JP7369278B2

JP7369278B2 - 経皮浸透促進組成物、及びチモロール製剤におけるその適用

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Inventors: 小順周; ▲東▼升牟; 国富童; 芝梅 ▲劉▼; ▲園▼ 廖; 容▲麗▼ 賀; 文双 ▲劉▼
Original assignee: 武▲漢▼科福新▲薬▼有限責任公司
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Filing date: 2020-09-18
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Description

本発明は、経皮浸透促進剤に関し、特に、薬物の経皮吸収を容易にする複数の物質から主に形成された組成物に関するものであり、チモロール製剤における組成物の適用に関するものである。

乳児血管腫（ＩＨ）は、世界中の小児における最も一般的な良性腫瘍の１つである。文献によれば、一般新生児集団における血管腫の発生率は１．１％から２．６％、未熟児では１０％以上であり、女児の発生率は男児の３倍であると報告されている（Chinese Journal of Oral and Maxillofacial Surgery, 2011, 9(1): 61-67)。初期の文献では、ほとんどの乳児血管腫は治療を必要としないが、高リスク患者の約１２％は臓器機能への影響又は生命を脅かす状態のために治療を必要とする可能性があると報告されている。現在では、患児の生理学及び心理学、特にＩＨの特定の部位及びタイプに対するＩＨの潜在的な有害性を考慮して、血管腫の治療は美容上の原則に従うことが示唆されている：早期介入及び治療を追求すること、並びに正常な皮膚の色及び質感を回復することを目的とした、疾患の部位及び進行に応じて対応する個別化された治療計画を選択すること（Chinese Journal of Oral and Maxillofacial Surgery, 2013, 11(2):161-164; Shanghai Journal of Stomatology, 2016, 25(6): 744-747)。現在、中国には年間約１，５００万人の新生児がいるが、これに基づくと、中国には毎年２０万人以上のＩＨの新生児がいると内輪に推定されている。

血管腫は、血管内皮細胞の増殖後に増殖及び自然退縮の生物学的特徴を有する胎児性良性腫瘍性奇形であり、乳児血管腫は主に、２つの完全に異なる相、すなわち増殖相及び退行相で臨床的に発現する。ＩＨは出生時には現れないことがあるが、出生直後に増殖期に入る。臨床症状は、最初は小さな赤色の斑又は丘疹であり、腫瘍はその後６カ月から１年かけて成長を続け、徐々に安定化し、通常、組織学的に血管内皮細胞の過剰な分裂及び増殖、肥満細胞の浸潤及び基底膜層の肥厚を示す。ＩＨは、患児が約１歳になると長期間の退縮期に入り始め、この時期は数年間、あるいは１０年以上も続くことがある。臨床症状は通常、腫瘍の増殖が徐々に止まり、サイズが縮小し続け、患者の皮膚がしわを寄せ、鮮やかな赤色から暗い赤色に変化し始めることである。増殖期と同様に、退行期のＩＨも様々な程度のマスト細胞浸潤を有し、退行終了後も色素沈着、毛細血管拡張、線維性及び脂肪組織沈着などを保持することがある。イチゴ状血管腫、海綿状血管腫の一部及び従来の分類における混合血管腫の一部はこのカテゴリーに属し、先天性皮膚血管疾患の約８０％を占める。血管腫の病因及び病原は完全には解明されていないが、病因はＣＤ３１、von Willebrand因子（ｖＷＦ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、増殖核抗原、及び血管新生因子と抗血管新生因子の不均衡を引き起こすウロキナーゼと関連していることが研究により示されている。さらに、内因性コルチコステロイド及びグルコース輸送体１（ＧＬＵＴ１)も血管腫の発症に関与している。

