JP7428327B2 - 癌細胞増殖抑制組成物および加工食品 - Google Patents

癌細胞増殖抑制組成物および加工食品 Download PDF

Info

Publication number
JP7428327B2
JP7428327B2 JP2021502197A JP2021502197A JP7428327B2 JP 7428327 B2 JP7428327 B2 JP 7428327B2 JP 2021502197 A JP2021502197 A JP 2021502197A JP 2021502197 A JP2021502197 A JP 2021502197A JP 7428327 B2 JP7428327 B2 JP 7428327B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
formula
compound
rac
cancer cell
cell growth
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
JP2021502197A
Other languages
English (en)
Other versions
JPWO2020171210A1 (ja
Inventor
利治 橋詰
隆 北山
玄伍 柏▲崎▼
怜 平林
芳美 宇高
圭悟 種田
智広 伊藤
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
HAGIHARA FARM PRODUCTION INSTITUTE CO.,LTD.
Mie University NUC
Kinki University
Original Assignee
HAGIHARA FARM PRODUCTION INSTITUTE CO.,LTD.
Mie University NUC
Kinki University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by HAGIHARA FARM PRODUCTION INSTITUTE CO.,LTD., Mie University NUC, Kinki University filed Critical HAGIHARA FARM PRODUCTION INSTITUTE CO.,LTD.
Publication of JPWO2020171210A1 publication Critical patent/JPWO2020171210A1/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP7428327B2 publication Critical patent/JP7428327B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/02—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals
    • C07C233/09—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals with carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of an acyclic unsaturated carbon skeleton
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/175—Amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/131—Amines acyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C211/00—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton
    • C07C211/01—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C211/20—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic unsaturated carbon skeleton
    • C07C211/21—Monoamines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/02—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals
    • C07C233/04—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals with carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C233/05—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having nitrogen atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals with carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

