JP7418441B2

JP7418441B2 - Ｍａｔ２Ａのアザ複素二環式阻害剤、およびがんの治療のための使用方法

Info

Publication number: JP7418441B2
Application number: JP2021538127A
Authority: JP
Inventors: ゼノンディー．コンテアティス，; ミンゾンリ，; サミュエルケー．レズニック，; ジフアスイ，
Original assignee: Laboratoires Servier SAS
Current assignee: Laboratoires Servier SAS
Priority date: 2018-12-27
Filing date: 2019-12-27
Publication date: 2024-01-19
Anticipated expiration: 2039-12-27
Also published as: ZA202104423B; CO2021009879A2; JP2024015340A; AR117544A1; CA3124952A1; JOP20210172A1; CR20210410A; MA54608B1; PE20212090A1; BR112021012595A2; IL284326A; EP3902803A1; GEP20237519B; AU2019416349A1; TWI816962B; IL284326B1; SA521422405B1; LT3902803T; AU2019416349B2; CL2021001721A1

Description

関連出願への相互参照
本出願は、2018年12月27日に出願された米国仮特許出願第62/785,519号の優先権を主張し、その全体が本明細書に参照により組み込まれる。

S-アデノシルメチオニンシンテターゼとしても知られるメチオニンアデノシルトランスフェラーゼ（MAT）は、メチオニンおよびATPからのS-アデノシルメチオニン（SAM、またはADOMET）の合成を触媒する細胞酵素であり、当該触媒はメチオニンサイクルの律速段階であると考えられている。SAMは、ポリアミン生合成のプロピルアミノドナーであり、DNAメチル化の主たるメチルドナーであり、遺伝子転写および細胞増殖に関与し、また二次代謝産物の産生に関与する。

MAT1AおよびMAT2Aと表される二つの遺伝子は、それぞれ別個の二つの触媒性MATアイソフォームをコードする。第三の遺伝子、MAT2Bは、MAT2A調節サブユニットをコードする。MAT1Aは成人肝臓で特異的に発現され、一方でMAT2Aは広く分布している。MATアイソフォーム同士は触媒運動性および調節性の特性で異なるため、MAT1A発現細胞はMAT2A発現細胞よりも著しく高いSAMレベルを有する。MAT2Aプロモーターの低メチル化およびヒストンアセチル化は、MAT2A発現上昇を引き起こすことが分かっている。例えば、M. Vazquez-Chantada et al., Gastroenterology 138 (2010) 1943-53; M. Frau et al., J. Hepatol. 59 (2013) 830-41; M. Frau et al., Hepatology 56 (2012) 165-75; and R. M. Pascale et al., Transl. Gastroenterol. Hepatol. 3 (2018) 36を参照されたい。

肝細胞がん（HCC）では、MAT1Aの発現低下およびMAT2Aの発現上昇が起こるが、これはMAT1A：MAT2Aスイッチとして知られている。このスイッチは、MAT2Bの発現上昇を伴い、より低いSAM含量を導くが、これは肝腫細胞に対する増殖利益を提供する。MAT2Aは、肝腫細胞の増殖を促進する上で重要な役割を果たすため、抗腫瘍療法の標的である。最近の研究では、低分子干渉RNAを使用したサイレンシングが実質的に増殖を抑制し、肝腫細胞においてアポトーシスを誘発することが示されている。例えば、T. Li et al., J. Cancer 7(10) (2016) 1317-1327を参照されたい。

MTAP欠損である一部のがん細胞株は、特にMAT2Aの阻害に感受性である。Marjon et al. (Cell Reports 15(3) (2016) 574-587)。MTAP（メチルチオアデノシンホスホリラーゼ）は、メチルチオアデノシン（MTA）のアデニンおよび5-メチルチオリボース-1-リン酸塩への変換を触媒する、正常組織で広く発現される酵素である。アデニンは、アデノシン一リン酸を生成するために再利用され、5-メチルチオリボース-1-リン酸塩はメチオニンおよびギ酸塩に変換される。このサルベージ経路のため、MTAは、例えばL-アラノシンなどの代謝拮抗剤を用いて、デノボプリン合成が遮断されたときに代替的プリン源としての役割を果たすことができる。

MAT2Aは、肝細胞がんおよび白血病を含むMTAP欠失を欠いているさらなるがんでは調節不全にされる。J. Cai et al., Cancer Res. 58 (1998) 1444-1450; T. S. Jani et al., Cell. Res. 19 (2009) 358-369。RNA干渉を介したMAT2A発現のサイレンシングは、いくつかのがんモデルにおいて抗増殖効果をもたらす。H. Chen et al., Gastroenterology 133 (2007) 207-218; Q. Liu et al. Hepatol. Res. 37 (2007) 376-388。

多数のヒトおよびマウスの悪性細胞は、MTAP活性を欠いている。MTAP欠損は組織培養細胞において存在するだけでなく、当該欠損は原発性白血病、神経膠腫、黒色腫、膵がん、非小細胞肺がん（NSCLC）、膀胱がん、星細胞腫、骨肉腫、頭頸部がん、粘液様軟骨肉腫、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、軟部組織肉腫、非ホジキンリンパ腫、および中皮腫においても存在する。ヒトMTAPをコードする遺伝子は、ヒト染色体9p上の領域9p21に位置する。この領域はまた、腫瘍抑制遺伝子p16INK4A（CDKN2Aとしても知られる）およびpl5INK4Bも含有する。これら遺伝子は、それぞれサイクリンD依存性キナーゼcdk4およびcdk6の阻害剤である、p16およびp15をコードする。
代わりとして、p16INK4A転写物を、pl4ARFをコードする転写物に挿入される代替的なリーディングフレーム（ARF）とすることが可能である。pl4ARFはMDM2に結合し、p53の分解を防止する（Pomerantz et al. (1998) Cell 92:713-723）。9p21染色体領域は、白血病、NSLC、膵がん、神経膠腫、黒色腫、および中皮腫を含む、さまざまながんでホモ接合性欠失していることがよくあるため、関心対象である。欠失は複数の遺伝子を不活性化することが多い。例えば、Cairns et. al. （(1995) Nat. Gen. 11:210-212）は、500を超える原発腫瘍を研究した後に、当該腫瘍において特定されたほぼすべての欠失が、MTAP、pl4ARF、およびP16INK4Aを含有する170kb領域を含んでいたことを報告した。Carson et al. （国際公開第99/67634号）は、MTAPをコードする遺伝子およびp16をコードする遺伝子の腫瘍発生段階とホモ接合性の喪失との間に相関関係が存在することを報告した。例えば、p16INK4Aではないが、MTAP遺伝子の欠失は、発生の早期段階でのがんの兆候であることが報告されたが、p16およびMTAPをコードする遺伝子の欠失は、腫瘍発生のより進行した段階でのがんの兆候であることが報告された。一部の骨肉腫患者では、MTAP遺伝子は診断時に存在していたが、後の時点では欠失していた（Garcia-Castellano et al., Clin. Cancer Res. 8(3) 2002 782-787）。

M. Vazquez-Chantada et al., Gastroenterology 138 (2010) 1943-53 M. Frau et al., J. Hepatol. 59 (2013) 830-41 M. Frau et al., Hepatology 56 (2012) 165-75 R. M. Pascale et al., Transl. Gastroenterol. Hepatol. 3 (2018) 36 T. Li et al., J. Cancer 7(10) (2016) 1317-1327 Marjon et al. (Cell Reports 15(3) (2016) 574-587) J. Cai et al., Cancer Res. 58 (1998) 1444-1450 T. S. Jani et al., Cell. Res. 19 (2009) 358-369 H. Chen et al., Gastroenterology 133 (2007) 207-218 Q. Liu et al. Hepatol. Res. 37 (2007) 376-388 Pomerantz et al. (1998) Cell 92:713-723 Garcia-Castellano et al., Clin. Cancer Res. 8(3) 2002 782-787

本開示は、MAT2Aを阻害する化合物を提供する。化合物およびそれらの医薬組成物は、例えば外科手術、放射線療法、化学療法、およびホルモン療法などの標準治療に対して不応性のものを含む、種々のがんを治療する方法に有用である。

したがって、一部の実施形態によれば、本開示は、以下の一般式Iに従った化合物またはその薬学的に許容可能な塩、互変異性体、および/またはアイソトポログを提供する：

一般式I中、LはO、S、NR、または結合である。Rは、HまたはC₁-C₆アルキルである。

R¹は、C₁-C₆アルキル、C₂-C₆アルケニル、C₃-C₆カルボシクリル、-(C₁-C₆アルキル)(C₃-C₆カルボシクリル)、および-(C₁-C₆アルキル)(C₃-C₆シクロアルケニル)からなる群から選択されるものであって、式中、R¹の任意のアルキルは直鎖または分岐である。一実施形態では、R¹は、1～6個のハロまたは1～6個の重水素によって任意に置換される。

あるいは、一実施形態において、LがNRである場合、Lと組み合わせたRおよびR¹は、一つまたは複数のR^Aで置換されていてもよい3～6員のヘテロシクロアルキルを表す（ここで、環の1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）。

R²およびR³は、C₂-C₆アルキニル、C₆-C₁₀アリール、C₃-C₆カルボシクリル、5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）、および3～14員のヘテロシクロアルキル（ここで、ヘテロシクロアルキルの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）からなる群から独立に選択される。R²およびR³は、R^A、OR^A、ハロ、-N＝N-R^A、NR^AR^B、-(C₁-C₆アルキル)NR^AR^B、-C(O)OR^A、-C(O)NR^AR^B、-OC(O)R^A、-SI(C₁-C₆アルキル)₃、および-CNからなる群から選択される一つまたは複数の置換基によって、独立しておよび任意で、置換される。

R⁴は、H、C₁-C₆アルキル(任意で一つまたは複数のハロ、ヒドロキシ、または3～14員のヘテロシクロアルコキシ(ここで、ヘテロシクロアルコキシの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される))、-O(C₁-C_6-アルキル)(任意で一つまたは複数のハロにより置換される)、-OH、ハロ、-CN、-(C₁-C₆アルキル）NR^AR^B、および-NR^AR^Bからなる群から選択される。

R⁵ は、H、C₁-C₆アルキル、C₁-C₆アルコキシ、C₂-C₆アルケニル、C₂-C₆アルキニル、ハロ、-CN、および-NR^CR^Dからなる群から選択される。

R^AおよびR^Bは、H、-CN、-ヒドロキシ、オキソ、C₁-C₆アルキル、C₁-C₆アルコキシ、C₂-C₆アルケニル、C₂-C₆アルキニル、-NH₂、-S(O)_0-2-(C₁-C₆アルキル)、-S(O)_0-2-(C₆-C₁₀アリール)、-C(O)(C₁-C₆アルキル)、-C(O)(C₃-C₁₄カルボシクリル)、-C₃-C₁₄カルボシクリル、-(C₁-C₆アルキル)(C₃-C₁₄カルボシクリル)、C₆-C₁₀アリール、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C₁-C₆アルキル)-(3～14員のヘテロシクロアルキル)（ここで、ヘテロシクロアルキルの1～4員はN、O、およびSから独立に選択される）、および5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員はN、O、およびSから独立に選択される）からなる群から独立に選択される。

R^AおよびR^Bの各アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、アリール、カルボシクリル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール部分は、重水素、ヒドロキシ、ハロ、-NR'₂（ここで、各R'は、C₁-C₆アルキル、C₂-C₆アルケニル、C₂-C₆アルキニル、C₆-C₁₀アリール、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C₁-C₆アルキル)-(3～14員のヘテロシクロアルキル）（ここで、環の1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）、および5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）からなる群から独立に選択される）、-NHC(O)(OC₁-C₆アルキル）、-NO₂、-CN、オキソ、-C(O)OH、-C(O)O(C₁-C₆アルキル)、-C₁-C₆アルキル(C₁-C₆アルコキシ)、-C(O)NH₂、C₁-C₆アルキル、-C(O)C₁-C₆アルキル、-OC₁-C₆アルキル、-Si(C₁-C₆アルキル)₃、-S(O)_0-2-(C₁-C₆アルキル)、C₆-C₁₀アリール、-(C₁-C₆アルキル)(C₆-C₁₀アリール)、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C₁-C₆アルキル)-(3～14員の複素環)（ここで、複素環の1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）、および-O(C₆-C₁₄アリール)からなる群から選択される一つまたは複数の置換基で任意に置換される。R^AおよびR^Bの各アルキル、アルケニル、アリール、およびヘテロシクロアルキル置換基は、重水素、ヒドロキシ、-OC₁-C₆アルキル、ハロ、-NH₂、-(C₁-C₆アルキル)NH₂、-C(O)OH、CN、およびオキソからなる群から選択される一つまたは複数の置換基で任意に置換される。

R^CおよびR^Dはそれぞれ独立して、HおよびC₁-C₆アルキルから選択される。

本開示は、別の実施形態では、本明細書に記載の治療有効量の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、互変異性体、および/またはアイソトポログ、ならびに薬学的に許容可能な担体を含む、医薬組成物を提供する。

別の実施形態では、本開示は、がんを患う対象においてがんを治療する方法であって、対象に対して本明細書に記載の有効量のMAT2A阻害剤化合物を投与することを含む、方法を提供する。

本開示のさらに別の実施形態は、細胞におけるS-アデノシルメチオニン（SAM）の合成を阻害する方法であって、細胞に、本明細書に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、互変異性体、および/またはアイソトポログの有効量を導入することを含む、方法である。

本開示は、別の実施形態では、対象におけるS-アデノシルメチオニン(SAM)の合成を阻害するための方法であって、本明細書に記載の少なくとも一つの化合物またはその塩、互変異性体、および/またはアイソトポログの有効量を対象に投与することを含む、方法に関する。

一実施形態では、本開示は、がんを患う対象においてがんを治療する方法であって、がんは、メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（MTAP）遺伝子発現が、MTAP遺伝子もしくはMTAPタンパク質が存在するおよび/もしくは完全に機能しているがんと比較して、減少または不在であること、MTAP遺伝子が不在であること、またはMTAPタンパク質の機能低下を特徴とするものであって、本明細書に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、互変異性体、および/またはアイソトポログの治療有効量を対象に投与することを含む、方法を提供する。

本開示はまた、別の実施形態では、S-アデノシルメチオニン(SAM)の合成を阻害するための、本明細書に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、互変異性体、および/またはアイソトポログを提供する。

またさらなる実施形態では、本開示は、がんを患う対象のがんの治療において使用するための、本明細書に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、互変異性体、および/またはアイソトポログを提供する。

本開示はまた、がんを治療するための医薬品の製造のための、本明細書に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
一実施形態において、例えば、以下の項目が提供される。
（項目１）
以下の一般式Iに従った化合物であって、

式中、
Lは、O、S、NR、または結合であり、
Rは、HまたはC ₁ -C ₆ アルキルであり、
R ¹ は、C ₁ -C ₆ アルキル、C ₂ -C ₆ アルケニル、C ₃ -C ₆ カルボシクリル、-(C ₁ -C ₆ アルキル)(C ₃ -C ₆ カルボシクリル)、および-(C ₁ -C ₆ アルキル)(C ₃ -C ₆ シクロアルケニル)からなる群から選択されるものであって、式中、
R ¹ の任意のアルキルは直鎖または分岐であり、
R ¹ は、1～6個のハロまたは1～6個の重水素によって任意に置換され、
または、LがNRである場合、Lと組み合わせたRおよびR ¹ は、一つまたは複数のR ^A で置換されていてもよい3～6員のヘテロシクロアルキル（ここで、環の1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）を表し、
R ² およびR ³ は、(C ₂ -C ₆ )アルキニル、C ₆ -C ₁₀ アリール、C ₃ -C ₆ カルボシクリル、5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）、および3～14員のヘテロシクロアルキル（ここで、ヘテロシクロアルキルの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）からなる群から独立に選択され、
式中、R ² およびR ³ は、R ^A 、OR ^A 、ハロ、-N＝N-R ^A 、NR ^A R ^B 、-(C ₁ -C ₆ アルキル)NR ^A R ^B 、-C(O)OR ^A 、-C(O)NR ^A R ^B 、-OC(O)R ^A 、-Si(C ₁ -C ₆ アルキル) ₃ 、および-CNからなる群から選択される一つまたは複数の置換基によって、独立しておよび任意に置換され、
R ⁴ は、H、C ₁ -C ₆ アルキル(一つまたは複数のハロ、ヒドロキシ、または3～14員のヘテロシクロアルコキシ(ここで、ヘテロシクロアルコキシの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される)により任意に置換される)、-O(C ₁ -C _6- アルキル)(一つまたは複数のハロにより任意に置換される)、-OH、ハロ、-CN、-(C ₁ -C ₆ アルキル）NR ^A R ^B 、および-NR ^A R ^B からなる群から選択され、
R ⁵ は、H、C ₁ -C ₆ アルキル、C ₁ -C ₆ アルコキシ、C ₂ -C ₆ アルケニル、C ₂ -C ₆ アルキニル、ハロ、-CN、および-NR ^C R ^D からなる群から選択され、
R ^A およびR ^B は、H、-CN、-ヒドロキシ、オキソ、C ₁ -C ₆ アルキル、C ₁ -C ₆ アルコキシ、C ₂ -C ₆ アルケニル、C ₂ -C ₆ アルキニル、-NH ₂ 、-S(O) _0-2 -(C ₁ -C ₆ アルキル)、-S(O) _0-2 -(C ₆ -C ₁₀ アリール)、-C(O)(C ₁ -C ₆ アルキル)、-C(O)(C ₃ -C ₁₄ カルボシクリル)、-C ₃ -C ₁₄ カルボシクリル、-(C ₁ -C ₆ アルキル)(C ₃ -C ₁₄ カルボシクリル)、C ₆ -C ₁₀ アリール、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C ₁ -C ₆ アルキル)-(3～14員のヘテロシクロアルキル)（ここで、ヘテロシクロアルキルの1～4員はN、O、およびSから独立に選択される）、および5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員はN、O、およびSから独立に選択される）からなる群から独立に選択され、
式中、R ^A およびR ^B の各アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、アリール、カルボシクリル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール部分は、重水素、ヒドロキシ、ハロ、-NR' ₂ （ここで、各R'は、C ₁ -C ₆ アルキル、C ₂ -C ₆ アルケニル、C ₂ -C ₆ アルキニル、C ₆ -C ₁₀ アリール、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C ₁ -C ₆ アルキル)-(3～14員のヘテロシクロアルキル)（ここで、環の1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）、および5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）からなる群から独立に選択される)、-NHC(O)(OC ₁ -C ₆ アルキル)、-NO ₂ 、-CN、オキソ、-C(O)OH、-C(O)O(C ₁ -C ₆ アルキル）、-C ₁ -C ₆ アルキル(C ₁ -C ₆ アルコキシ)、-C(O)NH ₂ 、C ₁ -C ₆ アルキル、-C(O)C ₁ -C ₆ アルキル、-OC ₁ -C ₆ アルキル、-Si(C ₁ -C ₆ アルキル) ₃ 、-S(O) _0-2 -(C ₁ -C ₆ アルキル)、C ₆ -C ₁₀ アリール、-(C ₁ -C ₆ アルキル)(C ₆ -C ₁₀ アリール)、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C ₁ -C ₆ アルキル)-(3～14員の複素環)（ここで、複素環の1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）、および-O(C ₆ -C ₁₄ アリール)からなる群から選択される一つまたは複数の置換基で置換されていてもよいものであり、
式中、R ^A およびR ^B の各アルキル、アルケニル、アリール、およびヘテロシクロアルキル置換基は、ヒドロキシ、-OC ₁ -C ₆ アルキル、ハロ、-NH ₂ 、-(C ₁ -C ₆ アルキル)NH ₂ 、-C(O)OH、CN、およびオキソからなる群から選択される一つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
R ^C およびR ^D はそれぞれ独立して、HおよびC ₁ -C ₆ アルキルから選択される、化合物、
またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目２）
式中、
R ⁴ は、H、C ₁ -C _6- アルキル(一つまたは複数のハロ、ヒドロキシ、または3～14員のヘテロシクロアルコキシ(ここで、ヘテロシクロアルコキシの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される)によって任意に置換される)、-O(C ₁ -C ₆ -アルキル)、-(C ₁ -C ₆ アルキル)NR ^A R ^B 、および-NR ^A R ^B (ここで、R ^A およびR ^B は、HおよびC ₁ -C ₆ アルキルから独立に選択される）からなる群から選択され、
R ⁵ は、H、C ₁ -C ₆ アルキル、C ₁ -C ₆ アルコキシ、および-NR ^C R ^D からなる群から選択される、項目1に記載の化合物。
（項目３）
R ⁴ およびR ⁵ のうちの少なくとも一つがHである、項目1または2に記載の化合物。
（項目４）
R ⁴ が、Hである、項目1～3のいずれか一項に記載の化合物。
（項目５）
R ⁵ が、Hである、項目1～4のいずれか一項に記載の化合物。
（項目６）
R ⁴ およびR ⁵ の各々が、Hである、項目1～5のいずれか一項に記載の化合物。
（項目７）
R ² が、任意に置換されたC ₆ -C ₁₀ アリールまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリールである、項目1から6のいずれか一項に記載の化合物。
（項目８）
R ² が、任意に置換されたC _6- C ₁₀ アリールである、項目7に記載の化合物。
（項目９）
R ² が、任意に置換されたフェニルである、項目8に記載の化合物。
（項目１０）
R ² が、任意に置換された5～10員のヘテロアリールであり、環の1員がNである、項目7に記載の化合物。
（項目１１）
R ² が、任意に置換された5または6員のヘテロアリールである、項目10に記載の化合物。
（項目１２）
R ² が、任意に置換された6員のヘテロアリールである、項目10または11に記載の化合物。
（項目１３）
R ² が、任意に置換されたピリジルである、項目10～12のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１４）
R ³ が、任意に置換された3～14員のヘテロシクロアルキルまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリールである、項目1～12のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１５）
R ³ が、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ピリジニル、ピリジノニル、ピリダジニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、キナゾリニル、イミダゾピリジニル、ピラゾロピリジニル、トリアゾロピリジニル、シンノリニル、イソキサゾリル、ピラゾリル、ベンゾフラニル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾジオキシニル、およびテトラヒドロベンゾジオキシニルからなる群から選択され、これらのそれぞれが任意に置換され得る、項目14に記載の化合物。
（項目１６）
R ³ が、任意に置換されたC ₆ -C ₁₀ アリールである、項目1～12のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１７）
R ³ が、任意に置換されたフェニルである、項目16に記載の化合物。
（項目１８）
R ² が、任意に置換されたフェニルであり、R ³ が、任意に置換された3～14員のヘテロシクロアルキルまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリールである、項目1～6のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１９）
Lが、OまたはNRである、項目1～18のいずれか一項に記載の化合物。
（項目２０）
R ¹ が、任意に置換されたC _1- C ₆ アルキルまたは任意に置換されたC _3- C ₆ カルボシクリルである、項目19に記載の化合物。
（項目２１）
R ¹ が、1～3のFで置換されていてもよいC ₁ -C ₃ アルキルである、項目19または20に記載の化合物。
（項目２２）
式中、
LはOまたはNRであり、またRはHであり、
R ¹ は1～3のFで置換されていてもよいC ₁ -C ₃ アルキルであり、
R ² は、任意に置換された3～14員のヘテロシクロアルキルまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールの1員はNである）または任意に置換されたC ₆ -C ₁₀ アリールであり、
R ³ は、任意に置換された3～14員のヘテロシクロアルキルまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリールであり、ここでヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールの1～3員は、N、O、およびSから独立に選択され、また
R ⁴ およびR ⁵ の各々はHである、項目1に記載の化合物。
（項目２３）
Lが、NRである、項目22に記載の化合物。
（項目２４）
前記化合物が、以下の表から選択される、項目1に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

