JP7465310B2 - 多用途性且つ効率的な遺伝子発現のためのrnaレプリコン - Google Patents
多用途性且つ効率的な遺伝子発現のためのrnaレプリコン Download PDFInfo
- Publication number
- JP7465310B2 JP7465310B2 JP2022123058A JP2022123058A JP7465310B2 JP 7465310 B2 JP7465310 B2 JP 7465310B2 JP 2022123058 A JP2022123058 A JP 2022123058A JP 2022123058 A JP2022123058 A JP 2022123058A JP 7465310 B2 JP7465310 B2 JP 7465310B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- rna
- alphavirus
- sequence
- protein
- nucleic acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 title description 60
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 489
- 241000710929 Alphavirus Species 0.000 claims description 470
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 432
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 claims description 253
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 200
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 197
- 230000010076 replication Effects 0.000 claims description 191
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 claims description 149
- 108091027544 Subgenomic mRNA Proteins 0.000 claims description 137
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 76
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 64
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 64
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 48
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 41
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 39
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims description 39
- 241000710961 Semliki Forest virus Species 0.000 claims description 38
- -1 cationic lipid Chemical class 0.000 claims description 38
- 108091036078 conserved sequence Proteins 0.000 claims description 33
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims description 25
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 claims description 25
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 24
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 13
- 239000002479 lipoplex Substances 0.000 claims description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 10
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 claims description 9
- NFQBIAXADRDUGK-KWXKLSQISA-N n,n-dimethyl-2,3-bis[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienoxy]propan-1-amine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCCOCC(CN(C)C)OCCCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC NFQBIAXADRDUGK-KWXKLSQISA-N 0.000 claims description 7
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 6
- 150000003512 tertiary amines Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 5
- KWVJHCQQUFDPLU-YEUCEMRASA-N 2,3-bis[[(z)-octadec-9-enoyl]oxy]propyl-trimethylazanium Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC KWVJHCQQUFDPLU-YEUCEMRASA-N 0.000 claims description 4
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 4
- REZZEXDLIUJMMS-UHFFFAOYSA-M dimethyldioctadecylammonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC REZZEXDLIUJMMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 3
- LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[(z)-octadec-9-enoxy]propyl-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 0.000 claims description 2
- WALUVDCNGPQPOD-UHFFFAOYSA-M 2,3-di(tetradecoxy)propyl-(2-hydroxyethyl)-dimethylazanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCO)OCCCCCCCCCCCCCC WALUVDCNGPQPOD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- XULFJDKZVHTRLG-JDVCJPALSA-N DOSPA trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCNC(=O)C(CCCNCCCN)NCCCN)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC XULFJDKZVHTRLG-JDVCJPALSA-N 0.000 claims description 2
- NYDLOCKCVISJKK-WRBBJXAJSA-N [3-(dimethylamino)-2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(CN(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC NYDLOCKCVISJKK-WRBBJXAJSA-N 0.000 claims description 2
- UMGXUWVIJIQANV-UHFFFAOYSA-M didecyl(dimethyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCC UMGXUWVIJIQANV-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- OGQYPPBGSLZBEG-UHFFFAOYSA-N dimethyl(dioctadecyl)azanium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC OGQYPPBGSLZBEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 239000001294 propane Substances 0.000 claims description 2
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 639
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 312
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 182
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 170
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 170
- 108010026228 mRNA guanylyltransferase Proteins 0.000 description 149
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 140
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 94
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 85
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 84
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 84
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 84
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 79
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 75
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 75
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 67
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 66
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 62
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 58
- 238000000034 method Methods 0.000 description 54
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 49
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 46
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 46
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 45
- 101800001758 RNA-directed RNA polymerase nsP4 Proteins 0.000 description 44
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 43
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 41
- 108091034057 RNA (poly(A)) Proteins 0.000 description 40
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 39
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 34
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 34
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 33
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 33
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 33
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 32
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 31
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 29
- 201000003639 autosomal recessive cerebellar ataxia Diseases 0.000 description 29
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 29
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 29
- 241000272534 Struthio camelus Species 0.000 description 27
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 26
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 26
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 26
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 26
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 24
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 23
- 230000006870 function Effects 0.000 description 23
- 241000894007 species Species 0.000 description 23
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 22
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 22
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 22
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 22
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 22
- 241000710959 Venezuelan equine encephalitis virus Species 0.000 description 21
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 21
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 20
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 20
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 20
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 20
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 19
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 19
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 18
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 18
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 18
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 17
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 17
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 17
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 17
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 17
- 101800000515 Non-structural protein 3 Proteins 0.000 description 16
- 101800000980 Protease nsP2 Proteins 0.000 description 16
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 16
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 16
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 15
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 15
- 210000004898 n-terminal fragment Anatomy 0.000 description 15
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 15
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 15
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 14
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 14
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 13
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 13
- 241000710960 Sindbis virus Species 0.000 description 13
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 13
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 13
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 13
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 13
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 13
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 13
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 13
- 108091036407 Polyadenylation Proteins 0.000 description 12
- 102100034170 Interferon-induced, double-stranded RNA-activated protein kinase Human genes 0.000 description 11
- 101710089751 Interferon-induced, double-stranded RNA-activated protein kinase Proteins 0.000 description 11
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 11
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 11
- 210000004900 c-terminal fragment Anatomy 0.000 description 11
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 11
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 10
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 10
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 10
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 10
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 9
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 9
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 description 9
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical group C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 9