本発明はフィトール系物質を有する癌細胞増殖抑制効果を有する医薬組成物および加工食品に関する。
スイカスプラウトの抽出物には、癌細胞増殖抑制効果があることが知られている（特許文献１）。この文献では、スイカスプラウトの抽出物中で特にフィトールやルテインがその効果に有効であることが示されている。そして、これらの物質は正常細胞に対して影響を及ぼさないことから、副作用の少ない抗癌用医療組成物を提供できると期待される。
国際公開第２０１７／１３１１７５号
フィトールやルテインは抗癌用医療組成物として利用できる期待はある。しかし、効果を発揮させるためには、必要とされる量が多いという課題があった。
本発明は上記の課題に鑑みて想到されたものであり、癌細胞増殖抑制効果の高い物質を提供するものである。
より具体的に本発明に係る癌細胞増殖抑制組成物は、（１）式、（２）式、（６）式、（７）式若しくは（８）式で表される構造を有する化合物若しくはその薬学的に許容される塩のうち少なくとも１種を主成分とすることを特徴とする。
Figure 0007428327000001
Figure 0007428327000002
Figure 0007428327000003
Figure 0007428327000004
Figure 0007428327000005
なお、（１）式、（２）式、（６）式、（７）式、（８）式中の「ｒａｃ－１」、「ｒａｃ－２」、「ｒａｃ－６」、「ｒａｃ－７」、「ｒａｃ－８」は、本明細書中でのそれぞれの化合物の仮名称であり、それぞれの化合物の構造自体に含まれるものではない。
また、本発明は加工食品として提供されることもできる。より具体的に本発明に係る加工食品は、（１）式、（２）式、（６）式、（７）式若しくは（８）式で表される構造を有する化合物若しくはその薬学的に許容される塩を有することを特徴とする。また、（２）式、（６）式、（７）式、（８）式の構造を有する化合物は、初めて合成されたものであり、新規物質でもある。
本発明に係る癌細胞増殖抑制組成物は、癌細胞の増殖を抑制することができる。したがって、抗癌用医薬組成物として好適に利用することができる。また、本発明に係る加工食品は、癌細胞増殖抑制作用を有する化合物を含んでいるので、サプリメントといった形態で定常的に服用することで、癌の予防を行うことができる。
フィトールの癌細胞増殖抑制効果を示すグラフである。 アミノフィトールの癌細胞増殖抑制効果を示すグラフである。 アミドフィトールの癌細胞増殖抑制効果を示すグラフである。 （モノ）メチルアミノフィトールの癌細胞増殖抑制効果を示すグラフである。 （モノ）ヘキシルアミノフィトールの癌細胞増殖抑制効果を示すグラフである。 アセトアミドフィトールの癌細胞増殖抑制効果を示すグラフである。
以下に本発明に係る癌細胞増殖抑制組成物および加工食品について図面および実施例を示し説明を行う。なお、以下の説明は、本発明の一実施形態および一実施例を例示するものであり、本発明が以下の説明に限定されるものではない。以下の説明は本発明の趣旨を逸脱しない範囲で改変することができる。
本発明に係る癌細胞増殖抑制組成物には、（１）式、（２）式、（６）式、（７）式若しくは（８）式で表される構造を有する化合物若しくはその薬学的に許容される塩で構成される。
Figure 0007428327000006
Figure 0007428327000007
Figure 0007428327000008
Figure 0007428327000009
Figure 0007428327000010
（１）式の化合物（ｒａｃ－１）は、（Ｅ）－３，７，１１，１５－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｄｅｃ－２－ｅｎ－１－ａｍｉｎｅ（（Ｅ）－３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデカ－２－エン－１－アミン。以下「アミノフィトール」と呼ぶ。）であり、（２）式の化合物（ｒａｃ－２）は、（Ｅ）－３，７，１１，１５－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｄｅｃ－２－ｅｎａｍｉｄｅ（（Ｅ）－３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデカ－２－エンアミド。以下「アミドフィトール」と呼ぶ。）である。
（６）式の化合物（ｒａｃ－６）は、（Ｅ）－Ｎ，３，７，１１，１５－ｐｅｎｔａｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｄｅｃ－２－ｅｎ－１－ａｍｉｎｅ（（Ｅ）－Ｎ，３，７，１１，１５－ペンタメチルヘキサデカ－２－エン－１－アミン。以下「メチルアミノフィトール」若しくは「モノメチルアミノフィトール」と呼ぶ。）であり、（７）式の化合物（ｒａｃ－７）は、（Ｅ）－Ｎ－ｈｅｘｙｌ－３，７，１１，１５－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｄｅｃ－２－ｅｎ－１－ａｍｉｎｅ（（Ｅ）－Ｎ－ヘキシル－３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデカ－２－エン－１－アミン。以下「ヘキシルアミノフィトール」若しくは「モノヘキシルアミノフィトール」と呼ぶ。）であり、（８）式の化合物（ｒａｃ－８）は、（Ｅ）－Ｎ－（３，７，１１，１５－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｄｅｃ－２－ｅｎ－１－ｙｌ）ａｃｅｔａｍｉｄｅ（（Ｅ）－Ｎ－（３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデカ－２－エン－１－イル）アセトアミド。以下「アセトアミドフィトール」と呼ぶ。）である。