チモロールは１９７８年に米国で緑内障治療薬として承認されて以来、小児緑内障治療の第一選択薬としてのチモロールの安全性が小児集団において検証されている（Journal of Tissue Engineering and Reconstructive Surgery, 2012,8(4): 208-212)。その後、様々な国の臨床医や研究者が、チモロールがＩＨの治療に安全かつ有効であることを相次いで報告した。チモロールの安全性及び有効性に鑑み、米国皮膚科学会及び米国小児科学会は、表在性限局性乳児血管腫（小領域)の治療のための望ましい選択肢の１つとして、チモロールの外用を推奨している（JPediatr Ophthalmol Strabismus, 2009, 46(1): 12-18)。中国の臨床専門家も、特定の投与方法に関する専門家のコンセンサスを形成している（Shanghai Journal of Stomatology, 2016, 25(6): 744-747)：１日３回、隔てて６～８時間（朝１回、午後１回、夕方１回)、吸収性綿にチモロール点眼液（濃度５ｍｇ／ｍｌ)を滴下し、１～２層のガーゼ（３０～４０μＬ／ｃｍ^２)を均一に浸漬し、腫瘍表面に浸漬した吸収性綿又はガーゼを塗布し、５～１５分間湿潤を維持する（腫瘍の厚さ及び治療反応に応じて)。

チモロールは消化管から完全に吸収されるが、その肝初回通過効果及び他の部位での代謝は全投与量の約３４％を占めるため、経口投与などの消化管投与による送達は良好なバイオアベイラビリティを達成できない（J. Pharm. Pharmol, 1978, 30, 53)。現在、中国で市販されているチモロール製剤には、チモロールマレイン酸塩点眼液とマレイン酸チモロール錠の２種類がある。このうちマレイン酸チモロール錠は５ｍｇ、２．５ｍｇであり、効能・効果は、１．本態性高血圧、２．狭心症・心筋梗塞後の治療、３．片頭痛予防である。チモロールマレイン酸塩点眼液の力価は、５ｍＬ：２５ｍｇ、５ｍＬ：１２．５ｍｇ、８ｍＬ：４０ｍｇ、１０ｍＬ：５０ｍｇ、０．４ｍＬ：１ｍｇ等であり、その効能・効果は原発開放隅角緑内障における眼圧下降である。薬剤や手術では効果がない二次性緑内障、高眼圧、一部の原発性閉塞隅角緑内障、その他の緑内障では、眼圧下降効果がさらに増強されることがある。

現在、チモロールによるＩＨの局所治療は、表在型及び小さな病変に適している。皮下組織の深部に位置する血管腫の状態は、チモロールの局所治療に関する推奨事項には示されていない。従って、局所投与におけるチモロールの経皮的効果は、治療効果に直接影響する。

Xu Yizhongら（Acta Pharmaceutica Sinica [J], 1992, 27(6): 467-471)は、チモロールの経皮特性及び経皮吸収に影響する因子（例えば、水和剤、培地、ｐＨ、及び種々の経皮エンハンサー)を検討し、皮膚角質層はチモロールの経皮輸送に影響を及ぼした。Ji Xuefangら（Journal of China Pharmaceutical University [J], 1996, 27(1): 6-9)は、マレイン酸チモロールの経皮浸透に及ぼすエンハンサーの選択、適合性、比、作用濃度及び作用部位の影響に関する研究を行い、ラウロカパムとプロピレングリコールの併用が最良の経皮効果を達成できることを明らかにした。

発明番号201410447231.7の中国特許は、透過促進剤としてメントール、テトラデシル硫酸ナトリウム、ゲラニオール、アネトール又はデシルメチルスルホキシドを用い、マイクロニードルと組み合わせてチモロールの経皮投与を達成する、チモロールの長時間作用性経皮調製物及び血管腫におけるその適用を開示している。

本発明の目的は、局所投与のためのチモロールの経皮効果の改善を促進するための経皮浸透促進組成物を提供することである。

本発明の別の目的は、チモロールの経皮吸収を有意に促進するために皮膚表面に塗布される経皮浸透促進組成物を含む、有効成分としてチモロールを含む組成物を提供することである。

本発明の別の目的は、乳児血管腫を治療するための医薬の調製における有効成分とチモロールを含む組成物の使用を提供することである。

１つの経皮浸透促進組成物は、白色ワセリン及びワックス物質からなり、前記白色ワセリンの量は６５重量％以上９８重量％以下であり、前記ワックス物質の量は２重量％以上３５重量％以下であり、前記ワックス物質は、軽質流動パラフィン及び白色蜜蝋の１つ以上から選択される。