（項目２５）
前記化合物が、以下の表から選択される、項目1に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

（項目２６）
項目1～25のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量、および薬学的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。
（項目２７）
がんを患う対象においてがんを治療する方法であって、前記対象に対して、項目1～25のいずれか一項に記載のMAT2A阻害剤化合物またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を投与することを含む、方法。
（項目２８）
前記がんが、MTAP-欠失がんである、項目27に記載の方法。
（項目２９）
がんを患う対象においてがんを治療する方法であって、前記対象に対して、項目1～25のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を投与するこ
とを含む、方法。
（項目３０）
前記がんが、MTAP-欠失がんである、項目29に記載の方法。
（項目３１）
前記がんが、中皮腫、神経芽細胞腫、直腸がん、大腸がん、家族性腺腫ポリポーシスがんおよび、遺伝性非ポリポーシス大腸がん、食道がん、陰唇がん、喉頭がん、下咽頭がん、舌がん、唾液腺がん、胃がん、腺がん、髄様甲状腺がん、乳頭状甲状腺がん、腎がん、腎実質がん、卵巣がん、子宮頸部がん、子宮体がん、子宮内膜がん、絨毛がん、膵がん、前立腺がん、膀胱がん、精巣がん、乳がん、尿路がん（urinary carcinoma）、黒色腫、脳腫瘍、リンパ腫、頭頸部がん、急性リンパ性白血病（ALL）、慢性リンパ性白血病（CLL）、急性骨髄性白血病（AML）、慢性骨髄性白血病（CML）、肝細胞がん、胆嚢がん、気管支がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、多発性骨髄腫、基底細胞腫、奇形腫、網膜芽細胞腫、脈絡膜黒色腫、精上皮腫、横紋筋肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫および形質細胞腫からなる群から選択される、項目27～29のいずれか一項に記載の方法。
（項目３２）
前記がんが、B細胞急性リンパ球性白血病（B-ALL）、中皮腫、リンパ腫、膵がん、肺がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、脳腫瘍、頭頸部がん、黒色腫および乳がんからなる群から選択される、項目29または30に記載の方法。
（項目３３）
前記がんが、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肺の腺がん、および肺の扁平上皮がんからなる群から選択される肺がんである、項目32に記載の方法。
（項目３４）
前記がんが、神経膠腫、神経膠芽細胞腫、星細胞腫、髄膜腫、髄芽細胞腫、末梢性神経外胚葉性腫瘍、および頭蓋咽頭腫からなる群から選択される脳腫瘍である、項目32に記載の方法。
（項目３５）
前記がんが、トリプルネガティブ乳がん（TNBC）である、項目32に記載の方法。
（項目３６）
前記がんが、マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫、および成人T細胞性白血病/リンパ腫からなる群から選択されるリンパ腫である、項目32に記載の方法。
（項目３７）
がんを患う対象におけるがんの治療で使用するための、項目1～25のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目３８）
前記がんが、MTAP欠失がんである、項目37に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目３９）
前記がんが、中皮腫、神経芽細胞腫、直腸がん、大腸がん、家族性腺腫ポリポーシスがんおよび、遺伝性非ポリポーシス大腸がん、食道がん、陰唇がん、喉頭がん、下咽頭がん、舌がん、唾液腺がん、胃がん、腺がん、髄様甲状腺がん、乳頭状甲状腺がん、腎がん、腎実質がん、卵巣がん、子宮頸部がん、子宮体がん、子宮内膜がん、絨毛がん、膵がん、前立腺がん、膀胱がん、精巣がん、乳がん、尿路がん（urinary carcinoma）、黒色腫、脳腫瘍、リンパ腫、頭頸部がん、急性リンパ性白血病（ALL）、慢性リンパ性白血病（CLL）、急性骨髄性白血病（AML）、慢性骨髄性白血病（CML）、肝細胞がん、胆嚢がん、気管支がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、多発性骨髄腫、基底細胞腫、奇形腫、網膜芽細胞腫、脈絡膜黒色腫、精上皮腫、横紋筋肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫および形質細胞腫からなる群から選択される、項目37または38に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目４０）
前記がんが、B細胞急性リンパ球性白血病（B-ALL）、中皮腫、リンパ腫、膵がん、肺がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、脳腫瘍、頭頸部がん、黒色腫および乳がんからなる群から選択される、項目37または38に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目４１）
前記がんが、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肺の腺がん、および肺の扁平上皮がんからなる群から選択される肺がんである、項目40に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目４２）
前記がんが、トリプルネガティブ乳がん(TNBC)である、項目40に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目４３）
前記がんが、神経膠腫、神経膠芽細胞腫、星細胞腫、髄膜腫、髄芽細胞腫、末梢性神経外胚葉性腫瘍、および頭蓋咽頭腫からなる群から選択される脳腫瘍である、項目40に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目４４）
前記がんが、マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）、および成人T細胞性白血病/リンパ腫からなる群から選択されるリンパ腫である、項目37～39のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目４５）
がんを治療するための薬剤を製造するための、項目1～25のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩の使用。
（項目４６）
前記がんが、MTAP欠失がんである、項目45に記載の使用、またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目４７）
前記がんが、中皮腫、神経芽細胞腫、直腸がん、大腸がん、家族性腺腫ポリポーシスがんおよび、遺伝性非ポリポーシス大腸がん、食道がん、陰唇がん、喉頭がん、下咽頭がん、舌がん、唾液腺がん、胃がん、腺がん、髄様甲状腺がん、乳頭状甲状腺がん、腎がん、腎実質がん、卵巣がん、子宮頸部がん、子宮体がん、子宮内膜がん、絨毛がん、膵がん、前立腺がん、膀胱がん、精巣がん、乳がん、尿路がん（urinary carcinoma）、黒色腫、脳腫瘍、リンパ腫、頭頸部がん、急性リンパ性白血病（ALL）、慢性リンパ性白血病（CLL）、急性骨髄性白血病（AML）、慢性骨髄性白血病（CML）、肝細胞がん、胆嚢がん、気管支がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、多発性骨髄腫、基底細胞腫、奇形腫、網膜芽細胞腫、脈絡膜黒色腫、精上皮腫、横紋筋肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫および形質細胞腫からなる群から選択される、項目45または46に記載の使用、またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目４８）
前記がんが、B細胞急性リンパ球性白血病（B-ALL）、中皮腫、リンパ腫、膵がん、肺がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、脳腫瘍、頭頸部がん、黒色腫および乳がんからなる群から選択される、項目45または46に記載の使用、またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目４９）
前記がんが、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肺の腺がん、および肺の扁平上皮がんからなる群から選択される肺がんである、項目48に記載の使用、またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目５０）
前記がんが、トリプルネガティブ乳がん(TNBC)である、項目48に記載の使用、またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目５１）
前記がんが、神経膠腫、神経膠芽細胞腫、星細胞腫、髄膜腫、髄芽細胞腫、末梢性神経外胚葉性腫瘍、および頭蓋咽頭腫からなる群から選択される脳腫瘍である、項目48に記載の使用、またはその薬学的に許容可能な塩。
（項目５２）
前記がんが、マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）、および成人T細胞性白血病/リンパ腫からなる群から選択されるリンパ腫である、項目48に記載の使用、またはその薬学的に許容可能な塩。

本明細書に記載の化合物はMAT2A阻害剤である。したがって、本開示は、一般式Iに適合するそのような化合物だけでなく、それらの医薬組成物、互変異性体、およびアイソトポログにも関する。化合物および組成物は、がんの治療に有用である。一部のがんには、様々なMTAP欠失がんであって、すなわち、MTAP遺伝子/タンパク質の不在もしくは欠失、またはMTAPタンパク質の機能低下によって特徴付けられるがんが含まれる。

定義
「アルキル」とは、1～約20個の炭素原子の直鎖、分岐鎖のヒドロカルビル基を指す。例えば、アルキルは1～10個の炭素原子または1～6個の炭素原子を持つことができる。例示的なアルキルは、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、アンデシル、ドデシルなどの直鎖アルキル基を含み、また例えば、-CH(CH₃)₂、-CH(CH₃)(CH₂CH₃), -CH(CH₂CH₃)₂, -C(CH₃)₃, -C(CH₂CH₃)₃, -CH₂CH(CH₃)₂, -CH₂CH(CH₃)(CH₂CH₃), -CH₂CH(CH₂CH₃)₂, -CH₂C(CH₃)₃, -CH₂C(CH₂CH₃)₃, -CH(CH₃)CH(CH₃)(CH₂CH₃), -CH₂CH₂CH(CH₃)₂, -CH₂CH₂CH(CH₃)(CH₂CH₃), -CH₂CH₂CH(CH₂CH₃)₂, -CH₂CH₂C(CH₃)₃, -CH₂CH₂C(CH₂CH₃)₃, -CH(CH₃)CH₂CH(CH₃)₂, -CH(CH₃)CH(CH₃)CH(CH₃)₂, などの直鎖アルキル基の分岐鎖異性体を含むが、これらに限定されない。したがって、アルキル基は、一級アルキル基、二級アルキル基、および三級アルキル基を含む。アルキル基は、以下に記載される一つまたは複数の置換基により、非置換であり得るまたは任意に置換され得る。

「置換アルキル」という語句は、例えば1、2、3、4、5、またはさらに6つの位置である1つまたは複数の位置で置換されたアルキルを指し、ここでは本明細書に記載される置換により、置換基が任意の利用可能な原子に結合して、安定な化合物を生じる。「任意で置換されるアルキル」は、アルキルまたは置換アルキルを指す。

「ハロゲン」、「ハロゲン化物」、および「ハロ」という用語の各々は、-F、-Cl、-Br、または-Iを指す。

「アルケニル」という用語は、1～3個、1～2個、または少なくとも一個の炭素-炭素二重結合を有する、2～約20個の炭素原子を含む、直鎖または分岐鎖のヒドロカルビル基を指す。アルケニル基は、本明細書において以下に記載される一つまたは複数の置換基により、非置換であり得るまたは任意に置換され得る。

「置換アルケニル」は、例えば、1、2、3、4、5、またはさらに6つの位置である1つまたは複数の位置で置換されたアルケニルを指し、ここでは本明細書に記載される置換により、置換基が任意の利用可能な原子に結合して、安定な化合物を生じる。「任意で置換されるアルケニル」は、アルケニルまたは置換アルケニルを指す。

「アルキンまたは「アルキニル」は、示された数の炭素原子および少なくとも一つの三重結合を有する、直鎖または分岐鎖の不飽和炭化水素を指す。アルキニル基の例としては、アセチレン、プロピン、1-ブチン、2-ブチン、1-ペンチン、2-ペンチン、1-ヘキシン、2-ヘキシン、3-ヘキシン、1-ヘプチン、2-ヘプチン、3-ヘプチン、1-オクチン、2-オクチン、3-オクチン、および4-オクチンが挙げられるが、これらに限定されない。アルキニル基は、本明細書において以下に記載される一つまたは複数の置換基により、非置換であり得るまたは任意に置換され得る。

「置換アルキニル」は、例えば、1、2、3、4、5、またはさらに6つの位置である1つまたは複数の位置で置換されたアルキニルを指し、ここでは本明細書に記載される置換により、置換基が任意の利用可能な原子に結合して、安定な化合物を生じる。「任意で置換されるアルキニル」は、アルキニルまたは置換アルキニルを指す。

「アルコキシ」という用語は、示された数の炭素原子を有する-O-アルキル基を指す。例えば、(C₁-C₆)アルコキシ基としては、-O-メチル、-O-エチル、-O-プロピル、-O-イソプロピル、-O-ブチル、-O-sec-ブチル、-O-tert-ブチル、-O-ペンチル、-O-イソペンチル、-O-ネオペンチル、-O-ヘキシル、-O-イソヘキシル、および-O-ネオヘキシルが挙げられる。

用語「カルボシクリル（carbocyclyl）」は、単環式、二環式、三環式、または多環式の、3～14員環系を指し、これは例えば「シクロアルキル」等である飽和の、または例えば「シクロアルケニル」等の不飽和のいずれかである。用語「シクロアルケニル」は、例えばC₃-C₆シクロアルケニルである、環状アルケニルを具体的には指す。カルボシクリルは、任意の原子を介して結合してもよい。例えば、カルボシクリルは縮合環も企図するものであって、例えばカルボシクリルは、本明細書に規定されるアリール環またはヘテロアリール環に縮合する。カルボシクリルの代表的な例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、フェニル、ナフチル、アントラシル、ベンゾフラニル、およびベンゾチエフェニルが挙げられるが、これらに限定されない。カルボシクリル基は、本明細書において以下に記載される一つまたは複数の置換基により、非置換であり得るまたは任意に置換され得る。

「置換カルボシクリル」は、例えば、1、2、3、4、5、またはさらに6つの位置である1つまたは複数の位置で置換されたカルボシクリルを指し、ここでは本明細書に記載される置換により、置換基が任意の利用可能な原子に結合して、安定な化合物を生じる。「任意で置換されるカルボシクリル」とは、カルボシクリルまたは置換カルボシクリルを指す。

単独でまたは別の用語の一部として使用される場合、「アリール」とは、指定された炭素原子の数を有するかまたは数が指定されていない場合には例えばC₆-C₁₄アリール等である最大14個の炭素原子を含む、縮合しているまたは縮合していない炭素環式芳香族基を意味する。特定のアリール基は、フェニル、ナフチル、ビフェニル、フェナントレニル、ナフサセニル、およびこれに類するものである（例えば、Lang’s Handbook of Chemistry (Dean, J. A., ed）第13版、表7-2［1985］を参照）。特定のアリールはフェニルである。「アリール」はまた、本明細書で規定されるように、カルボシクリル環と縮合していてもよい芳香族環系を含む。アリール基は、本明細書において以下に記載される一つまたは複数の置換基により、非置換であり得るまたは任意に置換され得る。

「置換アリール」は、任意の利用可能な原子において結合した一つまたは複数の置換基により独立に置換されて安定な化合物を生じるアリールであって、当該置換基は本明細書に記載されるとおりである。「任意で置換されるアリール」は、アリールまたは置換アリールを指す。

「ヘテロ原子」という用語はN、O、およびSを指す。NまたはS原子を含有する化合物は、任意に、対応するN-酸化物、スルホキシド、またはスルホン化合物に酸化され得る。

「ヘテロアリール」は、単独でまたは本明細書に記載されるその他の部分と組み合わせて、O、SおよびNからなる群から独立に選択される、例えば1～4個、1～3個もしくは1～2個等のヘテロ原子である1個以上のヘテロ原子を含有する、例えば5もしくは6個の環上の原子である5～10個の原子を含有する単環式芳香環構造、または、8～10個の原子を有する二環式芳香族基を指す。ヘテロアリールはまた、例えばスルフィニル、スルホニルおよび3級環窒素のN酸化物等である、酸化されたSまたはNを含むことを企図している。炭素またはヘテロ原子は、安定化合物が生成されるような、ヘテロアリール環構造の結合点である。ヘテロアリール基の例としては、ピリジニル、ピリダジニル、ピラジニル、キノキサリル、インドリジニル、ベンゾ［b］チエニル、キナゾリニル、プリニル、インドリル、キノリニル、ピリミジニル、ピロリル、ピラゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、チエニル、イソキサゾリル、オキサチアジアゾリル、イソチアゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、フラニル、ベンゾフリル、およびインドリルが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロアリール基は、本明細書において以下に記載される一つまたは複数の置換基により、非置換であり得るまたは任意に置換され得る。

「置換ヘテロアリール」は、別段の指示がない限り、任意の利用可能な原子に結合して安定化合物を生成する、一つまたは複数の、例えば、1、2、3、4、または5である、1、2、または3の置換基でもある、1個の置換基でもある置換基により独立して置換されるヘテロアリールであって、当該置換基は、本明細書に記載されるとおりである。「任意で置換されるヘテロアリール」は、ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールを指す。

「ヘテロシクロアルキル」とは、例えば3～6個であって、3～14個の原子を有する、飽和または不飽和の非芳香族の単環式、二環式、三環式または多環式の環系を意味し、環内の1～4個の炭素原子がO、SまたはNのヘテロ原子で置換されている。ヘテロシクロアルキルは、任意に、環の5～6員のアリールまたはヘテロアリールと縮合しており、例えばスルフィニル、スルホニル、および3級環窒素のN酸化物などである酸化されたSまたはNを含む。ヘテロシクロアルキル環の結合点は、安定な環が保持されるように、炭素またはヘテロ原子にある。ヘテロシクロアルキル基の例としては、モルホリノ、テトラヒドロフラニル、ジヒドロピリジニル、ピペリジニル、ピロリジニル、ピペラジニル、ジヒドロベンゾフリル、およびジヒドロインドリルが挙げられるがこれに限定されない。ヘテロシクロアルキル基は、本明細書において以下に記載される一つまたは複数の置換基により、非置換であり得るまたは任意に置換され得る。

「任意で置換されるヘテロシクロアルキル」は、任意の利用可能な原子において結合して安定化合物を生成する、例えば、1、2、または3個の置換基である1～3個の置換基で置換されるヘテロシクロアルキルを指し、当該置換基は本明細書に記載されるとおりである。

「ヘテロシクロアルコキシ」は、単環式、二環式、三環式、または多環式環系において示された数のメンバー原子を有し、環中の1～4個の炭素原子がO、S、またはNのヘテロ原子で置換される、-O-ヘテロシクロアルキル基を指す。

「任意で置換されるヘテロシクロアルコキシ」は、任意の利用可能な原子において結合して安定化合物を生成する、例えば、1、2、または3個の置換基である1～3個の置換基で置換されるヘテロシクロアルコキシを指し、当該置換基は本明細書に記載されるとおりである。

「ニトリル」または「シアノ」という用語は互換的に使用でき、これは、ヘテロアリール環、アリール環およびヘテロシクロアルキル環の炭素原子に結合する-CN基を指す。

「オキソ」という用語は、飽和部分または不飽和部分に結合した＝O原子を指す。＝O原子は、環式部分または非環式部分の一部である、炭素、硫黄、または窒素原子に結合できる。

「ヒドロキシル」または「ヒドロキシ」は、-OH基を指す。

置換基-CO₂Hは、例えば以下の：
等の生物学的等価性の置換により置換され得、式中、Rは本明細書において規定されるR^Aと同じ定義を持つ。例えば、The Practice of Medicinal Chemistry（医薬品化学の実践）（Academic Press: New York, 1996）、203ページを参照されたい。

本明細書に記載される化合物は、立体配置異性体、幾何異性体、および例えばシス-またはトランス-体を含む配座異性体、を含む様々な異性体で存在することができる。また、化合物は、単一の互変異性体および互変異性体の混合物の両方を含む、一つまたは複数の互変異性体で存在してもよい。「異性体」という用語は、化合物の互変異性体を含めて本開示の化合物のすべての異性体を包含することを意図している。本開示の化合物はまた、開放鎖または環化形態で存在してもよい。一部の場合では、一つまたは複数の環化形態は水の喪失に起因し得る。開放鎖および環化形態についての具体的な組成は、化合物がどのように単離、保存または投与されるかに依存し得る。例えば、化合物は、酸性条件下で開放鎖の形態で主に存在し得るが、中性条件下では環化形態であり得る。すべての形態が本開示に含まれる。

本明細書に記載される一部の化合物は、不斉中心を有することにより、様々な鏡像異性体およびジアステレオ異性体で存在することが可能である。本開示の化合物は、光学異性体またはジアステレオマーの形態であることが可能である。したがって、本開示は、ラセミ混合物を含むそれらの光学異性体、ジアステレオ異性体およびその混合物の形態で、本明細書に記載される化合物およびそれらの使用を包含する。本開示の化合物の光学異性体は、不斉合成、キラルクロマトグラフィ、模擬移動床技術等の公知技術により、または光学的に活性な分割剤を用いることによる立体異性体の化学的分離により、得ることができる。

別途示されていない限り、「立体異性体」という用語は、その化合物の他の立体異性体を実質的に含まない化合物の一つの立体異性体を意味する。したがって、一つのキラル中心を有する立体異性学的に純粋な化合物は、その化合物の反対のエナンチオマーを実質的に含まないこととなる。二つのキラル中心を有する立体異性学的に純粋な化合物は、その化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まないこととなる。典型的な立体異性学的に純粋な化合物は、化合物の一つの立体異性体を約80重量%超、かつ、化合物の他の立体異性体を約20重量%未満で含み、例えば、化合物の一つの立体異性体を約90重量%超、かつ、化合物の他の立体異性体を約10重量%未満で、または化合物の一つの立体異性体を約95重量%超、かつ、化合物の他の立体異性体を約5重量%未満で、または化合物の一つの立体異性体を約97重量%超、かつ、化合物の他の立体異性体を約3重量%未満で、または化合物の一つの立体異性体を約99重量%超、かつ、化合物の他の立体異性体を約1重量%未満で、含む。上述の立体異性体は、本明細書に記載されるそれらのそれぞれの重量百分率で存在する二つの立体異性体を含む組成物として見ることができる。