これらの化合物を癌細胞増殖抑制組成物（医薬組成物）として利用する場合は、単独で利用する場合の他、例えば水、メタノール、エタノール、アセトン等の溶媒中で、薬学上許容される酸と混合して塩としても利用できる。ここで、薬学上許容される酸としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸塩、リン酸、硝酸等の無機酸、あるいは酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、コハク酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、マレイン酸、フマル酸、メタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、アスコルビン酸等の有機酸が挙げられる。
本発明の医薬組成物の投与形態は特に限定されず、経口または非経口のいずれの投与形態でもよい。また、投与形態に応じて適当な剤形とすることができ、例えば注射剤、あるいはカプセル剤、錠剤、顆粒剤、散剤、丸剤、細粒剤などの経口剤、直腸投与剤、油脂性坐剤、水性坐剤などの各種製剤に調製することができる。
また、本発明に係る癌細胞増殖抑制組成物は、加工食品として提供することも可能である。加工食品としては、例えば、飴、ガム、ゼリー、ビスケット、クッキー、煎餅、パン、麺、魚肉・畜肉練製品、茶、清涼飲料、コーヒー飲料、乳飲料、乳清飲料、乳酸菌飲料、ヨーグルト、アイスクリーム、プリン等といった嗜好食品や健康食品を含む一般加工食品だけでなく、厚生労働省の保健機能食品制度に規定された特定保健用食品や栄養機能食品などの保健機能食品を含み、さらに、栄養補助食品（サプリメント）、飼料、食品添加物等も加工食品に含まれる。
これらの加工食品の原料中に、癌細胞増殖抑制組成物を添加することで、本発明に係る加工食品を調製することができる。
＜１．化合物の合成＞
以下にアミノフィトールおよびアミドフィトールを合成した実施例について示す。
＜１－１＞
（Ｅ）－１－Ｂｒｏｍｏ－３，７，１１，１５－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｄｅｃ－２－ｅｎｅ：（Ｅ）－１－ブロモ－３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデカ－２－エン（ｒａｃ－３）の合成
Figure 0007428327000011
まず、（３）式の化合物を合成した。「ｒａｃ－３」は、（３）式の構造の化合物の本明細書中における仮番号であり、（３）式の化合物の構造に含まれるものではない。
１００ｍＬ２口フラスコにＥｔ２Ｏ（５ｍＬ）を加え、Ｅｔ２Ｏ（２０ｍＬ）に溶解させたフィトール（５００ｍｇ，１．６８６ｍｍｏｌ）を加え、０°Ｃでしばらく攪拌させた。その後、三臭化リン（０．０６４ｍＬ，０．６７４ｍｍｏｌ，０．４ｅｑ）を滴下し同温で３０分間攪拌させた。
反応はＴＬＣ（Ｔｈｉｎ－Ｌａｙｅｒ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：薄層クロマトグラフィー）（Ｈｅｘａｎｅ（ヘキサン）／ＡｃＯＥｔ（酢酸エチル）＝５／１）で確認した。ＴＬＣ上で原料が消失していることを確認後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を滴下して反応を停止し、酢酸エチルで抽出し、有機層を集めて飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和、ブラインで洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、自然ろ過で硫酸ナトリウムを除き、溶液をロータリーエバポレーターで減圧濃縮して赤褐色オイル状の粗生成物を４４９．９ｍｇ得た。精製操作は行っていない。
Ｙｉｅｌｄ（７４％：ｒｅｄｄｉｓｈ ｂｒｏｗｎ ｏｉｌ）１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ ０．８２－０．８９（ｍ，１４Ｈ），１．０２－１．４１（ｍ，２１Ｈ），１．５０－１．６２（ｍ，２Ｈ），１．７２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝１．３Ｈｚ），２．０２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），４．０４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），５．５３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）．
＜１－２＞
（Ｅ）－（３，７，１１，１５－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｄｅｃ－２－ｅｎ－１－ｙｌ）ｉｓｏｉｎｄｏｌｉｎｅ－１，３－ｄｉｏｎｅ：（Ｅ）－（３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデカ－２－エン－１－イル）イソインドリン－１，３－ジオン（ｒａｃ－４）の合成
Figure 0007428327000012
次にｒａｃ－３を原料として（４）式の化合物を合成した。「ｒａｃ－４」は、（４）式の構造の化合物の本明細書中における仮番号であり、（４）式の化合物の構造に含まれるものではない。