別の経皮浸透促進組成物は、白色ワセリン及び軽質流動パラフィンからなる。

前記白色ワセリンの量は、６８重量％以上９５重量％以下、例えば、限定されるわけではないが、６８重量％、６９重量％、７０重量％、７１重量％、７２重量％、７３重量％、７４重量％、７５重量％、７６重量％、７７重量％、７８重量％、７９重量％、８０重量％、８１重量％、８２重量％、８３重量％、８４重量％、８５重量％、８６重量％、８７重量％、８８重量％、８９重量％、９０重量％、９１重量％、９２重量％、９３重量％、９４重量％及び９５重量％である。

前記軽質流動パラフィンの量は、５重量％以上３２重量％以下、例えば、限定されるわけではないが、５重量％、６重量％、７重量％、８重量％、９重量％、１０重量％、１１重量％、１２重量％、１３重量％、１４重量％、１５重量％、１６重量％、１７重量％、１８重量％、１９重量％、２０重量％、２１重量％、２２重量％、２３重量％、２４重量％、２５重量％、２６重量％、２７重量％、２８重量％、２９重量％、３０重量％、３１重量％、及び３２重量％である。

別の経皮浸透促進組成物は、白色ワセリン及び白色蜜蝋からなる。

前記白色ワセリンの量は、９２重量％以上９８重量％以下、例えば、限定されるわけではないが、９２重量％、９３重量％、９４重量％、９５重量％、９６重量％、９７重量％、及び９８重量％である。

前記白色蜜蝋の量は、２重量％以上８重量％以下、例えば、限定されるわけではないが、２重量％、３重量％、４重量％、５重量％、６重量％、７重量％及び８重量％である。

別の経皮浸透促進組成物は、白色ワセリン、白色蜜蝋及び軽質流動パラフィンからなる。

前記白色ワセリンの量は、６８重量％以上９３重量％以下、例えば、限定されるわけではないが、６８重量％、６９重量％、７０重量％、７１重量％、７２重量％、７３重量％、７４重量％、７５重量％、７６重量％、７７重量％、７８重量％、７９重量％、８０重量％、８１重量％、８２重量％、８３重量％、８４重量％、８５重量％、８６重量％、８７重量％、８８重量％、８９重量％、９０重量％、９１重量％、９２重量％、及び９３重量％である。

前記軽質流動パラフィンの量は、５重量％以上３０重量％以下、例えば、限定されるわけではないが、５重量％、６重量％、７重量％、８重量％、９重量％、１０重量％、１１重量％、１２重量％、１３重量％、１４重量％、１５重量％、１６重量％、１７重量％、１８重量％、１９重量％、２０重量％、２１重量％、２２重量％、２３重量％、２４重量％、２５重量％、２６重量％、２７重量％、２８重量％、２９重量％、及び３０重量％である。

本発明の種々の経皮浸透促進組成物を経皮浸透促進剤として使用し、チモロールの経皮吸収を促進する効果を有する、皮膚表面に適用されるチモロールと混合する。ここで、チモロールの濃度は０．１重量％以上３重量％以下である。

有効成分としてチモロールを含む一つの組成物は、経皮浸透促進剤として白色ワセリン及びワックス物質の組成物を使用する。

有効成分としてチモロールを含む別の組成物は、さらに、メトプロロール及びプロプラノロールなどの他のベータ遮断薬を含むが、これらに限定されない。これらの化合物は、単独で、又は組み合わせて本発明において使用される。

有効成分としてチモロールを含む別の組成物は、０．１重量％以上３重量％以下のチモロール、及び５５重量％以上９９．９重量％以下の経皮浸透促進剤を、他のアジュバントと共に、又は他のアジュバントなしで含む。

有効成分としてチモロールを含む別の組成物は、０．１重量％以上３重量％以下のチモロール、５０重量％以上９８重量％以下の白色ワセリン、及び１重量％以上３５重量％以下のワックス物質を含むことを特徴とし、他のアジュバントを含むか又は含まない。