本明細書で使用される場合、「アイソトポログ」という用語は、同位体的に濃縮された化合物である。本明細書で使用される場合、別段の示唆がない限り、「同位体的に濃縮された」という用語は、その原子の天然に豊富な同位体組成以外の同位体組成を有する原子を指す。「同位体的に濃縮された」はまた、その原子の天然の同位体組成以外の同位体組成を有する少なくとも一つの原子を含有する化合物を指す場合もある。アイソトポログでは、「同位体濃縮」とは、所与の原子の特定の同位体の量を、その原子の天然の同位体組成の代わりに、分子中に組み込む割合を指す。例えば、所与の位置での1%の重水素濃縮は、所与のサンプル中の分子の1%が特定の位置に重水素を含有することを意味する。重水素の自然発生分布は約0.0156%であるため、非濃縮の出発材料を使用して合成された化合物中の任意の位置での重水素濃縮は約0.0156%である。

したがって、本明細書で使用される場合、別段の示唆がない限り、「同位体濃縮係数」という用語は、特定の同位体の同位体組成と、天然の同位体組成との間の比を指す。

本明細書に提供される化合物に関して、特定の原子の位置が、重水素または「D」または「H²」を有すると指定される場合、その位置での重水素の存在量は、重水素の天然存在量である約0.015%よりも実質的に大きいことが理解される。重水素を有すると指定された位置は、特定の実施形態では、典型的には、少なくとも1000(15%の重水素組み込み)、少なくとも2000(30%の重水素組み込み)、少なくとも3000(45%の重水素組み込み)、少なくとも3500(52.5%の重水素組み込み)、少なくとも4000(60%の重水素組み込み)、少なくとも4500(67.5%の重水素組み込み)、少なくとも5000(75%の重水素組み込み)、少なくとも5500(82.5%の重水素組み込み)、少なくとも6000(90%の重水素組み込み)、少なくとも6333.3(95%の重水素組み込み)、少なくとも6466.7(97%の重水素組み込み)、少なくとも6600(99%の重水素を組み込み）、または少なくとも6633.3(99.5%の重水素組み込み)の最小同位体濃縮係数を、指定された各重水素原子に有する。本明細書に提供される化合物の同位体濃縮および同位体濃縮係数は、質量分析および核磁気共鳴分光法を含む、当業者に公知の従来的な分析方法を使用して決定することができる。

示された構造とその構造に与えられた名称との間に不一致がある場合、示された構造体を考慮する。さらに、構造のまたは構造の部分の立体化学が、例えば太線または破線となっており、示されていない場合は、その構造または構造の部分は、そのすべての立体異性体を包含するように解釈される。しかしながら、一部の場合では、複数のキラル中心が存在する場合、構造および名称は、関連する立体化学を説明するのに役立つ単一のエナンチオマーとして表され得る。有機合成の当業者は、化合物が、それらの調製に使用される方法から単一のエナンチオマーとして調製されるかどうかがわかるだろう。

本明細書で使用される場合、および反対の内容が特に明記されていない限り、「化合物」という用語は、それが化合物またはその薬学的に許容可能な塩、立体異性体、アイソトポログ、および/または互変異性体を包含するという点で包括的である。したがって、例えば、一般式IまたはIIの化合物は、化合物のアイソトポログの薬学的に許容可能な塩を含む。

本明細書において、「薬学的に許容可能な塩」は、本開示の化合物の薬学的に許容可能な、有機もしくは無機の酸または塩基の塩である。代表的な薬学的に許容可能な塩としては、例えば、アルカリ金属塩、アルカリ土類塩、アンモニウム塩、例えばアセテート、アムソン酸塩（4,4-ジアミノスチルベン-2,2-ジスルホン酸塩）、ベンゼンスルホン酸塩、ベンゾネート（benzonate）、重炭酸塩、重硫酸塩、酸性酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、酪酸塩、カルシウム、カルシウムエデト酸塩、カンシラート、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、クラブラリエート（clavulariate）、二塩化水素化物、エデト酸塩、エジシレート（edisylate）、エストレート、エシレート、フマル酸塩、グルセプテート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニレート（glycolylarsanilate）、ヘキサフルオロリン酸塩、ヘキシルレゾルシナート（hexylresorcinate）、ヒドラバミン（hydrabamine）、臭化水素酸、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、臭化メチル、硝酸メチル、硫酸メチル、ムチン酸塩、ナプシラート、硝酸塩、N-メチルグルカミンアンモニウム塩、3-ヒドロキシ-2-ナフトエ酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩（1,1-メテン-ビス-2-ヒドロキシ-3-ナフト塩酸塩、エインボン酸塩（einbonate））、パントテン酸塩、リン酸塩/二リン酸塩、ピクリン酸塩、ポリガラクツロ酸塩、プロピオン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩（sulfosalicylate）、スラメート（suramate）、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシラート（tosylate）、トリエチルヨージド、および吉草酸塩等の水溶性塩ならびに水不溶性塩が挙げられる。薬学的に許容可能な塩は、その構造において一つまたは複数の電荷を帯びた原子を有することができる。この場合、薬学的に許容可能な塩は、複数の対イオンを有することができる。従って、薬学的に許容可能な塩は、一つまたは複数の電荷を帯びた原子および/または一つまたは複数の対イオンを有することができる。

「治療する」、「治療すること」および「治療」という用語は、疾患または疾患に関連する症状の改善または根絶を指す。特定の実施形態では、こうした用語は、一つまたは複数の予防薬または治療薬を、こうした疾患を患う患者に投与することから生じる疾患の拡大または悪化を最小化することを指す。

「予防する」、「予防すること」および「予防」という用語は、予防薬または治療薬を投与することから生じる患者における疾患の発症、再発または拡散の予防を指す。

「有効量」という用語は、疾患の治療もしくは予防において治療的もしくは予防的な利益を提供するために十分な、または疾患に関連する症状を遅延もしくは最小化するのに十分な、本開示の化合物または他の有効成分の量を指す。さらに、本開示の化合物に関して、治療有効量とは、単独での、または疾患の治療もしくは予防において治療的利益を提供する他の療法と組み合わせた、治療薬の量を意味する。本開示の化合物に関連して使用される場合、当該用語は、全体的な療法を改善する、疾患の症状もしくは原因を減少させるかもしくは回避する、または別の治療剤との治療効果を強化するもしくは別の治療剤と相乗作用する量を包含することが可能である。

「患者」または「対象」は、ヒト、ウシ、ウマ、ヒツジ、子ヒツジ、ブタ、トリ、シチメンチョウ、ウズラ、ネコ、イヌ、マウス、ラット、ウサギまたはモルモットなどの動物を含む。一部の実施形態によれば、動物は、非霊長類および霊長類（例えば、サルおよびヒト）等の哺乳動物である。一実施形態では、患者は、ヒトの幼児、子供、青年または成人などのヒトである。

「阻害剤」とは、SAMの合成を予防またはSAMの合成の量を減少させる化合物を意味する。ある実施形態では、阻害剤はMAT2Aに結合する。一実施形態では、阻害剤はMAT2Aの機能を阻害する。

化合物
概して上述されるように、本開示は、化合物、ならびにその薬学的に許容可能な塩、互変異性体、および/またはアイソトポログを提供し、化合物は、一般式Iに一致する。

R^AおよびR^Bの各アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、アリール、カルボシクリル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール部分は、重水素、ヒドロキシ、ハロ、-NR'₂（ここで、各R'は、C₁-C₆アルキル、C₂-C₆アルケニル、C₂-C₆アルキニル、C₆-C₁₀アリール、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C₁-C₆アルキル)-(3～14員のヘテロシクロアルキル）（ここで、環の1～4員は、N、O、およびSから、独立に選択される）、および5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）からなる群から独立に選択される)、-NHC(O)(OC₁-C₆アルキル)、-NO₂、-CN、オキソ、-C(O)OH、-C(O)O(C₁-C₆アルキル)、-C₁-C₆アルキル(C₁-C₆アルコキシ)、-C(O)NH₂、C₁-C₆アルキル、-C(O)C₁-C₆アルキル、-OC₁-C₆アルキル、-Si(C₁-C₆アルキル)₃、-S(O)_0-2-(C₁-C₆アルキル)、C₆-C₁₀アリール、-(C₁-C₆アルキル)(C₆-C₁₀アリール)、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C₁-C₆アルキル)-(3～14員の複素環)（ここで、複素環の1～4員は、N、O、およびSから、独立に選択される）、および-O(C₆-C₁₄アリール)からなる群から選択される一つまたは複数の置換基で置換される。R^AおよびR^Bの各アルキル、アルケニル、アリール、およびヘテロシクロアルキル置換基は、ヒドロキシ、-OC₁-C₆アルキル、ハロ、-NH₂、-(C₁-C₆-アルキル)NH₂、-C(O)OH、CN、およびオキソからなる群から選択される一つまたは複数の置換基で任意に置換される。

いくつかの実施形態では、R⁴は、H、C₁-C₆アルキル(一つまたは複数のハロ、ヒドロキシ、または3～14員のヘテロシクロアルコキシ(ここで、1～4員のヘテロシクロアルコキシは、N、O、およびSから独立に選択される)で任意に置換される)、-O(C₁-C₆アルキル)、‐(C₁-C₆-アルキル)NR^AR^B、および-NR^AR^B(ここで、R^AおよびR^Bは、HおよびC₁-C₆アルキルから独立に選択される）からなる群から選択され、R⁵は、H、C₁-C₆アルキル、C₁-C₆アルコキシ、および-NR^CR^Dからなる群から選択される。

他の実施形態では、R⁴およびR⁵のうちの少なくとも一つは、Hである。例えば、R⁴はHであるか、またはR⁵はHである。あるいは、R⁴およびR⁵の各々はHである。

任意で、本明細書に記載される任意の他の実施形態と組み合わせて、様々な実施形態は、一般式Iの化合物を提供し、式中、R²は、任意に置換されたC_6-C₁₀アリールまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリールである。一実施形態では、R²は、任意に置換されるフェニルなどの任意に置換されるC₆-C₁₀アリールである。別の実施形態では、R²は、任意に置換された5～10員のヘテロアリールであり、式中、1つの環メンバーはNである。例えば、R²は、任意に置換された5もしくは6員のヘテロアリール、または任意に置換された6員のヘテロアリールであり、その一例は、任意に置換されたピリジルである。

いくつかの実施形態では、任意に本明細書に記載される他の任意のものと組み合わせて、R³は、任意に置換された3～14員のヘテロシクロアルキル、または任意に置換された5～10員のヘテロアリールである。R³の非限定的な例は、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ピリジニル、ピリジノニル、ピリダジニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、キナゾリニル、イミダゾピリジニル、ピラゾロピリジニル、トリアゾロピリジニル、シンノリニル、イソキサゾリル、ピラゾリル、ベンゾフラニル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾジオキシニル、およびテトラヒドロベンゾジオキシニルからなる群から選択され、これらのそれぞれは任意に置換され得る。

他の実施形態では、R³は、任意に換されたC₆-C₁₀アリールである。一例は、任意に置換されたフェニルである。

本開示は、R²が任意に置換されたフェニルであり、R³が任意に置換された3～14員のヘテロシクロアルキルまたは任意で置換された5～10員のヘテロアリールである、いくつかの一般式Iの化合物を提供する。

様々な実施形態では、本開示は、LがOまたはNRである、一般式Iの化合物を提供する。さらに、追加の実施形態によると、R¹は、任意に置換されたC_1-C₆アルキル、または任意に置換されたC_3-C₆カルボシクリルである。R¹の一例は、1～3のFで任意に置換されたC₁-C₃アルキルである。

一実施形態による、一般式Iの化合物のサブセットは、LがOまたはNRであり、RがHであり、 R¹が、1～3のFで任意に置換されたC_1-C₃アルキルであり、R²が、任意に置換された3～14員のヘテロシクロアルキルまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリール(ここで、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールの1員はNである)または任意に置換されたC_6-C₁₀アリールであり、R³が、任意に置換された3～14員のヘテロシクロアルキルまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリールであり、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールの1～3員はN、O、およびSから独立に選択され、R⁴およびR⁵の各々がHであるものである。一部の実施形態では、LはNRである。

様々な実施形態では、本開示は、下記の表1に記載されるような、一般式Iの化合物、ならびにそれらの薬学的に許容可能な塩、互変異性体、および/またはアイソトポログの具体的な実施例を提供する:

表1

他の様々な実施形態では、本開示は、下記の表2に記載されるような、一般式Iの化合物、ならびにそれらの薬学的に許容可能な塩、互変異性体、および/またはアイソトポログのさらなる具体的な実施例を提供する:

表2

医薬組成物
本開示はまた、治療有効量の、一般式Iに従った一つまたは複数の化合物、または薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、および/またはアイソトポログを、薬学的に許容可能な担体と混合して含む、医薬組成物も提供する。いくつかの実施形態では、この組成物は、医薬化合物の受容された慣行に従って、一つまたは複数の追加的な治療剤、薬学的に許容可能な賦形剤、希釈剤、アジュバント、安定剤、乳化剤、保存剤、着色剤、緩衝剤、香味付与剤をさらに含有する。

一実施形態では、医薬組成物は、表1に示されたものから選択される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、および/またはアイソトポログと、薬学的に許容可能な担体とを含む。

本開示の医薬組成物は、良好な医療慣行と一致する様式で、製剤化され、投薬され、および投与される。この文脈で考慮する因子には、治療される特定の障害、治療される特定の対象、該対象の臨床状態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与の方法、投与スケジュールおよび医療従事者に知られる他の因子が含まれる。

投与される化合物(またはその薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、および/またはアイソトポログ)の「治療有効量」は、このような考慮事項によって支配され、がんに細胞毒性の効果を及ぼすため、またはMAT2A活性を阻害するため、あるいはその両方に必要な最小量である。かかる量は、正常細胞、または対象全体に対して毒性のある量よりも少ない可能性がある。概して、投与される本開示の化合物(またはその薬学的に許容可能な塩、立体異性体、もしくは互変異性体)の初期治療有効量は、一日あたり患者体重の約0.01～約200mg/kgまたは約0.1～約20mg/kgの範囲内であり、典型的な初期範囲は約0.3～約15mg/kg/日である。錠剤およびカプセルなどの経口単位剤形は、約1mg～約1000mgの本開示の化合物(またはその薬学的に許容可能な塩、立体異性体、もしくは互変異性体)を含有してもよい。別の実施形態では、こうした剤形は、約50mg～約500mgの本開示の化合物(またはその薬学的に許容可能な塩、立体異性体、もしくは互変異性体)を含有する。さらに別の実施形態では、こうした剤形は、約25mg～約200mgの本開示の化合物(またはその薬学的に許容可能な塩、立体異性体、もしくは互変異性体)を含有する。さらに別の実施形態では、こうした剤形は、約10mg～約100mgの本開示の化合物(またはその薬学的に許容可能な塩、立体異性体、もしくは互変異性体)を含有する。さらなる実施形態では、こうした剤形は、約5mg～約50mgの本開示の化合物(またはその薬学的に許容可能な塩、立体異性体、もしくは互変異性体)を含有する。

組成物は、投与単位製剤で吸入または噴霧または直腸的に、経口、局所、非経口投与することができる。本明細書で使用される場合、非経口の語は、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内注射または点滴技術を含む。

本開示による適切な経口組成物には、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性もしくは油性の懸濁剤、分散性粉剤または顆粒剤、乳剤、硬質もしくは軟質のカプセル剤、シロップまたはエリキシルが含まれるがこれに限定されない。

本開示の化合物またはその薬学的に許容可能な立体異性体、塩、または互変異性体、および薬学的に許容可能な担体を含む一回単位の投薬量に適した医薬組成物が、本開示の範囲内に包含される。

経口用途に適した組成物は、医薬組成物の製造に関して当技術分野に公知の任意の方法に従って調製されてもよい。例えば、化合物の液体製剤は、MAT2A阻害剤の薬学的に口当たりの良い製剤を提供するために、甘味剤、香味剤、着色剤および保存剤からなる群から選択される一つまたは複数の薬剤を含有する。

錠剤組成物については、非毒性の薬学的に許容可能な賦形剤と混合した本開示の化合物を、錠剤の製造に使用する。このような賦形剤の例としては、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウム等の不活性希釈剤、例えばコーンスターチもしくはアルギン酸である造粒剤および崩壊剤、または例えばデンプン、ゼラチンもしくはアカシアである結合剤、および例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクである潤滑剤が挙げられるが、これらに限定されない。錠剤は被覆されていなくてもよく、または公知のコーティング技術で被覆されて消化管内での分解および吸収を遅延させて、それによって望ましい時間間隔にわたって持続的な治療作用をもたらしてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料が用いられ得る。

また、経口用途のための製剤は、有効成分が、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウムもしくはカオリンである不活性固体希釈剤と混合される硬質ゼラチンカプセルとして、または有効成分が、水媒体もしくは例えばピーナッツ油、液体パラフィンもしくはオリーブ油である油媒体と混合される軟質ゼラチンカプセルとして、存在し得る。

水性懸濁剤については、本開示の化合物は、安定な懸濁剤を維持するのに適した賦形剤と混合される。このような賦形剤の例としては、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアカシアゴムが挙げられるがこれらに限定されない。

経口懸濁剤はまた、例えばレクチンである天然に存在するホスファチド等の分散剤もしくは浸潤剤、または例えばステアリン酸ポリオキシエチレンである脂肪酸を伴う酸化アルキレンの縮合物、または例えばヘプタデカエチレンオキシセタノールである長鎖脂肪族アルコールを伴う酸化エチレンの縮合物、または例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール等である脂肪酸とヘキシトールとに由来する部分エステルを伴う酸化エチレンの縮合物、または、例えばモノオレイン酸ポリエチレンソルビタンである脂肪酸とヘキシトール無水物とに由来する部分エステルを伴う酸化エチレンの縮合物を含有することもできる。水性懸濁剤はまた、例えば、エチルまたはp-ヒドロキシ安息香酸n-プロピルである一つまたは複数の保存剤、一つまたは複数の着色剤、一つまたは複数の香味剤、および例えばショ糖またはサッカリンなどの一つまたは複数の甘味剤を含有し得る。

油性懸濁剤は、本開示の化合物を、例えばラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油、もしくはココナッツ油である植物油中、または例えば液体パラフィン等の鉱油中に懸濁することで配合してもよい。油性懸濁剤は、例えば蜜ろう、硬質パラフィンまたはセチルアルコールである、増粘剤を含み得る。

上述のようなものである甘味剤、および香味剤は、味のよい経口調製物を提供するために追加してもよい。これら組成物は、アスコルビン酸等の抗酸化剤の添加によって保存され得る。

水の添加による水性懸濁剤の調製に適した分散性の粉剤および顆粒剤は、分散剤または湿潤剤、懸濁剤および一つまたは複数の保存剤と混合した混合物に本開示の化合物を提供する。好適な分散剤または湿潤剤および懸濁剤は、既に上述したものによって例示されている。例えば、甘味剤、香味剤、着色剤である追加的な賦形剤もまた存在してもよい。

本開示の医薬組成物はまた、水中油型乳剤の形態であってもよい。油相は、例えばオリーブ油もしくはラッカセイ油である植物油、または例えば液体パラフィンもしくはこれらの混合物である鉱油類であり得る。好適な乳化剤は、例えばアカシアゴム、またはトラガカントゴムである天然のゴム、例えばダイズである天然のホスファチド、レシチン、および脂肪酸由来のエステルもしくは部分エステル、例えばソルビタンモノオレート（sorbitan monooleate）であるヘキシトール、無水物、ならびに例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレート（polyoxyethylene sorbitan monooleate）である、酸化エチレンを伴う該部分エステルの縮合物であってもよい。乳化剤はまた、甘味剤および香味剤を含有し得る。

シロップおよびエリキシルは、例えばグリセリン、プロピレングリコール、ソルビトールまたはショ糖である甘味剤と共に製剤化してもよい。こうした製剤はまた、粘滑剤、防腐剤、ならびに香味剤および着色剤も含有してもよい。医薬組成物は、滅菌注射可能な形態である、水性懸濁剤または油性懸濁剤であってもよい。この懸濁剤は、上記の好適な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して、公知の技術に従って製剤化され得る。滅菌注射可能な調製物はまた、非毒性の非経口的に許容可能な希釈剤または溶媒中の、例えば1,3-ブタンジオール溶液としての、滅菌注射可能な液剤または懸濁剤であってもよい。採用され得る許容可能なビヒクルおよび溶媒には、水、リンガー溶液、および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、無菌の固定油が、溶媒または懸濁用媒体として従来通り採用される。この目的のために、合成のモノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激性固定油が採用され得る。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の調製の用途で用いられる。

一般式Iの化合物はまた、薬剤の直腸投与のための坐剤の形態で投与され得る。これら組成物は、常温では固体であるが直腸温度では液体であり、したがって直腸内で融解して薬物が放出されることになる好適な非刺激性の賦形剤を薬物と混合することによって調製することができる。こうした材料は、カカオバターおよびポリエチレングリコールである。

非経口投与用組成物は、滅菌媒体中で投与される。使用されるビヒクルと製剤中の薬物の濃度の濃縮に応じて、非経口製剤は、溶解した薬物を含有する、懸濁剤または液剤のいずれかとすることができる。例えば局所麻酔薬、防腐剤および緩衝剤などのアジュバントもまた、非経口組成物に追加することができる。

