JP7356326B2 - 皮膚成分の分析方法 - Google Patents

Description

本発明は、皮膚成分の分析方法に関する。

従来、皮膚に含まれる成分を分析するために皮膚成分を採取する方法として、主にテープストリッピング法が用いられている。
例えば、特許文献１は、経皮吸収された製剤等に含まれた有効成分の角層への浸透度合いを分析して可視化するため、粘着シートを用いてテープストリッピング操作により、ヒトの角層を皮膚の最外層から順次採取（１層目～５層目）する方法を開示している。

また、特許文献２は、敏感肌等の肌性を鑑別するため、顔の頬部と上腕内側部から、セロハンテープによって皮膚表面の角質細胞をストリッピングして採取する方法を開示している。

特開２００１－１０８６７４号公報 特開２０１４－１３２０１号公報

特許文献１および２の方法のように、セロハンテープ等の粘着シートを皮膚に貼り付けて皮膚成分を採取する方法は、従来、複数提案されている。しかしながら、いずれの方法も、予め定められた皮膚成分の採取対象領域から皮膚成分を採取し、当該採取対象領域に含まれる皮膚成分を部位全体で分析および検証するに留まっている。
一方で、例えば、顔の頬部、目の周り、口の周り等の体の各部位、あるいはもう少し広く体を分類し、例えば、顔全体、腕全体等に含まれる皮膚成分を複数の採取部分に細分化して分析し、当該分析結果に基づいて、顔等の採取対象領域における皮膚成分の分布を俯瞰することに着目し、それを実現できる発明を提案している文献は見つかっていない。

本発明の目的は、皮膚成分の分布を俯瞰することができる皮膚成分の分析方法を提供することである。

本発明の一の局面に係る皮膚成分の分析方法は、皮膚の採取対象領域から皮膚成分を粘着シートで採取する工程と、前記粘着シートで採取された前記皮膚成分を、前記採取対象領域における複数の採取部分ごとに分け、各前記採取部分で採取された皮膚成分を分析する工程と、各前記分析結果を集約し、前記採取対象領域における前記皮膚成分の分析結果の分布を検証する工程とを含む。

図１は、本発明の一実施形態に係る方法のフロー図である。 図２は、角層の採取対象領域を説明するための人物の正面顔を示す図である。 図３は、角層の採取対象領域を説明するための人物の横顔を示す図である。 図４は、本発明の一実施形態に係る角層の採取用マスクの正面図である。 図５は、本発明の一実施形態に係る角層の採取用マスクの背面図である。 図６は、本発明の一実施形態に係る角層の採取用マスクの拡大断面図である。 図７は、角層の採取に関連する工程を説明するための図である。 図８は、角層の採取に関連する工程を説明するための図である。 図９は、角層の採取に関連する工程を説明するための図である。 図１０は、シート基材からの角層の剥離に関連する工程を説明するための図である。 図１１は、角層の染色および面積測定に関連する工程を説明するための図である。 図１２は、分析結果の可視化に関連する工程を説明するための図である。 図１３は、本発明の他の実施形態に係る角層の採取用シートの正面図である。 図１４は、本発明の他の実施形態に係る角層の採取用シートの背面図である。 図１５は、前記可視化を３次元的に示す図であって、人物の正面顔の３次元画像のイメージを示す図である。 図１６は、前記可視化を３次元的に示す図であって、人物の横顔の３次元画像のイメージを示す図である。

＜本発明の実施形態＞
まず、本発明の実施形態を列記して説明する。
本発明の一実施形態に係る皮膚成分の分析方法は、皮膚の採取対象領域から皮膚成分を粘着シートで採取する工程と、前記粘着シートで採取された前記皮膚成分を、前記採取対象領域における複数の採取部分ごとに分け、各前記採取部分で採取された皮膚成分を分析する工程と、各前記分析結果を集約し、前記採取対象領域における前記皮膚成分の分析結果の分布を俯瞰する工程とを含む。

この方法によれば、皮膚の採取対象領域における複数の採取部分ごとに皮膚成分が分析され、その後、各分析結果が集約され、皮膚の採取対象領域における皮膚成分の分析結果の分布が俯瞰される。これにより、皮膚の採取対象領域全体における皮膚成分の状態を知ることができる。この俯瞰結果を複数サンプルについて集めることにより、例えば、皮膚の採取対象領域における皮膚成分の状態が、化粧品の使用前後や、年齢別、性別、居住場所等に応じて、どのように変化しているか検証することができる。

本発明の一実施形態に係る皮膚成分の分析方法では、前記分析結果の分布を俯瞰する工程は、前記複数の採取部分を反映したマップに前記分析結果の分布を表示して可視化する工程と、前記可視化された表示を俯瞰する工程とを含んでいてもよい。
この方法によれば、複数の採取部分を反映したマップに分析結果の分布が表示されるので、皮膚成分の状態の分布を簡単に把握することができる。

本発明の一実施形態に係る皮膚成分の分析方法では、前記皮膚成分の分析結果は、各前記採取部分における前記皮膚成分の所定の定量値の結果を含み、前記分析結果の分布を俯瞰する工程は、前記可視化のために、前記所定の定量値を複数の定量区分に分類する工程をさらに含んでいてもよい。
この方法によれば、分析結果（定量値）が定量区分（定量値の大きさ）に応じてグループ分けされ、マップに可視化されるので、皮膚成分の定量値の大まかな大小関係を簡単に把握することができる。