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 9
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 9
- 230000008859 change Effects 0.000 description 9
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 8
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 8
- 102100038132 Endogenous retrovirus group K member 6 Pro protein Human genes 0.000 description 8
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 8
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 8
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 8
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 8
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- 101000899111 Homo sapiens Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 7
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 7
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 7
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 7
- 230000006819 RNA synthesis Effects 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 7
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 7
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 7
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 7
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 101100223333 Caenorhabditis elegans dcap-2 gene Proteins 0.000 description 6
- 241001502567 Chikungunya virus Species 0.000 description 6
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 6
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 6
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 description 6
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 6
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 6
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 description 6
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 6
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 6
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 6
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 6
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 6
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 6
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 6
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 6
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 6
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 102100035429 Cystathionine gamma-lyase Human genes 0.000 description 5
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 description 5
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 5
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 5
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 5
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 5
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 5
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 5
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 238000004325 capillary sieving electrophoresis Methods 0.000 description 5
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 5
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 5
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 5
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 5
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 5
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 5
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 5
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 5
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 5
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 4
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 4
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 4
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 4
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 4
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 4
- 101710114167 Polyprotein P1234 Proteins 0.000 description 4
- 101710124590 Polyprotein nsP1234 Proteins 0.000 description 4
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 4
- 102400000827 Saposin-D Human genes 0.000 description 4
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 4
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 4
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 4
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 4
- 125000004437 phosphorous atom Chemical group 0.000 description 4
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 4
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 4
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 4
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 4
- 229960000856 protein c Drugs 0.000 description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 4
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 4
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- LZOIGVDSAMDBIO-LXWJMTKESA-N (2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-4-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C1=CC=CC=C1 LZOIGVDSAMDBIO-LXWJMTKESA-N 0.000 description 3
- 101100014154 Arabidopsis thaliana RACK1A gene Proteins 0.000 description 3
- 241001421757 Arcas Species 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- 102000003859 Claudin-6 Human genes 0.000 description 3
- 108090000229 Claudin-6 Proteins 0.000 description 3
- 108091033380 Coding strand Proteins 0.000 description 3
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 3
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 3
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 description 3
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 description 3
- 102100020715 Fms-related tyrosine kinase 3 ligand protein Human genes 0.000 description 3
- 101710162577 Fms-related tyrosine kinase 3 ligand protein Proteins 0.000 description 3
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- 108020005350 Initiator Codon Proteins 0.000 description 3
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 3
- 108010066345 MHC binding peptide Proteins 0.000 description 3
- 101710152005 Non-structural polyprotein Proteins 0.000 description 3
- 108090001074 Nucleocapsid Proteins Proteins 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 3
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 3
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 3
- 241000710951 Western equine encephalitis virus Species 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 3
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 3
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 3
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 210000003953 foreskin Anatomy 0.000 description 3
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 3
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 3
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 3
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 3
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002691 unilamellar liposome Substances 0.000 description 3
- LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 3-Amino-1-methyl-5H-pyrido[4,3-b]indole Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C=C(N)N=C2C LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 3-[6-[4-(trifluoromethoxy)anilino]-4-pyrimidinyl]benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(C=2N=CN=C(NC=3C=CC(OC(F)(F)F)=CC=3)C=2)=C1 WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OGHAROSJZRTIOK-KQYNXXCUSA-O 7-methylguanosine Chemical compound C1=2N=C(N)NC(=O)C=2[N+](C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OGHAROSJZRTIOK-KQYNXXCUSA-O 0.000 description 2
- 101150100998 Ace gene Proteins 0.000 description 2
- 101001020123 Arabidopsis thaliana Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit alpha Proteins 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 241000710946 Barmah Forest virus Species 0.000 description 2
- 241000608319 Bebaru virus Species 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 2
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 2
- 108020004394 Complementary RNA Proteins 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 2
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 2
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 241000710945 Eastern equine encephalitis virus Species 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 2
- HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N HA peptide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N 0.000 description 2
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 description 2
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 description 2
- 102000006947 Histones Human genes 0.000 description 2
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 108020004684 Internal Ribosome Entry Sites Proteins 0.000 description 2
- 102100031413 L-dopachrome tautomerase Human genes 0.000 description 2
- 101710093778 L-dopachrome tautomerase Proteins 0.000 description 2
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 2
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 2
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 2
- 102100028389 Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Human genes 0.000 description 2
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000710949 Middelburg virus Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 2
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 2
- 108010009413 Pyrophosphatases Proteins 0.000 description 2
- 102000009609 Pyrophosphatases Human genes 0.000 description 2
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 108010000605 Ribosomal Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000002278 Ribosomal Proteins Human genes 0.000 description 2
- 201000003176 Severe Acute Respiratory Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 101710173694 Short transient receptor potential channel 2 Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 2
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical group OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 2
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 101900001372 Vaccinia virus RNA-binding protein E3 Proteins 0.000 description 2
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 2
- 229950006790 adenosine phosphate Drugs 0.000 description 2
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 229910000085 borane Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 150000001767 cationic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 229940107161 cholesterol Drugs 0.000 description 2
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 description 2
- 229940047120 colony stimulating factors Drugs 0.000 description 2
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 2