使用方法
MAT2A酵素は、細胞中のメチオニンおよびATPからS-アデノシルメチオニン（SAM）の合成を触媒する。したがって、本開示の別の実施形態では、細胞におけるSAM合成を阻害する方法であって、一般式Iの化合物またはその薬学的に許容可能な塩、立体異性体、互変異性体、および/またはアイソトポログの有効量を細胞内に導入することを含む、当該方法を提供する。一実施形態では、細胞は対象内にある。いくつかの実施形態では、例えばMAT2Aへの結合の競合アッセイまたはSAM産生阻害の競合アッセイである、MAT2Aの阻害剤である他の化合物を特定するために一般式Iの化合物が使用される。検出可能な標識を有する試験化合物による、MAT2Aへの結合またはSAM産生阻害は、本開示の非標識化合物の存在を伴って、または当該存在なしに、測定することができる。

本開示はまた、対象におけるがんを治療する方法であって、対象に対して本明細書に記載の有効量のMAT2A阻害剤化合物を投与することを含む、当該方法を提供する。いくつかの実施形態では、MAT2A阻害剤は、一般式Iの化合物またはその薬学的に許容可能な塩である。一実施形態では、随意に任意の他の実施形態と組み合わせて、対象は、ヒトなどの哺乳動物である。

ある実施形態では、がんはMTAP欠失のがんである。いくつかの実施形態では、がんは、中皮腫、神経芽細胞腫、例えば直腸がん、大腸がん、家族性腺腫ポリポーシスがんおよび遺伝性非ポリポーシス大腸がん等の腸がん、食道がん、陰唇がん、喉頭がん、下咽頭がん、舌がん、唾液腺がん、胃がん、腺がん、髄様甲状腺がん、乳頭状甲状腺がん、腎がん、腎実質がん、卵巣がん、子宮頸部がん、子宮体がん、子宮内膜がん、絨毛がん、膵がん、前立腺がん、膀胱がん、精巣がん、乳がん、尿路がん（urinary carcinoma）、黒色腫、脳腫瘍、頭頸部がん、リンパ腫、急性リンパ性白血病（ALL）、慢性リンパ性白血病（CLL）、急性骨髄性白血病（AML）、慢性骨髄性白血病（CML）、肝細胞がん、胆嚢がん、気管支がん、小細胞肺がん（SCLC）、非小細胞肺がん（NSCLC）、多発性骨髄腫（MM）、基底細胞腫、奇形腫、網膜芽細胞腫、脈絡膜黒色腫、精上皮腫、横紋筋肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫および形質細胞腫からなる群から選択されるものである。

他の実施形態では、がんは、肺がん、非小細胞肺がん、細気管支肺胞上皮がん、骨がん、膵がん、皮膚がん、頭頸部がん、皮膚黒色腫または眼球内黒色腫、子宮がん、卵巣がん、直腸がん、肛門部のがん、胃部のがん、胃がん、大腸がん、乳がん、子宮がん、卵管がん、子宮内膜がん、子宮頸部がん、膣がん、外陰がん、ホジキン病、食道がん、小腸がん、内分泌系がん、甲状腺がん、副甲状腺がん、副腎がん、軟部組織肉腫、尿道がん、陰茎がん、前立腺がん、膀胱がん、腎がんまたは尿管がん、腎細胞がん、腎盂がん、中皮腫、肝細胞がん、胆道がん、慢性または急性の白血病、リンパ球性リンパ腫、中枢神経系（CNS）の腫瘍、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、多形神経膠芽腫、星細胞腫、シュワン細胞腫、上衣芽腫、髄芽細胞腫、髄膜腫、扁平上皮がん、下垂体腺腫から選択され、上記のがんのいずれかの抵抗性の型および/または難治性の型を含め、また一つまたは複数の上記のがんの組み合わせを含める。

いくつかの実施形態では、がんは、B細胞急性リンパ球性白血病（B-ALL）、中皮腫、リンパ腫、膵がん、肺がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、脳腫瘍、頭頸部がん、黒色腫および乳がんからなる群から選択される。

他の実施形態では、肺がんは、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肺の腺がん、および肺の扁平上皮がんである。

他の実施形態では、乳がんはトリプルネガティブ乳がん（TNBC）である。

他の実施形態では、脳腫瘍は、神経膠腫、神経膠芽細胞腫、星細胞腫、髄膜腫、髄芽細胞腫、末梢性神経外胚葉性腫瘍、および頭蓋咽頭腫からなる群から選択される脳腫瘍である。

さらに他の実施形態では、がんは、マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）、および成人T細胞性白血病/リンパ腫（ATLL）からなる群から選択されるリンパ腫である。本明細書で使用される場合、成人T細胞性白血病/リンパ腫の表現は、血液（白血病）、リンパ節（リンパ腫）、皮膚、または体の複数の領域に見られ得る希少且つ侵攻性であることが多いT細胞リンパ腫を指す。

上記に概略的に記載したように、メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（MTAP）は、メチルチオアデノシン（MTA）のアデニンおよび5-メチルチオリボース-1-リン酸塩への変換を触媒する、すべての正常組織で見られる酵素である。アデニンは、アデノシン一リン酸を生成するために再利用され、5-メチルチオリボース-1-リン酸塩はメチオニンおよびギ酸塩に変換される。このサルベージ経路のため、MTAは、例えばL-アラノシンなどの代謝拮抗剤を用いて、デノボプリン合成が遮断されたときに代替的プリン源としての役割を果たすことができる。多数のヒトおよびマウスの悪性細胞は、MTAP活性を欠いている。MTAP欠損は組織培養細胞において存在するだけでなく、当該欠損は原発性白血病、神経膠腫、黒色腫、膵がん、非小細胞肺がん（NSCLC）、膀胱がん、星細胞腫、骨肉腫、頭頸部がん、粘液様軟骨肉腫、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、軟部組織肉腫、非ホジキンリンパ腫、および中皮腫においても存在する。例えば、MTAPヌルである、すなわちMTAP欠失である、がん細胞の増殖は、MAT2A発現を、MAT2Aの低分子阻害剤を使用して確認されたshRNAによりノックダウンすることによって阻害される。K. Marjon et al., Cell Reports 15 (2016) 574-587を、参照により本明細書に組み込む。MTAPヌルまたはMTAP欠失がんは、MTAP遺伝子を欠失もしくは喪失している、もしくはそうでなければ非活性化されたがんであるか、またはMTAPタンパク質の機能が低下または損なわれたがん、または存在が低下したがんである。

また、本開示のある実施形態では、対象におけるがんの治療方法を提供するものであって、当該がんは、MTAP遺伝子および/もしくはMTAPタンパク質が存在して完全に機能するがんと比較して、または野生型MTAP遺伝子によるがんと比較して、MTAP発現の減少もしくは不在、またはMTAP遺伝子の不在、またはMTAPタンパク質の機能低下で特徴付けられるものである。当該方法は、対象に、一般式Iの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、互変異性体、および/またはアイソトポログの治療有効量を投与することを含む。

別の実施形態では、対象におけるMTAP欠失がんの治療方法を提供するものであって、対象に、一般式Iの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を投与することを含む。ある実施形態では、MTAP欠失がんは、白血病、神経膠腫、黒色腫、膵がん、非小細胞肺がん（NSCLC）、膀胱がん、星細胞腫、骨肉腫、頭頸部がん、粘液様軟骨肉腫、卵巣がん、子宮内膜がん、乳がん、軟部組織肉腫、リンパ腫、および中皮腫から選択される。

ある実施形態では、MTAP欠失がんは膵がんである。別の実施形態では、MTAP欠失がんは、膀胱がん、黒色腫、脳腫瘍、肺がん、膵がん、乳がん、肝がん、食道がん、胃がん、大腸がん、頭頸部がん、腎がん、大腸がん、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）、急性リンパ性白血病（ALL）、マントル細胞リンパ腫（MCL）、多形神経膠芽腫（GBM）および非小細胞肺がん（NSCLC）から選択される。

MTAPヌル細胞株のゲノム解析により、KRAS変異またはp53変異を組み込んだ細胞株がMAT2A阻害に感受性であることが明らかとなった。したがって、本開示の実施形態は、がんが、MTAP発現の低下もしくは不在、またはMTAP遺伝子の不在、またはMTAPタンパク質の機能低下で特徴づけられるような、対象におけるがんを治療する方法であって、当該方法は一般式Iの化合物の治療有効量を対象に投与することを含み、当該がんは、変異体KRASまたは変異体p53の存在によってさらに特徴付けられる。ある実施形態では、対象における変異体KRASまたは変異体p53を有するMTAPヌルのがんの治療方法を提供するものであって、当該方法は、対象に、一般式Iの化合物またはその薬学的に許容可能な塩、互変異性体、および/またはアイソトポログの有効量を投与することを含む。例えば、がんは、MTAPヌルおよびKRAS変異体であるか、MTAPヌルおよびp53変異体であるか、またはMTAPヌル、KRAS変異体およびp53変異体の各々である。

「変異体KRAS」または「KRAS変異」という用語は、その正常な機能を変化させる活性化変異と、こうしたタンパク質をコードする遺伝子とを組み込んだKRASタンパク質を指す。例えば、変異体KRASタンパク質は、12位または13位において単一のアミノ酸置換を組み込んでいてもよい。特定の実施形態では、KRAS変異体は、G12XまたはG13X置換を組み込み、Xは示された位置での任意のアミノ酸の変化を表す。特定の実施形態では、置換はG12V、G12R、G12CまたはG13Dである。別の実施形態では、その置換はG13Dである。「変異体p53」または「p53変異」とは、その腫瘍抑制因子機能を阻害または除去する変異を組み込んだp53タンパク質（または当該タンパク質をコードする遺伝子）を意味する。ある実施形態では、当該p53変異は、Y126＿スプライス、K132Q、M133K、R174fs、R175H、R196*、C238S、C242Y、G245S、R248W、R248Q、I255T、D259V、S261＿スプライス、R267P、R273C、R282W、A159VまたはR280Kである。ある実施形態では、前述のがんは、非小細胞肺がん（NSCLC）、膵がん、頭頸部がん、胃がん、乳がん、大腸がん、または卵巣がんである。

別の実施形態では、本明細書に開示される化合物は、疾患関連タンパク質の分解のためのリガンドとして有用である。このアプローチの例は、PROTAC（タンパク質分解誘導キメラ分子（PROteolysis TArgeting Chimeras））である。PROTACは、本明細書に開示される化合物のうちの一つから選択される、標的タンパク質を結合することができるリガンド部分と、E3リガーゼによって認識されてポリユビキチン化されるペプチド部分（デグロンと称される）などのリガーゼ標的部分との両方を含む二官能性分子である。したがって、PROTACは標的タンパク質に非共有結合的に結合し、E3リガーゼをデグロンを介してリクルートするが、これは結果として、結合した標的のポリユビキチン化および分解をもたらす。多くの文献が、腫瘍学を含む様々な治療分野におけるPROTACの前臨床的使用を記述している。例えば、Lu et al. Chemistry & Biology 22 (2015) 755-763を参照されたい。

態様

態様1
以下の一般式Iに従った化合物であって、
式中、
Lは、O、S、NR、または結合であり、
Rは、HまたはC₁-C₆アルキルであり、
R¹は、C₁-C₆アルキル、C₂-C₆アルケニル、C₃-C₆カルボシクリル、-(C₁-C₆アルキル)(C₃-C₆カルボシクリル)、および-(C₁-C₆アルキル)(C₃-C₆シクロアルケニル)からなる群から選択されるものであって、式中、
R¹の任意のアルキルは直鎖または分岐であり、
R¹は1～6のハロで置換されていてもよく、
または、LがNRである場合、Lと組み合わせたRおよびR¹は、一つまたは複数のR^Aで置換されていてもよい3～6員のヘテロシクロアルキル（ここで、環の1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）を表し、
R²およびR³は、C₆-C₁₀アリール、C₃-C₆カルボシクリル、5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）、および3～14員のヘテロシクロアルキル（ここで、ヘテロシクロアルキルの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）からなる群から、独立に選択され、
式中、R²およびR³は、R^A、OR^A、ハロ、-N＝N-R^A、NR^AR^B、-(C₁-C₆アルキル)NR^AR^B、-C(O)OR^A、-C(O)NR^AR^B、-OC(O)R^A、および-CNからなる群から選択される一つまたは複数の置換基によって、独立しておよび任意で、置換され、
R⁴は、H、C₁-C₆アルキル(一つまたは複数のハロにより任意に置換される)、-O(C₁-C₆アルキル)(一つまたは複数のハロにより任意に置換される)、-OH、ハロ、-CN、‐(C₁-C₆アルキル)NR^AR^B、および-NR^AR^Bからなる群から選択され、
R⁵ は、H、C₁-C₆アルキル、C₁-C₆アルコキシ、C₂-C₆アルケニル、C₂-C₆アルキニル、ハロ、-CN、および-NR^CR^Dからなる群から選択され、
R^AおよびR^Bは、H、-CN、-ヒドロキシ、オキソ、C₁-C₆アルキル、C₁-C₆アルコキシ、C₂-C₆アルケニル、C₂-C₆アルキニル、-NH₂、-S(O)_0-2-(C₁-C₆アルキル)、-S(O)_0-2-(C₆-C₁₀アリール)、-C(O)(C₁-C₆アルキル)、-C(O)(C₃-C₁₄カルボシクリル)、-C₃-C₁₄カルボシクリル、-(C₁-C₆アルキル)(C₃-C₁₄カルボシクリル)、C₆-C₁₀アリール、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C₁-C₆アルキル)-(3～14員のヘテロシクロアルキル)（ここで、ヘテロシクロアルキルの1～4員はN、O、およびSから独立に選択される）、および5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員はN、O、およびSから独立に選択される）からなる群から独立に選択され、
式中、R^AおよびR^Bの各アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、アリール、カルボシクリル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール部分は、ヒドロキシ、ハロ、-NR'₂（ここで、各R'は、C₁-C₆アルキル、C₂-C₆アルケニル、C₂-C₆アルキニル、C₆-C₁₀アリール、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C₁-C₆アルキル)-(3～14員のヘテロシクロアルキル）（ここで、環の1～4員は、N、O、およびSから、独立に選択される）、および5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）からなる群から独立に選択される)、-NHC(O)(OC₁-C₆アルキル)、-NO₂、-CN、オキソ、-C(O)OH、-C(O)O(C₁-C₆アルキル)、-C₁-C₆アルキル(C₁-C₆アルコキシ)、-C(O)NH₂、C₁-C₆アルキル、-C(O)C₁-C₆アルキル、-OC₁-C₆アルキル、-Si(C₁-C₆アルキル)₃、-S(O)_0-2-(C₁-C₆アルキル)、C₆-C₁₀アリール、-(C₁-C₆アルキル)(C₆-C₁₀アリール)、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C₁-C₆アルキル)-(3～14員の複素環)（ここで、複素環の1～4員は、N、O、およびSから、独立に選択される）、および-O(C₆-C₁₄アリール)からなる群から選択される一つまたは複数の置換基で置換され、式中、R^AおよびR^Bの各アルキル、アルケニル、アリール、およびヘテロシクロアルキルは、ヒドロキシ、-OC₁-C₆アルキル、ハロ、-NH₂、-(C₁-C₆-アルキル)NH₂、-C(O)OH、CN、およびオキソからなる群から選択される一つまたは複数の置換基で任意に置換され、
R^CおよびR^Dはそれぞれ独立して、HおよびC₁-C₆アルキルから選択される、化合物、
またはその薬学的に許容可能な塩。

態様2
態様1に記載の化合物であって、式中、
R⁴は、H、一つまたは複数のハロで任意に置換されたC₁-C₆アルキル、-O(C₁-C₆アルキル)、‐(C₁-C₆アルキル)NR^AR^B、および-NR^AR^B(ここで、R^AおよびR^Bは、HおよびC₁-C₆アルキルから独立に選択される)からなる群から選択され、
R⁵は、H、C₁-C₆アルキル、C₁-C₆アルコキシ、および-NR^CR^Dからなる群から選択される、化合物。

態様3
R⁴およびR⁵のうちの少なくとも一つがHである、態様1または2に記載の化合物。

態様4
R⁴が、Hである、態様1～3のいずれか一つに記載の化合物。

態様5
R⁵が、Hである、態様1～4のいずれか一つに記載の化合物。

態様6
R⁴およびR⁵の各々が、Hである、態様1～5のいずれか一つに記載の化合物。

態様7
R²が、C₆-C₁₀アリールまたは5～10員のヘテロアリールである、態様1～6のいずれか一つに記載の化合物。

態様8
R²が、C_6-C₁₀アリールである、態様7に記載の化合物。

態様9
R²が、フェニルである、態様8に記載の化合物。

態様10
R²が、5～10員のヘテロアリールであり、環の1員はNである、態様7に記載の化合物。

態様11
R²が、5または6員のヘテロアリールである、態様10に記載の化合物。

態様12
R²が、6員のヘテロアリールである、態様10または11に記載の化合物。

態様13
R²が、ピリジルである、態様10～12のいずれか一つに記載の化合物。

態様14
R³が、3～14員のヘテロシクロアルキルまたは5～10員のヘテロアリールである、態様1～12のいずれか一つに記載の化合物。

態様15
R³が、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ピリジニル、ピリジノニル、ピラダジニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、キナゾリニル、イミダゾピリジニル、ピラゾロピリジニル、トリアゾロピリジニル、シンノリニル、イソキサゾリル、ピラゾリル、ベンゾフラニル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾジオキシニル、およびテトラヒドロベンゾジオキシニルからなる群から選択される、態様14に記載の化合物。

態様16
R³が、C₆-C₁₀アリールである、態様1～12のいずれか一つに記載の化合物。

態様17
R³が、フェニルである、態様16に記載の化合物。

態様18
R²がフェニルであり、R³が3～14員のヘテロシクロアルキルまたは5～10員のヘテロアリールである、態様1～6のいずれか一つに記載の化合物。

態様19
Lが、OまたはNRである、態様1～18のいずれか一つに記載の化合物。

態様20
R¹が、C_1-C₆アルキルまたはC_3-C₆カルボシクリルである、態様19に記載の化合物。

態様21
R¹が、1～3のFで置換されていてもよいC₁-C₃アルキルである、態様19または20に記載の化合物。

態様22
態様1に記載の化合物であって、式中、
LはOまたはNRであり、またRはHであり、
R¹は1～3のFで置換されていてもよいC₁-C₃アルキルであり、
R²は3～14員のヘテロシクロアルキルまたは5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールの1員はNである）またはC₆-C₁₀アリールであり、
R³は3～14員のヘテロシクロアルキルまたは5～10員のヘテロアリールであり、ここでヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールの1～3員は、N、O、およびSから独立に選択され、また
R⁴およびR⁵の各々はHである、化合物。

態様23
Lが、NRである、態様22に記載の化合物。

態様24
化合物が、以下の表から選択される、態様1に記載の化合物。

態様25
治療有効量の、態様1～24のいずれか一つに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩、および薬学的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。

態様26
がんを患う対象においてがんを治療する方法であって、当該対象に対して、態様1～24のいずれか一つに記載のMAT2A阻害剤化合物の有効量を投与することを含む、方法。

態様27
がんが、MTAP-欠失がんである、態様26に記載の方法。

態様28
細胞におけるS-アデノシルメチオニン（SAM）の合成を阻害する方法であって、細胞に、態様1～24のいずれか一つに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の有効量を導入することを含む、方法。

態様29
細胞が対象内にある、態様28に記載の方法。

態様30
対象におけるS-アデノシルメチオニン（SAM）の合成を阻害する方法であって、対象に、態様1～24のいずれか一つに記載の少なくとも一つの化合物またはその塩の有効量を投与することを含む、方法。

態様31
がんを患う対象においてがんを治療する方法であって、当該対象に対して、態様1～24のいずれか一つに記載の化合物の有効量を投与することを含む、方法。

態様32
がんが、MTAP-欠失がんである、態様31に記載の方法。

態様33
がんが、中皮腫、神経芽細胞腫、直腸がん、大腸がん、家族性腺腫ポリポーシスがんおよび、遺伝性非ポリポーシス大腸がん、食道がん、陰唇がん、喉頭がん、下咽頭がん、舌がん、唾液腺がん、胃がん、腺がん、髄様甲状腺がん、乳頭状甲状腺がん、腎がん、腎実質がん、卵巣がん、子宮頸部がん、子宮体がん、子宮内膜がん、絨毛がん、膵がん、前立腺がん、膀胱がん、精巣がん、乳がん、尿路がん（urinary carcinoma）、黒色腫、脳腫瘍、リンパ腫、頭頸部がん、急性リンパ性白血病（ALL）、慢性リンパ性白血病（CLL）、急性骨髄性白血病（AML）、慢性骨髄性白血病（CML）、肝細胞がん、胆嚢がん、気管支がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、多発性骨髄腫、基底細胞腫、奇形腫、網膜芽細胞腫、脈絡膜黒色腫、精上皮腫、横紋筋肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫および形質細胞腫からなる群から選択される、態様26、27、31、および32のいずれか一つに記載の方法。

態様34
がんが、B細胞急性リンパ球性白血病（B-ALL）、中皮腫、リンパ腫、膵がん、肺がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、脳腫瘍、頭頸部がん、黒色腫および乳がんからなる群から選択される、態様31または32に記載の方法。

態様35
がんが、肺がん、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肺の腺がん、および肺の扁平上皮がんからなる群から選択される、態様34に記載の方法。

態様36
がんが、神経膠腫、神経膠芽細胞腫、星細胞腫、髄膜腫、髄芽細胞腫、末梢性神経外胚葉性腫瘍、および頭蓋咽頭腫からなる群から選択される脳腫瘍である、態様34に記載の方法。

態様37
がんが、トリプルネガティブ乳がん（TNBC）である、態様34に記載の方法。

態様38
がんが、マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫、および成人T細胞性白血病/リンパ腫からなる群から選択されるリンパ腫である、態様34に記載の方法。

態様39
がんを患う対象においてがんを治療する方法であって、がんが、メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（MTAP）遺伝子発現が、MTAP遺伝子もしくはMTAPタンパク質が存在するおよび/もしくは完全に機能しているがんと比較して、減少または不在であること、MTAP遺伝子が不在であること、またはMTAPタンパク質の機能低下を特徴とするものであって、当該方法は、態様1～24のいずれか一つに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の治療有効量を、対象に投与することを含む、方法。