他のアジュバントには、ラノリン、植物油、ゴマ油、落花生油、綿実油、ジメチコン油、グリセリン、ステアリン酸、ポリオキシエチレンステアリルエーテル、オクタデカノール、セテアリルアルコール、ポリオキシエチレンステアレート、及びグリセロールモノステアレートが含まれるが、これらに限定されない。

有効成分としてチモロールを含む別の組成物は、０．５重量％のチモロール及び９９．５重量％の経皮浸透促進剤を含有する。

有効成分としてチモロールを含む別の組成物は、０．５重量％のチモロール、９４．５重量％の白色ワセリン及び５重量％の白色蜜蝋を含有する。

有効成分としてチモロールを含む別の組成物は、０．５重量％のチモロール、９４．５重量％の白色ワセリン及び５重量％の軽質流動パラフィンを含有する。

有効成分としてチモロールを含む別の組成物は、０．５重量％のチモロール、８９．５重量％の白色ワセリン、５重量％の白色蜜蝋及び５重量％の軽質流動パラフィンを含有する。

有効成分としてチモロールを含む別の組成物は、０．５重量％のチモロール、８４．５重量％の白色ワセリン、５重量％の白色蜜蝋及び１０重量％の軽質流動パラフィンを含有する。

有効成分としてチモロールを含む別の組成物は、０．５重量％のチモロール、７９．５重量％の白色ワセリン、５重量％の白色蜜蝋及び１５重量％の軽質流動パラフィンを含有する。

有効成分としてチモロールを含む別の組成物は、０．５重量％のチモロール、６９．５重量％の白色ワセリン、５重量％の白色蜜蝋及び２５重量％の軽質流動パラフィンを含有する。

０．５重量％のチモロールと９９．５重量％の経皮浸透促進剤とを含有する組成物は、チモロールの経皮効率を改善し、チモロールが深部皮下部に到達しやすくするために皮膚表面に塗布される軟膏に処方され、臨床治療目的で乳児血管腫に作用する。

本発明の技術的解決策は、添付の図面に関連して以下に詳細に説明される。本発明の実施形態は、本発明の技術的解決策を例示するためにのみ使用され、本発明を限定するためには使用されない。本発明は、好ましい実施形態を参照して詳細に説明されているが、当業者にとっては、本発明の技術的解決策の精神及び範囲から逸脱することなく、本発明の技術的解決策に対して修正又は同等の置換を行うことができ、そのすべては本発明の特許請求の範囲によってカバーされるべきであることが理解されるべきである。

本発明の以下の実施形態において経皮効率を検証するために使用される材料及び方法は、以下の通り規定される。

１．体外皮膚の調製
雄子豚(１ヶ月齢)を採取し、腹部を電気シェーバーで脱毛し、脱毛部位の皮膚を、保湿剤としてのグリセリン溶液で被覆した。子豚は試験前に屠殺した。無毛皮膚を採取し、皮下脂肪を除去し、皮下脂肪を除去した無毛皮膚を、清浄にするために蒸留水で繰り返しすすいだ。皮膚表面上の残留蒸留水を濾紙で吸引し、それによってex vivo皮膚を得た。

２．ex vivo経皮デバイス及び方法
経皮的実験には改良フランツ垂直型拡散セルを用いた。レセプターチャンバーに撹拌機を入れた。子豚の皮膚（子豚の腹部皮膚)をドナーチャンバーとレセプターチャンバーとの間に置き、真皮をレセプター溶液に面するように固定した。レセプター溶液として生理食塩水７ｍＬをレセプターチャンバーに添加した。その後、約０．５ｇの試料を子豚の皮膚に塗布し、有効浸透面積は３．１４ｃｍ^２であった。拡散セルを恒温水槽（３７℃±０．５℃)に入れ、撹拌速度３００ｒｐｍの恒温水槽の下に磁気撹拌機を置いた。１時間、２時間、４時間、６時間、８時間、１２時間、２４時間後にレセプター溶液５ｍＬを採取し、ブランクレセプター溶液を同量添加した。得られた試料を遠心分離した。上清を採取し、チモロールマレイン酸塩（又はチモロール)の含量をＨＰＬＣで測定した。