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N cytidine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 230000037433 frameshift Effects 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 2
- RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N guanosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- 235000013928 guanylic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004226 guanylic acid Substances 0.000 description 2
- 108010064833 guanylyltransferase Proteins 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 238000003670 luciferase enzyme activity assay Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 108700043045 nanoluc Proteins 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 2
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 108010054624 red fluorescent protein Proteins 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 2
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 2
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000037432 silent mutation Effects 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 2
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 description 2
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 2
- SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N (4S)-5-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[(2S)-2-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(2S)-5-carbamimidamido-1-[[(1S)-4-carbamimidamido-1-carboxybutyl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-2-oxoethyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CNC(=O)[C@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](Cc1c[nH]cn1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(C)C)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SSOORFWOBGFTHL-OTEJMHTDSA-N 0.000 description 1
- WEYNBWVKOYCCQT-UHFFFAOYSA-N 1-(3-chloro-4-methylphenyl)-3-{2-[({5-[(dimethylamino)methyl]-2-furyl}methyl)thio]ethyl}urea Chemical compound O1C(CN(C)C)=CC=C1CSCCNC(=O)NC1=CC=C(C)C(Cl)=C1 WEYNBWVKOYCCQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010086241 2',5'-Oligoadenylate Synthetase Proteins 0.000 description 1
- 102000007445 2',5'-Oligoadenylate Synthetase Human genes 0.000 description 1
- 102100027962 2-5A-dependent ribonuclease Human genes 0.000 description 1
- 108010000834 2-5A-dependent ribonuclease Proteins 0.000 description 1
- 102100030310 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Human genes 0.000 description 1
- 101710163881 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase Proteins 0.000 description 1
- FVFVNNKYKYZTJU-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-1,3,5-triazine-2,4-diamine Chemical group NC1=NC(N)=NC(Cl)=N1 FVFVNNKYKYZTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035657 Abasia Diseases 0.000 description 1
- 101001082110 Acanthamoeba polyphaga mimivirus Eukaryotic translation initiation factor 4E homolog Proteins 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- 101710137115 Adenylyl cyclase-associated protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 208000000230 African Trypanosomiasis Diseases 0.000 description 1
- 208000007887 Alphavirus Infections Diseases 0.000 description 1
- 206010001935 American trypanosomiasis Diseases 0.000 description 1
- 102000052587 Anaphase-Promoting Complex-Cyclosome Apc3 Subunit Human genes 0.000 description 1
- 108700004606 Anaphase-Promoting Complex-Cyclosome Apc3 Subunit Proteins 0.000 description 1
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 description 1
- 102100023003 Ankyrin repeat domain-containing protein 30A Human genes 0.000 description 1
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 description 1
- 102100022977 Antithrombin-III Human genes 0.000 description 1
- 101000719121 Arabidopsis thaliana Protein MEI2-like 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000014654 Aromatase Human genes 0.000 description 1
- 108010078554 Aromatase Proteins 0.000 description 1
- 241000238421 Arthropoda Species 0.000 description 1
- 241000972773 Aulopiformes Species 0.000 description 1
- 241000178568 Aura virus Species 0.000 description 1
- 102100035526 B melanoma antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000231314 Babanki virus Species 0.000 description 1
- 102100021663 Baculoviral IAP repeat-containing protein 5 Human genes 0.000 description 1
- 108060000903 Beta-catenin Proteins 0.000 description 1
- 102000015735 Beta-catenin Human genes 0.000 description 1
- 102100023995 Beta-nerve growth factor Human genes 0.000 description 1
- 241000868136 Bijou Bridge virus Species 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000409811 Bombyx mori nucleopolyhedrovirus Species 0.000 description 1
- 238000003737 Bright-Glo Luciferase Assay System Methods 0.000 description 1
- 101150108242 CDC27 gene Proteins 0.000 description 1
- 101710156847 CTD small phosphatase-like protein Proteins 0.000 description 1
- 102100027674 CTD small phosphatase-like protein Human genes 0.000 description 1
- 101100148606 Caenorhabditis elegans pst-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 1
- 102100025570 Cancer/testis antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100039510 Cancer/testis antigen 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000282421 Canidae Species 0.000 description 1
- 101710134395 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100027668 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710134389 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100027667 Carboxy-terminal domain RNA polymerase II polypeptide A small phosphatase 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000538 Caspase-8 Proteins 0.000 description 1
- 102100026548 Caspase-8 Human genes 0.000 description 1
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 1
- 102000005575 Cellulases Human genes 0.000 description 1
- 108010084185 Cellulases Proteins 0.000 description 1
- 108020004638 Circular DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000002029 Claudin Human genes 0.000 description 1
- 108050009302 Claudin Proteins 0.000 description 1
- 102100039518 Claudin-12 Human genes 0.000 description 1
- 101710197000 Claudin-12 Proteins 0.000 description 1
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 1
- 102100023804 Coagulation factor VII Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 206010010144 Completed suicide Diseases 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- 102100040501 Contactin-associated protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010025464 Cyclin-Dependent Kinase 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100036252 Cyclin-dependent kinase 4 Human genes 0.000 description 1
- 229930183912 Cytidylic acid Natural products 0.000 description 1
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 description 1
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- 108010041986 DNA Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 229940021995 DNA vaccine Drugs 0.000 description 1
- 101001082109 Danio rerio Eukaryotic translation initiation factor 4E-1B Proteins 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005199 Dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 101100216227 Dictyostelium discoideum anapc3 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100037070 Doublecortin domain-containing protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710201734 E3 protein Proteins 0.000 description 1
- 101150091263 E3L gene Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 208000006825 Eastern Equine Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 201000005804 Eastern equine encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 206010014587 Encephalitis eastern equine Diseases 0.000 description 1
- 102100031780 Endonuclease Human genes 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 206010066919 Epidemic polyarthritis Diseases 0.000 description 1
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 241000465885 Everglades virus Species 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 102000004678 Exoribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010002700 Exoribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 108010023321 Factor VII Proteins 0.000 description 1
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 1
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 1
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 1
- 102100028043 Fibroblast growth factor 3 Human genes 0.000 description 1
- 108010022355 Fibroins Proteins 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000710198 Foot-and-mouth disease virus Species 0.000 description 1
- 241000231322 Fort Morgan virus Species 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- 241000608297 Getah virus Species 0.000 description 1
- 108010017544 Glucosylceramidase Proteins 0.000 description 1
- 102000004547 Glucosylceramidase Human genes 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 1
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102400001066 Growth hormone-binding protein Human genes 0.000 description 1
- 108010078321 Guanylate Cyclase Proteins 0.000 description 1
- 102000014469 Guanylate cyclase Human genes 0.000 description 1
- 101000757191 Homo sapiens Ankyrin repeat domain-containing protein 30A Proteins 0.000 description 1
- 101000874316 Homo sapiens B melanoma antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000856237 Homo sapiens Cancer/testis antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000889345 Homo sapiens Cancer/testis antigen 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 description 1
- 101000954709 Homo sapiens Doublecortin domain-containing protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000985516 Homo sapiens Hermansky-Pudlak syndrome 5 protein Proteins 0.000 description 1
- 101000614481 Homo sapiens Kidney-associated antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001051093 Homo sapiens Low-density lipoprotein receptor Proteins 0.000 description 1
- 101001134060 Homo sapiens Melanocyte-stimulating hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000578784 Homo sapiens Melanoma antigen recognized by T-cells 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000615488 Homo sapiens Methyl-CpG-binding domain protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001133056 Homo sapiens Mucin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000874141 Homo sapiens Probable ATP-dependent RNA helicase DDX43 Proteins 0.000 description 1
- 101000880770 Homo sapiens Protein SSX2 Proteins 0.000 description 1