態様40
S-アデノシルメチオニン（SAM）の合成を阻害するための、態様1～24のいずれか一つに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

態様41
がんを患う対象におけるがんを治療するための、態様1～24のいずれか一つに記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

態様42
がんが、MTAP-欠失がんである、態様41に記載の化合物。

態様43
がんが、中皮腫、神経芽細胞腫、直腸がん、大腸がん、家族性腺腫ポリポーシスがんおよび、遺伝性非ポリポーシス大腸がん、食道がん、陰唇がん、喉頭がん、下咽頭がん、舌がん、唾液腺がん、胃がん、腺がん、髄様甲状腺がん、乳頭状甲状腺がん、腎がん、腎実質がん、卵巣がん、子宮頸部がん、子宮体がん、子宮内膜がん、絨毛がん、膵がん、前立腺がん、膀胱がん、精巣がん、乳がん、尿路がん（urinary carcinoma）、黒色腫、脳腫瘍、リンパ腫、頭頸部がん、急性リンパ性白血病（ALL）、慢性リンパ性白血病（CLL）、急性骨髄性白血病（AML）、慢性骨髄性白血病（CML）、肝細胞がん、胆嚢がん、気管支がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、多発性骨髄腫、基底細胞腫、奇形腫、網膜芽細胞腫、脈絡膜黒色腫、精上皮腫、横紋筋肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫および形質細胞腫からなる群から選択される、態様41または42に記載の化合物。

態様44
がんが、B細胞急性リンパ球性白血病（B-ALL）、中皮腫、リンパ腫、膵がん、肺がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、脳腫瘍、頭頸部がん、黒色腫および乳がんからなる群から選択される、態様41または42に記載の化合物。

態様45
がんが、肺がん、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肺の腺がん、および肺の扁平上皮がんからなる群から選択される、態様44に記載の化合物。

態様46
がんが、トリプルネガティブ乳がん（TNBC）である、態様44に記載の化合物。

態様47
がんが、神経膠腫、神経膠芽細胞腫、星細胞腫、髄膜腫、髄芽細胞腫、末梢性神経外胚葉性腫瘍、および頭蓋咽頭腫からなる群から選択される脳腫瘍である、態様44に記載の化合物。

態様48
がんが、マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）、および成人T細胞性白血病/リンパ腫からなる群から選択されるリンパ腫である、態様41～43のいずれか一つに記載の化合物。

本開示は、以下の実施例を参照することにより完全に理解されるであろう。実施例は、しかし本開示の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。

全般的実験

以下の実施例では、試薬および溶媒は、商業的供給源（例えばAlfa社、Acros社、Sigma Aldrich社、TCI社およびShanghai Chemical Reagent Company社等）から購入し、別段に明記しない限り、さらに精製することなく使用した。フラッシュクロマトグラフィーは、200～300メッシュのシリカゲル粒子を備えたカラムを用いて、Ez Purifier IIIで実施した。分析および分取用薄層クロマトグラフィー（TLC）プレートは、HSGF254（厚さ0.15～0.2mm、Shanghai Anbang Company社、中国）であった。核磁気共鳴法（NMR）のスペクトルは、Brucker社AMX-400のNMR（Brucker社、スイス国）で取得した。化学シフトは、テトラメチルシランから低磁場側の百万分率（ppm、δ）で記録した。質量スペクトルは、Waters社のLCT TOF質量分析計（Waters社、米国）よりエレクトロスプレーイオン化（ESI）法で与えられた。HPLCクロマトグラフは、Agilent社の1200 Liquid Chromatography（Agilent社、米国、カラム：Ultimate 4.6mm×50mm、5μm、移動相A：0.1%ギ酸水溶液、移動相B：アセトニトリル）で記録した。マイクロ波反応は、Initiator 2.5 Microwave Synthesizer（Biotage社、スウェーデン国）で実行した。

全般的手順I：

構造1.9、1.11、および1.12の化合物を、全般的手順Iとして図示したスキームを通して得た。ピリダジノン1.1から、求電子臭素化を使用して複素環式臭化物1.2を生成した。所望のR₃基を、Chan-Lamカップリングを使用して導入し、化合物1.3を生成した。この段階で、所望のR₄およびR₅基を、試薬1.4を用いたSuzukiクロスカップリング(方法A)、または試薬1.5を用いたStilleクロスカップリング(方法B)のいずれかを使用して導入した。次いで、得られた中間体1.6を、塩基性条件下で所望の二環式コア1.7に環化させた。所望のR₂基を、Suzukiクロスカップリングを使用して導入し、化合物1.8を生成した。次いで、化合物1.8をアルキル化して、所望のR₁基を導入し、構造1.9の最終化合物を得た。あるいは、化合物1.8を塩素化して塩化アリール1.10を得、芳香族求核置換を介して所望のR₁を導入して、構造1.11の最終化合物を得た(方法C)。あるいは、BOPを使用して化合物1.8を活性化し、芳香族求核置換を介して所望のN-結合型R₁を導入して、構造1.12の最終化合物を得た(方法D)。

全般的手順Iによる実施例101の調製（方法A）：

ステップA:5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロピリダジン-3(2H)-オン

MeCN(40mL)中の5-アミノ-4-クロロピリダジン-3(2H)-オン(1.2g、8.2mmol、1.0当量)およびNaOAc(0.74g、9.1mmol、1.1当量)の懸濁液に、Br₂(1.45g、9.1mmol、1.1当量)を、シリンジを介して、80℃で5分間添加した。得られた混合物を、80℃でさらに1時間攪拌した。室温まで冷却した後、揮発性物質を減圧下で除去し、氷冷H₂O(20mL)で希釈し、得られた白色沈殿物を濾過し、濾過ケーキを収集し、減圧下で乾燥させて、白色固体として5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロピリダジン-3(2H)-オン(1.48g、収率80%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 224, 226 [M+H]⁺。

ステップB:5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリダジン-3(2H)-オン

DMF(15mL)中の5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロピリダジン-3(2H)-オン(590mg、2.63mmol、1.0当量)の懸濁液に、(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ボロン酸(555mg、3.15mmol、1.2当量)、Cu(OAc)₂(478mg、2.63mmol、1.0当量)およびピリジン(422μL、5.26mmol、2.0当量)を添加した。得られた混合物を、50℃(空気雰囲気)で8時間攪拌し、反応をTLCによって監視した。完了後、反応混合物をH₂O(30mL)で希釈し、得られた懸濁液をさらに30分間攪拌し、沈殿物を収集し、氷冷したH₂O(30mL×3)で洗浄し、減圧下で乾燥させて、灰白色固体として5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリダジン-3(2H)-オン(770mg、収率82%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 354, 356 [M+H]⁺。

ステップC:エチル(E)-3-(4-アミノ-5-クロロ-1-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-イル)アクリレート

DMF(10mL)中の5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリダジン-3(2H)-オン(500mg、1.41mmol、1.0当量)の溶液に、エチル(E)-3-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)アクリレート(350mg、1.55mmol、1.1当量)、Pd(dppf)Cl₂(103mg、0.14 mmol、0.1当量)およびK₂CO₃ (389mg、2.82 mmol、2.0当量)を添加した。反応混合物を、N₂雰囲気下で、80℃で16時間攪拌した。反応混合物を、氷水（30mL）中に注いで、EtOAc（50mL×3）で抽出した。合わせた有機層を、Na₂SO₄で乾燥させ、減圧下で濃縮し、粗残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色固体としてエチル(E)-3-(4-アミノ-5-クロロ-1-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-イル)アクリレート(316mg、収率60%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 374 [M+H]⁺。

ステップD:4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン

EtOH(10mL)中のエチル(E)-3-(4-アミノ-5-クロロ-1-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-イル)アクリレート(400mg、1.07mmol、1.0当量)の溶液に、K₂CO₃(295mg、2.14mmol、2.0当量)を室温で加えた。反応混合物を、80℃で3時間攪拌した。次いで氷水（30mL）を加え、混合物をEtOAc（30mL×3）で抽出した。合わせた有機層をNa₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、黄色固体として4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン（319mg、収率85%）を得た。LC-MS (ESI): m/z 328 [M+H]⁺。

ステップE:4-(4-クロロフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン

ジオキサン/H₂O (110mL、10/1、v/v)中の4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(1g、3.05mmol、1.0当量)、(4-クロロフェニル)ボロン酸(954mg、6.1mmol、2.0当量)、Pd(OAc)₂(68mg、0.3mmol、0.1当量)、S-Phos(251mg、0.61 mmol、0.2当量) およびK₂CO₃(1.26g、9.15 mmol、3.0当量) の溶液を、N₂雰囲気下で、110℃で2時間攪拌した。氷水(30mL)を加え、混合物をEtOAc(30mL×3)で抽出し、合わせた有機層をNa₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、粗残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色固体として4-(4-クロロフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(700mg、収率57%)を得た。LC-MS: m/z 404 [M+H]⁺。

ステップF:4-(4-クロロフェニル)-6-(シクロプロピルメトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

DMF (3mL)中の4-(4-クロロフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(200mg、0.495mmol、1.0当量)、(ブロモメチル)シクロプロパン(0.2mL、2.0mmol、4.0当量)、Cs₂CO₃(484mg、1.5mmol、3.0当量)の溶液を、室温で16時間攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣を、分取HPLCにより精製して、4-(4-クロロフェニル)-6-(シクロプロピルメトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例101)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.55 (s, 1H), 8.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.76 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.51 (dd, J = 9.2 Hz, 1.6 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.28 (s, 3H), 4.21 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 1.36-1.19 (m, 1H), 0.64-0.57 (m, 2H), 0.37-0.33 (m, 2H).

LC-MS (ESI): m/z 458 [M+H]⁺

全般的手順Iによる実施例102の調製（方法B）：

ステップC：4-クロロ-6-ヒドロキシ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-8-(トリフルオロメチル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

DMF (10mL)中の5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリダジン-3(2H)-オン(1g、2.8mmol、1.0当量)、エチル(Z)-4,4,4-トリフルオロ-3-(トリブチルスタンニル)ブタ-2-エノエート(参照:Synlett、2012、23、755-759)(2.6g、5.6mmol、2.0当量)、Pd(PPh₃)₄(655mg、0.567mmol、0.2当量) 、およびCuI (216mg、1.13mmol、0.4当量)の溶液を、N₂雰囲気下で、100℃で16時間攪拌した。反応混合物を、CsF(飽和水溶液)(30mL)でクエンチし、さらに30分間攪拌し、得られた懸濁液を濾過し、沈殿物を収集し、EtOAc(20mL)で粉砕して、黄色固体として4-クロロ-6-ヒドロキシ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-8-(トリフルオロメチル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(800mg、収率71%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 396 [M+H]⁺。

6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-8-(トリフルオロメチル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(実施例102)を、全般的手順I(ステップE、F)により、2-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロランおよび2,2-ジフルオロエチルトリフルオロメタンスルホネートから合成した。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.56 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.76 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.50 (dd, J = 9.2 Hz, 1.6 Hz, 1H), 7.38 (t, J_HF = 73.6 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.43 (tt, J_HF = 54.0 Hz, J = 2.8 Hz, 1H), 4.63 (td, J_HF= 14.8 Hz, J = 2.8 Hz, 2H), 4.25 (s, 3H)。

LC-MS (ESI): m/z 568 [M+H]⁺。

全般的手順Iによる実施例103の調製（方法C）：

ステップG:6-クロロ-4-(4-クロロフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

POCl₃(5mL)中の4-(4-クロロフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(100mg、0.284mmol 1.0当量)の溶液を、80℃で2時間攪拌した。過剰なPOCl₃を減圧下で除去し、残渣を氷冷したNaHCO₃(飽和水溶液) (10mL)に注意深く注ぎ、得られた混合物を、DCM(10mL×3)で抽出し、合わせた有機層を、塩水(10mL)で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させ、減圧下で濃縮させ、粗残渣を、シリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、赤色固体として6-クロロ-4-(4-クロロフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(60mg、収率57%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 422 [M+H]⁺。

ステップH:4-(4-クロロフェニル)-6-(エチルアミノ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

THF(3mL) 中の6-クロロ-4-(4-クロロフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(60mg、0.142mmol、1.0当量)、エチルアミン塩酸塩(58mg、0.71mmol、5.0当量)、CsF(108mg、0.71mmol 5.0当量)、およびDIPEA(92mg、0.71mmol、5.0当量)の溶液を、室温で16時間攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗残渣を、分取HPLCにより精製して、4-(4-クロロフェニル)-6-(エチルアミノ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例103)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.46 (s, 1H), 8.34 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.67 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.45-7.40 (m, 3H), 6.79 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.22 (s, 3H), 3.37-3.30 (m, 2H), 1.15 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 431 [M+H]⁺。

全般的手順Iによる実施例301の調製（方法D）：

ステップI：2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-4-(6-メチルピリジン-3-イル)-6-((2,2,2-トリフルオロエチル)アミノ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(実施例301)

DMF(5mL)中の6-ヒドロキシ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-4-(6-メチルピリジン-3-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(100mg、0.26mmol、1.0当量)、BOP(173mg、0.39mmol、1.5当量)の溶液に、DIEA(0.13mL、0.78mmol、3.0当量)を添加した。得られた混合物を、室温で30分間攪拌し、次いで2,2,2-トリフルオロエタン-1-アミン(0.06mL、0.78mmol、3.0当量)を加え、室温でさらに2時間攪拌した。完了後、反応物を、氷水(10mL)を加えることによりクエンチし、EtOAc(10ml×3)で抽出し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-4-(6-メチルピリジン-3-イル)-6-((2,2,2-トリフルオロエチル)アミノ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た（実施形態301）。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.86 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.02 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.77 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.30-4.22 (m, 2H), 4.21 (s, 3H), 2.51 (s, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 466 [M+H]⁺。

全般的手順I（方法A）に関して上記に記載した手順を使用して、適切な出発材料を使用して、以下の化合物を合成した：

全般的手順I（方法C）に関して上記に記載した手順を使用して、適切な出発材料を使用して、以下の化合物を合成した：

全般的手順I（方法D）に関して上記に記載した手順を使用して、適切な出発材料を使用して、以下の化合物を合成した：

中間体(6-(メチル-d₃)ピリジン-3-イル)ボロン酸の合成:

ステップA:5-メトキシ-2-(メチル-d₃)ピリジン

無水THF(70mL)中の2-ブロモ-5-メトキシピリジン(7g、37.2mmol、1.0当量)およびFe(acac)₃(1.31g、3.71mmol、0.1当量)の溶液に、CD₃MgI(THF中1M)(93mL、93mmol、2.5当量)をN₂雰囲気下で、0℃で滴下し、得られた混合物を0℃で3時間攪拌した。完了後、反応をNH₄Cl(飽和水溶液)(200mL)を添加することによってクエンチし、次いでEtOAc(70mL×3)で抽出し、合わせた有機層を塩水(100mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させて減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、無色油として5-メトキシ-2-(メチル-d₃)ピリジン(4g、85%)を得た。LC-MS (ESI):m/z 127 [M+H]⁺。

ステップB:6-(メチル-d₃)ピリジン-3-オール

乾燥トルエン(20mL)中の5-メトキシ-2-(メチル-d₃)ピリジン(1.6g、12.6mmol、1.0当量)の溶液に、L-Selectride(THF中1M)(37.8mL、37.8mmol、3.0当量)を、滴下漏斗を介して0℃で滴下し、添加後、反応混合物を室温に加温し、予熱された油浴(110℃)に移動させて、さらに3時間攪拌した。完了後、反応物を再び0℃に冷却し、MeOH(10mL)を慎重に添加することによってクエンチし、得られた混合物を減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、微黄色固体として6-(メチル-d₃)ピリジン-3-オール(1.2g、84.3%)を得た。LC-MS (ESI):m/z 113 [M+H]⁺。

ステップC:6-(メチル-d₃)ピリジン-3-イルトリフルオロメタンスルホネート

乾燥DCM(10mL)中の6-(メチル-d₃)ピリジン-3-オール(500mg、4.46mmol、1.0当量)およびピリジン(0.54mL、6.69mmol、1.5当量)の溶液に、0℃でシリンジを介してトリフリン酸無水物(1.13mL、6.69mmol、1.5当量)を添加した。反応混合物を室温に自然昇温し、さらに2時間攪拌した。完了後、反応物を、H₂O(20mL)を添加することによってクエンチし、次いでEtOAc(20mL×3)で抽出し、合わせた有機層を、希釈HCl(0.5N、水溶液)(20mL)、塩水(20mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、無色油として6-(メチル-d₃)ピリジン-3-イルトリフルオロメタンスルホネート(1.0g、91%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 245 [M+H]⁺。

ステップD:(6-(メチル-d₃)ピリジン-3-イル)ボロン酸

乾燥1,4-ジオキサン(10ml)中の6-(メチル-d₃)ピリジン-3-イルトリフルオロメタンスルホネート(1.0g、4.09mmol、1.0当量)の溶液に、ビス(ピナコラート)ジボロン(2.08g、8.2mmol、2.0当量)、KOAc(1.6g、16.4mmol、4.0当量)およびPd(dppf)Cl₂(300mg、0.41mmol、0.1当量)を添加した。得られた混合物を、N₂雰囲気下で、100℃で16時間攪拌した。完了後、粗混合物を、Celite(登録商標)の短いパッドを通して濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、残渣をRP分取HPLCにより精製して、(6-(メチル-d₃)ピリジン-3-イル)ボロン酸(460mg、80%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 141 [M+H]⁺。

全般的手順II：

構造2.8および2.11の化合物を、全般的手順IIとして示されるスキームを通して得た。ピリダジノン2.1から始めて、複素環をベンジル化して、化合物2.2を生成した。所望のR₄基およびR₅基を、Suzukiクロスカップリングを使用して導入し、構造2.3の化合物を得た。次いで、化合物2.3を塩基性条件下で環化して、二環式化合物2.4を生成した。所望のR₂基を、Suzukiカップリングを使用して導入し、化合物2.5を生成した。次いで、化合物2.5を塩素化して、塩化アリール2.6を生成した。所望のR₁基を、芳香族求核置換を介して導入し、同時に複素環式コアを脱ベンジルして化合物2.7を生成した。最後に、所望のR₃基を、Ullmannカップリング(方法A)またはChan-Lamカップリング(方法B)を使用して導入し、構造2.8の化合物を得た。あるいは、化合物2.5をBOPで活性化し、所望のR₁アミンと反応させて、複素環2.9を得ることができた(方法C)。ベンジル基を、t-BuOKを使用して除去して複素環2.10を得、所望のR₃基を、Ullmannカップリングを使用して導入して、構造2.11の化合物を得た。

全般的手順IIa(方法C):

全般的手順IIa(方法C)は、全般的手順II(方法C)に示されるBn保護基の代替保護基としてPMBを使用して後に開発された。酸性条件下での複素環2.16の脱保護は、化合物構造2.11の収束合成をもたらした。

全般的手順IIによる実施例166の調製（方法A）：

ステップA:5-アミノ-2-ベンジル-6-ブロモ-4-クロロピリダジン-3(2H)-オン

DMF(50mL)中の5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロピリダジン-3(2H)-オン(3g、13.4mmol、1.0当量)、K₂CO₃(3.7g、26.8mmol、2.0当量)の溶液に、BnBr(2.5g、14.7mmol、1.1当量)を加え、反応混合物を80℃で一晩攪拌した。反応混合物を、水(50mL)で希釈し、EtOAc(50mL×3)で抽出し、合わせた有機層を、塩水(50mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、白色固体として5-アミノ-2-ベンジル-6-ブロモ-4-クロロピリダジン-3(2H)-オン(2.46g、収率59%)を得た。LC-MS (ESI) m/z 314, 316 [M+H]⁺。

ステップB:エチル(E)-3-(4-アミノ-1-ベンジル-5-クロロ-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-イル)アクリレート

DMF(40mL)中の5-アミノ-2-ベンジル-6-ブロモ-4-クロロピリダジン-3(2H)-オン(2.46g、7.8mmol、1.0当量)、K₂CO₃(2.2g、15.6mmol、2.0当量)、エチル(E)-3-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)アクリレート(1.94g、8.6mmol、1.1当量)の溶液に、Pd(dppf)Cl₂ (0.57g、0.8 mmol、0.1当量) をN₂雰囲気下で添加し、反応混合物を100℃で3時間撹拌した。反応混合物を、H₂O(50mL)で希釈し、EtOAc(50mL×3)で抽出し、合わせた有機層を、塩水(50mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーで精製して、褐色固体として(E)-3-(4-アミノ-1-ベンジル-5-クロロ-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-イル)アクリレート(1.89g、収率71%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 334 [M+H]⁺。

ステップC:2-ベンジル-4-クロロピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン

EtOH(20mL)中のエチル(E)-3-(4-アミノ-1-ベンジル-5-クロロ-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-イル)アクリレート(1.89g、5.66mmol、1.0当量)の攪拌溶液に、K₂CO₃(2.34g、16.98mmol、3.0当量)を加え、反応混合物を80℃で一晩攪拌した。反応混合物を、水(30mL)で希釈し、EtOAc(30mL×3)で抽出し、合わせた有機層をNa₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗2-ベンジル-4-クロロピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオンを褐色固体(1.5g)として得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。LC-MS (ESI): m/z 288 [M+H]⁺。

ステップD:2-ベンジル-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン

ジオキサン/H₂O混合物(88mL、10/1、v/v)中の2-ベンジル-4-クロロピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(1.5g、5.2mmol、1.0当量)、2-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン(2g、7.2mmol、1.4当量)、K₂CO₃(1.54g、11.1mmol、2.1当量)、X-Phos(0.52g、1.1mmol、0.2当量)の攪拌溶液に、N₂雰囲気下でPd(OAc)₂ (0.12g、0.55mmol、0.1当量)を添加した。反応混合物を、110℃で一晩攪拌した。反応混合物を、減圧下で濃縮し、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィーにより精製して、白色固体として2-ベンジル-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(1.4g、収率68%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 396 [M+H]⁺。