式中、Ｑは累積浸透量を、Ｓは有効浸透面積を、ｖはレセプターチャンバー内の生理食塩水の体積を、Ｃ_ｉはレセプター溶液中の最初のサンプリングから最後のサンプリングまでの薬物濃度を、Ｃ_ｎはこのサンプリング時のレセプター溶液中の薬物濃度を示す。単位面積当りの累積浸透量（Ｑ）を用いて時間（ｔ）に対する回帰式を作成し、単位面積当りの累積浸透量を計算した。

例１チモロールマレイン酸塩とチモロールの経皮吸収効果の比較
チモロールマレイン酸塩ゲルの調製工程：
２％のヒドロキシプロピルメチルセルロース及び１５％のグリセロールを秤量し、均一に混合し、適量の水を加え、混合物をゲルマトリックスとして使用した。５％のチモロールマレイン酸塩を取り、適当量の水で完全に溶解（５０℃に加熱攪拌)し、チモロールマレイン酸塩溶液を得た。溶解したチモロールマレイン酸塩溶液をゲルマトリックスに添加して、混合物Ａを得た。２％のラウロカパムと５％のプロピレングリコールの混合物を秤量し、均一に混合して混合物Ａに加え、得られた混合物を十分に攪拌してチモロールマレイン酸塩ゲル試料を得た。

チモロール軟膏の調製工程：
５％の白色蜜蝋及び８８％の白色ワセリンを適当な容器に量り入れ、８０℃の水浴中で加熱して融解し、よくかき混ぜながら混合物Ａを調製し、混合物Ａの温度を若干下げた後、５％のチモロール及び２％のラウロカパムを量り、混合物Ａに加え、かき混ぜて完全に溶解した。加熱装置を取り除き、試料を撹拌し続けて試料を室温に冷却し、チモロール軟膏試料を得た。

チモロールマレイン酸塩とチモロール製剤の累積浸透量の結果を比較すると、チモロール軟膏中のチモロールの浸透率は子豚の腹部皮膚中のチモロールマレイン酸塩ゲル製剤のそれより有意に高く、軟膏製剤中のチモロールの累積浸透量もゲル製剤中のチモロールマレイン酸塩のそれより有意に高かった。

例２各種チモロール軟膏処方の経皮吸収効果の比較
表２に示すように、所定量の軽質流動パラフィン、白色ワセリン及び白色蜜蝋を、８０℃の水浴中の適当な容器内で秤量して、完全に溶解させて混合物Ａを得た。混合物Ａを６５℃に冷却し、保温した。所定量のチモロールを秤量し、混合物Ａに加えて６分間攪拌してチモロールを完全に溶解させ、攪拌を続けて室温まで冷却し、試料を得た。

上記６つの試料を経皮試験にかけ、子豚のex vivo腹部皮膚に対するin vitro経皮試験により、薬剤の経皮的挙動に及ぼす異なる製剤の影響を調べた。４ｍＬのレセプター溶液をそれぞれ１時間、２時間、４時間、６時間及び８時間後に取り出し、ブランクレセプター溶液を同量補給した。得られた試料を遠心分離し、上清を採取し、チモロールの濃度をＨＰＬＣで測定した。単位面積当りの累積浸透量（Ｑ）を用いて時間（ｔ）に対する回帰式を作成し、単位面積当りの累積浸透量を算出した（詳細は表３参照)。

以上の経皮吸収試験の結果は、以下のことを示している。

軽質流動パラフィン単独若しくは白色蜜蝋単独、又は軽質流動パラフィン及び白色蜜蝋の両方を配合した処方のチモロールの量は、白色ワセリンのみを配合した軟膏のチモロールの量と比較して改善された。

処方番号20161220-1は、チモロールに対して最大の経皮効果を達成した。すなわち、処方が７９．５重量％の白色ワセリン、５重量％の白色蜜蝋、及び１５重量％の軽質流動パラフィンを含有する場合、チモロールの経皮効果は、他の処方の場合よりも良好であった。