本発明の一実施形態に係る皮膚成分の分析方法における前記可視化の工程では、前記複数の定量区分ごとに互いに異なったカラーで前記定量区分を表示してもよい。
この方法によれば、定量区分ごとに互いに異なったカラーで可視化されるので、可視化された定量区分を一見するだけで、採取対象領域における皮膚成分の定量値の大小関係を簡単に把握することができる。

本発明の一実施形態に係る皮膚成分の分析方法における前記可視化の工程では、コンピュータのモニタに前記定量区分をカラーで表示してもよい。
この方法によれば、コンピュータを使用して可視化するので、定量区分のカラー表示にあたって、色相・明度・彩度が異なる様々なカラーを使用することができる。
本発明の一実施形態に係る皮膚成分の分析方法では、前記採取部分の皮膚成分を分析する工程は、前記採取対象領域に対して行列状の前記採取部分を割り当て、当該行列状の前記採取部分のそれぞれの皮膚成分を分析する工程を含んでいてもよい。

この方法によれば、複数の採取部分が格子状のラインで区画され、隣り合う採取部分の間に隙間ができないので、採取対象領域における皮膚成分の状態を満遍なく分析することができる。
本発明の一実施形態に係る皮膚成分の分析方法では、前記採取部分の皮膚成分を分析する工程は、前記採取部分で採取された角層の面積を測定する工程を含んでいてもよい。

この方法によれば、採取対象領域における角層面積の分布を俯瞰することができる。
本発明の一実施形態に係る皮膚成分の分析方法では、前記角層の面積を測定する工程は、前記角層を採取した前記粘着シートを分散媒に入れて前記粘着シートから前記角層を剥離させ、前記分散媒に前記角層を分散させる工程と、前記粘着シートから剥離された前記角層を染色する工程と、染色された前記角層の面積に基づいて、前記採取部分に含まれる前記角層の面積を算出する工程とを含んでいてもよい。

この方法によれば、角層の面積の算出にあたって、分散媒中で粘着シートから角層を剥離し、その後染色された角層の面積を算出値として採用するので、角層の面積を精度よく算出することができる。
例えば、粘着テープ上で角層同士が重なり合っていると、重なり合っている各角層の面積をそれぞれ正確に測定することが困難である。しかしながら、上記の方法であれば、角層同士が重なり合っていても、分散媒中で粘着シートから角層がバラバラになるので、角層の面積を正確に算出することができる。

本発明の一実施形態に係る皮膚成分の分析方法では、前記皮膚成分を採取する工程は、対象人物の顔の前記採取対象領域の皮膚成分を採取する工程を含んでいてもよい。
本発明の一実施形態に係る皮膚成分の分析方法では、前記皮膚成分を採取する工程は、対象人物の顔の左右いずれかの採取対象半面の前記採取対象領域の皮膚成分を採取する工程を含み、前記皮膚成分を分析する工程は、前記採取対象半面側の分析結果を、前記採取対象半面の反対側の非採取対象半面の分析結果として採用する工程を含んでいてもよい。

この方法によれば、顔の採取対象半面側の皮膚成分を分析し、その分析結果が非採取対象半面の分析結果として採用されるので、より少ない作業量で、顔全体の皮膚成分の分析を完了することができる。
＜本発明の実施形態の詳細な説明＞
次に、本発明の実施形態を、添付図面を参照して詳細に説明する。

まず、以下では、本発明の一実施形態として、採取対象領域の一例としての顔の角層を採取し、顔における角層の面積分布を分析する方法を取り上げる。
しかしながら、本発明は、角層の面積分布を分析する方法に限らず、粘着シートで採取された皮膚成分を分析し、皮膚の採取対象領域における皮膚成分の分析結果の分布を俯瞰することを目的としている。つまり、以下で説明する角層の面積分布を分析する方法は、本発明のほんの一例に過ぎず、本発明は、他の形態で実施することもできる。

例えば、分析試料の採取領域は、顔に限らず、皮膚の比較的広い領域を対象とすることができる。例えば、腕、腹、胸、背中、太もも等を採取対象領域（採取対象部位）としてもよい。
また、分析試料についても、角層に限らず、皮膚成分全般を広く採用することができる。皮膚成分は、発生源が体内・体外を問わず、皮膚の表層に分布する物質であればよい。例えば、体内や皮膚下層から分泌または合成されて皮膚の表層に分布する物質として、角層（角層内成分を含む）、細胞間脂質、細胞表層の脂質、汗の成分、菌等が挙げられる。一方、例えば、体外から塗布または付着して皮膚の表層に分布する物質として、（皮膚上の）チリ、花粉、粒子状物質（例えば、ＰＭ２．５等）、タバコの煙に含まれる成分等の大気中物質等が挙げられる。

また、分析目的についても、角層の面積の分布測定に限らず、より広い考え方として、採取対象領域における皮膚成分の分布測定であってもよい。具体的な分析目的の他の例としては、例えば、細胞表層の脂質量分布の測定、角層のニトロ化分布の測定等が挙げられる。
それでは以下に、顔の角層を採取し、顔における角層の面積分布を分析する方法を詳細に説明する。

