143145
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2021505428A Active JP7474239B2 (ja) | 2018-08-07 | 2019-08-06 | 架橋ヒドロゲルの動的濾過の方法 |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210299335A1 (ja) |
| EP (1) | EP3833695A1 (ja) |
| JP (1) | JP7474239B2 (ja) |
| KR (1) | KR20210041562A (ja) |
| CN (1) | CN112533960B (ja) |
| AU (1) | AU2019319024B2 (ja) |
| BR (1) | BR112021001515A2 (ja) |
| CA (1) | CA3108125A1 (ja) |
| IL (1) | IL280439A (ja) |
| MX (1) | MX2021001208A (ja) |
| SG (1) | SG11202101017SA (ja) |
| WO (1) | WO2020030629A1 (ja) |
| ZA (1) | ZA202100068B (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TW202317214A (zh) | 2021-06-23 | 2023-05-01 | 德商莫茲製藥有限兩合公司 | 以絲蛋白交聯多醣及所得材料之用途 |
| EP4362993A1 (en) | 2021-06-30 | 2024-05-08 | Merz Pharma GmbH & Co. KGaA | Hyaluronic acid dermal fillers crosslinked with polyethylene glycol diglycidyl ether, method for making same and uses thereof |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005112888A8 (en) | 2004-05-20 | 2007-01-04 | Mentor Corp | Methods for making injectable polymer hydrogels |
| JP2007519779A (ja) | 2003-12-30 | 2007-07-19 | ジェンザイム コーポレイション | 架橋したヒアルロナンおよび／またはハイランに由来する粘着性ゲル、その調製および使用法 |
| JP2011529762A (ja) | 2008-08-04 | 2011-12-15 | アラーガン・アンデュストリー・ソシエテ・パール・アクシオン・サンプリフィエ | 麻酔剤を含有するヒアルロン酸系ゲル |
| JP2015526537A (ja) | 2012-06-15 | 2015-09-10 | メルツ ファーマ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディトゲゼルシャフト アウフ アクティーン | ヒアルロン酸に基づく組成物の調製方法 |
Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60194960A (ja) * | 1984-03-17 | 1985-10-03 | テルモ株式会社 | 体液濾過装置 |
| US5143724A (en) | 1990-07-09 | 1992-09-01 | Biomatrix, Inc. | Biocompatible viscoelastic gel slurries, their preparation and use |
| US5679249A (en) * | 1991-12-24 | 1997-10-21 | Pall Corporation | Dynamic filter system |
| AT406936B (de) | 1999-02-08 | 2000-10-25 | Andritz Patentverwaltung | Verfahren und vorrichtung zur querstromfiltration |
| FR2861734B1 (fr) | 2003-04-10 | 2006-04-14 | Corneal Ind | Reticulation de polysaccharides de faible et forte masse moleculaire; preparation d'hydrogels monophasiques injectables; polysaccharides et hydrogels obtenus |
| FR2865737B1 (fr) | 2004-02-03 | 2006-03-31 | Anteis Sa | Gel reticule biocompatible |
| US20100035838A1 (en) | 2006-09-19 | 2010-02-11 | Geoffrey Kenneth Heber | Cross-linked polysaccharide gels |
| FR2909560B1 (fr) | 2006-12-06 | 2012-12-28 | Fabre Pierre Dermo Cosmetique | Gel d'acide hyaluronique pour injection intradermique |
| EP2222715B1 (en) | 2007-12-19 | 2019-07-24 | Evonik Degussa GmbH | Crosslinked hyaluronic acid in emulsion |
| ITMI20072416A1 (it) * | 2007-12-21 | 2009-06-22 | Sigea Srl | Derivati polisaccaridici dell'acido lipoico, loro preparazione ed uso come dermocosmetici e presidi medicali |
| FR2938187B1 (fr) | 2008-11-07 | 2012-08-17 | Anteis Sa | Composition injectable a base d'acide hyaluronique ou l'un de ses sels, de polyols et de lidocaine, sterilisee a la chaleur |
| EP2413894B1 (en) | 2009-04-02 | 2017-01-04 | Allergan, Inc. | Hair-like shaped hydrogels for soft tissue augmentation |
| CN102399295B (zh) * | 2010-09-09 | 2013-11-06 | 常州百瑞吉生物医药有限公司 | 低巯基化改性度生物相容高分子巯基化衍生物及其交联材料和用途 |
| PT2637710T (pt) | 2010-11-08 | 2017-07-12 | Allergan Ind Sas | Formulações à base de ácido hialurónico |
| US9393263B2 (en) | 2011-06-03 | 2016-07-19 | Allergan, Inc. | Dermal filler compositions including antioxidants |
| US9408797B2 (en) | 2011-06-03 | 2016-08-09 | Allergan, Inc. | Dermal filler compositions for fine line treatment |
| FR2997085B1 (fr) | 2012-10-24 | 2015-05-29 | Teoxane | Procede de preparation d'un gel reticule |
| RU2582702C1 (ru) * | 2015-08-19 | 2016-04-27 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный научно-исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "ФНИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи" Минздрава России) | Способ получения композиции на основе модифицированного гиалуроната натрия, композиция на основе модифицированного гиалуроната натрия и ее применение |
| US20180326375A1 (en) * | 2015-09-01 | 2018-11-15 | Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa | Method of making a cross-linked polymer gel and device for performing the method |
| US11324854B2 (en) * | 2017-11-17 | 2022-05-10 | Altergon Sa | Resorbable implantable device based on crosslinked glycosaminoglycans, and process for the preparation thereof |
-
2019
- 2019-08-06 WO PCT/EP2019/071096 patent/WO2020030629A1/en active Application Filing
- 2019-08-06 KR KR1020217003173A patent/KR20210041562A/ko unknown
- 2019-08-06 US US17/263,973 patent/US20210299335A1/en active Pending
- 2019-08-06 EP EP19746507.3A patent/EP3833695A1/en active Pending
- 2019-08-06 AU AU2019319024A patent/AU2019319024B2/en active Active
- 2019-08-06 SG SG11202101017SA patent/SG11202101017SA/en unknown
- 2019-08-06 CA CA3108125A patent/CA3108125A1/en active Pending
- 2019-08-06 BR BR112021001515-9A patent/BR112021001515A2/pt active Search and Examination
- 2019-08-06 CN CN201980050070.9A patent/CN112533960B/zh active Active
- 2019-08-06 JP JP2021505428A patent/JP7474239B2/ja active Active
- 2019-08-06 MX MX2021001208A patent/MX2021001208A/es unknown
-
2021
- 2021-01-05 ZA ZA2021/00068A patent/ZA202100068B/en unknown
- 2021-01-27 IL IL280439A patent/IL280439A/en unknown
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007519779A (ja) | 2003-12-30 | 2007-07-19 | ジェンザイム コーポレイション | 架橋したヒアルロナンおよび／またはハイランに由来する粘着性ゲル、その調製および使用法 |
| WO2005112888A8 (en) | 2004-05-20 | 2007-01-04 | Mentor Corp | Methods for making injectable polymer hydrogels |
| JP2011529762A (ja) | 2008-08-04 | 2011-12-15 | アラーガン・アンデュストリー・ソシエテ・パール・アクシオン・サンプリフィエ | 麻酔剤を含有するヒアルロン酸系ゲル |
| JP2015526537A (ja) | 2012-06-15 | 2015-09-10 | メルツ ファーマ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディトゲゼルシャフト アウフ アクティーン | ヒアルロン酸に基づく組成物の調製方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20210041562A (ko) | 2021-04-15 |
| SG11202101017SA (en) | 2021-02-25 |
| MX2021001208A (es) | 2021-06-15 |
| CA3108125A1 (en) | 2020-02-13 |
| CN112533960A (zh) | 2021-03-19 |
| IL280439A (en) | 2021-03-01 |
| CN112533960B (zh) | 2022-12-27 |
| BR112021001515A2 (pt) | 2021-04-27 |
| US20210299335A1 (en) | 2021-09-30 |
| EP3833695A1 (en) | 2021-06-16 |
| JP2021533975A (ja) | 2021-12-09 |
| AU2019319024A1 (en) | 2021-02-18 |
| ZA202100068B (en) | 2021-09-29 |
| WO2020030629A1 (en) | 2020-02-13 |
| AU2019319024B2 (en) | 2024-01-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7474239B2 (ja) | 架橋ヒドロゲルの動的濾過の方法 | |
| Fissell et al. | High-performance silicon nanopore hemofiltration membranes | |
| Yang et al. | Silibinin as a natural antioxidant for modifying polysulfone membranes to suppress hemodialysis-induced oxidative stress | |
| KR101590666B1 (ko) | 세포 증식을 위한 조사된 멤브레인 | |
| US20090269323A1 (en) | Non-amphiphile-based water-in-water emulsion and uses thereof | |
| TW200932330A (en) | Protein purification method | |
| US9901601B2 (en) | Method for preparing decellularized tissue product, and graft provided with decellularized tissue product | |
| JP7388722B2 (ja) | アルギン酸中空マイクロファイバ | |
| JP2007231225A (ja) | エンドトキシン含有量を低減したゼラチンの製造方法および低エンドトキシンゼラチン | |
| Ter Beek et al. | New membranes based on polyethersulfone–SlipSkin™ polymer blends with low fouling and high blood compatibility | |
| Fu et al. | Synthesis and biocompatibility of an argatroban-modified polysulfone membrane that directly inhibits thrombosis | |
| JP2004305840A (ja) | 中空糸膜の保存方法 | |
| JPH1099431A (ja) | 体外循環により血液を処理する装置およびその製造方法 | |
| Chiang et al. | Nonsolvent-induced phase separation preparation of porous TOPO-mixed polyethersulfone membranes for selective clearance of p-cresol from simulated serum | |
| JP2005224604A (ja) | 血液浄化膜およびそれを用いた血液浄化器 | |
| Bakhshayeshi et al. | Effect of solution pH on protein transmission and membrane capacity during virus filtration | |
| KR20130124798A (ko) | 합성 고분자, 폴리사카라이드 및 단백질을 포함하는 크라이오젤 스캐폴드 및 상기 스캐폴드를 이용한 조직 재생방법 | |
| RU2803656C2 (ru) | Способ динамической фильтрации поперечно-сшитого гидрогеля | |
| WO2018020285A4 (en) | Flow capture device and method for removing cells from blood | |
| CN115337473B (zh) | 一种用于体外膜肺氧合系统气体交换膜的血液相容性涂层及其制备方法和应用 | |
| Qin et al. | Improving the Blood Compatibility and the Gas Permeability of Polyether Ether Ketone Hollow Fiber Membrane Used for Membrane Oxygenator via Grafting Hydrophilic Components | |
| KR102181502B1 (ko) | 에피갈로카테킨 갈레이트가 코팅된 고분자 복합체의 제조방법 및 상기 방법에 따라 제조된 고분자 복합체 | |
| Prihandana et al. | REVIEW OF SURFACE MODIFICATION OF NANOPOROUS POLYETHERSULFONE MEMBRANE AS A DIALYSIS MEMBRANE. | |
| Voicu et al. | Cellulose derivatives based membranes for biomedical applications | |
| JP4017958B2 (ja) | 細胞培養担体 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220509 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20230130 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230131 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20230427 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230726 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20231018 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20240115 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20240305 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240329 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20240412 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7474239 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |