JP7368042B2 - 水棲動物用経口投与薬剤 - Google Patents
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Description
本発明の一実施形態は、炭素粉末と薬効成分とを混合して、炭素粉末および薬効成分を含む混合物を形成し、前記混合物中の炭素粉末に油性成分を吸着させることを含む、上述の水棲動物用経口投与薬剤を製造する方法を提供する。
本発明の一実施形態は、炭素粉末と油性成分とを混合して炭素粉末に油性成分を吸着させ、油性成分を吸着した炭素粉末と薬効成分とを混合することを含む、上述の水棲動物用経口投与薬剤を製造する方法を提供する。
本発明の一実施形態は、上述の水棲動物用経口投与薬剤を水棲動物に投与することにより、水棲動物の疾病を予防および/または治療する方法を提供する。
以下、実施例により本発明を詳述するが、本発明は実施例の範囲に限定されるものではない。
薬効成分および炭素粉末を含む薬剤において、炭素粉末に油性成分(流動パラフィンまたは食用調合油(サラダ油))を添加した場合に、油性成分が炭素粉末本来のEP飼料に対する展着力にどの程度影響するかについて検証を行った。
試験例1において、以下の材料が使用された。なお、本明細書において、原料として使用される炭素粉末は炭素粉末材料とも称されうる。また、本明細書において、原料として使用される薬効成分は薬効成分材料とも称される。
薬効成分材料は、プラジクアンテル(PZQ)粉末(プラジクアンテル原末)であった。
炭素粉末材料は、100メッシュパスのサイズを有する竹炭粉末材料であった。この竹炭粉末材料は、竹炭粉末材料の重量を基準にして5.5重量%の水分を含んでいた。
油性成分は、流動パラフィン(ハイコールK-160:カネダ株式会社)または食用調合油(サラダ油、味の素株式会社)であった。
EP飼料としては、ブリ用EP(サイズ13mm、脂肪分22%)が使用された。
実施例1および2、並びに比較例1の炭素粉末含有薬剤が以下の通り調製された。下記に示される薬剤中の各成分の比率は、薬剤全重量を基準にした重量%である。
比較例1:竹炭粉末材料(80重量%)にPZQ粉末(20重量%)を添加、混合して、油性成分非含有の炭素粉末含有PZQ薬剤を調製した。
実施例1:竹炭粉末材料(75.2重量%)に流動パラフィン(4.8重量%)を添加して混合物を得た。この混合物にPZQ粉末(20重量%)を添加、混合して、流動パラフィン含有の炭素粉末含有PZQ薬剤を調製した。
実施例2:竹炭粉末材料(67重量%)に食用調合油(サラダ油)(13重量%)を添加して混合物を得た。この混合物にPZQ粉末(20重量%)を添加、混合して、食用調合油含有の炭素粉末含有PZQ薬剤を調製した。
実施例1、実施例2または比較例1の薬剤(0.2g)をEP飼料(20g)に添加、攪拌して、薬剤をEP飼料に展着させた。溶出機(NTR-6200A)に入れた人工海水500ml中にこのEP飼料を投入し、内容物を30秒間攪拌(250rpm)した。この流失操作により、EP飼料に付着した薬剤から人工海水に薬効成分が流失し、薬効成分を含む人工海水を生じさせた。溶出機から、EP飼料および人工海水をそれぞれ回収した。回収されたEP飼料および人工海水から、以下の手順に従ってHPLC用サンプルを調製した。このサンプルを以下の条件でHPLCで分析することで、人工海水中のPZQの量およびEP飼料に残存したPZQの量を特定した。また、分析が適切に行われていることを確認するために、薬剤自体、および人工海水に投入する前の、薬剤を展着させたEP飼料から、HPLC用サンプルを調製し、これらのサンプルについてもHPLC分析を行った。
約1gの回収されたEP飼料または人工海水を精密に秤量し、100mLのメスフラスコに入れた。メスフラスコにエタノールを約50mLを加え、超音波を20分間掛けてPZQを溶解させた後、メスフラスコの内容物にエタノールを加えてメスフラスコの内容物を100mLに調整して、PZQ含有サンプル溶液を得た。PZQの濃度が約100μg/mLとなるようにPZQ含有サンプル溶液をエタノールで希釈した。希釈されたPZQ含有サンプル溶液を0.45μmのメンブランフィルタでろ過してHPLC用サンプルとした。
HPLC分析条件は以下の通りであった。
カラム:ODS (Waters symmetry C18, Wako Handy ODS 150mm)
移動相:アセトニトリル:水=55:45
カラム温度:40℃
流量:1.0mL/min
注入量:10μL
検出:210nm
分析時間:6分
定量:絶対検量線法(PZQ標準品:和光純薬)
測定範囲:0.01~10μg/mL。
試験例2においては、炭素粉末以外の従来の展着剤を使用して薬効成分を展着させたEP飼料(比較例2のEP飼料)を用いて、展着性試験が行われた。
比較例2のEP飼料は、以下のように調製された。20gのEP飼料(13mm、脂肪分22%)に、PZQ粉末(試験例1で使用されたのと同じ)およびブドウ糖(PZQ:ブドウ糖=2:8重量比)を含む粉末薬剤(0.2g)を投入し、水0.2mlを加えた後、グアガム0.2gを添加し、15分間放置することにより、薬効成分(PZQ)をEP飼料に展着させた。
比較例2のEP飼料は試験例1と同じ方法で処理され、得られたサンプルが試験例1と同じ条件でHPLC分析されて、薬効成分(PZQ)のEP飼料への残存率と溶出液中の薬剤流失率が、3回の試験を行った平均値として算出された。試験の結果は、EP残存率が38.6%であり、流出率は60.6%であった。
試験例1の実施例1および2、並びに試験例2の比較例2の結果から、炭素粉末以外の従来の展着剤を使用した場合と比較して、本発明の薬剤は海水中への薬効成分の流失を顕著に抑制できることが明らかとなった。
参考試験例3においては、薬剤中の炭素粉末の含有量と、EP飼料への薬効成分の展着性との関連性について検討が行われた。
参考試験例3において、以下の材料が使用された。
薬効成分材料として、エリスロマイシン(EM)粉末(エリスロマイシン原末)が使用された。
炭素粉末材料として竹炭粉末(150メッシュパス、水分含有量5.6重量%)が使用された。
EP飼料として、粗脂肪22重量%、サイズ13mmのEP飼料が使用された。
表3に示される量で薬効成分材料(エリスロマイシン(EM)粉末)および炭素粉末材料(5.6重量%の水分を含む竹炭粉末)が混合されて、参考例6~10の薬剤を調製した。参考例6の薬剤は90重量%の炭素粉末材料(85.0重量%の竹炭粉末および5重量%の水分)を含んでいた。参考例7の薬剤は22重量%の炭素粉末材料(20.8重量%の竹炭粉末および1.2重量%の水分)を含んでいた。参考例8の薬剤は15重量%の炭素粉末材料(14.2重量%の竹炭粉末および0.8重量%の水分)を含んでいた。参考例9の薬剤は10重量%の炭素粉末材料(9.4重量%の竹炭粉末および0.6重量%の水分)を含んでいた。参考例10の薬剤は炭素粉末材料を含んでいなかった。参考例6~10のいずれの薬剤も、油性成分を含んでいなかった。
EM100mg(力価:EMとしての重量)程度を含むサンプル(すなわち、回収された水)を精密に秤量し、100mLのメスフラスコに入れた。メタノール25mLをメスフラスコに入れ、サンプル中に含まれるエリスロマイシンを溶解させた。この溶液にpH8.0の0.1mol/mLリン酸塩緩衝液を加えて、メスフラスコの内容物を100mLとした。(なお、リン酸塩緩衝液は、250mLの0.2mol/Lリン酸二水素カリウム水溶液(このリン酸二水素カリウム水溶液はリン酸二水素カリウム27.218gを水に溶かし、1000mLとしたものであった)、230.5mLの0.2mol/L水酸化ナトリウム水溶液(この水酸化ナトリウム水溶液は、水酸化ナトリウム8.0gに新たに煮沸して冷却した水を加えて溶かし、1000mLとしたものであった)、および全体を1000mLとする量の水から調製された。)メスフラスコの内容物をNo.2ろ紙でろ過した。EMの濃度が約1000μg(力価)/mLとなるように、ろ過された溶液がpH8.0の0.1mol/mLリン酸塩緩衝液で希釈されて100mLの希釈溶液を得た。この希釈溶液を0.45μmのメンブランフィルタでろ過して、HPLC用サンプルとした。
薬効成分の流失率=[水中のEMの総重量/EP飼料に展着させたEMの総重量(表2に示されるEMの重量)]。
また、それぞれの参考例について、2回の実験の平均および標準偏差(SD)を算出した。
HPLC装置:Waters e2695、
カラム:C18, Wako Handy ODS 150mm
移動相:アセトニトリル:水:25%アンモニア水=75:25:0.3
カラム温度:40℃
流量:1.0mL/分
注入量:10μL
検出:UV(215nm)
定量:絶対検量線法(エリスロマイシン標準品:和光純薬)
測定範囲:100~10000μg/mL。
試験例4においては、薬効成分および炭素粉末を含む薬剤の飛散性および固形化に対して油性成分が及ぼす影響についての検討が行われた。
薬剤1~7として、表5に示される成分を、表5に示される量(薬剤の全重量を基準にした重量%)で含む粉末状の薬剤を調製した。
これら薬剤を調製するために使用された材料は以下の通りである。
薬効成分材料としては、エリスロマイシン(EM)原末またはオキシテトラサイクリン(OTC)原末が使用され、それぞれの薬効成分を含む薬剤の飛散性および固形化が確認された。例えば、表5の薬剤1として、EMを含む薬剤およびOTCを含む薬剤が調製され、それぞれの薬効成分を含む薬剤の飛散性および固形化が検討された。薬効成分の量は薬剤の全重量を基準にして20重量%であった。
炭素粉末材料としては竹炭粉末(150メッシュパス)が使用された。竹炭粉末の量は、薬効成分(20重量%)、水分(5重量%)および流動パラフィン(0~14重量%)を除いた残量全部であった。
水分の量は薬剤の全重量を基準にして5重量%であった。
油性成分としては、流動パラフィン(ハイコールK-160:カネダ株式会社)が使用された。流動パラフィンの量は、表5に示される通り、薬剤の全重量を基準にして0~14重量%の範囲であった。
それぞれの薬剤の飛散性および固形化が検討された。結果が表5に示される。
表5において、薬剤1および7は比較例であり、薬剤2~6が本発明の実施例に該当する。
評価基準は以下の通りであった:
○(飛散性に問題無し)、
△(少し飛散性に問題あるが我慢すれば使えるレベル)、
×(風の影響が大きすぎて養殖現場での使用に不適)。
評価〇および△を合格とし、評価×を不合格とした。結果は表5の「飛散性」の欄に示される。
評価基準は以下の通りであった:
○(全量通過)、
△(少しダマのような固まりが残るが手で触ると直ぐにつぶれる)、
×(大きな固まりが残り、製剤として不適)。
評価結果が〇および△の場合を合格とし、×の場合を不合格とした。結果は表5の「固形化」の欄に示される。
炭素粉末を医薬品の賦形剤として使用する場合、添加剤(液体)を加えなければ竹炭の飛散が激しく、養殖現場での使用が困難となる。しかし、加える添加剤の種類によっては、薬剤の力価(薬効成分の含有量)を低下させてしまう恐れがある。そこで添加剤として適した物質について検討が行われた。試験例5においては、以下の薬剤A~Eが調製された。
薬剤A:9gの竹炭粉末材料に1gのアンピシリン(ABPC)原末を添加、混合して薬剤を調製した。