ステップE:2-ベンジル-6-クロロ-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

2-ベンジル-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(400mg、1.01mmol、1.0当量)を、POCl₃(4mL)中に溶解し、得られた混合物を80℃で4時間攪拌した。過剰なPOCl₃を減圧下で除去し、残渣を、氷冷NaHCO₃(飽和水溶液)(20mL)上に注いで、DCM(30mL×3)で抽出し、合わせた有機層をNa₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、黄色固体として粗2-ベンジル-6-クロロ-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(400mg、収率95%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 414 [M+H]⁺。

ステップF: 6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

無水THF(8mL)中の2-ベンジル-6-クロロ-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(400mg、0.97mmol、1.0当量)、2,2-ジフルオロエタン-1-オール(396mg、4.8mmol、5.0当量)の溶液に、t-BuOK(541mg、4.8mmol、5.0当量)を、0℃で数回に分けて添加し、添加後、反応混合物を室温で一晩攪拌した。反応混合物を、H₂O(10mL)で希釈し、EtOAc(30mL×3)で抽出し、合わせた有機層をNa₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色固体として6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(150mg、収率42%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 370 [M+H]⁺。

ステップG: 6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2,3-ジメチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(方法A)

MeCN(3mL)中の6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(70mg、0.19mmol、1.0当量)の攪拌懸濁液に、5-ブロモ-2,3-ジメチル-2H-インダゾール(64.0mg、0.28mmol、1.5当量)、Cul(36.2mg、0.19mmol、1.0当量)、N¹,N²-ジメチルシクロヘキサン-1,2-ジアミン（26.9mg、0.19mmol、1.0当量）およびCsF（57.6mg、0.38mmol、2.0当量）を添加した。反応物を、N₂雰囲気下で、シールチューブ内で、85℃で一晩攪拌し、減圧下で濃縮した。残渣を、分取HPLCにより精製し、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2,3-ジメチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例166)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.07 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.62 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 9.1 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.35 (t, J_HF = 72.0 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.41 (tt, J_HF = 54.4 Hz, J = 3.3 Hz, 1H), 4.59 (td, J_HF = 15.1 Hz, J = 3.3 Hz, 2H), 4.10 (s, 3H), 2.64 (s, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 514 [M+H]⁺。

全般的手順IIによる実施例167の調製（方法B）：

ステップG: 6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(1-メチル-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン (方法B)

DMF(5mL)中の6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(70mg、0.19mmol、1.0当量)の懸濁液に、1-メチル-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-イルボロン酸(33.4mg、0.23mmol、1.2当量)、Cu(OAc)₂(34.5mg、0.19mmol、1.0当量)およびピリジン（30.0mg、0.38mmol、2.0当量）を添加した。混合物を、空気雰囲気下で50℃で一晩攪拌した後、反応混合物を、H₂O(10mL)を添加してクエンチし、EtOAc(10mL×3)で抽出した。合わせた有機層を、無水Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、残渣を分取HPLCにより精製して、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(1-メチル-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例167)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.34 (s, 1H), 8.06 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.79 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.47 (dd, J = 8.6 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.35 (t, J_HF = 72.0 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.07 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.41 (tt, J_HF = 54.4 Hz, 3.3 Hz, 1H), 4.60 (td, J_HF = 15.1 Hz, 3.3 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 500 [M+H]⁺。

全般的手順IIによる実施例321の調製（方法C）：

ステップH: 2-ベンジル-4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-6-((エチル-d₅)アミノ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

DMF(2mL)中の2-ベンジル-4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(250mg、0.66mmol、1.0当量)の溶液に、BOP(436mg、0.99mmol、1.5当量)およびDIEA(584μL、3.29mmol、5.0当量)を加え、反応混合物を室温で1時間攪拌し、次いでエチルアミン-d₅塩酸塩（86mg、0.99mmol、1.5当量)を加え、得られた混合物を室温でさらに0.5時間撹拌した。完了後、反応物を、氷水(10mL)を加えることによりクエンチし、EtOAc(10ml×3)で抽出し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色固体として4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-6-((エチル-d₅)アミノ)ピリドピリダジン-3(2H)-オン(234mg、86%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 413 [M+H]⁺。

ステップI:4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-6-((エチル-d₅)アミノ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

THF/DMF(2mL、1/1)中の2-ベンジル-4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-6-((エチル-d₅)アミノ)ピリドピリダジン-3(2H)-オン(185mg、0.45mmol、1.0当量)の溶液に、t-BuOK(251mg、2.25mmol、5.0当量)を添加し、反応混合物を、70℃で8時間攪拌した。完了後、pHを1NのHCl(水溶液)を加えることによって約7に調整し、次いで混合物をDCM(10mL×3)で抽出した。合わせた有機層を、塩水(20mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィーで精製して、黄色固体として4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-6-((エチル-d₅)アミノ)ピリドピリダジン-3(2H)-オン(50mg)を得た。LC-MS (ESI): m/z 323 [M+H]⁺。

ステップJ:4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-6-((エチル-d₅)アミノ)-2-(2-(メチル-d₃)-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

ACN(1mL)中の4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-6-((エチル-d₅)アミノ)ピリドピリダジン-3(2H)-オン(50mg、0.16mmol、1.0当量)および5-ブロモ-2-(メチル-d₃)-2H-インダゾール(50mg、0.23mmol、1.5当量)の溶液に、CuI (30mg、0.16mmol、1.0当量)、CsF (47mg、0.31mmol、2.0当量)、N1,N2-ジメチルクロロヘキサン-1,2-ジアミン(22mg、0.16mmol、1.0当量)を添加し、反応混合物を85℃で14時間撹拌した。完了後、反応混合物を、H₂O（5mL）で希釈し、EtOAc（10mL×3）で抽出した。合わせた有機層を、塩水(20mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、残渣をRP分取HPLCにより精製して、4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-6-((エチル-d₅)アミノ)-2-(2-(メチル-d₃)-2H-インダゾール-5-イル)ピリドピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例321)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 9.06 (s, 1H), 8.46 (d, J = 2.6 Hz, 2H), 8.39 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 11.5, 9.4 Hz, 2H), 7.42 (dd, J = 9.2, 1.9 Hz, 1H), 6.99 (t, J = 55.1 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 9.6 Hz, 1H).

LC-MS (ESI): m/z 456 [M+H]⁺。

全般的手順IIaによる実施例322の調製（方法C）：

ステップA:5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロ-2-(4-メトキシベンジル)ピリダジン-3(2H)-オン

DMF(20mL)中の5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロピリダジン-3(2H)-オン(2.0g、8.91mmol、1.0当量)およびK₂CO₃(2.5g、17.8mmol、2.0当量)の溶液に、PMBCl(1.3mL、9.8mmol、1.1当量)を加え、反応混合物を、80℃で14時間攪拌した。完了後、反応混合物を、水(50mL)で希釈し、EtOAc(50mL×3)で抽出し、合わせた有機層を、塩水(50mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、白色固体として5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロ-2-(4-メトキシベンジル)ピリダジン-3(2H)-オン(2.0g、45%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 344 [M+H]⁺。

ステップB: エチル(E)-3-(4-アミノ-5-クロロ-1-(4-メトキシベンジル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-イル)アクリレート

DMF(20mL)中の5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロ-2-(4-メトキシベンジル)ピリダジン-3(2H)-オン(2.0g、5.8mmol、1.0当量)、K₂CO₃(2.0g、14.5mmol、2.5当量)、およびエチル(E)-3-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)アクリレート(1.44g、6.4mmol、1.1当量)の溶液に、Pd(dppf)Cl₂ (0.43g、0.6mmol、0.1当量)を添加し、反応混合物をN₂雰囲気下で100℃で5時間撹拌した。反応混合物を、H₂O(30mL)で希釈し、EtOAc(50mL×3)で抽出し、合わせた有機層を、塩水(40mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーで精製して、褐色固体としてエチル(E)-3-(4-アミノ-5-クロロ-1-(4-メトキシベンジル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-イル)アクリレート(1.4g、53%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 364 [M+H]⁺。

ステップC:4-クロロ-2-(4-メトキシベンジル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン

EtOH(20mL)中のエチル(E)-3-(4-アミノ-5-クロロ-1-(4-メトキシベンジル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-イル)アクリレート(1.4g、3.85mmol、1.0当量)の攪拌溶液に、K₂CO₃(1.6g、11.54mmol、3.0当量)を加え、反応混合物を、80℃で14時間攪拌した。反応混合物を、水(30mL)で希釈し、EtOAc(30mL×3)で抽出し、合わせた有機層をNa₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗4-クロロ-2-(4-メトキシベンジル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(0.6g、粗製物) を褐色固体として得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。LC-MS (ESI): m/z 318 [M+H]⁺。

ステップD:4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-2-(4-メトキシベンジル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン

1,4-ジオキサン/H₂O混合物(8mL、10/1、v/v)中の4-クロロ-2-(4-メトシキベンジル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(0.2g、0.63mmol、1.0当量)、2-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン(152mg、0.88mmol、1.4当量)、K₂CO₃(217mg、1.57mmol、2.5当量)、およびX-Phos(33mg、0.06mmol、0.1当量)の溶液に、Pd(OAc)₂ (15mg、0.06mmol、0.1当量)を添加し、反応混合物を、N₂雰囲気下で、110℃で一晩攪拌した。完了後、反応混合物を、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーにより精製して、白色固体として4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-2-(4-メトキシベンジル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(120mg、46%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 411 [M+H]⁺。

ステップE: 4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-2-(4-メトキシベンジル)-6-((2,2,2-トリフルオロエチル)アミノ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

DMF(2mL)中の4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-2-(4-メトキシベンジル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(100mg、0.24mmol、1.0当量)の溶液に、BOP(180mg、0.36mmol、1.5当量)およびDIEA(157mg、1.22mmol、5.0当量)を加え、反応混合物を室温で1時間攪拌し、次いで2,2,2-トリフルオロエタン-1-アミン（36mg、0.36mmol、1.5当量)を加え、得られた混合物を室温でさらに0.5時間撹拌した。完了後、反応物を、氷水(10mL)を加えることによりクエンチし、EtOAc(10ml×3)で抽出し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色固体として4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-2-(4-メトキシベンジル)-6-((2,2,2-トリフルオロエチル)アミノ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(80mg、67%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 492 [M+H]⁺。

ステップF: 4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-6-((2,2,2-トリフルオロエチル)アミノ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

TFA(2mL)中の4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-2-(4-メトキシベンジル)-6-((2,2,2-トリフルオロエチル)アミノ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(80mg、0.16mmol、1.0当量)の溶液に、TfOH(142μL、1.6mmol、10.0当量)およびEt₃SiH(128μL、0.8mmol、5.0当量）を加え、反応混合物を室温で2時間攪拌した。完了後、反応物を、10mLのNaHCO₃(飽和水溶液)でクエンチし、EtOAc(10mL×3)で抽出した。合わせた有機層を塩水（20mL）で洗浄し、NA₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、黄色固体として4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-6-((2,2,2-トリフルオロエチル)アミノ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン（40mg、66%）を得た。LC-MS (ESI): m/z 372 [M+H]⁺。

ステップG: 4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-2-(4-(メトキシ-d₃)フェニル)-6-((2,2,2-トリフルオロエチル)アミノ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン (実施例322)

4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-2-(4-(メトキシ-d₃)フェニル)-6-((2,2,2-トリフルオロエチル)アミノ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン (実施例322) は、全般的手順II (方法C、ステップJ)による、4-(6-(ジフルオロメチル)ピリジン-3-イル)-6-((2,2,2-トリフルオロエチル)アミノ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン& 1-ブロモ-4-(メトキシ-d₃)ベンゼンから合成された。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.98 (s, 1H), 8.93 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.30 (dd, J = 8.0 Hz, 1.6 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.59-7.53 (m, 2H), 7.09-7.04 (m, 2H), 7.00 (t, J_HF = 56.0 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 4.23-4.15 (m, 2H).

LC-MS (ESI): m/z 481 [M+H]⁺。

全般的手順II（方法A）に関して上記に記載した手順を使用して、適切な出発材料を使用して、以下の化合物を合成した：

全般的手順II（方法B）に関して上記に記載した手順を使用して、適切な出発材料を使用して、以下の化合物を合成した：

全般的手順II（方法C）に関して上記に記載した手順を使用して、適切な出発材料を使用して、以下の化合物を合成した：

全般的手順III：

構造3.6の化合物を、全般的手順IIIとして示されるスキームを通して得た。置換ピリダジノン3.1(全般的手順I(ステップA～B)により合成)から開始して、所望のR₄基を、Suzukiクロスカップリングを使用して導入し、ビニル化合物3.2を生成した。次いで、3.2における二重結合を酸化して、カルボニル3.3を得た。所望のR₂基を、Suzukiクロスカップリングを使用して導入し、化合物3.4を生成した。所望のR₅基を、ホーナー・ワズワース・エモンズ反応を使用して導入し、タンデムの分子内環化の後に二環式複素環3.5が生成された。最後に、アルキル化反応を通して所望のR₁基を導入し、構造3.6の化合物を得た。

全般的手順IIIによる実施例194の調製：

ステップA:5-アミノ-4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-ビニルピリダジン-3(2H)-オン

ジオキサン/EtOH（48mL、3/1、v/v）中の5-アミノ-6-ブロモ-4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリダジン-3(2H)-オン(2g、5.67mmol、1.0当量、全般的手順I、(ステップA～B))、4,4,5,5-テトラメチル-2-ビニル-1,3,2-ジオキサボロラン(1.738g、11.34mmol、2.0当量)、Pd(dppf)Cl₂(0.826g、1.13mmol、0.2当量）、K₂CO₃(2.336g、16.99mmol、3.0当量)の溶液を、N₂雰囲気下で、80℃で16時間攪拌した。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色固体として5-アミノ-4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-ビニルピリダジン-3(2H)-オン(1.02g、収率60%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 302 [M+H]⁺。

ステップB:4-アミノ-5-クロロ-1-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-カルバルデヒド

THF/H₂O(20mL、3:1)中の5-アミノ-4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-ビニルピリダジン-3(2H)-オン(1.6g、5.3mmol、1.0当量)、NaIO₄(3.4g、15.9mmol、3.0当量)、およびK₂OsO₄-2H₂O(98mg、0.26mmol、0.05当量)の溶液を、室温で3時間攪拌し、得られた混合物を濾過して、DCM (50mLx3)で抽出した。濾液を塩水（30mL）で洗浄し、合わせた有機層をNa₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗残渣を、シリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、白色固体として4-アミノ-5-クロロ-1-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-カルバルデヒド(1g、収率62%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 304 [M+H]⁺。

ステップC:4-アミノ-5-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-1-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-カルバルデヒド

ジオキサン/H₂O (11mL、10/1、v/v)中の4-アミノ-5-クロロ-1-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-カルバルデヒド(650mg、2.15mmol、1.0当量)、2-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン(934mg、3.46mmol、1.6当量)、Pd(OAc)₂(52mg、0.215mmol、0.1当量)、X-Phos (205mg、0.43mmol、0.2当量)、K₂CO₃ (594mg、4.3mmol、2.0当量) の溶液を、N₂雰囲気下で、110℃で3時間攪拌した。H₂Oを加え、得られた混合物をEtOAc(30mL×3)で抽出し、合わせた有機層をNa₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色固体として4-アミノ-5-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-1-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-カルバルデヒド(650mg、収率69%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 412 [M+H]⁺。

ステップD:4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-7-フルオロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン

MeCN(5mL)中の4-アミノ-5-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-1-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-カルバルデヒド(150mg、0.36mmol、1.0当量)および2-(ジエトキシホスホリル)-2-フルオロ酢酸エチル(132mg、0.55mmol、1.5当量)の懸濁液に、NaH(鉱油中で30%の懸濁、175mg、2.19mmol、6.0当量）を、N₂雰囲気下で、0℃で数回に分けて加えた。室温で一晩攪拌した後、得られた混合物を、氷冷したNH₄Cl(飽和水溶液) (10mL)に注ぎ、次いでEtOAc(10mL×3)で抽出し、合わせた有機層を、塩水(20mL)で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥させ、減圧下で濃縮し、残渣を、シリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体として4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-7-フルオロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(120mg、収率73%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 454 [M+H]⁺。

6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-7-フルオロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン (実施例194) は、全般的手順I (ステップF)に記載されているのと同様の手順により、4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-7-フルオロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオンおよび2,2-ジフルオロエチルトリフルオロメタンスルホネートから合成された。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.56 (s, 1H), 8.10 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.77 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 9.2 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.41 (t, J_HF = 74.0 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 6.50 (tt, J_HF = 54.0 Hz, 3.2 Hz, 1H), 4.71 (td, J_HF = 15.2 Hz, J = 3.2 Hz, 2H), 4.28 (s, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 518 [M+H]⁺。

全般的手順IIIに関して上記に記載した手順を使用して、適切な出発材料を使用して、以下の化合物を合成した：

4-(4-ブロモフェニル)-6-エトキシ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成(実施例198)

ステップA:4-(4-アミノフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン

TFA/DCM (1mL/5mL)中のtert-ブチル(4-(2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3,6-ジオキソ-2,3,5,6-テトラヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-4-イル)フェニル)カルバマート (全般的手順I (方法A、ステップE)により4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン & (4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)フェニル)ボロン酸から合成) (180mg、0.372mmol)の溶液を、室温で1時間攪拌した。反応混合物を、EtOAc(20mL×3)で抽出した。合わせた有機層を塩水（20mL）で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、黄色固体として4-(4-アミノフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン（116mg、収率79%）を得た。LC-MS (ESI): m/z 385 [M+H]⁺。

ステップB:4-(4-ブロモフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン

ACN(10mL)中の4-(4-アミノフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン(200mg、0.52mmol、1.0当量)およびCuBr(299mg、2.08mmol、4.0当量)の溶液に、tert-ブチル亜硝酸塩（215mg、2.08mmol、4.0当量)を、0℃で10分かけて滴下して加えた。反応混合物を、室温で4時間攪拌した。得られた混合物をNa₂SO₃（飽和水溶液)(20mL）でクエンチし、EtOAc（10mL×3）で抽出した。合わせた有機層を塩水（20mL）で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、黄色固体として4-(4-ブロモフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン（70mg、収率30%）を得た。LC-MS (ESI): m/z 448 [M+H]⁺。

ステップC:

4-(4-ブロモフェニル)-6-エトキシ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(実施例198)を、全般的手順I(方法A、ステップF)により、4-(4-ブロモフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン&ヨードエタンから合成した。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.49 (s, 1H), 8.00 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.70 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.45 (dd, J = 8.8 Hz, 1.6 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.22 (s, 3H), 1.32 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 476, 478 [M+H]⁺。

4-(4-ブロモフェニル)-6-イソプロポキシ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成(実施例199)

4-(4-ブロモフェニル)-6-イソプロポキシ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(実施例199)を、全般的手順I(方法A、ステッF)により、4-(4-ブロモフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン＆2-ヨードプロパンから合成した。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.49 (s, 1H), 8.00 (dd, J = 2.0 Hz, 0.8 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.74-7.68 (m, 3H), 7.64 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.45 (dd, J = 9.1 Hz, 2.0 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 5.15 (hept, J = 6.2 Hz, 1H), 4.22 (s, 3H), 1.30 (d, J = 6.2 Hz, 6H).

LC-MS (ESI): m/z 490, 492 [M+H]⁺.

4-(4-ブロモフェニル)-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成(実施例200)

4-(4-ブロモフェニル)-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(実施例200)を、全般的手順I（方法A、ステップF）により、4-(4-ブロモフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン＆2,2-ジフルオロエチルトリフルオロメタンスルホネートから合成した。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.51 (s, 1H), 8.07 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.47 (dd, J = 9.2 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.41 (tt, J_HF = 54.4 Hz, 3.2 Hz, 1H), 4.59 (td, J_HF = 15.2 Hz, J = 3.2 Hz, 2H), 4.23 (s, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 512, 514 [M+H]⁺.

2-(ベンゾ[d]チアゾール-6-イル)-4-(4-ブロモフェニル)-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成 (実施例201)

実施例198に記載されるものと類似した手順に従った。2-(ベンゾ[d]チアゾール-6-イル)-4-(4-ブロモフェニル)-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(実施例201)を、ステップA～B（実施例198）により、tert-ブチル(4-(2-(ベンゾ[d]チアゾール-6-イル)-3,6-ジオキソ-2,3,5,6-テトラヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-4-イル)フェニル)カルバメートから、および全般的手順I(方法A、ステップF)により、2,2-ジフルオロエチルトリフルオロメタンスルホネートから合成した。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 9.53 (s, 1H), 8.54 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 8.7 Hz, 2.1 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.66 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.09 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.41 (tt, J_HF = 54.4, 3.4 Hz, 1H), 4.60 (td, J = 15.2, 3.4 Hz, 2H).

LC-MS (ESI): m/z 515, 517 [M+H]⁺。

2-(ベンゾ[d]チアゾール-6-イル)-4-(4-ブロモフェニル)-6-イソプロポキシピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成 (実施例202)

2-(ベンゾ[d]チアゾール-6-イル)-4-(4-ブロモフェニル)-6-イソプロポキシピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(実施例202)を、全般的手順I(方法A、ステッF)により、2-(ベンゾ[d]チアゾール-6-イル)-4-(4-ブロモフェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオンおよび2-ヨードプロパンから合成した。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 9.53 (s, 1H), 8.52 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 8.7, 2.1 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.65 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.93 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 5.16 (hept, J = 6.4 Hz, 1H), 1.31 (d, J = 6.4 Hz, 6H).