図１は、本発明の一実施形態に係る角層の面積の分析方法のフロー図である。
この方法では、まず、採取対象領域２の角層を採取する（ステップＳ１）。この実施形態では、採取対象領域２は、顔の左半面であるが、もちろん顔の右半面であってもよい。
角層の採取に先立って、この実施形態では、まず、図２および図３に示すように、対象人物１（角層提供者）の採取対象領域２に複数の採取セクション４を設定する。なお、この採取セクション４を設定する工程は、前述したように、皮膚の採取対象領域における皮膚成分の分析結果の分布を俯瞰するという本発明の目的に照らして、もちろん省略することができる。

この実施形態では、採取対象領域２（顔の左半面）の全体を平面的に格子状に細分化した第１区画パターン３を設定し、当該格子状の第１区画パターン３の各格子窓部分に１つずつ採取セクション４を割り当てる。各採取セクション４は、図２および図３に示すように正方形状であってもよいし、長方形状であってもよい。また、正方形状の場合、各採取セクション４は、一辺が１ｃｍ～２ｃｍであってもよい。

例えば、写真撮影した対象人物１の顔の画像をコンピュータのモニタに表示し、コンピュータ上で、図２および図３に示すように、顔の左半面の全体に格子状の仮想の第１区画パターン３を重ね、当該格子状の第１区画パターン３の各格子窓部分を採取セクション４と設定してもよい。この際、各採取セクション４に対して、後述する角層採取用マスク５の第２区画パターン１０の各シート側セクション１１を１対１で対応付けておく。例えば、角層採取用マスク５の各シート側セクション１１に形成された目印１２（この実施形態では、数字）と同じ目印を各採取セクション４に形成し、対応関係を記録しておけばよい。

次に、図４～図６に示す角層採取用マスク５を準備する。角層採取用マスク５は、採取対象領域２を覆う形状に形成されており、この実施形態では、顔の左半面を覆う略半円形状に形成されている。
角層採取用マスク５は、図６に示すように、一方面に粘着面６および他方面に非粘着面７を有するシート基材８と、シート基材８の粘着面６に積層された剥離シート９とを含んでいる。剥離シート９は、シート基材８の粘着面６に貼り合わせることによって、シート基材８に取り外し可能に積層されている。

シート基材８は、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン等の合成樹脂からなるシートの片面に接着剤が塗布されたものであってよい。また、シート基材８は、伸縮性を有していてもよいし、伸縮性を有していなくてもよい。また、シート基材８は、この実施形態では、透明なシート基材８である。これにより、採取対象領域２（顔の左半面）に対するシート基材８の位置関係を、シート基材８を通して確認しながら、シート基材８を皮膚に貼り付けることができる。そのため、角層の採取の作業性を向上することができる。また、シート基材８は、起伏を有する採取対象領域２に対する貼り付け作業性を考慮して、例えば、厚さが５０μｍ～３００μｍであることが好ましい。

シート基材８には、前述の採取セクション４ごとに採取された角層を区別するための第２区画パターン１０が形成されている。第２区画パターン１０は、図４に示すように破線で形成されていてもよいし、実線で形成されていてもよい。また、第２区画パターン１０は、シート基材８に印刷によって形成されたものであってもよいし、ミシン目や、シート基材８に刻印等で形成された凹凸等であってもよい。

第２区画パターン１０は、格子状に形成されている。この実施形態では、第２区画パターン１０は、シート基材８の中央部から外周縁部に至るまで、シート基材８の全体にわたって形成されている。これにより、シート基材８には、第２区画パターン１０の各格子窓部分に１つずつシート側セクション１１が形成されている。
各シート側セクション１１は、前述の採取セクション４に合わせて、図４に示すように正方形状であってもよいし、長方形状であってもよい。また、正方形状の場合、各シート側セクション１１は、一辺が１ｃｍ～２ｃｍであってもよい。なお、第２区画パターン１０のシート側セクション１１は、この実施形態では互いに同じ大きさで統一されているが、小、中、大というように複数の大きさに区分されていてもよい。

また、第２区画パターン１０の各シート側セクション１１は、四角形状に限らず、例えば、円形、三角形等であってもよい。採取対象領域２の角層を満遍なく、いずれかのシート側セクション１１に収めるという観点では、格子状の第２区画パターン１０によって四角形状に形成することが好ましい。また、第２区画パターン１０は、格子状である必要はなく、例えば、複数のシート側セクション１１がドット（水玉）状や千鳥状に配列されたパターンであってもよい。

第２区画パターン１０の各シート側セクション１１には、シート側セクション１１ごとに区別可能な目印１２が形成されている。この実施形態では、シート側セクション１１ごとに異なる数字が形成されており、これにより、各シート側セクション１１が区別される。このような目印１２は、数字である必要はなく、例えば、アルファベット（Ａ、Ｂ、Ｃ・・・）、数字とアルファベットの組み合わせ（１Ａ、２Ａ、３Ａ・・・）等であってもよい。また、目印１２は、第２区画パターン１０と同様に、シート基材８に印刷によって形成されたものであってもよいし、シート基材８に刻印等で形成された凹凸等であってもよい。