１００ｍＬ３口フラスコに窒素雰囲気下ＤＭＦ（７ｍＬ）に溶解させたｒａｃ－３（４４９．９ｍｇ，１．２５２ｍｍｏｌ）を加え、室温でしばらく攪拌させた。その後、ＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解させたフタルイミドカリウム塩（３０１．４ｍｇ，１．６２７ｍｍｏｌ，１．３ｅｑ）を加え同温で２時間攪拌させた。
反応はＴＬＣ（Ｈｅｘａｎｅのみ）で確認した。ＴＬＣ上で原料が消失していることを確認後、同温でＨ２Ｏを滴下して反応を停止し、酢酸エチルで抽出した。有機層を集めて飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和した。ブラインで洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、自然ろ過で硫酸ナトリウムを除いた。溶液をロータリーエバポレーターで減圧濃縮して黄色結晶状の粗生成物を５９１．５ｍｇ得た。
この粗生成物をオープンカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘａｎｅ／ＡｃＯＥｔ＝２０／１）により精製し黄色オイル状の生成物を収量４２２．３ｍｇで得た。
Ｙｉｅｌｄ（７９％：ｙｅｌｌｏｗ ｏｉｌ）１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ ０．８０－０．８８（ｍ，１２Ｈ），０．９９－１．５７（ｍ，１９Ｈ），１．８２（ｓ，３Ｈ），１．９５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），４．２８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），５．２６（ｔｑ，１Ｈ，Ｊ＝７．３，１．２Ｈｚ），７．８１－７．８６（ｍ，２Ｈ），７．６７－７．７２（ｍ，２Ｈ）．
＜１－３＞アミノフィトールの合成
（Ｅ）－３，７，１１，１５－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｄｅｃ－２－ｅｎ－１－ａｍｉｎｅ：（Ｅ）－３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデカ－２－エン－１－アミン（アミノフィトール（ｒａｃ－１））の合成 上記のｒａｃ－４を原料としてアミノフィトール（ｒａｃ－１）を合成した。１００ｍＬ３口フラスコに窒素雰囲気下エタノール（１０ｍＬ）に溶解させたｒａｃ－４（３００ｍｇ、０．７０５ｍｍｏｌ）を加え、ヒドラジン一水和物（０．１０３ｍＬ、２．１１４ｍｍｏｌ、３．０ｅｑ）を滴下し、室温で２時間攪拌させた。反応はＴＬＣ（Ｈｅｘａｎｅ／ＡｃＯＥｔ＝２０／１）で確認した。
ＴＬＣ上で原料が消失していることを確認後、吸引ろ過し、ろ液を回収して酢酸エチルで抽出し、有機層を集めてブラインで洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、自然ろ過で硫酸ナトリウムを除き、溶液をロータリーエバポレーターで減圧濃縮して黄色結晶の粗生成物を２４６．９ｍｇ得た。この粗生成物をオープンカラムクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ（メタノール）／ＣＨ２Ｃｌ２（ジクロロメタン）＝９５／５、１Ｍアンモニア水１％含有）により精製し黄色オイル状の生成物（アミノフィトール）を収量６４．５ｍｇ（３１％）で得た。
Ｙｉｅｌｄ（３１％：ｙｅｌｌｏｗ ｏｉｌ）１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ ０．８０－０．９１（ｍ，１２Ｈ），１．０２－１．５５（ｍ，２１Ｈ），１．６１（ｓ，３Ｈ），１．９６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），３．２８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），５．２５（ｔｑ，１Ｈ，Ｊ＝６．９，１．３Ｈｚ）．
＜１－４＞アミドフィトールの合成
（Ｅ）－３，７，１１，１５－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｄｅｃ－２－ｅｎａｍｉｄｅ：（Ｅ）－３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデカ－２－エンアミド（アミドフィトール（ｒａｃ－２））の合成
フィタン酸（ＣＡＳ番号：１４７２１－６６－５）を合成した後、フィタン酸からアミドフィトールを合成した。
まず、（５）式のフィタン酸（ｒａｃ－５）を合成した。「ｒａｃ－５」は、（５）式の構造のフィタン酸の本明細書中における仮番号であり、（５）式の化合物の構造に含まれるものではない。
Figure 0007428327000013
１０ｍＬ２口フラスコにアセトニトリル（０．１５０ｍＬ）と水（０．１５０ｍＬ）の混合溶媒を加え、ヨードベンゼンジアセテート（４７７．９ｍｇ、１．４８４ｍｍｏｌ、２．２ｅｑ）と触媒量のＴＥＭＰＯ（２１．１ｍｇ、０．１３５ｍｍｏｌ、０．２ｅｑ）を加えてＮ２雰囲気下室温でしばらく攪拌させた。その後、Ｎ２雰囲気下同温でアセトニトリル（０．７５０ｍＬ）と水（０．７５０ｍＬ）の混合溶液に溶解させたフィトール（２００ｍｇ、０．６７４ｍｍｏｌ）を滴下し、Ｎ２雰囲気下室温で１４時間攪拌させた。