例３チモロール軟膏処方に対する種々の経皮浸透促進剤の経皮効果の比較
薬物の経皮効果は治療効果に直接関係し、先行技術はまた、プロピレングリコール、ラウロカパム、メントール、テトラデシル硫酸ナトリウム、ゲラニオール、アネトール、及びデシルメチルスルホキシドのような経皮浸透促進剤の使用がチモロールの経皮効果を改善できることも教示している。

幼児への適用状況に基づいて、刺激特性の低い一般的な経皮浸透促進剤、例えば、ボルネオールなどのテルペノイド；プロピレングリコール及びミリスチン酸イソプロピルなどのアルコールを選択し、薬剤の経皮浸透に対するそれらのそれぞれの効果を調べた。

プロピレングリコールは一般に無毒性で刺激性が低いと考えられており、局所用クリームには一般的に最大３０％の用量で使用されている。ミリスチン酸イソプロピルは化粧品及び局所用製剤に広く使用されており、一般に無毒性及び無刺激性物質であると考えられている。ボルネオールはテルペノイド化合物であり、一般に合成浸透促進剤より毒性が低く、比較的安全に使用でき、親水性及び親油性薬物に対する良好な浸透促進作用も有する。

さらに、ラウロカパムを浸透促進剤の比較試験として選択し、チモロールの経皮的効果に及ぼす効果を検討した。

表４に示すように、所定量の軽質流動パラフィン、白色ワセリン及び白色蜜蝋を、８０℃の水浴中の適当な容器内で秤量して、完全に溶解させて混合物Ｂを得た。混合物Ｂを６５℃に冷却し、保温した。所定量のチモロール及び浸透促進剤を秤量し、混合物Ｂに加えて６０分間撹拌してチモロール及び浸透促進剤を完全に溶解させ、撹拌を続けて室温まで冷却し、試料を得た。

調製中に、プロピレングリコールと白色ワセリンのような油ベースマトリックスの混合物は混和性がなく、プロピレングリコールは混合マトリックス中に均一に分散しないことが分かった。

上記表４の浸透促進剤を添加した試料を経皮試験に供し、子豚のex vivo腹部皮膚におけるin vitro経皮試験により、薬物の経皮的挙動に対する異なる浸透促進剤の影響を調べた。１時間、２時間、４時間、６時間及び８時間後にそれぞれ４ｍＬのレセプター溶液を取り出し、同量のブランクレセプター溶液を補給した。得られた試料を遠心分離し、上清を採取し、チモロールの濃度をＨＰＬＣで測定した。単位面積当りの累積浸透量（Ｑ）を用いて時間（ｔ）に対する回帰式を作成し、累積浸透量を算出し、経皮吸収試験の結果を以下の表５に示した。

経皮試験の結果、経皮浸透促進剤としてプロピレングリコール、ボルネオール、ミリスチン酸イソプロピル及びラウロカパムを別々に添加した４つの試料中のチモロールの浸透量は、浸透促進剤を添加しない軟膏試料のそれよりも有意に低く、種々の既存の浸透促進剤の添加は、本実施形態のチモロール軟膏処方中の薬物の経皮効果を増強しなかっただけでなく、薬物浸透量も減少させたことを示した。チモロールマレイン酸塩点眼液と比較して、本実施形態の軟膏剤の経皮効果は、浸透促進剤を添加しないで大幅に改善された（累積浸透量についての詳細は表７参照)が、浸透促進剤の添加は、特に本実施形態の軟膏剤が、より敏感で脆弱な皮膚を有する乳児のような特殊な集団で使用される場合に、皮膚刺激のような安全性の問題を引き起こす可能性がある。従って、本実施形態の軟膏製品は、白色ワセリン及びワックス物質からなる浸透促進剤の場合、現在一般的な浸透促進剤のいずれの添加も必要としないことが検証された。