また、シート基材８には、第２区画パターン１０が形成されていない余白１３が形成されていてもよい。例えば、図４では、シート基材８の外周縁部のうち、顔の中心線に沿って貼り付けられる外周縁部に余白１３が形成されている。外周縁部に余白１３が形成されていれば、シート基材８を採取対象領域２に貼り付けるときに余白１３を指で摘まむことができるので、貼り付け作業性を向上することができる。

剥離シート９は、例えば、紙や合成樹脂からなるシートの片面に剥離剤が塗布されたものであってよい。剥離シート９は、この実施形態では、シート基材８に対して複数の部分に分割されて積層された分割剥離シート９である。より具体的には、図５に示すように、シート基材８の縦方向（顔の中心線に沿って貼り付けられる外周縁部に沿う方向）に分割線１４が形成されており、当該分割線１４を境界にして左半面および右半面のそれぞれを独立して剥離可能となっている。この実施形態では、剥離シート９は、分割線１４に対して顔の中心線側の第１部分１５と、その反対側の第２部分１６とを含む。

また、角層採取用マスク５には、複数の切れ込み１７，１８が形成されている。複数の切れ込み１７，１８は、図４および図５に示すようにシート基材８および剥離シート９の積層構造に形成されていてもよいし、シート基材８のみに形成されていてもよい。複数の切れ込み１７，１８は、例えば、第１切れ込み１７と、第２切れ込み１８とを含む。
第１切れ込み１７は、角層採取用マスク５の外周縁１９を起点にして、途中で屈曲した直線状もしくは曲線状に形成されている。例えば、採取対象領域２に比較的大きな凸部がある場合、第１切れ込み１７は、当該凸部の外形に沿って形成された形状であってもよい。この実施形態では、第１切れ込み１７は、顔の凸部である鼻の外形に沿って形成されている。

これにより、シート基材８には、採取対象領域２の凸部の外形に沿う形状である揺動部２０が形成されている。この揺動部２０は、一部がシート基材８の残りの部分（第１切れ込み１７が形成されていない部分）に片持ち支持されており、シート基材８の厚さ方向に揺動可能となっている。そのため、シート基材８を採取対象領域２（この実施形態では、顔の左半面）に貼り付けたときに、採取対象領域２の凸部（この実施形態では、鼻）に接する揺動部２０を逃がすことができるので、シート基材８の突っ張りを抑制することができる。

第２切れ込み１８は、角層採取用マスク５の外周縁１９を起点にして、直線状に形成されている。この実施形態では、シート基材８の外周縁１９から格子状の第２区画パターン１０のライン２１に沿って第２切れ込み１８が複数形成されている。これにより、シート基材８には、第２切れ込み１８を境界にして隣り合う連続した複数のシート側セクション１１からなる第１部分２２，２４，２６と、第２部分２３，２５，２７とが形成されている。図４では、明瞭化のため、第１部分２２，２４，２６および第２部分２３，２５，２７をグレーで示している。

例えば、３４～３６番のシート側セクション１１からなる第１部分２２に対して、４３～４６番のシート側セクション１１からなる第２部分２３が形成されている。また、８５～８８番のシート側セクション１１からなる第１部分２４に対して、９６～９９番のシート側セクション１１からなる第２部分２５が形成されている。また、１３４，１４３，１５１，１５８番のシート側セクション１１からなる第１部分２６に対して、１３３，１４２，１５０，１５７番のシート側セクション１１からなる第２部分２７が形成されている。

第２切れ込み１８は、シート基材８の外周縁１９から分割線１４に至るように形成されている。これにより、シート基材８および剥離シート９の第２部分１６は、上部分２８，３１、中部分２９，３２および下部分３０，３３に分割されている。なお、上部分２８，３１、中部分２９，３２および下部分３０，３３は、この実施形態では、角層の採取用シートがマスクであり、互いに上下に並ぶことから上部分２８，３１、中部分２９，３２および下部分３０，３３と称しているに過ぎない。つまり、第２切れ込み１８によって分割されたシート基材８および剥離シート９は、互いの整列方向に関係なく、それぞれ、第３部分、第４部分、第５部分等と称してもよい。

上記の角層採取用マスク５は、例えば、インクジェットプリンタやレーザプリンタ等で印刷可能なシールシートに第２区画パターン１０および目印１２を印刷し、所望のマスク形状に切り取ることによって作製することができる。第１切れ込み１７および第２切れ込み１８は、マスク形状に切り取った後に形成すればよい。
そして、上記の角層採取用マスク５を用いて角層を採取するには、例えば、まず、分割された剥離シート９の一部をシート基材８から剥離し、シート基材８の粘着面６の一部を露出させる。この実施形態では、図７に示すように、剥離シート９の第１部分１５（顔の中心線側）を剥離する。次に、シート基材８の余白１３、およびシート基材８の剥離シート９が残った部分を指で摘まみ、例えば鏡を見ながら、透明なシート基材８を通して鼻の位置を確認しながら、揺動部２０の下方のシート基材８の部分を鼻の下端部に位置合わせして貼り付ける。その状態から、揺動部２０を鼻の中央部に貼り付けると共に、シート基材８の残りの部分を額、目の周り、口の周り、顎に貼り付ける。