反応はＴＬＣ（Ｈｅｘａｎｅ／ＡｃＯＥｔ＝５／１）で確認した。ＴＬＣ上で原料が残ったままであったが、反応の進行が確認できなかったため、酢酸エチルで抽出、有機層を集めてブラインで洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、自然ろ過で硫酸ナトリウムを除き溶液をロータリーエバポレーターで減圧濃縮して赤色オイル状の粗生成物を３０８．６ｍｇ得た。この粗生成物をオープンカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘａｎｅ／ＡｃＯＥｔ＝１５／１）により精製し黄色オイル状の生成物が収量４７．５ｍｇ（２３％）で得られたが、純度が不十分であったためさらに分取ＨＰＬＣにより精製し、黄色オイル状のフィタン酸（ｒａｃ－５）を収量２１．８ｍｇ（収率１０％）で得た。
Ｙｉｅｌｄ（２３％：ｙｅｌｌｏｗ ｏｉｌ）１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ ０．８０－０．８８（ｍ，１２Ｈ），１．０５－１．５３（ｍ，１９Ｈ），２．０７－２．０２５（ｍ，５Ｈ），５．６９（ｂｓ，１Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ １９．１，１９．７，１９．８，２２．６．２２．７，２４．５，２４．８，２４．９，２８．０，３２．６，３２．８，３６．５，３７．３，３７．４，３９．４，４１．５，１１５．０，１５３．１，１６３．６．
５ｍＬスクリュー管にＴＨＦ（１．０ｍＬ）に溶解させたフィタン酸（ｒａｃ－５）（９６．８ｍｇ，０，３１２ｍｍｏｌ）を加え、２８％アンモニア水溶液（０．２００ｍＬ，２．９５９ｍｍｏｌ，９．５ｅｑ）を滴下し、室温でしばらく攪拌させた。その後、縮合剤としてＤＭＴ－ＭＭ（４－（４，６－Ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ－１，３，５－ｔｒｉａｚｉｎ－２－ｙｌ）－４－ｍｅｔｈｙｌｍｏｒｐｈｏｌｉｎｉｕｍ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｎ－Ｈｙｄｒａｔｅ：１２９．４ｍｇ，０．４６８ｍｍｏｌ、１．５ｅｑ）を加え室温で１６時間攪拌させた。反応はＴＬＣ（Ｈｅｘａｎｅ／ＡｃＯＥｔ＝３／１）で確認した。
ＴＬＣ上で原料が残ったままであったが、反応の進行が確認されなかったため、酢酸エチルで抽出し、ブラインで洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、自然ろ過で硫酸ナトリウムを除き、溶液をロータリーエバポレーターで減圧濃縮して白色結晶状の粗生成物を１０４．５ｍｇ得た。この粗生成物をオープンカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘａｎｅ／ＡｃＯＥｔ＝１／１）により精製し、白色結晶状の生成物を収量１４．１ｍｇ（１５％）で得られたが、純度が不十分であったため、さらに分取ＨＰＬＣにより精製し、白色結晶の生成物（アミドフィトール）を収量７．２ｍｇ（収率８％）で得た。
Ｙｉｅｌｄ（１５％：ｗｈｉｔｅ ｓｏｌｉｄ）１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ ０．８０－０．９１（ｍ，１２Ｈ），１．０２－１．５６（ｍ，１９Ｈ），２．０９（ｔｄ，２Ｈ，Ｊ＝７．７，２．２Ｈｚ），２．１５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝１．０Ｈｚ），５．３１（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）．ＨＲＭＳ ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２０Ｈ３９ＮａＮＯ＋ ３７７．２９２９；Ｆｏｕｎｄ ３７７．２９２９．
＜１－５＞メチルアミノフィトールの合成
（Ｅ）－Ｎ，３，７，１１，１５－ｐｅｎｔａｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｄｅｃ－２－ｅｎ－１－ａｍｉｎｅ：（Ｅ）－Ｎ，３，７，１１，１５－ペンタメチルヘキサデカ－２－エン－１－アミン（ｒａｃ－６）の合成
Figure 0007428327000014
２０ｍＬスクリュー管にＣＨ２Ｃｌ２（４．０ｍＬ）に溶解させた４０％Ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ（０．７４０ｍＬ，２１．０ｍｍｏｌ，３３．４ｅｑ）を加え、室温で攪拌させた。その後、ＣＨ２Ｃｌ２（４．０ｍＬ）に溶解させたｒａｃ－３（２２５．０ｍｇ、０．６３０ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下し、室温で１時間攪拌させた。反応はＴＬＣ（Ｈｅｘａｎｅ／ＡｃＯＥｔ＝５／１）で確認した。
ＴＬＣ上で原料の消失を確認後、水を滴下し希釈、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、Ｂｒｉｎｅで洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、自然ろ過で硫酸ナトリウムを除き、溶液をロータリーエバポレーターで減圧濃縮して黄色オイル状の粗生成物を１６９．１ｍｇ得た。この粗生成物をオープンカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘａｎｅ／ＡｃＯＥｔ＝１／１）により精製し、黄色オイル状の生成物が収量７７．８ｍｇで得られた。純度が不十分なため再度、オープンカラムクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＡｃＯＥｔ＝１／１，トリエチルアミン１％）により精製し黄色オイル状の生成物が収量２８．５ｍｇ（１５％）で得られた。その後、もう一度オープンカラムクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＡｃＯＥｔ＝１／５，トリエチルアミン１％）で精製し黄色オイル状の生成物が収量１７．８ｍｇ（９％）で得られた。