追加の試験は、子豚に関する本実施形態のチモロール軟膏（すなわち、白色ワセリン及びワックス物質からなる浸透促進剤の使用)とチモロールマレイン酸塩点眼液とを比べた経皮結果が、チモロール軟膏を皮膚に塗布した後のチモロールの血中薬物濃度がチモロールマレイン酸塩点眼液よりも有意に高いことを示すことを示している。

例４投与中の投与量精度の検討
投与量は、医薬品の安全性及び有効性に影響を及ぼす。投与量を正確に制御するために、この実施形態では、定量ポンプ装置を備えたチューブに軟膏をパッケージした。理論的には、定量ポンプは加圧するたびに一定量の薬剤を圧送するが、チューブ内の試料の粘度及び硬度が圧送量の精度に影響する可能性がある。安定性試験の結果の解析に基づき、５％の軽質流動パラフィン及び１０％の軽質流動パラフィンをそれぞれ含む試料の排気誤差を検討した（詳細は表６参照)。１０個の連続したポンプ重量のＲＳＤを比較することにより、ポンプ量の一貫性が良好な処方をさらに選択した。

定量法：定量ポンプ付き試料チューブの指示に従い、キャップを外し、試料が絞り出されるまで定量ポンプを連続的に加圧した。最初の１５個のポンプの試料を廃棄し（試料を絞り出したときに、試料の体積が不安定になる可能性があるために発生する誤差を減らすため)、次に１０個の連続したポンプの量を測定し、各処方について５本のチューブを測定した。

その結果は、ポンプ当り約０．１ｇの試料が絞り出され、１０％の軽質流動パラフィンを含む処方の場合、ポンプ量の誤差は小さくなり、使用される絞り圧力は小さく、試料は比較的容易に汲み出されることを示した。５％の軽質流動パラフィンでは、試料をポンプで汲み出すのに大きな圧搾圧力が必要であり、その誤差は、１０％の軽質流動パラフィンを含む試料と比較して幾分大きかった。

従って、０．５重量％のチモロール、８４．５重量％の白色ワセリン、５重量％の白色蜜蝋、及び１０重量％の軽質流動パラフィンを含む処方は、軟膏剤を製造するのにより適している。

チモロール軟膏の経皮効果に対する経皮浸透促進剤の効果を検討し、経皮浸透促進剤の添加が必要か否かを理解する助けとなった。

例５累積浸透量、皮内滞留量、及び皮上残留量の比較
チモロール軟膏（０．５重量％のチモロール、８４．５重量％の白色ワセリン、５重量％の白色蜜蝋、及び１０重量％の軽質流動パラフィンを含む)及びチモロールマレイン酸塩点眼液（市販の武漢光製薬（株)）の結果を、表７に示すように、累積浸透量、皮内滞留量、及び皮上残留量に関して比較した。

表７において、チモロール軟膏の累積浸透量は、チモロールマレイン酸塩点眼液と比較して有意に高かったが、皮膚への皮内滞留量は一致しており、チモロール軟膏は、皮膚の表皮組織に有意な残留を示さず、皮膚に副作用（チモロールマレイン酸塩点眼液の局所投与により、皮膚の落屑、掻痒感等の副作用が報告されている)を起こさないことが示された。

例６皮膚刺激性
表８に示すように、所定量の軽質流動パラフィン、白色蜜蝋及び白色ワセリンを、乾燥ビーカー中で秤量し、８０℃の水浴中で加熱し、融解させ、そして約３０分間撹拌することにより十分に混合した。その後、混合物を撹拌し、室温に冷却し、充填し、ブランク試料を得た。調製した異なる処方のブランク軟膏試料には、それぞれ１、２、３及び４の番号を付けた。３０名の任意被験者を選択し、各試料を約０．５ｇ絞り出し、前腕部に塗布した。試料を均一に塗布し、約２０分間放置した後、軟膏塗布部位の皮膚反応を観察し、発赤、腫脹、刺痛、そう痒の反応に応じて採点し、評価した。

ＦＤＡに記載されている皮膚刺激性及び／又はアレルギー性反応スコアは、Hill Top Researchが用いた方法に基づいている。具体的な皮膚反応のスコアリング基準は以下の通りである。