なお、目の周り、口の周り等、対象人物１（被験者）に負荷がかかる部位については、次の（１）～（３）の対策等によって、負荷を軽減してもよい。
（１）目の周り、口の周り等の該当箇所に対応する箇所に予め開口が形成されたマスク５としてもよい。
（２）目の周り、口の周り等の該当箇所にかかる負担を軽減するため、該当箇所に接する部分の粘着力を弱くしてもよい。
（３）目の周り、口の周り等の該当箇所をコットン等で保護した上で、マスク５を貼り付けてもよい。

このように、剥離シート９が分割剥離シート９であることから、剥離シート９が剥がされていない部分を指で摘まんで、採取対象領域２に対するシート基材８の位置決めをしながら、シート基材８を採取対象領域２に貼り付けていくことができる。そのため、採取対象領域２に対してシート基材８を正確に貼り付けることができる。
次に、分割された剥離シート９の残りの部分をシート基材８から剥離し、シート基材８の粘着面６の残りの部分を露出させる。この実施形態では、剥離シート９の上部分３１、中部分３２および下部分３３を順に剥がし、剥離シート９が剥がされたシート基材８の部分２８，２９，３０から先に顔に貼り付けていく。まず、図８に示すように、剥離シート９の上部分３１を剥離することによって、一対の第１部分２２および第２部分２３のうち第１部分２２を含むシート基材８の上部分２８を露出させる。

そして、このシート基材８の上部分２８を目の周りに貼り付ける。次に、剥離シート９の中部分３２を剥離することによって、第２部分２３と、一対の第１部分２４および第２部分２５のうち第１部分２４とを含むシート基材８の中部分２９を露出させる。そして、第２部分２３を指で摘まみ、第２部分２３を第１部分２２上に重ねるようにして、シート基材８の中部分２９を目の周りおよび頬に貼り付ける。

このように、第２切れ込み１８を境界にして隣り合う第１部分２２を角層の採取に使用する採取部とし、第２部分２３を角層の採取に使用しない非採取部としている。第２部分２３には、採取対象領域２以外の角層（例えば、指の角層）が付着していても問題ないので、第２部分２３を指で摘まんでシート基材８を採取対象領域２に貼り付けて角層を採取することができる。

このとき、第２部分２３（非採取部）を第１部分２２（採取部）の上に重ねることによって、第２部分２３を採取対象領域２から避けることができるので、角層の採取が第２部分２３によって阻害されることを防止することができる。つまり、第２部分２３が第１部分２２に重なるため、３４～３６番のシート側セクション１１に５３～５５番のシート側セクション１１を隣り合わせることができる（図４参照）。そのため、３４～３６番のシート側セクション１１に隣り合う顔の部分の角層を確実に採取することができる。

次に、図９に示すように、剥離シート９の下部分３３を剥離することによって、第２部分２５と、一対の第１部分２６および第２部分２７のうち第１部分２６を含むシート基材８の下部分３０を露出させる。そして、第２部分２５を指で摘まみ、第２部分２５を第１部分２４上に重ねるようにして、シート基材８の下部分３０を頬および顎の周りに貼り付ける。その後、例えば、シート基材８全体を顔に押し付けることによって、皮膚に対するシート基材８の粘着性を高めてもよい。

そして、シート基材８を顔から剥離することによって、顔の角層の採取が完了する。この際、シート基材８の余白１３を指で摘まんで剥離すれば、シート基材８の各シート側セクション１１に余計な皮膚成分（例えば、指の角層等）が付着することを防止することができる。
次に、角層を採取したシート基材８を所望のサイズ（シート側セクション１１ごと）に分類する（図１のステップＳ２）。この実施形態では、シート基材８を第２区画パターン１０のライン２１に沿って分断し、各シート側セクション１１を切り分ける。シート基材８は、例えば、はさみ、カッターナイフ等の刃物で分断することができる。

次に、図１０に示すように、切り分けたシート側セクション１１ごとのシート基材８を、それぞれ独立した容器３４（例えば、耐熱容器）に収容し、その容器３４の中に剥離・分散溶液３５を加える（ステップＳ３）。剥離・分散溶液３５としては、例えば、ＳＤＳ ２％・ＥＤＴＡ ５ ｍＭ・Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ０．１Ｍ緩衝液 （ｐＨ８．５）・ＤＴＴ ２０ ｍＭの混合溶液等を使用することができる。その後、例えば耐熱シール等で容器３４を密閉し、例えば、１分間～１０分間、剥離・分散溶液３５を煮沸する。これにより、シート基材８に付着していた角層が、シート基材８から剥離される。

その後、容器３４を室温程度にまで放置し、耐熱シールを取り外す。そして、シート基材８、およびシート基材８から剥離した粘着剤を可能な限り避けながら、溶液の液状部分を遠心分離可能な容器に採取する。次に、採取された溶液を遠心分離することによって、角層を沈殿させ、溶液の上清を除去する。これにより、角層を回収する（ステップＳ４）。

次に、各容器内で遠心分離によって生じた角層を含む沈殿物を、例えば、所定の容器（例えば、マイクロプレートの各ウェル）に移す。その後、各ウェル内の溶媒を乾燥によって除去する。例えば、６０℃に設定したインキュベータ内に当該マイクロプレートを５～６時間放置して溶媒を除去してもよい。乾燥後、固定液（例えば、ホルマリン溶液等）を添加して角層をウェル中に固定する（ステップＳ５）。