Ｙｉｅｌｄ（９％：Ｙｅｌｌｏｗ ｓｏｌｉｄ）．１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：δ ５．２４（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝１３．５，１．４Ｈｚ），３．１９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），２．４２（２Ｈ，ｓ），２．０１－１．８８（３Ｈ，ｍ），１．６３（３Ｈ，ｓ），１．５７－１．４８（１Ｈ，ｍ），１．４６－１．１６（１３Ｈ，ｍ），１．１６－０．９９（７Ｈ，ｍ），０．８９－０．８０（１２Ｈ，ｍ）．１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ １３７．４２，１２０．９５，４７．８，３８．７，３８．１，３６．２，３６．２，３６．１，３５．４，３４．６，３１．６，３１．５，２６．８，２４．０，２３．６，２３．３，２１．５，２１．４，１８．６，１５．０．ＨＲＭＳ ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２１Ｈ４４Ｎ＋ ３１０．３４６８；Ｆｏｕｎｄ ３１０．３４７７．
＜１－６＞ヘキシルアミノフィトールの合成
（Ｅ）－Ｎ－ｈｅｘｙｌ－３，７，１１，１５－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｄｅｃ－２－ｅｎ－１－ａｍｉｎｅ：（Ｅ）－Ｎ－ヘキシル－３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデカ－２－エン－１－アミン（ｒａｃ－７）の合成
Figure 0007428327000015
５０ｍＬスクリュー管にＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解させたｎ－ｈｅｘｙｌａｍｉｎｅ（４．２０ｍＬ，３．２０ｇ，３１．７ｍｍｏｌ，３３．４ｅｑ）を加え室温で攪拌させた。その後、ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解させたｒａｃ－３（３４２．７ｍｇ，０．９５０ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下し、室温で２時間攪拌させた。反応はＴＬＣ（Ｈｅｘａｎｅ／ＡｃＯＥｔ＝５／１）で確認した。
ＴＬＣ上で原料の消失を確認後、水を滴下し希釈、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、Ｂｒｉｎｅで洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、自然ろ過で硫酸ナトリウムを除き、溶液に水を加えロータリーエバポレーターで試薬残渣を除去し、黄色オイル状の粗生成物を３５２．５ｍｇ得た。この粗生成物をオープンカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘａｎｅ／ＡｃＯＥｔ＝１０／１とＡｃＯＥｔ（トリエチルアミン１％））により精製し黄色オイル状の生成物が収量２７０．２ｍｇ得られた。
Ｙｉｅｌｄ（７５％： Ｙｅｌｌｏｗ ｓｏｌｉｄ）．１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：δ ５．２５（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝１３．９，１．３Ｈｚ），３．２１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ），２．５９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．５Ｈｚ），２．０１－１．９０（２Ｈ，ｍ），１．６２（３Ｈ，ｓ），１．５７－１．４４（３Ｈ，ｍ），１．４４－１．１７（１９Ｈ，ｍ），１．１７－１．００（７Ｈ，ｍ），０．９１－０．８１（１５Ｈ，ｍ）．１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１２５ＭＨｚ）：δ １３７．８，１２２．７，４９．６，４７．３，３９．９，３９．３，３７．４，３７．３，３７．２，３６．６，３２．７，３２．６，３１．８，３０．１，２７．９，２７．１，２５．１，２４．７，２４．４，２２．７，２２．６，１９．７，１６．１，１４．０．ＨＲＭＳ ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２６Ｈ５１ＮａＮＯ＋ ４０２．４０７０；Ｆｏｕｎｄ ４０２．４０７６．
＜１－７＞アセトアミドフィトールの合成
（Ｅ）－Ｎ－（３，７，１１，１５－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｈｅｘａｄｅｃ－２－ｅｎ－１－ｙｌ）ａｃｅｔａｍｉｄｅ：（Ｅ）－Ｎ－（３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデカ－２－エン－１－イル）アセトアミド（ｒａｃ－８）の合成
Figure 0007428327000016