０点：刺激なし；
１点：軽度の紅斑、観察可能；
２点：顕著な紅斑、肉眼で容易に確認できるもの、軽度の浮腫又は軽度の丘疹状反応；
３点：紅斑、丘疹；
４点：重大な浮腫；
５点：紅斑、浮腫、丘疹；
６点：水疱
７点：試験部位を超えた分布域での強い反応。

表８の試料１～４のブランク軟膏の皮膚刺激性スコアの結果を表９に示す。

皮膚刺激性試験の結果、以下のことが示された。

全体として、短期間の試験期間中、全試料に有意な皮膚反応（３点以上のスコア)は観察されず、マトリックスの安全性が比較的良好であることが最初に示された。

軽質流動パラフィンの含有量が増加するにつれて、軽度の皮膚反応を呈する被験者の数が増加する傾向が認められたことから、軽質流動パラフィンの含有量が増加すると、皮膚刺激（又はアレルギー反応)の量が少なくなる可能性があることが示唆され、これはアジュバントの性質について知られている情報と一致する。

さらに、軽度の皮膚反応を有する任意被験者は、自己対照後、一般に、軽質流動パラフィンの含有量が１０％を超える試料３及び４は、使用時に皮膚に軽度の灼熱感を引き起こすことを反映したが、軽質流動パラフィンの含有量が１０重量％及び５％の試料は、皮膚刺激性を全く示さず、同じ任意被験者は試料１及び２において非常に軽度の皮膚反応を示した。したがって、チモロール軟膏中の軽質流動パラフィンの含有量が１０重量％以下の場合、皮膚の安全性は高くなると予備的に判断できる。

Claims

チモロールを含む医薬の調製における経皮浸透促進組成物の使用であって、
前記経皮浸透促進組成物が、白色ワセリン、軽質流動パラフィン、及び白色蜜蝋からなり、
前記白色ワセリンの量が６８重量％以上９３重量％以下であり、
前記軽質流動パラフィンの量が５重量％以上３０重量％以下であり、
前記白色蜜蝋の量が２重量％以上８重量％以下である、
経皮浸透促進組成物の使用。
有効成分としてチモロールを含み、経皮浸透促進組成物を含む組成物であって、
前記経皮浸透促進組成物が、白色ワセリン、軽質流動パラフィン、及び白色蜜蝋からなり、
前記白色ワセリンの量が６８重量％以上９３重量％以下であり、
前記軽質流動パラフィンの量が５重量％以上３０重量％以下であり、
前記白色蜜蝋の量が２重量％以上８重量％以下である、
組成物。
メトプロロール及びプロプラノロールの１つ以上を更に含む、請求項２に記載の組成物。
チモロールの濃度が０．１重量％以上３重量％以下である、請求項３に記載の組成物。
有効成分としてチモロールを含み、０．１重量％以上３重量％以下のチモロール、６８重量％以上９３重量％以下の白色ワセリン、５重量％以上３０重量％以下の軽質流動パラフィン、及び２重量％以上８重量％以下の白色蜜蝋を含み、他のアジュバントを含むか又は含まない組成物。
請求項５に記載の組成物であって、前記組成物が以下の組み合わせの１つから選択される、組成物：
０．５重量％のチモロール、８９．５重量％の白色ワセリン、５重量％の白色蜜蝋及び５重量％の軽質流動パラフィン；
０．５重量％のチモロール、８４．５重量％の白色ワセリン、５重量％の白色蜜蝋及び１０重量％の軽質流動パラフィン；
０．５重量％のチモロール、７９．５重量％の白色ワセリン、５重量％の白色蜜蝋及び１５重量％の軽質流動パラフィン；
０．５重量％のチモロール、６９．５重量％の白色ワセリン、５重量％の白色蜜蝋及び２５重量％の軽質流動パラフィン。
乳児血管腫を治療するための医薬の調製における請求項２～６のいずれか一項に記載の有効成分としてチモロールを含む組成物の使用。
有効成分としてチモロールを含み、請求項２～６のいずれか一項に記載の有効成分としてチモロールを含む組成物を含む軟膏。