- 101000679365 Homo sapiens Putative tyrosine-protein phosphatase TPTE Proteins 0.000 description 1
- 101001109419 Homo sapiens RNA-binding protein NOB1 Proteins 0.000 description 1
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000857677 Homo sapiens Runt-related transcription factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000821981 Homo sapiens Sarcoma antigen 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000665137 Homo sapiens Scm-like with four MBT domains protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000739178 Homo sapiens Secretoglobin family 3A member 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 1
- 101100508081 Human herpesvirus 1 (strain 17) ICP34.5 gene Proteins 0.000 description 1
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 1
- 108050002021 Integrator complex subunit 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108010092694 L-Selectin Proteins 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241000222722 Leishmania <genus> Species 0.000 description 1
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 1
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 1
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 1
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 102100024640 Low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006830 Luminescent Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010047357 Luminescent Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010010995 MART-1 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 241000316144 Macrodon ancylodon Species 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- 241000608292 Mayaro virus Species 0.000 description 1
- 102100034216 Melanocyte-stimulating hormone receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010057081 Merozoite Surface Protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100021299 Methyl-CpG-binding domain protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000465889 Mosso das Pedras virus Species 0.000 description 1
- 241000868135 Mucambo virus Species 0.000 description 1
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 1
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 1
- 102000007530 Neurofibromin 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010085793 Neurofibromin 1 Proteins 0.000 description 1
- 108091092724 Noncoding DNA Proteins 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102400000050 Oxytocin Human genes 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N Oxytocin Natural products N1C(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800000989 Oxytocin Proteins 0.000 description 1
- 102000036673 PRAME Human genes 0.000 description 1
- 108060006580 PRAME Proteins 0.000 description 1
- 102100034640 PWWP domain-containing DNA repair factor 3A Human genes 0.000 description 1
- 108050007154 PWWP domain-containing DNA repair factor 3A Proteins 0.000 description 1
- 208000016222 Pancreatic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000015439 Phospholipases Human genes 0.000 description 1
- 108010064785 Phospholipases Proteins 0.000 description 1
- 102000004861 Phosphoric Diester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090001050 Phosphoric Diester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 240000009188 Phyllostachys vivax Species 0.000 description 1
- 241000868134 Pixuna virus Species 0.000 description 1
- 241000224016 Plasmodium Species 0.000 description 1
- 241000223960 Plasmodium falciparum Species 0.000 description 1
- 241000223821 Plasmodium malariae Species 0.000 description 1
- 206010035501 Plasmodium malariae infection Diseases 0.000 description 1
- 241001505293 Plasmodium ovale Species 0.000 description 1
- 206010035502 Plasmodium ovale infection Diseases 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 206010036030 Polyarthritis Diseases 0.000 description 1
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 1
- 241000734672 Polygala senega Species 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 102100035724 Probable ATP-dependent RNA helicase DDX43 Human genes 0.000 description 1
- 101710093543 Probable non-specific lipid-transfer protein Proteins 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- 101800004937 Protein C Proteins 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108700040121 Protein Methyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 102000055027 Protein Methyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 102100037686 Protein SSX2 Human genes 0.000 description 1
- 102100022578 Putative tyrosine-protein phosphatase TPTE Human genes 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 241001092473 Quillaja Species 0.000 description 1
- 235000009001 Quillaja saponaria Nutrition 0.000 description 1
- 101150027249 RL1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108091000106 RNA cap binding Proteins 0.000 description 1
- 102000028391 RNA cap binding Human genes 0.000 description 1
- 108010012974 RNA triphosphatase Proteins 0.000 description 1
- 229940022005 RNA vaccine Drugs 0.000 description 1
- 102000044126 RNA-Binding Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700020471 RNA-Binding Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102100022491 RNA-binding protein NOB1 Human genes 0.000 description 1
- 101150066717 Rara gene Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 101710200092 Replicase polyprotein Proteins 0.000 description 1
- 241000328499 Rio Negro virus Species 0.000 description 1
- 241000710942 Ross River virus Species 0.000 description 1
- 102100025373 Runt-related transcription factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000608282 Sagiyama virus Species 0.000 description 1
- 101800001700 Saposin-D Proteins 0.000 description 1
- 102100021466 Sarcoma antigen 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100038689 Scm-like with four MBT domains protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000242583 Scyphozoa Species 0.000 description 1
- 102100037269 Secretoglobin family 3A member 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000184 Selectins Proteins 0.000 description 1
- 102000003800 Selectins Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 101710173693 Short transient receptor potential channel 1 Proteins 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 description 1
- 241001472492 Southern elephant seal virus Species 0.000 description 1
- 102100035748 Squamous cell carcinoma antigen recognized by T-cells 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710185775 Squamous cell carcinoma antigen recognized by T-cells 3 Proteins 0.000 description 1
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 description 1
- 108010002687 Survivin Proteins 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 101710137500 T7 RNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 108700026226 TATA Box Proteins 0.000 description 1
- 108700019889 TEL-AML1 fusion Proteins 0.000 description 1
- 102100033082 TNF receptor-associated factor 3 Human genes 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 241000868137 Tonate virus Species 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108030003004 Triphosphatases Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 241000951300 Trocara virus Species 0.000 description 1
- LVTKHGUGBGNBPL-UHFFFAOYSA-N Trp-P-1 Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C(C)=C(N)N=C2C LVTKHGUGBGNBPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000223104 Trypanosoma Species 0.000 description 1
- 241000223105 Trypanosoma brucei Species 0.000 description 1
- 241000223109 Trypanosoma cruzi Species 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108010065158 Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily Member 14 Proteins 0.000 description 1
- 102100027244 U4/U6.U5 tri-snRNP-associated protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710155955 U4/U6.U5 tri-snRNP-associated protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 1
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 1
- 241000608278 Una virus Species 0.000 description 1
- DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N Uridinemonophosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FOGRQMPFHUHIGU-UHFFFAOYSA-N Uridylic acid Natural products OC1C(OP(O)(O)=O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 FOGRQMPFHUHIGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHHZHGZBHYYWTG-INFSMZHSSA-N [(2r,3s,4r,5r)-5-(2-amino-7-methyl-6-oxo-3h-purin-9-ium-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl [[[(2r,3s,4r,5r)-5-(2-amino-6-oxo-3h-purin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-hydroxyphosphoryl] phosphate Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1[N+]([C@H]1[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=C(C(N=C(N)N4)=O)N=C3)O)O1)O)=CN2C FHHZHGZBHYYWTG-INFSMZHSSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 description 1
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000036783 anaphylactic response Effects 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-TXICZTDVSA-N beta-D-ribose Chemical group OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-TXICZTDVSA-N 0.000 description 1
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 1
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 1
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 1
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003130 blood coagulation factor inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003943 catecholamines Chemical class 0.000 description 1
- 241001233037 catfish Species 0.000 description 1
- 229920006317 cationic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000034303 cell budding Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000011748 cell maturation Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012761 co-transfection Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000205 computational method Methods 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000011970 concomitant therapy Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 1
- IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N cytidine monophosphate Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N dTMP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- CGMRCMMOCQYHAD-UHFFFAOYSA-J dicalcium hydroxide phosphate Chemical compound [OH-].[Ca++].[Ca++].[O-]P([O-])([O-])=O CGMRCMMOCQYHAD-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 1