５ｍＬスクリュー管にｄｒｙ ＴＨＦ（１．０ｍＬ）に溶解させたｒａｃ－１（１００ｍｇ，０．３４０ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（０．１５ｍＬ，１．１ｍｍｏｌ，３．１ｅｑ）を加え、Ｎ２雰囲気下０℃で攪拌した。その後、ｄｒｙ ＴＨＦ（１．０ｍＬ）に溶解させた塩化アセチル（０．０４０ｍＬ，０．５３ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を滴下し、Ｎ２雰囲気下同温で２時間攪拌させた。反応はＴＬＣ（Ｈｅｘａｎｅ／ＡｃＯＥｔ＝１／１）で確認した。
ＴＬＣ上で原料の消失を確認後、水を滴下して反応を停止、酢酸エチルで抽出し、有機層を集めて水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、自然ろ過で硫酸ナトリウムを除き、溶液をロータリーエバポレーターで減圧濃縮して黄色オイル状の粗生成物を１０３．１ｍｇ得た。この粗生成物をオープンカラムクロマトグラフィー（Ｈｅｘａｎｅ／ＡｃＯＥｔ＝２／１）により精製し、黄色オイル状の生成物が収量６８．５ｍｇ（６０％）で得られた。
Ｙｉｅｌｄ（６０％： Ｙｅｌｌｏｗ ｓｏｌｉｄ）１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ ５．３５（１Ｈ，ｂｒ ｓ），５．１８（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝１４．０，１．４Ｈｚ），３．８４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ），１．９７（５Ｈ，ｓ），１．６５（４Ｈ，ｓ），１．５６－１．４７（１Ｈ，ｍ），１．４６－１．１８（１Ｈ，ｍ），１．１６－１．００（７Ｈ，ｍ），０．８８－０．８２（１３Ｈ，ｍ）．１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）：δ １６９．８，１４０．６，１１９．５，３９．８，３９．４，３７．６，３７．４，３７．３，３７．２，３６．７，３２．８，３２．７，２８．０，２５．２，２４．８，２４．５，２３．３，２２．７，２２．６，１９．８，１９．７，１６．２．ＨＲＭＳ ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｎａ］＋ Ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２２Ｈ４３ＮａＮＯ＋ ３６０．３２３７；Ｆｏｕｎｄ ３６０．３２３５．
＜２．細胞培養＞
ヒト白血病Ｔ細胞株Ｊｕｒｋａｔ細胞は、独立行政法人理化学研究所バイオリソースセンター（つくば市、茨城県）より入手した。１０％牛胎児血清（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃｓ、Ｋ．Ｋ．、ＭＡ、ＵＳＡ）、１００Ｕ／ｍＬペニシリンおよび１００μｇ／ｍＬスプレトマイシン（共にＬｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ、ＵＳＡ）を含んだＲＰＭＩ１６４０培地（和光純薬工業株式会社、大阪市、大阪府）により３７℃、９５％空気－５％ＣＯ２環境下で培養した。
＜３．化合物によるヒト白血病Ｔ細胞株Ｊｕｒｋａｔ細胞の増殖への影響＞
Ｊｕｒｋａｔ細胞を１×１０５ ｃｅｌｌｓ／ｍＬに調整し、２４ウェルマルチプレート（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃｓ Ｋ．Ｋ．）に５００μＬ／ｗｅｌｌずつ播種した。播種後、フィトール、アミノフィトール、アミドフィトール、メチルアミノフィトール、ヘキシルアミノフィトール、アセトアミドフィトールのそれぞれを、最終濃度が１０μＭ、２５μＭ、５０μＭとなるように蒸留水で調節し、加えた。なお、コントロールは化合物を加えないものである。各化合物を加えた後、２４、４８、７２時間後に細胞をトライパンブルー（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で染色し、血球計算盤を用いて生細胞を計数した。
結果を図１から図６に示す。横軸は培養時間（時間）であり、縦軸は生存細胞数（×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬ）である。図中「Ｃｏｎｔ」はコントロールを表し、「１０μＭ」、「２５μＭ」、「５０μＭ」は、濃度を表す。図１は、フィトール、図２はアミノフィトール、図３はアミドフィトール、図４はモノメチルアミノフィトール、図５はモノヘキシルアミノフィトール、図６はアセトアミドフィトールである。フィトールは、特許文献１に示したようにＪｕｒｋａｔ細胞（癌細胞）の増殖を抑制し、濃度依存性もあった。
一方、アミノフィトール、アミドフィトール、モノメチルアミノフィトールおよびモノヘキシルアミノフィトール、アセトアミドフィトールは、フィトール以上の効果を示した。より具体的には、フィトールでは、５０μＭの濃度で７２時間かけても、まだ生存細胞が確認できたが、アミノフィトール、アミドフィトール、モノメチルアミノフィトール、モノヘキシルアミノフィトールでは、２５μＭの濃度で、２４時間後に、ほとんど生存する細胞はなかった。アセトアミドフィトールについては、２５μＭの濃度でもまだ生存細胞が確認できたが、５０μＭの濃度ではほとんど生存する細胞はなかった。
グラフ中にそれぞれの化合物でのＩＣ５０を求めた結果を示す。フィトールが２９．８μＭであったのに対して、アミノフィトールは３．８μＭ、アミドフィトールは９．６μＭ、モノメチルアミノフィトールは６．６μＭ、モノヘキシルアミノフィトールは８．５μＭと、フィトールよりも１桁以上効果が高いことがわかった。なお、アセトアミドフィトールは２１．２μＭと、フィトールよりは低かった。
本発明に係る癌細胞増殖抑制組成物は、癌の治療や予防に好適に利用することができる。