次に、固定液を除去し、洗浄によって大きなチリ等を排除した後、染色液によって角層を染色する（ステップＳ６）。染色液としては、例えば、ゲンチアナバイオレット溶液等を使用することができるが、これに限らない。染色後、水で複数回洗浄することによって、余分な染色液を取り除く。
次に、例えば顕微鏡で角層を撮影することによって、角層３６の画像を取得する（ステップＳ７）。その後、得られた画像をコンピュータで処理することによって、図１１に示すように、各シート側セクション１１で採取された角層３６の形状が解析される（ステップＳ８）。例えば、図１１では、シート基材８の５番、９番および１２番の各シート側セクション１１で採取された角層３６の画像を示す。

次に、上記で得られた角層３６の解析データに基づいて、各シート側セクション１１に含まれる角層３６の平均面積を算出する（ステップＳ９）。次に、算出された角層３６の面積を、複数の面積区分に分類する（ステップＳ１０）。面積区分の数は、複数であれば特に制限されないが、後述する可視化において互いに判別し易いように、例えば、３～５区分に分類することが好ましい。

なお、ステップＳ３～ステップＳ９に示す工程については、例えば、人工知能（AI：Artificial Intelligence）等のコンピュータ技術を利用することによって省略することもできる。つまり、シート基材８で採取された角層を分散および染色せずに、角層の面積を算出してもよい。例えば、シート基材８で採取された角層同士が重なっていても、人工知能技術を用いることによって、重なっていない部分の角層の大きさや形状等から残りの大きさを把握することによって、採取された角層の面積を算出することができる。

次に、図１２に示すように、コンピュータ３７のモニタ３８に人の顔を模したマップ３９を表示し、当該マップ３９上に各面積区分に対応するカラーを表示する（ステップＳ１１）。このマップ３９は、採取対象領域２の第１区画パターン３に一致する格子状の区画パターン４０を反映している。つまり、各シート側セクション１１に含まれる角層が、シート基材８の各シート側セクション１１と採取対象領域２の各採取セクション４との関連付けに基づいて、採取対象領域２のどの採取セクション４から採取されたものであるか判別され、その面積区分がマップ３９の該当セクションに反映される。なお、図１２では、便宜上、面積区分の大小関係を、カラーに代えて、互いに異なるパターンのハッチングや網掛けで示している。

これにより、角層の面積分布がモニタ３８にヒートマップ化されるので、モニタ３８のマップ３９を俯瞰することによって、対象人物１（角層提供者）の顔全体において、角層の面積がどのように分布しているかどうかを知ることができる。
なお、この実施形態では、顔の左半面の角層の面積分布のみをモニタ３８にヒートマップ化しているが、顔の中心線を軸として、角層の面積分布は概ね左右対称と考えられるので、得られた左半面のデータに基づいて、右半面の角層の面積分布をヒートマップ化してもよい。つまり、顔の採取対象半面（この実施形態では、左半面）の角層の面積を算出することによって、顔の採取対象半面の分析結果を非採取対象半面の分析結果として採用し、非採取対象半面（この実施形態では、右半面）の角層の面積も算出できるので、より少ない作業量で、顔全体の角層の面積分布を分析することができる。

以上の方法によれば、採取対象領域２における複数の採取セクション４ごとに角層の面積が算出され、その後、各算出結果が集約され、角層の面積分布がモニタ３８にヒートマップ化される。これにより、前述したように、モニタ３８のマップ３９を俯瞰することによって、対象人物１（角層提供者）の顔全体において、角層の面積がどのように分布しているかどうかを知ることができる。

その結果、例えば、対象人物１（角層提供者）にとっては、自分の顔全体における角層の分布を知ることができ、スキンケアカウンセラーにとっては、サロンや店頭等において、当該マップ３９に基づいて顧客（対象人物１）に皮膚のカウンセリングをすることができる。また、例えば、研究者にとっては、研究者目線で対象人物１（角層提供者）の顔の角層の分布を把握でき、さらに、一人ひとりの角層の面積分布が表示されたマップ３９を複数の対象人物（複数サンプル）について集めることにより、例えば、採取対象領域２における角層の面積が、化粧品の使用前後や、年齢別、性別、居住場所等に応じて、どのように変化しているか検証することもできる。

また、採取対象領域２を第１区画パターン３で細分化し、採取対象領域２の採取セクション４ごとに含まれる角層の面積をそれぞれ独立して算出できるので、当該採取対象領域２における角層の面積分布を精度よく分析することができる。また、角層の面積の算出にあたって、剥離・分散溶液３５中でシート基材８から角層を剥離し（図１０参照）、その後染色された角層の面積を算出値として採用するので、採取セクション４ごとの角層の面積も精度よく算出することができる。

なお、この実施形態では、採取対象領域２に複数の採取セクション４が設定され、シート基材８の各シート側セクション１１と関連付けることによって、各シート側セクション１１で採取された角層の採取位置を特定している。しかしながら、採取セクション４が設定されなくても、シート基材８における各シート側セクション１１の位置および採取対象領域２に対するシート基材８の貼り付け位置等に基づいて、各シート側セクション１１で採取された角層が、採取対象領域２のどの部分から採取されたものであるか大まかに類推することもできる。