- 102000010982 eIF-2 Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010037623 eIF-2 Kinase Proteins 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 1
- 229940012413 factor vii Drugs 0.000 description 1
- 229940012426 factor x Drugs 0.000 description 1
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 231100000221 frame shift mutation induction Toxicity 0.000 description 1
- 238000011990 functional testing Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 1
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 1
- 229940094892 gonadotropins Drugs 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 102000028718 growth factor binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091009353 growth factor binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 108010072285 growth inhibitory proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 231100000171 higher toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 208000029080 human African trypanosomiasis Diseases 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- HOPZBJPSUKPLDT-UHFFFAOYSA-N imidazo[4,5-h]quinolin-2-one Chemical class C1=CN=C2C3=NC(=O)N=C3C=CC2=C1 HOPZBJPSUKPLDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005934 immune activation Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000011293 immunotherapeutic strategy Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 230000017730 intein-mediated protein splicing Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 108010074108 interleukin-21 Proteins 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 1
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 239000002960 lipid emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108700021021 mRNA Vaccine Proteins 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000007102 metabolic function Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 150000002741 methionine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000001446 muramyl group Chemical group N[C@@H](C=O)[C@@H](O[C@@H](C(=O)*)C)[C@H](O)[C@H](O)CO 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- PUPNJSIFIXXJCH-UHFFFAOYSA-N n-(4-hydroxyphenyl)-2-(1,1,3-trioxo-1,2-benzothiazol-2-yl)acetamide Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1NC(=O)CN1S(=O)(=O)C2=CC=CC=C2C1=O PUPNJSIFIXXJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000030648 nucleus localization Effects 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001723 oxytocin Drugs 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N oxytocin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N 0.000 description 1
- UNEIHNMKASENIG-UHFFFAOYSA-N para-chlorophenylpiperazine Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1N1CCNCC1 UNEIHNMKASENIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 108010011903 peptide receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000014187 peptide receptors Human genes 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 1
- 208000030428 polyarticular arthritis Diseases 0.000 description 1
- 229920000056 polyoxyethylene ether Polymers 0.000 description 1
- 229940051841 polyoxyethylene ether Drugs 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000023603 positive regulation of transcription initiation, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000003334 potential effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 230000014424 regulation of RNA biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 239000002342 ribonucleoside Substances 0.000 description 1
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 description 1
- 235000019515 salmon Nutrition 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000010845 search algorithm Methods 0.000 description 1
- JRPHGDYSKGJTKZ-UHFFFAOYSA-N selenophosphoric acid Chemical group OP(O)([SeH])=O JRPHGDYSKGJTKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 201000002612 sleeping sickness Diseases 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 108010033419 somatotropin-binding protein Proteins 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 230000003393 splenic effect Effects 0.000 description 1
- 241000114864 ssRNA viruses Species 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000010473 stable expression Effects 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 108020003113 steroid hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005969 steroid hormone receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000000365 steroidogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002328 sterol group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 description 1
- 125000005017 substituted alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005415 substituted alkoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004426 substituted alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003107 substituted aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005346 substituted cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008362 succinate buffer Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 150000003584 thiosemicarbazones Chemical class 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 239000005495 thyroid hormone Substances 0.000 description 1
- 229940036555 thyroid hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 125000002264 triphosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])O* 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002993 trophoblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 230000029069 type 2 immune response Effects 0.000 description 1
- 241000724775 unclassified viruses Species 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N uridine 5'-monophosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 108010027510 vaccinia virus capping enzyme Proteins 0.000 description 1
- 210000003934 vacuole Anatomy 0.000 description 1
- 230000007444 viral RNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 230000017613 viral reproduction Effects 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 description 1
- 229960001134 von willebrand factor Drugs 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/36011—Togaviridae
- C12N2770/36111—Alphavirus, e.g. Sindbis virus, VEE, EEE, WEE, Semliki
- C12N2770/36141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2770/36143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Virology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Mycology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
シスレプリコンの場合、この重複は、例えば、レプリカーゼORFのコドン使用の、異なる哺乳動物標的細胞(ヒト、マウス、農場動物)への適合化を制限する。ウイルス内で見出される、5’複製認識配列の二次構造は、あらゆる標的細胞においても最適なわけではないことが考えられる。しかし、レプリカーゼORF内で結果としてもたらされる可能性が高いアミノ酸変化を、レプリカーゼ機能に対する影響について、考え、調べなければならないので、二次構造を自由に変更することはできない。また、完全なレプリカーゼORFを、異種由来のレプリカーゼと交換することも、これは、5’複製認識配列構造の破壊を結果としてもたらすので、可能ではない。
トランスレプリコンの場合、この重複は、5’複製認識配列がトランスレプリコン内に保持される必要があるので、nsP1タンパク質の断片の合成を結果としてもたらす。nsP1の断片は、典型的に、必要とされず、所望されない。つまり、所望されない翻訳は、宿主細胞に、不要な負荷をかけ、薬学的に活性のタンパク質に加えて、nsP1の断片もコードする治療適用を意図されるRNAレプリコンは、規制への懸念に直面しうる。例えば、短縮nsP1が、望ましくない副作用をもたらさないことを裏付けることが必要であろう。加えて、5’複製認識配列内の、nsP1のAUG開始コドンの存在が、異種の目的の遺伝子をコードするトランスレプリコンのデザインであって、目的の遺伝子の翻訳のための開始コドンが、リボソームの翻訳開始にアクセス可能な、最も5’側の位置にある形のデザインを妨げている。一方、インフレームにおいて、nsP1の開始コドンとの融合タンパク質(このような融合コンストラクトは、例えば、Michel等, 2007, Virology, vol. 362, pp. 475-487により記載されている)としてクローニングされない限りにおいて、先行技術のトランスレプリコンRNAからの、トランス遺伝子の5’キャップ依存性翻訳は、難題である。このような融合コンストラクトは、上記で言及した、同じ不要なnsP1断片の翻訳をもたらし、上記と同じ懸念を生じさせる。更に、融合タンパク質は、融合させた目的のトランス遺伝子の機能又は活性を変更する場合もあり、ワクチンベクターとして使用されると、融合領域にわたるペプチドが、融合させた抗原の免疫原性を変更する場合もあるので、更なる懸念も引き起こす。
機能的なアルファウイルス非構造タンパク質を発現させるためのRNAコンストラクトと、
トランスで、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質により複製することができる、本発明の第1の態様に従うRNAレプリコンと
を含むシステムを提供する。好ましくは、RNAレプリコンは更に、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質をコードしないことを特徴とする。
(a)機能的なアルファウイルス非構造タンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含み、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質により複製することができ、目的のタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを更に含む、本発明の第1の態様に従うRNAレプリコンを得る工程と、
(b)RNAレプリコンを、細胞へと接種する工程と
を含む、細胞内で目的のタンパク質を作製するための方法を提供する。
(a)機能的なアルファウイルス非構造タンパク質を発現させるためのRNAコンストラクトを得る工程と、
(b)トランスで、(a)に従う機能的なアルファウイルス非構造タンパク質により複製することができ、目的のタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含む、本発明の第1の態様に従うRNAレプリコンを得る工程と、
(c)機能的なアルファウイルス非構造タンパク質を発現させるためのRNAコンストラクト、及びRNAレプリコンを、細胞へと共接種する工程と
を含む、細胞内で目的のタンパク質を作製するための方法を提供する。
(a)機能的なアルファウイルス非構造タンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含み、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質により複製することができ、目的のタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを更に含む、本発明の第1の態様に従うRNAレプリコンを得る工程と、
(b)RNAレプリコンを、対象へと投与する工程と
を含む、対象において目的のタンパク質を作製するための方法を提供する。
(a)機能的なアルファウイルス非構造タンパク質を発現させるためのRNAコンストラクトを得る工程と、
(b)トランスで、(a)に従う機能的なアルファウイルス非構造タンパク質により複製することができ、目的のタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含む、本発明の第1の態様に従うRNAレプリコンを得る工程と、
(c)機能的なアルファウイルス非構造タンパク質を発現させるためのRNAコンストラクト、及びRNAレプリコンを、対象へと投与する工程と
を含む、対象において目的のタンパク質を作製するための方法を提供する。
WT-RRSによるシスレプリコン:アルファウイルスの構造タンパク質をコードする核酸配列が、目的の遺伝子(「トランス遺伝子」)をコードするオープンリーディングフレームで置き換えられていることを除き、アルファウイルスのゲノムに本質的に対応するRNAレプリコン。「WT-RRSによるレプリコン」を、細胞へと導入する場合、レプリカーゼをコードするオープンリーディングフレームの翻訳産物(nsP1234又はその断片)は、RNAレプリコンの複製を、シスで駆動することが可能であり、サブゲノムプロモーター(SGP)の下流において、核酸配列(サブゲノム転写物)の合成を駆動しうる。
WT-RRSによるトランスレプリコン又は鋳型RNA:アルファウイルスの構造タンパク質であるnsP1-4をコードする核酸配列の大半が、除去されていることを除き、「WT-RRSによるレプリコン」に本質的に対応するRNAレプリコン。より具体的には、nsP1をコードする核酸配列及びnsP3は、完全に除去されており、nsP1をコードする核酸配列は、「WT-RRSによる鋳型RNA」が、nsP1の断片をコードするが、この断片が、nsP1のC末端断片を含まない(しかし、nsP1のN末端断片は含む;nsP1*)ように切断されており、nsP4をコードする核酸配列は、「WT-RRSによる鋳型RNA」が、nsP4の断片をコードするが、この断片が、nsP4のN末端断片を含まない(しかし、nsP4のC末端断片は含む;*nsP4)ように切断されている。この短縮nsP4配列は、完全に活性のサブゲノムプロモーターと部分的に重複する。nsP1*をコードする核酸配列は、天然で見出されるアルファウイルス内のnsP1*をコードする核酸配列の、全ての開始コドン(セムリキ森林ウイルスに由来するnsP1の場合、5の特異的開始コドン)を含む。
Δ5ATG-RRS:天然で見出されるアルファウイルス内のnsP1*をコードする核酸配列の、開始コドンを含まない(セムリキ森林ウイルスの場合、「Δ5ATG-RRS」は、天然で見出されるセムリキ森林ウイルスと比較した、5つの特異的開始コドンの除去に対応する)ことを除き、「WT-RRSによる鋳型RNA」に本質的に対応するRNAレプリコン。開始コドンを除去するように導入された全てのヌクレオチド変化は、RNAの予測二次構造を保存するように、更なるヌクレオチド変化により補正した。
Δ5ATG-RRSΔSGP:サブゲノムプロモーター(SGP)を含まず、*nsP4をコードする核酸配列を含まないことを除き、「Δ5ATG-RRS」に本質的に対応するRNAレプリコン。「トランス遺伝子1」=目的の遺伝子。
Δ5ATG-RRS:バイシストロニック:サブゲノムプロモーターの上流の、第1の目的の遺伝子(「トランス遺伝子1」)をコードする第1のオープンリーディングフレームと、サブゲノムプロモーターの下流の、第2の目的の遺伝子(「トランス遺伝子2」)をコードする第2のオープンリーディングフレームとを含むことを除き、「Δ5ATG-RRS」に本質的に対応するRNAレプリコン。第2のオープンリーディングフレームの配置は、RNAレプリコンである「Δ5ATG-RRS」内の目的の遺伝子(「トランス遺伝子」)の配置に対応する。
Δ5ATG-RRSによるシスレプリコン:第1の目的の遺伝子が、オープンリーディングフレームをコードする機能的なアルファウイルス非構造タンパク質をコードすること典型的に、ポリタンパク質nsP1-nsP2-nsP3-nsP4、すなわち、nsP1234をコードする、1つのオープンリーディングフレームを除き、「Δ5ATG-RRS-バイシストロニック」に本質的に対応するRNAレプリコン。「Δ5ATG-RRSによるシスレプリコン」内の「トランス遺伝子」は、「Δ5ATG-RRS:バイシストロニック」内の「トランス遺伝子2」に対応する。機能的なアルファウイルス非構造タンパク質は、サブゲノムプロモーターを認識し、目的の遺伝子(「トランス遺伝子」)をコードする核酸配列を含むサブゲノム転写物を合成することが可能である。「Δ5ATG-RRSによるシスレプリコン」は、「WT-RRSによるシスレプリコン」と同様に、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質を、シスでコードするが、「Δ5ATG-RRSによるシスレプリコン」によりコードされるnsP1のコード配列が、全てのステムループを含む、「WT-RRSによるシスレプリコン」の正確な核酸配列を含むことを必要としない。