Claims (6)

  1. （１）式、（２）式、（６）式、（７）式若しくは（８）式で表される構造を有する化合物若しくはその薬学的に許容される塩のうち少なくとも１種を主成分とする癌細胞増殖抑制組成物。
  2. （２）式、（６）式、（７）式若しくは（８）式で表される構造を有する化合物若しくはその薬学的に許容される塩のうち少なくとも１種を含む加工食品。
  3. （２）式の構造を有する化合物。
  4. （６）式の構造を有する化合物。
  5. （７）式の構造を有する化合物。
  6. （８）式の構造を有する化合物。
JP2021502197A 2019-02-21 2020-02-21 癌細胞増殖抑制組成物および加工食品 Active JP7428327B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2019029800 2019-02-21
JP2019029800 2019-02-21
PCT/JP2020/007102 WO2020171210A1 (ja) 2019-02-21 2020-02-21 癌細胞増殖抑制組成物および加工食品

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPWO2020171210A1 JPWO2020171210A1 (ja) 2020-08-27
JP7428327B2 true JP7428327B2 (ja) 2024-02-06

Family

ID=72144061

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2021502197A Active JP7428327B2 (ja) 2019-02-21 2020-02-21 癌細胞増殖抑制組成物および加工食品

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20220135514A1 (ja)
JP (1) JP7428327B2 (ja)
CN (1) CN113453672A (ja)
WO (1) WO2020171210A1 (ja)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2022144783A (ja) * 2021-03-19 2022-10-03 株式会社萩原農場生産研究所 癌細胞増殖抑制組成物および加工食品

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050158329A1 (en) 2004-01-21 2005-07-21 Ghosh Swapan K. Novel phytol derived immunoadjuvants and their use in vaccine formulations

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PH16234A (en) * 1979-08-14 1983-08-11 Eisai Co Ltd Polyphenylcarboxylic acid amides
JPS5632442A (en) * 1979-08-28 1981-04-01 Eisai Co Ltd Polyprenylcarboxylic acid amide
US4959370A (en) * 1989-03-29 1990-09-25 Phillip Crews Alkaloids of marine origin
EP1069130B1 (en) * 1999-07-15 2004-08-11 Hoechst Marion Roussel Moenomycin A Derivatives, their preparation, and use as antibacterial products
CN108601756B (zh) * 2016-01-29 2021-03-05 学校法人近畿大学 将来源于西瓜苗的物质作为主要成分的加工食品和医药组合物

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050158329A1 (en) 2004-01-21 2005-07-21 Ghosh Swapan K. Novel phytol derived immunoadjuvants and their use in vaccine formulations

Also Published As

Publication number Publication date
CN113453672A (zh) 2021-09-28
JPWO2020171210A1 (ja) 2020-08-27
US20220135514A1 (en) 2022-05-05
WO2020171210A1 (ja) 2020-08-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6014640B2 (ja) レバウジオシドａ誘導体生成物及び製作方法
US7776923B2 (en) Use of trans-pellitorin as flavor substance
EP2943500B1 (en) Crystalline 3-o-fucosyllactose
EP2119712A1 (en) Novel methylated catechin and composition containing the same
JP5586715B2 (ja) ７−ヒドロキシフラボン誘導体の調製方法
JP7428327B2 (ja) 癌細胞増殖抑制組成物および加工食品
JPWO2006137139A1 (ja) マンゴスチンの単離方法とそれを含有する医薬品、及び健康食品
CN116867775A (zh) 作为trpm8激活剂的有机化合物
KR20030038383A (ko) 항우울ㆍ항스트레스제 및 이를 포함하는 조성물
KR20080032105A (ko) 홉산의 무기염을 포함하는 조성물 및 홉산의 무기염생산방법
CN116096347A (zh) 清凉感组合物
WO2022196731A1 (ja) 癌細胞増殖抑制組成物および加工食品
ES2512240T3 (es) Método para preparar espilantol y producto intermedio para su preparación
CN112745288B (zh) β-烷氧基醇二苯并呫吨类化合物及其应用
JP2006117582A (ja) インターロイキン４産生抑制剤とその利用
JP2006348003A (ja) マスト細胞ＩｇＥレセプター発現抑制剤
JP6368270B2 (ja) モニエロサイドａ及びその誘導体、又はそれを有効成分として含有する医薬用組成物、健康食品又は化粧品
JP2014185099A (ja) 細胞増殖抑制剤およびがんの予防・治療剤
WO2024157899A1 (ja) 癌細胞増殖抑制組成物および加工食品
WO2019146801A1 (ja) 新規化合物
JP6242532B1 (ja) 新規化合物、脂肪肝の予防又は治療剤、血中コレステロール低下剤及び血中コレステロール低下用食品組成物
WO2024017814A1 (en) Urolithin a - betain co-crystal (i)
JP3525267B2 (ja) 抗酸化作用を有するマロフェノンの利用およびその製造方法
TWI703120B (zh) 甘草素前驅物質的製造方法
WO2024017815A1 (en) Urolithin a - betain co-crystal (ii)

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821

Effective date: 20210623

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20221108

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20230808

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20231010

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20240109

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20240116

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 7428327

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150