薬剤B:9gの竹炭粉末材料に1gのABPC原末および0.9gの水を添加、混合して薬剤を調製した。
薬剤C:9gの竹炭粉末材料に1gのABPC原末および0.48gの流動パラフィンを添加、混合して薬剤を調製した。
薬剤D:9gの竹炭粉末材料に1gのABPC原末および1.3gのサラダ油を添加、混合して薬剤を調製した。
薬剤E:9gの竹炭粉末材料に1gのABPC原末を添加、混合して薬剤を調製した。
薬剤A、B、およびEは比較例であり、薬剤CおよびDは本発明の実施例である。
薬剤A~Eの製造に使用された材料は以下の通りであった。
アンピシリン(ABPC)原末は、粉末状のアンピシリン水和物原末であった。
竹炭粉末材料は、150メッシュパスのサイズを有し、使用された竹炭粉末材料中に5.5重量%の水分を含んでいた。すなわち、使用された9gの竹炭粉末材料中には0.5gの水分が存在していた。
流動パラフィンはカネダ株式会社のハイコールK-160であった。
サラダ油は味の素株式会社の食用調合油であった。
ABPC100mg(力価)程度となるような量で薬剤を精密に秤量して、100mLのメスフラスコに入れた。HPLC分析で使用される移動相を加えメスフラスコ内容物を100mLにした。超音波洗浄器内で3分間、メスフラスコ内容物を振り混ぜ、ABPCを移動相に溶解させ、ABPC溶液を得た。No.2ろ紙でABPC溶液をろ過した。ABPCが約1000μg(力価)/mLとなるようにABPC溶液を移動相で希釈した。希釈されたABPC溶液を0.45μmのメンブランフィルタでろ過してHPLC用サンプルとした。
HPLC分析条件は以下の通りであった。
カラム:ODS(Wakosil II 5C18、(Waters Symmetry C18)
移動相:水850mLにリン酸水素二アンモニウム5.943gを溶かして得られた溶液にアセトニトリル100mLを加え、リン酸でこの溶液のpHを約5に調整した後、水を加えて1000mLとしたものを移動相として使用した。
カラム温度:30℃
流量:1.0mL/min
注入量:10μL
検出:230nm
分析時間:6分
定量:絶対検量線法(ABPC標準品:和光純薬)。
Claims (8)
- 薬効成分であるアンピシリン、
薬剤の全重量を基準にして15~98重量%の炭素粉末、並びに
薬剤の全重量を基準にして1~13重量%の油性成分を含み、
薬剤中の水分量が薬剤の全重量を基準にして12重量%以下であり、
薬剤中の油性成分と水分の合計量が薬剤の全重量を基準にして9.35~15.93重量%である、造粒されていない粉末状の水棲動物用経口投与薬剤。 - 油性成分が流動パラフィンおよび植物油からなる群から選択される、請求項1に記載の水棲動物用経口投与薬剤。
- 炭素粉末が竹炭粉末、ヤシガラ炭粉末および木炭粉末からなる群から選択される、請求項1に記載の水棲動物用経口投与薬剤。
- 炭素粉末の粒径が50メッシュを通過する大きさである、請求項1に記載の水棲動物用経口投与薬剤。
- エクストルーダーペレット飼料と共に使用するための、請求項1に記載の水棲動物用経口投与薬剤。
- 炭素粉末と薬効成分とを混合して、炭素粉末および薬効成分を含む混合物を形成し、前記混合物中の炭素粉末に油性成分を吸着させることを含む請求項1に記載の水棲動物用経口投与薬剤を製造する方法。
- 炭素粉末と油性成分とを混合して炭素粉末に油性成分を吸着させ、油性成分を吸着した炭素粉末と薬効成分とを混合することを含む、請求項1に記載の水棲動物用経口投与薬剤を製造する方法。
- 請求項1~5のいずれか1項に記載の水棲動物用経口投与薬剤を水棲動物に投与することにより、水棲動物の疾病を予防および/または治療する方法。
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