LC-MS (ESI): m/z 493, 495 [M+H]⁺。

6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(3-(ジメチルアミノ)-2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン（実施例203）＆4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-6-(ジメチルアミノ)-2-(3-(ジメチルアミノ)-2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン（実施例204）

ステップA: 2-(3-ブロモ-2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

ACN(4mL)中の6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(実施例125)(200mg、0.4mmol、1.0当量)の懸濁液に、NBS(75mg、0.42mmol、1.05当量)を添加した。次いで反応物を、80℃で3時間攪拌した。反応物を減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーで直接精製して、黄色固体として2-(3-ブロモ-2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(160mg、収率69%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 578; 580 [M+H]⁺。

ステップB:6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(3-(ジメチルアミノ)-2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン＆4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-6-(ジメチルアミノ)-2-(3-(ジメチルアミノ)-2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

トルエン(3mL)中の2-(3-ブロモ-2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(160mg、0.28mmol、1.0当量)の懸濁液に、Cs₂CO₃(90mg、0.28mmol、1.0当量)、Pd₂(dba)₃ (25mg、0.028mmol、0.10 当量)、Ru-Phos (26mg、0.055mmol、0.2 当量) およびジメチルアミン (THF中に2 M) (1.4mL、2.8mmol、10.0当量)を添加した。次いで、反応物を耐圧チューブに密封し、N₂雰囲気下で、100℃で5時間攪拌した。反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーおよびRP分取HPLCにより精製して、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(3-(ジメチルアミノ)-2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(実施例203)および4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-6-(ジメチルアミノ)-2-(3-(ジメチルアミノ)-2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例204)。

実施例203：

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.11 (s, 1H), 8.08 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.55 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 7.35 (t, J_HF = 74.0 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.06 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 6.41 (tt, J_HF = 54.4 Hz, J = 3.3 Hz, 1H), 4.59 (td, J_HF = 15.1 Hz, J = 3.3 Hz, 2H), 3.99 (s, 3H), 2.97 (s, 6H).

LC-MS (ESI): m/z 543 [M+H]⁺.

実施例204：

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.04 (dd, J = 2.0, 0.8 Hz, 1H), 7.93-7.84 (m, 2H), 7.76 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 9.1, 0.8 Hz, 1H), 7.33 (dd, J = 9.2, 2.0 Hz, 1H), 7.31 (t, J_HF = 74.2, 1H), 7.27 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 7.22-7.16 (m, 2H), 3.99 (s, 3H), 3.23 (s, 3H), 3.17 (s, 3H), 2.96 (s, 6H).

LC-MS (ESI): m/z 506 [M+H]⁺。

4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-プロピルピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成(実施例205)

THF(5mL)およびNMP(1mL)中の6-クロロ-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(全般的手順I(方法C、ステップE、G）により、4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン＆2-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロランから合成)(120mg、0.26mmol、1.0当量) およびFe(acac)₃(93mg、0.26mmol、1.0当量) の混合物に、n-プロピルマグネシウム臭化物(ジエチルエーテル中に1M)(4.0mL、4.0mmol、15.4当量)を、N₂雰囲気下で、0℃で滴下して加えた。反応混合物を、室温で一晩攪拌し、氷水(10mL)で注意深くクエンチした。粗混合物を、EtOAc(10mL×3)で抽出した。合わせた有機層を、塩水(20mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗残渣を、RP分取HPLCにより精製して、4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-6-プロピルピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例205)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.51 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.99 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.35 (t, J_HF = 72.0 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 4.23 (s, 3H), 2.78 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.82-1.61 (m, 2H), 0.94 (t, J = 7.4 Hz, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 462 [M+H]⁺。

4-シクロヘキシル-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成(実施例206)

ステップA: 4-クロロ-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

DMF (8mL) 中の4,6-ジクロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(300mg、0.87mmol、1.0当量、全般的手順I(方法A、ステップA～D)により合成）、2,2-ジフルオロエチルトリフルオロメタンスルホネート(278mg、1.3mmol、1.49当量)、およびCs₂CO₃(565mg、1.7mmol、1.95当量)の混合物を、室温で3時間攪拌し、氷水（10mL）でクエンチした。粗混合物を、EtOAc(10mL×3)で抽出した。合わせた有機層を、塩水(20mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥しさせ、減圧下で濃縮した。粗残渣を、シリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色固体として4-クロロ-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(250mg、収率74%)を得た。 LC-MS (ESI): m/z 392 [M+H]⁺。

ステップB: 4-シクロヘキシル-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

4-クロロ-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-2H,3H-ピリド[3,2-c]ピリダジン-3-オン(100mg、0.26mmol、1.0当量)、Fe(acac)₃(90mg、0.26mmol、1.0当量)、およびNMP/THF混合物 (0.5mL/5mL) を、N₂雰囲気下で、0℃で攪拌した。臭化シクロヘキシルマグネシウム（ジエチルエーテル中に1M）(2.6mL、2.6mmol、10.0 当量) を、0℃で滴下して加えた。次いで、混合物を室温まで加温し、一晩攪拌し、反応物をTLCによって監視し、完了後、反応物を、氷水(10mL)でクエンチし、粗混合物を、EtOAc(10mL×3)で抽出し、合わせた有機層を、塩水(30mL)で洗浄し、 Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、粗残渣を、RP分取HPLCにより精製して、4-シクロヘキシル-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例206)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm) 8.48 (s, 1H), 7.99-7.92 (m, 2H), 7.69 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 9.1, 2.0 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.50 (t, J_HF = 54.2 Hz, 1H), 4.79 (td, J_HF = 15.1, 3.2 Hz, 2H), 4.22 (s, 3H), 2.36-2.32 (m, 1H), 1.88-1.69 (m, 4H), 1.63-1.55 (m, 2H), 1.43-1.19 (m, 4H).

LC-MS (ESI): m/z 439 [M+H]⁺.

6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-ヒドロキシフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成(実施例207)

ジオキサン/水の混合物（5mL、10/1、v/v）中の4-クロロ-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(100mg、0.25mmol、1.0当量)、Pd(OAc)₂(12mg、0.05mmol、0.2当量)、K₂CO₃(105mg、0.75mmol、3.0当量)、および(4-ヒドロキシフェニル)ボロン酸(53mg、0.38mmol）の混合物を、N₂雰囲気下で、100℃で攪拌した。次いで、反応混合物を、氷水（10mL）中に注いで、EtOAc（10mL×3）で抽出した。合わせた有機層を、塩水（20mL）で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗残渣を、RP分取HPLCにより精製して、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-ヒドロキシフェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例207)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.49 (s, 1H), 8.04-7.97 (m, 2H), 7.77-7.62 (m, 3H), 7.44 (dd, J = 9.1, 1.9 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.42 (tt, J_HF = 54.5, 3.5 Hz, 1H), 4.61 (td, J = 15.0, 3.5 Hz, 2H), 4.22 (s, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 450 [M+H]⁺.

6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(3-エチル-2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成（実施例208）

ステップA:1-(5-ブロモ-2-メチル-2H-インダゾール-3-イル)エタノール

THF(10mL)中の5-ブロモ-2-メチル-2H-インダゾール(500mg、2.37mmol、1当量)の溶液に、n-BuLi(ヘキサン中に2.5M)(4.7mL、11.85mmol、5当量)を、N₂雰囲気下で、-65℃で滴下して加えた。3時間後、アセトアルデヒド(THF中5M)(0.6mL、3.0mmol、1.27当量)を添加した。次いで反応物を、徐々に室温に加温し、16時間攪拌した。次いで、反応混合物を、飽和 NH₄Cl水溶液（10mL）に注ぎ、EtOAc（10mL×3）で抽出した。合わせた有機層を、塩水（20mL）で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗残渣をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製し、黄色固体として1-(5-ブロモ-2-メチル-2H-インダゾール-3-イル)エタノール（500mg、収率83%）を得た。LC-MS (ESI): m/z 255, 257 [M+H]⁺。

ステップB:5-ブロモ-3-エチル-2-メチル-2H-インダゾール

DCM(5mL)中の1-(5-ブロモ-2-メチル-2H-インダゾール-3-イル)エタノール(200mg、0.78mmol、1当量)、トリエチルシラン(453mg、3.9mmol、5当量)、TFA(889mg、7.8mmol、10当量)の混合物を、40℃で16時間攪拌した。次いで、混合物を、飽和 NaHCO₃水溶液(10mL)に0℃で注ぎ、DCM(10mL×3)で抽出した。合わせた有機層を、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗残渣をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製し、黄色固体として5-ブロモ-3-エチル-2-メチル-2H-インダゾール（80mg、収率43%）を得た。LC-MS (ESI): m/z 239, 241 [M+H]⁺。

6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(3-エチル-2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(実施例208)を、手順II（方法A、ステップG）により、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンおよび5-ブロモ-3-エチル-2-メチル-2H-インダゾールから合成した。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.13 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.07 (dd, J = 2.0 Hz, 0.8 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.68 (dd, J = 9.2 Hz, 0.8 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 8.8 Hz, 1.6 Hz, 1H), 7.41 (t, J_HF = 74.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.47 (tt, J_HF = 54.4 Hz, 3.2 Hz, 1H), 4.65 (td, J_HF = 15.2 Hz, 3.2 Hz, 2H), 4.20 (s, 3H), 3.17 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.33 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 528 [M+H]⁺.

6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-8-(ヒドロキシメチル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン（実施例209）および6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-8-(ジフルオロメチル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成（実施例210）

ステップA: 6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-8-(ヒドロキシメチル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

ジオキサン中(3mL)の6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-8(((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)メチル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(実施例142、全般的手順I(方法A、ステップE～F)により、(E)-メチル4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-3-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)ブタ-2-エノエート(参考: Tetrahedron 2012, 68, 3444-3449)から合成）(180mg、0.3mmol、1.0当量) の溶液に、1N HCl(水溶液) (1mL、1mmol、3.3当量)を室温で添加した。得られた混合物を、室温で2時間攪拌した。次いで反応物を、氷水(20mL)でクエンチし、EtOAc(20mL×3)で抽出した。合わせた有機層を、塩水(20mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-8-(ヒドロキシメチル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例209)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.50 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.84 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.70 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.34 (t, J_HF = 74.0 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.94 (s, 1H), 6.39 (tt, J_HF = 54.4 Hz, 3.2 Hz, 1H), 5.63 (s, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.58 (td, J_HF = 15.2 Hz, 3.2 Hz, 2H), 4.22 (s, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 530 [M+H]⁺。

ステップB: 6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-8-カルバルデヒド

CHCl₃(5mL)中の6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-8-(ヒドロキシメチル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(60mg、0.1mmol、1.0当量)の溶液に、新たに活性化されたMnO₂(96mg、1.0mmol、10.0当量)を一度に加えた。次いで、得られた混合物を、室温で16時間攪拌した。反応の進行をTLCにより監視し、完了後、反応混合物を、Celite(登録商標)の短いパッドを通して濾過し、濾液を減圧下で濃縮して、黄色固体として粗6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-8-カルバルデヒド(50mg)を得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。

LC-MS: m/z 528 [M+H]⁺。

ステップC: 6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-8-(ジフルオロメチル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

DCM(3mL)中の6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-8-カルバルデヒド(50mg、粗製物)の溶液に、DAST(46mg)を-60℃で加えた。加えた後、室温に自然昇温させ、さらに16時間攪拌した。反応が完了した後、氷水(10mL)を加え、EtOAc(10mL×3)で抽出し、合わせた有機層を、塩水(20mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、残渣をRP分取HPLCにより精製して、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-8-(ジフルオロメチル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た（実施例210)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.53 (s, 1H), 8.08 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.73 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 9.2 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.45 (t, J_HF = 53.6 Hz, 1H), 7.36 (t, J_HF = 74.0 Hz, 1H), 7.30-7.25 (m, 3H), 6.41 (tt, J_HF = 54.4 Hz, 3.2 Hz, 1H), 4.61 (td, J_HF = 15.2 Hz, 3.2 Hz, 2H), 4.23 (s, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 550 [M+H]⁺.

6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-8((ジメチルアミノ)メチル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成(実施例211)

ステップA:(6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-8-イル)メチルメタンスルホネート

DCM(3mL)中の6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-8-(ヒドロキシメチル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(90mg、0.17mmol、1.0当量、実施例209)の溶液に、MsCl(29mg、0.25mmol、1.47当量)およびTEA(34mg、0.34mmol、2.0当量)を、室温で添加した。反応混合物を、室温で2時間攪拌した。次いで、反応混合物を、氷水（10mL）中に注いで、EtOAc（10mL×3）で抽出した。合わせた有機層を、塩水(20mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色固体として(6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-8-イル)メチルメタンスルホネート(90mg、収率87%)を得た。LC-MS: m/z 608 [M+H]⁺。

ステップB: 6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-8-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

DMSO(3mL)中の(6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-8-イル)メチルメタンスルホネート(50mg、0.08mmol、1.0当量)の溶液に、NH(Me)₂ HCl塩(33mg、0.41mmol、5.1当量)、Nal(23mg、0.16mmol、2.0当量)、およびNaHCO₃(14mg、0.16mmol、2.0当量)を室温で加えた。反応混合物を、80℃で2時間攪拌した。次いで、反応混合物を、氷水（10mL）中に注いで、EtOAc（10mL×3）で抽出した。合わせた有機層を、塩水（20mL）で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗残渣を、RP分取HPLCにより精製して、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-8((ジメチルアミノ)メチル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例211)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm) 8.52 (s, 1H), 8.05 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.72 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 9.2, 2.0 Hz, 1H), 7.36 (t, J_HF = 74.0 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.96 (s, 1H), 6.40 (tt, J_HF= 54.4, 3.4 Hz, 1H), 4.23 (s, 3H), 3.77 (s, 2H), 2.29 (s, 6H).

LC-MS (ESI): m/z 557 [M+H]⁺.

8-アミノ-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成 (実施例212)

ステップA:6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-8-カルボン酸

H₂O(0.5mL)中の6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-8-カルバルデヒド(120mg、0.23mmol、1.0当量、実施例210ステップBのように合成）およびHCO₂H(0.1mL、2.65mmol、11.5当量)の混合物に、H₂O₂(H₂O中に30重量%、0.1mL、1.14mmol、5当量）を4℃でゆっくりと添加した。混合物を、室温で6時間攪拌した。次いで混合物を、H₂O（10mL）中に注いで、ETOAC（10mL×3）で抽出した。合わせた有機層を、塩水(20mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色固体として(6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-8-カルボン酸(80mg、収率52%)を得た。LC-MS (ESI): m/z 544 [M+H]⁺。

ステップB: 8-アミノ-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

DMF(2mL)中の6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-8-カルボン酸(80mg、0.15mmol、1.5当量)の溶液に、TEA(22mg、0.22mmol、1.45当量)およびDPPA(61mg、0.22mmol、1.45当量)を加えた。混合物を、室温で3時間攪拌した。次いで、0.3mLの水が溶液に加えられ、反応混合物を、100℃で一晩攪拌した。反応物を室温まで冷却し、H₂O(10mL)中に注いで、EtOAc(10mL×3)で抽出した。合わせた有機層を、塩水(20mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗残渣をRP分取TLCにより精製して、8-アミノ-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例212)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.49 (s, 1H), 8.05 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.69 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 9.2 Hz, 1.6 Hz, 1H), 7.32 (t, J_HF = 74.0 Hz, 1H), 7.23-7.14 (m, 4H), 6.31 (tt, J_HF = 54.0 Hz, 3.6 Hz, 1H), 5.83 (s, 1H), 4.47 (td, J = 14.8 Hz, 3.6 Hz, 2H), 4.22 (s, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 515 [M+H]⁺.

6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-4-((トリメチルシリル)エチニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン（実施例213）、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-エチニル-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン（実施例214）＆4-((1H-ピラゾール-3-イル)エチニル)-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成（実施例215）

ステップA: 6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-4-((トリメチルシリル)エチニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

ジオキサン(5mL)中の 4-クロロ-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(180mg、0.46mmol、1.0当量、実施例206ステップAのように合成)、トリメチル((トリブチルスタンニル)エチニル)シラン(268mg、0.69mmol、1.5当量)、およびPd(PPh₃)₄(58mg、0.05mmol、0.11 当量)の混合物を、N₂雰囲気下で、80℃で15時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、粗残渣をシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-4-((トリメチルシリル)エチニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た（実施例213）。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.50 (s, 1H), 8.08 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.41 (dd, J = 9.2 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.54 (tt, J_HF = 54.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 4.82 (td, J_HF = 14.4 Hz, 3.6 Hz, 2H), 4.22 (s, 3H), 0.28 (s, 9H).

LC-MS (ESI): m/z 454 [M+H]⁺.

ステップB:6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-エチニル-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

2,2-ジフルオロエタン-1-オール(4mL)中の6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-4-((トリメチルシリル)エチニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(126mg、0.28mmol、1.0当量)およびCs₂CO₃(183mg、0.56mmol、2.0当量)の混合物を、室温で4時間撹拌した。得られた混合物を、H₂O（10mL）中に注いで、EtOAc（10mL×3）で抽出した。合わせた有機層を、塩水（20mL）で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗残渣を、シリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-エチニル-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例214)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.51 (s, 1H), 8.08 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.41 (dd, J = 9.2 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.52 (tt, J_HF = 54.4 Hz, 3.2 Hz, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.83 (td, J_HF = 14.8 Hz, 3.2 Hz, 2H), 4.23 (s, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 382 [M+H]⁺.

ステップC:4-((1H-ピラゾール-3-イル)エチニル)-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン

DMF (5mL)中の6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-エチニル-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2 2H)-オン(50mg、0.13mmol、1.0当量)、DIPEA(50mg、0.39mmol、3.0当量)、Pd(PPh₃)₂Cl₂(10mg、0.013mmol、0.1当量)、および3-ヨード-1H-ピラゾール(101mg、0.52mmol、4.0当量)およびCuI(25mg、0.13mmol、1.0当量) の混合物を、N₂雰囲気下で、室温で4時間攪拌した。次いで反応混合物を、H₂O（10mL）中に注いで、EtOAc（10mL×3）で抽出した。合わせた有機層を、塩水（20mL）で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗残渣を、RP分取HPLCにより精製して、4-((1H-ピラゾール-3-イル)エチニル)-6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例215)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 13.39 (br, s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.09 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.91-7.81 (m, 1H), 7.72 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 9.2 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 9.2Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.55 (tt, J_HF = 54.4 Hz, 3.2 Hz, 1H), 4.88 (td, J_HF = 14.8 Hz, 3.2 Hz, 2H), 4.23 (s, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 448 [M+H]⁺.

6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(4-オキソシクロヘキシル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成 (実施例216)

THF(1.5mL)中の6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(1,4-ジオキサスピロ[4.5]デス-7-エン-8-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン(全般的手順II（方法A、ステップG）により、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン＆1,4-ジオキサスピロ[4.5]デス-7-エン-8-イルトリフルオロメタンスルホネートから合成）(10mg、0.0197mmol) および濃縮 HCl(0.1mL)の溶液を、室温で2時間攪拌した。反応物を、飽和 NaHCO₃水溶液(5mL)に注ぎ、EA(5mL×3)で抽出した。合わせた有機層を、塩水（20mL）で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。次いで、トルエン(3mL)中の残渣およびRh(PPh₃)₃Cl(18mg、0.0197mmol)の混合物を、H₂雰囲気下で室温で一晩攪拌した。次いで混合物を、H₂O（5mL）中に注いで、ETOAC（5mL×3）で抽出した。合わせた有機層を、塩水（10mL）で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗残渣を、RP分取HPLCにより精製し、6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-2-(4-オキソシクロヘキシル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例216)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): 8.02 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.34 (t, J_HF = 74.0 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.02 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.37 (tt, J_HF = 54.4 Hz, 2.8 Hz, 1H), 5.62 (hept, J = 4.8 Hz, 1H), 4.54 (td, J_HF = 14.8 Hz, 2.8 Hz, 2H), 2.78-2.63 (m, 2H). 2.45-2.23 (m, 2H), 2.29-2.14 (m, 1H) (HCO₂H塩)。

LC-MS (ESI): m/z 466 [M+H]⁺.

4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-6-エトキシ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンの合成 (実施例217)

EtOH (8mL)中の6-クロロ-4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オン（全般的手順I（方法C、ステップE、G）により、4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン＆2-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロランから合成）(120mg、0.26mmol、1.0当量)およびEtONa (177mg、2.6mmol、10.0当量)の混合物を40℃で3時間攪拌した。次いで反応混合物を、氷水(10mL)中に注いで、DCM(10mL×3)で抽出した。合わせた有機層を、Na₂SO₄上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗残渣を、RP分取HPLCにより精製して、4-(4-(ジフルオロメトキシ)フェニル)-6-エトキシ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3(2H)-オンを得た(実施例217)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.49 (s, 1H), 8.04 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.70 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 9.2 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.34 (t, J_HF = 74.0, 1H), 7.24 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.95 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.34 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.22 (s, 3H), 1.32 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 464 [M+H]⁺.

5-(6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-4-イル)-1H-インドール-3-カルボニトリルの合成(実施例331)

DCM (3mL)中の7-(2,2-ジフルオロエトキシ)-3-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-1-(1-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)-1H-インダゾール-5-イル)-3,4-ジヒドロピリド[2,3-d]ピリミジン-2(1H)-オン(54mg、0.09mmol、1.0当量)(全般的手順I（方法A、ステップE＆F）により、4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン＆5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)-1H-インドール-3-カルボニトリル(参考: WO2018215316)から合成)の溶液に、TFA(1mL)を加え、反応混合物を、室温で3時間攪拌した。次いで、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をMeOH(2mL)および濃縮 NH₄OH (1mL)に再溶解し、得られた混合物を、室温で一晩攪拌した。完了後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をRP分取HPLCにより精製して、5-(6-(2,2-ジフルオロエトキシ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-4-イル)-1H-インドール-3-カルボニトリルを得た(実施例331)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ (ppm): δ 12.29 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.12 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.10-8.01 (m, 2H), 7.75 (dd, J = 8.6 Hz, 1.5 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 9.1 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.38 (tt, J_HF = 54.5 Hz, J = 3.3 Hz, 1H), 4.54 (td, J_HF = 15.0 Hz, J = 3.4 Hz, 2H), 4.22 (s, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 498 [M+H]⁺.