5’末端 5’--P-NNNNNNN-OH-3’ 3’末端
3’-HO-NNNNNNN-P--5’
ACCUCUACGGCGGUCCUAAAUAGG(配列番号1;コンセンサス接合部配列(コンセンサスCSE3);下線を付したヌクレオチドは、サブゲノム転写物の最初の5ヌクレオチドを表す)
を特徴とする。
AUUUUGUUUUUAAUAUUUC(配列番号2;19ntの保存配列)
を特徴とする。
第1の態様では、本発明は、天然アルファウイルス5’複製認識配列と比較して、少なくとも1つの開始コドンの除去を含むことを特徴とする5’複製認識配列を含むレプリコンを提供する。レプリコンは、好ましくは、RNAレプリコンである。
(http://rna.urmc.rochester.edu/RNAstructureWeb/Servers/Predict1/Predict1.html)
(http://unafold.rna.albany.edu/?q=mfold)
により確認した。
一実施態様では、本発明に従うRNAレプリコンは、目的のペプチド又は目的のタンパク質をコードする、少なくとも1つのオープンリーディングフレームを含む。好ましくは、目的のタンパク質は、異種核酸配列によりコードされる。目的のペプチド又はタンパク質をコードする遺伝子は、「目的の遺伝子」又は「トランス遺伝子」と同義に称される。多様な実施態様では、目的のペプチド又はタンパク質は、異種核酸配列によりコードされる。本発明によると、「異種」という用語は、核酸配列が、天然では、アルファウイルスの核酸配列へと、機能的又は構造的に連結されていない事実を指す。
一実施態様では、オープンリーディングフレームは、レポータータンパク質をコードする。この実施態様では、オープンリーディングフレームは、レポーター遺伝子を含む。ある特定の遺伝子は、それらを発現する細胞又は生物に付与する特徴が、たやすく同定及び測定しうるか、又は選択用マーカーであるため、レポーターとして選び出すことができる。レポーター遺伝子は、ある特定の遺伝子が、細胞内又は生物集団内に取り込まれているか、又はこれらにおいて発現しているのかどうかについての指標として使用されることが多い。好ましくは、レポーター遺伝子の発現産物は、目視により検出可能である。目視により検出可能な、一般的なレポータータンパク質は、典型的に、蛍光タンパク質の又は発光タンパク質を有する。具体的なレポーター遺伝子の例は、それを発現する細胞を、青色光下で緑色に発光させる、クラゲの緑色蛍光タンパク質(GFP)をコードする遺伝子、ルシフェリンとの反応を触媒して光をもたらす酵素であるルシフェラーゼ、及び赤色蛍光タンパク質(RFP)を含む。変異体が、目視により検出可能な特性を有する限りにおいて、これらの特異的レポーター遺伝子のうちのいずれかの変異体も可能である。例えば、eGFPは、GFPの点突然変異体である。レポータータンパク質の実施態様は、発現について調べるのに特に適する(例えば、実施例2から5を参照されたい)。
本発明によると、一実施態様では、レプリコンのRNAは、薬学的に活性のRNAを含むか、又はこれからなる。「薬学的に活性のRNA」とは、薬学的に活性のペプチド又はタンパク質をコードするRNAでありうる。好ましくは、本発明に従うRNAレプリコンは、薬学的に活性のペプチド又はタンパク質をコードする。好ましくは、オープンリーディングフレームは、薬学的に活性のペプチド又はタンパク質をコードする。好ましくは、RNAレプリコンは、任意選択で、サブゲノムプロモーターの制御下にある、薬学的に活性のペプチド又はタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含む。
オープンリーディングフレームによりコードされる、更なる適切な目的のタンパク質は、インターフェロン(IFN)シグナル伝達の阻害剤である。RNAを発現させるために導入した細胞の生存率は、特に、細胞に、RNAを、複数回にわたりトランスフェクトした場合、低減されることが報告されているが、IFN阻害剤は、RNAを発現する細胞の生存率を増強することが見出された(国際公開第2014/071963A1号)。好ましくは、阻害剤は、I型IFNシグナル伝達の阻害剤である。細胞外IFNによる、IFN受容体への会合を防止し、細胞内IFNシグナル伝達を阻害することは、細胞内のRNAの安定的発現を可能とする。代替的に、又は加えて、特に、細胞に、繰り返し、RNAをトランスフェクトする場合、細胞外IFNによる、IFN受容体への会合を防止し、細胞内IFNシグナル伝達を阻害することは、細胞の生存を増強する。理論に束縛されることを望まずに述べると、細胞内IFNシグナル伝達は、翻訳の阻害及び/又はRNAの分解を結果としてもたらしうることが想定される。これは、一又は複数のIFN誘導性抗ウイルス活性エフェクタータンパク質を阻害することにより対処することができる。IFN誘導性抗ウイルス活性エフェクタータンパク質は、RNA依存性タンパク質キナーゼ(PKR)、2’,5’-オリゴアデニル酸シンセターゼ(OAS)、及びRNアーゼLからなる群から選択することができる。細胞内IFNシグナル伝達を阻害することは、PKR依存性経路及び/又はOAS依存性経路を阻害することを含みうる。適切な目的のタンパク質は、PKR依存性経路及び/又はOAS依存性経路を阻害することが可能なタンパク質である。PKR依存性経路を阻害することは、eIF2-アルファのリン酸化を阻害することを含みうる。PKRを阻害することは、細胞を、少なくとも1つのPKR阻害剤で治療することを含みうる。PKR阻害剤は、ウイルス性のPKR阻害剤でありうる。好ましいウイルス性のPKR阻害剤は、ワクシニアウイルスE3である。ペプチド又はタンパク質(例えば、E3、K3)により、細胞内IFNシグナル伝達を阻害する場合、ペプチド又はタンパク質の細胞内発現が好ましい。ワクシニアウイルスE3は、dsRNAに結合し、これを隔離して、PKR及びOASの活性化を防止する、25kDaのdsRNA結合性タンパク質(E3L遺伝子によりコードされる)である。E3は、PKRに直接結合し、その活性を阻害する結果として、eIF2-アルファのリン酸化の低減をもたらす。IFNシグナル伝達の、他の適切な阻害剤は、単純ヘルペスウイルスICP34.5、トスカーナウイルスNS、カイコ(Bombyx mori)核多角体病ウイルスPK2、及びHCV NS34Aである。
オープンリーディングフレームによりコードされる、更なる適切な目的のタンパク質は、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質である。「アルファウイルス非構造タンパク質」という用語は、アルファウイルス非構造タンパク質の、炭水化物修飾(グリコシル化など)形態及び脂質修飾形態を含む、各共翻訳修飾形態又は各翻訳後修飾形態、及びあらゆる共翻訳修飾形態又はあらゆる翻訳後修飾形態を含む。
RNAレプリコンは、任意選択で、サブゲノムプロモーターの制御下における、目的のペプチド又は目的のタンパク質をコードする、一又は複数の遺伝子の発現に適する。多様な実施態様が可能である。各々が目的のペプチド又は目的のタンパク質をコードする、一又は複数のオープンリーディングフレームは、RNAレプリコン上に存在しうる。RNAレプリコンの、最も上流のオープンリーディングフレームを、「第1のオープンリーディングフレーム」と称する。一部の実施態様では、「第1のオープンリーディングフレーム」とは、RNAレプリコンのオープンリーディングフレームだけである。任意選択で、一又は複数の更なるオープンリーディングフレームは、第1のオープンリーディングフレームの下流に存在しうる。第1のオープンリーディングフレームの下流の、一又は複数の更なるオープンリーディングフレームを、それらが、第1のオープンリーディングフレームの下流に存在する順序で(5’から3’へと)、「第2のオープンリーディングフレーム」、「第3のオープンリーディングフレーム」などと称することができる。好ましくは、各オープンリーディングフレームは、典型的に、ATG(それぞれのDNA分子内の)に対応するAUG(RNA分子内の)である、開始コドン(塩基トリプレット)を含む。
第2の態様では、本発明は、
機能的なアルファウイルス非構造タンパク質を発現させるためのRNAコンストラクトと、
トランスで、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質により複製することができる、本発明の第1の態様に従うRNAレプリコンと
を含むシステムを提供する。
まず何にもまして、本発明のシステムの多用途性は、レプリコン及びレプリカーゼコンストラクトを、異なる時点及び/又は異なる部位において、デザイン及び/又は調製しうることを可能とする。一実施態様では、レプリカーゼコンストラクトを、第1の時点において調製し、レプリコンを、後の時点において調製する。例えば、その調製後、レプリカーゼコンストラクトを、後の時点における使用のために保存することができる。本発明は、シスレプリコンと比較した柔軟性の増加を提供する。つまり、新たな病原体が出現したら、新たな病原体に対する免疫応答を誘発するポリペプチドをコードする核酸へと、レプリコンをクローニングすることにより、本発明のシステムを、ワクチン接種のためにデザインすることができる。既に調製されたレプリカーゼコンストラクトは、保存物から回収することができる。したがって、レプリカーゼコンストラクトを、デザイン及び調製する時点において、特定の病原体、又は特定の病原体の抗原(一又は複数)の性格が既知であることは必要とされない。結果として、レプリカーゼコンストラクトを、デザイン及び調製する時点において、特定の新たな病原体に対する免疫応答を誘発するポリペプチドをコードするレプリコンが利用可能であることは必要とされない。言い換えれば、レプリカーゼコンストラクトは、任意の特定のレプリコンから独立に、デザイン及び調製することができる。これは、レプリカーゼを欠くレプリコンの調製は、シスレプリコンの調製より、必要とされる労力及び資源が少ないため、新たな病原体、又は少なくとも1つの新たな抗原の発現を特徴とする病原体の出現に対して、迅速に反応することを可能とする。歴史は、病原体に対する迅速な反応を可能とするシステムが必要とされると語っており、これは、例えば、近年における、重症急性呼吸器症候群(SARS)、エボラウイルス、及び多様なインフルエンザウイルス亜型を引き起こす病原体の発生により例示される。
本発明に従うRNA分子は、任意選択で、更なる特色、例えば、5’キャップ、5’-UTR、3’-UTR、ポリ(A)配列、及び/又はコドン使用の適合化を特徴としうる。詳細については、以下で記載する。
一部の実施態様では、本発明に従うレプリコンは、5’キャップを含む。
により表される。
である。
[式中、
R1は、任意選択で、置換アルキル、任意選択で、置換アルケニル、任意選択で、置換アルキニル、任意選択で、置換シクロアルキル、任意選択で、置換ヘテロシクリル、任意選択で、置換アリールと、任意選択で、置換ヘテロアリールとからなる群から選択され、
R2及びR3は、独立に、H、ハロ、OHと、任意選択で、置換アルコキシとからなる群から選択されるか、又はR2及びR3は共に、O-X-Oを形成し、Xは、任意選択で、置換CH2、CH2CH2、CH2CH2CH2、CH2CH(CH3)、及び
C(CH3)2からなる群から選択されるか、又はR2は、-O-CH2-又は-CH2-O-を形成するように、R2を接合させる環の4’位の水素原子と組み合わされ、
R5は、S、Se、及びBH3からなる群から選択され、
R4及びR6は、独立に、O、S、Se、及びBH3からなる群から選択され、
nは、1、2、又は3である]
に従うキャップジヌクレオチドから選択することができる。
により表される。
「非翻訳領域」又は「UTR」という用語は、転写されるが、アミノ酸配列へと翻訳されない領域、又はmRNA分子など、RNA分子内の対応する領域に関する。非翻訳領域(UTR)は、オープンリーディングフレームの5’側(上流)(5’-UTR)、及び/又はオープンリーディングフレームの3’側(下流)(3’-UTR)に存在しうる。
(1)5’-UTRと、
(2)オープンリーディングフレームと、
(3)3’-UTRと
を含む。
一部の実施態様では、本発明に従うレプリコンは、3’ポリ(A)配列を含む。レプリコンが、保存配列エレメント4(CSE4)を含む場合、レプリコンの3’ポリ(A)配列は、好ましくは、CSE4の下流に、最も好ましくは、CSE4に直に隣接して存在する。
一般に、遺伝子コードの縮重は、同じコード能を維持しながら(置き換えるコドンが、置き換えられるコドンと同じアミノ酸をコードするように)の、RNA配列内に存在するある特定のコドン(アミノ酸をコードする塩基トリプレット)の、他のコドン(塩基トリプレット)による置換を可能とするであろう。本発明の一部の実施態様では、RNA分子に含まれるオープンリーディングフレームの、少なくとも1つのコドンは、オープンリーディングフレームが由来する種における、それぞれのオープンリーディングフレーム内のそれぞれのコドンと異なる。この実施態様では、オープンリーディングフレームのコード配列を、「適合させた」又は「修飾された」という。レプリコンに含まれるオープンリーディングフレームのコード配列を、適合させることができる。代替的に、又は加えて、レプリカーゼコンストラクトに含まれる機能的なアルファウイルス非構造タンパク質のコード配列も、適合させることができる。
本発明では、単独で、又は任意の適する組合せにおける、以下の特色が好ましい。
第3の態様では、本発明は、本発明の第1の態様に従うRNAレプリコンをコードする核酸配列を含むDNAを提供する。
本発明によると、任意のRNA分子は、本発明のシステムの一部であろうと、そうでなかろうと、in vitro転写により得られうる。本発明では、in vitro転写RNA(IVT-RNA)は、特に、関心の対象である。IVT-RNAは、核酸分子(特に、DNA分子)からの転写により得られる。本発明の第3の態様のDNA分子は、特に、DNA依存性RNAポリメラーゼにより認識されうるプロモーターを含む場合に、このような目的に適する。
本発明はまた、本発明の第1の態様に従うRNAレプリコン又は本発明の第2の態様に従うシステムを含むキットも提供する。
本明細書で記載されるレプリカーゼコンストラクト及び/又はレプリコンは、薬学的組成物の形態で存在しうる。本発明に従う薬学的組成物は、本発明に従う、少なくとも1つの核酸分子、を含みうる。本発明に従う薬学的組成物は、薬学的に許容される希釈剤及び/又は薬学的に許容される賦形剤及び/又は薬学的に許容される担体及び/又は薬学的に許容される媒体を含む。薬学的に許容される担体、媒体、賦形剤、又は希釈剤の選出しは、特に限定されない。当技術分野で公知の、任意の適適切な、薬学的に許容される担体、媒体、賦形剤、又は希釈剤を使用することができる。
一部の実施態様では、非保護RNAの不安定性のために、本発明のRNA分子を、複合体化形態又は封入形態で提供することが有利である。本発明では、それぞれの薬学的組成物が提供される。特に、本発明の一部の実施態様では薬学的組成物は、核酸含有粒子、好ましくは、RNA含有粒子を含む。それぞれの薬学的組成物を、粒子製剤と称する。本発明によると、粒子製剤では、粒子は、本発明に従う核酸と、核酸の送達に適する、薬学的に許容される担体、又は薬学的に許容される媒体とを含む。核酸含有粒子は、例えば、タンパク質性粒子の形態の場合もあり、脂質含有粒子形態の場合もある。適切なタンパク質又は脂質を、粒子形成剤と称する。タンパク質性粒子及び脂質含有粒子は、粒子形態におけるアルファウイルスRNAの送達に適すると、既に記載されている(例えば、Strauss及びStrauss, Microbiol. Rev., 1994, vol. 58, pp. 491-562)。特に、アルファウイルスの構造タンパク質(例えば、ヘルパーウイルスによりもたらされる)は、タンパク質性粒子の形態における、RNAの送達のための、適切な担体である。
一実施態様では、本発明の薬学的組成物は、少なくとも1つの脂質を含む。好ましくは、少なくとも1つの脂質は、カチオン性脂質である。前記脂質を含有する薬学的組成物は、本発明に従う核酸を含む。一実施態様では、本発明に従う薬学的組成物は、小胞内、例えば、リポソーム内に封入されたRNAを含む。一実施態様では、本発明に従う薬学的組成物は、エマルジョンの形態のRNAを含む。一実施態様では、本発明に従う薬学的組成物は、カチオン性化合物と共に複合体化し、これにより、例えば、いわゆるリポプレックス又はポリプレックスを形成するRNAを含む。リポソームなどの小胞内のRNAの封入は、例えば、脂質/RNA複合体と顕著に異なる。脂質/RNA複合体は、例えば、RNAを、例えば、あらかじめ形成されたリポソームと混合する場合に得られる。
第4の態様では、本発明は、
(a)機能的なアルファウイルス非構造タンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含み、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質により複製することができ、目的のタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを更に含む、本発明の第1の態様に従うRNAレプリコンを得る工程と、
(b)RNAレプリコンを、細胞へと接種する工程と
を含む、細胞内で目的のタンパク質を作製するための方法を提供する。
(a)機能的なアルファウイルス非構造タンパク質を発現させるためのRNAコンストラクトを得る工程と、
(b)トランスで、(a)に従う機能的なアルファウイルス非構造タンパク質により複製することができ、目的のタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含む、本発明の第1の態様に従うRNAレプリコンを得る工程と、
(c)機能的なアルファウイルス非構造タンパク質を発現させるためのRNAコンストラクト、及びRNAレプリコンを、細胞へと共接種する工程と
を含む、細胞内で目的のタンパク質を作製するための方法を提供する。
(a)機能的なアルファウイルス非構造タンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含み、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質により複製することができ、目的のタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを更に含む、本発明の第1の態様に従うRNAレプリコンを得る工程と、
(b)RNAレプリコンを、対象へと投与する工程と
を含む、対象において目的のタンパク質を作製するための方法も提供する。
(a)機能的なアルファウイルス非構造タンパク質を発現させるためのRNAコンストラクトを得る工程と、
(b)トランスで、(a)に従う機能的なアルファウイルス非構造タンパク質により複製することができ、目的のタンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含む、本発明の第1の態様に従うRNAレプリコンを得る工程と、
(c)機能的なアルファウイルス非構造タンパク質を発現させるためのRNAコンストラクト、及びRNAレプリコンを、対象へと投与する工程と
を含む、対象において目的のタンパク質を作製するための方法を更に提供する。
「免疫化」又は「ワクチン接種」という用語は、一般に、治療的理由又は予防的理由で、対象を治療する工程を指す。治療、特に、予防的治療は、好ましくは、例えば、一又は複数の抗原に対する、対象の免疫応答を誘導又は増強することを目的とする治療であるか、又はこれを含む。本発明によると、本明細書で記載されるRNAを使用することにより、免疫応答を誘導又は増強することが所望される場合、免疫応答は、RNAにより、誘発又は増強することができる。一実施態様では、本発明は、好ましくは、対象のワクチン接種であるか、又はこれを含む予防的治療を提供する。レプリコンが、目的のタンパク質として、免疫学的に活性の化合物又は抗原である、薬学的に活性のペプチド又はタンパク質をコードする、本発明の実施態様は、ワクチン接種に、特に、有用である。
本発明に従う医薬は、任意の適切な経路により、対象へと適用することができる。
下記で記載される例では、以下の材料及び方法を使用した。
プラスミドは、標準技術を使用してクローニングした。本発明の実施例で使用される、個別のプラスミドのクローニングの詳細については、実施例1においてにおいて記載する。実施例1において記載されるプラスミドと、T7RNAポリメラーゼとを使用するin vitro転写、並びにRNAの精製は、既に記載されている通りに実施した(Holtkamp等, 2006, Blood, vol. 108, pp. 4009-4017、Kuhn等, Gene Ther., 2010, vol. 17, pp. 961-971)。
エレクトロポレーションのために、以下の設定:BHK21細胞用:750V/cm、16ミリ秒の1パルス;ヒト包皮線維芽細胞用:500V/cm、24ミリ秒の1パルスを使用する、方形波エレクトロポレーションデバイス(BTX ECM 830、Harvard Apparatus、Holliston、MA、USA)を使用して、RNAを、室温で、哺乳動物細胞へとエレクトロポレーションした。異なるRNA分子種の混合物を、RNアーゼ非含有チューブ内で調製し、トランスフェクションまで、氷上で保持した。エレクトロポレーションのために、RNA又はRNA混合物を、キュベットのギャップサイズ1mm当たりの最終容量62.5μl中に再懸濁させた。
全ての成長培地、ウシ胎仔血清(FCS)、抗生剤、及び他の補充物質は、そうでないことが言明されない限りにおいて、Life Technologies/Gibcoにより提供された。System Bioscience(HFF、新生児)又はATCC(CCD-1079Sk)から得たヒト包皮線維芽細胞を、15%のFCS、1%の非必須アミノ酸、1mMのピルビン酸ナトリウムを含有する最小必須培地(MEM)中、37℃で培養した。細胞を、5%のCO2へと平衡化させた加湿雰囲気中、37℃で増殖させた。American Type Culture Collection、Manassas、Virginia、USAから入手可能な「BHK21[C13](ATCC(登録商標)CCL10(商標))」細胞株に由来するBHK21細胞を、10%のFCSを補充した、イーグル最小必須培地中で増殖させた。
GFPをコードするRNAの発現は、FACS Canto IIフローサイトメーター(BD Bioscience、Heidelberg、Germany)を使用するフローサイトメトリーにより測定し、収集されたデータは、対応するDivaソフトウェア又はFlowJoソフトウェア(Tree Star Inc.、Ashland、OR、USA)により解析した。
ホタルルシフェラーゼの発現について評価するために、トランスフェクト細胞を、96ウェル黒色マイクロプレート内に播種し、Nanolucトランスフェクト細胞に由来する上清を、96ウェル黒色マイクロプレート(Nunc、Langenselbold、Germany)へと移した。ホタルルシフェラーゼの検出は、Bright-Glo Luciferas Assay Systemにより測定し、NanoLucの発現は、製造元の指示書に従い、Nano-Glo Luciferaseアッセイシステムを使用して検出した(いずれも、Promega、Madison、WI、USA)。生物発光は、マイクロプレート発光リーダーである、Infinite M200(Tecan Group、Maennedorf、Switzerland)を使用して測定した。データは、相対光単位[RLU]で表し、ルシフェラーゼ陰性細胞を使用して、バックグラウンドシグナルを控除した。