また、採取セクション４ごとの角層の面積が面積区分に応じてグループ分けされ、マップ３９の区画パターン４０に可視化されるので、採取対象領域２における角層の面積の大まかな大小関係を簡単に把握することができる。しかも、面積区分ごとに互いに異なったカラーで可視化されるので、可視化された面積区分を一見するだけで、採取対象領域２における角層の面積の大小関係を簡単に把握することができる。また、コンピュータ３７を使用して可視化することによって、面積区分のカラー表示にあたって、色相・明度・彩度が異なる様々なカラーを使用することができる。

また、複数のシート側セクション１１が格子状のラインからなる第２区画パターン１０で区画され、隣り合うシート側セクション１１の間に隙間ができないので、採取対象領域２における角層の面積を満遍なく分析することができる。また、行列状のシート側セクション１１の大きさを揃えることによって、シート側セクション１１間における角層の面積を容易に比較することができる。

そして、上記のような角層の面積分布の分析は、図４～図６に示した角層採取用マスク５を使用することによって、より効率的に行うことができる。
つまり、角層採取用マスク５を使用することによって、シート基材８の各シート側セクション１１の角層の面積を個別に算出することができる。そして、シート基材８の第２区画パターン１０の各シート側セクション１１と、採取対象領域２の各採取セクション４との対応関係を確認することによって、シート基材８の各シート側セクション１１から得られた角層の面積の算出結果に基づいて、各採取セクション４における角層の面積を簡単に分析することができる。そして、得られた採取セクション４の分析結果を集めれば、採取対象領域２における角層の面積分布を精度よく判別することができる。

また、角層採取用マスク５のシート基材８に目印１２が形成されているので、シート基材８の第２区画パターン１０の各シート側セクション１１と、採取対象領域２に設定された採取セクション４とを、目印１２を利用して対応付けることができるので、対応関係を簡単に確認することができる。
以上、本発明の実施形態について説明したが、本発明は、他の形態で実施することもできる。

前述したように、本発明は、顔の角層を採取し、顔における角層の面積分布を分析する方法、および当該方法に使用される角層採取用マスク５に限られるものではない。
例えば、前述の角層採取用マスク５は、顔の角層以外の皮膚成分を採取するための皮膚成分採取用マスクとして使用することもできる。また、採取対象領域２が顔以外の場合には、例えば、図１３および図１４に示すように、シート基材８および剥離シート９が積層された皮膚成分採取用シート４１としてもよい。図１３および図１４では、一例として、長方形状の皮膚成分採取用シート４１を示している。この場合にも、角層採取用マスク５と同様に、シート基材８に第２区画パターン１０を形成しておけばよい。このような皮膚成分採取用シート４１は、皮膚の様々な部位の皮膚成分の分析に自由に使用することができる。むろん、顔の一部分（例えば、額、頬等）に使用してもよい。

また、図１５および図１６に示すように、皮膚成分の分布が可視化されたマップ３９を３次元的に表すこともできる。皮膚成分の分布を３次元的に可視化するには、例えば、３次元デジタイザによって対象人物１の顔の３次元画像４２を取得し、この３次元画像４２と、前述のマップ３９の情報とをコンピュータ（例えば、３次元ＣＡＤソフトウェア）上で組み合わせればよい。この操作に使用する装置の一例としては、例えば、非接触３次元デジタイザとして、コニカミノルタ社製「VIVID910」、Canfield Scientific社製「VECTRA M3」、Creaform社製「GO!SCAN」等が挙げられる。また、３次元ＣＡＤソフトウェアとしては、例えば、Dassault Systtult社製「SolidWorks」、PTC社製「Creo Parametric 3D」、AUTODESK社製「Inventor」等が挙げられる。

これにより、皮膚成分の分布を３次元で把握することができる。なお、図１５および図１６では、一例として、図１２に示した角層面積の分布を３次元画像４２として示している。なお、図１５および図１６では、明瞭化のため、対象人物１の顔の３次元画像４２を線図化して示している。
また、角層の面積の分布測定以外の分析目的の場合の分析方法の一例は、次の通りである。

例えば、細胞表層の脂質量分布を測定する場合には、皮膚の採取対象領域に粘着させた後の粘着シートをジエチルエーテルなど目的の脂質を溶解できる溶媒に浸漬して抽出後、ガスクロマトグラフィーによって測定すればよい。
また、角層のニトロ化分布を測定する場合には、皮膚の採取対象領域に粘着させた後の粘着シートを、ニトロ化チロシン抗体を用いた抗体染色することで観察したり、例えばＰＢＳ（－）に浸漬して超音波破砕機で処理後、市販のニトロ化チロシン定量キットによって定量したりすればよい。

つまり、上記の方法に従って得られた細胞表層の脂質量およびニトロ化の定量値をヒートマップ化し、当該ヒートマップを複数の対象人物（複数サンプル）について集めることにより、例えば、採取対象領域２における脂質量分布やニトロ化が、年齢、性別、居住場所等にどのように関連しているか検証することができる。
また、前述の角層の面積の分析方法では、１枚の角層採取用マスク５を使用して採取対象領域２の角層を一括して採取したが、採取セクション４ごとに別々のシート等で角層を採取してもよい。例えば、各採取セクション４に粘着シール等を１枚ずつ貼ることによって各採取セクション４の角層を採取し、各粘着シールを分割せずにそのまま、剥離・分散溶液３５中に分散させてもよい。この場合、シートの貼り付けの作業性は低下するが、採取セクション４ごとにシートを分割しなくてもよいので、この点では作業性が向上する。このような方法であっても、個々のシートで採取された成分の分析結果を集めることによって、採取対象領域２における角層の面積の分布を俯瞰することができる。

また、各採取セクション４と各シート側セクション１１との対応関係を記録できるのであれば、シート基材８に目印１２を形成しなくてもよい。
その他、特許請求の範囲に記載された事項の範囲で種々の設計変更を施すことが可能である。

１ 対象人物
２ 採取対象領域
３ 第１区画パターン
４ 採取セクション
５ 角層採取用マスク
１１ シート側セクション
３５ 剥離・分散溶液
３６ 角層
３７ コンピュータ
３８ モニタ
３９ マップ
４０ 区画パターン
４２ ３次元画像

Claims (13)

1. 皮膚の採取対象領域から皮膚成分を粘着シートで採取する工程と、
   前記粘着シートで採取された前記皮膚成分を、前記採取対象領域を平面的に分割することにより割り当てられた複数の採取部分ごとに分け、各前記採取部分で採取された皮膚成分を分析する工程と、
   各前記分析結果を集約し、前記複数の採取部分間の皮膚成分の分析結果を比較することにより、前記採取対象領域における前記皮膚の表面方向の前記皮膚成分の分析結果の分布を俯瞰する工程とを含む、皮膚成分の分析方法。
2. 皮膚の採取対象領域から皮膚成分を粘着シートで採取する工程と、
   前記粘着シートで採取された前記皮膚成分を、前記採取対象領域における複数の採取部分ごとに分け、各前記採取部分で採取された皮膚成分を分析する工程と、
   各前記分析結果を集約し、前記採取対象領域における前記皮膚成分の分析結果の分布を俯瞰する工程とを含み、
   前記採取部分の皮膚成分を分析する工程は、前記採取部分で採取された角層の面積を測定する工程を含む、皮膚成分の分析方法。
3. 前記分析結果の分布を俯瞰する工程は、前記複数の採取部分を反映したマップに前記分析結果の分布を表示して可視化する工程と、前記可視化された表示を俯瞰する工程とを含む、請求項１または２に記載の皮膚成分の分析方法。
4. 前記皮膚成分の分析結果は、各前記採取部分における前記皮膚成分の所定の定量値の結果を含み、
   前記分析結果の分布を俯瞰する工程は、前記可視化のために、前記所定の定量値を複数の定量区分に分類する工程をさらに含む、請求項３に記載の皮膚成分の分析方法。
5. 前記可視化の工程では、前記複数の定量区分ごとに互いに異なったカラーで前記定量区分を表示する、請求項４に記載の皮膚成分の分析方法。
6. 前記可視化の工程では、コンピュータのモニタに前記定量区分をカラーで表示する、請求項５に記載の皮膚成分の分析方法。
7. 前記採取部分の皮膚成分を分析する工程は、前記採取対象領域に対して行列状の前記採取部分を割り当て、当該行列状の前記採取部分のそれぞれの皮膚成分を分析する工程を含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の皮膚成分の分析方法。
8. 前記採取部分の皮膚成分を分析する工程は、前記採取部分で採取された角層の面積を測定する工程を含む、請求項１および請求項１を引用する請求項３～７のいずれか一項に記載の皮膚成分の分析方法。
9. 前記角層の面積を測定する工程は、
   前記角層を採取した前記粘着シートを分散媒に入れて前記粘着シートから前記角層を剥離させ、前記分散媒に前記角層を分散させる工程と、
   前記粘着シートから剥離された前記角層を染色する工程と、
   染色された前記角層の面積に基づいて、前記採取部分に含まれる前記角層の面積を算出する工程とを含む、請求項２または８に記載の皮膚成分の分析方法。
10. 前記皮膚成分を採取する工程は、対象人物の顔の前記採取対象領域の皮膚成分を採取する工程を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の皮膚成分の分析方法。
11. 前記皮膚成分を採取する工程は、対象人物の顔の左右いずれかの採取対象半面の前記採取対象領域の皮膚成分を採取する工程を含み、
    前記皮膚成分を分析する工程は、前記採取対象半面側の分析結果を、前記採取対象半面の反対側の非採取対象半面の分析結果として採用する工程を含む、請求項１０に記載の皮膚成分の分析方法。
12. 前記皮膚成分を前記粘着シートで採取する工程に先立って、前記皮膚の採取対象領域を平面的に分割することにより前記採取対象領域に前記複数の採取部分を割り当てる工程をさらに含み、
    前記皮膚成分を前記粘着シートで採取する工程は、前記複数の採取部分に対して１対１で対応付けられたシート側分割部分が形成された粘着シートを使用して前記皮膚成分を採取する工程を含む、請求項１～１１のいずれか一項に記載の皮膚成分の分析方法。
13. 前記複数の採取部分を割り当てる工程は、前記採取対象領域を平面的にラインで分割することにより、前記ラインで区画された複数の採取セクションを割り当てる工程を含む、請求項１２に記載の皮膚成分の分析方法。

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