5-(6-(エチルアミノ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-4-イル)-1H-インドール-3-カルボニトリルの合成(実施例332)

DCM (6mL)中の5-(6-(エチルアミノ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-4-イル)-1-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)-1H-インドール-3-カルボニトリル(100mg、0.17mmol)(全般的手順I（方法A、ステップE; 方法D、ステップI）により、4-クロロ-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)ピリド[3,2-c]ピリダジン-3,6(2H,5H)-ジオン＆5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)-1H-インドール-3-カルボニトリル(参考: WO2018215316)から合成)の溶液に、TFA(6mL)を加え、反応混合物を、室温で12時間攪拌した。次いで、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をMeOH(4mL)および濃縮 NH₄OH (2mL)で再溶解し、得られた混合物を、室温でさらに6時間攪拌した。完了後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣をRP分取HPLCにより精製して、5-(6-(エチルアミノ)-2-(2-メチル-2H-インダゾール-5-イル)-3-オキソ-2,3-ジヒドロピリド[3,2-c]ピリダジン-4-イル)-1H-インドール-3-カルボニトリルを得た(実施例332)。

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) (ppm): δ 12.17 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.76 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.21 (s, 3H), 3.31 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.14 (t, J = 7.1 Hz, 3H).

LC-MS (ESI): m/z 461 [M+H]⁺.

生化学的アッセイ

Mat2Aタンパク質は、Bac-to-Bacシステムを使用してSF9感染細胞における組換えバキュロウイルスによって発現され、pFASTBAC1ベクター（Invitrogen社、カリフォルニア州カールズバッド）内にクローニングされた。組換えMAT2Aは、HP Niセファロースカラムクロマトグラフィーを使用して、150gの感染細胞のうちの細胞可溶化物から単離した。組換えMAT2Aホモ二量体を、250および500mMのイミダゾールで溶離し、MAT2Aを含有する分画をドデシル硫酸ナトリウム-ポリアクリルアミドゲル電気泳動で同定してプールした。

MAT2Aホモ二量体に対する化合物の阻害活性を求めるために、アッセイ緩衝液（50mMのTris、pH8.0、50mMのKCl、15mMのMgCl₂、0.3mMのEDTA、0.005%［w/v］ウシ血清アルブミン［BSA］）中で、タンパク質を4μg/mLに希釈した。試験化合物を、所望の最終濃度の50×で100%ジメチルスルホキシド（DMSO）中で調製した。1μL量の化合物希釈液を40μLの酵素希釈液に加え、混合物を25℃で60分間平衡化させた。酵素アッセイを、10μLの基質ミックス（1×のアッセイ緩衝液中の、500μMのATP、pH7.0、400μMのL-メチオニン）で開始して、混合物を25℃でさらに60分間インキュベートした。反応を休止して、S-アデノシルメチオニン（SAM）の産生により理論量の酵素より放出された遊離リン酸を、PiColorLock Goldキット（Innova Biosciences社、英国）を使用して測定した。絶対産生量は、リン酸カリウム緩衝液、pH8.0の標準曲線と比較して決定した。

本明細書に開示される特定の化合物を前述のアッセイで試験し、当該化合物が、MAT2Aを阻害することを、以下のスコアに従ってIC₅₀で決定された：以下の表2に示すように、（A）100nM未満（＞40%の最大阻害）、（B）100nM～1μM（＞40%の最大阻害）、および（C）1μM～10μM（＞40%の最大阻害）。

ターゲット結合（SAM）の細胞アッセイ

細胞におけるMAT2A活性の測定は、その酵素活性の産物、SAMの存在の直接定量によってなされた。適切なインキュベーション期間の間、候補MAT2A阻害剤を用いてがん細胞を処理し、その後、さらなる酵素活性をクエンチする試薬を使用して細胞を溶解した。SAMを含む可溶性代謝物を回収し、SAM自体を定量的LC-MS/MSを使用して溶解物から直接測定した。

標準的なアッセイは、MTAP遺伝子を欠失するように遺伝子操作されたHCT116ヒト大腸がん細胞株（Horizon Discovery社から市販されている）を使用して行われた。MTAP遺伝子の欠如によりMAT2A阻害剤に対する感度が予測されることがわかったという理由から、この細胞株を利用した。細胞を、適切な細胞密度で96ウェルディッシュに蒔いた。24時間後、次いで候補MAT2A阻害剤で細胞を処理した。細胞に加える前に、まず化合物を100%DMSOで段階希釈するが、典型的には、3倍段階希釈とし、DMSOのみの対照を含めて、10用量点での500倍の上位用量で開始した。次いで、DMSO中の5μLの化合物を495μLの細胞培養培地に添加することにより、細胞培養培地中のワーキングストックプレートに化合物を移した。次いで、25μLのワーキングストックを100μLの培養培地中の細胞に加えることによって、さらに5倍希釈にすることで、このワーキングストックを細胞に加えた。化合物を加えた後、細胞を37℃/5%のCO₂で72時間インキュベートした。

化合物処理後のSAMレベルを定量するために、細胞を、炭酸アンモニウム緩衝液（pH7.4で75mM）中で穏やかに一回洗浄し、ドライアイス上に置き、代謝産物抽出緩衝液（内部対照として200ng/mLの重水素化d₃-SAMを用いて、1Mの最終濃度で酢酸を含む80%冷却メタノールおよび20%水（v/v））で溶解した。4℃、3,200rpmでの30分間の遠心分離の後、上清を回収し、そしてタンデム質量分析法（LC-MS/MS）を伴う液体クロマトグラフィーによる分析がなされるまで-80℃で保存した。LC-MS/MS分析は、陽イオンスプレーモードで作動し、かつ、Waters社UPLC Acquity（Waters社、米国マサチューセッツ州ミルフォード）BEH Amideカラムを備えた、API6500質量分析計（Sciex社、米国マサチューセッツ州フレーミングハム）を用いて実行した。SAMおよびd₃-SAM標準に関して複数の反応モニタリングデータを取得したが、それぞれm/z399.2→250.1および402.2→250.1における質量遷移（mass transition）ペアを使用した。典型的なLC-MS/MS分析では、初期流量は25%移動相A（1%ギ酸および10mMの酢酸アンモニウムを含む、5：95（v/v）のアセトニトリルおよび水）および75%移動相B（1%ギ酸および10mMの酢酸アンモニウムを含む、95：5（v/v）のアセトニトリルおよび水）を0.5ml/分で、0.2～0.5分を75%～35%移動相B、25%～65%移動相Aで、0.5分を65%移動相Aおよび35%移動相Bで、1.0～1.1分を35%～75%移動相B、65%～25%移動相Aで、1.1分を25%移動相Aおよび75%移動相Bとし、総稼働時間1.5分とした。

本明細書に開示される特定の化合物を前述のアッセイで試験し、当該化合物が、SAMを阻害することを、以下のスコアに従ってIC₅₀で決定された：以下の表2に示すように、（A）100nM未満（＞60%の最大阻害）、（B）100nM～1μM（＞60%の最大阻害）、(C)1μM以上（＞60%の最大阻害）、および（NT）未試験。

細胞増殖阻害のアッセイ

がん細胞増殖に対する試験化合物の影響を、がん細胞を化合物で4日間処理して、次いで、ATPベースの細胞増殖値（Cell Titer Glo、Promega社）を使用して増殖を測定することによって評価した。

典型的なアッセイでは、MTAP欠失状態（HCT116 MTAP+/+およびHCT116 MTAP-/-）のみが異なるHCT116ヒト大腸がん細胞株のアイソジェニックな対を、適切な細胞密度で96ウェルディッシュに蒔いた。24時間後、次いで候補MAT2A阻害剤で細胞を処理した。細胞に加える前に、まず化合物を100%DMSOで段階希釈するが、典型的には、3倍段階希釈とし、DMSOのみの対照を含めて、10用量点での500倍の上位用量で開始した。次いで、DMSO中の5μLの化合物を495μLの細胞培養培地に添加することにより、細胞培養培地中のワーキングストックプレートに化合物を移した。次いで、25μLのワーキングストックを100μLの培養培地中の細胞に加えることによって、さらに5倍希釈にすることで、このワーキングストックを細胞に加えた。化合物の添加後、細胞を37℃/5%のCO2で4日間インキュベートした。

細胞増殖の阻害を測定するために、細胞を30分間室温に平衡化し、次いで125μLのCell Titer Glo試薬で処理した。次いで、プレートをアルミ箔で覆い、15分間振盪して、完全な混合および完全細胞溶解を確保した。次いで発光信号を、ATP標準曲線を使用して、プレートベースのルミノメーターVeritasバージョン1.9.2を使用して測定し、実行間でのアッセイ再現性を確認した。この発光測定は、各データ点から、バンク（無細胞）ウェルから測定したATP発光信号を減算して、ブランクウェル中のシグナルに対して調節した0.2%DMSO対照ウェルで測定したATP発光信号によって除算することによって、増殖指数に変換された。次いで、化合物の活性を、モル（M）単位の化合物濃度のlog10に対する、プレート内のDMSO対照に相対的な増殖のパーセンテージ変化として表した。

本明細書に開示される特定の化合物を前述のアッセイで試験し、当該化合物が、細胞増殖を阻害することを以下のスコアに従ってIC₅₀で決定された：以下の表2に示すように、（A）100nM未満（MTAP-/-に関して、＞30%の最大阻害；MTAP+/+に関して、＞10%の最大阻害）、（B）100nM～1μMの間（MTAP-/-に関して、＞30%の最大阻害；MTAP+/+に関して、＞10%の最大阻害）、（C）1μM以上、および（NT）未試験。

表2

Claims

以下の一般式Iに従った化合物であって、
式中、
Lは、O、S、NR、または結合であり、
Rは、HまたはC₁-C₆アルキルであり、
R¹は、C₁-C₆アルキル、C₂-C₆アルケニル、C₃-C₆カルボシクリル、-(C₁-C₆アルキル)(C₃-C₆カルボシクリル)、および-(C₁-C₆アルキル)(C₃-C₆シクロアルケニル)からなる群から
選択されるものであって、式中、
R¹の任意のアルキルは直鎖または分岐であり、
R¹は、1～6個のハロまたは1～6個の重水素によって任意に置換され、
または、LがNRである場合、Lと組み合わせたRおよびR¹は、一つまたは複数のR^Aで置換
されていてもよい3～6員のヘテロシクロアルキル（ここで、環の1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）を表し、
R²およびR³は、(C₂-C₆)アルキニル、C₆-C₁₀アリール、C₃-C₆カルボシクリル、5～10員
のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択
される）、および3～14員のヘテロシクロアルキル（ここで、ヘテロシクロアルキルの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）からなる群から独立に選択され、
式中、R²およびR³は、R^A、OR^A、ハロ、-N＝N-R^A、NR^AR^B、-(C₁-C₆アルキル)NR^AR^B、-C(O)OR^A、-C(O)NR^AR^B、-OC(O)R^A、-Si(C₁-C₆アルキル)₃、および-CNからなる群から選択さ
れる一つまたは複数の置換基によって、独立しておよび任意に置換され、
R⁴は、H、C₁-C₆アルキル(一つまたは複数のハロ、ヒドロキシ、または3～14員のヘテロシクロアルコキシ(ここで、ヘテロシクロアルコキシの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される)により任意に置換される)、-O(C₁-C_6-アルキル)(一つまたは複数のハロに
より任意に置換される)、-OH、ハロ、-CN、-(C₁-C₆アルキル）NR^AR^B、および-NR^AR^Bから
なる群から選択され、
R⁵は、H、C₁-C₆アルキル、C₁-C₆アルコキシ、C₂-C₆アルケニル、C₂-C₆アルキニル、ハ
ロ、-CN、および-NR^CR^Dからなる群から選択され、
R^AおよびR^Bは、H、-CN、-ヒドロキシ、オキソ、C₁-C₆アルキル、C₁-C₆アルコキシ、C₂-C₆アルケニル、C₂-C₆アルキニル、-NH₂、-S(O)_0-2-(C₁-C₆アルキル)、-S(O)_0-2-(C₆-C₁₀
アリール)、-C(O)(C₁-C₆アルキル)、-C(O)(C₃-C₁₄カルボシクリル)、-C₃-C₁₄カルボシク
リル、-(C₁-C₆アルキル)(C₃-C₁₄カルボシクリル)、C₆-C₁₀アリール、3～14員のヘテロシ
クロアルキル、および-(C₁-C₆アルキル)-(3～14員のヘテロシクロアルキル)（ここで、ヘテロシクロアルキルの1～4員はN、O、およびSから独立に選択される）、および5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員はN、O、およびSから独立に選択され
る）からなる群から独立に選択され、
式中、R^AおよびR^Bの各アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、アリール、カルボシクリル、ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール部分は、重水素、ヒドロキシ、ハロ、-NR'₂（ここで、各R'は、C₁-C₆アルキル、C₂-C₆アルケニル、C₂-C₆アルキニル、C₆-C₁₀アリール、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C₁-C₆アルキル)-(3～14員のヘテロシクロアルキル)（ここで、環の1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）、および5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロアリールの1～4員は、N、O、およ
びSから独立に選択される）からなる群から独立に選択される)、-NHC(O)(OC₁-C₆アルキル)、-NO₂、-CN、オキソ、-C(O)OH、-C(O)O(C₁-C₆アルキル）、-C₁-C₆アルキル(C₁-C₆アル
コキシ)、-C(O)NH₂、C₁-C₆アルキル、-C(O)C₁-C₆アルキル、-OC₁-C₆アルキル、-Si(C₁-C₆アルキル)₃、-S(O)_0-2-(C₁-C₆アルキル)、C₆-C₁₀アリール、-(C₁-C₆アルキル)(C₆-C₁₀ア
リール)、3～14員のヘテロシクロアルキル、および-(C₁-C₆アルキル)-(3～14員の複素環)（ここで、複素環の1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される）、および-O(C₆-C₁₄アリール)からなる群から選択される一つまたは複数の置換基で置換されていてもよいも
のであり、
式中、R^AおよびR^Bの各アルキル、アルケニル、アリール、およびヘテロシクロアルキル置換基は、ヒドロキシ、-OC₁-C₆アルキル、ハロ、-NH₂、-(C₁-C₆アルキル)NH₂、-C(O)OH
、CN、およびオキソからなる群から選択される一つまたは複数の置換基で置換されていてもよく、
R^CおよびR^Dはそれぞれ独立して、HおよびC₁-C₆アルキルから選択される、化合物、
またはその薬学的に許容可能な塩。
式中、
R⁴は、H、C₁-C_6-アルキル(一つまたは複数のハロ、ヒドロキシ、または3～14員のヘテ
ロシクロアルコキシ(ここで、ヘテロシクロアルコキシの1～4員は、N、O、およびSから独立に選択される)によって任意に置換される)、-O(C₁-C₆-アルキル)、-(C₁-C₆アルキル)NR^AR^B、および-NR^AR^B(ここで、R^AおよびR^Bは、HおよびC₁-C₆アルキルから独立に選択される）からなる群から選択され、
R⁵は、H、C₁-C₆アルキル、C₁-C₆アルコキシ、および-NR^CR^Dからなる群から選択される
、請求項1に記載の化合物。
R⁴およびR⁵のうちの少なくとも一つがHである、請求項1または2に記載の化合物。
R⁴およびR⁵の各々が、Hである、請求項1～3のいずれか一項に記載の化合物。
R²が、任意に置換されたC₆-C₁₀アリールまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリ
ールである、請求項1から4のいずれか一項に記載の化合物。
R²が、任意に置換されたC_6-C₁₀アリールである、請求項5に記載の化合物。
R²が、任意に置換されたフェニルである、請求項6に記載の化合物。
R²が、任意に置換された5～10員のヘテロアリールであり、環の1員がNである、請求項5に記載の化合物。
R²が、任意に置換された5または6員のヘテロアリールである、請求項8に記載の化合物
。
R²が、任意に置換された6員のヘテロアリールである、請求項8または9に記載の化合物
。
R²が、任意に置換されたピリジルである、請求項8～9のいずれか一項に記載の化合物。
R³が、任意に置換された3～14員のヘテロシクロアルキルまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリールである、請求項1～10のいずれか一項に記載の化合物。
R³が、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ピリジニル、ピリジノニル、ピリダジニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、キナゾリニル、イミダゾピリジニル、ピラゾロピリジニル、トリアゾロピリジニル、シンノリニル、イソキサゾリル、ピラゾリル、ベンゾフラニル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾジオキシニル、およびテトラヒドロベンゾジオキシニルからなる群から選択され、これらのそれぞれが任意に置換され得る、請求項12に記載の化合物。
R³が、任意に置換されたC₆-C₁₀アリールである、請求項1～10のいずれか一項に記載の
化合物。
R³が、任意に置換されたフェニルである、請求項14に記載の化合物。
R²が、任意に置換されたフェニルであり、R³が、任意に置換された3～14員のヘテロシ
クロアルキルまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリールである、請求項1～4のい
ずれか一項に記載の化合物。
Lが、OまたはNRである、請求項1～16のいずれか一項に記載の化合物。
R¹が、任意に置換されたC_1-C₆アルキルまたは任意に置換されたC_3-C₆カルボシクリルである、請求項17に記載の化合物。
R¹が、1～3のFで置換されていてもよいC₁-C₃アルキルである、請求項17または18に記載の化合物。
式中、
LはOまたはNRであり、またRはHであり、
R¹は1～3のFで置換されていてもよいC₁-C₃アルキルであり、
R²は、任意に置換された3～14員のヘテロシクロアルキルまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリール（ここで、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールの1員はNである）または任意に置換されたC₆-C₁₀アリールであり、
R³は、任意に置換された3～14員のヘテロシクロアルキルまたは任意に置換された5～10員のヘテロアリールであり、ここでヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールの1～3員は、N、O、およびSから独立に選択され、また
R⁴およびR⁵の各々はHである、請求項1に記載の化合物。
Lが、NRである、請求項20に記載の化合物。
前記化合物が、以下の表から選択される、請求項1に記載の化合物またはその薬学的に
許容可能な塩
。
請求項1～22のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の治療有
効量、および薬学的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。
がんを患う対象におけるがんを治療するための組成物であって、請求項1～22のいずれ
か一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む、組成物。
前記がんが、MTAP欠失がんである、請求項24に記載の組成物。
前記がんが、中皮腫、神経芽細胞腫、直腸がん、大腸がん、家族性腺腫ポリポーシスがんおよび、遺伝性非ポリポーシス大腸がん、食道がん、陰唇がん、喉頭がん、下咽頭がん、舌がん、唾液腺がん、胃がん、腺がん、髄様甲状腺がん、乳頭状甲状腺がん、腎がん、腎実質がん、卵巣がん、子宮頸部がん、子宮体がん、子宮内膜がん、絨毛がん、膵がん、前立腺がん、膀胱がん、精巣がん、乳がん、尿路がん（urinary carcinoma）、黒色腫、脳腫瘍、リンパ腫、頭頸部がん、急性リンパ性白血病（ALL）、慢性リンパ性白血病（CLL）、急性骨髄性白血病（AML）、慢性骨髄性白血病（CML）、肝細胞がん、胆嚢がん、気管支がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、多発性骨髄腫、基底細胞腫、奇形腫、網膜芽細胞腫、脈絡膜黒色腫、精上皮腫、横紋筋肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫および形質細胞腫からなる群から選択される、請求項24または25に記載の組成物。
前記がんが、B細胞急性リンパ球性白血病（B-ALL）、中皮腫、リンパ腫、膵がん、肺がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、脳腫瘍、頭頸部がん、黒色腫および乳がんからなる群から選択される、請求項24または25に記載の組成物。
前記がんが、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肺の腺がん、および肺の扁平上皮がんからなる群から選択される肺がんである、請求項27に記載の組成物。
前記がんが、トリプルネガティブ乳がん(TNBC)である、請求項27に記載の組成物。
前記がんが、神経膠腫、神経膠芽細胞腫、星細胞腫、髄膜腫、髄芽細胞腫、末梢性神経外胚葉性腫瘍、および頭蓋咽頭腫からなる群から選択される脳腫瘍である、請求項27に記載の組成物。
前記がんが、マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）、および成人T細胞性白血病/リンパ腫からなる群から選択されるリンパ腫である、請求項24～26のいずれか一項に記載の組成物。
がんを治療するための薬剤を製造するための、請求項1～22のいずれか一項に記載の化合物の使用、または前記化合物の薬学的に許容可能な塩の使用。
前記がんが、MTAP欠失がんである、請求項32に記載の使用。
前記がんが、中皮腫、神経芽細胞腫、直腸がん、大腸がん、家族性腺腫ポリポーシスがんおよび、遺伝性非ポリポーシス大腸がん、食道がん、陰唇がん、喉頭がん、下咽頭がん、舌がん、唾液腺がん、胃がん、腺がん、髄様甲状腺がん、乳頭状甲状腺がん、腎がん、腎実質がん、卵巣がん、子宮頸部がん、子宮体がん、子宮内膜がん、絨毛がん、膵がん、前立腺がん、膀胱がん、精巣がん、乳がん、尿路がん（urinary carcinoma）、黒色腫、脳腫瘍、リンパ腫、頭頸部がん、急性リンパ性白血病（ALL）、慢性リンパ性白血病（CLL）、急性骨髄性白血病（AML）、慢性骨髄性白血病（CML）、肝細胞がん、胆嚢がん、気管支がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、多発性骨髄腫、基底細胞腫、奇形腫、網膜芽細胞腫、脈絡膜黒色腫、精上皮腫、横紋筋肉腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫および形質細胞腫からなる群から選択される、請求項32または33に記載の使用。
前記がんが、B細胞急性リンパ球性白血病（B-ALL）、中皮腫、リンパ腫、膵がん、肺がん、胃がん、食道がん、膀胱がん、脳腫瘍、頭頸部がん、黒色腫および乳がんからなる群から選択される、請求項32または33に記載の使用。
前記がんが、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、肺の腺がん、および肺の扁平上皮がんからなる群から選択される肺がんである、請求項35に記載の使用。
前記がんが、トリプルネガティブ乳がん(TNBC)である、請求項35に記載の使用。
前記がんが、神経膠腫、神経膠芽細胞腫、星細胞腫、髄膜腫、髄芽細胞腫、末梢性神経外胚葉性腫瘍、および頭蓋咽頭腫からなる群から選択される脳腫瘍である、請求項35に記載の使用。
前記がんが、マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）、および成人T細胞性白血病/リンパ腫からなる群から選択されるリンパ腫である、請求項35に記載の使用。