A.セムリキ森林ウイルスウイルス(SFV)に基づくレプリコンをコードするプラスミドは、PCRベースのシームレスクローニング法を使用して得た。シームレスクローニングとは、相同な配列の連なりを使用する、PCRにより作出した断片の、直鎖化ベクターへの組換えに基づくクローニング法を意味する。これにより、ウイルス構造遺伝子をコードするオープンリーディングフレームの非存在を除き、SFVゲノムに対応するレプリコンをコードするDNA配列を、pSFV-gen-GFP(Ehrengruber及びLundstrom, 1999, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, vol. 96, pp. 7041-7046、Lundstrom, 2001, Histochem. Cell Biol., vol. 115, pp. 83-91)から、pST1プラスミド骨格(Holtkamp等, 2006, Blood, vol. 108, pp. 4009-4017)の、T7ファージRNAポリメラーゼプロモーターのすぐ下流へと導入した。プラスミドによりコードされる、120アデニル酸残基のポリ(A)カセット(上記Holtkamp等)、又は10ヌクレオチドのランダム配列により隔てられた、30アデニル酸残基及び70アデニル酸残基からなる修飾ポリ(A)カセット(国際公開第2016/005004A1号)を、SFV 3’-UTRの、まさに最後のヌクレオチドのすぐ下流に付加した。SapI制限部位は、ポリ(A)カセット又は修飾ポリ(A)カセットのすぐ下流に配置した。更に、mycタグをコードするコード配列を、SFV nsP3の可変領域のコード領域内に見出されるXhoI部位へと挿入した。nsP3の可変領域への挿入は、レプリカーゼポリタンパク質の活性に影響を及ぼさない(Spuul等, 2010, J. Virol, vol. 85, pp. 7543-7557)。結果として得られるプラスミドは、T7ポリメラーゼのためのプロモーターの制御下で、SFVの5’複製認識配列をコードするDNA配列を含む。SFVの5’複製認識配列をコードするDNA配列を、配列番号4:
ATGGCGGATGTGTGACATACACGACGCCAAAAGATTTTGTTCCAGCTCCTGCCACCTCCGCTACGCGAGAGATTAACCACCCACGATGGCCGCCAAAGTGCATGTTGATATTGAGGCTGACAGCCCATTCATCAAGTCTTTGCAGAAGGCATTTCCGTCGTTCGAGGTGGAGTCATTGCAGGTCACACCAAATGACCATGCAAATGCCAGAGCATTTTCGCACCTGGCTACCAAATTGA(配列番号4)
により表す。
GATGGCGGATGTGTGACATACACGACGCCAAAAGATTTTGTTCCAGCTCCTGCCACCTCCGCTACGCGAGAGATTAACCACCCACGATGGCCGCCAAAGTGCATGTTGATATTGAGGCTGACAGCCCATTCATCAAGTCTTTGCAGAAGGCATTTCCGTCGTTCGAGGTGGAGTCATTGCAGGTCACACCAAATGACCATGCAAATGCCAGAGCATTTTCGCACCTGGCTACCAAATTGATCGAGCAGGAGACTGACAAAGACACACTCATCTTGGATATC(配列番号3)
GATGGCGGATGTGTGACATACACGACGCCAAAAGATTTTGTTCCAGCTCCTGCCACCTCCGCTACGCGAGAGATTAACCACCCACGACGGCCGCCAAAGTGCTTGTTGATATTGAGGCTGACAGCCCATTCATCAAGTCTTAGCAGAAGGCATTTCCGTCGTTCGAGGTGGAGTCATTGGAGGTGACACCAAATCACCATCCAAATCCCAGAGCATTTTCGCACCTGGGTACCAAATTGATCGAGCAGGAGACTGACAAAGACACACTCATCTTGGATATC(配列番号5)
に従うDNA配列が得られた。
BHK21細胞に、(i)SFVレプリカーゼをコードする、5μgのmRNA(実施例1のプラスミドDによりコードされる)、及び(ii)量を変動させるトランスレプリコンRNA(実施例1のプラスミドB又はC-1によりコードされる;図2:「鋳型」)を一緒にエレクトロポレーションした。トランスレプリコンは、ホタルルシフェラーゼ、野生型5’複製認識配列(図2:「WT-RRS」;プラスミドBによりコードされる)、又は全ての開始コドンの除去を特徴とする5’複製認識配列(図2:「Δ5ATG-RRS」;プラスミドC-1によりコードされる)を含有するトランスレプリコンをコードする。トランスレプリコンRNAは、キャップなし(キャップを伴わない)であった。エレクトロポレーションされたBHK21細胞5000個を、96ウェルプレートの各ウェルへと播種して、エレクトロポレーションの24時間後における、ルシフェラーゼの発現を測定した。結果を、図2Bに示す。
全ての開始コドンの除去を特徴とし、サブゲノムプロモーターを含むトランスレプリコン(図3:「Δ5ATG-RRS」;実施例1のプラスミドC-1によりコードされる)、全ての開始コドンの除去を特徴とするが、サブゲノムプロモーターを含まないトランスレプリコン(図3:「Δ5ATG-RRSΔSGP」;実施例1のプラスミドC-2によりコードされる)、及び全ての開始コドンを有し、サブゲノムプロモーターを含むトランスレプリコン(図3;「WT-RRSによる鋳型RNA」)を使用した。ヒト包皮線維芽細胞に、(i)図3に表示の、0.45μgずつのトランスレプリコンRNA、及び(ii-a)ワクシニアウイルスE3タンパク質をコードする、2.5μgのmRNA(実施例1のプラスミドE、図3:「E3」によりコードされる)、又は(ii-b)2.5μgのレプリカーゼをコードするmRNA(実施例1のプラスミドD、図3:「レプリカーゼ」によりコードされる)+ワクシニアウイルスE3タンパク質をコードする、2.5μgのmRNA(実施例1のプラスミドEによりコードされる)を一緒にエレクトロポレーションした。プロテインキナーゼRの活性化を阻害し、これにより、ルシフェラーゼ及びレプリカーゼの発現を促進するために、ワクシニアウイルスE3タンパク質をコードするmRNAを付加した。トランスレプリコンRNAは、キャップなし(図3:「キャップを伴わない」)、又はベータ-S-ARCA(D2)キャップ類似体(図3:「D2キャップ」)の共転写によるキャップありとした。ルシフェラーゼの発現は、24時間後に評価した。結果を、図3(右パネル)に示す。
全ての開始コドンの除去を特徴とし、サブゲノムプロモーターを含むトランスレプリコン(図4:「Δ5ATG-RRS」;実施例1のプラスミドC-1によりコードされる)、及び全ての開始コドンの除去を特徴とするが、サブゲノムプロモーターを含まないトランスレプリコン(図4:「Δ5ATG-RRSΔSGP」;実施例1のプラスミドC-2によりコードされる)を使用した。BHK21細胞に、(i)0.45μgの、それぞれのトランスレプリコンRNA、及び(ii)2.5μgのレプリカーゼをコードするmRNA(実施例1のプラスミドDによりコードされる)を一緒にエレクトロポレーションした。トランスレプリコンRNAは、キャップなし(図4「キャップを伴わない」)、又はベータ-S-ARCA(D2)キャップ類似体(図4:「D2キャップ」)の共転写によるキャップありとした。ルシフェラーゼの発現は、時間経過にわたり評価した。結果を、図4(右パネル)に示す。
全ての開始コドンの除去を特徴とするが、サブゲノムプロモーターを含まないトランスレプリコン(図5:「Δ5ATG-RRSΔSGP」;実施例1のプラスミドC-2によりコードされる)を使用した。トランスレプリコンRNAは、キャップなし(図5「キャップを伴わない」)、又はベータ-S-ARCA(D2)キャップ類似体(図5:「D2キャップ」)の共転写によるキャップありとした。BHK21細胞に、(i)0.45μgの、それぞれのトランスレプリコンRNAをエレクトロポレーションし、表示の場合(図5における「レプリカーゼ」)、更に、(ii)2.5μgのレプリカーゼをコードするmRNA(実施例1のプラスミドDによりコードされる)もエレクトロポレーションした。ルシフェラーゼの発現は、時間経過に沿って評価した。結果を、図5(右パネル)に示す。
SFVレプリカーゼのORFを、実施例1のプラスミドC-3の「Δ5ATG-RRSによるシスレプリコン」を結果としてもたらし、サブゲノムプロモーター(SGP)の下流でホタルルシフェラーゼをコードする、「Δ5ATG-RRS」(図7A:「Δ5ATG-RRS」;実施例1のプラスミドC-1によりコードされる)へと挿入した。挿入されたレプリカーゼ内で、CSE2及びコアSGPに対応する領域を、ヌクレオチド交換により破壊して(網掛けボックス)、これらの調節領域の重複を回避した。これは、再構築されたシスレプリコンを結果としてもたらした。BHK21細胞に、2.5μgの「WT-RRSによるシスレプリコン」又は「Δ5ATG-RRSによるシスレプリコン」を一緒にエレクトロポレーションした。エレクトロポレーションの24時間後に、ルシフェラーゼの発現を測定したが、これは、この再構築されたシスレプリコンが、機能的であることを裏付ける(図7B)。
分泌型Nano-Luciferase(SNL)を、WT-RSSによるトランスレプリコン(実施例1のプラスミドB)のサブゲノムプロモーター(SGP)の下流にクローニングした。SGPの上流の位置は、翻訳にアクセス可能ではないので、トランス遺伝子をコードしない(図8A)。第2のコンストラクトでは、SNLを、ΔATG-RSS(実施例1のプラスミドC-1)の下流にクローニングし、ホタルルシフェラーゼ(Luc)を、SGPの下流に挿入した。BHK21細胞に、0.9μgのトランス複製型RNA、及び5μgのSFVレプリカーゼをコードするmRNAを一緒にエレクトロポレーションした。エレクトロポレーションの48時間後、SNL及びLucの発現を測定した(図8B)。この実験は、トランス遺伝子が、「Δ5ATG-RRS:バイシストロニック」トランスレプリコン内のいずれの位置からも発現することの証拠をもたらす。
シンドビスウイルスゲノムに由来するトランスレプリコンを、実施例1において、SFVについて記載したコンストラクトと同様に、遺伝子合成により操作した。非修飾複製認識配列(WT-RSS)を伴うトランスレプリコンのほかに、2つの変異体を作出した。第1の変異体(ΔATG-RRS)は、元の開始コドン+4つの更なるATGの欠失と、RNAの二次構造を保存する、対応する補正的ヌクレオチド変化とを含有する。次の工程では、加えて、サブゲノムプロモーターに対応する領域も欠失させて、ΔATG-RRSΔSGPを得た。GFPを、Δ5ATG-RRSΔSGPベクター内の、ATGを欠失させた5’RRSのすぐ下流、又はΔ5ATG-RRSベクター内及びWT-RRSベクター内のサブゲノムプロモーター(SGP)の下流(図9A)のトランスレプリコンRNAへと挿入した。BHK21細胞に、0.1μgのトランス複製型RNAと、2.4μgのSFVレプリカーゼをコードするmRNAとを一緒にエレクトロポレーションし、24時間後におけるGFP発現(トランスフェクション率[%]及び平均値蛍光強度(MFI))を評価した(図9B)。この実験は、SFVによる操作レプリコンへと適用した配列修飾の同じ原理を、シンドビスウイルスによる操作レプリコンへも適用しうることを示す。
Claims (24)
- アルファウイルスの改変5’複製認識配列及び目的のタンパク質をコードする第1のオープンリーディングフレームを含むRNAレプリコンを含む薬学的組成物であって、改変5’複製認識配列は、全ての開始コドンが天然アルファウイルス5’複製認識配列の保存配列エレメント2(CSE2)から除去されていることを特徴とし、改変5’複製認識配列は、開始コドンの除去により導入される、一又は複数のステムループ(SL)内のヌクレオチド対合の破壊を補正する、一又は複数の追加のヌクレオチド変化を含み、
前記CSE2は、SL2からSL4にわたっており、かつアルファウイルスの非構造タンパク質であるnsP1の第1のアミノ酸残基をコードする天然開始コドンを含み、かつ
改変5’複製認識配列は、アルファウイルスゲノムRNAの5’複製認識配列の予測二次構造と同等な予測二次構造により特徴付けられる、
薬学的組成物。 - RNAレプリコンが、3’複製認識配列を含む、請求項1に記載の薬学的組成物。
- 第1のオープンリーディングフレームによりコードされる目的のタンパク質を、鋳型としてのRNAレプリコンから発現することができる、請求項1又は2に記載の薬学的組成物。
- RNAレプリコンが、目的のタンパク質をコードする第1のオープンリーディングフレームを含むサブゲノムRNAの産生を制御するサブゲノムプロモーターを含む、請求項1から3の何れか一項に記載の薬学的組成物。
- 第1のオープンリーディングフレームによりコードされる目的のタンパク質を、RNAレプリコン及びサブゲノムRNAから発現することができる、請求項4に記載の薬学的組成物。
- RNAレプリコンが、目的のタンパク質をコードする第2のオープンリーディングフレームを含むサブゲノムRNAの産生を制御するサブゲノムプロモーターを含む、請求項1から5の何れか一項に記載の薬学的組成物。
- サブゲノムプロモーターと、目的のタンパク質をコードする第2のオープンリーディングフレームとが、目的のタンパク質をコードする、第1のオープンリーディングフレームの下流に配置される、請求項6に記載の薬学的組成物。
- 第1のオープンリーディングフレーム及び/又は第2のオープンリーディングフレームによりコードされる目的のタンパク質が、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質である、請求項1から7の何れか一項に記載の薬学的組成物。
- RNAレプリコンが、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質により複製することができる、請求項8に記載の薬学的組成物。
- RNAレプリコンが、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質をコードするオープンリーディングフレームを含まない、請求項1から7の何れか一項に記載の薬学的組成物。
- 機能的なアルファウイルス非構造タンパク質を発現させるためのRNAコンストラクトをさらに含み、RNAレプリコンが、トランスで、機能的なアルファウイルス非構造タンパク質により複製することができる、請求項1から7及び10の何れか一項に記載の薬学的組成物。
- アルファウイルスが、セムリキ森林ウイルスである、請求項1から11の何れか一項に記載の薬学的組成物。
- RNAレプリコンの粒子製剤を含み、粒子がタンパク質性粒子又は脂質含有粒子のどちらかである、請求項1から12の何れか一項に記載の薬学的組成物。
- 脂質含有粒子が、少なくとも1のカチオン性脂質を含む、請求項13に記載の薬学的組成物。
- 前記カチオン性脂質が、1,2-ジ-O-オクタデセニル-3-トリメチルアンモニウムプロパン(DOTMA);ジメチルジオクタデシルアンモニウム(DDAB);1,2-ジオレオイル-3-トリメチルアンモニウム-プロパン(DOTAP);1,2-ジオレオイル-3-ジメチルアンモニウム-プロパン(DODAP);1,2-ジアシルオキシ-3-ジメチルアンモニウムプロパン;1,2-ジアルキルオキシ-3-ジメチルアンモニウムプロパン;ジオクタデシルジメチル塩化アンモニウム(DODAC)、1,2-ジミリストイルオキシプロピル-1,3-ジメチルヒドロキシエチルアンモニウム(DMRIE)、又は2,3-ジオレオイルオキシ-N-[2(スペルミンカルボキサミド)エチル]-N,N-ジメチル-1-プロパナミニウム(propanamium)トリフルオロ酢酸(DOSPA)である、請求項14に記載の薬学的組成物。
- カチオン性脂質が、1,2-ジリノレイルオキシ-N,N-ジメチル-3-アミノプロパン(DLinDMA)を含む、三級アミン基を伴う脂質を含む、請求項14に記載の薬学的組成物。
- 脂質含有粒子が、脂質/RNA複合体、リポソーム、リポプレックス、又はポリプレックスである、請求項13から16の何れか一項に記載の薬学的組成物。
- リポプレックスが、カチオン性リポソームで形成される、請求項17に記載の薬学的組成物。
- リポプレックスが、中性のヘルパー脂質を含む、請求項17又は18に記載の薬学的組成物。
- 薬学的に許容される希釈剤及び/又は薬学的に許容される賦形剤及び/又は薬学的に許容される担体及び/又は薬学的に許容される媒体をさらに含む、請求項1から19の何れか一項に記載の薬学的組成物。
- 治療における使用のための請求項1から20の何れか一項に記載の薬学的組成物であって、治療が対象に薬学的組成物を投与することを含む、薬学的組成物。
- 投与が、静脈内(i.v.)、皮下(s.c.)、皮内(i.d.)、吸入による、鼻腔内、眼内、腹腔内、間質内、口腔内投与、経皮、又は舌下投与である、請求項21に記載の薬学的組成物。
- 治療における使用のための医薬の製造のための、請求項1から20の何れか一項に記載の薬学的組成物の使用。
- 組成物が、静脈内(i.v.)、皮下(s.c.)、皮内(i.d.)、吸入による、鼻腔内、眼内、腹腔内、間質内、口腔内投与、経皮、又は舌下投与に適する、請求項23に記載の使用。
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EPPCT/EP2016/056165 | 2016-03-21 | ||
PCT/EP2016/056165 WO2017162266A1 (en) | 2016-03-21 | 2016-03-21 | Rna replicon for versatile and efficient gene expression |
JP2018549313A JP7121443B2 (ja) | 2016-03-21 | 2017-03-13 | 多用途性且つ効率的な遺伝子発現のためのrnaレプリコン |
PCT/EP2017/055808 WO2017162460A1 (en) | 2016-03-21 | 2017-03-13 | Rna replicon for versatile and efficient gene expression |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018549313A Division JP7121443B2 (ja) | 2016-03-21 | 2017-03-13 | 多用途性且つ効率的な遺伝子発現のためのrnaレプリコン |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2022169553A JP2022169553A (ja) | 2022-11-09 |
JP7465310B2 true JP7465310B2 (ja) | 2024-04-10 |
Family
ID=55587284
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018549313A Active JP7121443B2 (ja) | 2016-03-21 | 2017-03-13 | 多用途性且つ効率的な遺伝子発現のためのrnaレプリコン |
JP2022123058A Active JP7465310B2 (ja) | 2016-03-21 | 2022-08-02 | 多用途性且つ効率的な遺伝子発現のためのrnaレプリコン |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018549313A Active JP7121443B2 (ja) | 2016-03-21 | 2017-03-13 | 多用途性且つ効率的な遺伝子発現のためのrnaレプリコン |
Country Status (25)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11168337B2 (ja) |
EP (2) | EP3701959B1 (ja) |
JP (2) | JP7121443B2 (ja) |
KR (1) | KR102161607B1 (ja) |
CN (2) | CN108884473B (ja) |
AU (1) | AU2017236239B2 (ja) |
BR (1) | BR112018068381A2 (ja) |
CA (1) | CA3017272A1 (ja) |
CY (1) | CY1125086T1 (ja) |
DK (2) | DK3433369T3 (ja) |
ES (2) | ES2784711T3 (ja) |
HK (1) | HK1259449A1 (ja) |
HR (1) | HRP20220044T1 (ja) |
HU (2) | HUE050350T2 (ja) |
IL (2) | IL261379B (ja) |
LT (1) | LT3701959T (ja) |
MX (1) | MX2018011383A (ja) |
PL (2) | PL3701959T3 (ja) |
PT (2) | PT3433369T (ja) |
RS (1) | RS62864B1 (ja) |
RU (1) | RU2748892C2 (ja) |
SG (1) | SG11201807374WA (ja) |
SI (2) | SI3701959T1 (ja) |
WO (2) | WO2017162266A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201805519B (ja) |
Families Citing this family (42)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB201710973D0 (en) | 2017-07-07 | 2017-08-23 | Avacta Life Sciences Ltd | Scaffold proteins |
JP7389741B2 (ja) * | 2017-09-13 | 2023-11-30 | バイオエヌテック セル アンド ジーン セラピーズ ゲーエムベーハー | T細胞受容体または人工t細胞受容体を発現するためのrnaレプリコン |
EP3681993A1 (en) * | 2017-09-13 | 2020-07-22 | BioNTech RNA Pharmaceuticals GmbH | Rna replicon for reprogramming somatic cells |
TW202043256A (zh) | 2019-01-10 | 2020-12-01 | 美商健生生物科技公司 | 前列腺新抗原及其用途 |
EP3980059A1 (en) * | 2019-06-10 | 2022-04-13 | Infectious Disease Research Institute | Methods and compositions of astrovirus replicons |
WO2021074695A1 (en) | 2019-10-16 | 2021-04-22 | Avacta Life Sciences Limited | PD-L1 INHIBITOR - TGFβ INHIBITOR BISPECIFIC DRUG MOIETIES. |
CN110890127B (zh) * | 2019-11-27 | 2024-02-23 | 山东大学 | 酿酒酵母dna复制起始区域识别方法 |
EP4085130A4 (en) | 2019-12-31 | 2024-04-10 | Elixirgen Therapeutics Inc | TEMPERATURE-BASED TRANSIENT DELIVERY OF NUCLEIC ACIDS AND PROTEINS TO CELLS AND TISSUES |
CA3167611A1 (en) | 2020-02-13 | 2021-08-19 | Etienne Simon-Loriere | Nucleic acid vaccine against the sars-cov-2 coronavirus |
JP2023519173A (ja) * | 2020-03-09 | 2023-05-10 | アークトゥラス・セラピューティクス・インコーポレイテッド | 免疫応答を誘導するための組成物及び方法 |
GB2594365B (en) * | 2020-04-22 | 2023-07-05 | BioNTech SE | Coronavirus vaccine |
AU2021286169A1 (en) * | 2020-06-04 | 2023-01-19 | BioNTech SE | RNA replicon for versatile and efficient gene expression |
GB202101299D0 (en) | 2020-06-09 | 2021-03-17 | Avacta Life Sciences Ltd | Diagnostic polypetides and methods |
WO2022198002A1 (en) * | 2021-03-19 | 2022-09-22 | Tiba Biotech Llc | Artificial alphavirus-derived rna replicon expression systems |
JP2024518335A (ja) | 2021-04-26 | 2024-05-01 | アンスティチュ パスツール | SARS-CoV-2に対するヒト中和モノクローナル抗体、及びそれらの使用 |
WO2022234003A1 (en) | 2021-05-07 | 2022-11-10 | Avacta Life Sciences Limited | Cd33 binding polypeptides with stefin a protein |
TW202334196A (zh) | 2021-10-07 | 2023-09-01 | 英商阿法克塔生命科學有限公司 | Pd-l1結合多肽 |
WO2023057946A1 (en) | 2021-10-07 | 2023-04-13 | Avacta Life Sciences Limited | Serum half-life extended pd-l1 binding polypeptides |
WO2023066874A1 (en) | 2021-10-18 | 2023-04-27 | BioNTech SE | Methods for determining mutations for increasing modified replicable rna function and related compositions and their use |
WO2023066875A1 (en) | 2021-10-18 | 2023-04-27 | BioNTech SE | Modified replicable rna and related compositions and their use |
EP4169579A1 (en) | 2021-10-22 | 2023-04-26 | BioNTech SE | Disulfide oligosaccharide compounds and complexes |
EP4186528A1 (en) | 2021-11-30 | 2023-05-31 | BioNTech SE | Oligosaccharide complexes and uses |
WO2023067123A1 (en) | 2021-10-22 | 2023-04-27 | BioNTech SE | Oligosaccharide complexes and uses |
EP4285932A1 (en) | 2022-05-30 | 2023-12-06 | BioNTech SE | Oligosaccharide complexes and uses |
EP4286004A1 (en) | 2022-05-30 | 2023-12-06 | BioNTech SE | Disulfide oligosaccharide compounds and complexes |
WO2023067126A1 (en) | 2021-10-22 | 2023-04-27 | BioNTech SE | Oligosaccharide compounds and complexes |
EP4169534A1 (en) | 2021-10-22 | 2023-04-26 | BioNTech SE | Oligosaccharide complexes and uses |
EP4286003A1 (en) | 2022-05-30 | 2023-12-06 | BioNTech SE | Oligosaccharide compounds and complexes |
WO2023067121A1 (en) | 2021-10-22 | 2023-04-27 | BioNTech SE | Oligosaccharide compounds and complexes |
WO2023067125A1 (en) | 2021-10-22 | 2023-04-27 | BioNTech SE | Oligosaccharide complexes and uses |
EP4286394A1 (en) | 2022-05-30 | 2023-12-06 | BioNTech SE | Oligosaccharide compounds and complexes |
WO2023067124A1 (en) | 2021-10-22 | 2023-04-27 | BioNTech SE | Disulfide oligosaccharide compounds and complexes |
EP4169580A1 (en) | 2021-10-22 | 2023-04-26 | BioNTech SE | Oligosaccharide compounds and complexes |
EP4285933A1 (en) | 2022-05-30 | 2023-12-06 | BioNTech SE | Oligosaccharide complexes and uses |
EP4169578A1 (en) | 2021-10-22 | 2023-04-26 | BioNTech SE | Oligosaccharide compounds and complexes |
CN114639442B (zh) * | 2022-03-30 | 2024-01-30 | 中国农业科学院农业基因组研究所 | 一种基于单核苷酸多态性预测开放阅读框的方法及系统 |
WO2023213378A1 (en) | 2022-05-02 | 2023-11-09 | BioNTech SE | Replicon compositions and methods of using same for the treatment of diseases |
WO2023218243A1 (en) | 2022-05-12 | 2023-11-16 | Avacta Life Sciences Limited | Lag-3/pd-l1 binding fusion proteins |
WO2023232747A1 (en) | 2022-05-30 | 2023-12-07 | BioNTech SE | Complexes for delivery of nucleic acids |
WO2024056856A1 (en) | 2022-09-15 | 2024-03-21 | BioNTech SE | Systems and compositions comprising trans-amplifying rna vectors with mirna |
WO2024068674A1 (en) | 2022-09-26 | 2024-04-04 | BioNTech SE | Nucleic acid complexes and uses thereof |
WO2024084462A1 (en) | 2022-10-21 | 2024-04-25 | BioNTech SE | Nucleic acid complexes and uses thereof |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2008119827A1 (en) | 2007-04-02 | 2008-10-09 | Fit Biotech Oy | Transreplicase constructs |
JP2010530245A (ja) | 2007-06-21 | 2010-09-09 | アルファバックス, インコーポレイテッド | αウイルス構造タンパク質の発現のためのプロモーターレスカセット |
Family Cites Families (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2000053780A2 (en) | 1999-03-09 | 2000-09-14 | Large Scale Biology Corporation | Multiple component rna vector system for expression of foreign sequences |
DE60233061D1 (de) * | 2001-09-06 | 2009-09-03 | Alphavax Inc | Alphavirus replikon-vektorsysteme |
KR101454842B1 (ko) | 2003-03-20 | 2014-11-04 | 알파벡스, 인크. | 개선된 알파바이러스 레플리콘 및 헬퍼 구축물 |
CN104072561B (zh) | 2007-06-19 | 2017-12-22 | 路易斯安那州州立大学及农业机械学院管理委员会 | 信使rna帽的抗‑反向硫代磷酸类似物的合成和用途 |
EP2527367A1 (en) | 2007-08-20 | 2012-11-28 | Glaxo Group Limited | Production method |
PL215513B1 (pl) | 2008-06-06 | 2013-12-31 | Univ Warszawski | Nowe boranofosforanowe analogi dinukleotydów, ich zastosowanie, czasteczka RNA, sposób otrzymywania RNA oraz sposób otrzymywania peptydów lub bialka |
DE102008061522A1 (de) | 2008-12-10 | 2010-06-17 | Biontech Ag | Verwendung von Flt3-Ligand zur Verstärkung von Immunreaktionen bei RNA-Immunisierung |
EP2281579A1 (en) | 2009-08-05 | 2011-02-09 | BioNTech AG | Vaccine composition comprising 5'-Cap modified RNA |
MX343410B (es) | 2010-07-06 | 2016-11-04 | Novartis Ag * | Emulsiones cationicas de agua en aceite. |
PL2590626T3 (pl) | 2010-07-06 | 2016-04-29 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Liposomy z lipidami o korzystnej wartości pka do dostarczania rna |
LT3981427T (lt) | 2010-08-31 | 2022-08-10 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Pegilintos liposomos, skirtos imunogeną koduojančios rnr pristatymui |
ES2727583T3 (es) | 2010-08-31 | 2019-10-17 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Lípidos adecuados para la administración liposómica de ARN que codifica proteínas |
HRP20221048T1 (hr) | 2010-08-31 | 2022-11-11 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Mali liposomi za isporuku rna koja kodira imunogen |
MX363307B (es) * | 2010-10-11 | 2019-03-20 | Novartis Ag Star | Plataformas para suministro de antigenos. |
WO2013006837A1 (en) | 2011-07-06 | 2013-01-10 | Novartis Ag | Cationic oil-in-water emulsions |
EP2729126B1 (en) | 2011-07-06 | 2020-12-23 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Liposomes having useful n:p ratio for delivery of rna molecules |
EP3424495A1 (en) | 2011-07-06 | 2019-01-09 | GlaxoSmithKline Biologicals S.A. | Oil-in-water emulsions that contain nucleic acids |
RU2628705C2 (ru) | 2011-08-31 | 2017-08-21 | Новартис Аг | Пегилированные липосомы для доставки кодирующей иммуноген рнк |
WO2013143555A1 (en) | 2012-03-26 | 2013-10-03 | Biontech Ag | Rna formulation for immunotherapy |
WO2014071963A1 (en) | 2012-11-09 | 2014-05-15 | Biontech Ag | Method for cellular rna expression |
WO2016005004A1 (en) | 2014-07-11 | 2016-01-14 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | Stabilization of poly(a) sequence encoding dna sequences |
-
2016
- 2016-03-21 WO PCT/EP2016/056165 patent/WO2017162266A1/en active Application Filing
-
2017
- 2017-03-13 DK DK17710528.5T patent/DK3433369T3/da active
- 2017-03-13 EP EP20156693.2A patent/EP3701959B1/en active Active
- 2017-03-13 MX MX2018011383A patent/MX2018011383A/es unknown
- 2017-03-13 SI SI201731043T patent/SI3701959T1/sl unknown
- 2017-03-13 PL PL20156693T patent/PL3701959T3/pl unknown
- 2017-03-13 LT LTEP20156693.2T patent/LT3701959T/lt unknown
- 2017-03-13 PT PT177105285T patent/PT3433369T/pt unknown
- 2017-03-13 CA CA3017272A patent/CA3017272A1/en active Pending
- 2017-03-13 RU RU2018131966A patent/RU2748892C2/ru active
- 2017-03-13 HU HUE17710528A patent/HUE050350T2/hu unknown
- 2017-03-13 PT PT201566932T patent/PT3701959T/pt unknown
- 2017-03-13 JP JP2018549313A patent/JP7121443B2/ja active Active
- 2017-03-13 US US16/086,157 patent/US11168337B2/en active Active
- 2017-03-13 WO PCT/EP2017/055808 patent/WO2017162460A1/en active Application Filing
- 2017-03-13 DK DK20156693.2T patent/DK3701959T3/da active
- 2017-03-13 ES ES17710528T patent/ES2784711T3/es active Active
- 2017-03-13 CN CN201780019155.1A patent/CN108884473B/zh active Active
- 2017-03-13 PL PL17710528T patent/PL3433369T3/pl unknown
- 2017-03-13 KR KR1020187027294A patent/KR102161607B1/ko active IP Right Grant
- 2017-03-13 EP EP17710528.5A patent/EP3433369B1/en active Active
- 2017-03-13 HR HRP20220044TT patent/HRP20220044T1/hr unknown
- 2017-03-13 BR BR112018068381A patent/BR112018068381A2/pt active Search and Examination
- 2017-03-13 RS RS20220067A patent/RS62864B1/sr unknown
- 2017-03-13 SI SI201730212T patent/SI3433369T1/sl unknown
- 2017-03-13 SG SG11201807374WA patent/SG11201807374WA/en unknown
- 2017-03-13 CN CN202210935299.4A patent/CN115927467A/zh active Pending
- 2017-03-13 ES ES20156693T patent/ES2906807T3/es active Active
- 2017-03-13 AU AU2017236239A patent/AU2017236239B2/en active Active
- 2017-03-13 HU HUE20156693A patent/HUE059139T2/hu unknown
-
2018
- 2018-08-17 ZA ZA201805519A patent/ZA201805519B/en unknown
- 2018-08-26 IL IL261379A patent/IL261379B/en unknown
-
2019
- 2019-02-01 HK HK19101854.2A patent/HK1259449A1/zh unknown
-
2021
- 2021-10-05 US US17/494,601 patent/US20220033852A1/en active Pending
-
2022
- 2022-01-26 CY CY20221100063T patent/CY1125086T1/el unknown
- 2022-03-03 IL IL291100A patent/IL291100B2/en unknown
- 2022-08-02 JP JP2022123058A patent/JP7465310B2/ja active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2008119827A1 (en) | 2007-04-02 | 2008-10-09 | Fit Biotech Oy | Transreplicase constructs |
JP2010530245A (ja) | 2007-06-21 | 2010-09-09 | アルファバックス, インコーポレイテッド | αウイルス構造タンパク質の発現のためのプロモーターレスカセット |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Journal of General Virology,2010年,Vol.91, p.1723-1727 |
RNA,2001年,Vol.7, p.1638-1651 |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7465310B2 (ja) | 多用途性且つ効率的な遺伝子発現のためのrnaレプリコン | |
JP7421256B2 (ja) | トランス複製型rna | |
US20230265454A1 (en) | RNA Replicon for Versatile and Efficient Gene Expression | |
NZ785730A (en) | RNA replicon for versatile and efficient gene expression | |
NZ785741A (en) | Trans-replicating RNA |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220829 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220829 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230912 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231207 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240312 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20240329 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7465310 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |